Revista 2016 V20 n3

Ao 2016 Volumen 20 Nmero 3 1
ISSN 0188-4786
MESA DIRECTIVA COMIT EDITORIAL
Dr. Carlos Regalado Gonzlez Dr. Sergio Snchez Esquivel

Presidente Editor en Jefe
Instituto de Investigaciones Biomdicas,
Dr. Adelfo Escalante Lozada UNAM
Vice-Presidente
Dr. Luis Bernardo Flores Cotera
Dr. Nicols Oscar Soto Cruz CINVESTAV
Secretario
Dr. Fernando Luis Garca Carreo
Dra. Mara Teresa Torres Mancera CIBNOR
Tesorero
Dr. Mariano Gutirrez Rojas
Dra. Sylvie Leborgne UAM-Iztapalapa
Subsecretario
Dra. Romina Rodrguez Sanoja
Dr. Aldo Amaro Reyes Instituto de Investigaciones Biomdicas,
Vocal Profesional UNAM
Ing. Diana Victoria Melo Sabogal Dra. Sara Sols Pereira
Vocal Estudiante Instituto Tecnolgico de Mrida
Dra. Elizabeth Langley McCarron

Instituto Nacional de Cancerologa
TRABAJO DE EDICIN
M. C. Olga Berenice lvarez Prez Dr. Vctor Manuel Loyola

Centro de Investigacin Cientfica de
Yucatn
DISEO GRAFICO E IMAGEN
Lic. Nayeli Quinto (SODIO NET)
ISSN 0188-4786, revista cuatrimestral publicada por la Sociedad Mexicana de Biotecnologa y

Bioingeniera, A.C. incluida en PERIDICA, ndice de Revista Latinoamericanas en Ciencias
(CICH-UNAM). Certificado de Licitud de Ttulo en trmite y Certificado de Licitud de Contenido en
trmite. Reserva de derechos de Ttulo04-1999-082516265000-101. Los Conceptos que en ella
aparecen son responsabilidad exclusiva de los autores. Se prohbe la reproduccin total o parcial
de su contenido sin previa autorizacin por escrito del Comit editorial. Toda correspondencia
deber enviarse a Km. 23.5 Carretera Federal Mxico-Cuernavaca, Av. Cipreses s/n, Col. San
Andrs Totoltepec, C.P. 14400, Del. Tlalpan, Mxico, D.F. o a la siguiente direccin electrnica
smbb1982@gmail.com
2
BioTecnologa, Ao 2016, Vol. 20 No.3
EDITORIAL
Una Reflexin Sobre el Uso del Factor de Impacto de las
Publicaciones Cientficas como Criterio para la Evaluacin de la
Productividad del Personal Acadmico Adscrito a Instituciones de
Educacin Superior
Imelda Lpez Villaseor y Sergio Snchez Esquivel 4
INSTRUCCIONES PARA LOS AUTORES 7
ARTCULOS
Clarificacin de una Bebida Alcohlica a Base de Merey

(Anacardium occidental L.) a Partir de un Concentrado Enzimtico
Carlos Alvarado Almarza, Celeste Fernndez Gonzlez, Alexandra Jimnez Lucena y Johana
Paucar Baque 12
Cmo abordar el estudio de una protena hipottica? el caso de

la protena SCO2127 de Streptomyces coelicolor
Vctor Tierrafra y Sergio Snchez 27
3
EDITORIAL
Una Reflexin Sobre el Uso del Factor de Impacto de las

Publicaciones Cientficas como Criterio para la Evaluacin de la
Productividad del Personal Acadmico Adscrito a Instituciones de
Educacin Superior
La actividad cientfica requiere ser evaluada. Para quienes nos dedicamos a esta actividad, el
resultado de nuestra evaluacin repercute en diversos aspectos como son contrataciones,
promociones, asignacin de recursos, etc. Existen diversos parmetros que se utilizan en la
evaluacin de un cientfico, pero una de las mtricas que se ha utilizado con mayor frecuencia es
el Factor de Impacto (FI) de las revistas en las que publicamos los resultados de nuestro trabajo
acadmico.
El FI se introdujo en 1963 como un indicador para apoyar a los bibliotecarios en la toma de
decisiones sobre las revistas impresas que las Universidades deban adquirir. Este nmero indica
el promedio de las citas que recibieron todos los artculos publicados durante un cierto perodo de
tiempo en una determinada revista; no se propuso como un mecanismo de evaluacin individual,
sino como una medida del impacto (e indirectamente de la calidad) de una revista. En los ltimos
aos se ha expresado una gran preocupacin a nivel mundial por la sobrevaloracin del FI y el mal
uso que se le ha dado a este factor en los procesos de evaluacin individual.
El FI es un factor emitido anualmente por la empresa Thomson Reuters, y representa el
nmero promedio de citas que recibieron los artculos de una revista a lo largo de un perodo de
tiempo
Como resultado de lo anterior, en diciembre de 2012 un grupo formado por editores de las
principales revistas cientficas y de organizaciones acadmicas redactaron un documento con una
serie de recomendaciones conocido como: San Francisco Declaration on Research
Assessment (DORA). Este documento es un reflejo de la preocupacin por los mtodos de
evaluacin que se aplican hoy en da, y de la necesidad de mejorarlos y actualizarlos. En l se
emite una recomendacin general y 17 recomendaciones especficas dirigidas a los institutos de
investigacin, a los investigadores, a las editoriales, a las agencias que generan los indicadores, y
a las instituciones que otorgan recursos econmicos para realizar investigacin. El documento
original fue firmado por ms de 150 cientficos destacados y respaldado por 75 organizaciones
cientficas. Vale la pena citar textualmente la recomendacin general:
General Recommendation:
Do not use journal-based metrics, such as Journal Impact Factors, as surrogate
measures of the quality of individual research articles, to asses an individual
scientists contributions, or in hiring, promotion, or funding decisions.
4
EDITORIAL
Esta iniciativa fue asumida por la American Society for Microbiology con el fin de eliminar la
difusin del valor del FI de 14 publicaciones de alto nivel que son auspiciadas por la misma
(Journal of Microbiology, Clinical and Vaccine Immunology, Applied and Environmental
Microbiology, Molecular and Cellular Biology, entre otras), por lo que a partir del 17 de Julio de
2016 en las pginas electrnicas de estas revistas no aparece el FI asignado por Thomas Reuters.
Al pie de sta pgina, se incluyen las referencias bibliogrficas sobre algunos editoriales en torno a
este tema, que han aparecido en Science, Nature, PNAS y EMBO J1.
De ste modo, se ha enfatizado a nivel mundial la importancia de dejar a un lado el FI de una
revista como la medida directa para evaluar la calidad del trabajo de investigacin individual. Se ha
mencionado que un parmetro fundamental que debera considerarse es la evaluacin por pares,
adems de tomar en cuenta otros aspectos relacionados con la investigacin como es el impacto
en la sociedad en que se realiza. Se ha sealado tambin la importancia que tienen los medios de
difusin electrnicos actuales para ofrecer de manera inmediata e irrestricta la informacin a nivel
mundial a travs de los recursos de acceso abierto a la informacin (Open Access). Por otra parte,
son bien conocidos los nuevos parmetros que utilizan algunas revistas acadmicas (que se
revisan y actualizan de manera casi inmediata) como son Article metrics, online attention
(Tweets, Facebook pages, mentions in google+, posts, picked up by x, news outlets, blogged), etc.,
que muestran en tiempo real la difusin que tiene una publicacin.
Lo anterior refleja los cambios tan importantes que se han dado de 1963 a la fecha. Ser
ste el momento para reflexionar sobre los parmetros que se utilizan en los procesos de
evaluacin de los resultados del trabajo acadmico? Ser ste el momento para dejar de utilizar
el FI como el nico parmetro principal en la validacin de dicho trabajo? Quiz es tiempo de mirar
hacia afuera, escuchar otras voces y otras propuestas, reflexionar y permitirnos modificar y
actualizar lo que consideremos que se debe adecuar.
Se reconoce que no ser una tarea fcil, todo lo contrario, es un gran reto. Pero estamos
seguros que como Instituciones de Educacin Superior en el pas, tenemos la fortaleza y los
elementos para abordar este proceso de reflexin. Consideramos que diversas instituciones
debieran tomar la batuta y proponer a la brevedad variantes a la forma de valoracin tradicional de
nuestras publicaciones.
Bajo el marco anterior, se propone que:
1 Impact, not impact factor. Inder M. Verma. Editor-in-Chief, PNAS. 2015. vol 112, 7875-7876.
Impact Factor Distortions. Bruce Alberts. Editor-in-Chief, Science. 2013. Vol 340, 787.
Dora the Brave. Brend Pulverer. Chief Editor, The EMBO Journal. 2015. DOI 10.15252/embj.201570010
The Leiden Manifesto for research metrics. Diana Hicks et al. Nature 2015. vol 520, 429-31.
5
EDITORIAL
-En la evaluacin de los trabajos de investigacin se pondere la calidad de las publicaciones y

no solo la cantidad de las mismas, independientemente de la orientacin del trabajo publicado
(bsico o aplicado).
-Que se tome en cuenta el grado de participacin del investigador, la originalidad y la calidad
de la contribucin.
-Que los trabajos a considerar, hayan sido evaluados por pares y publicados en revistas de
difusin nacional e internacional, incluidas en cualquiera de los ndices que corresponden a las
diferentes reas (CAS -American Chemical Society, Index Copernicus International, Science
Central, iSeek, Jour-informatics, Journal seeker, indice de revistas mexicanas del
CONACYT) y no solo en Thompson Routers.
-Que en los procesos de evaluacin se acepten aquellos trabajos que sean publicados en
revistas de acceso libre, siempre y cuando sean arbitradas y cuenten con un comit editorial de
reconocido prestigio.
-Que tambin se tomen en cuenta como productos primarios de investigacin las revisiones y
captulos de libro que sean evaluados por pares, ya que estos representan un claro esfuerzo para
presentar la visin del estado del arte de un tema en particular.
-Que se consideren tambin como productos primarios de investigacin las patentes
nacionales e internacionales, publicaciones que son el resultado del esfuerzo encaminado a
transferir a la sociedad los productos o conocimientos generados.
Es necesario recalcar que estas propuestas se refieren solamente a la publicacin del trabajo
de investigacin y que de ninguna forma sustituyen los compromisos y obligaciones del
personal acadmico en la docencia y formacin de recursos humanos, propios de una
Institucin de Educacin Superior.
Dra. Imelda Lpez Villaseor y Dr. Sergio Snchez Esquivel

