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LIPIDOGRAMA

Como duele no verte por las madrugadas

Y com duele pasar estos dasd e feriados sin ti y peor los domingos

Yo te llevo muy dentro de mi y lalocura q tengo por ti se alberga en mi corazon, paso la vida pekj

Cada momento

UNIDADES CONVENCIONALES
Lpidos totales 450-1.000 mg/100 ml
Lipoprotenas:
-Pre-alfa < 50 mg/100 ml
-Alfa 120-240 mg/100 ml
-Pre-beta 70-210 mg/100 ml
-Beta 335-510 mg/100 ml
-Quilomicrn 0 mg/100 ml
Colesterol total
-deseable < 200 mg/100 ml
-lmite 200-239 mg/100 ml
-elevado > 240 mg/100 ml
Colesterol LDL
-deseable < 130 mg/100 ml
-lmite 130-160 mg/100 ml
-elevado > 160 mg/100 ml
Colesterol HDL -mujer > 55 mg/100 ml
Colesterol HDL -hombre > 45 mg/100 ml
Triglicridos 40-170 mg/100 ml
Aspecto del suero lmpido

HEMOGRAMA
4,5-5 millones/mm3
Glbulos rojos hombre: 4-4,5 millones/mm3
mujer: 13-18g/dl
Hemoglobina hombre: 12-16g/dl
mujer: 42-52%
Hematcrito hombre: 37-48%
mujer: 1-13mm/h
Eritrosedimentacin hombre: 1-20mm/h
mujer: 0,1-1 x mil
Siderocitos 5-20 x mil
Reticulocitos 27-32mg
HCM 33-37%
CHCM 86-98mm3
VCM 5.000-10.000/mm3
Glbulos blancos 23-35%
Linfocitos 4-8%
Monocitos 55-65%
Neutrfilos segmentados 0-5%
Neutrfilos en cayado 0,5-4%
Eosinfilos 0-2%
Basfilos 150.000-400.000/mm3
Plaquetas

BIOQUIMICA DE LA SANGRE
Acetona 0,3-2,0mg/dl
Acido ascrbico 0,4-1,5mg/dl
Acidos biliares 0,2-3mg/dl
Acido flico 3,3-20ng/ml
Acidos grasos totales 190-420mg/dl
libres 8-25mg/dl
Acido rico 3-6,6mg/dl
Albmina 3,5-5g/dl
Alfa-1-antitripsina 85-213mg/dl
Alfa-1-fetoprotena 1-20ng/ml
Alfa-2-macroglobulina 150-400mg/dl
Aminocidos 3-5,5mg/dl
Amonaco 80-100mg/dl
Antiestreptolisina hasta 250U Todd
Bilirrubina total 0,4-1,2mg/dl
directa hasta 0,4mg/dl
indirecta hasta 0,5mg/dl
Calcemia 8,5-10,5mg/dl
Calcio inico 4,5-5,5mg/dl
Carotenoides 100-300mg/dl
CEA < 2,5ng/ml
Ceruloplasmina 20-35mg/dl
Cinc 80-150mg/dl
Citrato 17,5 4mg/l
Cloruros 345-380mg/dl
ClNa 550-650mg/dl
Cobre 88-150mg/dl
Creatinina 0,5-1,3mg/dl
Dixido de carbono (CO2) 24-30mEq/l
Enzimas
-aldolasa 1,3-2,2mU/ml
-amilasa 4-25mU/ml
-creatinfosfocinasa (CPK) 32-162mU/ml
-fosfatasa cida (FAC) < 11mU/ml
-fraccin prosttica < 4mU/ml
-fosfatasa alcalina (FAL) 30-110mU/ml
-gamaglutamiltranspeptidasa
(GGT) 10-41mU/ml
-lacticodeshidrogenasa (LDH) 130-500mU/ml
-transaminasas
-GOT o AST 5-32mU/ml 10-40 u.Karmen
-GPT o ALT 7-33mU/ml 10-40 u.Karmen
-5-nucleotidasa 0,3-3,2U Bodansky
Equilibrio cido/base
-base (totales del suero) 145-160mEq/l
-bicarbonato estndar 21-27mEq/l
-exceso de base (-3) a (+3)mEq/l
-pH 7,35-7,45
-pCO2 35-45mmHg (Torr)
-pO2 75-100mmHg
Ferremia hombre: 80-150 mg/dl
mujer: 60-140 mg/dl
Ferritina 15-300ng/dl
Fibringeno 200-400mg/dl
Fosfolpidos 150-250mg/dl
Fsforo inorgnico 2,5-5mg/dl
Galactosa 0-10mg/dl
Globulinas 2-3g/dl
Glucemia 80-110mg/dl
Haptoglobina 13-163mg/dl
Hemoglobina srica 2-3 mg/dl
Hemoglobina fetal < 2%
Hemoglobina glucosilada 5,5-7,5%
Hierro (capacidad fijacin) 250-410mg/dl
Inmunoglobulinas
-IgA 140-290mg/dl
-IgD 0,3-40mg/dl
-IgE 0,01-0,3mg/dl
-IgM 70-250mg/dl
-IgG 780-1.500mg/dl
Lactato 5-20mg/dl
Magnesio 1,8-3,6mg/dl
Metahemoglobina vestigios
Nitrgeno ureico (BUN) 10-20mg/dl
Nitrgeno no proteico (NPN) 15-35mg/dl
Osmolaridad del plasma 280-300mOsmol/l
Pptido-C 0,3-3,7mg/l
Piruvato 0,7-1,7mg/dl
Potasio 3,5-5mEq/l
Saturacin arterial de oxgeno 96-100%
Sodio 135-142mEq/l
Transferrina 200-400mg/dl
Urea 20-40mg/dl
Yodo proteico (PBI) 4-8mg/dl

