UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

LIC. EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACIN AMBIENTAL

PROGRAMA MICROBIOLOGA

PRCTICA DE LABORATORIO 6.
OBSERVACIN DE ESTRUCTURAS INTERNAS DE CLULAS EUCARIOTAS

Docente: Rolando Hernndez Lazo

Departamento de Ciencias Naturales y Educacin Ambiental.
Fecha de realizacin: 06/04/2017
Grupo: 01

Integrantes:

EUNIS CASTAO MENDINUETA

ELIANIS MARTINEZ COHEN
SAMIA SANCHEZ CAMBER
KATIA SIERRA ROMERO

OBJETIVOS:

Objetivo General:

Determinar la importancia de ciertos colorantes y soluciones en la identificacin de

estructuras y sustancias celulares.

Objetivos Especficos:

Verificar que las clulas tienen formas y tamaos variables.

Identificar la clulas eucariotas en un frotis sanguneo
Reconocer la estructura interna y la forma de las clulas eucariotas
 INTRODUCCIN

La clula es la unidad morfolgica y funcional de todo ser vivo y todos los organismos estn
compuestos por clulas, y que todas las clulas derivan de otras precedentes. Los organismos
vivos pueden clasificarse segn el nmero de clulas que posean en unicelulares si slo tienen
una como en el caso de las bacterias y protozoos pluricelulares si poseen ms. De acuerdo a
las estructuras que presentan las clulas, pueden clasificarse en dos grandes tipos las
procariotas (arqueas y bacterias) y las eucariotas (protistas, animales, hongos y vegetales).
Pero en este caso estudiaremos a fondo la estructura interna de las clulas eucariotas,
mediante diferentes experimentos observaremos, su morfologa y las diferencias entre las
procariotas.
 FUNDAMENTO TERICO
Las clulas eucariotas son muy complejas con un citoplasma organizado con orgnulos
limitados por membranas biolgicas, que son similares en su composicin a la membrana
celular. El ncleo es el orgnulo ms notable y caracterstico tanto en clulas animales como
en vegetales, hongos y protistas. Por esto mismo un ejemplo tpico para observar una
estructura interna de una clula animal es el ncleo. Frotis sanguneo La tcnica de frotis
sanguneo consiste en una extensin de sangre realizada sobre un portaobjeto con ayuda de
otro portaobjeto (Fig. 10), que permite observar bajo el microscopio diferentes formas celulares
sanguneas. Con dbil aumento se explora la preparacin para localizar la zona en la que el
frotis es ms perfecto (Fig. 11).

En el campo del microscopio se ven con un dominio predominante los eritrocitos (tambin
llamados glbulos rojos o hemates), teidos de color rojo. No tienen ncleo y se observa un
entorno ms claro en medio que en los bordes. Los leucocitos (tambin llamados glbulos
blancos) se identifican fcilmente por la presencia del ncleo. Estos se clasifican en:
Linfocitos: Un poco ms grandes que los eritrocitos, con un ncleo muy voluminoso que
ocupa casi toda la clula. Aparece fuertemente teido de un color violeta oscuro.
Monocitos: Normalmente son poco frecuentes, hay que desplazarse por la preparacin para
encontrar alguno. Tienen un ncleo muy grande y redondeado que aparece teido en color
violeta.
Polimorfonucleares: Presentan el ncleo fragmentado, como lbulos grandes.
Eosinfilos: Son granulocitos poco abundantes de color rojizo y el ncleo teido de color azul
marino. Estas clulas aumentan su nmero en caso de parasitosis o alergia.
Basfilos: Presentan un ncleo teido de rojo y grnulos en el citoplasma teidos de color
azul oscuro.

Fig. 11: Morfologa celular y ncleo de las clulas sanguneas (extrado de "Prcticas de citologa").
 PROCEDIMIENTO 1

MATERIAL A UTILIZAR
Guantes
Papel de cocina
Lancetas estriles.
Soporte de tincin
Cinta adhesive
Aplicadores de madera largos.
6 portaobjetos
6 cubreobjetos
Material biolgico: Sangre humana

REACTIVOS
Etanol 90%
Agua destilada.
Metanol
Giemsa

PROCEDIMIENTO
Fijacin
1. Colocar una servilleta de papel sobre la superficie donde se trabaja.
2. Colocar los 6 portaobjetos desengrasados sobre la servilleta.
3. Lavar y limpiar con un antisptico el extremo libre del dedo ndice.
4. Con la lanceta pinchar rpidamente el extremo del dedo.
5. Apretar la punta del dedo hasta lograr ver una gota de sangre.
6. Colocar una gota de sangre en el extremo de uno de los portaobjetos.
7. Seguidamente colocar un portaobjeto como lo indica Fig. 10 y deslizarlo de un extremo al
otro. Slo debe pasarse una vez de forma continua e ininterrumpida.
8. Repetir la operacin con 2 portaobjetos ms, con el fin de seleccionar la mejor tincin.
9. Secar al aire las extensiones lo ms rpido posible. La desecacin se facilita con un
movimiento en forma de abanico, nunca soplando ni usando calor. La rpida desecacin evita
la deformacin de las clulas sanguneas.
10. Depositar el portaobjeto con la extensin de sangre encima del soporte de tinciones.
11. Depositar sobre la extensin unas gotas de metanol y esperar que se evapore.

