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Introduccin ....................................................................................................................................................... 2
Metodologa ....................................................................................................................................................... 2
Resultados .......................................................................................................................................................... 4
Discusin ............................................................................................................................................................ 4
Conclusin .......................................................................................................................................................... 5
Bibliografa ......................................................................................................................................................... 6
Anexo ................................................................................................................................................................. 7
Tcnica ........................................................................................................................................................... 7
Clculos .......................................................................................................................................................... 7
DETERMINACIN DE FOSFATOS EN BEBIDAS COLA 2
Agustn Sellanes
18/11/2010
OBJETIVO
INTRODUCCIN
El 88% del fsforo endgeno se encuentra en los huesos como fosfato clcico en forma de apatito
[ ( ) ] . El resto participa en el metabolismo intermediario de los carbohidratos y est contenido
en sustancias fisiolgicamente importantes como fosfolpidos, cidos nucleicos y ATP. En la sangre, el fsforo
est presente como fosfato inorgnico y cido fosfrico orgnico. El fsforo orgnico extracelular que
constituye slo una parte pequea, se halla casi exclusivamente en forma de fosfolpidos.
El fsforo y el calcio se encuentran en la sangre en una relacin de 6 a 10. La concentracin normal de fsforo
en la sangre es de 35 a 55 mg/L. La ingesta insuficiente de fsforo, causa hipofosfatemia que genera una
desmineralizacin sea que termina en osteoporosis. Por otra parte, el aumento del nivel fosfrico provoca
una disminucin del nivel clcico, mecanismo que se ve influido por una interaccin entre parathormona y
vitamina D. Al aumento del nivel de fosfato inorgnico en sangre se denomina hiperfosfatemia y entre otras
causas, puede deberse a una ingesta excesiva de este mineral.
Los valores diarios recomendados varan segn la edad, siendo los valores recomendados para adultos de 700
mg diarios aunque el lmite mximo tolerable (UL) es de 4 g. Segn la Coca-Cola Company, la concentracin de
fsforo en Coca-Cola es 17 mg/100g; por lo que la cantidad de fsforo ingerido en este tipo de bebidas es slo
un porcentaje de la dieta diaria. Sin embargo, las personas que sufren determinados tipos de afecciones como
Insuficiencia Renal Crnica, no pueden eliminar el exceso de fsforo y deben evitar los alimentos ricos en este
mineral. Por otra parte, existen estudios que demuestran que el consumo excesivo de fsforo sumado a un
consumo bajo de calcio, podra ser perjudicial para la formacin sea en personas saludables (1). Esto se suma
a que la ingesta de fsforo suele ser 2 o 3 veces superior a la dosis diaria recomendada y que es frecuente no
cubrir en la dieta la cantidad de calcio recomendada.
Hay fuerte evidencia acerca de la influencia de las bebidas cola con la capacidad de erosionar el esmalte dental
(2). Los fosfatos adicionados a estas bebidas actan como buffer, amortiguando el pH cuando se encuentran
en la disolucin en concentraciones lo suficientemente altas (mayores a 5mM); disminuyendo as la cantidad
de esmalte que se disuelve. Sin embargo, el pH de las bebidas gaseosas no se mantiene cerca de la neutralidad
ya que esto alterara el sabor caracterstico y la percepcin del gusto de las mismas. Para que el efecto
amortiguador sea significativo, el pH debe ser mayor a 3,5.
METODOLOGA
En esta investigacin emplearemos el mtodo del azul de molibdeno, ya que por ser un mtodo
espectrofotomtrico, nos da la sensibilidad adecuada para trabajar con las bajas concentraciones de fosfatos
presentes en las bebidas cola. Este mtodo se emplea para detectar trazas debido a su gran sensibilidad (10
veces ms que el mtodo del vandato-molibdato). Adems, preferimos esta tcnica porque da un pico en 850
nm, ya que los espectrofotmetros de que disponemos en el laboratorio, slo registran absorbancias en el
rango visible. Se trata de un mtodo muy especfico, ya que slo detecta la presencia de fosfatos, silicatos o
arsnico y estos dos ltimos no se encuentran en las muestras que queremos analizar.
El mtodo consiste en la medicin de la absorbancia del azul de molibdeno a una longitud de onda de 850 nm
y usar la ley de Beer-Lambert-Bouguer para determinar la concentracin del mismo en la muestra, previa
realizacin de una curva de titulacin midiendo las absorbancias en soluciones de de concentracin
exactamente conocida.