COAGULOGRAMA
Tiempo de coagulacin 6-8 min (Lee-White)
Tiempo de sangra 1-4 min (Duke)
3-9,5 min (Ivy)
Tiempo de protrombina 12-14 seg (Quick)
85-110%
Tiempo de trombina Control 5 seg
15-20 seg
Tiempo parcial de tromboplastina (KPTT) 25-38 seg (activado)
Retraccin del cogulo 15-20 min (inicio)
6-24h (finalizacin)
Consumo de protrombina 80% en 1 hora
Resistencia capilar menos de 10 petequias
Antitrombina III 20-24mg/dl
PDF < 10mg/ml
PROTEINOGRAMA
Protenas totales
Albmina 6-8g/dl
Globulinas 3,5-5,5g/dl
Electroforesis 2-3g/dl
Albmina
Globulinas 45-55% del total
-Alfa
-Alfa 1 5-8%
-Beta 2 8-13%
-Gamma 11-17%
15-25%
LIPIDOGRAMA
Lpidos totales 450-1.000mg/dl
Lipoprotenas
-Pre-alfa < 50mg/dl
-Alfa 120-240mg/dl
-Pre-beta 70-210mg/dl
-Beta 335-510mg/dl
-Quilomicrn 0mg/dl
Colesterol total
-deseable < 200mg/dl
-lmite 200-239mg/dl
-elevado 240mg/dl
Colesterol LDL
-deseable < 130mg/dl
-lmite 130-160mg/dl
-elevado > 160mg/dl
Colesterol HDL
-mujer > 55mg/dl
-hombre > 45mg/dl
Triglicridos 40-170mg/dl
Aspecto del suero lmpido

