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Informao
Medies volumtricas
F I R S T C L A S S B R A N D
Introduo
Medies volumtricas tem um papel fundamental no laborat-
rio. O usurio deve determinar o grau de exatido requerido para
cada medio. Com base nisso, possvel escolher o instrumento
volumtrico apropriado.
Medies confiveis requerem a utilizao de instrumentos pre-
cisos e um manuseio apropriado. Para proporcionar um melhor
entendimento sobre instrumentos volumtricos e sua utilizao,
este folheto explica os termos mais importantes para sua classifi-
cao e manuseio, e ilustra os mesmos utilizando os equipamen-
tos BRAND para laboratrio como exemplos.
O folheto Informao sobre Medies Volumtricas foi desenvol-
vido para dar ao leitor uma viso rpida dos instrumentos volum-
tricos. No sua intenso substituir os manuais de operao dos
instrumentos de manuseio de lquidos descritos. Por tanto, leia os
manuais de operao fornecidos com estes instrumentos antes do
uso para sua segurana e sucesso.
Por favor nos contate se tiver outras perguntas sobre o tema me-
dies volumtricas.
BRAND GMBH + CO KG
P.O. Box 11 55
97861 Wertheim/Main
n Definio de Exatido 32
n Diretivas IVD 39
n Gesto da Qualidade
40
n Informaes de segurana 43
Instrumentos Volumtricos
Instrumentos A medio volumtrica de lquidos uma operao de rotina no laboratrio. Ento, instrumentos
volumtricos como bales volumtricos, pipetas volumtricas, pipetas graduadas, provetas e buretas
volumtricos so equipamentos usuais. Estes podem ser fabricados em vidro ou plstico. Os fornecedores ofere-
cem instrumentos volumtricos em uma ampla variedade de qualidades. Copos becker graduados,
vidro/plstico Erlenmeyers, funis de decantao e afins no so instrumentos volumtricos! No so precisamente
calibrados e a escala serve somente como uma aproximao.
Uma seleo de instrumentos volumtricos est descrita a seguir:
Instrumentos de manuseio
de lquidos
Para attender a demanda crescente das medies
volumtricas no laboratrio, como testes em srie,
novos dispositivos esto constantemente sendo
criados, por ex. para dispensao, pipetagem e
titulao. Usualmente, os instrumentos criados por
diferentes fabricantes para um propsito em par-
ticular so mais ou menos similares nos princpios
funcionais. Entretanto, diferenas significativas
aparecem quando se trata dos detalhes de con-
struo e design.
A seleo de instrumentos de manuseio de lqui-
dos BRAND ilustra a variedade de instrumentos Dispensador para Dispensador para
Bureta digital
disponveis. frasco frasco
BRAND
5
Instrumentos Volumtricos de Vidro Fabricao
Cascos
Os tipos de vidro utilizados so: O resultado uma estabilidade lizao sem resultar qualquer Ento: Sempre coloque os ins-
vidro alcalino (ex., AR-GLAS) mecnica tima, um requisito alterao do volume. trumentos de vidro em fornos
para pipetas volumtricas e para que o volume seja manti- Entretanto, como em qualquer de secagem e esterilizao no
graduadas e vidro borossili- do constante mesmo frente a instrumento de vidro, deve-se aquecidos. No final do perodo
cato (ex. Vidro Borossilicato qualquer flutuao de tempera- notar que o aquecimento des- de secagem ou esterilizao,
3.3) para bales volumtricos, tura. Portanto, os instrumentos contnuo ou mudanas bruscas deixe os instrumentos resfriar
provetas e buretas. Estes tipos volumtricos BLAUBRAND de temperatura produzem lentamente dentro dos fornos
de vidro atendem os requeri- e SILBERBRAND podem ser estresse trmico, que pode de secagem ou esterilizao
mentos estritos de resilincia aquecidos at 250 C em resultar em quebra. desligados. Nunca aquea
qumica e mecnica. Cascos fornos de secagem ou esteri- instrumentos volumtricos em
de alta qualidade e um rigoroso placas de aquecimento.
teste estatstico das caracters-
ticas de qualidade requeridas
so as bases da produo de
instrumentos volumtricos de
alta qualidade. Por exemplo,
o estresse trmico no casco
de vidro deve ser eliminado por
um processo de aquecimento e
resfriamento controlado.
Calibrao
6
Instrumentos Volumtricos de Vidro Fabricao
A calibrao seguida da A BRAND utiliza tintas de alta qualidade fabricadas especialmente para instrumentos volumtricos
impresso das marcas e inscri- de vidro.
es. A BRAND usa estnceis
elsticos para todas as pipetas Esmalte azul: Esmalte branco: Impresso mbar por
graduadas, buretas, provetas Alto contraste, tima combina- O esmalte branco utilizado difuso:
graduadas e provetas com o de resistncia e legibilida- em instrumentos volumtricos A tinta se difunde na superf-
tampa. Estes estnceis podem de. O esmalte azul utilizado SILBERBRAND (classe B). cie do vidro e somente pode
ser esticados para coincidir nos instrumentos volumtricos ser removida por abraso.
precisamente com as marcas BLAUBRAND (classe A/AS). utilizada em instrumentos
de calibrao, de forma que a volumtricos que esto expos-
preciso da medio mantida tos a condies de limpeza
em todos os volumes interme- particularmente agressivas. A
dirios. impresso por difuso mbar
utilizada em instrumentos
A pipetas so adicionalmente volumtricos BLAUBRAND
marcadas com anis cdigo ETERNA (classe A/AS) assim
de cor na sua extremidade como instrumentos volumtri-
superior, o que torna fcil a cos SILBERBRAND ETERNA
identificao clara de pipetas (classe B).
de volumes similares. Os pa-
dres industriais da ISO 1769
definem os cdigos de cor para
diferentes volumes nominais.
BRAND
7
Instrumentos volumtricos de vidro Fabricao
Nmero de lote
Exemplo:
Pipeta volumtrica
BLAUBRAND
H o smbolo de certificao em
conformidade da BRAND de
acordo com 'Eichordnung', a
norma Federal Alem de Pesos e
Fabricante Medidas e a norma DIN 12600.
