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Manual de

MICROBIOLOGA y
PARASITOLOGA
MEDICA
7ma. Edicin

ERRNVPHGLFRVRUJ
Arqumedes Canese
Doctor en Medicina y Ciruga,
Facultad de Ciencia Mdicas de la Universidad Nacional de Asuncin, Paraguay

Profesor Emrito de la Universidad Nacional de Asuncin

Andrs Canese
Bioqumico
Facultad de Ciencias Qumicas de la Universidad Nacional de Asuncin, Paraguay

Master en Enfermedades Parasitarias Tropicales


Departamento de Parasitologa Universidad de Valencia, Espaa
1' Edicin: 1983
2" Edicin: 1985
3" Edicin: 1988
4" Edicin: 1996
5' Edicin: 2000
6' Edicin: 2005
7" Edicin: 2012

2012 Edicin hecha por Andrs Canese


General Daz 970
Asuncin, Paraguay.
TELEFAX: 595 21 493295
Email : acanese@click,com.py
Nmero de registro : 44.327
Certificado ele depsito legal 69 l O
ISBN 978-99953-2-526-8

Prohibida la reproduccin total o parcial del texto.


PREFACIO
La Microbiologa es una ciencia muy dinmica, de continuos cambios. En los ltimos 1 O aos, han Ocu
rrido cosas nuevas muy importantes en las enfermedades ocasionadas por los microorganismos. Para muchos
microorganismos se ha modificado la realidad, con respecto a la epidemiologa, la aparicin de cepas mutantes,
el aumento de la resistencia a los antimicrobianos, el diagnstico, la prevencin y el control. El contexto de hoy,
para estos microorganismos, es muy distinto a! de hace algunos aos, lo cual exige actualizacin a los profesio
nales de la salud, encargados de las distintas tareas de diagnstico, tratamiento, vigilancia, prevencin y control
de las enfermedades infecciosas.

La carga que producen a la humanidad algunos microorganismos ha disminuido notoriamente. La mala


ria se ha reducido a niveles insospechadamente bajos gracias a una accin enrgica mundial en la prevencin por
medio de la utilizacin de mosquiteros impregnados con insecticidas. Las enfennedades producidas por los virus
del sarampin, la rubola, la poliomielitis y la rabia han disminuido a niveles casi cercanos a la erradicacin,
gracias a las campaas de vacunacin masiva emprendidas por los distintos pases y por la Organizacin Mun
dial de la Salud. Si las medidas de control emprendidas continan, probablemente en los prximos aos se podr
concretar la erradicacin de Dracunculus med;nensis, la cual sera la segunda, despus de la viruela. A pesar de
que no se puede hablar de una cura total, el tratamiento para el virus de la inmunodeficiencia humana ha progre
sado notablemente en los ltimos aos, disminuyendo la morbilidad y la mortalidad de las personas infectadas y
probablemente la transmisin del virus. As mismo las campaas masivas de tratamiento, han permitido la dismi
nucin evidente de los casos de parasitacin por geohelmintos y de ceguera en la oncocercosis.

No obstante, otros microorganismos han aumentado su dao producido a la humanidad. El nmero de


casos de dengue ha aumentado en forma casi exponencial en los ltimos aos. Muchas bacterias, entre las que
resaltan las enterobacterias, los estafilococos y los enterococos, han desarrollado multiresistencia a todos los
antimicrobianos conocidos, complicando el manejo teraputico de los pacientes, sobretodo de los hospitalizados.
Han aparecido cepas resistentes de Plasmodium a los artesunatos, obligando a realizar esquemas de tratamiento
de drogas combinadas. La Leishmaniosis visceral es una patologa para la que an no se han podido concretar
medidas de control eficaces y a pesar de los esfuerzos conjuntos, ha mantenido siempre un crecimiento constante
y una elevada letalidad.

En Paraguay, la realidad de las enfermedades infecciosas tambin ha cambiado en fonna determinante.


Por un lado el dengue ha producido una serie de epidemias severas con preocupante mortalidad y la fiebre amari
lla ha reaparecido despus de dcadas de estar dormida. Por otro lado, hace ms de un ao que no se detectan
casos autctonos de paludismo y la Regin Oriental ha certificado, desde el ao 2008, la eliminacin de la trans
misin vectorial del mal de Chagas.

La sptima edicin del Manual de Microbiologa y Parasitologa Mdica ha tenido un cambio funda
mental en su esti'uctura. Se le ha dado una forma ms amigable para el estudio y la interpretacin, en base a los
aos de experiencia en la docencia. El enfoque del libro sigue siendo para estudiantes de Ciencias de la Salud,
con un contenido de carcter sencillo y prctico. Se ha cambiado el esquema de las ediciones anteriores, conden
sando algunos captulos afines. Tambin se han introducido cambios en el orden de los ternas. A diferencia de
las ediciones anteriores, la actual edicin comienza con una breve introduccin, seguida de la parte de inmuni
dad. Tambin se han introducido cambios en algunas de las figuras, a fin darle un entendimiento ms gil. El
libro, como siempre, abarca todos los microorganismos, nematodos, artrpodos y serpientes de inters mdico,
pero poniendo nfasis en los de mayor relevancia del Paraguay. Los captulos del libro van describiendo los dis
tintos microorganismos patgenos o no, su morfologa, ciclo biolgico, clnica, diagnstico, tratamiento y profi
laxis, entre otros temas para cada uno de ellos.

Durante la elaboracin de la sptima edicin nos ha dejado el profesor Arqumedes, pionero de la Mi


crobiologa en Paraguay, maestro de muchas generaciones de profesionales que lo tienen como referencia y autor
de este libro, en todas sus ediciones anteriores. El inmenso legado que nos ha dejado, con su ejemplo de vida, ha
quedado como una luz gua para las futuras generaciones.

Andrs Canese
INDICE DE CAPTULOS
SECCIN 1: INTRODUCCIN 8. LABORATORIO DE MICROBIOLOGA 1: EQUIPA
MIENTO, ESTERILIZACIN Y DESINFECCIN. Mi
1. HISTORIA DE LA MICROBIOLOGA. Alcance de la croscopios. Autoclave. Estufa de esterilizacin por calor
microbiologa. Hitos histricos en la microbiologa. - 3 seco (hornos). Estufas de cultivo. Equipos para ,maerobios.
Centrfugas. Accin de los agentes fsicos y qumicos sobre
2. MICROORGANISMOS Y PARSITOS. Procariotas y !os microorganismos. - 89
eucariotas. Taxonoma de !os seres vivos. La microbiologa
de las enfermedades infecciosas. Relaciones entre los seres 9. LABORATORIO DE MICROBIOLOGA 11: MTO
vivos. Entrada y salida de microorganismos. Mecanismos DOS DE OBSERVACIN DIRECTA. Mtodos de dia
desarrollados durante la infeccin. Tipos de infeccin. Fac gnstico directo. Mtodos de diagnstico indirecto. Valor
tores que determinan las infecciones humanas. Enfermeda diagnstico de los mtodos. Toma de muestras para anlisis
des infecciosas en [a poblacin. - 7 microbiolgico. Exmenes de observacin directa. Colora
ciones empleadas. Mtodos de exmenes de sangre para
protozoarios. Otros mtodos de diagnstico para protozoa
rios. Mtodos de diagnstico para protozoarios y helmintos
SECCIN 11: INMUNIDAD
intestinales. - 97
3. BARRERA E INMUNIDAD INESPECFICA. Tipos de
inmunidad. Barreras fsicas y qumicas. Inmunidad inespcc
fica. Complemento. Molculas de adhesin intercelular. 10. LABORATORIO DE MICROBIOLOGA lll: MTO
lnterferones. Protenas de fase aguda. Mediadores de la DOS DE CULTIVO. Caracterstica de los mtodos de culti
inflamacin. Clulas del sistema inmune. Clulas fagocti vo. Preparacin y control de los medios de cultivo. Mtodos
cas. Clulas no fagocticas. Accin de la inmunidad ines de siembra. Mtodos de aislamiento. Identificacin bacteria
pecfica en conjunto. - 19 na. Cultivo para hongos. Cultivo para virus. - 111

4. INMUNIDAD ESPECFICA. Sistema linfoide. Clulas 1 1. LABORATORIO DE MICROBIOLOGA IV: PRUE


linfoides. Complejo mayor de histocompatibilidad. Clulas BAS SEROLGICAS INDIRECTAS. Definiciones bsicas.
presentadoras de antgeno. Formacin de los anticuerpos. Reacciones serolgicas. Aglutinacin. Reaccin de fijacin
Citocinas. Accin coordinada de la inmunidad. lnmunoglo de complemento. Reacciones de precipitacin. Inmtm"afluo
bulinas. Accin de los anticuerpos. Accin de los receptores resccncia. Microscopio de inmunofluorescencia. Tipos de
T. lnmunidad celular mediada por anticuerpos. Respuesta reacciones de inmunofluorescencia. Reacciones inmunoen
inmune. Ontogenia de las inrnunoglobulnas. Anticuerpos zimticas. Radioinmunoensayo (RIA). Otras reacciones
monoclonales. - 31 antgeno-anticuerpo. - 117

5. PROCESOS INMUNITARIOS. Inmunidad frente a los 12. MICROORGANISMOS 1: BACTERIAS. Morfologa.


virus. Inmunidad frente a las bacterias. Inmunidad frente a Formas bsicas. Estructuras externas. Estructuras internas.
los hongos. Inmunidad frente a protozoarios y helmintos. Reproduccin y gentica. Cambios de la estructura bacteria
lnmunosupresin. Inmunodeficiencias. Deficiencias prima na. Replicacin, transcripcin y traduccin del genoma bac
rias de linfocitos B. Deficiencias primarias en linfocitos T. teriano. Ingeniera gentica microbiana. Metabolismo bacte
Inmunodeficiencias secundarias. Deficiencias del comple riano. Desarrollo bacteriano. Bacterifago. Clasificacin de
mento. Deficiencias de los fagocitos. Regulacin de la res las bacterias. - 132
puesta inmune. - 55
13. MICROORGANISMOS 11: EUCARIOTAS Y VIRUS.
6. HIPERSENSIBILIDAD. Clasificacin. Hipersensibilidad Hongos. Virus. Protozoarios. Cestodos. Trematodos. Nema
de tipo 1 (anafi!ctica). Drogas moderadoras de anafilaxia. todos. - 148
Diagnstico de la hipersensibilidad atpica relacionada con
la lgE. Hipersensibilidad del tipo 11 (citotxica). Hipersensi 14. ANTIMICROBIANOS E INFECCIONES NOSOCO
bilidad de tipo 111 (complejo inmune). Hipersensibilidad de MIALES. Antimicrobianos para infecciones producidas por
tipo IV (retardada por linfocitos T). - 66 bacterias y hongos. Resistencia a los antimicrobianos. Prue
bas de sensibilidad a los antirnicrobianos. Frmacos antvri
cos. Frmacos antiprotozoarios. Frmacos antihelmnticos.
7. INMUNlZACIONES. Vacunas. Vacunacin. Vacunas de
uso humano. Sueros. G!obulinas sricas humanas inmunes lnfecciones nosocomiales. - 160
(GSI). lnmunopotenciacin. Toxinas y antitoxinas. Carac
tersticas de las endo y exotoxinas. Caractersticas de algu SECCIN IV: BACTERIAS
nas endotoxinas. Accin biolgica de la endotoxinas. Dosifi
cacin de toxinas y antitoxinas. - 77 15. COCOS DE INTERS MDICO. Familia Micrococca
ceae. Clasificacin. Gnero Staphylococcus. Familia Strep
tococcaceae. Gnero Aerococcus. Gnero Streptococcus.
Gnero Enterococcus y afines. Estreptococos anaerbicos y
SECCIN 111: EL LABORATORIO DE MICRO
gnero Peptoestreptococcus. Familia Neisseaceae. Gnero
BIOLOGA

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11

Neisseria. Clasificacin. Neisseria meningitidis. Neisseria Chlamydiales. Gnero Chlamydia, Chlamydia psittaci.
gonorrhoeae. Neisseria no patgenas y opo1tunistas. - 177 Chlamydophila pneumoniae. Orden Mycoplasmatales, - 252

16. FAMILIA ENTEROBACTERIACEAE. Gnero Escheri SECCIN V: HONGOS.


chia. Gnero Edwarsiella. Gnero Citrobacter. Gnero Sal
monella. Gnero Shigella. Gnero Klebsiella. Gnero Ente 23. MICOSIS CUTNEAS SUPERFICIALES. Dennatofi
robacter. Gnero Serratia. Tribu Proteeae. Gnero Yersinia. tos. Otros agentes de micosis cutneas. Gnero Malassezia.
- 194 Piedraia Hortae. Trichosporum beigeli. Cladosporium wer
neckii. - 261
17. FAMILIA VIBRIONACEAE Y BACILOS GRAM NE
GATIVOS FACULTATIVOS DE UBICACIN INCIER 24. MICOSIS SUBCUTNEAS. Sporothrix schenckii.
TA. Gnero Vibrio. Gnero Aeromonas. Gnero Plesiomo Agentes de micetoma. Agentes de cromomicosis. Feohifo
nas. Bacilos Gram negativos facultativos de ubicacin in micosis. Lacazia loboi. - 268
cierta. Gnero Haemophilus. Gnero Pasteurella. Chromo
bacte'rium violaceum. Gnero Flavobacterium. Gnero Acti 25. MICOSIS SISTMICA. Paracoccidioides brasiliensh,.
nobacillus. Cardiobacterium hominis. Streptobacillus moni Blastomyces dermatitides. Cryptococcus neoformans. Histo
l(formis. Familia Legionellaceae. Gnero Capnocytophaga. plasma capsulatum. Histoplasma capsulatum variedad du
Gardnerella vagina/is. Gnero Branhamella. Gnero Mo boisi. Coccidioides immitis. - 273
raxella. Gnero Acinetobacter. Gnero Kingella. Gnero
Afipia. - 205 26. HONGOS OPORTUNISTAS. Candida albicans. Gne
ro Aspergillus. Gnero Penicillium. Gnero Scopulariopsis.
18. PSEUDOMONAS Y BACILOS GRAM NEGATIVOS Gnero Fusarium. Gnero Cladosporium. Gnero Acremo
NO FERMENTADORES. Gnero Pseudomonas. Pseudo nium. Torulopsis Glabrata. Geotrichum candidum. Gneros
monas aeruginosa. Gnero Burkholderia. Burkholderia Rhodotorula y Chromotorula. Gnero Chrysosporium.
mallei. Burkholderia cepacia. Burkholderia pseudomal/ei. Pneumocystis jiroveci. Microsporidia. Hongos oportunistas
Stenotrophomonas maltophilia. F'rancise/la tularensis.
Gnero Alca/igenes. Eikenella corrodens. Achromobacter
poco frecuentes. - 280
xylosoxidans. Gnero Brucella. Gnero Bordetella. 214
SECCIN VI: VIRUS
19. ORDEN SPIROCHAETALES. Treponema pallidum,
subespecie pallidum. Treponema pallidum, subespecie p e r
27. GRUPO ARBOVIRUS Y DEMS VIRUS DE LAS
FAMILIAS TOGAVIRIDAE. FLAVIVJRIDAE, BUNYAVIRJ
tenue. Treponema pallidum, subespecie endemicum. Trepo
DAE Y REOVIRIDAE. Familias del grupo Arbovirus. Enfer
nema carateum. Treponema vincenti. Gnero Borrelia.
Gnero Leptospira. Spirillum minar. Gnero Campylobac
medades humanas pOr ArboviruS. Virus de la fiebre amari
ter. Helicobacter pylori. - 222
lla. Virus del dengue. Virus Chikungunya. Virus del Nilo
oeste. Hantavirus. Fiebre por garrapata del Colorado. Cua
dros febriles menos frecuentes. Gnero Rotavirus, Gnero
20. BACILOS GRAM POSITIVOS, ACTINOMICETOS Y Rubivirus. Virus de Rubola. - 291
BACTERIAS ANAEROBIAS. Familia Bacil/aceae. Gne
ro Bacillus. Bacillus anthracis. Bacillus cereus. Otros baci 28. VIRUS ADN. Familia Poxviridae. Gnero Orthopoxvi
los del gnero Bacillus. Gnero Clostridium. Clostridium rus. Virus de la viruela humana. Gnero Parapoxvirus.
tetani. Clostridium 'botulinum. Clostridium perf ingens.
Gnero Molluscipoxvirus. Molluscum contagioswn. Gnero
r

Clostridium difficile. Otras especies de Clostridium. Actino


Yatapoxvirus. Familia Herpesviridae. Subfamilia Alphaher
micetos. Dermatophilus congolensis. Gnero Listeria. E1ysi pesvirinae. Virus del Herpes simple. Virus de Varicela
pelothrix rhusopathiae. Bacterias Corineiformes, Co,yne
Herpes Zoster. Subfamilia Betaherpesvirinae. Citomegalo
bacteriwn diphtheriae. Co,ynebacterium tenuis. Corynebac
terium minutissimun. Corynebacterium urealyticum. Cmy
virus. Herpes virus humano 6 (HVH6). Herpesvirus humano
7 (HVH7). Herpesvirus humano 8. Subfamilia Gammaher
nebacterium jeikeium. Co1ynebacterium pseudotubercu/osis,
pesvirinae. Herpesvrus EB (Virns de Epstein-Barr). Familia
Cmynebacterium ulcerans. Gnero Brevibacterium. Gnero
Adenoviridae. Adenovirus. Familia Papovaviridae. Gnero
Oerskovia. Gnero Turicella, Arcanobacterium haemolyti
Papillomavirus. Gnero Polyomavirus. Familia Parvoviri
cum. Bacterias anaerbicas. Bacilos Gram negativos anaero
dae. Parvovirus. Adenoasociadovirus (Dependovirus). - 299
bios no esporulados. Gneros Bacteroides, Prevotella y
Porphyromonas. Gnero Fusobacterium. Bacilos Gram
positivos anaerobios no esporulados. Gneros Propionibac 29. VIRUS RESPIRATORIOS. Familia Orthomyxoviridae.
terium, Eubacteriwn, Bifidobacterium, Lactobacillus, Rot Gnero Injluenzavirus. Familia Paramyxoviridae. Gnero
hia y Mobiluncus. - 230 Paramyxovirus. Parainfluenzavirus. Virus de la parotiditis.
Gnero Morbillivirus. Virus del sarampin. Gnero Pneu
movirus. Virus sincitial respiratorio. Virus de Nipah y Hen
21. GNERO MYCOBACTER/UM. Micobacterias patge
nas de los grupos A y B, Mycobacterium tuberculosis, My dra. Coronaviridae. Gnero coronavirus. - 307
cobacteriwn bovis y otras micobacterias. Mycobacterium
leprae. - 246 30. FAMILIAS RHABDOVIRIDAE, FILOVJR!DAE Y ARE
NAVJRIDAE. Familia Rhabdoviridae. Gnero Vesiculovirus,
Gnero Lyssavirus. Virus de la rabia. Virus de Mokola.
22. RDENES RJCKETTSIALES, CHLAMYDJALES Y
Familia Filoviridae. Virus de Marburg. 'Virus bola. Familia
MYCOPLASMATALES. Orden Rickettsiales. Rickettsia,
Arenaviridae, Virus de la coriomeningitis linfocitaria. Virus
Coxiella, Orientia, Ehrlichia y Bartonel!a. Gnero Ehrli
chia. Gnero Barfonel/a. Bartonel[a Bacilliformis. Orden
de la fiebre de Lassa. Virus de !as fiebres hemorrgicas. -
312

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111

ittaci. 3 ! . FAMILIAS HEPADNA VJRJDAE, PICORNA VJRIJJAE. Dipylidiwn caninum. Gnero Hymenolepis. Hymeno[epis
- 252 CALJCJVJRJDAE Y FLA VJVJRIJJAE: VIRUS DE LAS nana. Hymenolepfa diminuta. Gnero Echinococcus. Echi
HEPATITIS Y OTROS VIRUS. Virus de Hepatitis. Familia nococcus granulosus. Echinococcus mu/tilocu/aris. Echino
Picornaviridae. Gnero Enterovirus. Po!iovirus. Coxsackie coccus vogeli. Echinococcus oligarthrus. - 377
virus. Enterovirus 68/7 1 . Gnero Cardiovirus. Gnero Rhi
atoti novirus. Familia Caliciviridae. Virus de la Gastroenteritis 39. TREMATODOS, Fasciola hepatica. Opistorchis ji?.li
sezia. humana. - 318 neus. Fasciolopsis buski, Echinostoma ilocanum. Opistor
wer- chis sinensis. Heterophyes heterophyes. Gnero Plagiorchis.
32. FAMILIA RETROVJRJDAE. VIRUS ONCOGNICOS. Gnero Paragonimus. Paragonimus westermani. Gnero
PRIONES Y ENCEFALOPATAS ESPONGIFORMES. Schistosoma. Dermatitis por cercara. - 386
nckii. Familia Retroviridae. Virus de !a inmunodeficjencia humana
)hifo- (VJH). Virus de Leucemia humana de clulas T. Virus on 40. NEMATODOS DE LA SANGRE Y LOS TEJIDOS.
cognico. Priones y cncefalopatas espongiformes. - 325 Trichinella spira/is. Gnero Capillaria. Dioctophyma rena
le. Dracunculus medinensis. Familia Filariidae. Angiostron
ensis. SECCIN VII: PROTOZOARIOS gylus cantonensis. Angiostrongylus costaricensis. - 392
'isto
d du- 33. FLAGELADOS Y CILIADOS DE LAS MUCOSAS. 4 ! . NEMATODOS INTESTINALES. Trichuris trichiura.
Flagelados de las mucosas. Flagelados parsitos. Giardia Strongyloides stercoralis. Familia Ancylostomatidae. Larva
lamblia. Trichomonas vagina/is. Flagelados no patgenos. migrante cutnea. Trichostrongylus. Enterobius vermicula
Jne Ciliados de las mucosas. Balantidiwn coli. - 335 ris. Familia Ascarididae. Ascaris !umbricoides. Gnero
opsis. Toxocara. Lagochilascaris minar. Gnero Anisakis y afines.
"emo 34. FLAGELADOS DE LA SANGRE Y LOS TEJIDOS. - 400
neros Leishmaniosis. Agentes de Leshrnaniosis rnucocutnea.
rium. leishmania braziliensis. Leishmania panamensis. Agente de SECCIN IX: ARTRPODOS
nistas Leishmaniosis cutnea. Leishmania tropica. Leishmania
majar. Leishmania aethiopica. Leishmania infantum. Leish 42. ARTRPODOS: CLASE CRUSTACEA, DJPLOPODA,
mania mexicana. Leishmania amazonensis. Leishmania ClJJLOPODA Y ARACHNJDA. Generalidades de A,trpo
venezuelense. Leishmania p{fanoi. leishmania braziliensis. dos. Clase Crustacea. EucOpepoda. Decapada. Pentastomi
Leishmania guyanensis. Leishmania panamensis. Leishma da. Diplopoda. Chilopoda. Scorpionida. Araneida. Gnero
nia peruviana. Agentes de la leishmaniosis visceral. Leish Loxosceles. Gnero Latrodectus. Gnero Phoneutria. Gne
LAS
mania donovani. Leishmania infantum. Gnero T,ypanoso ro Ctenus, Gnero Lycosa. Clave de araas venenosas de
VJRJ
ma. liypanosoma cruzi. T1ypanosoma brucei gambiense. Amrica del Sur. Garrapatas. caros. Suborden Astigmata.
Trypanosoma brucei rhodesiense. - 340
nfer
mari Suborden Prostigm'ata. Suborden Mesostigmata. - 413

35.AMEBAS Y PROTOZOARIOS DE CLASIFICACIN


Nilo
Cua 43. CLASE INSECTA. Caractersticas de los insectos. Or
nero CONTROVERTIDA. Amebas del tubo digestivo humano. den Anoplura. Orden Dictyoptera. Orden Cimicidae. Subfa
Entamoeba histolytica. Amebas comensales intestinales. milia Triatominae. Coleoptera. Hymenoptera. Lepidoptera.
Amebas de vida libre. Agentes de meningoenccfalitis. Gne Gneros Aedes, Anopheles y Culex. Familia Psychodidae.
ro Naegleria y Acanthamoeba. Protozoarios de clasificacin Familia Ceratoponidae. Familia Simulidae. Suborden Bra
1oxvi controvertida. Blastocystis hominis. Rhinosporidium seeberi.
virus. chycera. Moscas hematfagas. Moscas no hematfagas.
tuero
- 352 Miasis humana. Orden Siphonaptera. - 421
aher
SECCIN X: SERPIENTES
icela 36. TOXOPLASMA GONDII Y COCCIDIOS INTESTINA
LES. Gnero Jsospora. Gnero Cryptosporidium. Cyclospo
ra cayetanensis. Gnero Sarcocystis. - 360
galo
mano 44. SERPIENTES VENENOSAS DE AMRICA DEL
aher SUR. Caractersticas diferenciales de las serpientes. - 435
milia 37. PLASMODIUM Y BABESIA. Gnero Plasmadium.
bnero Gnero Babesia. - 369

299
'JVri-
SECCIN VIII: HELMINTOS

idae. 38. CESTODOS. Diphyllobothrium latum. Esparganosis.


nero Gnero Taenia. Taenia solium. Taenia saginata. Cenurosis.
<litis.
)neu
Hen-

4RE
,irus.
kola.
milia
Virus
:as. -

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SECCIN 1

INTRODUCCIN

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Captulo 1

HISTORIA DE LA MICROBIOLOGA
Este libro trata sobre los microorganismos patge La ingeniera gentica comprende tcnicas que modifican la
nos que pueden producir enfermedades humanas, no obstan estructura gentica de los organismos (principalmente los
te no debemos perder de vista el complejo mundo de los microorganismos) para la produccin masiva de hormonas,
microorganismos y las contribuciones de los mismos para drogas y sustancias nuevas.
mantener el medio ambiente y por ende intervenir en forma
decisiva en el mantenimiento de toda la vida en la tierra. A HITOS HISTRICOS EN LA MICROBIOLOGA.
pesar de que los microorganismos son !as criaturas ms
pequeas, !a influencia de !as mismos es enorme. Se los La microbiologa, corno un todo, con sus ciencias
encuentra por todas partes y habitan todos los ambientes de que abarca: bacteriologa, micologa, parasitologa, virolog
la tierra. Se los localiza debajo del hielo de los polos, a lO a e inmunologa, es una ciencia relativamente nueva, la
km de profundidad en el mar, en las aguas termales, en los cual se fue afianzando recin a partir de los inicios del siglo
efluentes de desechos txicos y hasta en las nubes. A pesar XIX. En el pasado, el conocimiento de la esencia de las
de que habitualmente se piensa que son los vegetales los cosas provena del saber emprico, el cual estaba muy in
responsables de la produccin del oxgeno en la tierra, son fluenciado por los dogmas religiosos y filosficos. Antigua
los microorganismos fotosintticos (incluyendo a las algas) mente las enfermedades eran consideradas como de origen
!os principales contribuyentes del oxgeno atmosfrico con sobrenatural y su tratamiento generalmente se buscaba por
ms del 50% de la fotosntesis terrestre (varias veces ms medio de sacrificios y purificaciones destinadas a aplacar la
importante que toda la cuenca del Amazonas). Por otro lado furia de los dioses.
estimaciones recientes basadas en peso y nmero, determi
naron que alrededor del 50% de todas la formas de vida
Primeras nociones sobre el concepto de las enfer
(principalmente microorganismos) se encuentran en la capa
medades contagiosas. A pesar de carecer de medios para
superficial del suelo, los sedimentos y las rocas, evidencian
observar e identificar a los microorganismos, el concepto
do la tremenda fuerza de los microorganismos en el clima y
del contagio de las enfermedades infecciosas, en la antige
formacin de los suelos.
dad, no era totalmente desconocidos, lo cual se encontraba
reflejado en las normas de higiene de esa poca. Una mues
ALCANCE Dll LA MICROBIOLOGA tra de ste conocimiento bsico figura en el Antiguo Testa
mento, en el cual se relata que los leprosos deban vivir
La microbiologa es una rama de !a biologa que fuera de las ciudades para evitar, de esta manera, que conta
trata sobre !as formas de vida que no son visibles sin un giaran su enfennedad a otras personas. Adems deban lle
aumento. Los organismos microscpicos son denominados, var campanillas o sonajeros para anunciar su presencia
por lo tanto, microorganismos o microbios, si bien la micro cuando se desplazaban por los caminos. Los sacerdotes eran
biologa suele abarcar tambin los que pueden ser observa los que se encargaban de confirmar el diagnstico de la
dos simple vista sin la ayuda de lupas ni microscopios, co enfermedad, as como tambin de certificar la curacin de la
mo los helmintos, los artrpodos y hasta las serpientes. misma. Esto demuestra que ya en esa poca se tena el con
cepto de que dicha enfermedad era transmitida desde las
La microbiologa es una de las especialidades ms personas enfermas a las personas sanas. De los relatos ms
grandes y complejas de la biologa, porque integra partes de antiguos que se conocen, en las "Leyes de Eshnunna" de
diferentes disciplinas, como la gentica, la fisiologa, la los pueblos que habitaron la Mesopotamia, ! 800 aos AC,
epidemiologa, entre otras. Por otro lado, la microbiologa se puede leer, con relacin a la transmisin de la rabia, que
actualmente se ha subdividido en varias especialidades. Hoy si un perro estaba enfermo y si las autoridades se lo haban
en da no es raro que un microbilogo se especialice en un notificado; si ste no lo recoga y el perro morda a una
solo tipo de microorganismo. Los avances en la microbio persona que posteriormente mora a consecuencia de ello, el
loga han guiado a un mejor entendimiento de muchos prin dueo deba pagar una multa. De igual forma, con respecto
cipios biolgicos, relacionados con la qumica de la vida, la a la rabia, Cornclius Celso, en el primer siglo de nuestra
herencia y los ciclos metablicos de nutrientes, minerales y era, ya haba prescrito un tratamiento, que consista en la
gases. Actualmente son comunes las especializaciones de la incisin inmediata de la herida causada por la mordida y la
microbiologa con nfasis en distintas ciencias o ramas cauterizacin de la misma con un hierro al rojo.
como: clnica, inmunologa, salud pblica, epidemiologa,
ambiente, industria, agricultura, agua, alimentos, etc. En Primeras nociones sobre los microorganismos.
nuestros das las dos ramas de mayor desarrollo e impacto En forma muy temprana, Varro, en el siglo II AC, ya haba
econmico de la microbiologa son la biotecnologa y la referido que existan enfermedades producidas por
ingeniera gentica. La biotecnologa abarca el entendimien "criaturas" que causaban enfermedades, creencia comparti
to de todo proceso utilizado por el ser humano y que involu da tanto por los griegos como por los romanos, en ese en
cra al metabolismo de microorganismos para consecucin tonces. Mucho tiempo despus, en el siglo XH DC, Roger
de un producto deseado, desde la fabricacin de productos Bacon tambin sostuvo que existan "criaturas invisibles"
alimenticios, hasta la elaboracin de molculas para dia que eran causantes de enfermedades. Ya en el ao 1 546, de
gnstico y tratamiento humano. Es una herramienta muy igual forma, Fracastoro de Verona, hablaba del_contagium
ulizada en la industria para producir grandes cantidades de vivum como causa de las enfermedades. Basndose en sus
sustancias como cerveza, vino, medicamentos y protenas. observaciones sobre la sfilis y otras enfermedades, sostena

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4 - Introduccin

que las mismas eran contagiosas, tanto por el contacto direc polvo suspendido en el aire contena los microorganismos
to interhumano como por las partculas vehiculizadas por el que luego se desarrollaban cuando encontraban los medios
aire, causando en el individuo sano, la misma enfermedad nutritivos adecuados para su reproduccin. Pasteur tambin
que padeca el enfermo que lo contagi. realiz trabajos sobre fermentacin alcohlica, actica y
butrica, demostrando la existencia de microorganismos
Generacin espontnea versus microorganismos. La vivos productores de dichos procesos. Demostr que el ca
idea de la generacin espontnea se bas en las opiniones de lentamiento, a 63" C durante media hora de los jugos de
Aristteles (384 - 322 AC) quien haba dicho que los ani uvas, seguido de un enfriamiento rpido, evitaba la fermen
males podan originarse del suelo. Tambin existen relatos tacin deficiente o mala, en la produccin de vino.
en el Antiguo Testamento en el que se describe la produc
cin de abejas a pmiir de la miel. Durante siglos se crey Descubrimiento de la relacin entre las enfermeda
que se podan generar gusanos, en forma espontnea, por des infecciosas y los microorganismos. Recin a partir del
exposicin de b. carne al calor en el aire. Mucho tiempo ao 1800, con la revolucin indui;trial, se pudo disponer de
tuvo que pasar hasta que Francesco Redi ( l 626 - 1697) microscopios ms perfeccionados, lo cual permiti grandes
demostr que la formacin de gusanos en la carne en putre avances en la microbiologa y la relacin de los microorga
faccin, segn la teora de la generacin espontnea, se im nismos con !as enfermedades. As, Agostino Bassi, a co
peda al protegerla con una gasa, debido a que con ella se mienzos del siglo XIX, demostr que un hongo
evitaba que las moscas desovaran sobre ella. De igual forma (posteriormente denominado Bottytis bassiana en su nom
fueron refutadas la produccin espontnea de ratones y otras bre) era el causante de la enfermedad de los gusanos de
formas similares de vida a partir de la basura. Sin embargo seda. En 1847 Semmelweis sugiri el origen infeccioso de
la demostracin de Redi no fue aceptada por todos. las enfermedades puerperales, preconizando el lavado de las
manos con el cloruro de sodio. Oliver Wendell Holmes, en
La idea de la generacin espontnea volvi a cobrar la dcada de 1840, plante que la fiebre puerperal era causa
fuerza con el descubrimiento de los microorganismos. En da por microorganismos acarreados de una madre a otra por
1676, Anton Van Leeuwenhoek, comunicaba a la Royal el personal de salud. Finalmente Joseph Lister, fue quien
Society de Londres la observacin de formas bacterianas, indic la utilidad de los antispticos, a finales de la dcada
mediante un microscopio de lentes de vidrio, que el mismo de 1870, demostrando la reduccin de las enfermedades
construy, con el que pudo observar bacterias esfricas, en infecciosas en los hospitales al rociar las salas de operacio
formas de bastones y en espiral, as como tambin protozoa nes con fenol acuoso y en 1887 emple la antisepsia en ci
rios y hongos filamentosos y levaduriformes. Posteriormente ruga utilizando soluciones de fenal y bicloruro de mercurio
en 1678 Rohert Hooke desarroll y perfeccion el micros como bactericidas.
copio compuesto, mediante el cual corrobor los hallazgos
de Van Leeuwenhock. Un tiempo despus, en 1749, John En el siglo XIX, se fueron sucediendo los descubri
Needhan, al observar la presencia de microorganismos en la mientos en la microbiologa. Con respecto a los helmintos o
carne en proceso de putrefaccin, postul nuevamente el gusanos parsitos, en 1835 Owen describi al nematodo
concepto de la generacin espontnea para los microorganis Trichinella spiralis, en 1851 Bilharz descubri Schistosoma
mos, hecho sealado tambin, 100 aos ms tarde en 1859, haematobium e Hymenolepis nana, en 1853 Von Siebold
por Pouchet. describi al cestodo Echinococcus granu!osus. En lo que
concierne a los protozoarios parsitos, en 1857 Lamb iden
Varios investigadores contribuyeron con evidencias en tific a Giardia lamblia, en 1875 LOsch descubri a Enta
contra de la generacin espontnea. Entre ellos Lzaro Spa moeba histo/ytica y en1880 Laveran descubri el agente del
llanzani (1729 - 1799), quien hirvi caldo de carne en un paludismo. Algunos de los descubrimientos ms resa!tantes
frasco, el cual sell despus hermticamente, demostrando de las bacterias agentes de enfermedades fueron los de
que no se contaminaba de esta forma. Frente a este hecho, Klebs y LOeffler, quienes en 1884 describieron al bacilo
los partidarios de la teora de la generacin espontnea rna diftrico, el descubrimiento del neumococo por Fracnckel
nifestaron que eso suceda porque al cerrar el recipiente se en 1886, en 1887 Weichselbaum aisl el meningococo, en
impeda la entrada del aire, elemento indispensable para que 1889 Kitasato aisl el bacilo tetnico y en 1894 Yersin
se desarrollara la vida en el caldo. Otros investigadores, identific al bacilo de la peste.
como Franz Schulze (1815 1875) y Theodor Schwann,
(181O - 1882), contribuyeron a la demostracin que el aire Joscph Lister, en 1878, fue el primero en obtener culti
libre de microorganismos en contacto con los caldos de vos puros bacterianos por diluciones sucesivas, lo cual
carne no generaba espontneamente nuevos microorganis ayud al entendimiento de los procesos infecciosos. Robcrt
mos. Similares trabajos desa1Tollaron en 1850, Schroeder y Koch, pudo aislar a la bacteria causante del ntrax, mediante
Von Duch, colocando filtros de algodn en los tubos de siembras por estras en medios de cultivo slidos con gelati
respiracin de los caldos. na y agar. A partir de esta experiencia, enunci los postula
dos que llevan su nombre y que se refieren a las condiciones
En la dcada de 1850, Luis Pasteur pudo filtrar el aire que debe reunir un microorganismo para ser considerado
y librarlo de microorganismos llegando a la conclusin que corno el agente causal de una enfermedad. En 1882, Robert
la presencia de los mismos en el aire es la fuente de conta Koch aisl e identific a los agentes de la tuberculosis y del
minacin de los caldos. A raz de una polmica con Pou clera.
chet, en el ao 1859, Pasteur pudo demostrar que los micro
organismos no pueden originarse por generacin espont Progresos en las inmunizaciones. Si bien en la China,
nea, con su famoso experimento de los caldos hervidos en hace ms de 2000 aos, ya se hacan prcticas preventivas
matraces con terminacin en forma de cuello de cisne, el inoculando a las personas pequeas cantidades de venenos
cual permita el paso del aire, pero impeda a los microorga de serpientes, el hito ms importante en el rea de !a inmu
nismos llegar a los caldos. Posteriormente, a fines del siglo nologa, sin lugar a dudas, lo constituy el descubrimiento
XIX, los trabajos de John Tyndall, demostraron que el de la vacuna antivarilica en 1796 por Edward Jenner,

