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INTRODUCCIN

La Microbiologa se enfrenta a una amplia gama de desafo:


Aumento de los costos de la asistencia sanitaria
Uso inapropiado de antibiticos
Infecciones adquiridas en Hospital
Aumento de las resistencias microbianas
Los tratamientos antimicrobianos representan una significativa carga
para los presupuestos de la asistencia sanitaria hospitalaria. Los
laboratorios de Microbiologa juegan un papel clave en el control del
adecuado uso de los antibiticos.
Sus diagnsticos orientan decisiones teraputicas apropiadas ya que
un tratamiento bien dirigido depende de la exactitud de los resultados
microbiolgicos.
El papel de la microbiologa en la lucha contra las infecciones
adquiridas en hospitales ha sido ms relevante en los ltimos aos.
Alertando y controlando las infecciones nosocomiales, los
microbilogos estn en la vanguardia de la lucha contra la resistencia
bacteriana, una inquietud de cualquier institucin de salud.
El aumento de la resistencia bacteriana es un desafo a los
tratamientos antimicrobianos ms efectivos. Detectar resistencias tan
pronto como sea posible, permite adoptar medidas proactivas y
modificar el tratamiento, previniendo el fracaso teraputico.
En este entorno desafiante, la microbiologa tiene que estar a la
vanguardia para proporcionar el mejor servicio de la manera ms
eficaz.
OBJETIVOS

Describir los componentes fundamentales del equipo VITEK 2


COMPACT, sus caractersticas y especificaciones tcnicas.
Dar a conocer la utilidad del sistema VITEK 2 COMPACT para la
identificacin microbiolgica y el estudio de la susceptibilidad
antimicrobiana en las enfermedades infecciosas.
Dar a conocer las ventajas y desventajas del equipo VITEK 2
COMPACT.

SISTEMA VITEK 2 COMPACT

El sistema VITEK fue diseado y manfacturado en Argentina por el


Laboratorio BioMerieux, en Argentina.
Es un sistema automatizado para la identificacin bacteriana y el
estudio de la sensibilidad antimicrobiana.
El sistema automtico VITEK responde perfectamente a las
necesidades de la bacteriologa actual, tanto en la microbiologa
clnica como industrial.
La automatizacin en laboratorios clnicos como industriales aporta
mayor seguridad, suprimiendo las manipulaciones repetitivas, y la
rapidez de respuesta que permite obtener resultados fiables ms
rpidamente que con las tcnicas manuales.

Identificacin bacteriana:
Las pruebas de identificacin son rpidas y fiables.
A nivel clnico es importante reducir el tiempo de identificacin
para:
Mejorar la atencin al paciente.
Identificar brotes a tiempo.
Lucha contra las infecciones asociadas a la salud.

Pruebas de sensibilidad a antibiticos:


Las pruebas de sensibilidad a los antibiticos determina la
susceptibilidad de una cepa bacteriana a un antibitico
especfico a un grupo de antibiticos.
El organismo se pone en contacto con el antibitico y la prueba
revela si el microorganismo crecer o no en presencia del
antibitico.
Esta informacin es expresada como la concentracin inhibitoria
mnima.
Los mdicos utilizan los resultados de las pruebas de sensibilidad
a los antibiticos para ayudar a determinar el tratamiento ms
adecuado para la infeccin y el paciente individual.
La prueba de sensibilidad a los antibiticos tambin se pueden
utilizar para detectar la resistencia bacteriana a antibiticos.

Descripcin del equipo:

VITEK 2 es un sistema que utiliza tarjetas con reactivos


colorimtricos, las que son inoculadas con la suspensin de un
cultivo puro microbiano y el perfil de desarrollo es interpretado
de forma automtica
VITEK automatiza todas las etapas necesarias para la realizacin
de las pruebas de identificacin y antibiogramas con las tarjetas
VITEK.
La identificacin de bacterias se basa en la inoculacin de una
suspensin de microorganismos en tarjetas con determinadas
paneles de reacciones bioqumicas.
La sensibilidad antimicrobiana se lleva a cabo en forma similar a
travs de tarjetas que contiene diluciones estandarizadas de
distintos antibiticos correspondientes a los puntos de corte de
sensibilidad establecidos por CLSI.
Est constituido por un inoculador/sellador, un incubador/ lector,
un ordenador y una impresora.
VITEK 2 es un sistema que utiliza tarjetas con reactivos
colorimtricos, las que son inoculadas con la suspensin de un
cultivo puro microbiano y el perfil de desarrollo es interpretado
de forma automtica.