Norma
Marca registrada BRAND para
instrumentos volumtricos
Pas de origem
classe A e AS
Limite de erro
Classe A, o mais alto
Grau de qualidade,
Unidade de volume S para vertido rpido
A rotulao abaixo deve ser impressa em A seguinte informao tambm pode ser
cada instrumento volumtrico: adicionada:
BRAND
8
Instrumentos volumtricos de vidro Fabricao
Classe A/AS
Os instrumentos volumtricos das classes A e AS possuem Classe A/AS
limites de erro idnticos, conforme estabelecido pela DIN EN ISO. Designa sempre o mais alto
Geralmente isto se refere somente aos instrumentos volumtricos grau de exatido
de vidro. As excees so os bales volumtricos de plstico
'S' significa vertido rpido
BRAND fabricados em PFA e PMP, e provetas fabricadas em
(pipetas e buretas)
PMP, as quais atendem os mais altos requerimentos e portanto
correspondem a classe A. Para os instrumentos volumtricos Apenas classe A/AS so
classe AS, calibrados por vertido (TD, Ex), o S adicional signifi- marcao DE-M
ca vertido rpido. Graduao:
O uso dos instrumentos volumtricos classe A tem se tornado As marcaes longas se
prtica comum. estendem por pelo menos
O risco de entupimento em pipetas e buretas pequeno devido 90 % do permetro do tubo
a ampla abertura da ponta. O comportamento da dispensao ou esto presentes como
de lquidos diversos compensado pela observao do tempo de marcas anelares.
espera definido (veja Vertido e tempo de espera na pgina 11).
Classe B
Os instrumentos volumtricos classe B esto disponveis em vidro Classe B
ou plstico. Instrumentos classe B geralmente possuem o dobro Geralmente o dobro dos
dos limites de erro da classe A/AS. Para classe B, instrumentos limites de erro da classe A/
de medio calibrados por vertido (TD, Ex), no possuem tempo AS
de espera especificado.
Graduao:
As marcas longas se esten-
dem por cerca de 20 40 %
do permetro do tubo.
No existe um material uni- tricas, pipetas graduadas, ba- Proveta graduada em PMP,
versal que atenda todos os re- les volumtricos e prove- classe A
querimentos dos laboratrios. tas graduadas em PP corres-
A deciso de utilizar vidro ou pondem aos limites de erro da
plstico guiada pela aplicao classe B. PMP e PFA tambm
e design do produto, aps con- so utilizados para instrumen-
siderar as propriedades espe- tos de medio que corres-
cficas do material e aspectos pondem aos limites de erro da
econmicos. Os instrumentos classe A, por ex. bales volu-
volumtricos plsticos sobres- mtricos (PMP/PFA) e prove-
saem por sua alta resistncia tas graduadas (PMP). Devido a
frente a quebra e baixo peso. sua alta pureza, o PFA prefe-
PP, PMP e PFA so materiais rencialmente utilizado em apli-
comprovados. caes para anlise de traos.
A exatido de pipetas volum-
BRAND
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Instrumentos Volumtricos de Vidro Medio do volume
Menisco do lquido
O termo menisco descreve Se as molculas de lquidos Se o dimetro da pipeta su- Se a fora de coeso de um
a curvatura na superfcie do so atradas mais fortemente ficientemente estreito como fluido mais forte que a fora
lquido. pela parede do vidro (adeso) em capilares a adeso de adeso da parede do vidro,
O menisco pode se curvar para do que pelas prprias molcu- forte o bastante para puxar no um menisco com curvatura
cima ou para baixo. A curvatura las do lquido (coeso), o me- somente a borda mas tambm para cima (convexo) formado.
se desenvolve como funo da nisco se curva para baixo, ou todo o nvel do lquido (efeito Isto acontece com o mercrio,
interao de foras de adeso cncavo; a borda da superfcie capilar). por exemplo.
e coeso. do lquido levemente eleva-
da. Este o caso, por ex. de
solues aquosas.
Ajuste do menisco
O ajuste correto do menisco um pr-requisito para uma medio volumtrica exata.
Observao importante:
A temperatura do lquido e do
ambiente durante o uso im-
portante. Enquanto a expanso
do vidro de um instrumento de
vidro desprezvel, a expanso
do lquido em diferentes tem-
peraturas deve ser levada em
Menisco cncavo em uma Menisco convexo em uma Aparncia de um menisco na conta. Para minimizar os erros
pipeta graduada. pipeta graduada. franja de Schellbach de uma de volume tanto quanto poss-
bureta. vel, os volumes de todos os l-
quidos que entram em contato
No caso de um menisco cnca- No caso de um menisco con- A franja de Schellbach uma uns com os outros, devem ser
vo, o volume deve ser lido no vexo, o volume deve ser lido linha fina azul no centro de uma medidos a uma temperatura
ponto mais baixo do nvel do no ponto mais alto do nvel do franja branca. As franjas de comum (predominante no dia).
lquido. O ponto mais baixo do lquido. O ponto mais alto do Schellbach so impressas na Especialmente na preparao
menisco deve tocar a borda su- menisco deve tocar na borda parte traseira dos instrumentos de solues padro, por exem-
perior da marca de graduao. inferior da marca de gradua- volumtricos para melhorar a plo, a pipetagem das amostras
o. legibilidade. A refrao da luz e a titulao devem ser feitas
forma duas pontas de seta no na mesma temperatura.
menisco. O ponto de leitura Diferenas significantes de
no encontro das duas pontas temperatura entre o instrumen-
de seta. to de medio e o lquido tam-
bm devem ser evitadas.
Leitura do menisco
BRAND
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Instrumentos Volumtricos de Vidro Medio do volume
O tempo de vertido defini- O tempo de espera comea Tempo de espera para classe
do como o perodo de tempo quando o menisco para na AS:
requerido para a queda livre marca de volume inferior ou na O tempo de espera de 5 s
do menisco (escoamento da ponta. Durante o tempo de es- estabelecido para pipetas
gua por gravidade) da marca pera, o lquido residual continua volumtricas e graduadas o
superior de volume at atingir a fluir pela parede do vidro. tempo aps o qual o menisco
a marca do volume inferior ou visivelmente entra em repouso
a ponta. Deve-se somar ao na ponta, e deve ser observa-
tempo de espera definido para do antes da ponta poder ser
os instrumentos volumtricos removida da parede interna do
classe A recipiente de coleta.