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Historia de la microbiologa - 5

smos quien observ que las ordeadoras que desarrollaban la Burnet sientan las bases de la inmunologa moderna, con la
cdios viruela vacuna eran inmunes a la viruela humana. Al notar teora de la seleccin clonaL
:1bin esto, Jenner experiment entonces la inoculacin del mate
ca y rial proveniente de las lesiones de las ubres de las vacas en Desarrollo de las pruebas diagnsticas. El desarrollo
smos individuos sanos, a quienes consigui protegerlos, de esta de mtodos de anliss, permiti el entendimiento y el dia
:1 ca forma, de la viruela humana. A pesar de tan importante des gnstico de las enfermedades producidas por microorganis
)S de cubrimiento, tuvo que pasar casi un siglo para hacer efecti mos, as el mtodo de fijacin de complemento fue desarro
men- vas las inmunizaciones en contra de las enfermedades infec llado por Bordet y Gengou en 1901, la inmunofluorescen
ciosas, con el enfoque cientfico de los trabajos de Pasteur, cia por Coons en 1942, las pruebas inmunoenzimticas por
que entre sus logros ms destacados sobresalen !os realiza Avrameas en 1966. Oudin estandariz el mtodo de preci
1eda dos sobre el carbunco y la rabia, produciendo vacunas para pitacin en geles en 1948 y Outcherlony la inmunoelectro
ir del ambas enfermedades. En 1906, Albert Calmette y Camille
Gurin elaboran la primera vacuna BCG para la tuberculo
foresis en el mismo ao.
er de
mdes sis. En l 923 Gastn Ramon desarrolla la tcnica de fabri Desarrollo del concepto de la transmisin de los
Jrga- cacin del toxoide diftrico. La primera vacuna antipolio microorganismos por vectores biolgicos. Un hecho que
1 co meltica exitosa, con virus inactivados, por va parenteral, gener un nuevo concepto en la transmisin de las enferme
ongo fue desarrollada por Salk en 1954, pero fueron inigualables dades infecciosas por vectores biolgicos, fue e! descubri
nom los logros conseguidos con la vacuna oral, a virus atenuados, miento hecho por Ross en 1895, cuando demostr por pri
,s de producida por Albert Sabin, en 1 961. mera vez que la malaria se transmita por las picaduras de
:o de
mosquitos del gnero Anopheles. Luego le siguieron Reed y
le las Entendimiento de cmo funciona la respuesta inmu otros investigadores, en 1900, al descubrir la participacin
is, en ne. Siguiendo con los descubrimientos, en el rea de la in
1usa de Aedes aegypti en la transmisin de la fiebre amarilla,
munologa, en 1882 Elie Metchnikoff describi la fagocito siguiendo sugerencias de Finlay. Posteriormente, en 1903,
a por sis y sent las bases de la respuesta inmune celular. Fodor, Bruce demostr que Glossina palpa/is era vector de la en
uien en 1886, fue el primero que observ el efecto directo de un
:cada fermedad del sueo y en 1909 Carlos Chagas descubri al
suero inmune sobre !os bacilos del ntrax. Sin embargo protozoario flagelado T1ypanosoma cruzi en las heces de
lades Behring y Kitasato, en 1890, fueron los que demostraron
acio Panstrongylus megistus.
realmente la actividad antitxica neutralizante de sueros de
n Cl animales inmunizados con toxina tetnica o diftrica, siendo
::urio Desarrollo de los antimicrobianos. Si bien, en forma
la primera prueba de la existencia de la inmunidad humoral. pionera, ya a mediados del siglo XIX, Ehrlich propuso el
Pero recin en 1919 Bordet logr- identificar el complemen concepto de antimetabolitos, el uso de los antimicrobianos
to y los anticuerpos, basndose en los trabajos realizados por constituye un heCho relativamente reciente en la microbio
ubri Pfeiffer en 1894.
tos o loga. El primer r\!porte fue hecho por Domagk, en 1935,
.todo sobre et prontosil, el cual curaba las infecciones por Estrep
Paul Ehrlich fue el primero en aproximarse al entendi tococos. Rpidamente se descubri que el prontosil se trans
:ama
miento de la formacin de los anticuerpos y en 1896 elabor formaba en el organismo en su!fanilamida, el cual tiene
bold
su teora de las cadenas laterales, en la que postul que cier accin antibacteriana. Recin durante la segunda guerra
que
tas clulas del cuerpo posean sobre su superficie, cadenas mundial, en 1940, Florey y Chain aislaron la penicilina,
den
fnta
laterales especficas que eran receptores para los antgenos y descubierta por Fleming en 1929, volvindola un producto
que la unin con stos, provocaba la formacin de nuevas til para el tratamiento de infecciones pigenas causadas
, del
cadenas laterales que eran liberadas posteriormente al suero principalmente por bacterias Gram positivas. Este hecho
mtes
como anticuerpos. tuvo un impacto muy grande en el tratamiento de las heridas
de
1cilo de guerra aumentando, en forma sorprendente, la sobrevida
ckel Si bien a finales del siglo XIX todos los fenmenos de los combatientes. Posteriormente en 1952, Waksmann
>, en inmunolgicos observados describan a la inmunidad como descubre la estreptomicina.
,rsin mecanismos de defensa, en 1902 Richet y Portier descu
brieron el cuadro de anafilaxia, recibiendo el premio Nobel Los virus se hicieron esperar. Histricamente empez
posteriormente por este hallazgo. En 1900 fue Paul Ehrlich a sospecharse, con fundamentos, de la existencia de los virus
ulti el que desarrollo el concepto que el organismo distingue lo recin a partir de finales del siglo XIX, con los filtros de
cual propio de lo extrao. En 1900 Karl Landsteiner descubre porcelana desarrollados por Pasteur y Chamberland, para
bert los grupos sanguneos A, B, O, y en 1904 describi e! pri librar a los medios de cultivos de bacterias. A medida que
ante mer caso conocido de una enfennedad humana desencade progresaba la microbiologa se iban descubriendo agentes
lati nada por auto anticuerpos. En 1903 Arthus describi el patgenos de las distintas enfermedades, pero para algunas
:u!a fenmeno de necrosis por inyeccin de un antgeno a un enfe1medades infecciosas no se podan encontrar los agen
animal previamente inmunizado, denominndose en su tes, por lo que se haca evidente que dichos agentes causales
:mes honor como fenmeno de Arthus. En 1921 Landsteiner
rado tenan un tamao menor que las bacterias. En l 892 Iwa
Dert acu el trmino hapteno para aquellos grupos especficos nowski fue el primero en realizar la transmisin del virus de
que por si solos no eran capaces de provocar la formacin de la enfermedad del mosaico del tabaco, a travs de una sus
' del
anticuerpos, pero si de la reaccin especfica. Al igual que pensin pasada por un filtro para retener bacterias. LOeffler
muchas disciplinas, la inmunologa tuvo un auge muy im y Frosch, en ! 898, realizaron una experiencia similar con la
pottante justo antes de la segunda guerra mundial. En 1935 aftosa del ganado bovino. Beijerinck en 1 898, pensando
nna,
Medawar y en 1945 Owen sentaron las bases para el enten que los agentes infecciosos que se encontraban en los filtra
1vas
dimiento de la tolerancia inmuni.taria en el problema de! dos eran lquidos, propuso el nombre de virus (veneno en
nos
injerto de tejidos. En 1948, Fagraeus demostr que las clu latn). No pas mucho tiempo para descubrir que se trataba
mu
las plasmticas (descritas por Cajal en 1890) llevan a cabo de elementos "paiticulados", pero el trmino permaneci
mto
la sntesis de los anticuerpos. Entre 1955 y 1959, Jeme y para nombrar a los agentes infecciosos de inferior tamao
ner,

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6 - Introduccin

que las bacterias y que eran incapaces de multiplicarse fuera sido posible la erradicacin de la virela. En 1966 la Organi
de clulas vivas. Durante la primera guerra mundial Twort zacin Mundial de la Salud haba comenzado su programa
y d'Herelle descubrieron en forma independiente a los bac de erradicacin de la viruela y el ltimo caso por contagio
terifagos. Stanley en 1935 logra cristalizar el virus del natural ocmTi en Medra, Somalia, en octubre de 1977. La
mosaico del tabaco, demostrando que estaba compuesto conquista de la poliomielitis epidmica ha sido uno de los
solamente por cidos nuclicos y protenas. Este hecho cam hitos ms importantes en la salud pblica del siglo XX, se
bi el concepto que se tena anteriormente sobre los seres han salvado miles de vidas y se han evitado el dolor y el
vivos. Recin en 1940 con el microscopio electrnico pudie sufrimiento de la parlisis a millones de personas.
ron visualizarse los virus y con el desarrollo de tcnicas de
aislamiento, cultivo y cuantificacin se inici la era moderna Si bien es cierto que las enfermedades ocasionadas por
de la virologa molecular. los microorganismos siguen siendo una de las principales
causas de morbilidad, invalidez y muerte, en el mundo, lti
Los avances cientficos posteriores ocurridos en los mamente se ha progresado en fonna impensada en enferme
ltimos 70 aos han aportado tal cmulo de conocimientos, dades como la malaria, la poliomielitis, las geohe\mintiosis,
todos ellos muy importantes, que han esclarecido muchas la dracuculiosis, la oncocerquiosis, la esquistosimiasis e
lagunas que existan en este amplio campo de las ciencias incluso el VIH/SIDA, las cuales han sido frenadas en su
biolgicas. Se ha progresado mucho en la seguridad de los avance e incluso en algunos casos se encuentran a punto de
mtodos de diagnstico, se han descrito nuevos agentes de ser eliminadas del planeta. Gracias a los aportes de las cien
enfermedades, se han fabricado nuevas y mejores vacunas, cias como la biologa molecular, la ingeniera gentica, la
ha aumentado el nrnern de los antibiticos y quimioterpi inmunologa y la farmacologa, es muy probable que en las
cos de uso mdico, se conocen mucho mejor los procesos de prximas dcadas ocurran cambios sustanciales en la micro
inmunidad del organismo humano y, es evidente que, el biologa que permitan disminuir enormemente la carga que
auge de la investigacin en microbiologa, ha conferido una significa para los distintos pases, los problemas ocasiona
mejor calidad de vida. Gracias a estos avances, se han tenido dos por las enfennedades infecciosas.
logros que eran dificiles de imaginar con anterioridad. Sin el
desarrollo de las ciencias de la microbiologa no hubiese

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:gani
rama
1tagio
C aptulo 2
7. La
le los
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r y el
MICROORGANISMOS Y PARSITOS
PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS Las tribus se agrupan en familias.
1s por
ipales Las familias se agrupan en rdenes.
Los seres vivos presenta dos grupos bien definidos; los
1, lti
eucariotas y los procariotas. Los procariotas son seres Los rdenes se agiupan en clases.
Crme
vivos cuyo ADN carece de membrana nuclear limitante. En
tiosis, Las clases se agrupan en phyllum.
este grupo se encuentran las bacterias primitivas o arqueo
1sis e
bacterias y las eubacterias o bacterias verdaderas. Los proca Los phyllum se agrupan en reinos.
en su
riotas son los organismos vivos ms antiguos de la tierra, los
1to de
registros fsiles de los primeros procariotas (similares a Para aumentar la funcionalidad de este tipo de ordena
, cien bacterias) datan de hace 3,5 mil millones de aos. Todos los
ca, la miento y en los casos en los que se necesita, puede usarse la
dems seres vivos evolucionaron de estas formas primitivas terminologa sub, con lo que se tienen subcspecies, sub
en las
de vida.
nicro gneros, subfamilias.
a que
siona- Los eucariotas son seres vivos en los cuales las clulas Las clasificaciones de helmintos y artrpodos suelen ser
tienen ncleos verdaderos, es decir, limitados por la mem relativamente estables a travs del tiempo, ya que se basan,
brana nuclear. En este grupo se encuentran las algas, los en la mayora de los casos, en caracteres morfolgicos muy
hongos, los protozoarios, las plantas y los animales. Los notorios. En cambio la clasificacin de las bacterias, proto
eucariotas aparecieron en la tierra hace aproximadamente
zoarios y hongos, est sometido a cambios constantes.
J ,& mil millones de aos.
En el sistema linneano la especie constituye la unidad
Los virus, por sus propiedades y caractersticas muy base del agrupamiento de los seres vivos, dentro de la cual
especiales, no estn incluidos en ninguno de los dos grupos actualmente se reconocen varias categoras de agrupaciones
anteriores. Los virus no son clulas, a pesar de poseer mate que son: ( 1) la cepa o ra1..a formada por cultivos puros del
rial gentico, no poseen membrana celular, citoplasma ni la microorganismo, procedentes de un solo aislamiento, por
maquinaria para la sntesis proteica, por lo que dependen ejemplo Staphyloco.ccus aureus procedente de un solo
exclusivamente de los procesos metablicos de las clulas a hemocllltivo; (2) el clon es la progenie derivada u obtenida
las que parasitan. En razn a estas caractersticas eran consi por cultvo a partir de un solo microorganismo; (3) las va
derados en forma separada en la clasificacin de los seres riedades o subespecies pueden establecerse siguiendo crite
vivos, hasta hace poco. Los virus convencionales poseen su rios qumicos, biolgicos, por fagos o serolgicos. Se desig
material gentico contenido en B::psulasS. na con el nombre de cepa tipo aquella cuya descripcin
sirvi para caracterizar a la especie y es reconocida como
Algunos agentes que pueden causar enfermedades co tal. Son conocidas como cepas de referencia las que son
mo las de Creutzfeldt-Jacobs, el kuru y otras, no poseen utilizadas como razas comparativas, mientras no existen
cidos nuclicos y estaran constituidos por partculas infec cepas tipo reconocidas, por algn comit taxonmico.
ciosas proteicas, denominadas priones.
Principales caracteres taxonmicos. Las distintas
TAXONOMA DE LOS SERES VIVOS caractersticas que se usan para la clasificacin microbiana
reciben el nombre de caracteres taxonmicos y abarcan
La taxonoma es la ciencia que trata sobre la clasifica tanto las propiedades fenotpicas, como genotpicas, siendo
cin y la denominacin correcta de los seres vivos. El siste las ms importantes las que se refieren a la morfologa
ma utilizado para la nominacin de los seres vivos, inclu (forma, tamao, organelas), fisiologa (metabolismo), nece
yendo los agentes microbianos unicelulares, los artrpodos y sidades nutritivas (medios de cultivo especiales, factores de
los helmintos, es el binominal, vale decir que usa dos nom crecimiento), caractersticas culturales (forma de crecimien
bres, de los cuales el primer nombre corresponde al gnero to, tipo de colonia), propiedades bioqumicas
que debe ser escrito con letra mayscula resaltante, usa co (fermentaciones), componentes qumicos de las estructuras
mo idioma latn, incluyendo palabras latinizadas de otros (pared, membrana, flagelo), sensibilidad a los antimicrob i a
idiomas, principalmente el griego y el segundo nombre es el nos, estructura antignica, patogenia (natural y experimen
de la especie, que se escribe en letra minscula, usa el latn tal), caractersticas genticas y composicin de los cidos
o palabras latinizadas que pueden ser adjetivos (a/bus), nuclicos.
verbos (dissolvens) o genitivo (puliorum). La escritura co
rrecta completa de un microorganismo lleva adems el ape Esquemas de clasificacin. Varios procedimientos que
llido del autor y luego de una coma el ao en que se lo des establecen similitudes entre los microorganismos se utilizan
cribiera. Ejemplo: Trypanosoma cruzi Chagas, 1909. La para el efecto, estudio que puede hacerse mediante el mto
agrupacin de los seres vivos se hace as: do de la taxonoma numrica con base fenotpica, o bien la
Las especies se agrupan en gneros. investigacin patrstica cuya .base es genotpica.

Los gneros se agrupan en tribus. La taxonoma numrica llamada tambin fenotpica,

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B - Introduccin

Maternas _--Nutnc1onales
. 1%
1% ---- ,,,.--
Hepatitis ---
2% Diarreas
26%
5%
Meningitis
4% Traumas
10%
Prevenibles
10%

Mala1ia
1 1 'fo

TBC---- VIH!SIDJl.
18% 25% transin1s1l:iies
Infecciosas 60%
23%

Muertes por enfermedades infecciosas Total de muertes

FIGURA 2.1: causas de muertes en todo el murido y muertes atribuidas a enfermedades infecciosas, expresadas en
porcentaje, seg n estadsticas sanitarias mundiales, de la Org anizacin undial de la Salud, 201 1 .
M

computadorizada o adansoniana, estudia el grado de simili en virns. El comit es dirigido por la divisin de virologa de
tud entre dos o ms cepas de microorganismos. lllternational Union of Microbio!ogical Societies. E! ICTV
realiza una clasificacin universal que pueda funcionar co
La investigacin patrstica estudia las relaciones gen mo estndar de clasificacin de los virus, regulando la des
ticas entre microorganismos, investigando: ( 1) !a composi cripcin formal de las nuevas cepas y ordenando su ubica
cin del ADN; (2) el tamao del genoma; (3) el anlisis de cin dentro del esquema clasificatorio. Las reglas ele nomen
la secuencia del genoma; (4) la hibridacin de los cidos clatura y clasificacin elaboradas por el Comit, se asemejan
nuclicos. al estndar tradicional de la clasificacin de los seres vivos
utilizando algunas de sus categoras y sufijos que indican el
Nomenclatura. El Comit Internacional de Sistemtica rango taxonmico y aplicand(? cursiva a los nombres de los
de Procariotas (CSP) es el organismo encargado de la no taxones.
menclatura, taxonoma y las normas segn las cuales son
designados todos los procariotas. La clasificacin ms acep LA MICROBIOLOGA Y LAS ENFERMEDADES
tada es la elaborada por la oficina editorial del Manual Ber INFECCIOSAS.
gey de Bacteriologa Sistemtica (Bcrgey's Manual of Syste
matic Bacterio!ogy). Esta clasificacin, conocida como "The An en nuestros das las enfermedades infecciosas son
Taxonomic Outline of Bacteria and Archaea" (TOBA), est muy prevalentes en las poblaciones con menos recursos y
disponible en Internet. Debido a la reciente introduccin de por lo tanto con menos posibilidad de acceso a vacunas,
la filogenia molecular y del anlisis de las secuencias de pruebas diagnsticas y medicamentos. A pesar de los gran
genomas, la clasificacin bacteriana actual es un campo en des avances en la microbiologa, en forma contradictoria
continuo cambio y plena expansin. stos no llegan a todo el mundo. Las enfermedades infeccio
sas constituyen !a segunda causa de todas la muertes en el
La nomenclatura de los protozoarios, helmintos y artr planeta. Segn datos de la Organizacin Mundial de la Sa
podos se efecta por intermedio del Cdigo Internacional de lud del ao 2011, las diarreas siguen siendo la principal
Nomenclatura Zoolgica (conocido por sus siglas en ingls: causa de muc1ie en el mundo dentro del bloque de enferme
ICZN). En 1905 se haba publicado el primer Cdigo. En la dades infecciosas, con alrededor de 2,2 millones de muertes
actualidad la nomenclatura zoolgica se rige por la cuarta al ao y conjuntamente con el VIH/SIDA, la tuberculosis y
edicin del Cdigo, publicado en 1999 y del que hay, por la malaria, constituyen ms de los 3/4 de las muertes produ
primera vez, una versin en espaol autorizada oficialmente cidas por microorganismos, con aproximadamente 6,6 mi
por la Comisin. llones de muet1es al ao. Es curioso que, a pesar de contar
con vacunas efectivas disponibles, las enfermedades infec
El Cdigo internacional de Nomenclatura Botnica ciosas catalogadas como fpreveniblesS si,guen cobrando !a
reglamenta los nombres de los taxones no slo al reino vida de ms de 800.000 personas al ao (FIGURA 2.1)
Plantae, tal como se define hoy en da, sino que tambin de
todos los organismos tradicionalmente estudiados por la RELACIONES ENTRE LOS SERES VIVOS
botnica, incluyendo las algas verdeazulcs (Cyanobacteria),
los hongos (Fungi) y algunos protistas. Los organismos, en la naturaleza, interactan unos con
otros, establecindose grados de relacionamicnto entre ellos.
El Comit internacional de Taxonoma de Virus (en La supervivencia depende, en muchos casos, de la forma en
ingls lnternational Committee on Taxonomy of Viruses, que se encuentran relacionados. Desde el punto de vista de
ICTV) es un comit de reciente conformacin, que autoriza la microbiologa, las relaciones bsicas establecidas son el
y organiza la clasificacin taxonmica de los virus. Los parasitismo, el comensalismo y el mutualismo. Muchas
miembros del comit son considerados expertos mundiales veces es dificil establecer un lmite claro entre las relacio-

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M icroorganismos y parsitos - 9

Interdependencia

des

s en

FIGURA 2.2: relaciones entre los seres vivos.


a de
CTV
1r co
l dcs- nes. Por otro lado, la relacin para los mismos organismos ciclo y no completa su evolucin (para Ancylostoma ca11i
1bica puede cambiar, al cambiar las condiciones del ambiente o de n11111 y Ancylostoma brazi/iense el humano es un hospedador
mcn alguno de ellos (FIGURA 2.2). accidental, ya que solo desaITolla la larva migrante cutnea
njan y no los adultos).
vivos Parasitismo es la relacin entre seres vivos, en la que
:an el uno de ellos (el de menor tamao) crece y se multiplica a
le los 4. Hospedador paratnico: es el hospedador acciden
expensas del otro, producindole dao. Los parsitos pueden tal ineficiente, que no permite el desarrollo completo del
ser estrictos cuando producen la enfermedad cada vez que parsito. Para que el ciclo prosiga, el parsito debe pasar a
se encuentran parasitando o facultativos cuando pueden un hospedador en el que pueda desarrollarse completamente.
ocasionar o no la enfermedad segn sea la circunstancia. Los peces constituyen hospedadores paratnicos de las lar
vas plerocercoides de Diphyllobothrium latum, en los que
s son
Comensalisrno. Es cuando dos organismos se asocian sta pasa de uno a otro pez por predacin, sin cambio en la
sin producirse dao ni se alimentan uno a expensas del otro. morfologa de la misma. El desarrollo completo del parsito
sos y En la mayora de los casos los comensales son de menor adulto ocurre solamente en el intestino de humanos que
unas, tamaos que el organismo hospedador y se alimenta de lo consumen pescado crudo con la larva plerocercoide.
gran que le sobra o de las clulas o secreciones que son elimina
:toria das normalmente sin que haya un proceso patolgico. 4. Hospedador vicariante. Es el hospedador accidental
ccio en el que se desarrolla totalmente e! parsito, sea en su for
en el ma adulta o larvaria, pero que normalmente no pmiicipa en
Mutualismo. Se denomina a la dependencia obligada
a Sa- entre dos organismos (por lo menos para uno de ellos). No el ciclo biolgico del mismo (para Echinococcus granu/osus
1cipal el humano es un hospedador vicariante).
pudiendo vivir en forma separda.
:rme
te1ies
>SIS y Depredador o predador. Es todo ser vivo que ataca a Vector. Es el ser vivo que vehiculiza al parsito pat
rodu otro para alimentarse de L geno para transmitir la enfermedad. Puede actuar de vector
> m1- mecnico, como suelen ser las moscas y las cucarachas, que
ontar Hospedador o husped. Se denomina as al que alber solamente transportan !os microorganismos o vector bio
ga al microorganismo o parsito. Puede ser: lgico, desarrollando un ciclo indispensable para el desaITo
llo del parsito como es el caso del mosquito Anopheles en
nfcc
do la
1. Hospedador definitivo. Es el que alberga las formas el paludismo. El vector biolgico puede ser multiplicativo,
evolutivo o multiplicativo-evolutivo, segn si se multiplican
los microorganismos antes de transmitirlos ( como es el A e
ms desarrolladas, adultas y sexualmente maduras del par
sito (para Taenia soli11111 el hospedador definitivo es el
humano). des aegypti en el Dengue), s i cambian de forma sin multipli
carse (como son varias especies de insectos hematfagos
:, con que transmiten las filariosis) o si cambian de forma y se
multiplican antes de la transmisin ( como es Triatoma bifes
llos. 2. Hospedador intermediario. Es el que desmTolla y
hospeda las formas larvarias del parsito (para Taenia so
1a en fans en el mal de Chagas).
ta de lium e\ hospedador intermediario es el cerdo).
on el Reservorio. Es el ser vivo que alberga al microorganis
mo o parsito, constituyendo el hbitat natural en donde se
1chas 3. Hospedador accidental. Se dice del caso en que el
acio- parsito al penetrar al hospedador, no logra desarrolJar su desarrolla y sirve de foco de diseminacin (el ganado vacu-

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1 0 - Introduccin

no para la brucelosis, el perro para la rabia) o bien, se trata Periodo de incubacin. Es el tiempo que transcurre
de un animal del cual el vector pueda captar dicho microor desde la penetracin del agente patgeno en el hospedador
ganismo en la naturaleza (la comadreja en la enfermedad de hasta el momento en que aparecen los primeros sntomas de
Chagas). En cambio se denominan fuentes de infeccin a las la enfermedad.
que constituyen hbitat ocasionales o transitorios de los
agentes infecciosos. Estas fuentes pueden ser objetos inani Bacteriemia, viremia, funguemia y parasitcmia. Es la
madas corno el agua, el suelo, el polvo, que vehiculizan presencia de microorganismos en la sangre, en forma pasaje
bacterias, esporas, hongos, quistes de protozoarios o huevos ra, confirmada por cultivo.
de helmintos.
Septicemia. Es un trmino que tradicionalmente se us
Portadores. Es todo individuo que puede albergar en forma intercambiable con BACTERIEM!A, pero muchos
agentes patgenos de diversas enfermedades infecciosas, mdicos lo consideran que implica mayor gravedad. Por
teniendo la capacidad de transmitirlos a otras personas cuan analoga, para los dems microorganismos se habla de virc
do son eliminados fuera de su cuerpo. Son cuatro las situa mia, funguemia y parasitemia.
ciones en las que se manifiesta esta posibilidad: (1) porta
dores durante el periodo de incubacin, hecho que se Sepsis, se us anteriormente como sinnimo de infec
puede observar en las enfermedades que presentan multipli cin generalizada o sistmica, pero sin especificar la positi
cacin de los microorganismos en la regin rinofarngea vidad de los cultivos. Hoy en da, el trmino de sptico se
(sarampin, rubola, gripe, coqueluche, resfro comn), as est usando cada vez ms para designar a los individuos que
como tambin en las de asiento en otras reas (intestino, se piensa que tienen infeccin sistmica o alteraciones clni
pulmones, genitales); (2) portadores enfermos donde la cas y de laboratorio, consistentes con una infeccin sistmi
transmisin de la enfermedad se realiza durante el periodo ca, pero que no tiene hemocultivos positivos. Actualmente
de estado de la misma. Es bueno sealar que en muchos el trmino sepsis se propone como el de la situacin clnica
casos, el grado de eliminacin de los microorganismos no en la que hay evidencia de infeccin, ms una respuesta
guarda relacin con las formas clnicas (graves, medianas, sistmica manifestada por temperatura elevada, taquicardia,
leves); (3) portadores durante el periodo de la convale aceleracin de la respiracin, leucocitosis o neutrfilos en
cencia, es cuando la eliminacin de los microorganismos banda en sangre perifrica.
contina un tiempo despus que la persona se haya curado
de la enfermedad. Esto depende de las caractersticas del Sndrome de sepsis. se define como una sepsis con
agente causal, as como del sistema inmunitario del indivi evidencia de perfusin alterada de rganos, hipoxemia, lac
duo; (4) portadoras sanos son los individuos que sin haber tato elevado en sangre y conciencia alterada.
padecido aparentemente una enfermedad determinada, eli
minan el agente causal de la misma, debido probablemente a
Sndrome de , respuesta inflamatoria sistmica
colonizaciones transitorias del microorganismo. Esto puede
(SRIS). Es un trmino que los especialista en cuidados in
ocurrir en personas con alto grado de inmunidad y se deno
tensivos utilizan cada vez ms. Corresponde a una amplia
minan infecciones inaparentes o abortivas, las cuales pasan
variedad de cuadros clnicos de naturaleza infecciosa, pero
totalmente desapercibidas.
que tambin abarca entidades no infecciosas, como quema
duras y pancreatitis aguda. De acuerdo a esta ltima defini
Ciclos. Son las etapas que necesita un microorganismo cin, los pacientes con sepsis pueden considerarse como un
para completar su evolucin. Se dice que un microorganis subgrupo de los pacientes con SRIS.
mo es de ciclo directo (monoxnico) cuando todo su ciclo se
desarrolla en un solo tipo de hospedador, vale decir que no
Flora microbiana habitual. Durante la vida intrauteri
necesita del hospedadores intermediarios. En cambio, se
na el feto vive en un ambiente estril, libre de bacterias y
habla de ciclo indirecto, cuando el microorganismo necesita
recin despus del nacimiento comienza la colonizacin
tanto del hospedador definitivo como del hospedador inter
microbiana, la que se asienta en primer lugar sobre la piel.
mediario para completar su ciclo (se denomina diheteroxni
Muy pronto los microorganismos invaden todas aquellas
co, el ciclo de un microorganismos que requiere de dos hos
regiones anatmicas que tienen comunicacin libre con el
pedadores).
exterior, como son boca, nariz, odos, rinofaringc, esfago,
estmago, intestinos, vagina. La flora microbiana va ocu
Ihfeccin. Se usa para designar la presencia de un mi pando, en un individuo normal, todos estos territorios. Se
croorganismo patgeno en el interior del hospedador, sea encuentran libres de bacterias, sin embargo, algunas regio
que se encuentre en forma latente asintomtica o producien nes que mantienen libre comunicacin con el exterior como
do el cuadro clnico de la enfermedad correspondiente. Exis ser los alvolos, los bronquios y la trquea, debido a la exis
ten microorganismos que pueden permanecer latentes por tencia de varios mecanismos de . defensa, tanto mecnicos
largos periodos, que incluso pueden durar toda la vida del (cilias de clulas epiteliales que empujan de dentro para
hospedador, como es el caso de Toxoplasma gondii. Cuando afuera a los microorganismos), como tambin a la presencia
el parsito se encuentra dentro del hospedador se habla de de procesos inmunolgicos.
infeccin por T. gondii, reservndose la palabra enfermedad,
o toxoplasmosis para los casos sintomticos. Es habitual que la piel sana y limpia tenga pocos micro
organismos. En el conducto gastrointestinal, la boca consti
Infestacin. Se emplea esta palabra para designar las tuye uno de los lugares ms contaminados y con ms varie
ectoparasitosis. dad de bacterias. El estmago cuenta con muy pocas bacte
rias, debido a la accin del cido clorhdrico. A partir del
Contaminacin. Es la presencia de microorganismos duodeno se nota un rpido aumento de los microorganismos,
vivos, patgenos o no sobre objetos diversos. de tal manera que en el colon, la proporcin de bacterias en