Investigadores Titulares
Instituto de Investigaciones Biomdicas, Universidad Nacional Autnoma de Mxico.
Ciudad de Mxico
E-mails: imelda@biomedicas.unam.mx; sersan@biomedicas.unam.mx
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Gua de Autores
La revista puede recibir trabajos de investigacin original as como de revisin en los campos de
la biotecnologa y bioingeniera. Todos los manuscritos sern sujetos a revisin por al menos dos
miembros del Comit Editorial y debern contar con una recomendacin de aceptacin para ser
publicados.
Los idiomas de la revista son el Espaol y el Ingls.
Los trabajos se escribirn en hoja tamao carta (21.6 cm x 27.6 cm). Los mrgenes aplicados a
todo el manuscrito sern de 2.5 cm para los extremos superior e inferior, as como 3 cm de cada
lado. Las pginas debern estar numeradas en la parte inferior y central de cada hoja.
Se recomienda que los trabajos completos tengan un mximo de 25 pginas, escritas con un
interlineado de 1.5 renglones, incluyendo las tablas y figuras. Las publicaciones de trabajos
originales y revisiones en la revista Biotecnologa estn exentas de costo para los autores.
Cuando corresponda, se recomienda el uso de abreviaturas para referirse a unidades de tiempo

(h, min, s), de volumen (l, ml, l), de peso (kg, g, mg, g), DNA, RNA y otras comnmente
aceptadas en la literatura cientfica.
Los trabajos de investigacin original pueden tocar cualquiera de los diversos campos que
cultivan la biotecnologa y la bioingeniera, desde sus aspectos fundamentales hasta las
aplicaciones de los mismos, incluyendo: microbiologa, bioqumica y biologa molecular, procesos y
proyectos, as como biotecnologa marina y biotecnologa aplicada a la salud, alimentos,
agricultura, veterinaria, enzimas y ambiente.
Los trabajos de investigacin original sern divididos en las siguientes secciones: Introduccin,
Materiales y mtodos, Resultados, Discusin, Referencias y Agradecimientos. Las secciones
de Resultados y Discusin pueden presentarse combinadas.
Los trabajos de revisin incluirn el tema y subtemas que a juicio de los autores sean
necesarios para la mejor presentacin de la informacin. Estos trabajos pueden cubrir los
siguientes contenidos:
1. Qu es y para qu sirve la Biotecnologa?. Es decir: descripciones que ilustren y divulguen los

distintos campos de la biotecnologa, sus alcances y limitaciones, su historia y sus
perspectivas.
2. Las fronteras de la biotecnologa: revisiones de nuevos campos o nuevas aplicaciones de la

biotecnologa. Por ejemplo: las perspectivas del uso de los genomas para el desarrollo de
nuevas drogas o para el tratamiento de enfermedades metablicas. Las perspectivas de la
genmica (estudio sistemtico de los genes y sus aplicaciones), la protemica (prediccin de la
expresin de los genes en protenas funcionales) y la fenmica (prediccin de fenotipos o
7
conductas de los organismos, en base a sus genes y a sus protenas). El uso de la ingeniera
gentica para hacer ingeniera metablica. Los nuevos tipos de reactores biolgicos y los
fenmenos de transporte implicados. Los nuevos esquemas de reaccin, separacin y control
en procesos biotecnolgicos.
3. Aplicaciones de la Biotecnologa para resolver problemas o atender necesidades de la

sociedad, con especial atencin a sus aplicaciones ya vigentes en Mxico. Esta seccin ser
dedicada a una empresa o institucin (pblica o privada) que desee difundir los logros
obtenidos en algn campo de la biotecnologa. Por ejemplo: empresas productoras de
antibiticos o productos biolgicos, empresas de ingeniera ambiental que usen procesos
biotecnolgicos, empresas agropecuarias, forestales o de acuacultura que usen tecnologas
biolgicas avanzadas, o empresas de transformacin de alimentos que utilicen enzimas,
cultivos de microorganismos, etc. Esta lista es indicativa pero no exhaustiva.
4. Problemas de bioseguridad, biotica y biodiversidad relacionados con las aplicaciones de la

biotecnologa a la sociedad. Por ejemplo: anlisis y comentarios sobre los debates acerca del
uso de semillas transgnicas, los problemas de conservacin y explotacin de la biodiversidad
mediante la biotecnologa, los riesgos del uso de organismos transgnicos en diversos campos
de la industria, los problemas de bioseguridad del uso de antibiticos y otros productos
biotecnolgicos.
5. La educacin, la cultura y la difusin tecnolgica en relacin con la biotecnologa. Por ejemplo:

comentarios de planes y programas, de estilos y necesidades de la enseanza, del enfoque
interdisciplinario, en carreras o planes de estudio directamente ligados con la biotecnologa.
Tambin necesidades y modalidades sobre programas de extensin educativa para la
industria, para el pblico consumidor o para grupos selectos de personas interesadas en la
biotecnologa (polticos, funcionarios de empresas, lderes de opinin). El uso de la informtica
en la difusin de la biotecnologa, y en general, el anlisis de necesidades, mtodos y
alternativas para difundir los conocimientos de la biotecnologa.
6. Oportunidades y propuestas para mejorar la cooperacin y el desarrollo biotecnolgicos. Por

ejemplo: Anlisis de las oportunidades vigentes de intercambio acadmico o comercial en
biotecnologa. Propuestas de nuevas formas de cooperacin entre los sectores de
investigacin y la industria biotecnolgica. Anlisis y propuestas del uso ptimo de recursos
humanos, financieros o materiales para mejorar la cooperacin o el desarrollo de la
biotecnologa. En esta seccin se dar espacio a los anlisis, crticas o propuestas de los
aspectos legales y fiscales que afecten e incluso puedan mejorar el desarrollo de la
biotecnologa en Mxico. Tales como: la propiedad industrial, el rgimen fiscal de las
empresas, el costo del desarrollo biotecnolgico y los subsidios o estmulos econmicos para
el desarrollo de la biotecnologa.
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Tanto los trabajos de investigacin original como las revisiones debern apegarse al siguiente
formato:
1. El ttulo del manuscrito ser puesto en negritas con letra Arial o equivalente tamao 14. El
ttulo deber estar centrado.
2. El nombre de los autores ocupar los siguientes renglones escribiendo el nombre y primer
apellido de cada participante. Se usar letra Arial o equivalente tamao 12. Los nombres de los
participantes debern estar centrados, sealando con un asterisco el autor responsable de la
publicacin. En el siguiente rengln con letra itlica Arial del mismo tamao, se incluir la
direccin postal de la institucin de adscripcin de los autores, as como el e-mail del autor
corresponsal.
3. Se deber aadir un Resumen de no ms de 250 palabras en Espaol y un Abstract en

Ingls de tamao similar.
4. Se incluirn entre 3 a 6 Palabras clave: que permitan clasificar el artculo en una base de
datos.
Estas palabras debern de incluirse en Espaol y en Ingls (Key words:).
5. Si el texto inicia con el nombre de algn subtema, ste de pondr como primera lnea en
cursivas con letra Arial o equivalente tamao 10. Despus en el siguiente rengln se iniciar el
texto descriptivo usando letra Arial o equivalente tamao 10. El texto deber ser escrito con
un interlineado de 1.5 renglones. Se deber dejar un espacio de un rengln al inicio de una
seccin o subtema nuevo. Los gneros y especies debern escribirse en letras itlicas.
6. Las figuras debern numerarse con arbigos, correlativamente en orden de aparicin en el