Caractersticas del equipo:

Excelencia en las identificaciones de rutina


Aumente la productividad y la seguridad con el mximo nivel de
automatizacin.
Lector de cdigos de barras interno automatizado
Mecanismo de carga automatizado
Lecturas cada 15 minutos, para una mayor rapidez de la
identificacin.
Opciones de configuracin que le proporcionan flexibilidad.
Los tests terminados son arrojados automticamente a un
contenedor de deshechos ergonmico.

Software de manejo intuitivo


Gracias a unos iconos fcilmente comprensibles, los tcnicos
necesitan menos formacin, con lo que se incrementa la
productividad.
El rbol de navegacin muestra el estado actual de todas las
tarjetas, por lo que el personal soluciona cualquier incidencia, y
se aumenta la rapidez de los resultados.

Conexin en red desde cualquier lugar y con cualquier


equipo de hardware

Gua completa de conexin en red para imprimir, visualizar,


realizar copias de seguridad, restaurar y archivar a distancia.
Libertad para utilizar su hardware.

El software opcional incluye el paquete de validacin


vitek2 compact para poner en funcionamiento su
laboratorio en el menor tiempo posible.

Cumplimiento del ttulo 21, parte 11, del Cdigo


estadounidense de normas federales (CFR) (21 CFR11).
SRF (Supplemental React File), una funcin personalizable para
rastrear organismos especficos de las instalaciones.
Estos organismos pueden transferirse automticamente a esta
rea del software y guardarse.
Con ello se evitan errores tipogrficos y se incrementa la
fiabilidad y la calidad de los resultados.
Tiempo hasta Rendimiento el Resultado ID correcta/ 1
alternativa
Tarjeta de un solo uso, sin contaminacin cruzada
Resultados en el mismo da o al da siguiente
Mxima precisin.

Tarjetas Vitek:
Las tarjetas reactivas tienen 64 pozos que contienen, cada uno, un
sustrato de prueba individual. Con estos sustratos se miden varias
actividades metablicas como acidificacin, alcalinizacin, hidrlisis
enzimticas y desarrollo en presencia de sustancias inhibidoras. Las
tarjetas estn selladas en ambos lados por una pelcula clara que
evita el contacto entre las diferentes mezclas sustrato-
microorganismo y a la vez permite la transmisin del nivel de oxgeno
apropiada. Cada tarjeta tiene un tubito de transferencia pre-insertado
para la inoculacin. Estas tarjetas tienen cdigos de barras que
contienen informacin sobre el tipo de producto, nmero de lote,
fecha de caducidad y un identificador nico que puede ser ligado a la
muestra ya sea antes o despus de cargar la tarjeta al sistema.

Existen 4 tipos de tarjetas reactivas disponibles para la


identificacin de diferentes clases de organismos:
1. GN Bacilos Gram negativos fermentadores y no fermentadores.
2. GP - Cocos y bacilos no formadores de esporas Gram positivos
3. YST Levaduras y organismos levaduriformes
4. BCL Bacilos formadores de esporas Gram positivos

Tarjeta Reactiva GP (bioMrieuxMR) para cocos y bacilos Gram


positivos.
Preparacin de la suspensin
Transferir con asa estril, a partir de un cultivo puro desarrollado
durante 24 h en Agar nutritivo o TSA, una cantidad suficiente de
inculo a un tubo de ensaye de poliestireno claro de 12x75 mm
que contiene 3 mL de solucin salina estril (Sol.Acuosa de NaCl
0.45% a 0.5%, pH 4.5 a 7.0).
Ajustar la turbiedad a 0.50-0.63 unidades de la escala de
McFarland con el densitmetro DensiChek.
Colocar el tubo de ensayo que contiene la supensin bacteriana
dentro de la gradilla especial (cassette), y la tarjeta de
identificacin se coloca en la ranura cercana, insertando el tubo
de transferencia dentro del tubo con la suspensin
correspondiente. Colocar el cassette con las muestras en el
sistema VITEK 2.
Una vez dentro del equipo, las muestras se someten a los
siguientes procesos de forma automtica:
Inoculacin
Las muestras son trasportadas a una cmara en la que se aplica
vaco y en seguida se reintroduce nuevamente el aire, sta
accin hace que la suspensin bacteriana pase a travs del tubo
de transferencia hacia los microcanales que llenan todos los
pozos.
Sellado e incubacin de las tarjetas
Las tarjetas inoculadas pasan por un mecanismo que corta los
tubos de transferencia y las sella, previo a la carga dentro del
carrusel-incubador. Todos los tipos de tarjetas se incuban en lnea
a 35.5 1.0 C.
Lectura de las reacciones.
Cada tarjeta es removida del carrusel-incubador cada 15 min,
transportada al sistema ptico de transmitancia el que usa
diferentes longitudes de onda del espectro visible para
interpretar las reacciones de turbiedad o el color de los productos
metablicos, y de vuelta a su sitio en el carrusel hasta el
siguiente tiempo de lectura. Los datos son registrados a
intervalos de 15 min durante el periodo de incubacin total.
Los clculos se realizan con los datos crudos y se comparan en
los umbrales para determinar las reacciones para cada prueba.
Los resultados aparecen como +, -, o cuando las reacciones
son dbiles estas se indican como ?
Base de datos.
Las bases de datos de los productos de identificacin estn
construdos con un gran nmero de cepas de microorganismos
perfectamente caracterizados y probados bajo varias condiciones
de cultivo. Estas cepas provienen de una variedad de fuentes
clnicas e industriales, as como de colecciones de cultivo
pblicas y universitarias.
Disposicin de desechos
Despus del proceso las tarjetas se colocan en el contenedor rojo
ubicado en el laboratorio