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M icroorganismos y parsitos - 1 1

la materia fecal, puede alcanzar cifras de hasta el 30 % del por los microorganismos productores de infecciones respira
1 scurre
dador volumen de las heces. La flora microbiana intestinal aumen torias, como son el virus de la influenza, el virus sincitial
nas de ta a partir de las zonas menos contaminadas del duodeno respiratorio, entre muchos otros virus respiratorios.
( 103 105 microorganismos/gramo) e leon ( l 05 t 108 micro
organismos/gramo), hasta llegar a las porciones distales del 4. Por medio del agua y los alimentos, contaminados
.. Es la colon a cifras muy elevadas (mas de I 0 10 microorganismos/ con microorganismos. La contaminacin puede ser en forma
,asaJ e- gramo). directa o por intermedio de moscas, cucarachas y otros vec
tores mecnicos, que pueden acarrear los microorganismos,
Los mi.croorganismos no patgenos que se asientan en principalmente en la transmisin de agentes patgenos que
se us el humano, juegan un imp011ante rol. Los microorganismos afectan al tubo digestivo. Aqu entran los microorganismos
tuchos que se encuentran en el intestino, por ejemplo, participan en transmitidos en forma fecal-oral y tambin los transmitidos
l. Por la metabolizacin de los alimentos, a partir de los cuales se por el suelo que ingresan por boca. Juegan un papel impor
originan vitaminas y factores de crecimiento, que posterior tante los alimentos crudos y aquellos cuya coccin fue insu
! vire-
mente son absorbidos por el intestino. Tambin protegen ficiente. Tambin cumplen un papel importante en este pun
contra las infecciones, evitando que se asiente los agentes to, los manipuladores de alimentos, quienes pueden ser por
patgenos, compitiendo con ellos por el espacio y por los tadores sanos de microorganismos como Sa!monel/a, Stap
infec nutrientes. Si bien es cierto que algunos de microorganismos hy!ococcus y Enterobius vermicu!aris.
positi de la flora habitual, pueden ser patgenos oportunistas, en
ico se los casos de enfermedades inmunodepresoras (SIDA, leuce
:>s que 5. El polvo fino, que se mantiene en suspensin en el
mias) o debido al uso de medicamentos inmunodepresores aire, puede acarrear consigo agentes infecciosos como My
clni (corticoides y otros), la flora normal es considerada impres
stmi cobacterium tuberculosis, Hantavirus y esporos de hongos
cindibles para la salud. que afectan a[ aparato respiratorio (Coccidioides inmitis,
mente
:lnica flistoplasma capsulatum, Paracoccidioides brasi!iensis,
puesta ENTRADA Y SALIDA DE MICROORGANISMOS Blastomyces dermatitides y otros). Aqu tambin entran los
:ardia, microorganismos, que sin estar en las partculas del polvo,
los en Salida. Las vas por donde los microorganismos son utilizan la va area directa, como es el caso de los huevos
eliminados al exterior puede coincidir o no con la ubicacin del gusano Enterohius vermicularis y la bacteria Legione!fa
que los mismos adoptan durante el proceso infeccioso. pneumophila.
.s con
1, lac- Entrada. Cada microorganismo acostumbra tener una 6. Los artrpodos, vectores biolgicos multiplicativos
pue11a de entrada usual. No obstante, en algunos casos, un y evolutivos introducen los microorganismos al cuerpo,
mismo microorganismo puede usar diferentes puertas de abriendo generalmente una pue11a directa a la sangre y los
entrada. tej idos. Cada micoorganisrno, en cada vector, tiene su for
mica
ma especial de penetracin, como es el caso de Tlypanoso
os in
Mecanismos de transmisin: Es fundamental conocer ma cruzi, que se encuentra en las heces de los vectores y
mplia
a cabalidad la forma en que los microorganismos y parsitos penetra a travs de las mucosas (oral o labial) o de la herida
, pero
entran y salen del cuerpo, para poder evitar, de esta manera, dejada por la picadura o el rascado. En el caso de las filarias,
1ema
la transmisin de los agentes patgenos. Las diferentes for la larva infeetiva sale del insecto hematfago por su probs
lefini
mas de transmisin que los microorganismos pueden utilizar cide y cae a la piel del hospedador, en el momento que el
no un
son: vector est chupando la sangre y penetra luego por el sitio
de la picadura.
mteri 1. Por contacto directo con los enfermos o portadores
de procesos infecciosos de piel, boca o genitales. Las princi 7. La va parenteral, es una de las ms peligrosas, ya
nas y
pales infecciones contagiadas por contacto directo son las de que ubica a los microorganismos en forma directa en la
:acin
transmisin sexual. sangre o los tejidos de las personas, como son el VlH, y los
1 piel.
virus de las hepatitis B y C. Esta va corresponde a un cap
uellas
tulo importante en la transmisin de las infecciones nosoco
:on el 2. Por contacto indirecto con productos patolgicos o
miales, en donde muchas especies de bacterias, generalmen
)fago, materiales biolgicos procedentes del portador, que fueron
te multirresistentcs a los antibiticos son introducidas a la
ocu depositados sobre objetos, con los que posteriormente se
tiene contacto. Este es el caso de Enterococcus, agente muy sangre por procedimientos de extraccin sangunea o colo
)S. Se
comn de infecciones nosocomiales. Esta situacin es muy cacin de catteres. Aqu tambin entran las infecciones
regio
transmitidas por transfusiones y transplantes de rganos.
como comn en el personal de salud o en cualquier personas que
Tambin podran considerarse aqu a los microorganismos
exis estuvo en contacto con los portadores y que transportan en
introducidos al torrente sanguneo por procedimientos odon
micos forma indirecta los microorganismos en sus ropas o en sus
tolgicos de extraccin dentaria, de microorganismos usua
para manos. Entre los microorganismos ms resistentes estn
Staphylococcus aureus, Mycobacterium tuberculosis y el les de la boca.
oencia
virus de la Hepatitis B, que soportan condiciones adversas
en el medio ambiente, manteniendo su vitalidad. 8. Por oh.jetos o procedimientos mecnicos, no paren
tcrales utilizados en hospitales, como son las sondas vesica
1icro
3. Transmisin por intermedio de pequeas gotas, que les, endoscopios y tubos de respiradores.
onsti
varie los enfermos eliminan en forma de aerosoles, con la tos, el
)acte estornudo e inclusive al hablar o respirar. Las pequeas 9. La forma transplacentaria, es la va utilizada por
ir del gotas pueden proyectarse hasta distancias de varios metros, microorganismos que tienen un pasaje a travs de la sangre.
mos, permanecen un tiempo en el aire, pudiendo ser inhaladas por La placenta es ms permeable hacia el final del embarazo o
.as en el personal de salud u otra persona que se encuentren cerca. en el momento del parto, por lo que algunos microorganis
Esta es una de la principales vas de transmisin utilizada mos son contagiados en ese momento, como el V!H y la

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1 2 - Introduccin

Hepatitis B. Est<t forma de transmisin se denomina verti RELACIONES HOSPEDADOR-MICROORGANISMO


cal, en la cual se incluye a la va transmamaria. La forma
denominada perinatal se produce en el momento del naci A pesar de que no existe una definicin satisfactoria del
miento, siendo los ejemplos Neisseria gonorrhoeae y Chfa trmino infeccin, podra decirse que comprende una serie
mydia trachomatis, que se pueden contagiar al neonato, a de procesos ocurridos en el hospedador, que aparecen desde
travs del canal de parto. el mismo momento de la penetracin de los microorganis
mos, desarrollndose a consecuencia una respuesta, sea
10. La penetracin cutnea directa, es la forma utili motivada por el mismo microorganismo o sus toxinas.
zada por varios gusanos como Uncinarias, Schistosoma y las
larvas de la mosca Dermatobia hominis. Se denomina infeccin inaparente, asintomtica o sub
clnica cuando, sin existir manifestaciones de enfermedad,
1 1 . Por predacin o carnivorismo. Esta forma se rela puede comprobarse la presencia de anticuerpos, como res
ciona exclusivamente por el consumo de carnes crudas ( o puesta inmunolgica ocasionada por ln presencia de un mi
con coccin insuficiente), como Jo son Trichinella spiralis, croorganismo dentro del cuerpo. Un microorganismo puede
Taenia saginata y A11isak1'.\\ entre otros. ocasionar cuadros inaparentes, cuando el hospedador pre
senta una elevada respuesta inmunolgica o si el microorga
12. La zoonosis es una forma especial de transmisin, nismo carece de la virulencia necesaria para traspasar las
que involucra a quienes se encuentran en contacto con los defensas de dicho hospedador. As tambin microorganis
animales. Muchos microorganismos pueden ingresar al cuer mos poco virulentos podran causar infecciones clnicas
po por mordeduras o araazos de animales, como son el aparentes, si las defensas son bajas o si se las deprime por
virus dela rabia, Fiw1cisel/a tularensis y Enterohacteriaceae diversos procedimientos, como rayos ionizantes, medica
por mordeduras de serpientes. mentos citostticos o cirugas.

1 3. Por traumas, heridas y quemaduras. Los microor Postulados de Koch. Fue Robert Koch quien estipul
ganismos pueden aprovechar las heridas posoperatorias y las condiciones requeridas para que un determinado micro
producir procesos patolgicos. Tambin se encuentran en organismo pudiera ser considerado como agente etiolgico
esta forma de contagio, los hongos del medio ambiente co especfico de una enfermedad, enunciando lo que hoy se
mo Sporothrix schencldi y agentes de crotnomicosis, los conoce como los postulados de Koch, que constan de los
cuales penetran a travs de lesiones ocasionadas por espinas sit,-,-uientes puntos: ( 1 ) el agente debe encontrarse siempre en
o astillas y Pseudomonas aeruginosa en e! caso de personas la enfermedad; (2) debe poder aislrselo en cultivo puro; (3)
que sufrieron quemaduras. inoculado el cultivo a los animales de experimentacin debe
reproducir la enfermedad original; (4) debe aislarse de nue
14. La autoinfeccin y la va endgena son empleadas vo el mismo rpi<::roorganismo en cultivo puro, a partir de las
por microorganismos que aprovechan generalmente la des lesiones del animal. Posteriormente otros investigadores
truccin de las bafferas o la disminucin de las defensas del sealaron un quinto punto, que declara la necesidad de de
hospedador, para producir dao, como son los hongos opor tectar en la sangre de los enfermos y de los animales de
tunistas Geotrichum candidum y Candida albicans, habitan experimentacin inoculados, los anticuerpos correspondien
tes normales de piel e intestino o desarrollar infecciones tes al 1nicroorganismo en cuestin.
masivas, como es el caso de Strongy!oides stercora/is, en
pacientes con tratamiento prolongado con corticoesteroides. Si bien la mayor parte de los microorganismos causan
tes de infecciones humanas cumplen con los requisitos exi
Las forunculosis y otras patologas de piel son produci gidos en los postulados de Koch, es cic11o tambin que mu
das por Staphylococcus aureus, habitante usual de la dermis, chas veces existe la imposibilidad de hacerlo, sea debido ,1
que ocurren generalmente por la ruptura de alguna baITera. que no pueden ser cultivados (Mycobacterium leprae, Tre
En algunos casos la alteracin de la flora normal por trata ponema pallidum) o bien porque se carece actualmente de
miento con antibiticos, quiebra el equilibrio microbiolgico un animal receptivo (Neisseria go11orrhoeae).
existente, permitiendo que microorganismos usuales como
C!ostriclium dijj,cile o Gardnerella vaginalis, que son paiie Variaciones de la virulencia. Los microorganismos
<le la flora normal, causen procesos patolgicos al encontrar patgenos pueden producir dao en forma directa por medio
se sin competidores naturales. de su presencia (microorganismos virulentos) o por sus toxi
nas (microorganismos txicos).
1 5. Otras vas pueden ser por consumo de vegetales
con formas larvarias intermedias de los parsitos, como es el Las diferentes especies de microorganismos patgenos
caso de las metacercarias de Fasciola hepatica, adheridas al que producen dao en forma directa, puede tener razas que
be1To silvestre o por la mucosa nasal, va utilizada por Nae naturalmente difieren entre s por su grado variable de viru
gleria foll'leri, la cual se encuentra libre en el agua y que lencia, hecho que puede ser comprobado en los animales de
produce posteriormente cuadros de meningoencefalitis. experimentacin por la tasa de mortalidad que ocasiona en
ellos. Mediante diversos procedimientos laboratoriales se
Muchas miasis se transmiten por ovoposicin de las puede hacer variar la virulencia de los microorganismos
moscas adultas, generalmente en heridas abiertas del hospe disminuyndolas mediante el uso de siembras sucesivas en
dador. Tambin se encuentran formas extraas de transmi medios de cultivos, en los que generalmente proliferan me
sin como es la ingestin, en forma accidental, de pequeos jor las bacterias mutantes que aprovechan las condiciones
artrpodos que llevan estadios larvarios de gusanos en su nutritivas de los mismos y en cambio dejan de hacerlo los
interior, en los casos de Dracunculus medinensis y Dipyli microorganismos ms agresivos o virulentos. Este procedi
dium caninum. miento es utilizado en la preparacin de la vacuna BCG para
la tuberculosis, la cual se obtiene por cultivos repetidos (237

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Microorganismos y parsitos - 13

pasajes) de una cepa de Mycobacterium bovis en el medio tcna M, para fijarse al epitelio farngeo en las infecciones
SMO de cultivo de papa-bilis-glicerina, o bien se puede aumentar de la garganta. As mismo el cido teicoico y lipoteicoico
la virulencia efectuando inoculaciones sucesivas en anima fijan a Staphylococcus aureus al epitelio nasal en los porta
ria del les de experimentacin, con lo que se seleccionan las bacte dores, Streplococcus 11111tans se fija a los dientes mediante el
1 serie rias mutantes mejor adaptadas a !as condiciones patognicas glicocalix, interviniendo en el desarrollo de las caries y
desde exigidas para producir la infeccin. Este mtodo es usado en Neisseria gonorrlweae se fija mediante fimbrias a las muco
ganis- !a obtencin del virus fijo de la rabia. La virulencia se puede sas uretral y cervical produciendo la gonorrea o blenorragia.
1, sea medir mediante la dosis letal en los animales de experimen Parsitos corno las Uncinarias o Taenia utilizan sistemas de
tacin. sujecin como dientes, placas, ventosas y ganchos, con los
cuales logra permanecer en el intestino y no ser arrastrados.
o sub- Microorganismos oportunistas o patgenos poten
1edad, ciales. Son aquellos que bajo ciertas condiciones pueden
o rcs producir la enfermedad, generalmente cuando el hospedador Penetracin microbiana. Una vez lograda la adheren
m mi tie'be disminuidos sus mecanismos de defensa. Esta disminu cia, los microorganismos pueden quedar en la superficie del
puede cin puede ser debida a diversos procesos infecciosos, como epitelio, simplemente colonizando la pie! o las mucosas,
,r prc las virosis o al tratamiento con drogas inmunodeprcsoras. En pero pudiendo producir, en algunos casos, una patologa
::iorga los hospitales, los procedimientos instrumentales favorecen local, mediante !a eliminacin de toxinas. Si los microorga
ar las la penetracin de los microorganismos desde el exterior nismos logran penetrar a las clulas epiteliales, multiplicn
gans hacia las cavidades mucosas, mediante sondas, catteres, dose dentro de ellas, pero son incapaces de alcanzar la sub
nicas espculos y endoscopios o bien al interior de los tej idos rnucosa, poseen entonces una capacidad invasora mediana.
1e por mediante el uso de jeringas o procedimientos quirrgicos. Existen microorganismos que son capaces de adherirse a las
edica- Corno ejemplos de microorganismos oportunistas se tienen clulas epiteliales, penetrar y dividirse en ellas, alcanzar la
diversos cocos Gram positivos (Staphylococcus epidermidis, capa submucosa y difundirse luego a todo el organismo. Los
Streptncoccus spp.), bacilos Gram negativos (Klebsiella microorganismos disponen de una variada cantidad de enzi
tipul spp., Enterobacter spp., Sermtia marcescens, Prote11s spp. , mas que segregan al exterior, que son tas que permiten y
mero Pseudomonas spp., Escherichia spp.), anaerobios facilitan la invasin del organismo atacado. Entre ellas tene
lgico (Bacteroides spp.) y hongos (Candida spp., Gentrichum mos las hialuronidasas que actan sobre el cido hialurni
oy se ca11did11m, Phycomycetes, Fusarium spp., Pneumocystis co descomponiendo el cemento intercelular, las colagcnasas
fo los jiroveci). Estos oportunistas generalmente forman pa1ie que descomponen las fibras de colgeno, las elastasas que
;,re en integrante de la flora normal del organismo humano, aunque actan sobre tas fibras elsticas del tejido conjuntivo, las
o; (3) otras veces su procedencia puede ser del exterior. quinasas que desintegran la fibrina, las coagulasas que
1 debe transforman el fibringeno en fibrina, las lipasas que actan
! nue MECANISMOS DESARROLLADOS DURANTE LA
sobre las grasas, las iecitinasas sobre la lccitina, las ncura
de las minidasas que ac.tan sobre el cido neuramnico produ
INFECCIN ciendo- alteraciones de las membranas celulares, las glkosi
tdores
ie de dasas actan sobre glicoprotenas descomponiendo el moco,
Adherencia microbiana. Los microorganismos, sean las protcasas que actan sobre diversas estructuras proteicas
es de
de procedencia exgena o endgena, para poder ejercer su celulares y sobre la IgA secretora, las dornasas que actan
1dien-
accin patgena, deben traspasar, en primer trmino, las sobre del ADN y las ARN-asas que actan sobre del ARN.
barreras constituidas por la piel con su capa crnea, las mu
cosas, con su secrecin de mucus, IgA secretoria y las clu
1usan las ciliadas del epitelio bronquial. Para esto los microorga Multiplicacin microbiana. Una vez en los tejidos, los
s exi nismos disponen de enzimas mucolticos, mucinasas, cpsu microorganismos, luego de haber pasado a travs del epite
e rnu
las y antgenos de la pared que inhiben la fagocitosis, pro lio, necesltan multiplicarse para alcanzar as el nmero sufi
>ido n teasa que descompone la TgA y sustancias microbicidas, ciente para poder desarrollar la etapa siguiente. Durante el
, Tre para destruir la flora normal. Un paso importante para la proceso de multiplicacin, aprovechan !os elementos nutriti
lte de colonizacin de los microorganismos es la adherencia a las vos del hospedador, para realizar la sntesis de sus propias
clulas hospedadoras. Es as que los bacilos Gram negati sustancias constitutivas. Ciertos nutrientes celulares favore
vos, se va!en de fimbrias y adhesinas que se encuentran en cen el desarrollo y crecimiento de algunos microorganismos,
isrnos su superficie y que actan como mediadores de la unin. En como sucede con la urea, que aumenta el desarrollo de Pro
nedio algunas bacterias Gram positivas, las fibrillas de polisacri /eus nlirabilis en la orina y favorece el desarrollo de la infec
: toxi- dos que rodean a la bacteria, denominadas glicocalix, produ cin y la glucosa en los pacientes diabticos, en !os que
cen la adherencia a las clulas del hospedador o a los objetos favorece la mu!tiplicacin y la gravedad de numerosas in
corno catteres. Las clulas hospedadoras, tambin disponen fecciones producidas por bacterias y hongos.
genos de receptores, que se combinan con las adhesinas bacteria
s que nas, facilitando su unin. En la fijacin a la clula, las bacte El mecanismo de la difusin microbiana, despus de
v1ru rias utiliza formaciones especificas para su adherencia, as haber invadido y haberse multiplicado, puede realizarse por
les de Esche1'ichia coli entcrotoxignica lo hace mediante fimbrias tres vas que son: contigidad, linftica y sangunea. Se
na en del tipo MRE, para adherirse a las clulas del intestino del puede observar difusin por contigidad en las infecciones
es se gado en !as diarreas y Escherichia co!i no enteropatgena bacterianas, micticas y parasitarias de la piel, de las vas
smos usa fimbrias del tipo 1 (MS) para adherirse a las clulas areas (sobre todo cuando hay alteracin del aparato muco
as en epiteliales del aparato urinario, durante los procesos infec ciliar), del tubo digestivo desde las porciones altas hacia las
1 me cioso. Vibrio cholerae usa fimbrias para fijarse a las clulas bajas, del odo en donde los microorganismos de la faringe
rnnes del intestino, Shigella fl.exneri, utiliza fimbrias de tipo 1 para pueden subir por la trompa de Eustaquio, de las cavidades o
; o los adherirse a las clulas epiteliales de la mucosa del intestino senos paranasales por contagio con microorganismos exis
)Cedi grueso para producir luego disentera. El Estreptococo del tentes en la mucosa nasal, de la pleura por difusin de infec
J para grupo A usa corno adhesinas el cido lipoteicoico y la pro- ciones pulmonares y del peritoneo a patiir de infecciones
(237

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14 - Introduccin

intestinales o uterinas. La difusin por va linftica se los fagocitos (Leislunania), las toxinas del tipo de las leuco
produce cuando los microorganismos penetran en los vasos cidinas (Staphylococcus aureus), la toxina alfa
linfticos, que los transportan a los ganglios satlites regio (Staphylococcus aureus), la estreptolisina S (Streptococcus
nales. stos sirven de filtro para la mayor[a de los microor pyogenes) y la enzima coagulasa (Staphy/ococcus aureus).
ganismos, enfrentndose, en dicho lugar, a un gran nmero
de fagocitos y linfocitos, los cuales se encargan de iniciar la TIPOS DE INFECCIN
respuesta inmunolgica. La existencia de mltiples gan
glios en el trayecto de los cordones linfticos, hace que este Existen diversos modelos de infeccin, que se pueden
proceso se repita varias veces para los microorganismos, en encasillar en tres tipos principales: las infecciones de carc
cada uno de los grupos ganglionares que va encontrando en ter txico, las infecciones invasivas y las mixtas.
su trayecto .hacia el conducto torcico, siendo muy pocos
los que pueden alcanzarlo, con lo cual llegan a la sangre, Las infecciones de carcter txico son producidas por
para difundirse as por todo el organismo. Algunos micro microorganismos que tienen escasa capacidad de invasin,
organismos como Sporothrix schenckii y las filarias, que pero que segregan exotoxinas que pueden tener accin local
dan en el sistema linftico, produciendo procesos patolgi o a distancia. A nivel local son ejemplos, Bordetella pertus
cos, La difusin por la va sangunea, suele ser dificil para
sis en las vas areas superiores y Vibrio cholerae en el
la gran mayora de todos los microorganismos, si es que el
intestino. Exotoxinas que actan a distancia son las de
sistema circulatorio permanece intacto, ya que las paredes
Clostridium tetani y Co1Jlf1ebacteri11m diphteriae.
de las venas y arterias son muy poco franqueables, siendo
su parte ms dbil la red capilar aiieriovenosa. Los micro
organismos pueden alcanzar los vasos sanguneos, facilita Las infecciones invasivas son producidas por microor
dos por heridas traumticas, cortaduras, instrumentales ganismos con alto poder invasor, pero sin capacidad de
quirrgicos, agujas, catteres, picaduras de artrpodos y producir toxinas ni reacciones de hipersensibilidad, como
tambin a travs de la va linftica. Estando el microorga se observa en las infecciones por Streptococcus pneumo
nismo en la sangre, su diseminacin por todo el cuerpo es niae, Ye,:<;inia pestis, Naegleriafowleri y Entamoeba histo
sumamente rpida. Ahora bien, su ubicacin en los diversos (ytica.
rganos o tejidos puede deberse a varios factores, como la
velocidad ms lenta de la sangre en los capilares, a la falta Las infecciones mixtas o combinadas, se producen
de revestimiento endotelial en la mdula sea, hgado y por microorganismos que son capaces de invadir el organis
bazo o a la presencia de orificios en e! endotelio, presentes mo, a travs de cualquiera de las vas ya sealadas
en los plexos coroides y en los glomrulos renales. (contigidad, linftica o sangunea), produciendo adems
exotoxinas. Son ejemplos Staphylococrns aureus, que
Los microorganismos son rpidamente captados por adems de su poder invasor, produce varias toxinas muy
los leucocitos de la sangre y eliminados del organismo. Si dainas y Stre.R_tqcoccus pyogenes, invasor al igual que S.
los microorganismos tienen mayor poder patgeno o se aureus y productor de endotoxinas que provocan fiebre y
tratan de individuos inrnunodeprirnidos, ocurre un pasaje manifestaciones clnicas sistmicas.
ms prolongado de los microorganismos por la sangre,
denominndose entonces sepsis o sndrome de respuestas FACTORES QUE DETERMINAN LAS INFECCIO
inflamatoria sistmica (SIRS). NES HUMANAS

Los microorganismos en la sangre pueden hallarse Factores del individuo que influyen en la ocurren
libres en el plasma o bien dentro de hemates, neutrfilos o cia de las enfermedades infecciosas. No todos los indivi
monocitos. Otras veces pueden colonizar tejidos y producir duos son igualmente sensibles a las infecciones, as se pue
focos secundarios de infeccin en hgado, huesos, sistema de observar frente en una epidemia cualquiera, como la
nervioso, sobretodo los microorganismos que estn dentro gripe, que ciertos individuos desarrollan cuadros graves,
de los leucocitos. otros presentan cuadros de mediana intensidad, algunos
tienen sintomatologa leve y tambin estn los que no pre
Estrategias microbianas para evitar Ja acc10n del sentan absolutamente ninguna manifestacin de la enferme
sistema defensivo. Desde el establecimiento dentro del dad. Existen ciertos mecanismos de resistencia natural y de
cerpo, de los microorganismos que pudieron traspasar las defensa del organismo, que juegan un papel importante en
barreras, el hospedador recurre a los polimorfonucleares el proceso infeccioso. La susceptibilidad de las personas
neutrfilos y macrfagos, as corno tambin a los anticuer tambin vara con la edad (los nios y los ancianos son los
pos y a! complemento para tratar de detener el proceso ms vulnerables), la raza (la negra es ms sensible a la
tuberculosis y la blanca a la sfilis), el sexo (la mujer resiste
infeccioso.
mejor que el varn a las infecciones en general), la nutri
cin ( el estado de carencia nutricional predispone a las
No obstante los microorganismos disponen de meca
enfermedades crnicas como la tuberculosis y ciertas mico
nismos para contrarrestar las acciones celulares y humora
sis), la exposicin al fro (las infecciones respiratorias son
les sealadas, mediante la accin de componentes como la ms frecuentes durante el invierno), las enfermedades
cpsula (Streptococcus pneumonfoe, Haemophifus influen virsicas y el VIH en especial (determinan mayor predis
zae, Klebsie!la pneumoniae, C,yptococcus neoformans), posicin a las enfermedades tanto bacterianas como parasi
sustancias mucosas o antgenos de cubierta (antgeno K de
tarias y micticas), ciertos tratamientos con drogas inmu
Escherichia coli, antgeno Vi de Salmonelfa typhi), los
nodepresoras (citostticos) y la diabetes que aumenta y
componentes de la pared (antgeno O de las enterobacterias,
agrava las enfermedades pigenas.
las protenas M de Streptococcus grupo A, la protena A de
Staphylococcus aureus, el factor LA de Neisseria gonorr
hoeae), las proteasas que inhiben el estallido respiratorio en Factores del microorganismo. La gravedad de los

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Microorganismos y parsitos - 1 5

uco cuadros infecciosos depende de la mayor o menor agresivi sanitaria y cada individuo en paiiicular debe poseer adems
alfa dad del agente causal, de la va de penetracin y de la canti suficientes ingresos econmicos, buena vivienda y servicios
ccus dad de microorganismos que ha ingresado en el organismo. adecuados de agua potable y de eliminacin de excretas, as
S). El tropismo es la afinidad que tienen los microorganismos corno conceptos muy claros de ' los problemas mdicos para
o sus toxinas para atacar un determinado sistema o aparato que pueda usar adecuadamente los servicios de la medicina
(Neisseria meningitidis tiene tropismo por el SNC). La preventiva y curativa.
virulencia ha sido definida de varias maneras: l . Capaci
den !4 dad que tiene el agente patgeno de penetrar, reproducir ENFERMEDADES INFECCIOSAS EN LA POBLA
trc- 1 se, invadir (o localizarse en determinados rganos) y pro CIN.
ducir la enfermedad por su presencia. Un microorganismo

por
;in,
.
.j
,

<
sera tanto ms virulento cuanto ms rpidamente ejecuta
las etapas citadas. 2. Capacidad de transmisibilidad
(facultad del agente patgeno de pasar de un ser vivo a
La epidemiologa es la ciencia que se encarga del estu
dio de las enfermedades y de los procesos relacionados con
la salud, investigando las causas que detetminan su fre
ocal otro) y de poder invasor (rapidez para diseminarse en el cuencia, su distribucin dentro de la poblacin, el ambiente
hospedador). 3. Capacidad de producir la muerte. De ecolgico y el medio socio-econmico-cultural en que se
todas estas definiciones, esta es la ms fcil de medir y
'fllS-
n el desarrollan, A continuacin se detallan algunos trminos
de cuantificar mediante la dosis letal de la mitad de los anima utilizados en epidemiologa y que tambin son utilizados en
les inoculados (DL50).
;

rriicrobiologa.

oor- La va de inoculacin o puerta de entrada del microor Enfermedad endmica. Es la que afecta en forma
1 de ganismo puede influir para que su virulencia sea. mayor o constante y moderada en una regin, como la tuberculosis,
menor, corno es el caso de Yersinia pestis, cuya forma la sfilis y las parasitosis intestinales.
bubnica con puerta de entrada cutnea es de mortalidad
JnlO

1sto- ms baj a que la forma pulmonar, con puerta de entrada


'1110-

Enfermedad epidmica. Designa la presencia de una


respiratoria. Microorganismos de una misma especie, pero
enfermedad que aparece por primera vez en una regin o
de razas diferentes, tienen virulencia desigual, como se ve
cuando una enfermedad endmica, ya existente, aumenta
icen en las cepas pandmicas del virus de la gripe.
notoriamente el nmero de casos. Ejemplos son el Dengue
mis- y la gripe.
idas Respecto al poder patgeno de los microorganismos,
ms existen los patgenos estrictos, que tienen la capacidad de
Enfermedad hiperendmica. Se refiere a enfermeda
que producir la enfermedad cada vez que se encuentran dentro
des endmicas que presentan cifras muy elevadas pero
nuy del organismo y los parsitos patgenos oportunistas, que
constantes en una regin. La prevalencia de las parasitosis
e S. slo en determinadas condiciones producen cuadros patol
intestinales, en muChas zonas, sobrepasa el 50%.
re y gicos y es cuando existe una disminucin de los mecanis
mos de defensa especficos o inespecficos.
Enfermedad espordica. Enfermedad que presenta
unos pocos casos en una determinada regin.
'IO- Factores sociales y ambientales que afectan a la
transmisin de las infecciones. En primer trmino hay que
citar los factores del medio ambiente o factores ecolgi Pandemia. Sirve para designar enfermedades que
cos, lo cual si gnifica que las epidemias tienen ms facilidad habitualmente se propagan en todo el mundo.
-en-
para su desarrollo cuando se dan las condiciones de hume
Zoonosis. Hace referencia a las enfermedades que
livi-
me- dad y temperatura exigidas por el agente para su permanen
cia, reproduccin y transmisin. As existen las parasitosis afectan a los animales. Se utilizan tambin los trminos
) la
denominadas geoflicas, que se transmiten al humano a epizootias para las epidemias en animales, panzootias para
ves,
travs del suelo contaminado (Ascaris lumbricoidei, Unci enfermedades epidmicas de animales en todo el mundo y
mos
narias y Strongyloides stercoralis), que se desarrollan cuan enzootias, para designar las enfermedades endmicas en
pre-
do no existe un buen sistema sanitario de eliminacin de animales. Pero habitualmente se emplea el trmino de zoo
me-
excretas y de suministro de agua potable. En segundo lugar nosis para simbolizar las enfermedades de los animales que
1 de
estn los factores socio-econmicos-culturales, que son pueden ser transmitidas a los humanos.
en
mas muy importantes, puesto que existe W1 neto paralelismo
los entre dichas condiciones y el estado de salud. Es bien cono Antropozoonosis. Es el trmino correcto para designar
' la cido que las medidas sanitarias preventivas deben ser com a las enfermedades que se desarrollan generalmente en los
prendidas por la comunidad mediante una buena educacin animales y que pueden propagarse al humano.
: iste
: tri-
las
ICO-
son
des
dis-
asi-
nu-
ay

los

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SECCIN 1 1

I N M U N I DAD

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--- - -----------=

Captulo 3

BARRERAS E INMUNIDAD INESPECFICA

El humano, como todos los seres vivos, est en un mun Es fundamental la integridad de las barreras para que puedan
do en donde todos luchan, atacan y se defienden, para hacer detener a los microorganismos patgenos, si stas se rom
se dueos de su espacio vital y as poder perpetuar la especie pen, entonces los agentes nocivos pueden ingresar al cuerpo
a la que pertenecen. Si bien los humanos ya no estamos y producir procesos patolgicos. El sistema inmune ines
expuestos, sino excepcionalmente, a ser atacados por anima pecfico y especfico recin entran en accin una vez sobre
les de gran tamao, como ocurra hasta hace algunos siglos , pasadas las barreras.
hoy como ayer est rodeado microorganismos que tratan por
todos los medios de invadirnos. Cada centmetro cbico de Piel. La piel intacta difcilmente puede ser atravesada
aire, agua o tierra, encierra millones de microorganismos y por la mayora de las bacterias, hongos, protozoarios y virus.
gusanos, que constantemente se depositan sobre nuestra piel, Los cidos grasos no saturados de la secrecin sebcea pose
son inhalados o son ingeridos. Afortunadamente poseemos en accin letal sobre las bacterias y hongos. Su acidez (pH =-
mecanismos de defensa que nos protegen en contra de estas 5,2-5,8) no permite el desarrollo de muchos microorganis
agresiones. mos y la Jisozima que posee ataca la pared de las bacterias y
hongos. El cido lctico del sudor es eficaz contra un gran
TIPOS DE INMUNIDAD nmero de microorganismos. A ello se agrega adems el
factor de la descamacin constante de la piel que empuja a
La inmunidad es la capacidad que tienen los seres vivos las bacterias hacia el exterior.
de resistir a la agresin de los agentes infecciosos, la cual
puede ser clasificada en inmunidad inespecfica e especfica. Aparato digestivo. En la boca y el esfago no existen
secreciones ni sustancias que le confieran un poder microbi
La inmunidad inespeclica, natural, innata o primitiva, cida notorio. Pero los microorganismos que puedan ser inge
se refiere a la capacidad, que un determinado organismo ridos, pasan rpidamente al estmago junto con la saliva o el
tiene frente a agentes infecciosos, la cual no necesita del bolo alimenticio. La flora microbiana bucal es muy variada
contacto previo con dicho agente infeccioso para producirse y su nmero aumentara grandemente, de no ser por el dre
o estimularse. naje continuo de la saliva, que arrastra mecnicamente los
microorganismos 'hacia el estmago. En la saliva han sido
La inmunidad especfica o adquirida puede ser activa descritas sustancias microbicidas como tiocianato, lisozima,
o pasiva. L1 inmunidad especfica activa indica que el orga peroxidasas y lactoferrina.
nismo produce defensas (anticuerpos y clulas) por estimu
lacin de un agente infeccioso o antgeno. Esta estimulacin La mucosa del estmago es prcticamente estril en
puede ser debida a causas naturales (enfermedades) o artifi ayunas, ya que la mayora de los microorganismos que estn
ciales (vacunas). Puede ser adems temporal (resfro comn) en trnsito, son destruidos por la gran acidei del cido
que es de corta duracin o duradera si es permanente clorhdrico, por los fermentos proteolticos y por la lisozima.
(varicela, sarampin). Generalmente tarda ms de una sema El duodeno suele tener muy pocos, microorganismos, debi
na en manifestarse, que es el plazo que necesita el sistema do al pH alcalino y a las enzimas digestivas. Al neutralizarse
inmune para comenzar la formacin de clulas y anticuer el pH en el yeyunoleon, los microorganismos se reprodu
pos. En la inmunidad adquirida pasiva, anticuerpos forma cen con mayor libertad, para as constituir en el colon una
dos en otro hospedador son recibidos por el individuo sin gran parte del peso de la materia fecal. El aparato digestivo
activacin del sistema inmune. Esto puede ocurrir por cau intacto es una importante barrera contra las infecciones, ya
sas naturales, como es el pasaje de anticuerpos maternos a que cualquier perforacin por heridas o lceras que pueda
travs de la placenta o por causas artificiales, mediante la sufrir, ocasiona la invasin de mltiples grmenes que se
inyeccin de sueros hiperinmunes, que son de accin inme encuentran dentro de la luz intestinal.
diata pero pasajera.
Aparato respiratorio. La nariz y la nasofaringe consi
Suele emplearse el trmino resistencia para designar a guen detener partculas y microorganismos mediante el mo
los mecanismos no relacionados con la inmunidad, que el co segregado por las clulas que tapizan las mucosas. Las
cuerpo opone a los agentes nocivos, reservndose el uso del vas areas, laringe, trquea, bronquios, bronquiolos, pulmo
vocablo inmunidad para expresar la utilizacin de los meca nes, tambin fijan microorganismos y partculas por el moco
nismos de defensa especficos e inespecficos, que el orga que las recubre. Posteriormente, por la accin de las clulas
nismo posee frente a los diversos agentes y sus toxinas. ciliadas son eliminados al exterior y con los reflejos de la tos
y el estornudo se completa el proceso. La gran mayora de
BARRERAS FSICAS Y QUMICAS los microorganismos provenientes de las vas respiratorias
inferiores y que han alcanzado la faringe, finalmente SO!l
La gran mayora de los microorganismos son frenados deglutidos, pasando al estmago donde son destruidos.

