Bioclin

FOSFATASE CIDA PROSTTICA

K018
INSTRUES DE USO

FINALIDADE podem alterar de forma significativa os resultados;

Mtodo para a determinao da Fosfatase cida Prosttica. 5 - O nvel de gua no banho-maria deve ser superior ao nvel
Teste colorimtrico, somente para uso diagnstico in vitro. dos reagentes nos tubos de ensaio;
6 - Hemlise, mesmo discreta, interfere na dosagem;
PRINCPIO DE AO 7 - O descarte do material utilizado dever ser feito obede-
Metodologia: Roy Modificado. cendo-se os critrios de biossegurana de acordo com
O sal de Magnsio da timolftalena monofosfato a legislao vigente.
hidrolisado especificamente, em meio cido, pela frao
Prosttica da Fosfatase cida. A atividade enzimtica AMOSTRAS
proporcional quantidade de timolftalena formada, que Soro ou plasma (heparina) obtido livre de hemlise. A
medida colorimetricamente. Fosfatase cida Prosttica muito sensvel s variaes
A determinao da Fosfatase cida de origem prosttica de pH e temperatura. A amostra deve ser centrifugada no
representa recurso laboratorial valioso no diagnstico e mximo 30 minutos aps a colheita e acidificada com 0,01 mL
controle teraputico do cncer de prstata. de cido actico 20 % para cada 1,0 mL da amostra. Dessa
forma, a amostra estvel 2 dias entre 2 e 8 oC.
REAGENTES
Nmero 1 - Substrato de timolftalena - conservar entre DESCRIO DO PROCESSO
15 e 30C. Aps o manuseio conservar entre 2 e 8C. Con- TCNICA
tm: Timolftalena monofosfato 15 mmol/L. Marcar 3 tubos de ensaio com as letras B (Branco), P
Nmero 2 - Tampo - conservar entre 15 e 30C. Aps o (Padro), A (Amostra) e proceder como a seguir:
uso, fechar o frasco para evitar contaminao com CO2 do
ar. Contm: Citrato de sdio 100 mmol/L, pH 6,0. Reagentes Branco Padro Amostra
Nmero 3 - Reagente de Cor - conservar entre 15 e 30C.
Contm: Carbonato 150 mmol/L e Hidrxido de sdio Reagente N 1 50 L 50 L
100mmol/L. Reagente N 2 500 L 500 L
Nmero 4 - Padro 3 U/L - Conservar entre 15 e 30 C. gua destilada 500 L
Aps o manuseio conservar entre 2 e 8 C.Matenha o Reagente N 4 100 L
frasco bem vedado para evitar a evaporao do solvente. __________________________________________________________________________________________________________________
Contm: timolftalena 0,01 mmol/L. Incubar 37 oC por 2 minutos.
__________________________________________________________________________________________________________________
APRESENTAO Amostra 100 L
Reagentes Volume __________________________________________________________________________________________________________________
o
Reagente No 1 ................... 2 mL Homogeneizar e incubar 37 C por exatamente 30 minu-
Reagente No 2 ................. 20 mL tos.
Reagente No 3 ................. 80 mL __________________________________________________________________________________________________________________
Reagente No 4 ................... 2 mL Reagente N 3 2,0 mL 2,0 mL 2,0 mL
Amostra 100 L
EQUIPAMENTOS E INSUMOS OPERACIONAIS Homogeneizar bem e determinar a absorbncia da Amos-
Espectrofotmetro ou colormetro, banho-maria 37 oC, re- tra, do Branco e do Padro em 590 nm (580 - 590), acertan-
lgio ou cronmetro, pipetas, tubos de ensaio. Encontram- do o zero com gua destilada ou deionizada. A cor est-
se no mercado especializado de artigos para Laboratrios vel por 2 horas.
de Anlises Clnicas.
DESCRIO DOS CLCULOS
CONDIES DE ARMAZENAMENTO E TRANSPORTE
A temperatura de armazenamento e transporte dever ser Fosfatase cida = Abs. da amostra - Abs. do branco x3
de 15 a 30C. Manter ao abrigo da luz e evitar umidade. Prosttica (U/L) Absorbncia do padro