O tempo de espera de 5 s deve
estar indicado na pipeta pelo
fabricante (veja pg. 8).
Classe B
BRAND
11
Instrumentos Volumtricos de Vidro Manuseio
Calibrao: Calibrao:
Classe AS: Ex + 5 s Classe AS: 'Ex + 5 s'
Classe B: Ex Classe B: 'Ex'
Geralmente maior exatido A escala permite a leitura de
do que as pipetas graduadas volumes parciais
Modelos de pipetas volum- Tipos de pipetas graduadas:
tricas: O modelo mais impor- Tipo 2 volume nominal no
tante a pipeta volumtrica topo, esgotamento
com 1 marca (esgotamento total tambm para
total). Menos comum o volumes parciais
modelo com 2 marcas (esgo- Tipo 1 volume nominal na
tamento parcial). extremidade inferi-
Pipetas volumtricas tambm or, esgotamento
so chamadas de pipetas de parcial para todos
volume nico. os volumes
Tipo 3 volume nominal na
parte inferior, esgo-
tamento total apen-
as para o volume
nominal
BRAND
12
Instrumentos Volumtricos de Vidro Manuseio
Manuseio de pipetas
Vertido
5. Segure a pipeta verticalmen-
te. Verta o lquido com a pon-
ta da pipeta em contato com
a superfcie interna inclinada
do recipiente coletor.
6. Quando o menisco estabilizar
na ponta, o tempo de espera
de 5 s comea (somente
classe AS).
7. Aps o tempo de espera, Tipo 1 e tipo 3
arrastar a ponta da pipeta Ao utilizar pipetas graduadas do
para cima sobre a parede tipo 1 ou tipo 3 (ponto zero no
Ajuste do
interna do recipiente por menisco topo), o menisco deve:
aprox. 10 mm para remover 1 vez
1.) Primeiramente ser ajustado
o lquido residual. no ponto zero e ento deve
correr at um pouco acima
do volume parcial desejado.
Observao: 2.) Aps o tempo de espera
O lquido residual que de 5 s, o menisco deve ser
ainda permanece na ajustado uma segunda vez.
ponta da pipeta j foi le-
vado em conta durante a
calibrao e no deve ser
descartado no recipiente,
com sopro por exemplo.
13
Instrumentos Volumtricos de Vidro Manuseio
Manuseio de pipetas
Capilares so pipetas com um dimetro interno muito estreito. Podem ser carregadas tanto
com um auxiliar de pipetagem como por ao capilar. Aps esvaziar, o capilar deve ser repeti-
damente rinsado com o meio de diluio.
Enchimento
Aspirar o lquido exatamente
at a marca desejada.
Segurar a pipeta horizontal-
mente e secar cuidadosa-
mente com um leno.
Vertido
Para esvaziar capilares,
deve-se assoprar o lquido
com um auxiliar de pipeta-
gem, e rinsar duas ou trs Preencha Limpar Entregar
vezes com o meio de diluio capilar
(requerido devido a calibra-
o a conter).
Capilares extremo a extremo
so frequentemente coloca-
dos diretamente na soluo
de diluio e lavados por
agitao.
BRAND
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Instrumentos Volumtricos de Vidro Manuseio
Observao:
Observao: Quando dois lquidos so
No laboratrio, provetas gra- misturados, pode ocorrer uma
duadas so frequentemente alterao de volume.
utilizadas como instrumentos de
medio calibrados por vertido
(TD, Ex). Medies com gua
mostram que o volume dis-
pensado reduzido em apro-
ximadamente o limite de erro
da proveta graduada devido ao
resduo mido. Pr-requisito: O
lquido deve ser vertido lenta-
mente de uma vez, e para ter-
minar a dispensao a proveta
deve ser mantida inclinada por
mais 30 s.
BRAND
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Instrumentos Volumtricos de Vidro Manuseio
Manuseio de buretas
Buretas so instrumentos volumtricos calibrados por vertido (TD, Calibrao
Ex) que so utilizados para titulao em anlises volumtricas. Classe AS: 'Ex + 30 s'
Classe B: 'Ex'
Tipos de buretas:
Manuseio
1. Rinse a bureta com a soluo padro a ser utilizada e posicione
de forma que o tubo fique na posio vertical. Certifique-se de
que a soluo esteja homognea, isto , no deve haver turbi-
dez, floculao ou precipitados presentes.
2. Encha a bureta um pouco acima da marca zero. Para purgar a
torneira, deixe sair o lquido at a capacidade nominal. Se uma
bolha de ar persistir, segure a bureta em posio inclinada e
bata levemente com o dedo prximo ao local onde se encontra
a bolha.
3. Encha novamente com o titulante at aprox. 5mm acima da
marca zero. A parede da bureta no deve estar molhada acima
deste nvel.
4. Drene o lquido at exatamente o ponto zero. Importante: O
menisco deve ser lido na altura dos olhos (nvel livre de para-
laxe). Buretas automticas: Encha at aprox. 5 mm acima da
marca zero. O lquido ajustado automaticamente aps a libe-
rao do ar.
5. Seque qualquer gota aderida a ponta da bureta.
6. Abra a torneira e lentamente adicione o titulante amostra
(contendo o indicador). A torneira no deve tocar a parede do
recipiente. Mantenha a agitao do recipiente da amostra en-
quanto adicionar o titulante, ou utilize um agitador magntico.
Para melhor visualizao da mudana de cor, posicione o reci-
piente sobre uma superfcie branca. Quando ocorrer a mudan-
a de cor, feche a torneira. A titulao est terminada.
7. Faa a leitura do volume ao nvel dos olhos. O tempo de espe-
ra requerido (classe AS: 30 s) j foi satisfeito no processo de
titulao. Este deve ser levado em conta somente durante a
calibrao do instrumento.