Conjuntiva ocular. El mecanismo de defensa est


antes que el sistema inmune acte. De hecho, solo unos
pocos agentes pueden atravesar las barreras naturales del
organismo, sin las cuales no sera posible nuestra existencia. dado por el arrastre mecnico de las lgrimas, que conduce a

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20 Inmunidad

los microorganismos hacia el saco lagrimal. Adems las alcalina y citocromo. Los macrfagos forman parte del siste
lgrima."i poseen un alto poder bactericida debido a su gran ma fagoctico mononuclear, estn presentes tanto en la san
concentracin en lisozima. gre como en los tejidos. Son de mayor tamao que los
neutrfilos y tienen una vida ms larga que ellos. Poseen un
Aparato genitourinario. Las vas urinarias se limpian retculo endoplsmico rugoso y numerosas r1itocondrias. En
de microorganismos mediante el arrastre mecnico de la las infecciones motivadas por helmintos son atrados los
orina cuando es eliminada, as como tambin por el efecto eosinfilos. Otras clulas que acuden al foco inflamatorio,
de su pH normalmente cido. La vagina en la mujer tiene un en el caso de las clulas infectadas por virus, son los deno
pH cido debido a la formacin de cido lctico por micro minados natural killer (NK), estimulados por el interfern.
organismos del gnero Lactobacillus, vulgarmente conoci Muchas camadas de linfocitos, macrfagos y otros tipos de
dos con el nombre de bacilos de DOderlein, lo cual le confie clulas son atradas al proceso inflamatorio. Para atTibar a la
re resistencia a la colonizacin por microorganismos entri lesin los leucocitos migran a travs de las paredes vascula
cos potencialmente patgenos. res de los capilares (diapdesis), utilizando los orificios
existentes entre las clulas endoteliales, para lo cual inter
Flora normal. Los microorganismos que habitan en vienen las sustancias mediadoras que se fijan a los recepto
intestino, piel, boca, faringe y vagina, protegen al cuerpo res de los leucocitos. A continuacin las clulas estimuladas
mediante la competencia que desarrollan por el espacio y los inician su accin antibacteriana produciendo mctabolitos de
alimentos con agentes patgenos y oportunistas y mediante oxgeno txicos y lisozima. La produccin de cido lctico
la produccin de bacteriocinas corno las colicinas. Las infec por parte de las clulas inflamatorias disminuye el pH tisu
ciones oportunistas pueden desarrollarse en el curso de trata lar, que destruye a los microorganismos. Entre los mediado
mientos prolongados con antimicrobianos, que hace dismi res qumicos de la inflamacin se encuentran las anafilotoxi
nuir enormemente la flora microbiana normal, dejando el nas C3a y C5a, producidas durante la activacin del comple
espacio libre para que los microorganismos potencialmente mento, que estimulan la liberacin de histamina de parte de
patgenos, puedan desarrollarse. los mastocitos, la cual produce vasodilatacin. Las quininas
son sustancias que alteran el tono vascular y aumentan su
Compuestos inespecficos. Properdina, es una prote permeabilidad. Una de ellas es la bradiquinina. Otros media
na semejante a las globulinas sanguneas. Acta sobre baci dores son las calicrenas, que son enzimas producidas duran
los Gram negativos, necesita de sales de Mg para desarrollar te la cascada de coagulacin y que tambin pueden ser libe
su efectividad. No aumenta en el curso de las infecciones y radas por los leucocitos. Las endotoxinas de las bacterias
es un constituyente normal del suero sanguneo. Lisozima Gram negativas motivan la activacin de muchos mediado
(muramidasa), es una sustancia presente en la piel, lgrimas res inespecfico de la inflamacin, entre los que se encuen
y otros humores, que acta sobre la pared bacteriana. Lacto tran leucotrienos, prostaglandinas y algunos fosfolpidos.
ferrina y transferrina, actan como bacteriostticos, debi
do a la sustraccin de hieffo, sobre los microorganismos La inmunidacJ (nespecfica .puede dividirse en dos com
intestinales como el Escherichia coli. ponentes bsicos: los compuestos (molculas o conjunto de
molculas), como el complemento, los mediadores de la
inflamacin, las molculas de adhesin intercelular, las pro
tenas de fase aguda y los interferones y las clulas, cuya
INMUNIDAD INESPECFICA

Caractersticas generales. Cuando los microorganis


accin principal est dada por los fagocitos, pero tambin
con acciones importantes de clulas NK, mastocitos, eosin
mos han rebasado las barreras naturales y logran penetrar en
filos y plaquetas. Estos dos componentes bsicos, actan en
la intimidad de los tej idos, el organismo dispone de meca forma coordinada y amplificada sobre los microorganismos
nismos de defensa inespecficos, que se pone inmediatamen patgenos. El sistema inmune inespecfico se encuentra
te en accin y que se traducen finalmente en un proceso organizado para potenciar su accin desde el momento en
inflamatorio. Esta respuesta inflamatoria es aplicable a cual que se establece contacto con los microorganismos agreso
quier tipo de microorganismo o agente infeccioso y consiste res. La fagocitosis se ve favorecida por el complemento y
fundamentalmente en una reaccin coordinada de clulas y este produce anafilotoxinas que reclutan y activan a los fa
compuestos que actan como mediadores, muchos de los gocitos. Completan la accin inmune, molcula mediadoras
cuales tienen funcin quimiotctica. de la inflamacin, los interferones, las clulas NK, los eo
sinfilos y protenas de fase aguda como la PCR.
J_..a inflamacin presenta cuatro signos: rubor, calor,
dolor y tumor. El rubor es debido a la vasodilatacin de los
COMPLEMENTO
capilares sanguneos de la zona, el calor obedece a la mayor
circulacin de sangre, el dolor es ocasionado por la libera
cin de mediadores y la compresin e irritacin de los fasc El descubrimiento del complemento en el suero se debe
culos nerviosos y el tumor es consecuencia del mayor aflujo a las investigaciones de Pfeiffer en cobayos inyectados con
sanguneo y a la extravasacin de lquidos y clulas. L1s Vibrio cholerae y a los trabajos posteriores de Bordet y
primeras clulas en participar en la inflamacin son los fa Gengou.
gocitos. Los primeros fagocitos en acceder al foco inflama
torio son los polimorfonucleares neutrfilos, seguidos poste Propiedades. Se conocen 9 fracciones que componen
riormente por los macrfagos. La llegada de los linfocitos es el complemento que se designan con la letra C, seguida de
ms tarda, cuando interviene la inmunidad adquirida. Los nmeros arbigos (Cl, C2, C3, etc... ). El CI consta de 3
neutrfilos, predominantes en la sangre tienen vida muy subfracciones (Clq, C1r y Cls), por lo que puede conside
corta, . poseen ncleo segmentado y granulaciones azurfilas rarse 11 el nmero total de fracciones que lo integran. Todas
primarias ricas en mieloperoxidasas, . elastasa, catepsina G, las fracciones del complemento son protenas de elevado
defensinas e hidrolasas, adems muestran grnulos secunda peso molecular, entre 80.000 y 600.000 Da. Muchas de las
rio:-:; especficos conteniendo lactoferrina, lisozima, fosfatasa fracciones son proenzimas, que adquieren su poder enzim
tico despus de sufrir una escisin proteoltica. Se acostum-,

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Barreras e inmunidad inespecfica - 21

e
siste-
la funcin que desarrollan. Para los receptores de comple
1 san

)
mento se antepone a veces las letras CD, seguidas de un
ie los nmero, o bien, las letras CR tambin seguidas de un nme
ro,
en un C3

!
ts. En
1s los
torio, H,O La actividad del complemento se destruye a 56 C en 30
deno minutos, pero debe sealarse que no todas las fracciones

)
:ern. tienen la misma termolabilidad. El complemento est pre
os de C3i sente en todo suero normal de mamfero, aves y anfibios, en
:r a la una proporcin equivalente al 10% del total de las globuli
nas del plasma. El complemento no aumenta con la inmuni

l
,cula
ficios zacin, pero disminuye a veces en el curso de ciertas virosis
inter como la fiebre amarilla y en las enfermedades autoinmunes.
Mg El complemento interviene en los procesos de quimiotaxis,
epto
'' opsonizacin, inmunoadherencia, formacin de anafilotoxi
ladas
os de nas y neutralizacin de virus. La mayora de las fracciones
lctico C3i del complemento tiene una posicin electrofortica que se
tisu sita entre las globulinas beta, con excepcin de la fraccin
iado Clq situada entre las gamma, la Cls situada entre las alpha,
B la C8 en las beta y la C9 en las alfa.
>toxi
nple
te de Caractersticas del complemento. De acuerdo con su
t1inas forma de actuar, en el complemento se distinguen las frac
Ln su Factor D ciones que utilizan la va clsica (Clq, Clr, Cls, C4, C2,
edia- C3) dependiente de los anticuerpos, los que usan la va alter
1ran na independiente de los anticuerpos (C3b, B, D) y las que
libe actan en el complejo de ataque a las membranas (CAM)
erias (C5, C6, C7, C8, C9). Tambin existen las sustancias regu
iado ladoras como properdina, inhibidor de la C1, protena de
:uen- C3iBb unin a C4, H, l y S.
(C3 convertasa)
Existen por otro lado los receptores del complemento
:om como el CRl que ,aceleran la disociacin de las C3 converta

l
sas -e incrementan la fagocitosis de los microorganismos

e
:o de
le la recubiertos con C3b o C4b, El CR2 depura de los complejos
pro Mg inmunes que tienen complemento. El CR3 es una protena
cuya > (integrina) de adherencia, importante en la fagocitosis de los
1bin microorganismos recubiertos con C3b. El CR4 tambin de la
;in C3 familia de las integrinas que acta en la fagocitosis de los
n en microorganismos recubiertos con C3b.
)
, mos

....----,/
:ntra Protenas del complemento. Segn la homologa es

U)
o en tructural y las funciones que cumplen, las diversas fraccio


eso nes proteicas del complemento pueden ser agrupadas en
to y C3b familias de la manera siguiente:
) fa
oras Anafilotoxina l. Serina-proteasas (Clr, Cls, C2, Factor B, Factor D,
membrana plasmtica
eo- Se estabiliza sobre la
Factor O.Estas protenas poseen en su estructura la molcula
serina-proteasa de unos 25.000 Da, que al escindirse libera
FIGURA 3.1: activacin de C3 por la va alternativa. Al la serina-proteasa activa. En el proceso de activacin se
final del proceso C3b queda estabilizada en la membrana produce una separacin entre la serina-proteasa y el resto de
del microorganismo y C3a, una molcula pequea queda
en solucin, actuando como anafilotoxina.
la molcula, que queda libre.
lebe
con 2. Protenas de localizacin (C3, C4, C5), Las prote
,t y bra poner una barra encima para distinguir la fraccin de nas C3 y C5 estn constituidas por una cadena a y otra cade
complemento que se ha activado y as distinguirlo de la na 13, la protena C4 tiene cadenas 13 y y. Las porciones ter
misma fraccin precursora no activada. Los productos de minales de las cadenas de estas fracciones, posee 77 ami
,nen escisin del complemento se designan con la letra "a" si son nocidos aminoterminales ricos en cistena, que pueden
1 de fracciones pequeas y con las letras "b" si son grandes, C3a escindirse, formando lo que se denominan anafilotoxinas.
le 3 y C3b por ejemplo. Sin embargo es una excepcin la esci Una vez separada la fraccin de anafilotoxina, la cual queda
ide sin de C2 en C2a (grande) y C2b (pequeo). Las protenas en solucin, el resto molecular de C3, C4 y C5, forman
>das de la va alternativa del complemento se designan con letras uniones covalentes con la membrana de la clula atacada,
acto maysculas, que pueden estar precedidas por la letra F iniciando el proceso de fijacin del complemento.
las (factor). As se usa indistintamente B o FB, D o FD. Las
m protenas reguladoras se designan con abreviaturas driva 3. Protenas antipticas (C6, C7, C8, C9). Estas pro
Jm- das del nombre de cada una de ellas, que tienen relacin con tenas forman el compljo de ataque a la membrana (CAM);

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22 - Inmunidad

VA CLSICA VA ALTERNA
Ag Ac Toxinas bacterianas y otros activadores

C1q

c FactorB

j_
C1q

!r C3b , 8 FactorD
Mg'
1C1s Ba
C3b, Bb (C3 Convertasa)

1C1s
! C3

Ji

'"),
C1s (C1 Estearasa)

C4 / Mg2 'C2

'
C4a
,/ \t. ,/ \t.
C4b <;:2a C2b (Quinina)
(Anafilotoxina) ,.
J('
C4b,2a (C3 convertasa) C3b, Bb, 3b C3b, Bb, 3bP

' !'-.I
(C5 Convertasa lbil) (C5 Convertasa estable)

(Anafi!otoxina)

{C5 Convertasa)C4b, 2a, 3b

C5

C5a (A.nafilotoxina)
C5b C6 C7
Cadena del
com plejo de
! '
C5b, 6. 7
ataque a la - cs, cg
membrana
C5b 7, 8, 9 (Complejo de Ataque a la Membrana, CAM)
l

LISIS

FIGURA 3.2: activacin del complemento, por las vas clsica y alterna. Ambas vas se unen en la CS, con distintas
convertasas, La CSb al adherirse a la membrana del microorganismo, inicia la cadena de reacciones que terminan
con la.formacin del complejo de ataque a la membrana (CAM).

poseen segmentos hidrfobos que se activan, lo que les per polisacridos bacterianos pueden actuar como activadores
mite actuar sobre la membrana plasmtica de la clula ataca por la va alternativa, as como tambin extractos de levadu
da, insertndose en dicha zona como un poro. ras (zimosan), ciertas clulas infectadas por virus, enzimas
proteo!ticas y el factor del veneno de la cobra. La unin
4. Protenas de unin (Protenas de unin a C3 y C4, inespecfica de C3b a ciertos microorganismos, puede ini
factor H, protenas de unin a C4, factor acelerador del de ciar el proceso ltico del CAM y activar la accin de clulas
caimiento, receptores de complemento). Regulan interaccio fagocticas y de NK. La fraccin C3 es el constituyente ms
nes de C3 y C4 con otras protenas del sistema complemento importante del sistema complemento y el que presenta ma
y con otras clulas. yor concentracin en el plasma sanguneo ( l.200 g/ml).
Puede activarst:; por hidrlisis espontnea o mediante la
Va alternativa de activacin del complemento. Los accin proteoltica de la convertasa C3 que la escinde en
activadores de la va alternativa del complemento estn C3a y C3b, etapa en la que se inicia el prbceso de la activa
constituidos corrientemente por sustancias de estructura cin del complemento. El arranque inicial para la activacin
polisacrida de la pared bacteriana (endotoxinas). Otros de C3, comienza cuando un enlace de tio-ester se hidroliza,
formando entonces C3 (H20) o C3i, que se une con el factor

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Barreras e inmunidad inespecfica - 23

B en presencia de Mg+2 Posteriormente, mediante la accin virus de Epstein-Barr e IFNa.


del factor D, se escinde y elimina la porcin Ba, quedando
entonces formada la molcula C3i8b o C3 convertasa, que 3. CR3 (CD18/llb), Est presente en neutrfilos, clu
puede volver a escindir a otras molculas de C3 en C3a y las NK, monocitos, macrfagos, y clulas dendrticas folicu
C3b (FIGURA 3.2). lares. Se liga a iC3b, a ciertos microorganismos como hon
gos y bacterias y al zimosan. Es un heterodmero con una
Despus de la unin de C3b con el activador de la va cadena p (CDI 8) y una cadena u (CD l l b).
alterna, se agrega el factor 8, formando la molcula C3b,B,
sobre la cual se verifica la accin enzimtica del factor D 4. CR4 (CD18/llc). Tiene una cadena p (CD18) y una
con la presencia de iones de Mg+2 y como consecuencia de a (CD 1 1 c). Poseen estos receptores los neutrfilos, monoci
ello se libera el pptido Ba, formndose a la vez el complejo tos y macrfagos. Liga al iC3b.
C3b,Bb, que por su accin enzimtica se transforma en C3
convertasa de la va alterna, que actuando sobre C3 libera Receptores de anafilotoxinas. Los fragmentos de C3a
los fragmentos C3a y C3b. Esta etapa puede establecer rela y C5a son anafilotoxinas encargadas de activar la degranula
ciones con la va clsica en aquella parte de la secuencia en cin de los mastocitos y de unirse con los macrfagos. Los
que por la accin del complejo C4b,2a se liberan tambin efectos de la unin con los receptores especficos celulares,
los fragmentos C3a y C3b. El compuesto C3b,Bb, luego de provocan la liberacin de leucotrienos, prostaglandinas,
escindir la molcula C3 puede unirse al fragmento C3b, factor de necrosis tumoral, TL-1 , IL-8 e histamina.
originando un nuevo compuesto trimolecular C3b,Bb,3b,
capaz de activar CS, por lo que se denomina tambin C5
Actividad inmunolgica del complemento. Si bien la
convertasa de la va alterna, que es muy lbil, pero al recibir
principal accin del complemento es la formacin del CAM,
una molcula de P, forma un complejo tetramolecular
tambin realiza una serie de otras acciones, no menos im
C3b,Bb,3b,P muy estable que acta como C5 convertasa
portantes dentro del proceso inmunitario.
estable. Cualquiera de estas dos convertasas, la estable y la
inestable actan sobre CS (FIGURA 3.3).
l. Citolisis. Es un fenmeno por el cual las clulas son
lisadas por el CAM. Es la principal accin del sistema de
Complejo de ataque a la membrana (CAM). El CAM
se inicia mediante la accin de las CS convertasas C4b,2a,3b
complemento. La fijacin sobre la membrana celular de las
fracciones C5 al C9, da como resultado la lisis celular o
de la va clsica y las C3b,Bb,3b y C3b,Bb,3b,P de la va
bacteriana. La lisis se produce por la penetracin del cilin
alterna. Por la accin de cualquiera de estas C5 convertasas
dro hidrofbico del complemento (C8) en la bicapa lipdica
el C5 se escinde en dos fragmentos, CSa y C5b, el pptido
de la membrana que se completa con la participacin del
C5a tiene funcin de anafilotoxina, ingresa a la circulacin y
complejo polimrico C9, que producen los poros en dicha
acta sobre las clulas cebadas y sobre los leucocitos
memb)'apa, inicindose el proceso de la lisis celular. Las
(quimiotaxis). En cambio C5b se une al C6 y C7, sobre la
diferentes clases de clulas sensibles a la accin citoltica
membrana plasmtica contiguo a C3b, para formar el com
incluyen glbulos rojos (hemlisis), plaquetas, clulas tumo
plejo C5b,6,7. La unin con C7 marca la transicin del com
rales, linfocitos, bacterias (bacteriolisis) y virus con cubierta
plejo desde un estado hidroflico a otro estado hidrofbico.
lipoproteca, pudiendo realizarse el proceso ltico tanto por
Con la unin del C8 hidrofbico, se inicia la formacin de
un poro, que se introducen en la bicapa lipdica de la mem la va clsica como por la va alterna.
brana plasmtica de la clula atacada. Con el agregado de la
fraccin polimrica C9 se completa el CAM, que es una 2. Produccin de anafilotoxinas. Son sustancias de
abertura en la membrana plasmtica, produciendo la lisis de bajo peso molecular, capaces de producir la degranulacin
la clula. En el sistema inmune, existe una familia de com de los mastocitos, con la liberacin de la histamina encerra
plejos proteicos que producen poros, que involucra al siste da en ellos, C3a y C5a poseen esta accin. La degranulacin
ma de complemento, los linfocitos T, los eosinfilos y las de las clulas cebadas y la posterior accin de la histamina
clulas NK. tiene un efecto beneficioso en la inflamacin, pero puede
provocar cuadros de anafilaxia, fiebre de heno, otras alergias
1tas
y contraccin de los msculos lisos.
nan
Receptores del complemento. Durante la activacin
del complemento se liberan factores que pueden unirse a los
receptores de las clulas inmunitarias. Estos factores partici 3. Produccin de quimiotaxinas. Son sustancias que
pan en el papel mediador que el complemento tiene para inducen la migracin de los leucocitos hacia el lugar en
iniciar ciertas acciones. Existen adems tres productos deri donde se encuentra el agente infeccioso. Son quimiotaxinas
lores vados de C3 que son el C3b, iC3b y C3dg, que tienen capa las fracciones C3a y C5a. Otra quimiotaxina es el factor
adu cidad de unirse a la clula diana, actuando como fragmentos quimiotctico de los eosinfilos en la anafilaxia (FCE-A).
imas opsnicos. Los receptores de las clulas inmunitarias para el La activacin de neutrfilos, monocitos y macrfagos por
nin complemento son CR 1, CR2, CR3 y CR4. medio de fragmentos menores del complemento, es rpida e
ini- inmediata, debido a la fcil difusin de dichos elementos en
lulas l. CRl (CD35). Este receptor est presente en los lin el suero sanguneo.
ms focitos B, neutrfilos, monocitos, macrfagos, eritrocitos,
ma clulas dendrticas foliculares y clulas epiteliales glomeru 4. Opsonizacin. La fagocitosis se ve facilitada por el
rnl). lares. Es un fuerte receptor para C3b y menos intensamente recubrimiento de la clula diana con C3b y C4b, las que son
e la para iC3b y C4b. reconocidas por las clulas del sistema inmunitario que ten
e en gan receptores especficos para dichas fracciones en su su
tiva 2. CR2 (CD21). Se encuentra presente en los linfocitos perficie.
cin B, clulas dendrticas foliculares y clulas epitel iales del
,liza, cuello uterino y de la nasofaringe. Se liga con iC3b. C3dg, 5. Formacin de bradiquinina. La secuencia de libe
Lctor racin de bradiquinina con la participacin del complemento

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24 - Inmunidad

se relaciona con el proceso de la coagulacin sangunea. El obstructiva, tiroiditis, dermatomiositis, infarto agudo del
factor Hageman activado (factor XII de la coagulacin), miocardio, colitis ulcerosa, fiebre tifoidea, diabetes, gota y
adems de iniciar el proceso de la coagulacin sangunea, sndrome de Reiter. El C l est disminuido en el edema
activa el complemento C l , el cual se encarga de iniciar la angioneurtico; !as fracciones CL C2, C3 y C4 bajan nota
reaccin en cadena del complemento, sin que intervenga la blemente en el lupus eritematoso diseminado y en la enfer
unin antgeno anticuerpo. Tambin la accin de la plasmi medad srica aguda que presenta inmunocomplejos circu
na sobre el factor Hageman hace que se liberen otros frag lantes, Puede disminuir solo C3 y el factor B en las glome
mentos enzimticos aclivos, que mediante una serie de rulonefritis membrana-proliferativas y en las septicemias a
reacciones lleva a !a formacin final de quininogenasa, que microorganismos Gram negativos; otros cuadros en los que
es la que se encarga de hidrolizar el quiningeno cuyo re se produce disminucin del complemento son la cirrosis
sultado final es la bradiquinina, un pptido vasoactivo con heptica avanzada, la coagulacin intravascular disemina
accin parecida a la histamina, vale decir, que puede oca da, la inmunodeficiencia grave, la infeccin ocasionada por
sionar edemas, vasodilatacin y contraccin de los mscu derivaciones ventrculo-arteriales, la hcmoglobinuria pa
los lisos. roxstica 'a frigore", la miastenia gravis, la hepatitis infec
ciosa con artritis, el rechazo de los injertos y el !infosarco
Regulacin del sistema de complemento. Un primer ma.
mecanismo que previene la activacin no controlada de
todo el sistema del complemento, es la labilidad o fugaci MOLECULAS DE ADHESIN INTERCELULAR
dad que tienen las molculas activadas, impidiendo la reac
cin en cascada del sistema. En segundo trmino, existen Dentro de la de inmunidad inespccfica, en el proceso
protenas que se fijan a los componentes del complemento, de adherencia de las clulas inmunitarias a otras clulas,
actuando sobre ellos enzimticamente en forma especfica. para ejercer sus funciones de defensa. participan varias
Estas protenas actan sobre las fracciones activadas del molculas accesorias que pertenecen a cuatro familias: las
complemento, con lo que intervienen en la regulacin del selectinas, las integrinas, las globulinas y las diriginas.
proceso. Los compuestos reguladores del complemento
son: Las integrinas comprenden el grupo mayor de las
molculas de adhesin; cada miembro de esta familia est
l. Inactivador de Cl. Bloquea C l y tambin a la plas formado por dos polipptidos unidos en forma no covalen
mina, la calicrena (enzima del sistema de las quininas) y a te, el poliptido a y el polipptido 13, que se fijan atravesan
los factores XI y XII del sistema de coagulacin. do la membrana. Existen tres subfamilias principales que
son: las integrinas 31 que permiten la unin de las clulas a
2. Factor I. Inactiva las molculas de C3b cuando se la matriz extracelular, las integrinas 32 que participan en la
encuentra sola, pero no acta sobre las molculas complejas adhesin de los leucocitos al endoteJio o a otras clulas y
corno C4b,2a3b, o la C3b,Bb. las integrinas 33 que cOJ.iboran en las interacciones de pla
quetas y neutrfilos en el proceso inflamatorio o vascular.
3. Factor H. Al unirse a C3b acelera la accin destruc
tiva del factor I sobre dicha fraccin. Puede unirse al C3b Las selectinas son molculas de !ectina de adhesin
en diversos complejos donde ste interviene, por lo cual celular, transmembrana, con dominios extra-celulares
tambin participa en la etapa enzimtica C3b,Bb,3b,P. homlogos a los de CRI y CR2; incluye las molculas
ELAM-1, GMP-140 y MEL-14. Su dominio N terminal
4. Protena ligada a C4 (C4bp). Facilita la destruc tiene propiedades de lectina por intermedio de la cual se
cin de C4b por el factor I. unen a ligandos que tienen porciones de hidratos de carbo
no.
5. Inactivador de anafilotoxina. Es una enzima inac
tivadora de los fragmentos C3a, C4a y C5a. Las globulinas comprenden las molculas ICAM-1,
ICAM-2 y VCAM; todas ellas son in<lucibles sobre el en
6. Protena S. Puede unirse al C5b,6,7 en el momento dotelio vascular; el nmero de dominios extracelulares es
de su formacin, inhibiendo la accin citoltica del CAM. variable, cinco para el ICAM- 1 , dos para el ICAM-2 y seis
dominios para el VCAM. El ICAM-1 y el ICAM-2 tienen
7. Fctor nefrtico (C3NeF). Es un producto patolgi los dos dominios terminales homlogos.
co presente en enfermos con nefritis mesangiocapilar, que
muestra disminucin de C3 en sangre. Las diriginas vasculares constituyen otro grupo de
molculas de adhesin que se manifiestan en el epitelio alto
8. Factor B. Es un proactivador de C3.
de las vnulas (HEV) y en otros endotelios en las inflama
ciones crnicas. Una dirigina est presente en el HEV de
los ganglios linfticos perifricos y otra dirigina hace lo
9. Factor D. Acta como convertasa del factor B mismo en el HEV del tejido linfoide de las mucosas como
(proactivador de C3). el de las placas de Peyer; en estos rganos linfoides regulan
10. Properdina. Se une al complejo C3b,Bb,3B ines
el trfico linfocitario.
table para estabilizarlo en forma de C3b,Bb,3b,P en la va Participacin del complemento en la fagocitosis. Las
alterna. anafilotoxinas C3a y C5a, actan sobre los fagocitos,
haciendo que los mismos afluyan al sitio donde son produ
Variaciones del complemento. Se observa aumento cidas. Tambin los fagocitos poseen receptores para la C3b.
de la cantidad del complemento en el reumatismo articular Si esta fraccin del complemento se encuentra sobre la
agudo, artrits reumatoide, periarteritis nudosa, ictericia

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arreras e inmunidad inespecfica - 25

o del
ota y
:dema
nota Virus
!nfer
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lome-
1ias a
1s que
rrosis
mina


la por
a pa
infec
Replicacin Sntesis

/
:arco-


viral protelna
antivrica
Fabricacin ele
interfern

oceso
lulas, lnterfern
""---'V
mrias Clula infectada por virus Clula con "estado" anti-virus
s: las

FIGURA 3.3: mecanismo bsico de accin de los interferones. La clula infectada con virus produce interfern, el
cual es secretado. Otras clulas reciben la seal del interfern, el que enva una seal al ncleo, el cual produce en
donucleasas e hidrolasas, que actan sobre el ARNm y las protenas de la cpside del virus, evitando que se pueda
e las
armar, confirindole, de esta manera un estado antivrico.
1 est
alen
esan
; que
das a superficie de los microorganismos, stos pueden ser fagoci La penetracin de un virus dentro de una clula desa
en la tados al poder adherirse a la superficie del mismo a travs rrolla en ella la expresin de los IFNa y IFN3. Estos son
las y del receptor. Las fracciones C3a y C5a actan sobre los liberados al exterior de la misma, donde pueden ser capta
. mastocitos haciendo que stos liberen sus grnulos ricos en dos por otras cllllas vecinas, a travs de sus receptores
! pia
lar. histamina, leucotrieno B y el factor de necrosis tumoral, IFN. Las clulas que recibieron la seal del IFN, sintetizan
sustancias que atraen y activan los neutrfilos que al encon las protenas antivricas (proteinasas y endonucleasas), que
trarse con bacterias recubiertas de C3b pueden fagocitarlas. actan en forma selectiva contra virus similares (FIGURA
esin
3.1).
1lares
culas INTERFERONES.
nina! PROTEINAS DE FASE AGUDA
al se Si bien los interferones (IFN) fueron descritos inicial
arbo- mente como sustancias antivirus, hoy se sabe que son tam Durante la inflamacin aguda se liberan sustancias
bin factores de crecimiento celular e inmunorreguladores proteicas, por parte del hgado, las cuales aumentan rpida
(FIGURA 3 . 1 ). Se conocen 3 grupos de interferones. El mente su concentracin en el suero sanguneo. La protena
M-1 , IFNa que es elaborado por leucocitos. El IFNj3 conformado C reactiva reacciona con el polisacrido C del Streptococ
:l en por un solo tipo de protena, producido por fibroblastos. El cus pneumoniae y con otras bacterias, Otros compuestos
es es IFNy tambin contiene un solo tipo de protena, es fabrica son las protenas fijadoras de lipopolisacridos, l a alfa-1
1 seis do por linfocitos T y NK. Todos los interferones tienen antitripsina, el factor beta del complemento y la transferri
enen actividad antivrica. El interfern IFNy tiene como clulas na.
diana los monocitos y las clulas macrofgicas, reforzando
en ellos su capacidad de clula presentadora de antgeno
(CPA) e induciendo la formacin de CMH 11. Las acciones
Las endotoxinas bacterianas provocan la liberacin de
o de l L - 1 (pirgeno endgeno) que aumenta la temperatura cor
antivricas y anti cido nuclico (antiproliferativas) de JFNa poral y de IL-6 que estimula la produccin de la PCR por
, alto
ama e IFNl3 son ms potentes que las del IFNy. parte del hgado, haciendo que su concentracin plasmtica
V de suba hasta un nivel 1000 veces superior a la concentracin
;e lo El IFNy acta sobre las siguientes clulas: macrfa normal. Dependiente del calcio, la PCR se fija a las bacte
:orno gos, granulocitos y clulas endoteliales activndolas; linfo rias que contienen fosforilcolina en sus membranas activan
ulan citos Te activndolos; linfocitos B inhibindolos; clulas do la va clsica del complemento, fijando C3b a l a superfi
NK activndolas; diversas clulas con efecto antivirus e cie bacteriana con lo que facilita la adherencia a los fagoci
induciendo la expresin de CMH I y CMH II y sobre todo tos y su ulterior englobamiento.
. Las el sistema hematopoytico inhibindolo. El IFNy es una
:itos, linfocina adems de ser interfern. La liberacin de interfe La accin de la IL - 1 hace que aumente muchsimo l a
rones, sobre todo de los tipos IFNa e IFNj3, pueden ser concentracin de las protenas de l a fase aguda: l a protena
'Odu
ejecutadas por diversos tipos de clulas frente a la penetra C reactiva (PCR), la protena fijadora de manosa, l a gluco
C3b.
re la
cin de los virus, en cambio, el lFNy es elaborado sin parti protena l y el componente P del amiloide srico, atr!
cipacin de los virus. buyndose a las dos primera protenas propiedades opsom-

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26 - Inmunidad

zantes y fijadoras de complemento, participando la tercera aumento de la permeabilidad vascular.


en el transporte proteico y la ltima actuando como precur
sora amiloide. 9. Fibrinopptidos, derivados por degradacin de la

La protena fijadora de manosa (PFM) dependiente del


fibrina en el sistema de la coagulacin, aumentan la per
meabilidad vascular y la quimiotaxis de neutrfi!os y
calcio, reacciona tanto con la manosa como con otras hexo macrfagos.
sas fijndose a las bacterias, h9ngos, parsito$ o virus, sien
do capaz de provocar la accin de la' C3 convertasa clsica. 10. Prostaglandina E2, se origina en la va de la ciclo
La PFM pertenece a la familia de las colectinas (colgeno + -oxigenasa, potencia el efecto de la bradicinina y de la his
lectina) que poseen la propiedad de reconocer carbohidratos tamina.
extraos de los propios. Presentan cido silico y galactosa
terminales que los protegen y permiten as que estos lti 11. Leucotrieno B4, procede de la va de la lipo
mos no sean atacados. Las PFM tienen amplia difusin oxigena.sa, produce quimiotaxis de los neutrfilos actuando
tanto en los tejidos como en las mucosas. Otras sustancias sinrgicamente con la prostaglandina E2, aumentando la
que participan, aunque moderadamente, en la fase aguda permeabilidad vascular.
son: los inhibidores de la proteinasa (inhibe proteasas bac
terianas), la antiquimiotrpsina (inhibe proteinasas bacteria
nas), los factores C3, C9 y factor B (aumentan la funcin 12. Leucotrieno D4, procede tambin de la va de la
lipo-oxigenasa, contrae los msculos lisos y aumenta la
del complemento), la ceruloplasrnina (recolect,ora de 02), el
fibringeno (participa en la coagulacin sangunea), la an penneabilidad vascular.
giotensina (aumenta la tensin arterial, la fibronectina
(favorece la adhesin celular) y la haptoglobulina (fija la La migracin direccional de los fagocitos, se realiza a
hemoglobina). travs de un gradiente de concentracin de la molcula
quimiotctica, que va de menor a mayor concentracin,
orientada hacia el sitio de la inflamacin o de la reaccin
MEDIADORES DE LA INFLAMACIN inmunitaria. Existe un gran nmero de molculas qui
miotcticas, especialmente para los macrfagos y neutrfi
Los mediadores inespee:ficos de la inflamacin sobre los, siendo las principales la fraccin esa, el leucotrieno B4
vienen como resultado de la interaccin del sistema inmune y la interleucina IL-8.
inespecfico con los microorganismos. Son compuestos que
se generan a partir de la accin del complemento sobre
determinado tipos de clulas o por los fagocitos, producien CLULAS DEL SISTEMA INMUNE
do la amplificacin de fa respuesta inflamatoria con un
resultado final de mayor afluencia de fagocitos y sustancia Todas las clulas ge participan del sistema inmune
microbicidas provenientes de la sangre. provienen de la clula hematopoytica primordial o clula
madre, la cual da origen a dos progenies diferentes que son:
l. La histamina, producida por mastocitos y basfilos, la progenie mieloide y la progenie linfoide. La clula pro
aumenta la permeabilidad vascular y contrae los msculos
genitora mieloide indiferenciada, desarrolla los granuloci
lisos.
tos, as llamados por la presencia de grnulos caractersti
2. La serotonina, presente en mastocitos y plaquetas, cos en el citoplasma, los cuales pueden ser eosinfilos,
produce efectos similares a la histarnina sobre los vasos y neutrfilos, basfilos (todos ellos presentes en la sangre
los msculos lisos. circulante) y los mastocitos con asiento tisular. Igualmente
derivan de esta clula progenitora los monocitos y macrfa
3. El factor activador de plaquetas, presente en gos. Todas estas clulas son efectoras, involucradas en la
neutrfilos y macrfagos, libera mediadores plaquetarios inmunidad inespecfica y no estn involucradas en el reco
aumentando la permeabilidad vascular, contrayendo los
nocimiento especfico de antgenos. Neutrfilos, monocitos
msculos lisos y activando neutrfilos.
y rnacrfagos tienen la capacidad de fagocitar microorga
4. El factor quimiotctico de los neutrfilos, liberado nismos.La clula progenitora linfoide comn da origen a
por los rriastocitos, estimula la quimiotaxis de los neutrfi los linfocitos T y B, que son las clulas especializadas del
los. sistema inmune, las cuales dan una respuesta especfica,
frente a los procesos infecciosos ocasionados por microor
5. IL-8, producida por linfocitos, interviene en la loca ganismos. Los linfocitos T desarrollan los linfocitos Te
lizacin de los monocitos. (citotxicos) y los linfocitos TH (T helpers, en ingls) o de
ayuda. Los linfocitos B al activarse desarrollan los plasmo
6. C3a (anafilotoxina), procede del clivaje de C3, de citos o clulas formadoras de anticuerpos. Las clulas asesi
nas (o natural killer, en ingls) tienen un origen incierto, ya
granula mastocitos y contrae msculos lisos.