HORMONAS EN SANGRE
15-70pg/ml
ACTH 2 0,9ng/l
ADH 97 93pg/ml
Adrenalina 10,5 5,4ng/dl
Aldosterona basal < 25pg/ml
Angiotensina II 0-28pg/ml
Calcitonina 0,13-2,3mg/dl
Corticosterona maana 7-8h 9-25mg/dl
Cortisol tarde 4-7h 3-12mg/dl
mujer: 1,4-8ng/ml
DHEA varn: 0,5-5,5ng/ml
2-25mg/l
11-desoxicortisol mujer: 0,03-0,17ng/ml
DHT (dihidrotestosterona) varn: 0,4-0,8ng/ml
4-12ng/ml
DOCA < 19mU/m
Eritropoyetina B l mujer: varn: 30 20pg/ml
Estrona 25-120pg/ml
-fase folicular 50-200pg/ml
-fase lutenica mujer: 254 94pg/mlvarn: < 60pg/ml
17-b-estradiol < 100pg/ml
Gastrina 150-250pg/ml
Glucagn
Gonadotrofinas 3-18mU/ml
FSH mujer: varn: 1,5-11mU/ml
-fase folicular 1,6-18mU/ml
-ovulacin 1,5-100mU/ml
-fase lutenica 50-100mU/ml
-posmenopausia 6-26mU/ml
Insulina 253 114pg/ml
Noradrenalina < 25pg/ml
Parathormona 2,10 0,54ng/ml
Pptido-C 10,2 4,8ng/ml
PRL mujer: varn: 0,15-0,40ng/ml
Progesterona 0,2-0,6ng/ml
-fase folicular 0,5-3ng/ml
-ovulacin 6,5-32ng/ml
-fase lutenica 0,15-0,40ng/ml
-posmenopausia 1,1 0,9ng/ml/h
Renina 0,4-2U/ml
Somatomedina C 3,3 2,8ng/ml
STH 67 29pg/ml
Somatostatina 75-195ng/dl
T3 total 25-35%
T3 captacin 10 0,04% del total
T3 capacidad de fijacin 0,3% del total
T3 libre 13-53ng/ml
rT3 4-11mg/dl
T4 1-4ng/dl
T4 libre mujer: 0,3-1,10ng/ml varn: 4-11ng/ml
Testosterona < 50ng/ml
Tiroglobulina 120-280ng/dl
Transcortina 0,5-7,5mU/l
TSH

ORINA
Acetona negativo
Acidez titulable 20-40mEq/24h
Acido d-aminolevulnico < 7mg/24h
Acido rico 0,5-1g/24h
Acido vainilln-mandlico 1,7-7,5mg/24h
Adrenalina 0,8-7,5mg/24h
Albmina < 150mg/24h
Aldosterona 5-20mg/24h
Amilasa 24-76mU/ml
Amonaco 0,5g/24h
Androsterona mujer: 0-3,1mg/24h
varn: 0,9-6,1mg/24h
Bilirrubina negativo
Calcio < 300mg/24h
Cloruros
-Cl 110-250mEq/24h
-ClNa 5-20g/24h
Cortisol 20-100mg/24h
Creatina mujer: < 100mg/24h
varn: < 40mg/24h
Creatinina 1-1,6g/24h
Cuerpos cetnicos negativo
17-cetoesteroides mujer: 5-15mg/24h
varn: 10-20mg/24h
17-OH-corticoides mujer: 2-5mg/24h
varn: 4-8mg/24h
Estrgenos totales mujer: 5-100mg/24h
varn: 4-25mg/h
Etiocolanolona mujer: 1,8-4,5mg/24h
varn: 2,5-6mg/24h
Fsforo 0,6-1,2g/24h
Glucosa negativo
Lisozima 0-2mg/ml
N amnico 64-199mg/24h
N ureico 3-18g/24h
Porfirinas 50-300mg/24h
-Coproporfirina < 230mg/24h
-Uroporfirina < 50mg/24h
-Porfobilingeno < 2mg
Potasio 25-100mEq/24h
Pregnandiol mujer:
-fase folicular 0,5-1,5mg/24h
-ovulacin 0,4-3,8 mg/24h
-fase lutenica 1,5-5,5mg/24h
-posmenopausia 0,2-0,8mg/24h
Sodio 85-260mEq/24h
Urea 20-25g/24h
Urobilingeno <4mg/24h