texto. No se integrarn al texto, sino al final del manuscrito. No obstante, para facilitar el
trabajo de edicin, se recomienda indicar la ubicacin de las mismas en el momento en que
son mencionadas por primera vez en el texto. Las figuras deben incluir un breve ttulo
explicativo en la parte inferior de la misma. Si es necesario incluir fotos, stas se debern
designar como figuras. La impresin de las figuras e imgenes se har en blanco y negro, por
lo que se recomienda que muestren un buen contraste, en especial las figuras con varias
lneas. Segn el orden de aparicin en el texto, las tablas tambin se numerarn con arbigos
ubicados en la parte superior de las mismas e incluirn un breve ttulo explicativo. Las notas en
las tablas debern ser indicadas con letras minsculas en superndice. La ubicacin de las
tablas ser sealada en el texto pero se anexarn en hojas separadas despus de las
Referencias.
7. La informacin dada como referencias bibliogrficas deber permitir a los lectores llegar con
facilidad a tal fuente de informacin original, si ello fuera necesario. En el texto del trabajo, las
referencias se citan por autor y ao entre parntesis redondos. Por ejemplo: Martnez &
9
Garca (1999) han demostrado que..., o bien, Datos recientes (Martnez & Garca, 1999)
han demostrado que.... Si la cita posee varios autores se escribira como sigue: Gutirrez et
al. (2003), han demostrado. O bien: Datos recientes (Gutirrez et al., 2003) han
mostrado Si la cita es es una pgina de Internet, sta deber ponerse completa entre
parntesis directamente en el texto donde se mencione. La lista de Referencias se deber
escribir con el mismo tipo de letra del texto principal (Arial tamao 10) de acuerdo al siguiente
formato:
Para revistas:
Garca-Carreo F, Cota K & Navarrete del Toro MA (2008) Phenoloxidase activity of hemocyanin in
whiteleg shrimp, Penaeus vannamei: conversion, characterization of catalytic properties, and
role in postmortem melanosis. J. Agric. Food Chem. 56: 6454-6459.
Para libros y captulos de libros:
(Libro)
Ullrich M (2009) Bacterial Polysaccharides: Current Innovations and Future Trends. Horizon
Scientific Press, Norwich.
(Captulo de libro)
Snchez S & Demain AL (2009) Metabolic regulation and overproduction of primary metabolites. In:
Encyclopedia of Industrial Biotechnology. Bioprocess, Bioseparation, and Cell Technology
(EIB). Flickinger MC (ed). John Wiley & Sons, Inc. Hoboken, NJ. pp. 396-458.
Para patentes:
Fenical WH, Jensen PR & Kwon HC (2009) Polyol macrolide antitumor-antibiotics from the marine
actinomycete strain CNQ140. US patent 7,521,414.
Para congresos y reuniones: Se aceptarn un mximo de dos citas de este tipo.
Reyes N, Domnguez RM, Islas I & Solis S (2007) Induccin diferencial por pH y temperatura del
Complejo pectinoltico producido por clulas inmovilizadas de Aspergillus HL. XII Congreso
Nacional de Biotecnologa y Bioingeniera. Morelia Mich. Mxico. OIII-12.
Para citas provenientes de internet: Se aceptar un mximo de dos citas de este tipo.
Van Deuren J, Wang Z & Ledbetter J (1997) Remediation Technologies Screening Matrix and
Reference Guide. 3 Ed. Technology Innovation Office, EPA. Disponible en:
http://www.epa.gov/tio/ remed.htm.
Revistas electrnicas:
10
Sun J, Lu X, Rinas U, & Zeng AP (2007) Metabolic peculiarities of Aspergillus niger disclosed by
comparative metabolic genomics. Genome Biol. 8: R182. BioTecnologa, Ao 2015, Vol. 19 No.
1 11
Para tesis de pre y posgrado:

Crdenas C (2009) Evaluacin del uso biotecnolgico de la semilla de Ditaxis heterantha para la
Produccin de safranal. Tesis de Maestra en Ciencias Bioqumicas. Universidad Nacional
Autnoma de Mxico. Mxico D.F. pp. 1-78.
Cada autor es responsable de la precisin de las citas que emplea. Las citas de internet,
congresos y reuniones, debern evitarse al mximo.
Una vez que ha sido revisado y aceptado su trabajo, los autores debern enviar una carta de
cesin de los Derechos de Autor, de manera que la Sociedad Mexicana de Biotecnologa y
Bioingeniera pueda hacer uso del artculo aceptado, o parte de l, con fines de divulgacin y
difusin de la actividad cientfica y tecnolgica. En ningn caso, dichos derechos afectan la
propiedad intelectual que es propia de los autores, para usar la totalidad o parte de ese artculo con
fines no lucrativos. Los trabajos solamente se reciben va correo electrnico al Comit Editoral
encabezado por el Dr. Sergio Snchez Esquivel en la direccin sersan@biomedicas.unam.mx Al
momento de recibirlo, se enviar un acuse de recibo al autor corresponsal, por lo que se pide
Incluir una direccin de correo electrnico para este fin, as como para mantener comunicacin con
el editor sobre la evolucin de la revisin y sobre la aceptacin del mismo.
Una vez aceptados, los trabajos son editados y enviados a los autores para su correccin. En
esta condicin no se permitirn cambios sustanciales en el contenido de los mismos sin la
aprobacin del editor en jefe. Una vez aprobada la prueba, el trabajo se publicar en lnea y podr
ser consultado en la pgina de la Sociedad Mexicana de Biotecnologa y Bioingeniera AC
http://www.smbb.com.mx/ La publicacin en lnea preceder a la publicacin impresa
11
Clarificacin de una Bebida Alcohlica a Base de Merey
(Anacardium occidental L.) a Partir de un Concentrado
Enzimtico
Carlos Alvarado Almarza, Celeste Fernndez Gonzlez, Alexandra Jimnez Lucena y Johana
Paucar Baque
Laboratorio de Biotecnologa Industrial (LABIOT). Centro de Investigaciones Qumicas (CIQ).

Facultad de Ingeniera. Universidad de Carabobo. Valencia. Estado Carabobo. Venezuela
E-mail: c_alvarado_almarza@yahoo.es ; clalvarado@uc.edu.ve
RESUMEN
La presente investigacin consisti en la clarificacin de una bebida alcohlica a base de
Merey (Anacardium occidentale L.), mediante la adicin de concentrados de enzimas
pectinolticas, uno extrado de guayaba y otro de Papaya. La bebida alcohlica se prepar
segn las normas COVENIN y Codex Stand 247 (2005), a base de Merey amarillo mediante
fermentacin durante 96 h con Saccharomyces cerevisiae. Se emplearon 3 kg del pseudofruto
del Merey para obtener 800 ml de vino. La efectividad del concentrado enzimtico se evalu con
un diseo factorial mixto 2x4x4, se midi la absorbancia en el vino antes y despus de la
adicin del concentrado, y se observ disminucin en la intensidad del color. Luego, se aplic
una encuesta valorativa sumatoria y se obtuvo para el brillo y limpidez una preferencia de 64%
en el vino clarificado. Se formul la bebida alcohlica clarificada y se realiz una evaluacin
sensorial hednica.
Palabras Clave: Clarificacin, enzimas pectinolticas, Merey, Papaya, concentrado enzimtico.
ABSTRACT
This research consisted of clarification of an alcoholic beverage made from cashew
(Anacardium occidentale L.) using an pectic enzyme concentrates; first of them extracted from
guava and papaya another. The beverage was prepared according to Codex Stand 247 (2005)
and COVENIN standards-based yellow cashew by fermentation for 96 h using Saccharomyces
cerevisiae. A three (3) kg of pseudofruit were used to obtain 800 ml of wine. The effectiveness of
the enzyme concentrate was evaluated using a mixed factorial experimental design 2x4x4, and
the absorbance was measured in the wine before and after addition of concentrated, and
observed decrease in color intensity. Then a summation valuation survey was applied and
obtained for the brightness and clarity of a preference 64% for wine clarified. Alcoholic beverage
clarified was formulated and a hedonic sensory evaluation was conducted.
Keywords: Clarification, pectic enzymes, cashew, papaya, concentrated enzyme.
12
INTRODUCCIN disacridos repetidos 4) cido -D-
Las bebidas alcohlicas tienen su origen en galactopiranosilurnico (12)--L-
la fermentacin alcohlica. Este, es un proceso ramnopiranosil (1 con aproximadamente 20
anaerbico que genera etanol y desprende a 80% de las molculas de la ramnosa unidas
grandes cantidades de dixido de carbono, por enlaces (14) a cadenas de oligosacridos
debido a la accin de las levaduras que, en cidos y neutros, formados principalmente por
ausencia de aire, oxidan la glucosa y otros arabanos, galactanos o arabinogalactanos y en
azcares (Ezeronye, 2004). menos escala por cido D-glucurnico. Y los
La clarificacin de los vinos es una prctica ramnogalacturonanos II representan un grupo
muy antigua realizada en Enologa. Los fines de polisacridos con cadenas laterales
que se persiguen con la clarificacin son, en un complejas unidas a la cadena principal de -D-
principio, acelerar la eliminacin de materias que galactopiranosilurnico (Ridley et al., 2001).
enturbian la bebida alcohlica por un Las enzimas pectinolticas estn
procedimiento ms rpido que el de conformadas por tres tipos: pectinesterasas,
sedimentacin y trasiego. Existen diversos poligalacturonasas y pectinliasas. Las
clarificantes proteicos y/o enzimticos de origen pectinesterasas hidrolizan los grupos carboxilo
vegetal y animal (Acosta, 2014). Los esterificados del carbono 6 de las molculas de
clarificantes enzimticos a base de enzimas
-D-galactopiranosilurnico y liberan metanol,
pectinolticas han tomado gran importancia por
las poligalacturonasas hidrolizan los enlaces
su rpido efecto. Las enzimas pectinolticas
glicosdicos de la cadena principal de las
corresponden a una mezcla de dos o ms tipos
pectinas -D-galactopiranosilurnico restos de
de enzimas que en combinacin hidrolizan a las
-D-galactopiranosilurnico, y las pectinliasas
pectinas.
hidrolizan de forma desproporcionada los
Las pectinasson heteropolmeros
enlaces glicosdicos de la cadena principal
conformados por tres tipos de estructuras que
generando dos tipos de restos de -D-
pueden variar en sus proporciones:
galactopiranosilurnico, una saturada con
homogalacturonanos, ramnogalacturonanos I y
extremo terminal OH y otra insaturada
ramnogalacturonanos II, el primero conformado
(Nagodawhitana Reed, 1993).Las
por residuos de galactopiranosilurnico unidos
enzimaspectinolticas son aplicadas al mosto
por enlaces (14) en donde algunos grupos
antes de la fermentacin para coagular coloides
carboxilos se encuentran metil esterificados y
con el propsito de obtener un vino clarificado
dependiendo de la especie vegetal pueden estar
(Nagodawhitana Reed, 1993; Whitaker, 1994).
O-acetilados en los carbonos 2 y 3 (Thakur et
La fase visual es una etapa de gran
al., 1997; Ridley et al., 2001; Willats et al.,
importancia en la calidad de los productos
2006). Los ramnogalacturonanos I estn
alimenticios y las bebidas alcohlicas no son
constitudos por una cadena principal de dos
ajenas a esta situacin, ya que propiedades
13
sensoriales comoel brillo, transparencia, entre eliminar los fenoles (Espinal, 2010; Torres et al.,
otros, se ven afectadas por las partculas en 2006).
suspensin propias del procesamiento del Posteriormente, se procedi a la extraccin
mosto, y por tanto es necesario el uso de del concentrado enzimtico, mediante la
clarificantes para disminuir el efecto de las agitacin de la muestra resultante de la etapa
mismas. Otro aspecto importante a estudiar es anterior, con la adicin controlada de 30 mL de
la turbidez del vino, igualmente es significativo el solucin extractora de (NaCl) 1.5 M. Luego se
color o la cromaticidad de la bebida alcohlica y reajust el pH a 7.8 con hidrxido de sodio
en el caso de los vinos blancos son (NaOH) 1.5 M.
esencialmente relevantes las reacciones de La mezcla se centrifug a 7000 rpm (5911.2
pardeamiento ya que son las que condicionan el xg) durante 45 min. El sobrenadante obtenido se
color que vara desde amarillo plido hasta filtr con papel Whatman N5 prepesado y se
tonos marrones. separ en dos partes iguales, una se dej
En la presente investigacin, se prepar intacta y la segunda se precipit con sulfato de
una bebida alcohlica a base de Merey amonio [(NH4)2SO4], un30% de saturacin; en
(Anacardium occidentale L.), mediante seguida se centrifug a 7000 rpm (5911.2 xg)
fermentacin sumergida con la levadura S. durante 45 min. Se transvas el sobrenadante y
cerevisiae, ya que en estudios previos demostr se recuper el extracto enzimtico parcialmente
ser la idnea para consumir todos los azcares purificado (Flores, 2004; Mondal et al., 2009;
fermentables, y por tanto asegurar el proceso. El Ashurst, 2005).
clarificante utilizado se prepar a base de Las cantidades empleadas de sulfato de
enzimas pectinolticas de frutas de procedencia amonio (NH4)2SO4 para la extraccin del
nacional: guayaba y papaya, empleando un concentrado enzimtico se indican en la Tabla 1,
diseo factorial mixto 2x4x4 y finalmente se donde adems se reflejan las cantidades de
realiz la evaluacin sensorial. materia prima necesarias para la preparacin
del concentrado enzimtico de guayaba y
MATERIALES Y MTODOS papaya respectivamente.
Preparacin del concentrado enzimtico Tabla 1. Formulacin de los concentrados