7. CSa, se origina por clivaje de es, degranula masto que tienen apariencia linfoide, pero son clulas efectoras
citos, estimula quimiotaxis de neutrfilos y macrfago.s, primitivas, que no poseen un sistema de reconocimiento
activa neutrfilos, aumenta permeabilidad capilar y contrae especfico del antgeno (FIGURA 3.4).
msculos lisos.
S i bien no hay acciones individuales en el proceso
8. Bradicinina, tiene su origen en el sistema cinina, inmunitario, se entiende que las clulas encargadas de la
produce vasodilatacin, contraccin de msculos lisos y respuesta inmune especfica sbn los linfocitos y que las

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B rreras e inmunidad inespecifica - 27

a per-
de la

ilos y

1 ciclo
la his- Clula primordal \
hematopoytica

lipo-
uando
ido la

de la
nta la

Megacariocito \
Clula progenitora mieloide

Jiza a
,l &

lcula +
lCin,
1ccin o; (!) (!)
qui-
1trfi- i

Linfocito B
10 B4
Natural Killer Plaquetas

mune
;lula
: son: Citotxico Cooperador Macrfago
pro-
Plasmocito Eosinfilo Basfi!o, mastodto

: FIGURA 3.4: clulas que participan en la respuesta inmune, linfocitos, mielocitos y plaquetas.
Iloci-
:rsti-
filos,
rngre dems son clulas efectoras (neutrfilos, clulas NK, eo Los neutrfilos constituyen los fagocitos ms impor
1ente sinfilos y plaquetas) o colaboradoras (macrfagos) no tantes. Derivan de una clula precursora de la mdula sea,
rfa- especializadas. miden entre 10 y 1 5 m de dimetro, tienen ncleo seg
en la mentado y dos tipos de granulaciones en e.! citoplasma, las
reco- CLULAS FAGOCTICAS primarias o azurfilas que contienen mieloperoxidasas,
hidrolasas cidas, proteasas neutras, lisozima, sustancia
citos mucoide cida y protenas catinicas que participan en la
)rga- La fagocitosis es el proceso por el cual se incorporan
pa1tculas a una clula. Las clulas que tienen capacidad destruccin intracelular de los microorganismos y las gra
n a fagocitaria pueden ser catalogadas en dos grupos: los nulaciones secundarias o especificas que contienen sustan
s del cias de accin antibacteriana como la lisozima y la lactofe
fica,
micrfagos o polimorfonucleares neutrfilos (o simplemen
te neutrfilos) y los macrfagos. Los macrfagos en general rrina; Los neutrfilos poseen movimientos ameboides y
:oor- son conocidos como el sistema fagoctico mononuclear. pueden adherirse al endotelio de los vasos capilares, para
Los neutrfilos se encuentran principalmente en sangre iniciar la trasvasacin; viven por lo general 2 a 3 das en los
; Te
circulante o en los exudados peritoneales al comienzo de tejidos y algo menos en la sangre.
o de
los procesos inflamatorios.
;mo- Los neutrfilos tienen una alta velocidad de prduc
sesi- Fagocitos de la sangre. En la sangre existen bsica cin, que alcanza a unos 80.000.000 de clulas por minuto
), ya mente cinco tipos de leucocitos cuya concentracin porcen en condiciones normales. Son factores quimiotcticos para
oras tual en el adulto es: los neutrfilos, los antgenos bacterianos, los productos de
ento otros leucocitos y plaquetas, los factores derivados de la
Neutrfilos: 55-65% fibrinlisis y los fragmentos proteicos de activacin del
Eosinfilos: 2A% complemento, C3a y C5a. Al activarse por alguno de estos
Basfilos: 0,1 -2% factores, el neutrfilo se adhiere a los endotelios capilares e

:e la
ceso Linfocitos: 25-35% inicia la diapdesis hacia el estmulo para el cual se siente
Monocitos: 4-8% atrado. Tienen un alto poder fagocitario y al ingerir los
las microorganismos los neutrfilos los incluyen dentro de

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28 - Inmunidad

Lisosoma

Fagosoma

Englobame nto Fusin de lisosomas Degranulacin:


Altcr.:icin de la membrana
Estallido res pi ratori9
Hidrlisis

FIGURA 3.5: etapas de la fagocitosis. En un primer momento hay una atraccin, por quimiotaxinas u opsoninas, del
fagocito hacia el microorganismo. Para que se inicie el proceso de la fagocitosis debe haber adherencia del microor
ganismo con el fagocito, una vez ocurrido, el fagocito engloba al microorganismo en una vacuola. La destruccin del
microorganismo dentro de la vacuola se inicia con la fusin de los lisosomas a la membrana de la vacuola. Los liso
somas se degranulan, liberando las enzimas y productos al interior de la vacuola. En un primer momento actan los
compuestos que alteran la pared y la membrana de los grmenes, seguidamente actan las enzimas que producen el
estallido respiratorio y por ltimo intervienen las hidrolasas que digieren al microbio muerto. Finalmente se liberan al
exterior los detritos de la fagocitosis.

vacuolas denominadas fagosomas, que rpidamente se fu somal. Los macrfagos cuando digieren las diferentes part
sionan con los lisosomas formando los fagolisosomas. A culas, desarrollan una degradacin controlada de los antge
veces los neutrfilos son capaces de liberar al exterior sus nos, de tal manera a preservar la integridad de su estructura
grnulos y sus sustancias citotxicas, cuando se activan por antignica con todos los determinantes especficos, para as
la accin de los complejos inmunes a travs de sus recepto poder estimular la accin de los linfocitos T y B. Los
res Fcy. macrfagos al igual que los neutrfilos provienen de la
mdula sea y su tiempo de vida media en los tejidos es de
Fagocitos de los tejidos. Son los macrfagos, muy varios meses.
variables en cuanto a forma, tamao, motilidad y localiza
cin y de acuerdo con estas caractersticas reciben nombres Accin de las quimiotaxina,;;. Son sustancias que
diversos: osteoclastos (huesos), clulas de Kupffer tienen la propiedad de atraer a los fagocitos, como ya se
(hgado), clulas microgliales (sistema nervioso central), citara anteriormente. Actan como quimiotaxinas: ( l ) va
histiocitos (tejido conectivo), macrfagos alveolares rias fracciones del complemento; (2) ciertos factores bacte
(pulmones), clulas dendrticas (bazo, ganglios), clulas rianos solubles, como algunos lpidos de Mycobacteriwn
mesangiales (rin) y macrfagos en cualquier tejido u tuberculosis, diversas sustancias obtenidas de microorga
rgano. Son clulas grandes de ms de 15 m de dimetro, nismos anaerobios, microorganismos del gnero Coryne
con ncleo nico arrionado. El bazo tiene la mayor canti bacteriwn y protenas del E<cherichia co!i; (3) fibrinoppti
dad de macrfagos por gramo que ningn otro rgano, dos derivados de procesos de fibrin\isis; (4) ciertas sustan
aunque el hgado por su tamao es el mayor depsito de cias eliminadas por los mastocitos como la histarnina y el
estas clulas en el organismo. La morfologa de los macr factor ECF-A; (5) ciertas sustancias eliminadas por rnacr
fagos es variable y depende sobre todo de su motilidad, fagos; (6) protenas procedentes de los neutrfilos y (7)
pudiendo mostrar en los preparados fijados y coloreados varias linfoquinas. Existen sustancias que producen quimio
formas redondeadas con escasos seudpodos o formas alar taxis negativa, vale decir, impiden la atraccin del fagocito
gadas con prolongaciones. S i la emisin de seudpodos es realizada por un agente quirniotctico. Tienen quimiotaxis
muy activa, presentan en su citoplasma numerosos lisoso negativa los fluoruros y los iones de arsnico.
mas formados por enzimas hidrolticas inactivas, que al
ponerse en contacto con partculas ingeridas se activan. La Etapas de la fagocitosis. En primer lugar las clulas
presencia de inclusiones citoplasmticas que suelen obser fagocitarias son atradas por medio de las quirniotaxinas al
varse normalmente en los macrfagos, corresponden a res sitio donde deben actuar, luego se produce la adherencia o
tos celulares en proceso de desintegracin por accin liso- acoplamiento de la bacteria a la membrana celular del fago-

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Barreras e inmunidad inespecfica - 29

cito, posteriormente sucede el englobamiento o incorpora binacin con ciertas enzimas se forman complejos ditioldi
cin de la partcula dentro del citoplasma celular, lo que va nitroso de hierro que llevan a! agotamiento de los depsitos
seguido al final por la digestin de dicha sustancia. En caso de hierro citoplsmicos, elemento que es indispensable para
de tratarse de macrfagos se preservan los antgenos para el desarrollo de muchas bacterias.
su posterior presentacin a los linfocitos (FIGURA 3.5).
) Adherencia. La adherencia de las bacterias a la mem
3. Por ltimo actan las hidrolasas, que parten las
molculas. Las principales enzimas hidrolticas de los
brana celular del macrfago necesita la presencia de catio macrfagos son; hidrolasa, beta-acetilglucosamina, fosfata
nes calcio y magnesio. Las sustancias que promueven el sa cida, ribonucleasa cida, Desoxirribonucleasa cida,
acoplamiento del fagocito con las partculas se denominan ari1sulfatasa, catepsina, fagocitina, colagenasa, citocromo C
opsoninas o bacteriotropinas. Actan como opsoninas los reductasa, beta galactosidasa, beta glucuronidasa, lisozima
factores C3b y C4b del complemento. Estas sustancias al y alpha manosidasa. Una vez terminada la digestin en
fijarse sobre las bacterias, hacen que se adhieran al macr zimtica se forman detritus que son eliminados. En las
fi'!go, por cuanto en la membrana de ste existen receptores clulas de sistema macrofgico monoctico se retienen los
para C3b y C4b. Tambin actan corno opsoninas las pro antgenos que sern entregados a los linfocitos mediante
tenas sricas a2 y J, la protena C reactiva. molculas del CMH II.

Englobamiento de las partculas. Una vez que la Para que la funcin del fagocito en el mecanismo de
partcula contacta con el fagocito, ste la incorpora dentro defensa se desarrolle de una manera normal. es necesario
de su citoplasma quedando incluida dentro de un fagosoma. que los mismos se encuentren cuantitativamente dentro de
,% las cifras consideradas como adecuadas y corrientes para el
, :
Fusin de lisosomas. Para que se cumpla el proceso organismo al cual pertenecen, as como tamhin deben
de digestin se necesita la presencia de iones de ca+2, Mg+2 mostrar cualitativamente que sus respuestas fisiopatolgi
' :r y energa. Los lisosomas del fagocito entran en contacto cas son las que se dan habitualmente frente a los diversos
con el fagosoma, fusionndose con el mismo, originando lo estmulos biolgicos. Cabe acotar que existen muchas defi
' que se denomina fagolisosoma. ciencias congnitas y adquiridas de los procesos que invo
lucran !a fagocitosis y la accin del complemento. Las per
sonas con estos defectos son propensas a adquirir y desarro

1
:IS, del Degranulacin. Dentro del fagolisosoma se produce
llar cuadros infecciosos que norrnarnalmente no ocurren en
i croor- inmediatamente la digestin de las partculas ingeridas
n del mediante degranulacin de los lisosomas del fagocitos, los inmunocompetentes.
s liso- l liberando las enzimas que terminan degradando al microor
an los ,i ganismo en su interior. Bsicamente se observan 3 etapas: CLULAS NO FAGOCTICAS
cen el
iran al
l ). La primera consiste en una alteracin de la pared Mastocitos y basfilos. Los granulocitos basfilos
y la membrana plasmtica del microorganismo. Los son menos del 0,2% de los leucocitos sanguneos y se ca
grnulos especficos y azurfilos de los neutrfilos racterizan por tener grnulos basfilos de tamao variable.
; part- (lisozima) que se introducen dentro de los fagosomas, en Los mastocitos no se observan en sangre circulante, sola
rntge- tran en contacto con los microorganismos, atacndolos con mente se los encuentra en los tejidos. Se desconoce su rela
uctura diversos compuestos que afectan la pared celular bacteriana cin con los basfilos, con los cuales tienen caracteres mor
ara as provocando la escisin del mucopptido de la misma. La folgicos similares. Se conocen dos tipos de mastocitos que
!. Los membrana celular es daada con compuestos como las son: el de las membranas mucosas (MCM) y e! mastocilo
de la defcnsinas de bajo peso molecular ricas en arginina, las del tejido conjuntivo (MCTC). Los grnulos, tanto de los
es de protenas catinicas de alto peso molecular, las protenas basfilos como de los mastocitos contienen principalmente
bactericidas que aumentan la permeabilidad de la membra histamina, heparina, sustancia reactiva lenta de la anafilaxia
na y la catepsina G que es una proteinasa neutra. (SRS-A) y el factor quimiotctico eosinfilo de la anafi
IS que laxia (FCE-A). La degranulacin de los mastocitos es gene
ya se 2). Una vez alteradas la pared y la membrana de los ralmente simultnea y la totalidad de los contenidos granu
1 ) va- lares se eliminan al exterior de la clula, debido a la fusin
microorganismos, dentro del fagolisosoma actan un con
bactc- junto de enzimas que ocasionan lo que se denomina el esta de los grnulos previa a la degranulacin
rerium llido respiratorio, en el que intervienen una serie de com
oorga- puestos muy oxidantes con oxgeno y nitrgeno, Al iniciar Plaquetas. Las plaquetas derivan de los megacarioci
?ryne- se la fagocitosis se produce un aumento de las hexosasmo tos de la mdula sea. Poseen numerosas granulaciones_ en
1ppti- nofosfato, que llevan al desarrollo de nicotinamidadinu su interior. Juegan un papel importante en la coagulacin
ustan- cletido fosfato reducido (NADPH). Los electrones de sangunea, as como en las respuestas inmunitarias frente a
a y el NADPH al atravesar la membrana del futuro fagosoma se la inflamacin. Tienen receptores para el factor VIII, para
nacr- incorporan a la flavoprotena, flavina adenina dinucletido la lgG y para la IgE. Poseen CMH I y el complejo Gp !lb/
y (7) (FAD) y posteriormente al citocromo de la membrana IIIa (CD 41) o citoadhesina, responsable de la unin con el
Jimio- plasmtica (Cit.b 558), bajo cuyo control se generan los fibringeno, la fibronectina y la vitronectina. Al producirse
gocito aniones superxidos que mediante la superxido dismutasa una lesin del endotelio vascular las plaquetas se adhieren
otaxis engendra H202 capaz de liberar por un lado radicales entre si y taponan la zona erosionada, a la vez que segregan
hidroxilos sumamente activos contra las bacterias. Por otro sustancias que aumentan la permeabilidad y activan el com
lado mediante la accin de las mieloperoxidasas y el in plemento, as como las quirniotaxinas para los leucocitos.
lulas cloro forma un sistema halogenado bactericida muy oxidan
nas al te. Mediante el acoplamiento enzimtico del 02 al xido Clulas agresoras naturales (NK, por sus siglas en
ricia o ntrico se forma el peroxinitrito ('ONOO), que es suma ingls, natural killer). Por su aspecto similar, son denomi
fago- mente txico para los microorganismos y mediante la com- nados tambin linfocitos NK. Constituyen el 15% de los

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30 - Inmunidad

Compuestos
Complemento microbicidas

i /" ..,...----+

Mediadores --+
Microorganismo

Macrfago
Quimiotaxis
Endotelio

FIGURA 3.6: mecanismo de funcionamiento sinrgico del sistema inmune inespecfico. Por accin de las anafilotoxi
nas C3a y C5a, derivadas de la accin del complemento sobre los microorganismos o por la fagocitosis, se producen
una serie de mediadores que actan sobre los vasos sanguneos. La histamina producida por los mastocitos, ocasio
na vasodilatacin y por lo tanto mayor afluencia de sangre a la zona con la infeccin. Los mediadores producidos
por los macrfagos hacen que los neutrfilos se adhieran al endotelio vascular y puedan pasar a travs de la clulas
del epitelio, yendo luego al sitio de la inflamacin por quimiotaxis. La extravasacin del plasma aporta tambin com
puestos microbicidas y ms complemento.

linfocitos sanguneos, carecen de receptores antignicos ACCIN DE LA INMUNIDAD INESPECFICA EN


TCR y de las inmunoglobulinas, que son caractersticos de CONJUNTO
los linfocitos T y B respectivamente. Algunos marcadores
de superficie de las clulas NK, son compartidos con los El sistema inmune inespecfico es un conjunto de ac
linfocitos T, con los granulocitos y con los monocitos. La ciones muy efectivas en contra de la entrada y estableci
presencia de los marcadores CD 1 CD56 y la ausencia de miento de los microorganismos en el cuerpo. Tanto clulas
CD3 forman la caracterstica fundamental para identificar como compuestos en solucin actan en conjunto y en for
las clulas NK. Los linfocitos NK participan en la lisis de ma sinrgica para amplificar la respuesta defensiva. Cuando
las clulas tumorales. Las clulas NK pueden destruir a las un microorganismo consigue activar el complemento o es
clulas dianas infectadas por virus, al unirse los receptores fagocitado por un fagocito, se liberan una serie de mediado
de la clula NK a la superficie de la clula infectada. Una res que aumentan la permeabilidad de los capilares sangu
vez unida a la clula diana liberan la perforina, contenida neos, que permite el trasudado de molculas bactericidas
en sus grnulos, para que se formen canales a travs de la del plasma y la atraccin quimiotctica de los neutrfilos a
membrana de la clula diana, los cuales permiten la entrada la zona de la infeccin. Los macrfagos, al comienzo de la
de las granzimas (serina proteasa), el factor de necrosis inflamacin aguda secretan IL-1 y factor de necrosis tumo
tumoral (FNT) y otros factores citotxicos granulares que ral, que actan sobre el endotelio vascular, el cual ex.presa
son capaces de desencadenar la desintegracin celular, molculas en su superficie (ELAM-1 , ICAM-1) que hacen
comenzando por el ADN, por apoptosis. que los neutrfilos se peguen a la superficie de las clulas
endoteliales. Las prostaglandinas y los leucotrienos secreta
dos por el macrfago hacen que las clulas endoteliales se
Eosinfilos. Constituyen el 2 al 4% de los leucocitos separen y puedan pasar los neutrfilos entre ellas. Al pasar
de la sangre en personas normales. Si bien pueden hacerlo, entremedio de las clulas, los neutrfilos son activados por
no fagocitan generalmente bacterias. Su ncleo es habitual el pptido activador de neutrfilos (NAP- 1) y una vez de
mente bilobulado. Presentan numerosas granulaciones ntro del tejido son guiados por la NAP-2, la IL-8, secreta
acidfilas que en la microscopa electrnica presentan cris das por el macrfago y por las anafilotoxinas C3a y CSa del
complemento. Los mastocitos tienen una labor mu impor
taloides centrales. Los eosinfilos son atrados por produc tante en la resolucin de los procesos infecciosos a travs
tos quimiotcticos de las clulas T, mastocitos y basfilos, de la inflamacin. Son activados por C3a y CSa, producien
conocidos como factor quimiotctico eosinfilo de la anafi do la degrarulacin de productos que tienen accin sobre
laxia (FCE-A). Frente al antgeno activador, que puede ser los capilares sanguneos. El principal componente de los
un parsito, o un prceso anafilctico, sus grnulos se ad grnulos de los maslocitos es la histamina, la cual produce
hieren a la membraa celular y se liberan, vertiendo al exte vasodilatacin. El efecto final amplificado se observa en la
FIGURA 3.6.
rior sustancias txicas y porinas. El papel principal de los
eosinfilos es frente a los antgenos grandes que no pueden
ser fagocitados, como son los helmintos.

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Captulo 4

INMUNIDAD ESPECFICA

La fagocitosis es la manifestacin ms primitiva de la l. Timo. El timo en los mamferos es un rgano bilobu


inmunidad celular de los animales, ya los invertebrados lado, situado dentro del trax, por encima del corazn y de
poseen dicho mecanismo de defensa. Las inmunoglobulinas los grandes vasos. A menor aumento muestra una cpsula
o anticuerpos aparecen recin en los vertebrados, siendo la colgena pelifrica con linfocitos T organizados en lobuli
IgM la primera en estar presente en los vertebrados inferio llos, que estn separadas por trabculas de tejido conjuntivo;
res. A medida que se asciende en la escala filognica, el a mayor aumento, dentro de cada lobulillo se distinguen dos
orden.de aparicin de las restantes inmunoglobulinas es IgG, reas principales que son la corteza o regin externa con
JgA, lgE y por ltimo IgD. Si bien los peces primitivos no clulas inmaduras en rpida divisin y la mdula contenien
tienen IgG, otros como los tiburones y las rayas presentan do clulas linfoides ms madrnas.
esta inmunoglobulina. Los batracios presentan IgA, adems
lotoxi
de las dos inmunoglobulinas anteriores. Las aves tienen En la corteza es donde se ubican la mayor parte de los
iducen IgM, IgG e lgA y los mamferos, presentan . IgE e JgD, timocitos inmaduros en divisin, que luego de un tiempo--se
1casio adems de las tres inmunoglobulinas citadas. La respuesta al
L1cidos
dirigen a la regin medular. Los linfocitos medulares pre
:lulas
ingreso de los agentes extraos al organismo est a cargo de sentan el marcador CD4 que no tienen los linfocitos cortica
1 com-
clulas originadas en la mdula sea (FIGURA 4. 1). El de les.
sarrollo del sistema inmunitario, a travs de la evolucin de
las especies animales, culmina en los mamferos, con un Las clulas madres del timo ontognicamente se identi
conjunto de rganos y tej idos capaces de desarrollar distin ficaron en el saco vitelino en primer lugar, luego en el hgaw
tos tipos de clulas con capacidad de producir mecanisnos y do del feto y posteriormente en la mdula sea fetal. La
' A EN sustancias que confieren inmunidad al organismo, atacado migracin desde la mdula sea hacia el timo contina du
por el ms diverso tipo de microorganismos. La inmunidad rante toda la vida adulta.
especfica es desarrollada por dos tipos de linfocitos en el
de ac humano: los linfocitos T (timocitos), que tienen a su cargo la
ableci Existe adems de los linfocitos, una trama de clulas
inmunidad mediada por clulas y la coordinacin general de
clulas epiteliales en los lqbulillos del timo, tanto en la zona cortical
la respuesta inmune y los linfocitos B (osteomedulares) que
en for comO en la medular, clulas que juegan un papel preponde
son responsables de la inmunidad humoral, por medio de la
:uando rante en la diferenciacin de las clulas primordiales linfoi
sntesis de los anticuerpos. des hasta constituir los linfocitos T. Se distinguen dentro de
o o es
:diado las clulas epiteliales del timo las llamadas clulas epitelia
:angu SISTEMA LINFOIDE les nodrizas que asientan en la parte ms externa de la zona
ricidas cortical, las clulas epiteliales interdigitales que conforman
ifilos a El sistema linfoide abarca a los linfocitos y a las clulas la trama dentro de la corteza y las clulas epiteliales medula
J de la agregadas o colaboradoras, como son los macrfagos, las res ubicadas como dice su nombre en la regin medular
tumo clulas presentadoras de antgeno (CPA) y en algunos teji (FIGURA 4. 1 ).
xpresa dos las clulas epiteliales. El sistema linfoide puede presen
hacen tarse estructurado en rganos bien definidos corno el timo,
el bazo y los ganglios linfticos o disperso en forma de teji
Se encuentran adems rnacrfagos y clulas entrelaza
lulas das derivadas de la mdula sea, ricas ambas en CMH II.
ecreta dos linfoides. Las clulas emigrantes primordiales de la progenie de linfo
ales se citos T que provienen de la mdula sea, colonizan la regin
[ pasar Segn su ubicacin y funciones el sistema linfoide cortical de los lobulillos en su porcin ms externa y desde
los por puede dividirse en rganos y tejidos primarios o centrales y all, a medida que van madurando, migran hacia la regin
'ez de en rganos o tejidos secundarios o perifricos. medular. Una vez completada la maduracin de los linfoci
ecreta tos T, salen del timo a travs de las'venas de la regin corti
:sa ctel rganos y tejidos linfoides primarios. En ellos las cowmedular o por los vasos linfticos.
impor clulas plimordiales linfoides se multiplican y maduran en
travs clulas funcionales. As en los mamferos, los linfocitos T El timo en el humano, as como en los mamferos, invo
lucien maduran en el timo, en tanto que en el hgado fetal y en la luciona con la edad. Esta involucin que es notoria en la
sobre mdula sea maduran los linfocitos B pubertad, se inicia en la regin, cortical, la cual puede des
de los aparecer totalmente, en cambio persisten ms tiempo las
roduce Las aves tienen la bolsa de Fabricio que es una forma zonas medulares. Pa1iicipan en la atrofia del timo las hormo
:1. en la cin sacciforme de la pared intestinal cerca de la cloaca, nas corticoesteroidcs.
como sitio de rnadrnacin de los linfocitos B.
2. Bolsa de Fabricio y sus equivalentes en el huma
Es a nivel de los rganos linfoides primarios donde los no. En las aves la bolsa de Fabricio es una formacin que se
linfocitos adquieren los receptores antignicos especficos - y ubica cerca de la cloaca. Los linfocitos que se diferencian
es all donde los linfocitos son seleccionados por su capaci aqu se denominan lifocitos B, derivando esta letra de l a
dad de tolerancia frente a los antgenos propios del organis palabra bolsa. E n los mamferos que carecen de la blsa de
mo. Fabricio, la maduracin de los linfocitos B se reahza, al

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32 - Inmunidad

FIGURA 4.1: estructura del timo. Los lbulos presentan una corteza y una mdula. En el proceso de madurcin de
los linfocitos T, se dividen en la corteza y luego se van ubicando, ya maduros, en la mdula. En el esquema de la
derecha solamente se simbolizaron las clulas que acompaan a los linfocitos T.

comienzo de la vida, en el hgado y la mdula sea fetal y en La pulpa roja se encarga de eliminar los glbulos rojos
los adultos solamente en la mdula sea. Como la mdula caducos, as como puede, en caso necesario, verter a la san
sea del adulto contiene adems linfocitos T maduros y gre eritrocitos, granulocitos y plaquetas frente a necesidades
otros tipos de clulas plasmticas, se deduce que la mdula urgentes como las hemorragias agudas. La pulpa blanca est
sea acta tambin como un rgano linfoide secundario en compuesta por tejido linfoide, dispuesto habitualmente alre
el humano. dedor de una arteriola central, zona que se conoce con el
nombre de lmina linf9ide periarteriolar, que est compuesta
rganos y tejidos linfoides secundarios. Los rganos de linfocitos T y B. Los linfocitos T se ubican inmediata
linfoides perifricos o secundarios son el bazo, los ganglios mente alrededor de la arteriola. En los centros de germina
linfticos y el tejido linfoide de las mucosas como es el que cin linfoide se encuentran adems clulas dendrticas y
se encuentra en las amgdalas, en los ganglios linfticos macrfagos, ambas actan como CPA. La pulpa roja se
zonales, en las adenoides integrantes del anillo de Waldeyer, compone de senos venosos y cordones celulares constituidos
en el tejido linfoide asociado a los bronquios, en las placas por glbulos rojos, granulocitos, linfocitos, plaquetas y clu
de Peyer del intestino y en el tejido linfoide urogenital. En las plasmticas. Las arteriolas centrales rodeadas por linfoci
estos rganos perifricos es donde el linfocito se enfrenta tos, terminan abrindose en los cordones de la pulpa roja, lo
con el antgeno, sitio en donde adems colaboran las CPA. que hace que las clulas de la sangre circulante queden fcil
mente atrapadas all. Las plaquetas y los eritrocitos viejos
Los linfocitos producidos en los rgan_os linfoides pri son fagocitados por los macrfagos. Las clulas que no su
marios, timo y mdula sea, migran hacia los tejidos linfoi fren destruccin, re-ingresan de nuevo al torrente sanguineo,
des secundarios. Los tejidos linfoides secundarios o perifri para lo cual atraviesan las paredes de los senos venosos.