CUIDADOS ESPECIAIS
1 - Somente para uso diagnstico in vitro;
2 - Seguir com rigor a metodologia proposta para obteno
de resultados exatos;
3 - A gua utilizada na limpeza do material deve ser recen-
te e isenta de agentes contaminantes;
4 - Colunas deionizadoras saturadas liberam gua alcali-
na, ons diversos e agentes oxidantes e redutores, que
50
Como a reao de cor segue a lei de Lambert Beer, pode-
se usar o Fator de calibrao:
Fator de calibrao = Concentrao do padro (3 U/L)
Abs. do padro
U/L = (Absorb. da amostra - Absorb. do branco) x Fator
Uma Unidade (U/L) corresponde quantidade de enzima
capaz de hidrolisar 1 mol do substrato por minuto, por litro
de soro nas condies do teste.
Os resultados sero expressos em U/L.
A reao linear at 120 U/L, com cintica de ordem zero.
Ocorrendo absorbncia superior a 0,8 diluir a amostra e o
branco com o Reagente de Cor, repetir a leitura e multiplicar
o resultado pelo fator de diluio. Se o valor obtido aps
esta diluio for igual ou superior 120 U/L, realizar nova
determinao, reduzindo o tempo de incubao aps a adi-
o do soro. Multiplicar o resultado por 30 e dividir pelo tem-
po de incubao utilizado em minutos.
LIMITAES DO PROCESSO
No utilizar amostra hemolisada ou lipmica, para evitar
resultado falsamente elevado.
CONTROLE INTERNO DE QUALIDADE
Deve ser prtica rotineira do Laboratrio Clnico o uso de
soro controle para checar a preciso e exatido das dosa-
gens. Deve ser de 5% o erro mximo permitido em relao
aos valores pr-estabelecidos para os controles.
VALORES DE REFERNCIA
Os valores de referncia em U/L para o presente mtodo fo-
ram obtidos atravs da determinao de Fosfatase cida
Prosttica em populaes sadias.
0,15 a 0,56 U/L
Estes valores devem ser usados como orientao, sendo
que cada laboratrio dever criar sua faixa de valores de
referncia, de acordo com a populao atendida.
DESEMPENHO DO PRODUTO
CONTROLE DE QUALIDADE
NMERO DE TESTES
20 Testes/100 L de amostra/2,5mL de Reagente
40 Testes/50 L de amostra/1,25mL de Reagente
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1 - COLEMAN, C. M.; STROJE, R. C.: Clin. Chem. Acta 13:
401, 1966.
2 - ROY, A. V. ; BROWER, M. E.; HAYDEN, J. E.: Clin.
Chem. 17:1093, 1971.
GARANTIA DE QUALIDADE
Antes de serem liberados para o consumo, todos os
reagentes Bioclin so testados pelo Departamento de Con-
trole de Qualidade. A qualidade dos reagentes assegurada
at a data de validade mencionada na embalagem de apre-
sentao, desde que armazenados e transportados nas con-
dies adequadas.
DADOS DO FABRICANTE
QUIBASA QUMICA BSICA Ltda
Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca
CEP 31565-130 - Belo Horizonte - MG - Brasil
Tel.: ( 31 ) 3439.5454 - Fax ( 31 ) 3439.5455
e-mail bioclin@bioclin.com.br
CNPJ: 19.400.787/0001-07 - Indstria Brasileira
ATENDIMENTO AO CONSUMIDOR
Servio de Assessoria ao Cliente Tel.: 0800 0315454.
e-mail: sac@bioclin.com.br
Nmero de registro do kit de Fosfatase cida Prosttica na
ANVISA: 10269360113.
Reviso: Novembro/10

Dados Estatsticos
Referem-se a 20 ( vinte ) determinaes de Fosfatase cida
Prosttica em dias diferentes, utilizando 2 (dois) soros con-
trole:

N......... Mdia .......... DP ........... CV

Soro Controle 1 ...... 20 ........ .45,98 ........3,68 ...... .8,00%
Soro Controle 2. ..... 20 .......... 2,4 ........... 0,07 ....... 2,80%

ESPECIFICIDADE DIAGNSTICA
A frao prosttica da Fosfatase cida pode estar aumen-
tada na existncia de doenas malignas da prstata, parti-
cularmente se o cncer ultrapassar a cpsula da glndula
ou tenha desenvolvido metstase.
A manipulao da prstata pelo toque retal provoca uma
elevao transitria da Fosfatase cida Prosttica.
Em outras condies clnicas os nveis da Fosfatase cida
podem elevar-se como na doena de Gaucher (alterao
do armazenamento lisossmico), doena de Paget,
neoplasia com comprometimento sseo, doena renal, pro-
cessos hepatobiliares, doenas do sistema retculo
endotelial.