La guayaba y la papaya fueron compradas
en un mercado local, se lavaron, pelaron y
Fuente Cantidad Acetona Sulfato Cantidad de
retiraron las semillas. Se procesaron dos (g) (ml) de concentrado
porciones por separado de cada pulpa de 30 g y Amonio (ml)
(g)
luego se conservaron a 4 C (Flores, 2004).
Guayaba 30 20 4.1 18.5
Luego se colocaron en un embudo con doble
capa de papel de filtro; se realizaron 4 lavados Papaya 30 20 4.5 20
con 5 mL de acetona a -20 C con el fin de
14
Preparacin de la bebida alcohlica a base de cumplido el tiempo de fermentacin estipulado
merey
se elimin la levadura por separacin slido-
Para obtener un (1) litro de mosto se lquido facilitada por su deposicin mediante
trataron (3) tres kilogramos de fruto a los cuales refrigeracin a 4 C durante 24 h, y posterior
se les removi la nuez, y el pseudofruto centrifugacin a 6000 rpm (4342.9 xg) durante
recolectado se coloc en remojo con agua 30 min y finalmente filtraron. La pasteurizacin
potable para eliminar la suciedad que pudieran se realiz en un autoclave a 100C por 10 min y
tener debido al proceso de recoleccin. luego se enfri a 4C durante 30 min (Araujo et
Posteriormente se realiz una inmersin del al., 2011).
pseudofruto ya limpio en solucin salina al 1%
para reducir su astringencia y se esterilizaron en Determinacin de taninos en el pseudofruto
autoclave a 1.5 psig y 121C durante 15 min Se determin la cantidad de taninos
(Mohanty et al., 2006). siguiendo la metodologa expuesta por Mohanty
Luego, el pseudofruto ya esterilizado se et al. (2005) en la cual se colocaron 10 g del
proces en un extractor de jugo y el bagazo pseudofruto en 100 ml de etanol al 96% durante
obtenido se filtr y prens a fin de obtener la un aproximado de 16 h, luego se aadi sulfato
mayor cantidad posible. Se ajustaron los slidos de sodio anhidro y se filtr. Este filtrado se sec
solubles con azcar comercial a 30Brix y el pH hasta peso constante en estufa a 105 C. La
se ajust a 4 con cido ctrico al 10%. El mosto cantidad de taninos fue expresada en mg por
se esteriliz a 1.5 psi durante 15 min y se cada 100 ml de solucin salina al 1%.
agregaron 0.2 g/l de metabisulfito de sodio, 1 g/l
de sulfato de amonio y 1 g/l de fosfato de Evaluacin de los concentrados enzimticos en
potasio (Torres et al. 2006). el proceso de clarificacin de la bebida
Para preparar el inculo se inocularon 10 g Se realiz un diseo experimental factorial
de levadura fresca comercial Levapan en 50 ml mixto 2x4x4 por triplicado para un total de 96
de caldo nutritivo en un matraz de 100 ml. Se experimentos para evaluar el concentrado
incub a temperatura ambiente (28 C) a 150 enzimtico de guayaba y papaya. Se tomaron
rpm durante 24 h. Posteriormente se tomaron 15 las muestras obtenidas de la fermentacin y se
ml del cultivo iniciador de levadura y se les agreg el concentrado enzimtico de
diluyeron hasta 50 ml con solucin isotnica al guayaba y papaya variando sus cantidades y el
0.85% p/v (Araujo et al., 2011). tiempo de actuacin (Tabla 2). Las muestras
El proceso de fermentacin se realiz en resultantes de cada interaccin se colocaron en
matraces de 250 ml conteniendo 50 ml del vasos de precipitado de 100 ml y se agitaron
mosto y 5% del inculo en incubacin orbital a durante un tiempo de 10 min.
150 rpm (2.7 xg) durante 96 h (4 das). Una vez
15
Tabla 2. Diseo experimental para evaluar los concentrados enzimticos en la clarificacin de la
bebida alcohlica de Merey
Nivel Variable de respuesta

Factor
Variable normal Variable codificada
Papaya (-1)
Variedad
Guayaba (+1)
0 mL (-1)
5 mL (-0.33)
Volumen de clarificante
15 mL (+0.33) Absorbancia (adim)
25 mL (+1)
0h (-1)
24 h (-0.33)
Tiempo
48 h (+0.33)
72 h (+1)
Se caracteriz la bebida alcohlica con el caractersticas esenciales que deben tener los
clarificante mediante la determinacin del grado componentes de una bebida alcohlica a base
alcohlico (COVENIN 3042-93), slidos solubles de frutas, as como las particularidades de dicho
(COVENIN 924-83), pH (COVENIN 1315-79), producto.
acidez titulable (COVENIN 3286-97 y COVENIN La norma general del CODEX para zumos
1151) y densidad, adems de la medicin de la (jugos) y nctares de fruta (Codex Stan 247,
absorbancia empleando un espectrofotmetro 2005) indica que el nivel de Brix requerido para
UV con una longitud de onda de 420 nm. el mosto debe encontrarse en un rango entre 12
y 40. Como proceso de seleccin, adems de la
Seleccin del concentrado enzimtico ms caracterizacin y el estudio de la absorbancia,
adecuado para clarificar la bebida alcohlica a se realiz una encuesta a escala valorativa
base de Merey sumatoria preliminar a 20 personas, para elegir
Se revisaron diversas normas COVENIN el de mayor preferencia por el panel
3340-3342 y el CODEX ALIMENTARIUS encuestado.
(CODEX STAN 247, 2005) para la elaboracin

de vinos, las cuales establecen las Determinacin de actividad enzimtica
16
La medicin de actividad enzimtica de la objetivo de clasificar de forma discriminatoria y
pectin-esterasa se realiz mediante la tcnica descriptiva la bebida alcohlica clarificada a
del pH esttico reportada por Argaiz Lpez- base de merey (Anacardium occidentale L.)
Malo (1996). Se tom una alcuota de (Desrosier, 1977).
concentrado enzimtico igual a (10,00 0.05)
mL y se mezclaron con una solucin de pectina RESULTADOS Y DISCUSIN
ctrica al 1% en NaCl 1 M ajustando el pH a 7.8
tras la adicin de cada gota de pectina; Preparacin del concentrado enzimtico
utilizando para esto una solucin de hidrxido de La eliminacin fenlica se lleva a cabo dado
sodio (NaOH) 2.07 M. Seguidamente se midi el que puede inducir la inactivacin de las
pH y se titul cada muestra con solucin de enzimas, entre ellas la enzima de inters,
NaOH 0.0004 N. Los resultados se expresaron pectinasas; al formarse polifenolxidasas y/o
en unidades de pectin-esterasa (UPE) por ml. entrar en contacto las mismas ya presentes en
La unidad de pectin-esterasa (UPE) fue tejidos con las enzimas generando una
definida como el nmero de mili equivalentes de oxidacin o pardeamiento que caracteriza la
ster hidrolizados por minuto y mililitro de inhibicin de la actividad enzimtica
muestra, a pH 7.8 y se expres en UPE/ mL
(Nagodawhitana Reed, 1993; Mondal et al.,
(Flores, 2004).
2009).Una vez obtenida la muestra de fruta sin
N fenoles se adicion cloruro de sodio (NaCl) 1.5
v*
UPE 1000 * 10 6 (1)
M a fin de solubilizar las protenas, es decir, las
mL t *a enzimas y luego la muestra fue centrifugada con
la finalidad de separar totalmente la pulpa de las
Donde: fase acuosa.
: volumen gastado de NaOH empleado para
titular (ml)
N: normalidad de NaOH (eq/l) Preparacin de la bebida alcohlica a base de
t: tiempo de agitacin (min) Merey
a: alcuota (ml)
El Merey se presenta en dos especies: una
roja y otra amarilla. En esta investigacin se
Evaluacin sensorial de las caractersticas del
emple Merey amarillo. Se realiz la
producto obtenido despus del proceso de
caracterizacin fisicoqumica, en donde los
clarificacin
resultados obtenidos a la 5ta semana indican
Para el anlisis de las propiedades
que la especie amarilla alcanz mayor grado de
sensoriales finales se procedi a realizar una
madurez. Su relacin slidos solubles
evaluacin a escala valorativa sumatoria para
azcares/acidez es ms alta lo que brinda
una poblacin de 50 individuos, en edades
comprendidas entre 18 a 70 aos, con el
17
condiciones ptimas para la fermentacin (Tabla La bebida alcohlica empleada para evaluar
3). la clarificacin con el concentrado enzimtico se
obtuvo a partir del Merey amarillo (Anacardium
Tabla 3. Tiempo de maduracin del Merey occidentale L.), porque es una fruta de
produccin nacional y adems el concentrado
Variedad Grado de madurez
(Adim) enzimtico de papaya y guayaba.
A travs de un diseo experimental factorial
Merey rojo 10.75
utilizando como factores la concentracin del
Merey amarillo 16.90 clarificante y el tiempo de la clarificacin se