2. Ganglios linfticos (FIGURA 4.2). La red de gan


cos pueden ser de dos tipos: (1) rganos linfoides encapsula
dos como el bazo y los ganglios linfticos y (2) tejidos lin
foides ne;, encapsulados que se encuentran dispersos por todo glios extendida por todo el organismo en los mamferos,
el organismo, principalmente ubicados en las zonas muco tiene por misin filtrar la linfa y los lquidos intersticiales
sas, como son los que existen en el intestino, en los bron procedentes de cualquier rincn del cuerpo, deteniendo los
quios y en el aparato genitourinario. antgenos que pretenden atravesarlo. La linfa y los lquidos
filtrados en los ganglios son conducidos finalmente al con
En las regiones mucosas es importante el mecanismo ducto torcico.
efector constituido por la IgA secretora que se vierte directa
mente en las superficies epiteliales producidos por los linfo Los ganglios miden de 1 a 15 mm, redondos o arriona
citos B. Funcionalmente el bazo acta contra los antgenos dos, tienen un hilio por donde entran los vasos sanguneos y
que le llegan por la va sangunea o los ganglios linfticos sale el nico linftico eferente. El ingreso de la linfa se hace
aferentes. a travs de varios vasos aferentes. Los ganglios habitual
mente se los encuentra agrupados en las regiones del cuello,
1. Bazo. Constituye el rgano linftico ms grande del axilas, mediastino, cavidad abdominal e ingles. Morfolgi
adulto. Est situado en el cuadrante superior izquierdo del camente presentan una cubierta capsular colgena, con
abdomen, cerca del diafragma. Posee una cpsula o cubierta trabculas dispuestas radialmcnte, que sirven de sostn a Jas
colgena externa que lo envuelve y que emite trabculas clulas del sistema linfoide. Los linfocitos B estn ubicados
hacia el interior. Tiene dos clases de tejidos fundamentales en la regin cortical y los linfocitos T en la regin paracorti
que se denominan pulpa roja y pulpa blanca (FIGURA 4.2). cal. Los cordones celulares de la regin medular contienen

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Inmunidad especfica - 33

Linftic
Seno subcapsular
Arteria Central
Hilio
Seno venoso Cordones

blanca
Pulpa
Linftico
Zona eferente
marginal
Paracorteza
Arteria
Pulpa roja Folculo
primario Corteza

Vena trabecular dula Folculo secundario y


M
centro germinal
:r1
in de
'f GG IO LINFTICO
BAZO
1 de l a
L

FIGURA 4.2: estructuras del bazo y de lm ganglio linftico.


p
)S rojos tnto linfocitos B como T, as como abundantes macrfagos Circulacin linfocitaria. Los linfocitos existentes en
la san- y clulas plasmticas. En la zona paracortical se encuentran los tejidos linfoides secundarios ya diferenciados en linfoci
sidades las clulas interdigitales similares a las del bazo, con mol tos T y B, no permanecen siempre en ellos, sino estn en un
1ca est culas CMH II en su membrana. Los senos linfticos medula continuo desplazamiento que los lleva desde un rgano o
te alre- res drenan hacia el hilio. En esta zona los macrfagos que sistema linfoide a otro. Se estima que entre el 1 y el 2% de
con el tapizan los cordones, se encargan de fagocitar los antgenos los linfocitos estn en movimiento de un lugar a otro cada
1puesta
i
-1
extraos y entregarlos al tejido linfoide, del ganglio. Los hora. Es constante filovimiento permite que una gran varie
tediata- centros foliculares corticales contienen agregados de linfoci dad de linfocitos, puedan contactar y reconocer el antgeno.
irmina-
ticas y
tos B, los que pueden presentar focos de parti'cipacin activa Para que se produzca la seleccin linfocitaria, la constante
en su interior (folculos secundarios). recirculacin de los linfocitos permite que el linfocito es
roja se pecfico acceda in situ para tomar contacto con el antgeno
:ituidos correspondiente. Para que el antgeno encuentre al linfocito,
En el caso del ingreso de antgenos timo-dependientes
y clu- las clulas CPA, deben probar una gran variedad de linfoci
al ganglio, el vaso eferente ganglionar muestra mayor salida
linfoci- tos diferentes, hasta encontrar el que tenga el receptor es
de linfocitos T. Los linfocitos B de las reas germinales
roja, lo pecfico. Los linfocitos circulantes en sangre penetran con
n fcil- poseen IgM e IgD en la superficie. Se encuentran adems en
estos centros clulas dendrticas (CPA), macrfagos y linfo facilidad en los ganglios linfticos a travs de las venas del
viejos endotelio alto (VEA), que se encuentran principalmente en
no su- citos TH. Todas estas clulas desempean un papel impor
tante en el desarrollo de los linfocitos B con memoria. la paracorteza y secundariamente en la corteza. Si el tejido
guineo, carece de VEA no es penetrado por los linfocitos. Con los
JS.
3. Sistema linfoide mucoso. Entre las agrupaciones del linfocitos activados por el antgeno, se produce posterior
tejido linfoide no encapsulado se encuentra el tejido linfoide mente el contacto con otras clulas dentro de los folculos
le gan- linfoides.
asociado de las mucosas (TLAM), que se identifica especial
1feros,
mente en la amgdala, en la lmina propia y reas submuco
CLULAS LINFOIDES
ticiales
1do los sas del aparato digestivo, en las vas respiratorias y en el
iquidos aparato genitourinario. En estas zonas forman acmulos
difusos, ndulos aislados o en grupos y centros germinales o Los linfocitos son producidos por los rganos linfoides
al con-
folculos secundarios de clulas linfoides. En el intestino primarios o centrales, timo y mdula sea y desde all mi
1 intervienen unas clulas epiteliales denominadas clulas M , gran a los rganos linfoides secundarios, bazo, ganglios,

debido a los numerosos micropliegues que muestran en su amgdalas y tejidos linfoides en general. El nmero de clu
riona- superficie, son clulas con funciones de CPA que procesan y las linfoides alcanza la increble cifra de 10 12, representado
neos y ,1 presentan el antgeno a los linfocitos T. Estas clulas activan el 2% del peso corporal humano. Su concentracin en la
;e hace ! una respuesta inmunolgica especfica rpida a nivel de las sangre es ms elevada en el nio (40-50%), disminuyendo
1bitual- mucosas, producidas por los linfocitos B. Esta respuesta es hasta el 30%, en los adultos. Son clulas de larga vida, que
cuello, del tipo Inmunoglobulina A secretora (IgAs), anticuerpo que va desde unos cuantos aos hasta toda la vida del individuo.
folgi-
a, con
atraviesa las clulas epiteliales mediante la captacin y se Miden de 6 a 1 2 m, pueden tener o no granulaciones azur
crecin activa de estas clulas y acta en la superficie de las filas y la relacin ncleo-citoplsmica es variable. En la
n a ,las mucosas. La mayora de los linfocitos T intraepiteliales y de sangre existen linfocitos granulares grandes (LGL) con m a
iicados los linfocitos de la lmina propia pertenecen al subtipo yor proporcin de citoplasma, mayor tamao y grnulos
acorti- CD45RO de los linfocitos de memoria. azurfilos y hay los linfocitos pequeos agranulares con
itienen

ERRNVPHGLFRVRUJ
34 Inmunidad

CD4 {-)

CDS {-)

IL-4
IL-2
IL-5
IFN..y
IL-6
IL-10

CD4 {+) CD4(+) CD4(+)

FIGURA 4.:-E tipos de linfo-citos T.

citoplasma reducido. Los linfocitos TH (cooperadores) y los T sanguneos pertenecen al tipo TCR2 y solo las restantes
linfocitos Te (citotxicos) son en su mayora de tipo peque 1 0 a l 5% son TCR l . Los linfocitos T que son de tipo TCR2
o no granular y con citoplasma escaso. El patrn morfol se subdividen en dos p9bJaciones diferentes: la primera que
gico LGL se ve en el 10% de los TH y en el 35% de los Te. lleva como marcador el CD4, corresponde a los linfocitos
Dentro de los LGL existe un grupo ms reducido denomina denominados cooperadores o inductores de ayuda (TH) y la
do TCR l + a, caracterizndose por su morfologa dendr segunda poblacin es portadora del marcador CDS cuya
tica y ubicndose en fas zonas interfoliculares, especialmen funcin es netamente citotxica (Te) (FIGURA 4.3). Los
te en las amgdalas. Los linfocitos B son diferentes a los linfocitos con CD4 reconocen el antgeno asociado con la
LGL, tienen ribosomas y retculo endoplsmico rugoso molcula CMH U, en cambio, los linfocitos CDS reconocen
cuando se activan. Las clulas NK, clulas agresoras natura el antgeno asociado con CMH l. Los linfocitos TCR l gene
les poseen morfologa similar a los LGL, pero tienen ms ralmente no tienen marcadores CD4 ni CDS, aunque algunos
cantidad de grnulos azurfilos. pocas pueden tener CDS. Los linfocitos TCR2 CD4, o sim
plemente clulas o linfocitos CD4, se dividen en dos subti
Marcadores de clulas linfoides, Todos los leucocitos pos funcionales denominados THl y TH2. Las clonas THl
tienen en su superficie un gran nmero de molculas dife segregan IL-2 e !FNy y las TH2 producen IL-4, IL-5, lL-6 e
rentes llamadas marcadores que sirven para distinguir e lL 1O. Los linfocitos TH1 son mediadores en las funciones
identificar las diferentes poblaciones celulares. Los linfoci que se relacionan con la citotoxicidad y con las inflamacio
tos son los que presentan mayor diversidad y cantidad de nes localizadas, provocadas por bacterias y parsitos. Los
marcadores, siguindole luego los monocitos o macrfagos linfocitos TH2 son ms eficaces para activar los linfocitos
y los grariulocitos. La nomenclatura de estos marcadores se B, estimulando su reproduccin as como la produccin de
basa en los grupos de diferenciacin (del ingls, cluster of inmunoglobulinas. Los Linfocitos CDS+, pueden subdividir
d(ff'erentiation = CD). Este sistema CD numera en forma se en grupos mediante el uso de anticuerpos monoclonales y
ordenada el tipo de las molculas: CDl , CD2, CD3, etc., otros criterios.
existiendo hasta el momento alrededor de 180 marcadores
celulares identificados. La identificacin de los marcadores Los linfocitos TCR l +, constituyen una pequea minor
se ve facilitada mediante el trabajo con anticuerpos mono a de los linfocitos de la sangre y suele ms bien encontrr
clonales. A continuacin se detallan los marcadores en las selos en los epitelios mucosos como linfocitos intraepitelia
distintas clulas. les, representando una proteccin importante en las muco
sas. El linfocito T puede tener, adems de los marcadores
Linfocitos T. El marcador caracterstico de los linfoci citados, otros marcadores que son comunes para todos los
tos T es el receptor antignico TCR, que tiene dos tipos linfocitos T e inclusive de otras clulas (FIGURA 4.4). Los
diferentes, el TCRl y el TCR2 (FIGURAS 4.3 y 4.4). El principales marcadores son: ( 1) el CD2 que es selectivo para
TCRl tiene dos polipptidos (y y ) unidos por puentes de los eritrocitos de carnero y sirvi durante mucho tiempo
disulfuro y el TCR2 es de igual conformacin, pero con para reconocer los linfocitos T en la prueba de las rosetas de
polipptidos diferentes (a y B). El 85 al 95% de los linfocitos aglutinacin con estos glbulos rojos; (2) el CD3 que unido

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munidad especfica - 35
-

HLA-D

CR 1 CD 20
(CD35)
CD5

CD 72

FIGURA 4.4: marcadores de los linfocitos T y B.


-4
-5
.-5
al TCR forma un complejo que activa al linfocito T; (3) el cadena pesada presenta tres dominios (al, a2 y a3). La por

.-10
CD5 se encuentra en todos los linfocitos T y participa en la cin COOH terminal de la cadena atraviesa la membrana
activacin de ellas, puede ligarse al CD72 de los linfocitos plasmtica y penetra en el citoplasma. Entre los dominios al
B; (4) el CD7 que se encuentra en las clulas NK. y u2 existe la lmina plegada (FIGURA 4.7). El CMH l est
presente en todas las clulas nucleadas del organismo. El
Linfocitos B. El 5 al 15% de los linfocitos de la sangre CMH I sirve como seal de todas las clulas nucleadas,
estn constituidos por los linfocitos B. Tienen como carac para los linfocitos T citotxicos, principalmente en la pre
terstica principal la presencia de inmunoglobulinas (lg) en sentacin de los antgenos procedentes de virus.
su membrana, las que son producidas por estos mismos
linfocitos B. Las Ig ubicadas en la superficie de los linfoci Las molculas de la clase CMH II estn formadas por
stantes tos B actan como receptores antignicos especficos; la dos cadenas glucopolipptidas que atraviesan la membrana
, TCR2 mayora de los linfocitos B humanos de la sangre presentan en su porcin distal COOH igual que la CMH l. Cada cade
era que en su superficie lgM e lgD. En el caso de la molcula lgM na posee dos segmentos: la cadena a con los dominios a 1 y
1focitos superficial de los linfocitos B, se ha observado que la misma a2 y la cadena p con los dominios p l y p2. Tambin existe
'H) y la puede estar asociada a otras molculas conformando un una zona plegada parecida a la que tiene la molcula CMH l
18 cuya complejo receptor antignico lgMa. Adems de las Ig de la (FlGURA 4. 1 ). El CMH [I se encuentra en los linfocitos B,
l). Los membrana, los linfocitos B pueden tener otros marcadores clulas presentadoras de antgeno, macrfagos y clulas del
con la (FIGURA 4.4) que son: ( l ) CRI (CDJ5) receptor para C3b; endotelio capilar. EL CMH II imparte seales para los linfo
onecen (2) CR2 (CD2 l ) receptor para Cld; (3) FcyRU (CDJ2) re citos cooperadores, de tal manera que pueden colaborar con
1 gene ceptor para el Fe de la lgG; (4) CD19, CD20, CD2 l , CD22, los linfocitos B y los macrfagos.
llgunos CD72 y CD78 sirven para identificar los linfocitos B huma
o sim nas; (5) CDS, presente tambin en los linfocitos T, se en Captacin del antgeno (FIGURA 4.6). Los antgenos
subti cuentra pocas veces en un subgrupo denominado linfocitos son captados por las CPA y degradados mediante la accin
is THI B l , quedando como linfocitos 82 los linfocitos B mayorita de enzimas proteolticas, en el interior de los fagolisosomas.
1c1ones
[L-6 e rias convencionales y (6) algunos linfocitos B se unen a los Se obtienen as pptidos antignicos, que constituyen frag
glbulos rojos de ratones formando rosetas con ellos (MER). mentos de la molcula antgnica, los que luego se asocian
macio Esta propiedad unida al marcador CDS caracteriza un grupo al CMH II y se desplazan desde el citoplasma celular hacia
>s. Los de linfocitos B que permite el reconocimiento de autoantge la superficie ubicados en una concavidad del CMH II. Este
focitos nos. Por otro lado los linfocitos B son portadores del CMH complejo de histocompatibilidad es codificado por una serie
:in de l l que usan en sus interrelaciones con los linfocitos T. de genes especficos.
iividir
nales y En los linfocitos activados aparecen diversos tipos de Acoplamiento del CMH II al antgeno (FIGURA
marcadores: IL-2R para el IL-2 en linfocitos T y B; CD71 4.7). El CHM U se encuentra en el retculo endoplsmico
en linfocitos T; CD38 en linfocitos T y en clulas plasmti rugoso (RER), en forma de complejos asociados con un
minor cas; CD29 en los linfocitos T y los linfocitos de memoria y polipptido adicional de cadena invariable (li). El Ji facilita
ontrr CD23 en los linfocitos B. la salida del CHM II del RER, el cual transita a travs del
muco
Jitelia aparato de Go!gi hasta el fagolisosoma, en donde el macr
COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD fago ha lisado al antgeno fagocitado. All se produce la
adores separacin de la molcula li, lo cual permite el acople del
los los
Existen dos tipos de molculas del complejo mayor de CMH II con el antgeno elaborado por la CPA.
1). Los
' para histocompatibil !dad (CMH), clase l y clase II.
:iempo Se ha comprobado que la unin de los pptidos anti
tas de Molculas de la clase CMH I, estn constituidas por gnicos y el li sobre la molcula CMH II es de carcter ex
unido una gran cadena peptdica pesada de 44 kDa, unida a la 2- cluyente. La molcula CMH II + antgeno se dirige luego
microglobulina que es un pptido liviano de 1 1 kDa. La hacia !a superfici exterior de la' CPA, lista P,ara serpresen-

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36 - Inmunidad

Sitio de unin de pptidos

Citosol

COOH OOH
Molcula de CMH 1 Molcul de CMH 11

FIGURA 4.5: molculas transmembrana del complejo mayor de histocompatibilidad, clases 1 y 11.

tada a los linfocitos TH, los cuales reconocen al antgeno las necesidades de defensa, se transforman en clulas efecto
por su receptor T especfico. ras o linfocitos de memoria, estas ltimas asientan en las
reas B o T, dependientes de los tejidos linfoides, prontas a
Activacin celular. No es suficiente que el antgeno se responder al ingreso del mismo antgeno que motiv su
fije a una sola molcula receptora TCR para producir la activacin primaria.
estimulacin del linfocito T. Los macrfagos, los linfocitos
B y cualquier clula nucleada deben aportar el antgeno CLULAS PRESENTADORES DE ANTGENO
unido a CMH II o CMH I respectivamente, en cantidades
suficientes para cubrir varias decenas y an centenas de Si bien el sistema inmune especfico se vale de clulas
receptores TCR, para conseguir la activacin del linfocito especializadas como los linfocitos B y T, necesita de la co
correspondiente.
operacin de cierto tipo de clulas no especializadas, como
lo son las clulas presentadoras del antgeno (CPA), que
Activacin de los linfocitos. Los linfocitos T y B se
activan cuando se unen al antgeno especfico. Los linfocitos pertenecen al sistema macrofgico-monoctico (FIGURA
T reciben el antgeno incluido en el CMH, en cambio los 4.8). Son un conjunto de clulas, que poseen la capacidad de
linfocitos B reciben directamente el antgeno, aunque para captar el antgeno, prepararlo debidamente y posteriormente
activarse les es imprescindible la colaboracin de los linfo entregarlo a los linfocitos TH. Las CPA se encuentran habi
citos T. tualmente en el bazo, timo, ganglios linfticos y piel. Entre
las clulas que pueden actuar como CPA se tienen:
Con la participacin de una protena G se inducen cam
bios metablicos que hacen activar un grupo de enzimas, las
l . Clulas de Langerhans, que migran desde la piel a
que junto con la proteincinasa C, fosforila varias molculas
los ganglios, a travs de los cordones linfticos aferentes,
de la superficie celular. A consecuencia de ello las clulas
entrelazndose con los linfocitos T de la zona paracortical
linfoides activadas desarrollan en su membrana receptores
ganglionar. De esta manera vehiculizan los antgenos desde
para citocinas como es la IL2. Con la unin de las citocinas
la superficie cutnea hasta los linfocitos TH. .Poseen CMH
a los respectivos receptores celulares se produce la prolifera
II, cuyas molculas entrelazadas son necesarias para presen
cin y maduracin de los linfocitos. La excitacin de estas
tar el antgeno a los linfocitos TH
clulas forma rpidamente numerosos individuos, que segn

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Inmunidad especfica 37

B; no tienen molculas CMH II, pero si el receptor del

0 Antigeno fraccionado
complemento CRl (CD35).

4. Los linfocitos B que maduran en la mdula sea y


el hgado, se encuentran en todos los rganos y tejidos lin
foides del organismo. Poseen molculas de CMH II y go
zan de la capacidad de presentar el antgeno a los linfocitos
Fagolisosoma TH, por intermedio de receptores especficos
(inmunoglobulinas) que tiene el linfocito B para dicho ant
geno. El linfocito B tiene dos poblaciones: B l y B2. Los
linfocitos B l que son Mac 1+ y C23-, en su mayora mues
CMHII

tran el marcador CDS superficial. Dentro de los linfocitos


B l existen a su vez dos subpoblaciones, B la y Blb. La B l a
son CDS+ y l a B l b son CDS-. L a poblacin B l predomina
Receptor T en los primeros aos de vida, son autorrenovables y gene
ralmente segregan una gran cantidad de anticuerpos IgM
polirreactivos. Los linfocitos B2 no tienen el marcador
CDS, constituyen la mayora de los linfocitos B, generan
las clulas con memoria clonalmente extendida durante !a
respuesta inmunitaria primaria, estando adems programa
das para mediar en la respuesta secundaria frente al mismo
antgeno original.

FIGURA 4.6: presentacin del antgeno procesado por la 5. Los macrfagos. Existen dos tipos principales: el
clula presentadora de antgeno (CPA), al linfocito T co macrfago fagoctico profesional cuya funcin es destruir
operador {TH). Los antgenos fraccionados por accin y eliminar el antgeno inactivndolo y el macrfago con
enzimtica, dentro del fagolisosoma de la CPA, son incor funcin de CPA, que entrega el antgeno a los linfocitos.
porados al CMH 11. Este, con el antgeno son movilizados Los macrfagos reciben diversos nombres segn . sea el
a la membrana de la CPA y son reconocidos por el recep
tejido en donde se encuentran. Los macrfagos y los mo
tor T del linfocito TH.
nocitos son clulas de 10 a 18 m, poseen un ncleo arrio
nado y grnulos azurfilos, una membrana rugosa, aparato
2. Clulas interdigitalcs se encuentran en el timo, son de Golgi muy desarrollado y lisosomas conteniendo peroxi
ricas en CMH II, activan linfocitos T. dasas e hidrolasas cidas. Poseen una gran variedad de
rece!)tOres superficiales tales como: ( 1) receptor manosilo
3. Las clulas
. dendrticas foliculares asientan en los fucosilo (RMF) que se une a dichos azcares superficiales
ganglios linfticos y en el bazo, en las reas de los linfoci bacterianos; (2) receptor CD14 para protena copuladora
tos B. Presentan el antgeno exclusivamente a los linfocitos del lipopolisacrido (PCL) que recubre a los bacilos Gram
efecto
en las
ontas a
:iv su
Citoplasma

Expulsin de li Antgenos
fraccionados
Presentacin de!
antgeno a los
linfocitos TH

''
clulas
: la co
, como
\), que
GURA
idad de
CMH ll + li
1rmente
n habi
Aparato de Fagolisosoma Membrana
l. Entre
rugoso Golgi plasmtica

1 piel a
rentes,
cortical
s desde
1 CMH FIGURA 4,7: acoplamiento del CMH 11, con el antgeno procesado en el fagolisosoma del macrfago. El CMH 11, situa
presen- do en el retculo endoplsmico rugoso, pasa al aparato de Golgi con el polipptido li, el cual es liberado en el fagoli
sosoma para unirse al antgeno. Posteriormente el CMH ll con el antgeno, es expuesto en la membrana de la CPA,
para que lo reconozca el linfocito TH a travs del receptor T.

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38 Inmunidad
w

Piel
Ganglios (+) (+) (+) (-)
Clulas de Langerhans

Timo (-) (-) (+) (-)

Ganglios
Bazo (+) (+) (-) (-)
Clulas dendriti cas
foliculares

rganos
Tejidos
linfoides
(+) (+) (+) (-)

Linfocito 8

Sangre
Tejidos (+) (+) (+) (+)

Macrfa os

FIGURA 4.8: clulas presentadores de antgeno.

negativos; (3) tres receptores para lgG que son el FcyRl personas inmunocompetentes existen alrededor de 1 0 12 de
(CD64), el FqRll (CD32) y el Fcylll (CD16), que intervie molculas de anticuerpos diferentes, para poder hacer frente
nen en la destruccin extracelular, opsonizacin y fagocito a la enorme variedad de antgenos que ingresan al organis
sis; (4) receptor para el complemento CRl (C3b, CD35); mo humano. Estas inmunoglobulinas estn codificadas por
(5) receptor CR3 del complemento (C3bi, CD! lb y genes que radican en cromosomas diferentes. En forma pio
MACl); (6) receptor para la IgE FcRII (CD23); (1) re nera Jeme y Burnett establecieron la bases de la inmunolog
ceptor para citocinas como la IL-4, el IFNy y el factor de a moderna con la teora de la seleccin clona!. Segn se
inhibicin de migracin; (8) el CMH II importante para la sabe hoy en da, cada linfocito es capaz de producir un solo
presentacin del antgeno; (9) otros receptores son CD13, tipo de inmunoglobulina. El antgeno solamente puede ser
CD15, CD68, CD29 y CD 49. En el organismo existen otras aceptado por el linfocito que es capaz de formar el anticuer
clulas diferentes de las clulas inmunitarias que carecen de po especfico. El antgeno selecciona un determinado linfo
CMH II, pero que pueden actuar tambin como CPA. cito, a travs de los receptores de membrana, hecho que
produce la activacin del mismo aumentando de esta manera
FORMACIN DE LOS ANTICUERPOS su metabolismo, produciendo en forma activa inmunoglo
bulinas.
Hemos visto que cada antgeno selecciona a su inmuno
globulina correspondiente, la que es fabricada por un clon Solamente con al ayuda de la biologa .molecular se
especial de linfocitos B. Se estima que en el plasma de las pudo averiguar como se reordenan los genes que codifican

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Inmunidad especifica 39

\,_ --illtfj!:llf7' ,----@l!$rl7lflt--


,,------------------------------------ ----- //

+
Recombinacin V/J ADN

@lsf#t5;?tf-----
+
Transcr1pcin

--@-fif?Wfl:tiJ:SI I
Procesamiento t

Protena

FIGURA 4.9: modelo de reordenamiento de los genes de la cadena liviana kappa, para la conformacin final de -los
anticuerpos. En un primer momento se recombinan los genes L, V, J y C, para luego ser transcritos a ARN no co
herente (con espacios intergnicos}. Por accin de las endonucleasas se unen los genes para conformar el ARNm
coherente, que finalmente se traduce a una protena, que posteriormente elimina el lder (L) en el momento de fa es
tructuracin final del anticuerpo en la membrana del linfocito B.

las regiones variables y las regiones constantes, para la es na liviana. La protena precursora pierde el lder (codificado
tructuracin final del anticuerpo completo y activo. por L), I atravesar la membrana plasmtica (FIGURA 4.9).
Para la cadena pesada, ocurre un proceso muy similar de
El gen activo de la cadena liviana K, se fo1ma y expresa recombinacin de genes, pero adems de los genes descritos
tras un proceso de recombinacin y maduracin del ARN, para la cadena liviana, existen genes D, entre los genes J y
En la etapa embrionaria los componentes del gen activo de V. Estos genes D aumenta mucho ms la posibilidad de
la cadena liviana se encuentran en la confi guracin bsica combinaciones de genes en el proceso de reordenamiento de
(an no recombinada). La regin variable (V) de la cadena los mismos en el momento de la maduracin de los linfoci
liviana est codificada por alrededor de 150 copias del gen tos. Por ltimo la posibilidad de combinaciones distintas
V y por alrededor de 5 copias de un gen denominado J. La para generar anticuerpos distintos, aumenta mucho ms an,
regin constante (C) est codificada por un solo gen C. Cada ya que el sitio de accin del anticuerpo est formado por la
uno de los genes se encuentra separado por una secuencia unin de las regiones variables de la cadena liviana y la
lder (L) y por un fragmento espaciador. Tambin existen pesada. Todo este sistema de combinaciones explica la for
espaciadores entre los todos los genes. Para la cadena livia macin de la enorme cantidad de anticuerpos diferentes. El
na A, el mecanismo es un poco distinto, hay 6 genes C, cada mecanismo de recombinacin de genes para la cadena pesa
e 10 12 de uno de ellos ligado a su propia secuencia J. da involucra a los genes que codifican las distintas cadenas
.cer frente pesadas, que son las que le dan la funcin efectora distinta a
1 organis Durante el desaITollo del linfocito, un gen V, con su cada uno de los tipos distintos de los anticuerpos.
cadas por secuencia L, se recombina con una de las secuencias J, for
Orma pio mando, junto con el gen C, un gen kappa activo. El proceso La unin de una molcula de la cadena L con otra de la
munolog de recombinacin gentica ocurre en forma distinta para cadena H, forma una hemimolcula de anticuerpo, que me
Segn se cada uno de los linfocitos de cada clon. De esta forma se diante uniones de enlaces de disulfuro se acopla a otra hemi
ir un solo produce una gran variedad de genes distintos, que al final de molcula, integrando as la unidad bsica una inmunoglobu
puede ser todo el proceso se traducen en cadenas proteicas distintitas. lina. Los componentes hidrocarbonados de los anticuerpos
1 anticuer El gen recombinado se transcribe en su totalidad a un ARN se le agregan a nivel del aparato de Golgi. La cadena J pro
ado linfo primario no coherente. Las secuencias espaciadoras y cual ducida por los plasmocitos, une a las unidades bsicas en el
techo que quier secuencia J suplementaria que est presente en el ARN caso de la IgA e IgM. La pieza secretora, en cambio, se
.ta manera primario se eliminan, formndose un ARN mensajero co sintetiza a nivel de las clulas epiteliales de las mucosas y se
mmnoglo- herente. En el proceso de eliminacin de los espacios inter une a !a molcula dmera de IgA para constituir la IgAs.
gnicos, las endonucleasas que cortan el ARNm, tienen una
ligera variacin en el lugar de corte entre los genes V y J, Una vez maduro el linfocito en los rganos linfoides
lecular se dando finalmente productos de traduccin distintos. De esta primarios, migra a los rganos secundarios, esperando el
codifican forma se introducen variaciones en la conformacin del contacto con el antgeno. Una vez que el antgeno selecciona
ARNm coherente que determinan finalmente secuencias de al clon de linfocitos B, a travs de la IgD (o IgM) de mem
aminocidos diferentes de la protena precursora de la cade- brana, lo estimula. Algunos linfocitos B se transforman en

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40 - Inmunidad

0 CHMII
IL1
a

Activacin

lgM lgM Memoria lgGy otras

FIGURA 4.1 O: antgeno T dependiente.

clulas plasmticas, productoras de anticuerpos (iguales a das mostrando una curva ascendente de produccin que
los de membrana, pero con una cadena pesada distinta) y dura 2-3 semanas, mantenindose en el mismo nivel por un
otros se diferencian en linfocitos B de memoria (FIG. 4.10). buen tiempo (puede ser aos), bajando posteriormente a
niveles inferiores. Sin embargo, la formacin de anticuerpos
La sntesis de los diferentes anticuerpos se realiza en a una inyeccin secundaria del mismo antgeno, ser mucho
proporciones que varan de una a otra inmunoglobulina y su ms rpida (4-6 das) y mucho ms intensa, alcanzando
ritmo suele ser peculiar para cada una de ellas. As por niveles ms elevados y que durarn mucho ms tiempo que
ejemplo, la respuesta precoz es caracterstica de la lgM que los producidos durante la primera estimulacin (FIGURA
aparece a los 5-8 das, alcanzando los niveles de produccin 4. 1 9 ).
mxima a las 2-3 semanas, para luego descender a cifras
muy bajas o desaparecer. Al inyectar de nuevo el mismo Las clulas con memoria que provocan la respuesta
antgeno, la respuesta secundaria IgM ser exactamente secundara elevada deben ser estimuladas continuamente por
igual a la obtenida en la primera vez (FIGURA 4.1 9). el antgeno especfico que las clulas dendrticas foliculares
de los centros germinativos guardan en su superficie. En
En el caso de la IgG, la respuesta comienza a !os 10-12 realidad los linfocitos B no actan en forma solitaria, sino

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Inmunidad especfica - 41

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TABLA 4.1: OARACTRSTICA
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DE LA INTERLEUQUINAS, SU ORIGEN Y SU ACCIN.

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Factor activador de Monocitos, clulas Uinfocitos T y B. prcti- lnmunorregulacin, procesos in-


los linfocitos. Tiene dendriticas, linfocitos camente todas las clulas flamatorios, fiebre.
IL-1 dos fracciones a y B, fibrobtastos y del organismo.
. macrfagos.

Factor de creclmien- Linfocitos TCD4, Llinfocitos T y B, monoci- Proliferacin, activacin, efecto ci-
IL-2
to de los linfocitos. clulas NK. tos. totxico anticanceroso.
Hemopoyetina mul- Linfocitos T. Clulas primordiales hema- Estimula el crecimiento.
tiespecfica. topoyticas de eritrocitos,
IL-3
granulocitos, macrfagos y
linfocitos.
Factor 1 activador, Linfocitos T. Linfocitos T y B, macrfa- Activacin y diferenciacin de linfocitos
diferenciacin de los gos. B, produccin de lgG e lgE, activacin
IL-4 linfocitos B. de los linfocitos T, induccin del CMH
11 e inhibicin de citocinas en macrfa-
gas.
--- Linfocitos T. Linfocitos B, eosinfilos. Crecimiento y diferenciacin de linfoci-
IL-5 tos B, crecimiento y activacin de
eosinfllos, produccin de eosinofitia
en las enfermedades parasitarias.
Factor de diferen- Linfocitos T, ma- Linfocitos T y B, clulas Diferenciacin celular B, en el hgado
ciacin de los finfo- crfagos, linfocitos hepticas. favorece la formacin de protenas de
IL-6 citos B, factor esti- B, fibroblastos y la fase aguda de la inflamacin, es un
muladar de hepato- clulas endoteliales. factor de crecimiento del mieloma.
citos.
Factor de crecimien- Linfocitos T. Linfocitos B y T. Activacin y reproduccin de linfocitos
tl-7 to de linfocitos B. T, crecimiento de linfocitos B.

--- Clulas de piel, Granu!ocitos, linfocitos T. Qulmiotaxis, procesos inflamatorios.


IL-8 macrfagos, linfoci-
tos T.
Factor inhibidor de Linfocitos T. Linfocitos B y T , macrfa- Inhibe presentacin de antgenos de
la sntesis de las gos. las CPA, inhibe la produccin de IFNy,
IL-10
citocinas. IL- 1 , IL-6 y TNFa, regula produccin de
1gE de linfocitos B.

IL-11
--- Clulas del estroma -- ---
de medula -sea.
Monocitos y macr- Linfocitos T. Inducen linfocitos TH1.
IL-12
---
fagos.

--- Linfocito T. Linfocitos B, macrfagos. Inhiben la inflamacin fagoctico-


IL-13 mononuclear. Producen proliferacin y
diferenciacfn de los linfocitos B.
Linfocitos TCD8 y Linfocitos TCD4, eosinfi- Estimula el quimiotactismo de linfocitos
IL-16
---
CD4 los CD4 y eosinfi!os.
in que
1 por un
nente a que para la mayora de los antgenos, dependen de la ayuda para los timo-dependientes.
cuerpos de los linfocitos TH.
1 mucho Antgenos timo-dependientes (FIGURA 4 . 1 O). Los
mzando Una vez que el antgeno penetra en el organismo puede linfocitos T reciben el antgeno a travs de las clulas pre
1po que ser reconocido por los linfocitos T y B. Estos antgenos se sentadoras del antgeno (CPA) que son los macrfagos, las
!GURA denominan timo-dependientes. Existe adems u n pequeo clulas dendrticas y los linfocitos B, las que adems produ
nmero de antgenos capaces de activar las clulas B, sin la cen IL-1 para activar la transformacin del linfocito T.
colaboracin de las clulas T, que reciben por dicho motivo
:spuesta la denominacin de antgenos timo-independientes. Las El antgeno que prepara la CPA, corresponde a la pro
nte por respuestas primarias de los anticuerpos son habitualmente tena antignica original y est incluido en una cavidad
iculares ms dbiles para los antgenos timo-independientes que destinada al antgeno del complej o mayor de histocompati-
cie. En
'ia, sino

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42 - Inmunidad

Te

TH1 ..''"
'
,, ",.. ,,,,,,, RNI
' '
' '' IFN -y

_/i
'
ROi
''
'' '',,'
J

" '
',,'
' '

CPA

IL-5 Linfocito B Clula plasmtica /


TH2

FIGURA 4.1 1 : modelo TH1, TH2,. En el primer momento de interaccin con la CPA, los linfocitos cooperadores, adop
tan una forma indeterminada THO. Los linfocitos cambia luego a TH1 o inmunidad del tipo celular, en el caso de que
se trate de un microorganismo intracelular, con un perfil de citocinas IL-2, IL-12 e IFNy, las cuales activan a los
macrfagos y reclutan a los l infocitos Te y clulas NK. Los macrfagos secretan IL-8 que moviliza a los neutrfilos.
Macrfagos y neutrfilos producen estallido respiratorio dentro del fagolisosoma con reactivos intermediarios de
oxgeno y nitrgeno (ROi y RNI). En el caso que los microorganismos sean extracelulares, el peil TH2 de interleuci
nas es: IL-4, IL-5, IL-6 e IL-10. stas estimulan a los linfocitos B que se transforman en clulas plasmticas que pro
ducen anticuerpos. IL-10 e IL-4 inhiben la respuesta TH1 y el IFNy la TH2. La IL-5 est involucrada en la respuesta
celular por eosinfilos a travs de anticuerpos.

bilidad de la clase II (CMH II). Los linfocitos T que reco a la formacin de IgG y otros tipos de inmunoglobulinas y
nocen la mezcla CMH JI + protena antignica derivada de la segunda que se relaciona con la memoria inmunolgica
la protena original, son inducidos a formar IL-2 y a subdi de las clulas B.
vidirse engendrando linfocitos TH. Estos linfocitos TH
producen el interfern (IFN) que activa los macrfagos y Antgenos timo- i n dependientes. En este caso las
estimula el aumento del CMH II. Los linfocitos TH as clulas B reciben directamente el antgeno a travs de sus
estimulados producen IL-4 y IL-5, que estimulan a los lin receptores Ig o por intermedio de las CPA La presencia del
focitos B a la proliferacin y a una mayor interaccin B-T. antgeno sumado al estmulo de la IL- 1 , producida por el
mismo u otros macrfagos y de la IL-4 elaborada por linfo
Por su parte los linfocitos B pueden fijar directamente citos T, activan las clulas B que producen en respuesta
los antgenos por medio de sus receptores y presentar sus receptores para [L-2, IL 4 e IL-5. La unin de estas intcr
pptidos en la cavidad CMH 11, que pueden suministrarlos leucinas con los receptores incita,a la clula B a la divisin.
a otros linfocitos T vrgenes, que reciben por primera vez el La etapa de diferenciacin en plasmocitos se realiza me
antgeno. Los linfocitos B estimulados por IL-4 se dividen diante la colaboracin de IL-4, IL-5, IL-6 e IFN-y. En esta
rpidamente. El estmulo de IL-6 incita a la transformacin divisin no se desarrollan linfocitos de memoria.Los ant
del linfocito B en clula formadora de anticuerpos (CFA) o genos timoindependientes tipo l son activadores policlo
plasmocito, capaz de producir anticuerpos del tipo IgM. nales para el linfocito B. As actan los antgenos lipopoli
Otros linfocitos B reciben estirnulacin de IL-4 e IL-5 que saclidos bacterianos cuando se encuentran en altas con
los transforman en dos progenies diferentes, una destinada centraciones frente a esta clula, pudiendo entonces fijarse

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Inmunidad especfica - 43

Cadena pesada (H)

Zonas hipervarlables
de la cadena pesad
\
\

Uniones S-S
lntercatenarlas
Fab

F(ab')i
RNI
ROi Zonas hipervariables
de la cadena liviana

Papana

lgG
,.lgM
b.lgA
Fe
intracatenarias
' lgE

Cadena pesada {H)