8. Qualquer gota remanescente na ponta da bureta deve ser re-
colhida contra a parede do recipiente e rinsada. Ela parte do
Bureta com Bureta automtica Bureta automtica volume titulado.
torneira lateral tipo Pellet tipo Dr. Schiling
Antes de cada nova titulao, ajuste o ponto zero e inicie a ti-
tulao deste ponto.
BRAND
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Instrumentos Volumtricos de Vidro Manuseio
Manuseio de picnmetros
Picnmetros so utilizados principalmente para determinar a densidade de lqui-
dos de viscosidade moderada. No so instrumentos volumtricos, entretanto,
so calibrados "a conter" da mesma forma que bales volumtricos.
Tipos de picnmetros
Manuseio
1. Determine o peso do picnmetro vazio e seco.
2. Encha o picnmetro com o lquido, evitando bolhas. Aprox. 1/3
da junta esmerilhada deve estar coberta.
3. Em um banho termosttico, ajuste a temperatura do picnme-
tro e contedo a 20 C.
4. Alinhe a tampa e o termmetro do picnmetro de acordo com a
marca, e insira cuidadosamente. O tubo capilar preenchido e
o lquido transborda.
5. Seque cuidadosamente as superfcies externas da tampa e do
capilar lateral, assim como do picnmetro, com um leno.
ATENO:
Nenhum lquido deve ser extrado do capilar. O lquido amostra
deve estar exatamente no mesmo nvel da extremidade supe-
rior do capilar.
6. Determine o peso do picnmetro cheio.
Observao:
Picnmetros calibrados sempre possuem um nmero de identifi-
cao nico gravado em todas as peas. Somente use as partes
com o mesmo nmero.
BRAND
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Instrumentos Volumtricos de Vidro Auxiliares de pipetagem
O controle varivel da velocidade do motor e um sistema de vlvu- Uma vlvula de reteno integrada na conexo com o filtro mem-
las especial permitem uma operao com alta sensibilidade para brana efetivamente protege contra a penetrao de lquidos. Para
pipetas de 0,1 a 200 ml. proteo contra a corroso, uma compensao ativa de presso
desvia os vapores para fora.
Manuseio
A pipetagem controlada atravs de dois grandes botes:
Encher Vertido
Para encher a pipeta, A taxa de esvaziamento va-
pressione o boto superior. ria pela presso no gatilho.
A taxa de enchimento varia
Escolha:
continuamente pela presso
no gatilho. Vertido livre
ou
Vertido forado
BRAND
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Instrumentos Volumtricos de Vidro Auxiliares de pipetagem
Manuseio
Pera de pipetagem
O auxiliar de pipetagem clssico para pipetas volumtricas e
graduadas.
BRAND
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Instrumentos Volumtricos de Vidro Auxiliares de pipetagem
Manuseio
Manuseio
BRAND
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Instrumentos de Manuseio de Lquidos
Dispensador para Dispensador para Bureta digital para Micropipeta de inter- Micropipeta de inter-
frascos frascos frascos face de ar monocanal face de ar multicanal
21
Instrumentos de manuseio de lquidos Dosificao
Dispensette Organic.
No indicado para dispensar
cido fluordrico (HF).
BRAND
22
Instrumentos de manuseio de lquidos Dosificao
Ao escolher um dispensador Da mesma forma, a compati- Com respeito ao monitora- deve ser verificada regular-
para frascos, as caractersticas bilidade do dispensador com o mento dos instrumentos de mente e os mesmos devem
de segurana do instrumentos meio a ser dispensado deve ser medio de acordo com a ISO ser recalibrados se necessrio
devem sempre ser levadas em verificada pelo usurio. Estas e diretrizes BPL, a exatido (veja pg. 33).
conta. Por exemplo, ele reduz informaes geralmente podem dos instrumentos volumtricos
o risco de leso devido a que- ser encontradas nos manuais
bra de vidro? de operao no captulo Fun-
Como ele evita respingos aci- es e Limitaes de Uso. Em
dentais quando o instrumento caso de dvida contate direta-
purgado? Como o contato com mente o fabricante. Informao
o meio minimizado quando o sobre manuteno e monito-
tubo de dosificao fechado? ramento dos instrumentos de
medio tambm so encontra-
das no manual de operao.
BRAND
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Instrumentos de Manuseio de Lquidos Titulao
Como titular?
Uma poro definida de amostra (lquido com quantidade desconhecida de material dissolvido, ex.
cido actico) colocada em um Erlenmeyer com o auxlio de uma pipeta volumtrica.
Aps diluio com gua, 3 gotas de soluo de indicador so adicionadas. Ento, com agitao
continua, um titulante adequado de concentrao conhecida (ex. NaOH 0,1M) adicionado de uma
bureta at mudana de cor do indicador que sinaliza o ponto final da titulao.
Utilizando a equao qumica e o volume do titulante utilizado, a quantidade da substncia dissolvida
na amostra pode ser calculada.
Buretas digitais para frascos Com um movimento subse- O volume dispensado pode ser
so montadas diretamente no quente do pisto para baixo, o lido diretamente no display da
frasco reservatrio. Atravs de lquido liberado lentamente, bureta digital. No h erro de
um movimento do pisto para e adicionado amostra atravs leitura de menisco.
cima, o lquido aspirado do do tubo de dosificao at o
frasco reagente para dentro do trmino da titulao, ex. pela
cilindro. mudana de cor.
24
Instrumentos da Manuseio de Lquidos Pipetagem
Operao
25
Instrumentos de Manuseio de Lquidos Pipetagem
Estas pipetas tambm seguem o princpio de interface de ar. Elas permitem que 8 ou 12 operaes
de pipetagem sejam feitas simultaneamente.
Operao
BRAND
26
Instrumentos de Manuseio de Lquidos Pipetagem
Ergonomia e Esforo
Operaes intensivas e repetitivas realizadas com instrumentos mecnicos sem um design ergon-
mico apropriado resultam em estresse prolongado e podem levar um grande nmero de problemas
musculares, conhecidos como LER (leso por esforo repetitivo). Particularmente expostas ao risco
esto as reas do pescoo, ombros, braos e dedos. Por este motivo, no trabalho em laboratrio
frequentemente aparecem, entre outros problemas, tendinites e sndrome do tnel do carpo. Espe-
cialmente com micropipetas, a necessidade de operao livre de fadiga fundamental.