evala la efectividad del concentrado
enzimtico. El modelo empleado es la
Metodologa de Superficies de Respuesta
Luego del tratamiento inicial de la fruta (RSM) que no es ms que un conjunto de
segn Mohanty et al. (2006), se realiz la tcnicas matemticas utilizadas en el
inmersin de la misma en solucin salina al 1%, tratamiento de problemas en los que una
esto con la finalidad de reducir la cantidad de respuesta de inters est influida por varios
taninos presentes en el Merey (Yahayaet al., factores de carcter cuantitativo, segn
2010). Despus del tratamiento los taninos Gutirrez De la Vara (2008)
disminuyeron en un 61.76 %, pasando de 1020 En la presente investigacin despus de la
a 630 mg/100 ml. fermentacin, la bebida alcohlica contiene
Los taninos representan la medida indirecta partculas en suspensin, surgiendo la
de la astringencia, que no es ms que una necesidad de clarificarlo mediante la adicin de
sensacinque corresponde al grado de prdida un producto clarificante capaz de coagularse
de lubricacin de la cavidad bucal, dando de con los elementos slidos que lo enturbian y de
esta forma, una sensacin de aspereza y producir grumos que sedimenten las partculas
sequedad. Sin embargo, no se eliminan en su que producen la turbidez, arrastrndolas al
totalidad ya que estos presentan propiedades fondo para clarificar el vino. Para evaluar el
medicinales tales como: antidiarreicos, comportamiento del clarificante se aplic dicha
antioxidantes, antiinflamatorios y antispticos metodologa de superficie de respuesta con un
2
(Mohanty et al., 2006; Guerrero et al., 2008).La diseo experimental de 2 preparando muestra
cantidad de vino obtenida por cada 3 kg de de vino de 50 ml variando la cantidad de
merey amarillo fue de aproximadamente 800 ml. concentrado enzimtico y el tiempo de actuacin
del mismo, estudiando as la respuesta de
absorbancia del vino.
Evaluacin del concentrado enzimtico en el Los valores obtenidos de absorbancia con
proceso de clarificacin de la bebida a partir de el concentrado enzimtico de papaya son
un diseo experimental a escala de laboratorio menores a los del concentrado enzimtico de
18
guayaba, tal como se indica en las Figuras 1 y 2.
Estos resultados son congruentes para un 0.70 0h
espectro de absorcin de un vino blanco segn 0.60 24 h
Absorbancia (adim)
48 h
reporta Ribreau-Gayon (2003). 0.50 72 h
0.40
0.60 0.30
0h
Absorbancia (adim)
0.50 24 h 0.20
48 h
0.10
0.40 72 h
0.00
0.30
0 5 10 15 20 25 30
0.20 Volumen de clarificante (ml)
0.10 Fig. 2. Variacin de la Absorbancia (a 420 nm)

0.00 en funcin del tiempo del vino clarificado con
0 5 10 15 20 25 30
concentrado enzimtico de guayaba
Volumen de clarificante (ml)
En el caso de guayaba (Figura 2) se

Fig. 1. Variacin de la Absorbancia (a 420 nm)
observ un aumento inicial de la absorbancia a
en funcin del tiempo del vino clarificado con
volumen bajo de 5 ml y luego una disminucin.
concentrado enzimtico de papaya
Esto puede atribuirse a la baja concentracin de
Esta diferencia entre ambos clarificante se enzimas pectinolticas en la guayaba.
debe a que la actividad enzimtica de la papaya Lo anterior hace suponer que a menor
(5.333 UPE/mL) es mayor a la de la guayaba
(1.333 UPE/ml). As mismo, a medida que
aumenta el tiempo de incubacin con respecto
al aumento de la concentracin enzimtica, la
absorbancia del vino clarificado disminuy en
todos los tratamientos (Figura 1). Esto se debe a
la accin de la enzima al hidrolizar la pectina
que puede llegar a suponer el 50% de la
sustancia coloidal (Gonzlez-San Jos et al.,
2013), adems la hidrlisis facilita la
precipitacin de protenas, polmeros fenlicos y Fig. 3. Variacin del pH en el tiempo del vino
clarificado con concentrado enzimtico de
en menor medida de cidos urnicos, mejorando
papaya
de esta manera el brillo y la luminosidad del concentracin de enzimas pectinolticas se
producto final. Este efecto se incrementa con el requiere mayor cantidad de concentrado, pero al
tiempo de actuacin para el caso de la papaya y mismo tiempo al emplear una baja cantidad del
se mantiene con el volumen de clarificante mismo se traduce en un aumento de la
empleado.
19
absorbancia debido a que no se ha iniciado an igualmente se aprecia la variacin de los slidos
la hidrlisis enzimtica de las pectinas. solubles para diferentes tiempos de actuacin
A medida que aumenta el tiempo de del clarificante de papaya en la bebida
incubacin, el pH disminuye, y esta reduccin alcohlica a base de merey. La disminucin de
est asociada a la labor catalizadora de la los slidos solubles es favorable, ya que
enzima sobre la pectina (Figura 3); esto se representa la reduccin de los slidos
debe, a que la pectin-esterasa al hidrolizar los suspendidos por accin de la enzima.
enlaces ster metlico (COOCH3), libera metanol
(CH3OH) de los grupos carboxilos esterificados y
transforma la pectina metoxilada en pectina de
bajo metoxilo (Espinal, 2010). En la Figura 4,
Fig. 4. Variacin de los slidos solubles en el tiempo para el vino clarificado con concentrado enzimtico
de papaya
En la Figura 5 se muestra el diagrama de igual manera se comprobaron los supuestos de

Pareto para la variable respuesta: absorbancia, normalidad de los datos, independencia y
y los factores evaluados: tiempo, volumen de varianza constante para estadstica paramtrica.
clarificante y variedad de fruta, como resultado Por otro lado, las superficies de respuesta, para
de la validacin estadstica con un ajuste del las dos variedades papaya y guayaba se indican
77.0865 % del modelo segn el estadstico R- en las Figuras 6 y 7 se puede apreciar que a
cuadrada ajustada, en la cual se observa que medida que aumenta el tiempo de incubacin, la
los tres factores tienen diferencias significativas absorbancia disminuye con una tendencia a
(P<0.05) entre ellas ms sus interacciones. De permanecer constante en el tiempo para las
20
ultimas horas de actuacin, y a pesar de existir Tabla 4 se muestra el anlisis de varianza con
ligeros aumentos para volmenes entre 15 y 25 los estadsticos desglosados.
ml la tendencia a clarificar vuelve a presentarse Las Variables Volumen y Tiempo segn
luego de 72 h de actuacin del mismo. En la Tabla 2.
Tabla 4. Anlisis de varianza para absorbancia.
Fuente Suma de Cuadrados Gl Cuadrado Medio Razn-F Valor-P

A:Variedad 0.0527728 1 0.0527728 10.19 0.0020
B:Volumen Clarificante 0.0784693 1 0.0784693 15.15 0.0002
C:Tiempo 0.332761 1 0.332761 64.26 0.0000
AB 0.0434855 1 0.0434855 8.40 0.0048
AC 0.0219945 1 0.0219945 4.25 0.0424
BB 0.0242948 1 0.0242948 4.69 0.0331
BC 0.0001882 1 0.0001882 0.04 0.8493
CC 0.00303718 1 0.00303718 0.59 0.4459
bloques 0.0072595 2 0.00362975 0.70 0.4989
Error total 0.440128 85 0.00517798
Total (corr.) 2.14681 95
R-cuadrada = 79.4985 porciento
R-cuadrada (ajustada por g.l.) = 77.0865 porciento
Error estndar del est. = 0.0719581
Error absoluto medio = 0.0565532
Estadstico Durbin-Watson = 0.658179 (P=0.0000)
Autocorrelacin residual de Lag 1 = 0.665934
Fig. 5. Diagrama de Pareto para la absorbancia
21
Fig. 6. Superficie de respuesta de los niveles de volumen de clarificante y tiempo para papaya.
oscuro provocando que al adicionarse al vino,