446 COOH

FIGURA 4.12: estructura bsica de una inmunoglobulina (lgG}. Posee 2 cadenas pesadas (H) y dos cadena ligeras (L).
adop Entre ambas cadenas existen varios puentes disulfuro 5-S, que tambin los hay intracadena. Tanto las cadena L,
de que como las H, tienen regiones constantes que se encuentran hacia la porcin carboxilo terminal (COOH} de la cadena
1 a los (CL, CH1, CH2, CH3) y zonas variables que se encuentran hacia la porcin amino terminal (NH2) de la cadena (VL,
rfilos. VH}, estas ltimas poseen zonas hipervariables, que corresponde al sitio de unin con el antgeno. La papana corta
'ios de a las inmunoglobulinas en una zona cercana a la bisagra, originando 3 fragmentos: 2 fragmentos Fab (antibody, en
1rleuci ingls) y 1 fragmento Fe (cristalizable). La papana corta a la molcula en una porcin ms alejada de la bisagra hacia
Je pro la parte carboxilo terminal, originando 2 fragmentos: 1 fragmento F(ab'h y un fragmento similar al Fe. La cadena L
puesta tiene alrededor de 220 aminocidos y la cadena H ms de 440. La porcin variable de las dos cadenas posee alrede
dor de 1 1 0 aminocidos.

a las regiones hipervariables de los receptores inmunoglo son designadas mediante las letras maysculas IL a las que
1linas y bulnicos superficiales del linfocito B (Fig. 18.4). Los ant se Je agrega un nmero (TABLA 4. 1 ).
olgica genos timo-independientes tipo 2 son antgenos lineales
polimricos que no se degradan fcilmente. Se fijan a la Receptores de citocinas. Todas las clulas que son
superficie de los macrfagos especializados y a travs de estimuladas por las citocinas deben tener indefectiblemente
ISO las stos son captados posteriormente por los linfocitos B. los receptores adecuados en su superficie. Las citocinas son
de sus eficaces an a bajas concentraciones, por ejemplo, 10"12 g/
1cia del mi, debido al hecho de que los receptores de citocinas son
por el
CITOCINAS
de alta sensibilidad y una vez que la citocina se une al re
r linfo ceptor, ste transmite en forma rpida la informacin al
Son glucoprotenas producidas por una gran variedad
spuesta ncleo celular. Teniendo en cuenta la homologa de unos
de clulas, entre las que se destaca el linfocito T, razn por
s intcr receptores con otros se los agrupan en las siguientes fami
la cual tambin recibieron el nombre de linfoquinas. Dentro
visin. lias: ( 1) la familia con ms miembros es la hematopoyeti
de las citocinas existen dos familias o f:,>TUpos principales:
za me na (eritropoyetina) constituida por EPO, G-CSF, GM-CSF,
los interferones y las interleucinas.
En esta IL-2, JL-3, IL-4, IL-5. JL 6 e IL-7; (2) la familia de las
,s ant inmunoglobulinas presenta receptores M-CSF, IL-1, IL-6,
}oliclo InterJeucinas (IL). Si bien las interleucinas fueron
descubiertas como sustancias elaboradas por los leucocitos, CMH, TCR y las propias inmunoglobulinas y (3) 1a familia
popoli de receptores para el factor de crecimiento de los ner
lS con de donde le viene su nombre, hoy se sabe que existen otras
clulas que son capaces de producirlas. Las interleucinas vios (FCN), el factor de necrosis tumoral (FNT) y el CD40.
fijarse Se han desclito sustancias inhibidoras que impiden la unin

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44 - Inmunidad

VL

CL CH1

220 220

FIGURA 4.13: esquema de las zonas hipervariables de las cadenas liviana y pesada. Los nmeros representan el
orden de los aminocidos, contados desde la porcin aminoterminal.

citocina-receptor celular. Estos inhibidores actan, en la clula diana, se degranula y libera una sustancia llamada
unindose a la citocina, o ms raramente, al receptor. Los perforina, y varias otras enzimas. En presencia de Ca+ 2 se
inhibidores o antagonistas de las citocinas son a menudo activa la perforina por polimerizacin enzimtica, la que al
fragmentos desprendidos de los receptores celulares de actuar sobre la superficie de la clula diana origina conduc
citocina, los que se han detectado en el suero sanguneo tos de poliperforina; (2) las enzimas degradativas y diversas
para IL-2, IL-4, IL 6 y otros. sustancias que son-liberadas por la clula citotxica, pasan
a travs de los conductos y lesionan la clula diana y (3) la
ACCIN COORDINADA DE LA INMUNIDAD clula diana se destruye, interviniendo como factores agre
gados las citocinas TNFa, TNFP e IFNy.
El tipo de respuesta que el sistema inmune propina a
los distintos microorganismos puede resumirse en el mode Si los linfocitos adoptaron la configuracin TH2 pro
lo THI y TH2. En un primer momento, la clula presenta ducen un perfil de interleucinas, IL-4, IL-5, IL-6, IL-1 O,
dora de antgenos, interacta con el linfocito TH, el cual que estimula a los linfocitos B, los cuales se transforman en
presenta una configuracin indefinida THO. El primer est clulas plasmticas, para la produccin de anticuerpos
mulo recibido por los linfocitos T de parte de las CPA no (FIGURA 4.1 1). Las IL-1 0 e IL-4 inhiben el desarrollo de
produce proliferacin automtica, an cuando ya recibe el la inmunidad tipo THl y el IFNy, inhibe la respuesta TH2.
antgeno. Por ms que el reconocimiento de los antgenos
de los microorganismos sea especfico, el tipo de respuesta La IL-5 recluta a eosinfilos y con la lgE formada por
que pueda dar el sistema inmune se encuentra estructurado clulas plasmticas produce la imnunidad denominada cito
en dos tipos bsicos de respuesta. Si los microorganismos toxicidad mediada por anticuerpos. Este tipo de inmunidad
tienen una presentacin intracelular, la inmunidad ser se desarrolla para los gusanos parsitos, los cuales no pue
predominantemente del tipo celular. En cambio si los mi den ser fagocitados, por lo que la unin de los anticuerpos
croorganismos se encuentran fuera de las clulas, la res en su superficie es seguido posteriormente por la unin de
puesta ser del tipo humoral, con produccin de anticuer los eosinfilos, a travs de su receptor Fe. Una vez unidos
pos. Si el contacto precoz del antgeno se realiza con al gusano, los eosinfilos se dcgranulan, liberando perfori
macrfagos que producen IL-12, estimular la respuesta de nas. Tambin actan en este tipo de inmunidad, las clulas
los linfocitos THl, en cambio, si el antgeno afecta primiti NK y los rnacrfagos. Las clulas NK, muy similarmente a
vamente al subgrupo TNKl+, har que ste segregue IL-4, los cosinfilos, una vez unidas al gusano por los anticuer
que a su vez producir la respuesta de los linfocitos TH2. pos, tambin producen perforinas. Los macrfagos sin em
bargo actan produciendo un estallido respiratorio de su
Una vez definidos los linfocitos en THl, secretan un perficie.
perfil de interleucinas IL-2, IL-12 e IFNy, las cuales en
conjunto tienen una accin de reclutamiento de clulas INMUNOGLOBULINAS
citotxicas (linfocitos Te y clulas NK) y la activacin de
los macrfagos (sobretodo por la accin del IFNy). Al acti Receptores antignicos. En el proceso del reconoci
varse los macrfagos, son capaces de destruir a los microor miento del antgeno por parte de los linfocitos T y B inter
ganismos en su interior, por intermedio de los reactivos vienen dos tipos de molculas receptoras: ( 1 ) las clulas B
intermediarios de oxgeno (RIO) y reactivos intermediarios utilizan como receptor las inmunoglobulinas antgeno
de nitrgeno (RIN). Adems secreta IL-8 que recluta a los especficas que son glucoprotenas de presencia normal en
neutrfilos y produce factor de necrosis tumoral (TNFa ). el suero y otros humores del organismo humano o animal y
El mecanismo que utilizan los linfocitos Te y NK se verifi que se hallan en las superficies celulares en donde actan
ca en tres etapas: ( l ) la clula citotxica en la vecindad de como receptores, son producidas por las clulas formadoras

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Inmunidad especfica - 45

Do.ero Secretora

ntan el

lamada
Ca' 2 se
que al
onduc
iversas
, pasan
; (3) la
s agre-

12 pro
IL-10,

FIGURA 4.14: estructura esquemtica de la inmunoglobulinas. La lgA puede presentarse en forma individual, de a
nan en
dos o de a tres, unidas por la cadena J. La lgA secretora posee la pieza secretora (PS), la cual evita que sea digerida
uerpos
por las enzimas del tubo digestivo, en donde se la encuentra. Las lgG, lgD e lgE tienen forma monomricas exclusi
olio de
vamente y la lgM posee una estructura pentamrica, unidas por la cadena J.
TH2.

.da por
la cito de anticuerpos (CFA) en gran cantidad y se hallan presentes y pesadas. Tanto las cadenas ligeras como las cadenas pesa
unidad en la membrana de las clulas B precursoras. La inmuno das poseen una regin variable y otra llamada constante
o pue globulina de la clula B precursora y la segregada por los (FIGURA 4. 1 2). La unin entre las cadenas se hace en base
uerpos plasmocitos (CFA) descendientes de ella son iguales. (2) a enlaces de disulfuro (S-S). Las cadenas ligeras son comu
in de Las clulas T utilizan para el reconocimiento del antgeno nes a las 5 clases de inmunoglobulinas, en cambio las cade
unidos los receptores antgeno especficos (TCR). Estos recepto nas pesadas difieren unas de otras para cada inrnunoglobuli
erfori res que existen en las membranas de los linfocitos T, no se nas. Las molculas de las inmunoglobulinas estn formadas
:lulas encuentran libres en el suero ni en otros humores orgnicos. por dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas livianas (L),
1cnte a Los receptores de las clulas T presentm1 una cadena a y siendo la frmula (HL)2 , la representacin monomrica
ticuer otra p, o bien y y O, adems de otros cuatro pptidos agrega bsica de las inmunoglobulinas. La molcula de la inmuno
m em dos y, O, E y S, Las inmunoglobulinas constan de dos cade globulina cumple dos funciones diferentes. La fraccin Fab
de su- nas pesadas ( H idnticas y de dos cadenas ligeras (L) tam es la que se une especficamente al antgeno y la fraccin
bin idnticas. ) Fe participa en las funciones efectoras, unindose a las
distintas clulas del sistema inmunitario, a las clulas fa
Estructura de las inmunoglobulinas. La inyeccin de gocticas y a la fraccin Clq del complemento.
antgenos puede provocar al cabo de varios das, la apari
onoci cin en el suero sanguneo de anticuerpos, producidos por Cadenas ligeras (L). Su peso molecular es de 23.000
inter los linfocitos B, con los cuales reacciona al unirse. Los Da. Estn constituidas por dos tipos de cadenas diferentes
ulas B anticuerpos son protenas del grupo de las globulinas que sou la cadena kappa (K) y la cadena lambda (Je). En las
tgeno plasmticas y han se denominan inmunoglobulinas (Ig). imnunoglobulinas humanas la proporcin entre ambas es de
na] en Son cinco las inmunoglobulinas conocidas (IgA, JgG, IgM, 60% de cadenas K y 40% de cadenas A.. Cada molcula de
lmal y IgE e lgD). inmunoglobulina tiene un solo tipo de cadena (K o A.).
1ctan
1doras Todas las inmunoglobulinas poseen estructuras bsicas Las cadenas de las inmunoglobulinas tienen dos cade
similares: estn formadas por cadenas polipeptdicas ligeras nas L iguales, K o A, en cada unidad bsica monomrica. En

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46 Inmunidad

< . t i .

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.. > > . . .

...i. i CAAATERSTICAS
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TAB\
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.... .... ... . DE' .LA. . .INMUNOGLOBULINAS
..
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Caracterstica i :. .-:- : .. :_.-,lgG . 3
,.
..

. .

..
_-- , :-::: '.-: _,:,;
lgM lgA > lgD lgE
. :-_ . /fi: . .. -- : _ ._ .

Porcentaje de las
'.- --

75 - 85 % 5 - 10 % 1 5 - 20 % 1% <1 %
inmunoglobulinas

mg/dl en el suero 800 - 1.600 40 - 200 140 - 400 3 0,1

Peso molecular 970 159-447 177-185 1 88-200


146-160
(kDa)

Clase de cadena H y a E

Subclases de No tiene
y1 , y2, y3, y4. 1 , 2 a 1 , a2. No tiene
cadenas H

Peso molecular de 70 70-75


50-55 55-62 62-70
la cadena H (kDa)

Pieza secretoria No tiene No tiene Si No tiene No tiene

Cadena J No tiene si si No tiene No tiene

Nmero de
1 5 1, 2 y 3 1 1
unidades bsicas

Vida media 23 das 5 das 6 das 3 das 2 - 3 das

Atraviesa placenta Si No No No No
fijacin de
++ +++ +
complemento
No No

Respuesta
10 das > 6 das 10 das --- 10 das
inmunolgica
> > >

Unin con
Si
mastocitos
No No No No

Unin con fagocitos +++ No + No +

Plasma, Plasma,
Ubicacin Plasma, linfa superficie de Plasma, mucosas superficie de Plasma
linfocitos B linfocitos B

la regin yariable de la cadena liviana (VL), posee tres leucina y el alotipo Km3 posee valina.
reas hipervariables que corresponden a una zonas de unos
7 a 11 aminocidos cada una, lo que hace un total de 27 a Cadenas pesadas (H). Tienen peso molecular entre
30 aminopidos que participan en este segmento Esta zona 50.000 y 70.000 Da y se conocen cinco clases diferentes de
se relaciona fOn los aminocidos de las cadenas pesadas ellas que son alpha (a), gamma (y), m (), delta (6) y
(H) en la unin especfica con el antgeno. Esta regin va epsilon (e), que caracterizan a las inmunoglobulinas lgA,
riable aminoterminal presenta poca heterogeneidad en los IgG, lgM, lgD e IgE respectivamente. Existen 4 subclases
primeros 18 a 20 aminocidos contados desde el extremo. de cadenas pesadas gamma (1, 2, 3, 4), dos subclases de
La cadena liviana dibuja dos bucles, uno ubicado en la cadenas pesadas m ( 1, 2) y dos subclases de cadenas pesa
regin variable y otro en la regin constante, debido a la das alpha ( !, 2). Estas subclases de cadenas pesadas esta
presencia de uniones de disulfuro intracadena, que hacen blecen las subclases de inmunoglobulinas segn cual sea la
plegarla. cadena pesada que contengan. As existen cuatro subclases
de IgG (lgG I , IgG2, lgG3 e IgG4), dos subclases de lgM
El nmero total de aminocidos de las cadenas livianas (lgMI e lgM2) y dos subclases de IgA (IgAJ e lgA2). El
es aproximadamente 220, de los cuales, la mitad, pertene nmero de aminocidos de !a cadena pesada es aproxima
cen a la regin variable (VL), con sus segmentos hiperva damente 440 para la cadena gamma, 450 para la cadena
riables en las secuencias 24-34, 50- 56 y 89-97 (FIGURA alpha y 550 para la cadena epsilon. Presenta cuatro puentes
4.13). En la regin constante existe variacin en el eslabn de disulfuro intracatenario en !as cadenas alpha, gamma y
191 de la cadena K, que puede sustituir en ella leucina por delta y cinco en las cadenas m y epsilon, que hacen que se
valina, con Jo que se tienen dos marcadores diferentes conformen 4 a 5 bucles respectivamente. Comenzando en la
(alotipos Km o antiguos lnv): el alotipo Km 1/2 contiene regin aminoterminal se tiene en primer Jugar una regin

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Inmunidad especfica - 47

Ajuste perfecto Ajuste imperfecto

Ac Ac
FIGURA 4.15: representacin esquemtica del acoplamiento y ajuste antgeno-anticuerpo

variable (VH) a la que sigue otra zona constante par cada lo que se denomina pieza secretora o de transporte, que es
clase y subclase hasta la porcin carboxiterrninal (FIGURA un glucopptido con peso molecular de 70.000 Da. que se
4. 12). La regin variable (VH) est formada por 108 ami une a la regin constante de la cadena H por puentes de
nocidos, comenzando desde la regin aminoterminal, po disulfuro y tiene por funcin proteger a la lgAs contra las
see cuatro zonas hipervariables que se encuentran a nivel de enzimas proteolticas existentes en la zona.
los aminocidos 31-35, 50-56, 8 1-85 y 95-102. En las in
munoglobulinas el antgeno se fija en las regiones hiperva Cuando se exponen las formas monomricas de los
riables de las cadenas pesadas y livianas (VH y VL), en anticuerpos, a la accin de la papana, la molcula de inmu
trando en ntima relacin con los aminocidos, debido al nog!obulina se escinde a nivel de la bisagra, dando como
plegamiento que existe en estas regiones (FIGURA 4.1 3). resultado dos fracciones fijadoras de antgenos, segmentos
Fab, que se caracterizan por poseer 1 cadena L completa,
En la regin constante es donde se encuentran las dife con sus dos regiones, constnte y variable (VL y CL) y
rencias antignicas y fisicoqumicas de las diferentes clases patte de la cadena H con sus regiones VH y CHl. La frac
y subclases de las inmunoglobulinas, dicha regin, median cin cristalizable (Fe) restante contiene las fracciones o
te uniones de disulfuro dentro de la misma cadena se divide dominios CH2, CH3 y a veces CH4, segn el tipo de la
en varios dominios de unos 1 1 O aminocidos cada uno, cadena H. Este fragmento Fe carece de la cadena liviana
componiendo 3 a 4 bucles denominados CHl, CH2, CH3 y (FIGURA 4. 1 2). El fragmento F(ab' )2, se obtiene este seg
CH4, vindose que las cadenas gamma, alpha y delta pose mento por accin de la pepsina, la que acta sobre la mol
ntre en solamente 3 dominios o bucles y las cadenas pesadas m cula monomrica tambin en la regin ms abajo de la bisa
; de y epsilon tienen 4 dominios. Ubicado entre el primero y el gra, lo que permite que los dos segmentos fijadores de ant
i) y segundo dominio de la regin constante de la cadena H, genos (Fab) se mantengan unidos y fonnen un solo conjun
gA, entre CH 1 y CH2, se encuentra el segmento denominado to. (FIGURA 4.1 2 ). Las inmunoglobulinas G, D y E estn
LSeS
bisagra, con unos 1 5 aminocidos. Esta zona se caracteriza constituidas por molculas monmeras. La lgA presenta
de por su gran flexibilidad y sensibilidad a los agentes prote molculas monmeras, dmeras y trimeras y la IgM tiene
:sa olticos como la pepsina. En la regin constante se localiza molcula pentmera (FIGURA 4.14).
:.ta el carbohidrato de las inmunoglobulinas, as como tambin
, la los alotipos Gm en la cadena gamma y los alotipos Am en Isotipos - alotipos - idiotipos. Determinantes anti
ses la cadena alpha. gnicos. Las inmunoglobulinas por ser protenas de alto
peso molecular son tambin muy buenos antgenos, lo que
sM
El Cadena J. Tiene peso molecular alrededor de 15.000 se demuestra cuando se las inyecta en animales de especies
na Da. Se la encuentra en las inmunoglobulinas IgA e JgM. La diferentes. Teniendo en cuenta su especificidad como ant
ma cadena o pieza J se puede unir mediante puentes de disulfu genos, se distinguen tres niveles diferentes de determinan
tes ro con las regiones constantes de las cadenas H de 5 mon tes antignicos que son los isotipos, alotipos e idiotipos.
ly meros de la IgM o con 2 a 3 monmeros de la IgA Los isotipos definen la clase y la subclase de inmunoglobu
se (FIGURA 4. 14). lina, siendo idnticos de lUl individuo a otro de la misma
i la especie, son independientes de la actividad del anticuerpo,
n Pieza secretora (FIGURA 4.14). La IgA en su forma los antisueros anti-isotipos se obtienen en animales que
dmera, presente en las secreciones mucosas (IgAs), posee pertenecen a otra especie diferente. Los alotipos tambin

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48 - Inmunidad

CAM

Transportador.:
-P. Complemento de-nutthmte'

Anafilotoxinas Nutriente

Fagocito

ADAPTADOR BLOQUEANTE DE RECEPTOR

celula

BLOQUEANTE DE VIRUS BLOQUEANTE DE TOXINAS

FIGURA 4.16: accin de los anticuerpos. Como adaptadores, activando el complemento y la fagocitosis. Bloqueando
receptores de nutientes de bacterias. Bloqueando virus, evitando que infecte a las clulas. Bloqueando receptores

son independientes de la actividad como anticuerpo de la lnmunoglobulina G (IgG). Est constituida por dos
inmunoglobulina, sealan las diferencias que existen en la cadenas pesadas H y dos cadenas livianas L (FIGURA 4. 1 2
estructura primaria de las inmunoglobulinas entre los indi y TABLA 4.2), ligadas por 20 a 2 5 enlaces de disulfuro. La
viduos de la misma especie y dentro de una misma clase o porcin o fragmento Fab, con sus dos extremos, sirve para
subclase. Los antisueros anti-alotipos se obtienen en indivi unirse cada uno de ellos con el antgeno. La porcin cons
duos de la misma especie portadores de alotipos diferentes. tante que queda debajo de la bisagra de la cadena pesada es
Los sistemas de alotipos estn ubicados en las regiones el fragmento Fe. La particin a nivel de la bisagra puede
constantes de las cadenas ligeras y pesadas y generalmente lograrse mediante la accin de la enzima papana, que al
sustituyen un residuo de aminocido por otro. Se han des actuar sobre la molcula de lgG origina dos fragmentos Fab
crito los alotipos Km 1 , 2 y 3 en las cadenas kappa livianas, monovalentes y un fragmento Fe que no tiene capacidad de
Gm 1 al Gm 25 en las cadenas pesadas IgG y, Aml y Am2 unin con el antgeno. El fragmento Fe participa en las
en las cadenas pesadas de TgA. funciones efectoras tales como la fijacin del complemento,
la fijacin a clulas fagocitarias y la degranulacin de las
Los idiotipos son diferentes de los dos anteriores ya clulas cebadas. El nmero de fijadores de antgeno que
que dependen totalmente de la actividad como antgeno de tiene la molcula de inmunoglobulina, fraccin Fab, se
la inmunog!obulina, siendo caractersticos del sitio en que conoce con el nombre de valencia, que en el caso de la IgG
la misma se fija al antgeno (cada sitio posee un idiotipo). es igual a 2.
Los idiotipos se detectan con la ayuda de sueros obtenidos
en individuos de la misma especie que no han sido inmuni La produccin de IgG se hace un poco ms tarde que
zados con el antgeno en cuestin. Los detenninantes idioti la de la IgM en la respuesta primaria frente a la penetracin
pos se localizan en la fraccin Fab de las inmunoglobulinas, del antgeno, sin embargo, durante la respuesta secundaria
precisamente en las regiones hipervariablesde las cadenas la IgG constituye la inmunoglobulina ms abundantemente
ligeras y pesadas. segregada. De las cuatro clases de IgG, la que se encuentra

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Inmunidad especfica - 49

Receptor T Clula infectada Clula no


Antgeno por virus infectada
procesado

r Macrfago
CHCM II
IFNV

Linfocito TH
Li nfocito TH CE!lula NK
'-. lnterfern -e::!:.-_,
RECEPTOR T (TH Y Te) Y CHCM I y 11

FIGURA 4.17: los receptores T reconocen al antgeno nicamente sobre las molculas del CMH. El CMH I est en
todas las clulas nucleadas del organismo y expresa los antgenos virales que son reconocidos por el linfocito Te.
Este, a su vez, es estimulado por el linfocito TH y en conjunto secretan interfern que recluta clulas NK y ms linfo
citos Te. Finalmente el efecto es de muerte a la clula parasitada por virus y conferir un estado anti-vrico a las clu
las vecinas no infectadas. El CMH II se encuentra en los macrfagos. El linfocito TH reconoce a los antgenos sobre
dicha molcula y secreta IFN-gamma, que activa al macrfago y destruye los parsitos en su interior.

en mayor cantidad en la sangre es la lgGI (66%), luego le des constituidas por dos cadenas L y dos cadenas H, simila
sigue la IgG2 (23%) y en menor proporcin se encuentran res a las IgG e IgM. Se la encuentra formada a veces por
las IgG3 e IgG4. La capacidad de atravesar la placenta est una sola unidad (rnonmera), por dos unidades (dmera),
dada por la presencia de receptores del fragmento Fe en el por tres unidades (trmera) o bien excepcionalmente por
sincitiotrofoblstico de la placenta. Los alotipos Gm se ms de-tres unidades '(polmera). En caso de que existan dos
designan numricamente del 1 al 25 y cada uno de ellos o ms unidades, la cadena J las une. La forma monmera
est ubicado solamente en una determinada subclase de IgA l , predomina en el suero sanguneo, mientras que la
IgG, as puede verse que el Gm l , Gm2, Gm3 y Gml 7 estn forma dmera se observa en la secrecin intestinal, salival,
presentes en la IgG l . Los alotipos Gm pueden darse en las bronquial y en el calostro. Los dmeros de las secreciones
subclases IgG l , lgG2 e IgG3, pero no se encuentran en la llevan adems acoplado a la molcula, un componente se
:1ndo IgG4. La IgG se encuentra uniformemente difundida en los cretorio, producido por las clulas epiteliales. Este compo
:ores espacios intra y extravasculares, siendo la inmunoglobulina nente protege a la molcula de lgA contra la protelisis
predominante en la respuesta secundaria de los anticuerpos. enzimtica. La lgAl con cadena pesada alphal es el 90%
r dos El nmero de enlaces de disulfuro entre las dos cadenas H de las IgA del suero humano y solamente existe un 10% de
4. 12 es dos para la IgG 1 e Ig04, cuatro para la lgG2 y quince IgA2. Las molculas de IgA no fijan el complemento. El
o. La para la IgG3. nio no recibe IgA materna a travs de la placenta, sino por
para medio de la alimentacin lctea posterior, que lo protege
ons Inmunoglobulina M (IgM). La molcula de IgM fundamentalmente contra las infecciones del aparato diges
da es tiene la cadena J es pentamrica, constituida por 5 unidades tivo.
mede de estructuras bsicas (FIGURA 4.14 y TABLA 4.2); cada
ue al una de estas unidades tiene dos cadenas L y dos cadenas H. Inmunoglobulina D (IgD). Esta inmunoglobulina se
s Fab El 2-mercaptoetanol puede romper los enlaces de disulfuro la identific por primera vez en un caso de micloma. Es
ad de que unen las cinco unidades entre si, liberndolas, con lo tructuralmente es una tpica inmunoglobulina constituida
n las que la IgM pierde gran parte de su accin. Su estructura por dos cadenas L. y dos cadenas H (FIGURA 4. 1 4 y T A
ento, comprende adems una cadena J por cada molcula de IgM. BLA 4.2). La funcin d e la IgD como anticuerpo se conoce
e las Es de aparicin precoz en la respuesta inmunolgica a los muy poco. La lgD se observa en la superficie de los linfoci
1 que estmulos antignicos (6 das), pero en cambio tiene muy tos B.
b, se poca participacin en la respuesta secundaria. Si bien su
1 lgG valencia es 10, la valencia funcional no suele pasar de 5, Jnmunoglobulina E (lgE). Presenta una concentra
debido probablemente a dificultades de su estructura espa cin muy baja en la sangre, est formada por dos cadenas L
cial. Su valencia mayor a la de las otras inmunoglobulinas, y dos cadenas H (FIGURA 4. 14 y TABLA 4.2). Su estruc
e que hace que la inmunoglobulina M constituya el anticuerpo de tura unitaria es similar a las otras inrnunoglobulinas. La IgE
acin mayor eficacia aglutinante. La IgM ocupa solamente el tiene actividad biolgica sobre las clulas cebadas, a las que
daria espacio intravascular, no as los espacios extravasculares. se fija por su segmento Fe y luego de la unin con el ant
nente geno especfico ocasiona la degranulacin de las mismas,
_ _
entra Inmunogiobulina A (lgA). La lgA (FIGURA 4. 14 y provocando la liberacin de las sustancias como h1stamma
TABLA 4.2), tiene la misma conformacin bsica de w1ida- y serotonina. La concentracin de IgE aumenta considera-

ERRNVPHGLFRVRUJ
50 - Inmunidad

FIGURA 4.18: inmuni


dad celular mediada
por anticu erpos.
Cuando e l !J_arsito es
grande y no puede ser
fagocitado, entran en
acc1on clulas NK,
eosinfilos y macrfaa
gos, que se unen a los
anticuerpos que tapia
zan al parsito a
travs de su recepto
res Fe. Eosinfilos y
clulas NK, producen
perforaciones en la
superficie del agente,
mientras que el
macrfago desarrolia
un estallido respirato
Eosinfilo Macrfago
Natural Klller
rio superficial.

b!emente en el suero sanguneo en los prcesos alrgicos y las defensas "a medida" se vuelve una necesidad para llenar
en las parasitosis. los huecos dejados por la inmunidad inespecfica. Los anti
cuerpos constituyen la respuesta evolutiva a estas deficien
ACCIN DE LOS ANTICUERPOS cias del sistema inmune.

Unin antgeno anticuerpo. El antgeno se une a las Una de las principales acciones de los anticuerpos es
zonas variables de las cadenas L y H de los anticuerpos, facilitar !a fagocitosis. Los fagocitos son activados por el
estableciendo contacto con 10 a 12 aminocidos de las complejo antgeno-anticuerpo. La IgG es la principal inmu
zonas hipervariables de las dos cadenas de inmunoglobuli noglobulina que se fija a los macrfagos y neutrfilos, los
nas. Esta unin del denominada reaccin primaria se efect cuales poseen receptores para la fraccin Fe del anticuerpo.
a por fuerzas que son ms intensas cuando la distancia es Tambin se unen a los fagocitos, en menor proporcin la
pequea, siendo ellas las fuerzas de Van der Waals, l iga IgA y la IgE. La Fe de a lgE tiene afinidad por los recepto
das a los movimientos de los electrones dentro de las mol res especficos de a superficie de los mastocitos. Cuando el
culas, las fuerzas electrostticas por atraccin entre dos antgeno microbiano s qdhiere a estos anticuerpos unidos a
grupos inicos de carga opuesta, los puentes de hidrgeno la clula cebada, hace que se liberen mediadores que au
entre tomos electropositivos (H) y electronegativos (0-N) menta la permeabilidad vascular e induce la quimiotaxis de
y uniones hidrfobas entre los aminocidos lipofilicas, por los neutrfilos. Un anticuerpo dirigido en contra de recepto
desplazamiento del agua. Adems en la unin antgeno res de virus evita que ste se una a la clula especfica,
anticuerpo influyen la temperatura, el pH y la fuerza inica evitando la infeccin. Anticuerpos dirigidos en contra de
de la solucin en la cual se encuentran. Cuando se unen el molculas de transporte esencial de la superficie bacteriana
antgeno con el anticuerpo, es muy importante que exista un pueden impedir la fijacin de un determinado nutriente y
ajuste perfecto entre las dos molculas, para que as las producir un bloqueo metablico. Los anticuerpos en contra
fuerzas de atraccin superen a las de repulsin, en cambio, de las toxinas bacteriana evitan la lesin de las clulas, que
si no concordaran las estructuras, las fuerzas de repulsin podra producirles la toxina (FIGURA 4.16).
seran mayores que las de atraccin y las molculas se sepa
raran (FIGURA 4.1 5). La unin antgeno anticuerpo es Cuando las molculas del anticuerpo se unen a un
reversible, pudiendo ser separados ambos elementos con antgeno, el complejo resultante activa el primer componen
mayor o menor facilidad uno del otro, de acuerdo con la te del complemento CI, por la va denominada
avidez o fuerza que tenga dicha unin. In vitro puede con "clsica" (los cientficos la descubrieron antes que la va
seguirse la separacin mediante el uso de inmunoabsorben alternativa, pero es evolutivamente hablando, posterior a
tes como la bentonita o la sefarosa. esta ltima). En la va clsica de activacin del complemen
to, al igual que en la va alternativa, se forma el complejo
Muchos microorganismos escapan a la accin de la de ataque a la membrana (CAM).
inmunidad inespecfica. Solamente algunas superficies de
microorganismos activan el complemento, por la va alter Va clsica de activacin del complemento. El com
nativa. La presencia de cpsulas evita la adherencia de los plemento se fija sobre el complejo antgeno-anticuerpo en
microorganismos a los fagocitos, por lo que no pueden ser el cual participan la IgM o la IgG, pero no las otras inmu
englobados para su destruccin. Las clulas infectadas con noglobulinas. El complemento puede fijarse al complejo
ciertos virus pueden hacerse resistentes a la accin citotxi antgeno-anticuerpo en reacciones en que no es necesario,
ca de las clulas NK, o los virus pueden estimular slo corno son en los fenmenos de precipitacin o de aglutina
dbilmente la produccin de interfcrn, de modo que la cin y an ms, puede hacerlo en las uniones antgeno
transmisin del virus de clula a clula puede continuar sin anticuerpo que no se traducen por fenmenos observables.
trabas. El complemento acta en forma no especfica en las reac
ciones de fijacin sobre los complejos antgeno-anticuerpo,
Otra forma de supervivencia de los microorganismos tanto es as que el complemento de una determinada espe
es la produccin de toxinas, la cuales pueden matar al fago cie de mamfero, puede ser usado en las reacciones de cual
cito, antes que pueda ejercer su accin. La elaboracin de quier otra especie de animal mamfero. El complemento

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Inmunidad especfica - 51

l ,
nmuni- Primer estimulo Respuesta primaria Segundo estmulo Respuesta secundaria
1ediada antignico antignico
Hpos.
sito es
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NK,
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Semanas Meses

FIGURA 4.19: fenmeno de la memoria inmunolgica. En un primer enfrentamiento se forman primero anticuerpos
a llenar
del tipo lgM y luego anticuerpos del tipo lgG. En un segundo enfrentamiento la respuesta de formacin de anticuer
os anti
pos es mucho ms rpida y al igual que en el primer enfrentamiento con el antgeno, se forma lgM. La produccin
ficien-
final de lgG es mucho mayor que en el primer enfrentamiento.

rpos es interviene adems en los procesos de quimiotaxis, opsoni locccica A.