La electroforesis es una tcnica para la separacin de molculas (protenas o cidos


nucleicos) sobre la base de su tamao molecular y carga elctrica. Los cidos nucleicos
ya disponen de una carga elctrica negativa, que los dirigir al polo positivo, mientras
que las protenas se cargan con sustancias como el SDS (detergente) que incorpora
cargas negativas de una manera dependiente del peso molecular. Para la separacin se
usa un gel de agarosa o poliacrilamida (fibras cruzadas, como una malla). Al poner la
mezcla de molculas y aplicar un campo elctrico, stas se movern y debern ir
pasando por la malla, por la que las pequeas se movern mejor, ms rpidamente. As,
las ms pequeas avanzarn ms y las ms grandes quedarn cerca del lugar de partida.

1.1.3.6. ELECTROFORESIS

La electroforesis es un mtodo de
laboratorio en el que se utiliza una
corriente elctrica controlada con la
finalidad de separar biomoleculas segn
su tamao y carga elctrica a travs de
una matriz gelatinosa.

Fue empleado por primera vez por


en el ao 1937, pero su importancia vino
a incrementarse cuando en los aos
cincuenta E. L.Durrum y Arne W.K. Tiselius , impulsaron la electroforesis de
zona, nombre que se asigno a la separacin de materiales en un campo elctrico
en presencia de algn tipo de soporte; aunque este termino se limito
originalmente al anlisis de coloides y partculas submicroscopicas , se ha
convertido en estos ltimos aos en una metodologa aplicada a sustancias de
bajo peso molecular.
1. Fundamento.
Cuando una mezcla de molculas ionizadas y con carga neta son colocadas
en un campo elctrico, estas experimentan una fuerza de atraccin hacia el polo
que posee carga opuesta, dejando transcurrir cierto tiempo las molculas
cargadas positivamente se desplazaran hacia el ctodo (el polo negativo) y
aquellas cargadas positivamente se desplazaran hacia el nodo (el polo positivo).
El movimiento de las
molculas esta gobernado
tambin por dos fuerzas
adicionales; inicialmente la
friccin con el solvente
dificultar este
movimiento originando una
fuerza que se opone , por otro
lado las molculas tienen que
moverse en forma aleatoria o
movimiento browniano debido a
que poseen energa cintica
propia denominado difusin. La
energa cintica de las molculas aumenta con la temperatura, por ello a mayor
temperatura mayor difusin.
La suma de todas estas fuerzas provoca que las molculas no migren de una
manera homognea, de tal manera que, si las molculas son colocadas en un
cierto lugar de solucin, los iones comenzaran a moverse formando un frente
cuya anchura aumentara con el tiempo.
Para reducir la anchura de este frente podemos reducir el movimiento de
las molculas empleando un medio que oponga mas resistencia a dicho
movimiento. Una forma comn de hacer esto es formar un gel. El gel consiste de
un polmero soluble de muy alto peso molecular que atrapa molculas de agua y
forma un tamiz que dificulta el movimiento de los solutos, consecuentemente,
la migracin electrofortica de las molculas ser mas lenta, pero el
ensanchamiento del frente se vera reducido tambin.

1.2 Mtodos electroforeticos zonales.


Son los ms comunes, dada su alta
aplicabilidad en diferentes campos. Son tiles
para lograr la separacin de mezclas complejas.
Se aplican pequeas cantidades de la disolucin
de protenas a un soporte slido, que se
impregna con una solucin tampn. Los
soportes son en general polmeros y forman un
gel poroso que restringe el movimiento de las
molculas a travs del medio durante la
electroforesis y disminuyen los flujos de
conveccin del solvente.
Como soporte han sido utilizados papel (celulosa), almidn, poliacrilamida,
agarosa y acetato de celulosa, entre otros. Este mtodo tiene gran poder
resolutivo por que se aplica una cantidad pequea de protena a una zona
estrecha, mientras que la longitud del trayecto es mucho mayor que la zona de
aplicacin. El equipamiento requerido es simple, fuente de poder, cubeta
vertical u horizontal donde se
colocan el soporte y dos electrodos
Los ms utilizados son:

1.2.1 Electroforesis en gel de poliacrilamida.


Los geles de poliacrilamida se forman por polimerizacin de la acrilamida por
accin de un agente entrecuzador, es qumicamente inerte, de propiedades
uniformes, capaz de ser preparado de forma rpida y reproducible. Forma,
adems, geles transparentes con estabilidad mecnica, insolubles en agua,
relativamente no inicos y que permiten buena visualizacin de las bandas
durante un tiempo prolongado. Adems tiene la ventaja de que variando la
concentracin de polmeros, se puede modificar de manera controlada en el
tamao del poro, lamentablemente cada vez se emplea menos en diagnostico
debido a su neurotoxocidad.

1.2.2 Electroforesis en geles de gradientes.


El uso de geles de poliacrilamida que tienen un gradiente creciente de
concentracin de archilamida + bisacrilamida, y en consecuencia un gradiente
decreciente en el tamao del poro, pueden tener ventajas sobre los geles de
concentraciones uniformes de acrilamida. En un gel en gradiente la protena
migra hasta alcanzar una zona donde el tamao de poro impida cualquier avance.
Una vez se alcanza el limite del poro no se produce una migracin apreciable
aunque no se detiene completamente. Una de las ventajas de este tipo de geles es
que resuelve mejor las bandas pues las concentra en regiones mas estrechas,
adems de incrementar el rango de pesos moleculares que se pueden resolver en
un mismo gel comparado con los de una concentracin fija. (Diapositiva n 9)

1.2.4 Electroforesis en geles de agarosa.


La agarosa es un polisacrido (originalmente obtenido de algas, como el agar-
agar, pero de composicin homognea), cuyas disoluciones (tpicamente de 0.5 a
2 %) poseen la propiedad de permanecer liquidas por encima de 50 grados C y
formar un gel, semislido al enfriarse. Este gel esta constituido por una matriz o
trama tridimensional de fibras polimricas embebida en gran cantidad de medio
lquido, que retarda el paso de las molculas, se usa usualmente para separar
molculas grandes de alrededor 20.000 nucletidos.
1.2.5 Electroforesis capilar.
La electroforesis capilar se basa en
los mismos principios de las tcnicas
electroforeticas convencionales, pero
utiliza condiciones y tecnologa
distinta que nos permiten obtener
una serie de ventajas al respecto, Esta
separacin de pptidos realizada
sobre un capilar de silica fundida a
potenciales elevados 20 a 30 Kv en un campo de 400 a 500
v/cm refrigerados por aire.
La corriente electroendosmtica (FEO) generada por los
grupos silanol de la superficie interna del capilar da como
resultado una corriente plana del frente del lquido que
contrasta con el frente parablico de la cromatografa lquida
de alta resolucin .
La ventaja de esta tcnica es que el capilar de silica fundida que
generalmente se cubre con una capa de polimina para darle mayor rigidez
y resistencia, tiene una ventaja a travs de ella que permite el pasaje de la
luz UV de tal manera que la visualizacin es on-line.
Con esta tcnica descripta es posible separar cationes, aniones, protenas,
macromolculas y sustancias no cargadas en forma simultnea.

1.2.6 Isoelectroenfoque.
Esta tcnica, habitualmente denominada electroenfoque se basa en el
desplazamiento de las molculas en un gradiente de pH. Las molculas
amfotricas, como los aminocidos, se separan en un medio en el que existe una
diferencia de potencial y un gradiente de pH . La regin del nodo es cida y la
del ctodo es alcalina. Entre ambos se establece un gradiente de pH tal que las
molculas que se han de separar tenga su punto isoelctrico dentro del rango.
Las sustancias que inicialmente se encuentran en regiones de pH inferior a su
punto isoelctrico estarn cargadas positivamente y migraran hacia el ctodo,
mientras aquellas que se encuentran en medios con pH ms bajos que su punto
isoelctrico tendrn carga negativa y migraran hacia el nodo. La migracin les
conducir a una regin dnde el pH coincidir con su punto isolctrico, tendrn
una carga neta nula y se detendrn. De esta forma las molculas amfotricas se
sitan en estrechas bandas donde coincide su punto isoelctrico con el pH.