Estructura de Keggin con el tomo de fsforo
central en naranja, los tomos de molibdeno 4
en violeta y los oxgenos en rojo.
Este compuesto reducido tiene un intenso color azul, por lo que puede ser detectado an en concentraciones
traza.
RESULTADOS
Bebida Concentracin
Mo ( )
Coca-Cola ( )
DISCUSIN
Sobre una dieta de 700 mg diarios, un litro de Mo aporta aproximadamente el 29% de la cantidad diaria
recomendada y la Coca-Cola un 21%, lo que constituyen porcentajes significativos en personas que consumen
este tipo de bebidas con frecuencia.
CONCLUSIN
Por todo lo que hemos dicho, las bebidas cola analizadas no presentan cantidades significativamente altas de
fsforo comparadas con otros alimentos, aunque podran llegar a aportar un porcentaje significativo de este
mineral en la dieta de las personas que consumen este tipo de bebidas.
BIBLIOGRAFA 6
1. Kemi, Virpi. Effects of dietary phosphorus and calcium-to-phosphorus ratio on calcium and bone
metabolism in healthy 20- to 43-year-old Finnish women. Helsinki : Helsinki University Printing
House, 2010.
2. Mirelly, Domnica y Alburqueque, Franco. Prdida de calcio en esmalte de denticin mixta por
exposicin in vitro a bebida carbonatada cida. Facultad de Odontologa, Universidad Nacional
Mayor de San Marcos. Lima : s.n., 2008.
5. Lamberg-Allardt, Christel, Karp, Heini y Kemi, Virpi. Phosphorus and Bone. [aut. libro] Peter
Burckhardt, Bess Dawson-Hughes y Connie Weaver. Nutritional Influences on Bone Health. London :
Springer, 2010, 12.
6. BIHW. Beverages & Bone Health: Harmful, helpful or no effect? A conversation with Dr. P. Heaney,
Bone Health Expert. The Beverage Institute For Health & Wellness. [En lnea] [Citado el: 10 de
Noviembre de 2010.]
http://www.beverageinstitute.org/healthcare_professionals/bone_health_qa.shtml.
7. The Coca-Cola Company. The Coca-Cola Company. [En lnea] [Citado el: 10 de Noviembre de
2010.] http://www.thecoca-
colacompany.com/contactus/myths_rumors/packaging_kidney_stones.html.
9. Roche Diagnostics GmbH. Fsforo UV Cdigo 1.489.348. Mannheim, Alemania : s.n. Roche
Diagnostics.
10. The Cleveland Clinic Foundation. Chemocare.com. [En lnea] 2005. [Citado el: 10 de Noviembre
de 2010.] http://www.chemocare.com/es/managing_es/hiperfosfatemia_e_hipofosfatemia_ES.asp.
11. Gua de mtodos de anlisis por fotocolorimetra. Instrumental Analtico, Facultad de Ciencias de
la Universidad Central de Venezuela. Caracas : s.n., 2006.
12. Walton, Harold F, y otros, y otros. Anlisis qumico e instrumental moderno. Espaa : Revert,
1977.
ANEXO
7
TCNICA
SOLUCIONES
Solucin de trabajo
Se diluye la solucin anterior a una concentracin final de 2 mg/L. Para ello, se realiza una
toma de 2 mL de la misma y se lleva a un volumen final de 50 mL.
Solucin reductora
A. Se disuelve 0,7801 g de molibdato de amonio tetrahidratado, ( ) en
agua desionizada.
B. Se disuelve 1,0562 g de cido ascrbico en agua desionizada.
C. Se diluye 11 mL de cido sulfrico concentrado en agua desionizada.
PROTOCOLO EXPERIMENTAL
Curva de calibracin:
Preparacin de la muestra:
Se desgasifica. Se realizan diluciones de la muestra: 1:25; 1:50 y 1:100. Se toma 1 mL de cada una de ellas, se
aade 4 mL de solucin reductora y se afora a 10 mL.
En todos los casos, se lleva a un bao termostatizado a aproximadamente 50 C por 45 minutos y se mide la
absorbancia a 830 nm.