Pressionar o boto de pipe- controlados por um micropro- A combinao do controle por Uma vantagem adicional
tagem inicia o mecanismo cessador. motor e a ergonomia das pipe- a excuo de programas de
de aspirao ou dispensao Vrios programas de pipetagem tas permite uma operao sem pipetagem como o modo pipe-
(incluindo o sopro). O pisto da podem ser selecionados com estresse e sem fadiga. tagem em eletroforese (com
pipeta movido por um motor, os botes de controle. Ela tambm reduz a exigncia a indicao precisa no display
aspirao e dispensao so sobre os dedos ao realizar s- do volume dispensado) e o
ries longas que de outra forma modo de dosificao, os quais
aumentariam ainda mais o risco no so possveis com pipetas
de LER! manuais.
Ex. Transferpette electronic
mono e multicanal BRAND
Botes de programa
Boto de pipetagem
Operao
27
Instrumentos de Manuseio de Lquidos Pipetagem
O display
Programa
Capacidade da
bateria
Smbolo
seta para
aspirar
Volume pipe-
tado
Dosificao
Programa para dosificao de lquidos em sries com alquotas
iguais. Um volume aspirado e liberado parcialmente em etapas.
BRAND
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Instrumentos de Manuseio de Lquidos Pipetagem
Pipetas de deslocamento positivo so ideais para aplicaes difceis onde as pipetas de interface de
ar atingem seus limites fsicos. So adequadas tambm para meios de viscosidade muito baixa ou
muito alta, alta presso de vapor, ou com tendncia a formar espuma.
Cilindro de vidro Diferentemente das pipetas de do lquido. No necess- Alta exatido e velocidade de
deslocamento de ar, o pisto rio descartar a ponteira ou operao. As ponteiras e capi-
da pipeta de deslocamento capilar aps cada operao de lares so reutilizveis. A leitura
Pisto de desloca- positivo fica em contato direto pipetagem, j que um resduo do menisco no necessria
mento positivo com o lquido a ser pipetado. mnimo de umidade pode ser na pipetagem.
O pisto mvel desliza pelos negligenciado na maioria das
capilares e pelas ponteiras, aplicaes. Se o arraste uma
deixando suas paredes limpas preocupao, como em aplica-
at a ltima gota a qual pode es infecciosas ou radioativas,
Reagente
ser observada ao deixar o uma pipeta de interface de ar
orifcio da ponteira. Este prin- com ponteiras descartveis
cpio sempre produz resultados deve ser utilizada.
reprodutveis, independente-
mente das propriedades fsicas
Faixa de aplicao
Meios com alta viscosidade, Meios com alta presso de Meios com tendncia a forma-
como solues de protenas vapor como, lcoois, ter e o de espuma como solues
altamente concentradas, leos, hidrocarbonetos. de tensoativos.
resinas e gorduras.
BRAND
29
Instrumentos de Manuseio de Lquidos Dosificao
Tipos de repipetadores:
Repipetadores manuais
Repipetadores eletrnicos motorizados
Princpio de funcionamento
Com repipetadores manuais, Nenhum volume intermedirio meios difceis com alta presso
o volume dispensado em cada pode ser selecionado. Uma de vapor, alta viscosidade ou
passo resulta do comprimento grande vantagem destes tendncia a formao de espu-
do golpe, definido pelo nmero aparatos sua robustez; sua ma no so problemas para os
de passos em uma cremalhei- desvantagem a operao repipetadores.
ra, e do tamanho da ponteira. fatigante. De acordo com a faixa de volu-
Ento, somente um nmero Repipetadores trabalham me, o repipetador pode utilizar
limitado de passos de dosifica- conforme o j provado desloca- Ponteiras-PD de diferentes
o j definidos est disponvel. mento positivo. Ento, mesmo tamanhos.
Repipetador manual
Ex. HandyStep BRAND
O repipetador simplifica a pipetagem em srie pois aspira o meio
em uma nica vez e dispensa passo a passo. Com apenas um
enchimento, at 49 passos de 2 l a 5 ml podem ser dispen-
sados, dependendo do tamanho da Ponteira-PD. Os volumes e
nmeros de passos so resultados da combinao entre o ajuste
no boto de seleo (1-5) e do tamanho da ponteira utilizada.
As ponteiras-PD BRAND esto disponveis em 10 tamanhos
diferentes, estreis ou no. Ponteiras compatveis de outros
fabricantes tambm podem ser utilizadas.
Volume (l)
BRAND
30
Instrumentos de Manuseio de Lquidos Dosificao
Ergonomia e design
Trabalhos repetitivos com aparatos manuais podem ocasionar uma variedade de problemas muscula-
res, os quais afetam particularmente o pescoo, ombros, braos e dedos. Uma operao sem fadiga
ento um requerimento crucial para repipetadores, j que so usados quase que exclusivamente
para dosificaes em srie.
Um design ergonmico indispensvel para uma performance sem estresse em operaes de pipe-
tagem longas, na mesma posio de trabalho.
Princpio de funcionamento
Dosificao
modo padro Dosificao automtica Pipetagem
Um volume predefinido dis- O instrumento calcula o inter- Trabalha como uma pipeta de
pensado repetidamente. valo mdio entre os trs pri- deslocamento positivo. Um
meiros passos de dosificao e volume predefinido aspirado
continua a trabalhar neste ritmo e dispensado.
automaticamente.
BRAND
31
Exatido
Preciso definida
O que "Limite de Erro, Exatido, Coeficiente de Variao e
Preciso" significam em medies volumtricas?
1 2 3 4 5
V -Vnominal s 100 V E% + 2CV%
LE Vreal - Vnominal E[%]= 100 CV[%]= E P[%]= N E N% LE VN
Vnominal V VP 100 %
(de forma analga para CVP [%] )
BRAND
32
Controle dos Instrumentos de Medio
Laboratrios de anlises devem verificar e documentar a exatido dos instrumentos de medio uti-
lizados para alcanar resultados de anlises confiveis. Esta exigncia especialmente aplicada aos
laboratrios que trabalham segundo as diretivas BPL, que esto acreditadas segundo DIN EN ISO/
IEC 17 025 ou certificados segundo DIN EN ISO 9001.