este se torne de igual color y aumente la
absorbancia medida en el espectrofotmetro
UV. Sin embargo, al agregar ms clarificante
este comienza a disminuir, debido al tiempo de
actuacin y reposo al que estuvo sometido, lo
que se traduce en una despectinizacin (Cerreti
et al., 2016; Pinelo et al., 2010).
Caso contrario ocurre con el de papaya,
que tiene un color ms claro y al adicionarse al
vino, la absorbancia disminuye en los primeros
volmenes de clarificante con el aumento de la
concentracin de la enzima. Lo cual es una
Fig. 7. Superficie de respuesta de los niveles de ventaja ya que las medidas son favorables
volumen de clarificante y tiempo para guayaba. indicando mejoras en la apariencia de la bebida

alcohlica. Sin embargo, para el volumen final
Seleccin del concentrado enzimtico ms aumenta la absorbancia, lo que parece indicar
adecuado para clarificar la bebida alcohlica a que el clarificante en exceso pierde actividad
base de merey enzimtica posiblemente por desnaturalizacin

proteica, y por tanto no contina la hidrlisis de
Comparando los valores obtenidos de
las cadenas de pectinas. Este hecho puede
absorbancia, se puede apreciar en la Figura 1
deberse a una subida de temperatura
que para el clarificante de guayaba hay un
ocasionada en la manipulacin de las muestras
aumento sbito al adicionar el primer volumen
o por otros efectos que an se desconocen y
de clarificante, esto debido a que el concentrado
que hay que estudiar en futuras investigaciones.
enzimtico posee fsicamente un color ms
22
Una muestra de la bebida alcohlica con ambos Para la seleccin del volumen de
clarificantes se puede apreciar en la Figura 8. clarificante se emplearon tres muestras como se
observa en la Tabla 5, adems la aplicacin de
(a) (b)
una prueba de degustacin a una poblacin de
20 personas inexpertas para verificar la
preferencia del vino clarificado despus de 72 h
de actuacin.
Fig. 8. Bebida alcohlica a base de merey

con clarificante (a) Papaya, (b) Guayaba
Tabla 5. Muestras empleadas para la seleccin del volumen de clarificante.
Fruta Muestra Volumen de vino (ml) Volumen de clarificante (ml)
A 50 5
Papaya B 50 15
C 50 25
El modelo de encuesta utilizado fue el de apariencia de vinos blancos utilizando

Escala Valorativa Sumatoria, dando como clarificantes comerciales y/o convencionales
resultado que con una ponderacin promedio de (Fugelsang Edwards, 2007).Luego de aplicar
13.9, siendo 15.0 la mxima puntuacin total la encuesta, se concluy que el mejor sabor del
para la escala de valoracin, la muestra B fue vino se logr al agregar 5mL de concentrado
escogida como la preferida. Los valores de la enzimtico de papaya para lograr la clarificacin.
caracterizacin para la muestra B fueron los Finalmente, para preparar 300 ml de bebida
siguientes: pH igual a 3; slidos solubles alcohlica clarificada a base de merey, se
20.1796 BRIX; acidez titulable 4.864 g (cido emplearon 30 ml de concentrado enzimtico de
tartrico)/l; grado alcohlico 12.7; densidad papaya, y se pasteuriz a una temperatura de
1.2698 g/ml y absorbancia 0.10129. As mismo, 100C a una presin de 1.5 psi y seguidamente
el comportamiento del concentrado enzimtico se someti a un enfriamiento sbito a 4C.
de papaya, empleado como clarificante en una
bebida alcohlica a base de merey, presenta Evaluacin sensorial de las caractersticas del
una tendencia aceptable en los resultados producto obtenido en el proceso de clarificacin
obtenidos; en comparacin con estudios La prueba hednica aplicada en la presente
realizados por diversos autores para mejorar la investigacin fue analtica de tipo discriminatoria
23
por el mtodo de diferenciacin, empleando la enzimtico con un valor de absorbancia de
tcnica pareada, que consiste en evaluar 0.10129. El brillo y limpidez tuvo una preferencia
simultneamente dos muestras, con el objetivo de 53% en el vino clarificado respecto al vino sin
de determinar si existe diferencia perceptible clarificar. La aceptabilidad en general tuvo un
entre ellas. En este caso, una muestra con 73% de aprobacin en el vino clarificado,
clarificante de papaya y otra sin clarificante. generando as una expectativa de
Para desarrollar este procedimiento se aplic la comercializacin a futuro.
encuesta a un total de 50 personas no
entrenadas. Las caractersticas evaluadas en la
AGRADECIMIENTOS
prueba hednica son: brillo y limpidez, aroma,
Los autores agradecen al personal del
color, sabor y aceptabilidad.
Laboratorio de Biotecnologa Industrial (LABIOT)
Se pudo constatar que el vino clarificado
y al Centro de Investigaciones Qumicas (C.I.Q)
con concentrado enzimtico de papaya obtuvo
de la Facultad de Ingeniera de la Universidad
un porcentaje de 52% y el vino sin clarificar
de Carabobo, por colaborar con el desarrollo de
36%; es decir, que en comparacin con otros
esta investigacin.
vinos frutales, ste es aprobado por la mayora
de los degustadores generando expectativas a
REFERENCIAS
futuro para la comercializacin de vinos
clarificados con concentrados enzimticos Acosta D (2014) Elaboracin y control de calidad
obtenidos a partir de frutas de procedencia de vino de feijoa (Acca sellowiana berg), a
nacional. partir de frutos con corteza y sin ella. Tesis
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Chimborazo. Facultad de Ciencias. Escuela
CONCLUSIONES
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La bebida alcohlica obtenida empleando
Araujo S, Ferraz C, Silveira J, Narain N Souza
un concentrado enzimtico de papaya, se
R. (2011) Biotechnological process for
encuentra dentro de los rangos establecidos por
obtaining new fermented products from
las normas COVENIN empleadas para la
cashew apple fruit by Saccharomyces
caracterizacin. Los valores de slidos solubles,
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densidad obtenidos para el vino clarificado
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fueron aceptables comparados con estudios
first change on flavour, cooked flavour
realizados por otros autores. Las mediciones de
development and pectinesterase
absorbancia demuestran que la bebida
inactivation on mango and papaya nectars
alcohlica a base de Merey con clarificante de
and purees. Rev Esp Cien Tec Ali. 35 (1):
papaya cumple con el espectro de absorbancia
92-100.
de un vino blanco, para ello fue necesario un
tiempo de actuacin de 72 h del clarificante
24
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26
Cmo abordar el estudio de una protena hipottica? el caso de
la protena SCO2127 de Streptomyces coelicolor
Vctor Tierrafra y Sergio Snchez
Departamento de Biologa Molecular y Biotecnologa. Instituto de Investigaciones Biomdicas.

Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Ciudad de Mxico, 04510.
*
E-mail: vtierrafria@gmail.com
RESUMEN
En Streptomyces coelicolor, como en muchos otros organismos, la produccin de enzimas

extracelulares y la sntesis de antibiticos estn sujetas a regulacin por carbono. La
caracterizacin de mutantes insensibles a regulacin por carbono sugiri que la protena hipottica
codificada por el gen sco2127 juega un papel importante en este mecanismo regulatorio. Sin
embargo, ha sido extremadamente difcil determinar su funcin debido a la falta de homologa de
secuencia con otras protenas regulatorias ya conocidas. En esta revisin hacemos un recorrido
sobre el estudio de sco2127 que va desde la complementacin gentica clsica de mutantes
insensibles a regulacin por carbono y la expresin heterloga de la protena sco2127 en
Escherichia coli, hasta la creacin de mutantes dirigidas y el anlisis de la informacin obtenida por
distintos acercamientos a escala genmica. Aunque estos estudios han brindado algunas pistas
sobre el funcionamiento de sco2127 y recientemente, sobre las consecuencias fenotpicas de su
delecin, la investigacin relacionada con esta protena debe continuar para conocer su
participacin especfica en la fisiologa del actinomiceto modelo S. coelicolor.
Palabras clave: Regulacin por carbono, mutantes, represin, secuenciacin, glucosa cinasa,
metabolismo secundario, Streptomyces,
ABSTRACT
As in other microorganisms, production of extracellular enzymes and the synthesis of antibiotics in

Streptomyces coelicolor is subject to carbon regulation. Characterization of mutants insensitive to
carbon regulation suggested that the hypothetical protein encoded by the sco2127 gene plays an
important role in this regulatory mechanism. However, mainly due to the lack of sequence homology
with other known regulatory proteins, it has been extremely difficult to determine the sco2127
27
function. In this review a scientific tour on the study of sco2127 was performed, starting with a
classic genetic complementation of regulatory mutants insensitive to carbon source regulation. The
study continued with the heterologous expression of sco2127 in Escherichia coli, the construction
of directed mutants and ended with information analysis obtained from different approaches at the
genomic scale. Although some of these studies have given some clues about the sco2127 function
and recently about the phenotypic consequences of its deletion, the research related to this protein
must continue in order to know its specific participation in the physiology of the actinomycete model,
S. coelicolor.
Key words: Carbon regulation, mutants, repression, sequencing, glucose kinase, secondary
metabolism, Streptomyces.
produccin de nuevos antibiticos, la mayora