CLCULOS
Para la preparacin de la solucin patrn de la tcnica establece masar 0,2197 g de patrn primario
(136,08 g/mol) y llevar a un volumen final de 1L para obtener una solucin de formalidad
lo que equivale a 0,05000 g/L de P (30,97 g/mol). Luego, se toman de 2 mL de la misma y se lleva a un
volumen final de 50 mL. Es decir, hacemos una dilucin segn un factor 1/25 para obtener una solucin de
trabajo de concentracin de fsforo de o 2 mg/L. Con esta solucin patrn se preparan las
muestras para la curva de titulacin segn la siguiente tabla: 8
La solucin reductora y el agua absorben an sin que se forme el complejo con el fsforo. Para poder medir la
absorbancia que se debe a la formacin del complejo reducido de fsforo, debemos restar a cada muestra la
absorbancia de la solucin reductora y del agua. Por este motivo, es que se prepara la solucin blanco como se
indica en la tabla. Se considera la absorbancia del blanco igual a cero y esto afecta a todas las medidas de
absorbancias que aparecern en estos clculos.
Las absorbancias medidas para las muestras estndar fueron las siguientes:
Graficamos estos datos para obtener nuestra curva de titulacin usando el OriginPro 8:
9
Equation y = a + b*x
Adj. R-Square 0,99571
Value Standard Error
Absorbancia Intercept -0,041 0,01748
Absorbancia Slope 0,843 0,03191
0,6
Absorbancia
0,3
0,0
0,3 0,6 0,9
Concentracion P (mg/L)
Usamos el mtodo de mnimos cuadrados para obtener el mejor ajuste lineal de los datos, aunque
descartamos el ltimo valor porque se aparta de la linealidad (recordemos que la Ley de Beer es una ley lmite
y se cumple slo en concentraciones bajas). El coeficiente de correlacin r2=0,99571 es alto lo que implica una
relacin lineal fuerte entre los valores de concentracin de fsforo y las absorbancias medidas, segn la Ley de
Beer:
[ ]
En este trabajo, las concentraciones no se expresaran en molaridades sino en mg/L. A continuacin aparecen
los parmetros de linealizacin con sus errores respectivos:
Posteriormente, preparamos las muestras de bebidas cola. Se desgasifican y se diluyen 25, 50 y 100 veces. Se
toma 1 mL de cada una de ellas, se aade 4 mL de solucin reductora y se afora a 10 mL. O sea que los factores
de dilucin reales para estas muestras sern respectivamente: 1/250, 1/500 y 1/1000.
Los siguientes fueron los datos encontrados con sus clculos respectivos:
Bebida Factor de Absorbancia Concentracin de Error mg/L P Error
dilucin fsforo 10
Coca-Cola 0,001 0,122 0,193357058 0,0220212 193,35706 22,021272
0,002 0,206 0,293001186 0,0235452 146,50059 11,772594
0,004 0,198 0,283511269 0,0233781 70,877817 5,8445314
Mo 0,001 0,111 0,180308422 0,0218621 180,30842 21,862071
0,002 0,303 0,408066429 0,0258836 204,03322 12,941804
0,004 0,645 0,81376038 0,0371520 203,45000 9,2877731
El mtodo de mnimos cuadrados nos permiti ajustar los datos a una recta de la forma:
[ ]
, y despejando [ ] obtenemos:
[ ]
Esta fue la ecuacin usada para obtener las concentraciones de fsforo en las muestras directamente
a partir de las absorbancias medidas.
Para obtener una estimacin del error cometido en la medicin, usamos la propagacin de errores de
orden dos a partir de la ecuacin anterior:
[ ] [ ] [ ]
[ ] ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( )
( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( )
[ ] [ ]
y
En las medidas de Coca-Cola, el valor que corresponde a la dilucin de 1/100 tiene una absorbancia que cae
muy cerca del extremo inferior de la curva de calibracin, por lo cual dicho valor puede estar ms afectado de
error, y el valor de la dilucin 1/25 tiene una absorbancia muy cercana a la de la dilucin 1/50. Por lo que
descartamos ambos valores y nos quedamos con la dilucin 1/50.
En la bebida Mo, descartamos el valor de la dilucin 1/100 por el mismo motivo que el de la Coca-Cola y como
los otros dos valores son coherentes, los promediamos. La siguiente tabla muestra los datos calculados: 11
( ) | | | | ( )
[ ]
[ ]