Tincin
1. Una vez evaporado el metanol, depositar unas gotas de Giemsa (vase anexo I) cubriendo
toda la extensin, evitar desecacin y esperar 5 min.
2. Lavar con A. dest. la preparacin hasta que arrastre todo el colorante.
3. Secar al aire o bien al calor dbil de la flama del mechero.
4. Colocar el cubreobjeto y observar al microscopio iniciando con 40x y despus con 100x.
5. Identificar las clulas sanguneas de acuerdo a la Fig. 11. ESQUEMATIZAR
Eliminacin de residuos biolgicos:

1. Las mesetas de trabajo se desinfectan con etanol al 70 %.

2. Al final de la prctica los portaobjetos con muestra pueden ser sumergidos
en etanol al 70 % por 20 min o en solucin de hipoclorito de sodio; despus
lavarlos con agua y jabn para ser reutilizados o depositarlos donde se
almacena vidrio para reciclar. Los cubreobjetos se desechan al contenedor de
basura punzocortante con peligro biolgico infeccioso.
3. Los guantes se deben colocar en el recipiente donde se almacena material biolgico
infeccioso. El color del recipiente es rojo con el smbolo de riesgo biolgico (Fig. 1).

Resultados
1. Dibujar y nombrar los diferentes tipos de clulas sanguneas con el ncleo
correspondiente.
1. Anlisis de resultados

Monocito

Basfilos

Se utiliz una tincin de rojo de metilo para poder observar en la muestra del frotis sanguineo
los monocitos y los Basfilos.
En est muestra se aplico cristal violeta y se observaron monocitos y basfilos.

}
 PROCEDIMIENTO N 2
TCNICA PARA OBSERVAR LAS CLULAS DEL EPITELIO QUE REVISTE LA CAVIDAD
ORAL:
MATERIALES, INSUMOS Y REACTIVOS POR GRUPO DE TRABAJO
Solucin salina (suero fisiolgico)
Hisopos
Laminas porta objetos
Laminillas cubre objetos
Azul de metileno
Microscopio ptico

Procedimiento
1. Coloque una gota de solucin salina isotnica en un portaobjetos limpio, con un hisopo frote
ligeramente la cara interna de la mejilla y el material que obtenga mzclelo con movimientos
rotatorios junto con la solucin salina isotnica hasta obtener un material con aspecto lechoso
homogneo. Agregue una gota de azul de metileno y cubra la preparacin con un
cubreobjetos.
2. Con el objetivo de menor aumento, localice las clulas (va a encontrar algunas clulas
asociadas, otras dobladas o rotas). Busque una o dos que estn completas. El ncleo es
claramente visible si se ajusta la luz convenientemente, tambin se podr observar el
citoplasma y la dimensin de la MC.

2. Resultados

Ncleo
Citoplasma Membrana celular
Anlisis de resultados

Ncleo Citoplasma Membrana cellular

Se utilizo azul de metileno para observar las clulas de la mucosa bucal.

 Cuestionario

1. Qu otras estructuras internas celulares eucariotas se podran observar al

microscopio de campo claro? Por qu?

El nuclear la pared celular los cloroplastos, Se ven porque estn dentro de la resolucin del
microscopio de campo claro.

2. Cul estructura interna es la ms notable dentro del compartimento de una clula

vegetal?

La estructura ms prominente en muchas clulas vegetales es una vacuola

3. Cul estructura interna es la ms notable dentro de las clulas del epitelio de la

mucosa bucal compartimento de una clula vegetal?

Como se pueden observar en las clulas del epitelio buccal y las clulas del epitelio de una
vegetal la estructura interna ms notable es el citoplasma y el ncleo.
4. Elabore una lista de las estructuras internas que constituyen a las clulas eucariotas
y distinga cada una de ellas de acuerdo al tipo de clula animal, vegetal y hongos.

Clulas animales.

-Membrana de secrecin
-Vacuolas
-Centrosomas
- Orgnulo relacionado con la presencia de cilios y de flagelos.

Clulas vegetales

- Grandes vacuolas
-Cloroplastos
-Unos orgnulos de color verde debido a que contienden clorofila

Hongos

-Flagelos y cilios
- Pared celular
-Membrana plasmtica
-Citoplasma

5. Cuales son las cifras normales de hemoglobina que debe tener el ser humano?

Entre 12 a 16 grs de hemoglobin es lo normal y el hematocrito es aproximadamente el triple,

ya que la hemoglobina va a variar de acuerdo al sexo edad y altitud a la que uno viva.

6. Porqu se considera a los glbulos rojos clulas anucleadas? Explique.

Son celulas anucleadas, es decir, sin ncleo ya que lo eliminan durante su maduracin al
cargarse de hemoglobina.
7. Qu importancia tiene la presencia de diferentes estructuras en el torrente
sanguneo?

La hemoglobina, es la responsable de ligar el oxgeno para transportarlo desde los pulmones a todos
los tejidos del organismo para que las clulas respiren. Tambin se encargan de eliminar el dixido
de carbono que se produce por la actividad celular. Los glbulos rojos se forman en la mdula sea,
que se halla dentro de los huesos del esqueleto, desde donde son liberados al torrente sanguneo.

8. Presencia de eosinofilia en niveles altos.

La eosinofilia es un nivel ms alto de lo normal de eosinfilos, uno de los cinco tipos

principales de glbulos blancos o leucocitos que combaten las enfermedades.

Las concentraciones elevadas de eosinfilos pueden circular en la sangre, pero los niveles
altos de eosinfilos tambin pueden ocurrir localmente en una infeccin o inflamacin
(eosinofilia tisular).

Un conteo de ms de 500 eosinfilos por microlitro de sangre generalmente se considera

eosinofilia en los adultos.