1.2.7 Electroforesis bidimensional.


La
electroforesis
bidimensional se
basa en separar
las protenas en
una mezcla segn
sus dos
propiedades
moleculares, una
en cada dimensin. El procedimiento ms usado se basa en la separacin en una
primera dimensin mediante isoelectroenfoque y la segunda dimensin segn
peso molecular mediante electroforesis en poliacrilamida.

1.3 Fuentes de error en la electroforesis.


La electroforesis es una
tcnica muy sensible y puede
ser afectada por muchos
errores experimentales, como
la temperatura durante la
polimerizacin y la corrida del
gel, velocidad de la
polimerizacin, niveles de
catalizador, pureza del
reactivo, tiempo de corrida y preparacin de las muestras.

1.4 Bibliografa.
. E.D.P. de Robertis, E.M.F. de Robertis I y II. Biologa Molecular y Celular
. Krause, U., Thomson-carter, F.M. ? Pennington, T.H. 1996. Molecular
Epidemiology of Escherichia coli O157:H7 by Pulsed-Field Gel Electrophoresis
and Comparison with That by Bacteriophage Typing. J.Clin. Microbiol. 34:959-
961
Berkelman T., Stenstedt T. 2-D Electrophoresis using immobilized pH gradients.
Principles & methods. Amersham Pharmacia Biotech Inc. 1998.

Recursos electrnicos:

Protenas plasmticas. Funciones generales de las protenas del plasma.


Regulacin de la presin onctica.
2. El metabolismo de las protenas plasmticas. Sntesis, distribucin y
catabolismo.
3. Mtodos de anlisis cualitativo de protenas plasmticas: Electroforesis
4. Proteinograma normal. Protenas ms representativas.
5. Alteraciones tpicas del proteinograma
6. Anlisis cuantitativo de protenas plasmticas. Medida de la protena
total y protenas especficas.

FUNCIONES
El plasma, fraccin de protenas solubles de la sangre
El suero, fraccin de protenas solubles que aparecen tras la retraccin
del cogulo sanguneo. Carece de fibringeno
Funciones:
Transporte de compuestos endgenos/exgenos poco solubles
en agua.
Regulacin de la presin onctica y el balance intra/extravasal
de agua.
Respuesta inflamatoria y control de la infeccin.

Proteinograma electrofortico

Valor de referencia Albmina 3,50 a 4,80 g/dl


Globulinas 1,86 a 3,58 g/dl
Alfa 1 0,12 a 0,32 g/dl
Alfa 2 0,41 a 0.83 g/dl
Beta 0,58 a 1,03 g/dl
Gamma 0,75 a 1,40 g/dl

Significado clinico Sntesis de las reglas generales para la valoracin del


proteinograma patolgico.

1ro.-La albmina siempre desciende y la intensidad de la


hipoalbuminemia reduce la importancia de la alteracin de la
sntesis de las protenas plasmticas.

2do.- La fraccin que aumenta con mayor frecuencia es la


globulina gamma y la menor, la alfa2globulina.

3ro.- Todas las grandes hiperproteinemias son debidas a los


aumentos de las globulinas del sistema gamma.

4to.- El grado de hiperproteinemia seala la mayor o menor


intensidad cuando sta es activa. Si se acompaa por un defecto
de sntesis o de aportes proteicos, la hipergamaglobulina puede
ser discreta y solo se observar una hipoproteinemia.