Tarjeta reactiva YST:


El sistema Vitek 2 (bioMrieux) es un sistema totalmente automtico
para la deteccin del metabolismo fngico que puede identificar
levaduras y organismos afines en tan slo 15 h. Est basado en
tecnologa de fluorescencia y se compone de las tarjetas de anlisis
con 63 pocillos, una consola satlite para la recogida de informacin,
un mdulo incubador, un mdulo principal donde se procesa la
informacin gracias a un software de anlisis y un sistema experto
avanzado.
El sistema Vitek 2 permite la identificacin de 51 especies diferentes,
incluida C. dubliniensis, y, al igual que los sistemas semiautomticos,
requiere pruebas adicionales (fundamentalmente morfolgicas) en
caso de baja discriminacin.
Procedimiento
1. Realizar una suspensin de un cultivo joven de la levadura a
identificar en un tubo con 1,8 ml de solucin salina estril, hasta
conseguir una turbidez 2 de McFarland.
2. Introducir la tarjeta y la suspensin de levaduras en el mdulo de
llenado, para que la inoculacin de la tarjeta se realice de forma
automtica.
3. Colocar la tarjeta inoculada en el mdulo incubador (30 C).
4. A las 24 h, la lectura de la turbidez de las celdillas se realiza
automticamente y se trasfieren los datos al ordenador.
Interpretacin
Una vez que el patrn de las lecturas de turbidez se compara con
los perfiles de la base de datos, se imprime la identificacin del
microorganismo.
Una identificacin aceptable es la que alcanza una confiabilidad
85%. Las levaduras identificadas con menos del 85% de confiabilidad
deben ser evaluadas posteriormente valorando su morfologa y otras
pruebas suplementarias para lograr una identificacin aceptable.

DESARROLLADO Y PROBADO EN > 17.000


AISLAMIENTOS

El Resultado ID
Tiempo hasta
correcta/ 1
Rendimiento
alternativa
BCL para todos los 14 horas 87%
bacilos gram positivos
que forman esporas.
CBC para 8 horas 85.4%
Corynebacterium spp y
gneros relacionados
GN para todos los 2-10 horas 90%
bacilos gram negativos
GP para todos los cocos 2-8 horas 94%
gram positivos y bacilos
acidolcticos
YST para todos los 18 horas 87%
organismos similares a
las levaduras
ANC para todas las 6 horas 90%
bacterias anaerbicas