Todos estes padres e diretivas requerem a disponibilidade de instrues escritas que descrevem
o procedimento de controle em detalhes. Os limites de erro ou exatido e coeficiente de variao
tambm devem ser definidos, e deve haver instrues de como proceder se os limites aceitveis
forem excedidos.
A exatido dos instrumentos e Instrumentos volumtricos so O controle dos aparatos de Instrumentos volumtricos cer-
a medio da incerteza devem testados gravimetricamen- medio no pode ser a princi- tificados em marcao DE-M
ser conhecidas e documen- te. Instrumentos de manuseio pal ocupao em um laborat- com a DIN 12600 tambm es-
tadas antes de sua admisso de lquidos so realizados de rio; deve ser limitado a um pe- to sujeitos aos procedimentos
para o uso. Alm disso, o acordo com a ISO 8655; e no rodo razovel. H uma deman- de controle. No h uma dire-
instrumento deve ser testa- caso de instrumentos volum- da por procedimentos simples, tiva clara se tais instrumentos
do novamente em intervalos tricos de vidro, a ISO 4787 rpidos e baratos a serem se- devem passar por testes ini-
definidos (veja DIN EN ISO aplicada. guidos. ciais ou no. O usurio res-
10012). Vrias influncias devem ser A combinao das instrues ponsvel por responder esta
consideradas ao realizar os tes- de teste (POP), do software questo.
Motivo: tes. Por este motivo a BRAND de calibrao EASYCAL es- Entretanto, para garantir a se-
A performance dos instru- disponibiliza o Procedimento de pecialmente desenvolvido em gurana, o teste inicial de uma
mentos de medio pode ser Operao Padro (POP), que conjunto com instrumentos vo- amostragem randmica reco-
afetada, por ex., pelo uso de inclui detalhes das instrues lumtricos fornecidos com um mendado. Este teste ir docu-
reagentes agressivos e da ma- de teste, para cada tipo de ins- certificado de lote ou individual mentar o estado inicial em rela-
neira e frequncia de limpeza. trumento volumtrico. O pro- a melhor opo para minimi- o aos testes subsequentes.
J que a exatido requerida cedimento de teste descri- zar o tempo necessrio para Outra opo seria adquirir os
depende fortemente das to passo a passo. Para facilitar este procedimento. instrumentos volumtricos com
circunstncias de cada aplica- ainda mais, a BRAND oferece certificado do fabricante.
o, o usurio deve determinar um software que realiza os cl-
os intervalos para teste de culos, armazena em um banco
rotina. Intervalos tpicos para de dados, e imprime o relatrio
instrumentos de manuseio de detalhado do teste.
lquidos esto entre 3 e 12
meses, e para instrumentos
volumtricos de vidro, a cada
1-3 anos.
BRAND
33
Controle dos Instrumentos de Medio
2.
Clculo da
1. Clculo do volume mdio: exatido:
Um volume mdio (x) dos valores pesados calculado dividindo a Extrado da tabela Fator Z para
Instrumentos Liquid Handling V - VVespecif.
soma das pesagens pelo nmero de pesagens. Esta massa mdia E [%] = 100
ento multiplicada por um fator de correo (Z, unidade l/ VVespecif.
Temperatura Fator z
mg) para resultar no volume (V) dispensado. O fator Z combina a C ml/g
densidade da gua na temperatura de teste e os efeitos da pres- 200,1514 - 200
18 1,00245 E [%] = 100
so atmosfrica. Para uma temperatura tpica de 21,5 C e uma 200
18,5 1,00255
presso atmosfrica de 1013 mbar (hPa), Z = 1.0032 l/mg.
19 1,00264
19,5 1,00274 E [%] = 0,076
V = x Z 20 1,00284
20,5 1,00294
x + x2 + x3 +... + x10
V= 1 Z 21 1,00305
n 21,5 1,00316
22 1,00327
200,2 +199,6 +199,49 + ... + 199,19 22,5 1,00338
V
= 1,0032
10 23 1,00350
23,5 1,00362
V = 199,513 1,0032
24 1,00374
24,5 1,00386
25 1,00399
V = 200,1514
25,5 1,00412
26 1,00425
BRAND
34
Controle dos Instrumentos de Medio
0,8393
s = 1,0032
9
s = 0,306
0,306 100
CV [%] =
200,1514
CV [%] = 0,153
BRAND
35
Controle dos Instrumentos de Medio
Software de calibrao
O monitoramento de aparatos de medio conforme as BPL e DIN EN ISO 9001 no exatamente
direto. Equaes complexas facilmente levam a erros de clculo, e a documentao dos resultados
pode ser cansativa. Para facilitar esta tarefa entediante, alguns fabricantes desenvolveram softwares
de calibrao especiais.
BRAND
36
Declarao de conformidade e Calibrao
Para que instrumentos volumtricos estejam prontos para uso em Este certificado emitido pelo Eichamt, o Gabinete de Pesos e
reas legalmente regulamentadas como a mdica e farmacu- Medidas, e aceito na Alemanha alm de muitos outros pases.
tica (manufatura de produtos medicinais), a legislao Alem de Ambos, instrumento e certificado, apresentam um nmero de
Medio e Calibrao de Dezembro de 2014 exige a marca DE-M srie individual e o ano de emisso.
no lugar da calibrao oficial. O mesmo se aplica a acessrios
volumtricos relevantes (ex. ponteiras para pipetas operadas por
pisto). Certificado de calibrao DAkkS
Um Sistema de garantia da Qualidade organizado de acordo com Todos os instrumentos e certi- Tanto instrumento como certi-
a DIN EN ISO 9001 d ao fabricante o direito de emitir certifica- ficados de um lote de produto ficado apresentam um nmero
dos de performance, ou certificados de qualidade do fabricante. apresentam o mesmo nmero de srie individual, alm do n-
Certificados de qualidade do fabricante esto disponveis como de lote. O certificado registra o mero de lote. O certificado re-
certificados individuais ou de lote. valor mdio, o desvio padro e gistra o volume medido, a in-
Todos os resultados do controle de qualidade so documentados a data de emisso. certeza de medio e a data de
e arquivados por um perodo de, no mnimo, 7 anos. Se o nmero emisso.
de srie ou de lote conhecido, os resultados individuais da data
de produo podem ser acessados a qualquer momento.