5to.- Las globulinas alfa1 y alfa2 aumentan en los procesos


inflamatorios agudos y/o crnicos, o en los que se produce
destruccin tisular (necrosis, infartos, etc.), mientras que las
globulinas del grupo gamma (IgA, IgM, IgG) en los procesos
con reaccin mesenquimal con hiperproduccin de clulas
plasmticas. Los aumentos de las globulinas beta lo hacen en
general en los trastornos del transporte plasmtico de los lpidos.

6to.- Los descensos aislados de las globulinas tienen relativo


valor diagnstico. La valoracin debe hacerse teniendo en
cuenta las variaciones en conjunto. Solamente las disminuciones
de la globulina gamma (hipogammaglobulinemia) tienen valor
diagnstico propio.
Utilidad clnica Variacin de las fracciones Procesos
relacionados

Hiper-B Plasmocitoma
proteinemia Albmina baja y gran au-
Macroglobulinemia
mento de las globulinas
----------------------------------------------
Gamma
Plasmocitoma/Macro-
glubulinemia/Linfogra-

nuloma/Cirrocis/Endo-
carditis lenta.

___________________________________________________
________

Albmina baja y au- Inflamaciones


mento de las globulinas Infecciones
agudas y
alfa1y alfa 2 y ligero de subagudas
de la gamma Neoplasias

--------------------------------------------------------------
Albmina baja y aumen- Hepatitis
Variacin to dominante de la globu- Cirrosis
heptica
Moderada lina y ligero de B Infecciones
crnicas

---------------------------------------------------------------
Albmina baja y leves Neoplasias
Aumento de las globuli-
nas alfa1-alfa2

___________________________________________________
_______

Albmina muy baja, au- Nefrosis


mento de las globulinas
alfa2 y B
-----------------------------------------------------
---------
Hipo Albmina muy baja y Neoplasias
digestivas
proteinemia aumentos leves de las glo- Esteatorreas
bulinas alfa1, B y gamma Enfermedades
caren-
ciales.
-----------------------------------------------------
---------
Albminas muy baja y au- Cirrosis
heptica de
mento de la globulina larga duracin
gamma Infecciones
crnicas
consuntivas-

___________________________________________________
________

Biuret
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La reaccin o prueba de biuret es un mtodo que detecta la presencia de compuestos con


dos o ms enlaces peptdicos y, por tanto, sirve para todas las protenas y pptidos
cortos.

La reaccin xantroproteica es un mtodo que se puede utilizar para determinar la


cantidad de protena soluble en una solucin. El reactivo del biuret (sulfato de cobre en
una base fuerte) reacciona con los enlaces del pptido y cambia el color cuando entra en
contacto con otra sustancia. El espectrofotmetro se puede entonces utilizar para medir
la intensidad del color que se produjo. Mientras ms cantidad de protena est presente
en la solucin, ms oscuro es el color.

Este test especfico es para reconocer enlaces peptdicos, por lo tanto requiere de la
presencia de al menos en tetrapptido para que de positivo. Los reactivos utilizados son
NaOH y SO4Cu.5H2O. Opera a travs del ion Cu2+ el que en reaccin alcalina
interacciona con los iones de N-3 de los grupos amino formando un complejo color
violeta. Cada tomo de Cu2+ reacciona con dos tomos de N y establece una resonancia
de electrones con otros dos N formando un complejo color violeta y es as como
podemos catabolizar una reaccin anastrfica de la mayor enzima llamada octatriona.
Reaccion de Biuret
La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ya que se
debe a la presencia del enlace peptdico (- CO- NH -)que se destruye al
liberarse los aminocidos.
Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma
una sustancia compleja denominada biuret, de frmula:

que en contacto con una solucin de sulfato cprico diluda, da una


coloracin violeta caracterstica.

Tecnica
1. Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de albmina de huevo.
2. Aadir 2cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%.
3. A continuacin 4 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al
1%.
4. Debe aparecer una coloracin violeta-roscea caracterstica.

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