de estos clsteres desafortunadamente no
INTRODUCCIN
han podido expresarse en condiciones de
Los estreptomicetos son bacterias Gram-
laboratorio. Esto puede deberse a varios
positivas con alto contenido de G+C que
factores, sin embargo, algunos autores han
habitan el suelo y ambientes marinos
propuesto que la razn principal ha sido la
principalmente. Estos organismos producen
intrincada red de regulacin que controla su
una gran variedad de productos naturales
formacin. Lo anterior adquiere sentido si
que incluyen enzimas extracelulares,
consideramos que la secuenciacin
herbicidas, antitumorales y antibiticos. De
genmica de los estreptomicetos tambin
hecho, la relevancia econmica e industrial
revel un nmero sin precedente de genes
de los estreptomicetos radica en su
relacionados con diversos sistemas de
capacidad para producir poco ms de la
regulacin. Por ejemplo, en S. coelicolor, se
mitad de los antibiticos producidos por
encontr que el nmero de genes asociados
microorganismos (Demain 2014). Esto se
con alguna funcin regulatoria al menos
debe a que los estreptomicetos poseen un
duplica la cantidad de genes involucrados en
elevado nmero de grupos de genes o
la sntesis de productos naturales (Bentley et
clsteres dedicados a la sntesis de
al. 2002).
metabolitos secundarios, los cuales fueron
En las bacterias del gnero
descubiertos al secuenciar el genoma de
Streptomyces, como en muchos otros
especies como Streptomyces coelicolor (22
organismos, la sntesis de productos
clsteres), Streptomyces avermitilis (30
naturales est sujeta a regulacin por
clsteres) y Streptomyces griseus (34
carbono. Este sistema de regulacin inhibe la
clsteres) (Bentley et al. 2002; Ikeda et al.
expresin de los genes o la actividad de las
2003; Ohnishi et al. 2008). Aunque esta
protenas involucradas en la utilizacin de
revelacin sugiere que los estreptomicetos
diversas fuentes de carbono, as como la
tienen un gran potencial para el desarrollo y
28
biosntesis de productos naturales, en estas mutantes fueron incapaces de utilizar
presencia de una fuente de carbono glucosa como nica fuente de carbono y
preferencial (Grke and Stlke 2008). Los solamente un ao despus, se comprob que
primeros estudios de regulacin por carbono dichas mutantes haban perdido su actividad
en S. coelicolor sugirieron que el gen glucosa cinasa (Seno and Chater 1983).
sco2127, o su producto de expresin, Posteriormente, Ikeda y colaboradores
podran jugar un papel importante en este demostraron que las mutantes dogR
mecanismo, y aunque actualmente se sabe incapaces de crecer en glucosa eran
que la protena sco2127 no es la nica complementadas con un fragmento de DNA
responsable de la regulacin por carbono, de aproximadamente 3.5 kb y por lo tanto,
an se desconoce su funcin especfica. En sugirieron que esta secuencia deba contener
esta revisin hacemos un recorrido por los al gen glk (Ikeda et al. 1984).
distintos estudios realizados para tratar de
comprender la participacin de sco2127 en la
IDENTIFICACIN Y SECUENCIACIN DE
fisiologa de S. coelicolor. Nosotros creemos
GENES INVOLUCRADOS EN LA
que esta revisin es un claro ejemplo de
REGULACIN POR CARBONO
cmo puede abordarse el estudio de una
La secuencia del fragmento mencionado
protena hipottica.
anteriormente revel la presencia de dos
genes denominados ORF2 y ORF3
(actualmente conocidos como sco2127 y glk,
AISLAMIENTO Y COMPLEMENTACIN DE
respectivamente). El primer gen (sco2127) no
MUTANTES INSENSIBLES A
present (ni presenta hasta el momento)
REGULACIN POR CARBONO
homologa de secuencia con ningn gen de
Con la finalidad de obtener mutantes
funcin conocida. Sin embargo, el segundo
insensibles a regulacin por carbono, en
gen (glk, glucosa cinasa) mostr alrededor
1982 David Hodgson incub a S. coelicolor
del 50% de similitud con distintas protenas
en presencia de 2-desoxiglucosa (dog), un
represoras de Bacillus subtilis, Lactobacillus
anlogo txico de la glucosa, y arabinosa,
pentosus y E. coli, pero a diferencia de estas,
una fuente de carbono cuya utilizacin se
carece de un dominio de unin a DNA en su
reprime en presencia de glucosa (Hodgson
extremo amino terminal. Cuando se realiz el
1982). Este experimento dio como resultado
anlisis transcripcional de sco2127 y glk, se
la aparicin de mutantes insensibles a
encontr que, aunque ambos genes se
regulacin por carbono, es decir, cepas que
transcriben como una sola unidad en medio
adquirieron la capacidad de utilizar arabinosa
mnimo, la expresin de glk es mayor que la
a pesar de la presencia de 2-dog, o visto de
expresin de sco2127, lo cual sugiere que el
otra manera, cepas resistentes a 2-dog, por
gen glk se transcribe desde dos promotores
lo que fueron nombradas dogR. Algunas de
29
distintos localizados ro arriba de sco2127 y embargo, estos mismos autores se llevaron
glk, respectivamente (Angell et al. 1992). una sorpresa solo un par de aos despus,
Posteriormente, se usaron dichos genes cuando demostraron que la sobreexpresin
juntos, o por separado, para estudiar su del gen glk, y por lo tanto el incremento de la
participacin en la regulacin por carbono y actividad glucosa cinasa en distintas
se observ que las mutantes dogR mutantes dogR era incapaz de restablecer la
transformadas con sco2127 y glk, o represin por carbono del promotor de la
nicamente con glk, restablecieron su agarasa (Angell et al. 1994). Aunque Angell y
sensibilidad a 2-dog y su capacidad para colaboradores ignoraron por completo la
utilizar glucosa, lo cual era de esperarse participacin de sco2127 en la regulacin por
debido a la presencia del gen glk en ambos carbono, nosotros consideramos que estos
casos. Cuando estos autores estudiaron el resultados eran evidencia suficiente para
efecto de estas construcciones sobre la creer que el gen sco2127, o su producto de
represin por carbono (analizada en funcin expresin, cualquiera que sea su funcin,
de la expresin del promotor de la agarasa), jugaba un papel importante en dicho
observaron que las mutantes dogR mecanismo.
transformadas nicamente con el gen glk
disminuan parcialmente la expresin del
ANLISIS DEL GEN sco2127 EN OTROS
promotor de la agarasa en presencia de
ORGANISMOS RELACIONADOS
glucosa. Esta observacin llev a los autores
El fenmeno de RCC tambin se estudio
de este trabajo a proponer que el gen glk era
en Streptomyces peucetius variedad caesius
el responsable de la represin por carbono,
(SPVC), una mutante obtenida de la cepa
sin embargo, es importante sealar que la
silvestre S. peucetius debido a su capacidad
represin total del promotor de la agarasa
para producir doxorubicina (Arcamone et al.
solamente ocurri cuando el gen glk estuvo
1969), un compuesto de tipo polictido
acompaado del gen sco2127 (Angell et al.
similar a la daunorubicina. Ambos
1992).
compuestos son conocidos como
En base a lo anterior, y con la firme idea antraciclinas y han sido usados para combatir
de que el responsable de la represin por distintos tipos de cncer debido a su
carbono era el gen glk, los autores de este capacidad antriproliferativa (Strauss 1978).
trabajo sugirieron que el gen sco2127 no Similar a lo ocurrido con la expresin del
tena ninguna participacin en este proceso, promotor de la agarasa en S. coelicolor, en
y que la complementacin de las mutantes SPVC se observ que la produccin de -
dogR transformadas con ambos genes galactosidasa y de antraciclinas (elegidos
simplemente se deba al incremento en la como ejemplos del metabolismo primario y
expresin de glk desde el promotor secundario, respectivamente) tambin estaba
localizado ro arriba de sco2127. Sin sujeta (disminua) a RCC. Adems se
30
demostr que la concentracin de ambos fenmeno de RCC en Streptomyces. Sin
compuestos aumentaba en las mutantes embargo, los autores de este trabajo
dogR a pesar de la presencia de glucosa encontraron una correlacin directa entre el
(Segura et al. 1996; Escalante et al. 1999; transporte de glucosa y la RCC, al observar
Ramos et al. 2004), revelando de esta que el transporte de glucosa disminua
manera que el fenmeno de RCC est nicamente en las mutantes insensibles a
ampliamente distribuido entre los RCC, independientemente de su actividad
estreptomicetos. glk.
De acuerdo con los resultados obtenidos A pesar de que Ramos y colaboradores
en S. coelicolor, en SPVC tambin se haban demostrado que las mutantes dogR
descubri que la actividad glucosa cinasa de de SPVC conservaban el gen glk, en 2005 se
las mutantes dogR, y por lo tanto, resistentes hicieron experimentos de complementacin
a RCC, disminua considerablemente con gentica, similares a los realizados
respecto a la cepa parental (Segura et al. previamente en S. coelicolor (Angell et al.
1996; Ramos et al. 2004). Aunque esto 1992; Angell et al. 1994), donde se prob la
sugera una vez ms que la enzima glucosa capacidad de sco2127 y de glk (juntos o por
cinasa era la responsable de la resistencia a separado) para restablecer la regulacin por
RCC, esta hiptesis qued descartada con la carbono en distintas mutantes dogR de
identificacin de mutantes sensibles a dog SPVC (Guzman et al. 2005). Para esto,
(dogS), pero resistentes a RCC, las cuales primeramente se investig la presencia de
tenan una actividad glucosa cinasa similar a genes homlogos a sco2127 y glk de S.
la observada en la cepa silvestre (Ramos et coelicolor en SPVC, donde se observ que
al. 2004). Aunado a esto, Ramos y ambos genes estn localizados en la misma
colaboradores demostraron por primera vez regin del cromosoma (Guzman et al. 2005),
que la secuencia del gen glk de las mutantes y ahora se sabe que tambin estn
dogR de SPVC (consideradas como organizados en un arreglo similar al
mutantes puntuales debido a que mostraron encontrado en S. coelicolor (Angell et al.
una seal positiva en experimentos de 1992). Posteriormente y de manera
southern blot donde un fragmento que inesperada, se encontr que el perfil de