BRAND
37
Instrumentos volumtricos BLAUBRAND USP
Empresas que produzem produtos farmacuticos para o mercado americano e por este motivo audi-
tadas por agncias americanas como a FDA (Food and Drug Administration) so obrigadas a aten-
der os requerimentos da USP (United States Pharmacopeia).
A USP atual descreve no captulo 31 que os limites de erro para Classe A especificados nas normas
ASTM so requeridos nos instrumentos volumtricos de vidro.
Estes limites de erro esto listados em tabelas para bales volumtricos, pipetas volumtricas e bure-
tas. Para pipetas graduadas at 10 ml (incluso), os limites de erro esto mencionados no texto.
Limites de erro
Os instrumentos volumtricos
de vidro BRAND so fabricados
de acordo com a norma DIN EN
ISO atual. Visto que os requeri-
mentos de construo definidos
nas normas DIN EN ISO dife-
rem das normas ASTM, limites
de erro diferentes resultam para
cada instrumento de medio.
A BRAND confirma em cada
certificado USP fornecido com
cada instrumento de medio
USP que os limites de erro
Classe A correspondente aos
padres da norma ASTM so
atendidos.
BRAND
38
Diretiva IVD
Diretiva IVD
Implicaes e consequncias
Em 7 de Dezembro de 1988, Entende-se por "produtos para Entende-se por "produtos para O smbolo CE a marca oficial
a diretiva da UE para Dispo- Diagnstico in vitro" qualquer diagnstico" qualquer instru- requerida pela Comunidade Eu-
sitivos Mdicos para Diagns- produto utilizado em testes in mento, aparato, dispositivo, ropeia. Mostra ao usurio que o
tico in-vitro (Diretiva IVD) foi vitro de amostras procedentes material ou outro item, inclusive produto cumpre os requerimen-
publicada no Jornal Oficial da do corpo humano, incluindo o software, destinado pelo tos fundamentais de segurana
Comunidade Europeia e foi doaes de sangue e tecidos. fabricante para utilizao em e ambientais conforme defini-
efetivada em 7 de Junho de Estes dispositivos podem ser: seres humanos, com a finalida- do pelas chamadas Diretivas
2000. reagentes, substncias para de de: Europeias
calibrao ou controle, equipa- O fabricante coloca o smbo-
diagnstico, preveno,
mentos, instrumentos, sistemas lo no produto e elabora uma
monitoramento, tratamento,
ou tambm recipientes para declarao de conformidade,
ou alvio de doena, leso ou
amostras, se forem destinados garantindo o cumprimento do
deficincia
especificamente pelo fabricante produto com as diretivas e
para diagnstico in-vitro. IVD investigao, substituio ou requerimentos tcnicos.
so principalmente utilizados modificao da anatomia ou
para proporcionar informao de um processo fisiolgico Os produtos para diagnstico
controle de concepo. BRAND pertencem classe de
relativa a um estado fisiolgi-
produtos para diagnstico in
co ou patolgico No pertencem a estes produ-
vitro (IVD). Entre eles encon-
relativa a uma anomalia tos os agentes farmacolgicos
tram-se:
congnita ou imunolgicos regulamenta-
dos pela lei sobre medicamen- cmaras de contagem para
para monitorar medidas
tos. clulas sanguneas
teraputicas
lamnulas de vidro para
hematcritos
pipetas capilares descartveis
capilares para micro
hematcrito
massa vedante para
hematcrito
frascos de amostra para
analisadores
coletores para urina
recipientes para amostras
de fezes
tubos criognicos
ponteiras de pipeta
ponteiras PD
Transferpette micropipetas
HandyStep pipetas
repetitivas
BRAND
39
Gesto da Qualidade
Gesto da Qualidade
A gesto da Qualidade indispensvel. Idealmente, deve estar pronta j na etapa de projeto, e
deve acompanhar o design do produto, desenvolvimento e processo de fabricao. Garante a maior
segurana possvel no trabalho com equipamentos de laboratrio, e a confiabilidade nos resultados
das anlises.
A gesto de qualidade BRAND O sistema de gesto de qua- Todos os instrumentos de cumentados e arquivados por
comea na etapa de criao de lidade realizado na BRAND e medio utilizados no controle 7 anos. Se o nmero do lote
um produto e acompanha seu certificado segundo a DIN EN de qualidade so controlados ou nmero serial conheci-
desenvolvimento at que ele ISO 9001 uma combinao regularmente e se referem do, cada resultado de teste
esteja pronto para a produo do monitoramento do processo aos padres nacionais do PTB especfico na data de produo
em srie. O controle constante e de amostragens randmicas. (Instituto Federal de Fsica e pode ser rastreado. Como a
ao longo de todo o processo de O nvel de qualidade aceitvel Metrologia). A gesto de qua- BRAND produz instrumentos
fabricao resulta em materiais (NQA) menor ou igual a 0.4, lidade, de acordo com a norma volumtricos marcao DE-M,
volumtricos com o menor des- i.e., os valores limites so DIN EN ISO 9001, a base a qualidade dos produtos au-
vio do valor nominal (exatido) cumpridos com uma certeza para a emisso de certificados tomaticamente supervisionada
possvel e com uma disperso estatstica de, no mnimo, de calibrao (por ex., os certi- pelo Eichamt, Secretaria de
mnima dos valores individuais 99.6%. ficados de performance). Estado de Pesos e Mediadas
(coeficiente de variao). A Todos os resultados so do- Alemo. Os requerimentos para
etapa final deste Controle monitoramento de instrumentos
Estatstico de Processo uma de medida, rastreabilidade aos
amostragem randmica dos padres nacionais e qualifica-
produtos conforme a norma DIN o profissional so integral-
ISO 3951. mente cumpridos.