Interpretaciones de resultados:
Resultados con Luz Verde
Los resultados que exhiben una Luz Verde muestran consistencia
entre la Identificacin y el perfil de susceptibilidad obtenido. El
organismo en s puede variar desde un fenotipo salvaje (un perfil de
susceptibilidad que se encuentra habitualmente en un organismo en
particular), susceptible a todos los agentes antimicrobianos,
resistente solo a aquellos antibiticos para los cuales el organismo es
intrnsecamente (de manera natural) resistente, hasta una cepa
multidrogo resistente. Si y solo si este fenotipo es consistente con un
mecanismo o mecanismos de resistencia conocido, este aislamiento
ser reportado con una luz verde en el AES. Esto es basado en una
extensa base bibliogrfica.
Resultados con Luz Amarilla
Estos resultados requerirn atencin y cualquier discrepancia
potencial ser resuelta antes de reportar el resultado. Una luz
amarilla se convertir en consistente con algunos cambios pero no
sern enviados automticamente a su LIS. Esto significa que un
antibitico para un organismo identificado tiene una CIM que no es
consistente con un perfil esperado de susceptibilidad. AES
recomendar para este resultado el cambio de un solo antibitico
para hacer el perfil consistente con el fenotipo esperado.
Un ejemplo de esto es un Staphylococcus aureus con una prueba de
tamizaje de cefoxitin negativa pero que tiene una CIM a oxacilina 4.
El AES cambiar la prueba de cefoxitin a positiva. Sin embargo este
es un resultado que deber ser verificado realizando un ensayo para
detectar la PBP2a o repitiendo la oxacilina utilizando un Etest y
repitiendo la prueba de cefoxitin.
Otro ejemplo de resultado con Luz Amarilla lo constituira una
Klebsiella con una CIM elevada a ertapenem y una CIM a imipenem
1. Se debera hacer una revisin con una nota del microbilogo para
referir esta cepa para un anlisis de PCR para detectar genes KPC. El
AES puede ser configurado para cambiar automticamente el
imipenem a resistente, sin embargo la produccin de KPC o MBL en
un caso como este debe ser verificada.
Resultados con Luz Roja
Estos resultados no sern aceptados puesto que el fenotipo (perfil se
susceptibilidad) observado no corresponde a ninguno de los presentes
en la base de datos del AES.
Como ejemplo, recientemente tuvimos una Serratia marcescens
identificada con una probabilidad de89% que nos present una luz
roja. El aislamiento fue resistente a las cefalosporinas de primera y
segunda generacin y tena una CIM para cefepime de 1. Este perfil
en s mismo podra ser consistente con un productor de AmpC de
reprimido. Sin embargo el aislamiento present una CIM a ertapenem
8, a imipenem 1 siendo muy resistente a levofloxacina y muy
susceptible a ciprofloxacina. Siendo un perfil sin sentido no podra ser
reportado, adems la probabilidad de la identificacin estaba por
debajo de lo que aceptamos. En este caso al revisar la placa de
pureza se revel que el cultivo estaba mixto.
Resultados con Luz Prpura
Estos son organismos con identificacin y antibiograma que pueden
ser interpretados por el VITEK 2, pero que al no estar dentro de la
base de datos del AES debido a la baja frecuencia en la que son
aislados hay una falta de datos pertinentes para el perfil de
susceptibilidad. En esta instancia, los resultados debern ser
retenidos para anlisis del laboratorio.

ESPECIFICACIONES TCNICAS:
EQUIPO VITEK 2 COMPACT

Dimensiones Masa
Altura 60 cm (23,6 in.) Aproximadamente 75 kg (165 libras)
Anchura 72 cm (28,3 in.)
Profundidad 68 cm (26,8 in.)

CARACTERSTICAS ELCTRICAS
Tensin de entrada 100/120/220/240 V CA a 50/60
Hz
Corriente de entrada mxima 5 amps a 120 V CA o 2,5 amps
a 240 V CA
Corriente de entrada nominal 2,5 amps a 120 V CA o 1,25
amps a 240 V CA
Potencia nominal 300 vatios, pico 600 vatios
Calor 1025 BTU/HR (nominal)
Cable de corriente Desmontable, de 3 hilos, con toma de
tierra, segn IEC 320

CARACTERSTICAS GENERALES
Casete Capacidad, tarjetas: 10 tarjetas por casete
Vaco (unidad de llenado) Nivel mnimo: 0,89 PSIA 0,06 PSIA
Sellador Mecnica: longitud de la lengeta 1,25 0,25 mm
Estufa de incubacin Temperatura: 35,5 C 1 C como promedio
Capacidad: 30 60 tarjetas por estufa (En funcin de la
configuracin)

DISPONIBLE URS RENDIMIENTO PROBADO


AOAC Research Institute
Identificacin de GP, nmero de licencia 120702
Identificacin de BCL, nmero de licencia 080801
Identificacin de GN, nmero de licencia 020802
Paquete de Validacin disponible

CONCLUSIONES

Los sistemas automatizados ofrecen mltiples ventajas para el


diagnstico microbiolgico de las enfermedades infecciosas. Los
sistemas Vitek 2 Compact ha provocado un impacto positivo, que
se traducen en una disminucin significativa del tiempo de
emisin de los resultados para el diagnstico de las
enfermedades infecciosas y en un incremento de la positividad
de los hemocultivos.
Asimismo, estos sistemas automatizados han permitido la
deteccin de los fenotipos enzimticos de resistencia de las
principales bacterias de inters clnico.
El VITEK 2 con el Sistema Experto Avanzado proporciona a los
microbilogos clnicos las herramientas necesarias para entregar
un cuidado del paciente con calidad, a tiempo y de forma costo
eficiente.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
http://jornades.uab.cat/workshopmrama/sites/jornades.uab.cat.w
orkshopmrama/files/VITEK_2_compact_DiversiLab.pdf
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/IdentificacionConVIT
EK2_21548.pdf
http://www.convencionsalud2012.sld.cu/index.php/convencionsal
ud/2012/paper/viewFile/196/70
http://www.guia.reviberoammicol.com/Capitulo11.pdf
http://www.biomerieux.com.co/upload/vitek_aes_book_es21.pdf

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