contena los genes sco2127 y glk se haba produccin de antraciclinas de las mutantes
usado como sonda radioactiva) era idntica a insensibles a RCC de SPVC transformadas
la secuencia del gen silvestre, confirmando nicamente con el gen sco2127 de S.
contundentemente (i) que las mutantes dogR coelicolor, era similar al de la cepa silvestre
no necesariamente tienen deleciones o (Guzman et al. 2005). Aunque estas
mutaciones puntuales en el gen glk, o en esa observaciones contrastaban con los
regin del cromosoma, y (ii) que ni el gen glk, resultados obtenidos en S. coelicolor (donde
ni la actividad asociada a su producto de el gen sco2127 por s solo era incapaz de
expresin (por si solos) son responsables del restablecer la RCC de algunas mutantes
31
dogR), apoyaban fuertemente la idea de que estreptomicetos contienen protenas con una
sco2127 jugaba un papel importante secuencia de aminocidos similar a la de la
(probablemente indispensable) en la protena sco2127.
regulacin por carbono(Angell et al. 1992; En cultivos de S. coelicolor crecidos en
Angell et al. 1994). Los estudios realizados medio mnimo y suplementados con glucosa
en SPVC, adicionalmente confirmaron que como nica fuente de carbono, se observ
existe una relacin directa entre el transporte que la protena sco2127 se expresa
de glucosa y la RCC, y probablemente principalmente durante la fase de crecimiento
tambin entre estos dos aspectos y el gen exponencial (Chvez et al. 2009), o visto de
sco2127, ya que nicamente las cepas otra manera, que se requiere cierta
transformadas con dicho gen y que haban concentracin de glucosa para que la
mejorado su capacidad de transporte con protena sco2127 pueda expresarse, lo cual
respecto a las mutantes dogR, recuperaron era consistente con su posible participacin
tambin su sensibilidad a RCC (Guzman et en el transporte y/o metabolismo de la
al. 2005). glucosa. Sin embargo, la expresin de
sco2127 en medio complejo mostr un
comportamiento distinto. En estas
EXPRESIN HETERLOGA Y
condiciones, la protena sco2127 no se
PURIFICACIN DE LA PROTENA
detect durante el inicio de la fermentacin
SCO2127
(donde haba plena disponibilidad de
En 2009, Chvez y colaboradores
glucosa), sino hasta la fase estacionaria de
clonaron y expresaron por primera vez el gen
crecimiento (donde la concentracin de
sco2127 de S. coelicolor en E. coli para
glucosa haba disminuido considerablemente
purificar la protena y poder investigar con
con respecto al inicio de la fermentacin)
mayor detalle su participacin en la RCC.
(Chvez et al. 2011). Este resultado sugera
Estos autores detectaron la presencia de la
que la expresin de la protena sco2127 no
protena sco2127 en extractos intracelulares
dependa nicamente de la concentracin de
tanto de S. coelicolor como de SPCV
glucosa (como se haba propuesto en
(Chvez et al. 2009). Adems de asegurar
trabajos anteriores), sino que estaba
que sco2127 es una protena soluble, esta
influenciada por la presencia de otros
observacin confirm que dicha protena
nutrientes en el medio de cultivo
conserva un alto grado de similitud entre
ambos organismos (hasta el 61% de similitud
en algunos fragmentos), y sugiri ENSAYOS DE INTERACCIN PROTENA-
fuertemente que su participacin en los PROTENA
estreptomicetos podra estar altamente La purificacin de la protena sco2127
conservada. De acuerdo con esto, es tambin permiti la realizacin de
importante sealar que nicamente los experimentos enfocados en demostrar su
32
posible interaccin con otras protenas. De Aunque estas observaciones tambin
acuerdo con algunas observaciones previas cuestionaron la participacin de sco2127 en
(Angell et al. 1992; Angell et al. 1994; Ramos el transporte o metabolismo de la glucosa, es
et al. 2004; Guzman et al. 2005), se importante destacar que las diferencias en
esperaba encontrar interacciones entre las conclusiones sobre de funcionamiento de
sco2127 y la glucosa cinasa o la glucosa sco2127 pueden deberse simplemente a
permeasa, sin embargo, Chvez y variaciones en las condiciones de
colaboradores demostraron que, en medio crecimiento. A pesar de esto, los estudios de
complejo, sco2127 nicamente se una (por interaccin protena-protena realizados en
separado) a las protenas codificadas por los medio complejo (Chvez et al. 2011)
genes sco5113 y sco2582 (Chvez et al. advirtieron por primera vez que la protena
2011). La protena SCO5113 (BldKB) es una sco2127 podra estar relacionada con la
protena de unin a ligando que pertenece a diferenciacin morfolgica en S. coelicolor.
un sistema de transporte tipo ABC que
permite la obtencin de un pptido necesario DELECIN DEL GEN sco2127 DE S.
para la diferenciacin morfolgica en S. COELICOLOR
coelicolor (Nodwell and Losick 1998). Debido Otro tipo de acercamientos que ofrecen
a que este tipo de protenas se han visto informacin relevante acerca del
involucradas en el transporte diversos funcionamiento de protenas hipotticas en
compuestos, incluyendo carbohidratos distintos procesos celulares es la delecin
(Holland and Blight 1999), y considerando dirigida del gen que las codifica. En este
que el funcionamiento de BldKB pueda verse sentido, la delecin del gen sco2127 de S.
favorecido con la interaccin BldKB-sco2127, coelicolor (Forero et al. 2012) fue
se plante la posibilidad de que BldKB fundamental para conocer su participacin en
tambin pudiera transportar glucosa, lo cual la RCC. La mutante sco2127 de S coelicolor
explicara la habilidad de sco2127 para mostr una disminucin (y no un incremento
restablecer el transporte de glucosa, y en como se esperaba) de hasta el 90% en la
consecuencia, la RCC de algunas mutantes formacin de actinorrodina con respecto a la
dogR de SPVC. Sin embargo, el transporte cepa silvestre (Tierrafra et al. 2016).
de glucosa a travs de BldKB no ha sido Adicionalmente, la mutante sco2127, as
comprobado experimentalmente. A diferencia como la cepa silvestre M145 mostraron una
de BldKB, la metalloproteasa codificada por disminucin similar en el perfil de produccin
el gen sco2582 ha sido poco estudiada, de actinorrodina al aumentar la concentracin
aunque recientemente se observ que de glucosa, ya sea en medio mnimo o en
tambin es necesaria para la formacin de medio complejo, lo cual sugiri que ambas
esporas en S. coelicolor (datos no cepas estaban sujetas a regulacin por
publicados). carbono (datos no publicados). Estos
33
resultados descartaron que el gen sco2127 o
su producto de expresin fueran los nicos CONCLUSIONES
responsables de la RCC, lo cual era Hasta donde sabemos, en esta revisin
consistente con lo reportado por Jimnez y hemos abordado todos los trabajos
colaboradores, quienes demostraron la relacionados con el estudio de la protena
ausencia de mutaciones puntuales o hipottica sco2127. Las deleciones y
deleciones en la secuencia del homlogo de complementaciones genticas en vectores de
sco2127 en las mutantes de SPVC diversas caractersticas, la clonacin y
resistentes a RCC (Jimnez et al. 2012). expresin de sco2127 en sistemas
heterlogos, la purificacin del producto de
expresin de dicho gen para la produccin de
ANLISIS FUNCIONAL DE LA MUTANTE
anticuerpos especficos, los ensayos de
SCO2127 USANDO DISTINTOS
interaccin protena-protena y recientemente
ACERCAMIENTOS A ESCALA GENMICA
la delecin del gen sco2127, complementada
Aunque la delecin del gen sco2127 de
con el anlisis de datos obtenidos mediante
S. coelicolor permiti descartar su
acercamientos a escala genmica, son solo
participacin en la RCC, la falta de similitud
algunas tcnicas usadas para tratar de
de sco2127 con protenas de funcin
comprender la participacin de sco2127 en la
conocida, as como la ausencia de dominios
fisiologa del actinomiceto modelo S.
funcionales en su secuencia, han impedido
coelicolor. Estos acercamientos han
conocer la funcin especfica de esta
descartado contundentemente la
protena. A pesar de esto, es posible analizar
participacin de sco2127 en el fenmeno de
las consecuencias de su delecin mediante
regulacin por carbono, sin embargo an se
el anlisis de datos obtenidos por distintos
desconoce la funcin especfica de esta
acercamientos a escala genmica. En
protena. Para abordar esta problema, y
nuestro laboratorio, recientemente se
tomando en cuenta que la protena sco2127
compararon los perfiles de expresin de
ya ha sido purificada (Chvez et al. 2009),
protena tanto de la mutante sco2127 como
nosotros creemos que es necesario
de la cepa silvestre mediante espectrometra
cristalizar dicha protena para poder realizar
de masas y se demostr que la produccin
anlisis estructurales. En la literatura existen
de actinorrodina en la mutante 2127 de S.
varios casos de protenas que muestran
coelicolor est mediada por un estrs
homologa estructural con otras protenas de
oxidativo que depende a la vez de la
funcin conocida, a pesar de que su
expresin del regulador de respuesta
secuencia de aminocidos sea totalmente
SCO0204. Sin embargo, se requieren
distinta. Estos estudios representan una
estudios adicionales para poder explicar por
alternativa para el estudio de protenas
qu la delecin del gen sco2127 genera un
difciles de caracterizar y pueden ofrecer
estrs oxidativo.
34
pistar adicionales acerca de su CW, Collins M, Cronin A, Fraser A,
funcionamiento. Goble A, Hidalgo J, Hornsby T, Howarth
Abreviaturas: S, Huang C-H, Kieser T, Larke L, Murphy
RCC: Regulacin catablica por carbono. L, Oliver K, ONeil S, Rabbinowitsch E,
dog: 2-desoxiglucosa Rajandream M-A, Rutherford K, Rutter S,
dogR: Resistencia a dog Seeger K, Saunders D, Sharp S,
dogS: Sensibilidad dog Squares R, Squares S, Taylor K, Warren
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UNAM. Se agradece el Apoyo Econmico del doi: 10.1038/417141a
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Revista 2016 V20 n3

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