BRAND
40
Limpeza
Mtodo de banho de
Mtodo de frico imerso Banho ultrassnico
BRAND
41
Limpeza
Limpeza cuidadosa
Para tratar cuidadosamente os instrumentos de laboratrio, limpar , 50
destruio da graduao. ,
10
Informao 0 6 8 10 12 14
temperatura (C) pH
A 70 C, uma soluo de sdio elimina aprox. 1,4 m ou mais. Ataque alcalino ao vidro Boro 3.3 em Ataque alcalino ao vidro Boro 3.3 em
hidrxido 1N pode corroer Por isso, evite temperaturas de funo da temperatura, calculada a funo do pH a 100 C.
partir das perdas de peso. Concentrao Tempo de ataque: 3h.
uma camada de aprox. 0,14 limpeza superiores a 70 C e (NaOH) = 1 mol/l.
m da superfcie de Boro 3.3 prefira detergentes ligeiramen- Tempo: 1h.
(vidro borossilicato 3.3) em 1 te alcalinos.
hora. No entanto, a 100 C se
Desinfeco e esterilizao
Desinfeco Esterilizao por vapor Observaes sobre a esterilizao
Instrumentos de laboratrio Esterilizao por vapor (auto- Uma esterilizao por vapor eficaz somente ocorre quando o
que tenham entrado em conta- clavao) definida como des- vapor saturado e possui livre acesso aos pontos contamina-
to com materiais infecciosos ou truio ou inativao irrevers- dos.
organismos geneticamente mo- vel de todos microrganismos Para evitar sobrepresso, os recipientes sempre devem estar
dificados devem ser desinfe- reprodutveis sob exposio de abertos.
tados antes da reutilizao ou vapor saturado a 121 C
Os instrumentos contaminados reutilizveis devem ser profun-
descarte, isto , devem ser tra- (2 bar) de acordo com a DIN
damente limpos antes de serem esterilizados por vapor. De
zidos a uma condio no qual EN 285. Para um procedimen-
outro modo, os resduos se incrustaro durante a esterilizao
eles no sejam mais um risco. to de esterilizao correto, fa-
e os microrganismos no sero eliminados eficazmente por es-
Portanto os instrumentos de la- vor contatar o encarregado da
tarem protegidos pelos resduos. Alm disso, qualquer resduo
boratrio devem ser tratados, esterilizao.
pode danificar as superfcies devido s altas temperaturas.
por exemplo, com detergentes
desinfetantes. Caso necess- Nem todos os plsticos so resistentes esterilizao por
rio, e apropriado, os materiais vapor. O policarbonato por ex., perde sua resistncia. Tubos
devem ser posteriormente es- de centrfuga em policarbonato no podem ser esterilizados por
terilizados (autoclavados). vapor.
Durante a esterilizao (autoclavao), equipamentos plsticos
no devem sofrer tenses mecnicas (por ex. no empilhar).
Para evitar deformao, copos becker, frascos e provetas
devem ser autoclavados na posio vertical.
Resistncia trmica
BRAND
42
Informaes de Segurana
Informaes de Segurana
Manipulao de substncias perigosas
Manipular substncias perigosas, como produtos qumicos, materiais infectados, txicos ou radioa-
tivos e organismos modificados geneticamente, exige alta responsabilidade de todas as pessoas
envolvidas, a fim de proteger as pessoas e o meio ambiente. Observar atentamente as regras de
segurana do laboratrio, das associaes profissionais, dos institutos encarregados da proteo
do meio ambiente, da proteo contra radiaes e da eliminao de resduos. Igualmente devem-se
observar os padres tcnicos amplamente reconhecidos (por ex. DIN ou ISO).
Antes de utilizar instrumen- No caso de uso frequente, Os instrumentos de labo- No admissvel cortar as
tos de laboratrio, o usu- os equipamentos de labora- ratrio enviados para repa- provetas danificadas. Isto di-
rio deve comprovar que so trio devem ser examinados ro devem ser limpos e este- minui a distncia entre a di-
adequados e que funcionam quanto a eventuais avarias, rilizados, se necessrio. Ins- viso limite superior e o bico,
corretamente. especialmente instrumentos trumentos com contamina- conforme definido pela nor-
sujeitos a presso ou vcuo o radioativa devem ser ma DIN, resultando em um
Sempre segurar as pipetas
(por ex. dessecadores, kita- descontaminados de acor- aumento do risco de produ-
prximo sua extremidade
zatos, etc.). do com as normas de prote- tos qumicos serem derra-
de suco e inserir com cui-
o contra radiao. Os ma- mados e assim a seguran-
dado a pipeta no controlador Os perigos de trabalhar com
teriais volumtricos em vidro a operacional no est mais
de pipetagem at firmar com produtos de laboratrio ava-
(por ex. bales, provetas, garantida.
segurana. No usar fora. riados nunca deve ser su-
etc.) no devem ser repara-
Vidro quebrado pode causar bestimado (por ex. cortes, Os resduos devem ser eli-
dos em caso de dano. Expo-
leso! queimaduras, risco de infec- minados de acordo com as
sio ao calor, pode ocasio-
o). Se um reparo profis- normas e leis locais. Isto
nar tenses no vidro (risco
sional no for possvel, des- tambm vlido para mate-
elevadssimo de ruptura), ou
carte o produto. riais descartveis. Essa eli-
um processo descontrolado
minao no deve causar
de resfriamento pode causar
perigo para seres humanos
variaes permanentes de
nem para o meio ambiente.
volume.
Equipamentos de laborat-
rio devem ser eliminados de
acordo com os materiais de
que so fabricados, e em es-
tado limpo, de acordo com
Trabalho com vidro as normas em vigor.
Ao trabalhar com vidro, deve-se levar em considerao as limita- Favor observar que as vidra-
es com relao s mudanas de temperatura, choque trmico e rias de laboratrio no so
estresse mecnico. Deve-se tomar medidas rgidas de precauo: reciclveis.
BRAND
43
Para sua anotaes.
ndice de marcas regis-
tradas
accu-jet, BLAUBRAND, BRAND,
Dispensette, EASYCAL, HandyStep S,