por el zacin, inmunoadherencia, formacin de anafilotoxinas y
l inmu neutralizacin de virus. El complejo CI est constituido por tres subfracciones
los, los
proteicas, que se fijan a las inmunoglobulinas G y M, ad
cuerpo.
El complemento se necesita para la citolisis o lisis del hirindose a la fraccin Fe de las mismas. Cuando dos o
cin la
ecepto microorganismo, que es la accin desintegrativa que poseen ms receptores de Clq se unen a los fragmentos Fe de lgG
ando el ciertos anticuerpos contra determinadas clulas o bacterias. o IgM, la fraccin C l q altera su estructura e induce una
No todos los antgenos pueden ser destruidos por la accin modificacin similar en C l r, la que al estimularse adquiere
nidos a
ue au combinada del anticuerpo y el complemento. Los ms sen actividad enzimtica, de accin proteoltica sobre Cls, que
axis de sibles a esta accin citoltica son los hemates, los glbulos se escinde en dos fragmentos, de los cuales el fragmento
blancos, las plaquetas y las bacterias Grarn negativas. La menor (tiene actividad enzimtica denominndose tambin
ecepto
activacin de la va clsica del complemento es un proceso Clestearasa. El Cls por su accin proteoltica sobre C4 y
ecfica,
ntra de que se desarrolla en cascada, comenzando con Cl y termi C2, diva a ambos en dos fragmentos cada uno que son C4a
:teriana nando en C9, en donde las fracciones se activan unas a -C4b y C2a-C2b, de los cuales los fragmentos menores C4a
iente y otras, siendo la causa in;cial de la activacin, la unin ant y C2b quedan libres en el suero y los otros dos fonnan un
geno-anticuerpo (FIGURA l 0.2). nuevo complejo enzimtico (C4b,2a) que contina el proce
contra
as, que so; El C4a tiene funcin de ana:filotoxina y el C2b de quini
El primer compuesto C l tiene actividad nroteoltica na. En el proceso de activacin desarrollado por C l s es
que separa especficamente en dos fracciones al segundo importante la presencia de iones de Mg"2 El C4b,2a, por su
compuesto, ste a su vez se encarga de activar al tercer accin enzimtica sobre el C3 ha sido designado como C3
1 a un convertasa. El C3, como se ha visto en la va alternativa, se
compuesto y as sucesivamente. Un hecho importante en
ponen divide en dos fragmentos C3a-C3b y mientras el C3a es
ninada este sistema enzimtico es que la sustancia activadora, debe
estar fijada a la membrana celular, lo que hace que su ac liberado en la circulacin y acta como anafilotoxina, el
la va C3b se une al complejo C4b,2a, constituyendo un nuevo
erior a cin en solucin, sea relativamente limitada. La activacin
de C l se hace frente al complejo antgeno-anticuerpo en complejo enzimtico el C4b,2a,3b, que acta como C5
humanos, en los casos en que intervienen la IgM y las tres
lemen convertasa, se dirige hacia C5, al que desdobla en C5a
mplejo (anafilotoxina) y C5b, este ltimo a su vez contina el pro
primeras fracciones de lgG (lgG l , lgG2, Ig03); no partici
pan en la activacin la IgG4, IgA, IgD e IgE. La unin del ceso de CAM para producir la lisis.
antgeno con el anticuerpo provoca cambios en la fraccin
ACCIN DE LOS RECEPTORES T
; com Fe (constante) de las cadenas pesadas de las inmunoglobuli
rpo en nas en los dominios CH2-CH3 de la lgM y en el CH2 de la
inmu IgG, segmentos que presentan receptores especficos para Los linfocitos T se unen a los antgenos, derivados de
mplejo
Cl. los microorganismos intracelulares, ensamblados con el
esario,
lutina complejo mayor de histocompatibilidad. El receptor T,
La subunidad C l q que posee 6 receptores y necesita anlogo a la molcula de anticuerpo, en cuanto a su capaci
geno
que se activen por lo menos dos de ellos, por lo que la IgM dad de reconocer antgenos extraos, est especializada
vables.
s reac al poseer 5 fragmentos de Fe, es la inmunoglobulina que para unirse al complejo fonnado pro la molcula del CMH
ms activa el complemento. La lgG3 es la ms eficaz entre y el antgeno derivado del microorganismos intracelular.
uerpo,
las subclases de IgG. Otras sustancias que pueden ser acti Cuando el linfocito T reconoce estas dos molcula juntas,
espe
vadoras de la va clsica son el ADN, la protena C reacti se activa, iniciado un mecanismo efector. Uno de los meca
e cual
va, las enzimas semejantes a tripsina y la protena estafi- nismo efectores originados por el receptor T es la coopera-
mento

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52 Inmunidad

100 %
.. .. .. . . " " ..
..
. .. . .
, .
.. , . ,f
..... ,f
...
a lgG
lgD
:materna /
.
,

lgM

50 % .
lgG


I
lgA - lgE

lntrautero

"'
11

NACIMIENTO
1 ao 2 aos S aos

FIGURA 4.20; formacin de los anticuerpos en el humano, segn la edad..

cin de los TH (THl) en la destruccin de los microorga molculas de los anticuerpos que tapizan al parsito. El
nismos intracelulares (Listeria, Mycobacterium tuberculo resultado de esta interaccin consiste en inducir la activa
sis). Cuando el linfocito TH especfico se combina con el cin de la clula efectora y la liberacin de materiales lesi
complej o CMH U-antgeno, en la superficie del macrfago, vos para el organismo extrao. Los tipos ms importantes
libera IFNy. Esto pone en marcha mecanismos microbicidas de clulas que se encargan.de esta actividad son los macr
dentro del maerfago, llevando a la mue1te a los parsitos fagos, los eosinfilos y las clulas NK. Los eosinfilos y
intracelulares. Tambin los linfocitos T pueden inhibir la las clulas NK una vez activados en la superficie de los
multiplicacin intracelular de un virus. Las clulas infecta parsitos, producen perforinas muy similares a las de! CAM
das con un virus, expresan en su superficie el complejo y del linfocito Te, sin embargo los macrfagos actan a
formado por CMH I + antgeno vrico, los cuales son reco travs de la liberacin del estallido respiratorio sobre la
nocidos por los receptores especficos de las clulas T ci superficie del parsito (FIGURA 4. 1 8).
totxicas (Te). A continuacin, la clula diana es destruida
por un mecanismo de perforacin similar al que tienen las RESPUESTA INMUNE
clulas NK y al CAM. Como el complejo CMH I -antgeno
aparece desde una fase muy precoz de la infeccin, los Formacin de anticuerpos en respuesta al antgeno.
linfocitos Te matan a la clula hospedadora antes de que el La respuesta de anticuerpos a la inyeccin primaria del
virus haya tenido oportunidad de multiplicarse de forma antgeno no es inmediata, sino que deben pasar varios das
significativa. Las clulas NK carece de receptores T espe antes de que sean detectables, existiendo un perodo llama
cializados para reconocer a cada antgeno viral y sus opor do latente o de induccin que vara dependiendo de la clase
tunidades de ejercer su efecto son mucho menores que los de antgeno, la cantidad del mismo, la va de administra
linfocitos Te. No obstante la liberacin del IFNy, por parte cin, la especie animal, la edad, el estado de salud y de
de los linfocitos Te y TH, mejora notablemente la accin de nutricin, adems de la sensibilidad del test usado para
las clulas NK, logrando, de esta manera un sistema inte detectar el anticuerpo. Los anticuerpos pueden aparecer
grado de defensa (FIGURA 4. 1 7). entre 5 y 1 O das despus de la estimulacin del antgeno.
La primera inmunoglobulina anticuerpo que lo hace es la
INMUNIDAD CELULAR MEDIADA POR ANTI lgM que inicia hacia el 5 da su produccin, observndose
CUERPOS. que llega a la mxima concentracin en sangre alrededor de
las 2-4 semanas, bajando a cantidades mnimas alrededor
El ataque extracelular contra agentes infecciosos de de las 7-8 semanas. La IgG tarda unos das ms para for
gran tamao es realizado por clulas efectora que se unen a marse, comienza hacia los 8 a 1 2 das de la estimulacin
los anticuerpos en contra de los mismos. Cuando un parsi antignica, pero su produccin es ms prolongada durando
to es mayor que una clula fagoctica, es imposible que meses y aos, siendo mucho ms fcil detectarla en la san
pueda ocurrir la fagocitosis. Sin embargo, es todava posi gre. La inyeccin del mismo antgeno por segunda vez,
ble que las clulas efectoras realicen un ataque extracelular ocasiona la respuesta secundaria, que es mucho ms rpida,
sobre la superficie del parsito. Pueden hacerlo a travs del en la que se detectan ambas inmunoglobulinas (IgG e lgM)
fenmeno conocido como citotoxicidad mediada por clu a !os 2-3 das de la inyeccin del antgeno. Aumentan am
las, dependientes de anticuerpos, en la cual las clulas efec bas su concentracin casi al mismo tiempo, notndose que
toras se unen a travs de sus receptores de superficie, a las la curva de produccin de la IgM es aproximadamente igual

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Inmunidad especfica - 53

A B

Antgenos
Clulas
esplnicas

Linfocito B, Linfocito B,
productor de productor de
anticuerpos anti-A ahticuerpos anti-B

+
mieloma = "clulas de hibridoma"

to. El
ctiva
s lesi
tantcs y-y
\

Anticuerpos
1-(
rr Anticuerpos
Clulas tumorales "inmortales" de
mieloma

monoclonales anti-A
mcr
ilos y monoclonales anti
fe los B
CAM
an a

FIGURA: 4.21: anticuerpos monoclonales. Los antgenos A y B son inyectados a un animal de experimentacin, el
,re la
cual forma anticuerpos en contra de los mismos. Los linfocitos B del ratn se hibridan con clulas de mieloma, pro
duciendo clulas hbridas o de "hibridoma". En un proceso de separacin se pueden aislar las clulas de hibridoma
que producen los anticuerpos deseados.

geno.
a del a la obtenida por la inyeccin primaria. En cambio, la lgG ONTOGENIA DE LAS INMUNOGLOBULINAS
s das alcanza niveles de produccin mucho ms elevados, los que
lama se mantienen en forma sostenida por un tiempo bastante La IgG que el nio presenta al nacer es prcticamente
clase ms prolongado que en la primera vez. La aceleracin o toda materna. La IgG propia del nio comienza a producir
tistra precocidad de la respuesta secundaria es debida a la exis se en los das que siguen al parto o a veces un poco antes de
y de tencia de linfocitos de memoria, que se encargan de activa l y va suplantando a la de origen materno que se agota a
para ms rpidamente los mecanismos inmunolgicos para la los 6 meses de vida. En este momento, el total de IgG que
1recer produccin de los anticuerpos especficos. posee el nio alcanza un 30 a 40% de la cifra normal del
geno. adulto, elevndose hasta el 50%, al ao de vida y al 100%,
es la Memoria inmunolgica (FIGURA 4.19). Despus hacia los 7 a 8 aos de edad.
1dose que un organismo ha sido expuesto al antgeno por primera
lor de vez, la respuesta al segundo ingreso del mismo antgeno, un La IgM se forma en el nio hacia los 5 a 6 meses de su
:ledor tiempo despus, es ms rpida y si en la primera reaccin vida intrauterina y en el momento de nacer su porcentaje es
1 for produjo IgM antes que IgG, en la segunda reaccin la pro aproximadamente entre 1 5 y 25% de la cifra normal del
acin duccin de IgG ser muy superior a IgM. Esta memoria adulto. A los 6 meses sobrepasa el 50%, al ao de vida
:ando persiste por aos y a veces dura toda la vida. La memoria es alcanza el 80%, llegando a los 2 aos al 1 00%. La IgA
t san una caracterstica tanto del linfocito B como del linfocito T. aparece despus del nacimiento y alcanza cifras normales
vez, La memoria celular se debe a la estimulacin y expansin hacia los 7 a 8 aos de vida. La IgD es apenas detectable en
1pida, de las poblaciones especificas de linfocitos T y B, que se el recin nacido, llega a cifras normales hacia el ao de
lgM)
1 am
reproducen en mayor cantidad, quedando en reposo cie110 vida. La IgE que empieza su formacin a los pocos das de
porcentaje de las clulas producidas. nacer, tambin alcanza cifras normales hacia los 7 a 8 aos
que de vida (FlGURA 4.20).
i gual

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54 - Inmunidad

ANTICUERPOS MONOCLONALES para cada antgeno que ingresa. El antgeno puede ingresar
a travs de las diferentes mucosas que posee el cuerpo tales
Inmunoglobulinas monoclonales son producidas en los como la del aparato digestivo, respiratorio, conjuntiva! o
mielomas, por la proliferacin plasmocitaria monoclonal. urogenital. El antgeno puede penetrar tambin directamen
Es decir, por clulas que derivan de un solo plasmocito y te en los tejidos en el caso de heridas punzantes o cortantes.
que tienen corno caracterstica la de producir molculas Para hacer frente a estas posibilidades el sistema inmunol
iguales. Mediante la tcnica de hibridacin ideada por Mils gico dispone de estructuras adecuadas para cada caso.
tein, en 1 976, se pueden obtener inmunoglobulinas mono
clonales, mediante cultivos conjuntos de plasrnocitos de Los ganglios linfticos rcpaiiidos por todo el cuerpo,
mieloma, con linfocitos B inmunizados con un antgeno reciben la linfa que proviene de la red de vasos linfticos
definido. Despus de producirse la fusin con hibridacin, aferentes que zonalmente le pertenecen. Esta linfa es filtra
los linfocitos del rnielorna son eliminados por pasajes en un da en su interior, quedando en la trama ganglionar los ant
medio de cultivo selectivo con hipoxantina-aminopterina genos transportados por ella. Los ganglios ubicados escalo
tirnidina, en el cual se multiplican solamente los hbridos nadamente van reteniendo al material extrao que llega a
que son capaces de segregar los anticuerpos monoclonales. ellos, sean bacterias, hongos, protozoarios, virus, helmintos
o antgenos derivados de ellos. Dentro de los ganglios exis
Por sus caractersticas especiales los anticuerpos mo ten reas definidas de linfocitos T, linfocitos B sintetizado
noclonales han demostrado ser muy tiles para las pruebas res de anticuerpos, clulas presentadoras de antgenos y
de diagnstico inmunolgico, ya que son capaces de au clulas de memoria. Estas clulas son estimuladas inmedia
mentar eficazmente la especificidad de las pruebas realiza tamente en forma especfica con la penetracin de cualquie
das. ra de los antgenos sealados.

Los anticuerpos monoclonales elaborados por un solo El sistema linfoide del aparato digestivo est presente
don celular estn dirigidos contra un solo antgeno. Supon en la zona bucofarngea, vegetaciones adenoides, en las
gamos dos antgenos (A y B) que se inyectan a un ratn. placas de Peyer y la lmina propia del intestino, en el apara
Los linfocitos B del bazo elaboraran anticuerpos anti-A y to respiratorio y en el aparato urogenital. Generalmente son
anti-B, que se encontraran presentes en el suero del animal. acumulaciones linfoides difusas conformadas por linfocitos
Aislando estas clulas esplnicas, obtendramos cultivos de T cooperadoras y linfocitos B. Dentro de estos linfocitos B,
lneas celulares esplnicas capaces de producir anticuerpos se encuentran en especial los que integran un sistema pro
ant i - A y anticuerpos anti-B separadamente. Para conseguir ductor de lgA cuya secrecin local cubre toda la superficie
la produccin continua de anticuerpos monoclonales, se de la mucosa con estos anticuerpos protectores.
realiza la hibridacin de las clulas esplnicas del ratn con
clulas B tumorales humanas de reproduccin continua. La circulacin constante de los linfocitos entre la san
Esta clula, inmortal es capaz de producir, sin lmites el gre y los tejidos es guiad )' dirigida a travs de la interac
anticuerpo deseado (FIGURA 4.21). cin de integrinas, selectinas y ligandos que hacen que los
linfocitos puedan, en el momento necesario, atravesar el
Receptores celulares para las inmunoglobulinas. endotelio capilar y dirigirse hacia el sitio en donde son
Han sido sealados receptores para las inmunoglobulinas requeridos. Esta estrecha vigilancia ejercida por el sistema
en los monocitos (FcyRI), en los polinucleares neutrfilos inmunolgico le permite controlar en forma permanente
(FcyRlla y FcyRIII-1 ) y en las clulas NK (FcyRlll-1 ). todas las regiones del organismo humano y actuar sin prdi
da de tiempo desde el inicio de cualquier agresin por parte
Dinmica de la respuesta inmunitaria. El sistema de agentes infecciosos.
inmunolgico es capaz de producir una respuesta especfica

ERRNVPHGLFRVRUJ
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lies
,l o
Captulo 5
1en
tes.
)l-
PROCESOS INMUNITARIOS
-,o,
cos Los procesos inmunitarios ocurren en muchas patolog gripe, la hemaglutinina (H) y la neuraminidasa (N). La
tra
as en las que no intervienen los microorganismos, como la hemaglutinina facilita la unin del virin a las clulas hospe
nt
inmunidad relacionada con procesos neoplsicos y enferme dadoras, pero los anticuerpos anti-hemaglutinina, bloquea
:110- dades autoininunes. En este libro se tratarn solamente aque dicha unin. La neuraminidasa forma anticuerpos de menor
a a llos procesos inmunitarios que involucren a microorganis eficacia. El virus de la gripe puede mutar con relativa facili
1tos mos agentes de enfermedades infecciosas. dad y cambiar la estructura de estos dos antgenos superfi
xis ciales. As el virus pandmico del tipo A entre los aos 1933
.do
INMUNIDAD FRENTE A LOS VIRUS -46 tuvo por frmula HON l , mutando en los aos 1 947-56 al
,s y tipo H l N l , en el 1 957-67 al H2N2 y en 1968 al H3N2. Con
dia
uie- Infeccin vrica. Los virus al atacar al humano, infec este cambio en los antgenos vricos superficiales, el virus
tan diversos tipos de clulas, dependiendo para ello del tipo de la gripe se vuelve irreconocible para el sistema inmunita
de receptor que posee cada clula. As por ejemplo, el virus rio y de esta manera se instala una nueva pandemia gripal.
de la inmunodeficiencia humana (VIH) infecta los linfocitos Las vacunas antigripales de tipo A dejan de ser eficaces
!nte cada vez que el virus hace su mutacin gentica.
las T a travs del receptor CD4+ y el virus de la rabia penetra
en las neuronas a travs del receptor de acetilcolina.
Accin del anticuerpo sobre los virus. Los anticuer
ara
son pos pueden impedir los procesos de adherencia, penetracin,
ii:os Diferentes mecanismos inmunolgicos actan contra
los virus sea en su etapa extra o intracelular. La primera prdida de cubierta y replicacin de los vims. Algunos virus
'> B,
lnea de defensa situada a nivel de la piel y de las mucosas, ejercen su poder patgeno al ser incluidos en el fagosoma y
)fO
est formada, en primer lugar por el interfern (IFN) y por son capaces de disolver la membrana vacuolar, liberando su
icie
la IgA, sustancias que pueden inactivar a los virus que se cido nuclico directamente en el citoplasma celular. Sin
depositan en esos sitios. Con la penetracin de los virus en embargo, esta accin del virus puede ser bloqueada si el
los tejidos se desarrolla la respuesta inmunitaria especfica mismo se encuentra recubierto por anticuerpos antes de su
mn entrada _at fagosoma. El anticuerpo es ms eficaz contra los
rac producida por los linfocitos T y B, formando anticuerpos.
Los anticuerpos son muy eficaces para el bloqueo de los virus si ataca puntos crticos del mismo {por ejemplo la
los hemaglutinina del virus de la gripe). El complemento se
r el virus extracelularcs. Los anticuerpos de las clases IgG e IgM
son eficaces en la sangre y en la linfa, en tanto que la IgA activa por la va clsica, con los anticuerpos que se encuen
son tran sobre la superficie, para la lisis de las clulas infectadas
ma secretora protege las superficies epiteliales y mucosas. Los
anticuerpos, con el apoyo del complemento, pueden !isar las por varios tipos de virus. Tambin la respuesta mediada por
!nte clulas, sin intervencin de los anticuerpos, cumple una
clulas infeGtadas con el virus o directamente actuar sobre
:rdi los virus con membranas lipdicas, En esta accin participan misin importante contra los virus. En este sentido, las clu
arte las NK, portadoras de receptores Fe, ejercen su accin ci
clulas citotxicas dependientes del anticuerpo, las cules
reconocen la presencia de los antgenos vricos en la superfi totxica sobre las clulas infectadas por los virus despus de
cie de la membrana de la clula infectada, para ejercer su unirse al anticuerpo especfico en la superficie de las clulas
accin defensiva. infectadas. Las clulas Te que carecen de receptores Fe no
participan en este mecanismo.
Los antgenos vricos son de naturaleza glicoproticas o
proteica, La clula husped glucosila los antgenos proteicos Por olro lado hay que tener en cuenta, que los anticuer
durante el proceso de la cvaginacin del virus. Existen ant pop que recubren al virus durante las infecciones pueden
genos internos de los virus que no fomian anticuerpos por tener un efecto negativo para el hospedador, favoreciendo al
estar fuera del alcance del sistema inmunolgico. virus, a! aumentar la tasa de infeccin de aquellas clulas
portadoras de receptores Fe. De esta forma el virus incre
Reconocimiento del antgeno vrico. Este proceso
menta su posibilidad de penetracin a la clula, una vez que
es captado en su superficie por la combinacin de anticuerpo
depende exclusivamente de la clula T. En la produccin de
los anticuerpos por la clula B tambin es necesaria la cola -receptor Fe. Un efecto nocivo se observa en la infeccin
por el VIH, en la cual la infeccin previa de la persona por
boracin de la clula T. El reconocimiento de los antgenos
citomegalovirus (CMV), inducen a la formacin de Fe en la
vricos se efecta por el receptor T.
superficie de las clulas, actuando como potenciador de la
infeccin para el VIH. Un mecanismo para evadir la res
El principal mecanismo de defensa en contra de los puesta inmune, utilizado por los retrovirus, es integrar su
virus se efecta por intermedio de los linfocitos Te, que genoma a la clula hospedadora. De esta forma pasan des
reconocen a los antgenos del virus unidos al CMH i, de apercibidos para el sistema, pudiendo permanecer latentes
cualquier clula nucleada del cuerpo, para ejercer una accin hasta la replicacin de la clula (FIGURA 5. 1).
citotxica. Los anticuerpos antivricos se forman con inter
Accin antivrica del interfern. Los interferones son
vencin de los linfocitos TH, que reconocen a los antgenos
del virus unidos al CMH II de linfocitos B y de macrfagos.
fa.,fundamcntal el bloqueo que ejercen los anticuerpos, en el producidos por varios tipos de clulas, en respuesta a las
infecciones vricas, E!_ IFN-y es diferente a los IFN-a y IFN-
ca;:.,J de los principales antgenos superficiales del vims de la

ERRNVPHGLFRVRUJ
56 Inmunidad

\
1933

CD4

CAPTACIN

195 7 Macrfagos Linfocitos T


LATENCIA

Citocinas
194 7

1968
Mutacin antignica del virus de la gripe Infeccin de linfocitos y macrfagos por el VIH

FIGURA 5.1: estrategias utilizadas por los virus para evadir la respuesta inmune. El virus de la gripe muta sus antge
nos de superficie, con lo cual no puede ser reconocido. El VIH se vale de los anticuerpos para ingresar a los macr
fagos y del ocultamiento para no ser notado por el sistema inmune.

p, por ser el nico que es liberado como linfocina por las externa en la que se encuentra un lipopolisacrido (LPS).
clulas T activadas. Los IFN ejercen su accin antivrica Las enzimas de los lisosornas y la lisozima son activas con
provocando una expresin mayor de CMH I y CMH II que tra la capa de pptido-glucano, en tanto que el complemento
facilitan el reconocimiento vrico, inhibiendo en forma dire y las protenas catinicas actan contra la bicapa lipdica
cta la replicacin del virus y activando las clulas NK y los externa de las bacterias Gram negativas. La pared celular
macrfagos en su capacidad citotxica. El IFN por otro lado, compleja de las rnicobacterias es sumamente resistente a la
al unirse a los receptores de las clulas vecinas induce a !a destruccin. Bacterias que poseen fimbrias y/o flagelos pue
sntesis de protenas antivricas como ser una proteincinasa den ser atacadas en estas organe\as por los anticuerpos. La
y una endonucleasa. cpsula externa, por ejemplo, de Streptococcus pneumoniae
protege a la bacteria contra el complemento y la fagocitosis.
El factor" de necrosis tumoral (TNF) tiene actividad
antivrica similar al IFN-y, con el cual acta en forma sinr Mecanismo de ataque bacteriano. Las bacterias des
gica. arrollan su poder patgeno: ( l ) por su capacidad de invasin
sin toxicidad, son las denominadas bacterias virulentas; (2)
INMUNIDAD FRENTE A LAS BACTERIAS por su toxicidad sin capacidad de invasin, son las llamadas
bacterias txicas y (3) por su capacidad de actuar tanto por
La mayora de las bacterias que se depositan constante su invasin como por su toxicidad. El organismo humano
mente sobre nuestra piel y mucosas, no consiguen traspasar debe formar por lo tanto anticuerpos neutralizantes para las
las y son muy pocas las que penetran en la intimidad de los toxinas en algunos casos y en otros casos desarrollar meca
tejidos. nismos inmunitarios para conseguir la destruccin bacteria
na.
Susceptibilidad bacteriana segn la estructura de la
pared. El humano dispone de distintos mecanismos inmu Mecanismos antibacterianos del sistema inmune
nolgicos para destruir los diferentes tipos de pared bacte inespecfico. El humano dispone de numerosos mecanismos
riana. En todas las cubiertas bacterianas existe una pared de inmunidad independientes de la participacin de los lin
externa de pptido-glucano y una membrana interna. Las focitos T y B, pero que son suficientes para impedir la pene
bacterias Gram negativas poseen adems una bicapa lipdica tracin de la mayora de los microorganismo a los humores

ERRNVPHGLFRVRUJ
P_roesos nmunitarios - 57

-=- Protena C
Reactiva
__.,... Mastocito

---
,1 -
/

Mediadores
de l a

1
<111,,,,.._ Productos ---.
bacterianos inflamacin

Macrfago

Bacterias
Complemento --+-

1
Va alterna
Clula NK

FIGURA 5.2: accin del sistema inmune inespecfico sobre las bacterias. Algunos productos bacterianos, la activa
cin del complemento con la formacin de C3a y C5a y las protenas de fase aguda (PCR), de distinta forma actan
activando y facilitando la intervencin de mastocitos, macrfagos y clulas NK, los cuales a su vez producen media
dores de la inflamacin aguda, desarrollando un conjunto de acciones conjuntas que terminan con la lisis bacteria-

tisulares. Uno de los mecanismos inespecficos principales plemento formado incipienternente sobre la misma; (4)
que llevan a la destruccin de las bacterias es la activacin estrutqra superficiales que son capaces de impedir la
de la va alterna del complemento, con el desaITollo de la accin del CAM; (5) la conformacin de la membrana
antge cascada del complejo ltico C5-C9, con liberacin de C3a y externa puede resistir a la fijacin del complemento (el
macr- CSa, Esto ocasiona la degranulacin de los mastocitos, con complemento no se fija) y (6) el microorganismo puede
liberacin de histamina y leucotrienos, aumento de la per segregar compuestos que sirven de seuelo para que el
meabilidad vascular y quimiotaxis de los ncutrfilos. El otro complemento se fije sobre ellas, impidiendo que se deposite
mecanismo importante es la fagocitosis, realizada por los as en la pared bacteriana (FIGURA 5.3).
, (LPS). ncutrfilos y macrfagos. Los macrfagos activados secre
ras con tan una serie de mediadores, como el factor de necrosis tu Mecanismos de accin de los fagocitos. Los fagocitos
lemento moral y la IL-1 (FIGURA 5.2) son atrados y activados por varios compuestos, por compo
lipdica nentes bacterianos, por las anafilotoxinas del complemento
celular Participacin de los linfocitos T y B en la respuesta (C3a y C5a) y por citocinas producidas en el comienzo de la
:nte a la contra las bacterias. El sistema inmunitario capta los ant inflamacin (IFN-y, IL-2, GM-CSF, TNF y otras). Los
los pue genos de cada tipo de microorganismo, para luego activar macrfagos activados a su vez segregan citocinas capaces de
-pos. La las funciones efetoras en su contra, Si el microorganismo activar a otros fagocitos. Luego de la activacin, los fagoci
unoniae es del tipo txico, los anticuerpos cumplen una funcin de tos se unen a las bacterias mediante diversos receptores,
citosis. antitoxina especfica, inactivando la toxina antes de que ella como lectinas y oligosacridos bacterianos, anticuerpos
afecte a la clula o tejido especfico. La lgAs existente en la unidos a la pared de la bacteria con el receptor Fe de los
ias des piel y en las mucosas impide la unin de las bacterias a las fagocitos, las fracciones del complemento fijadas sobre la
nvasin clulas epiteliales, Los anticuerpos que fijan con mayor bacteria con los receptores de los fagocitos (C3b con CR 1,
Itas; (2) eficacia el complemento son IgGl, IgG3 e JgM. iC3b con CD3, iC3b con GP95-150, MBP con ClqR). Pos
!amadas terionnente el fagocito engloba a la bacteria y finalmente la
mto por Mecanismos de las bacterias patgenas contra el destruye por la accin de las enzimas contenidas en los liso
humano complemento. Las bacterias patgenas pueden utilizar va somas,
para las rias estrategias para librarse de la accin del complemento:
r meca- (1) poseer una cpsula o cubierta externa, que de esa mane Mecanismos bactericidas de los fagocitos. La destruc
1acteria- ra evitan que el complemento llegue a unirse a la pared bac cin de las bacterias dentro del fagolisosoma se lleva a cabo
teriana; (2) la pared externa bacteriana puede disponer de en tres etapas, alteracin de la membrana y la pared bacte
largas cadenas laterales (antgeno O), las que consiguen riana, estallido respiratorio e hidrlisis, Durante el estallido
inmune mantener a distancia de los receptores de los macrfagos y respiratorio, el xido ntrico (NO), es muy efectivo para
mismos las molculas de C3b del complemento depositadas en la destruir micobactcrias. Los pptidos catinicos denomina
los lin superficie bacteriana, de esta fomrn no se efectiviza la fago dos defcnsinas, que constituyen el 30-50 % de las protenas
la pene- citosis ni la activacin del complemento; (3) enzimas bacte de los grnulos de los neutrfilos, fonnan conductos en las
1mnores rianas de la membrana pueden actuar degradando el com- rll.ernbranas bacterianas y son ms activos a pH neutro. Act-

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58 - Inmunidad

bacterlanas externas,
3. Estructuras

Receptor C3b

2. Larsili'Cdhas
laterales d_e a_ritgetio O.

Antgeno O
4. Enzimas.

Cpsula

BACTERIA

6. Secreein de
Seuelo-a

compestos Seuelo.
2
(/4 C.
5. Membrana
resistente.

FIGURA 5.3: mecanismos bacterianos para evitar la accin del complemento. La cpsula, ciertas estructuras bactem
rianas externas y la conformacin de la membrana externa, evitan la fijacin de C3b sobre la membrana. Adems la
secrecin de enzimas que hidrolizan C3b sobre la membrana y compuestos que actan de seuelo, evitan que C3b
se fije sobre la membrana. Si C3b logr adherirse a la membrana, la bacteria puede evitar la fagocitosis por el antgem
no O, cuyas cadena largas no permiten el acercamiento de los fagocitos para unirse a travs de su receptor para
C3b.

an sobre un variado tipo de bacterias, tanto cocos como presin arterial, defectOs en la coagulacin de la sangre
bacilos Gram positivos y Gram negativos, sobre algunos originados por coagulacin intravascular diseminada, colap
hongos como Cryptococcus neoformans y virus como el so circulatorio y necrosis hemorrgica.
Herpes simple. Otras protenas catinicas como la catepsina
G y la azurocidina actan a diferentes pH sobre bacilos INMUNIDAD FRENTE A LOS HONGOS
Gram negativos. La lactoferrina, contenida en los grnulos
de los lisosomas, tiene la propiedad de fijar hierro, logrando La inmunidad frente a los hongos es similar a la inmu
con este mecanismo retirar localmente dicho elemento, evim nidad contra las bacterias. Las infecciones micticas se recu
tando que las bacterias que lo necesitan puedan utilizarlo e peran preferentemente mediante procesos de defensa basan
imoidiendo de esta manera su desarrollo y multiplicacin. dos en la inmunidad mediada por clulas, pudindose obser
var reacciones de hipersensibilidad retardada en los indivi
Mecanismos bacterianos de evasin. Muchas bactem duos infectados. La utilizacin de fnnacos inmunodepreso
rias y en especial aquellas que tienen capacidad para des res o el desarrollo de cualquier tipo de inmunodeficiencia,
arrollarse como parsitos endocelulares ( como por ejemplo en especial la motivada por e! VIH, estimula el desarrollo de
!as micobacterias, Mycobacterium leprae y M. tuberculosis micosis tales como la candidiasis y la criptococosis.
y otras como Streptococcus pneumoniae y Haemophilus
irfl,uenzae), tienen mecanismos que les permiten evadir la INMUNIDAD FRENTE A PROTOZOARIOS Y HEL
accin destructiva de los fagocitos: ( 1) desarrollando cpsum MINTOS
las o cubiertas protectoras; (2) segregando sustancias repe
lentes o toxinas que inhiben la quimiotaxis de los fagocitos; Clulas efectoras y citocinas. Actan como clulas
(3) inhibiendo la fusin del lisosoma al fagosoma; (4) pro efectoras contra los parsitos, protozoarios y helmintos, los
duciendo catalasa que desdobla el agua oxigenada; (5) pro macrfagos, los neutrfilos, los eosinfilos, las clulas NK,
tegiendo su pared, mediante cubiertas exterrias muy resistenm los mastocitos y las plaquetas, que cumplen las funciones de
tes, de un complejo gluco-lipdico-fenlico; (6) liberando
controlar la multiplicacin y diseminacin de los mismos.
lipo-arabino-manano que bloquea la activacin de los
La accin inmunitaria de estas clulas efectoras se refuerza
macrfagos; (7) anulando o disminuyendo la eficacia de las
por la accin de las citocinas segregadas por los linfocitos T,
clulas CPA; (8) evadindose del fagolisosoma, para proli
los macrfagos, linfocitos B, fibroblastos y clulas del endo
ferar en el citoplasma celular y (9) destruyendo al fagocito.
telio vascular.
Shock por endotoxinas. La liberacin de endotoxinas Linfocitos T. Estas clulas son las que controlan las
lipopolisacridas (LPS) de las bacterias Gram negativas en
infecciones parasitarias. Son necesarios los linfocitos CD4
los procesos septicmicos estimula la produccin masiva de
para controlar las infecciones por Leishmania y Giardia.
citocinas como TNF e IL-1, que provocan un cuadro de
Los linfocitos CD4 interviene en la inmunidad contra Plas-
shock endotxico grave, el que se manifiesta por cada de la

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Procesos inmunitarios - 59

modium, en la sangre, mientras que los linfocitos CDS act ra contra Leishmania y Schistosoma mansoni. El TNF- a
an contra los estadios hepticos de Plasmodium, destruyen activa macrfagos, eosinfilos, clulas NK y plaquetas fren
do los hepatocitos y segregando IFN-y que inhibe la multi te a larvas de Schistosoma mansoni, siendo reforzado en su
plicacin parasitaria intraheptica. Los linfocitos CD4 no accin por el IFN-r. Cuando la infeccin parasitaria no pue
tienen accin en el estadio heptico, debido a que los hepa de ser superada, el organismo reacciona desaffollando una
tocitos no expresan el CMH II, por lo que los CD4 no reco respuesta crnica mediada por clulas y citocinas y en el
nocen al parsito, sitio de la lesin se acumulan macrfagos, dentro de un
tejido granulomatoso y fibroso.
Citocinas de los linfocitos T. La mayora de las citoci
nas actan sobre las clulas efectoras para aumentar su ac Accin de los neutrfilos en las parasitosis. Muchas
S,
cin microbicida, pero tambin su cantidad. As se observa de las propiedades efectoras de los neutrfilos son similares
esplenomegalia y monocitosis en el paludismo, granulomas a las de los macrfagos y en la destruccin de los parsitos
con gran acumulacin de macrfagos en la esquistosomiasis utilizan los mecanismos dependientes del 02 y del xido
y eosinofilia en parasitosis intestinales por helmintos, espe ntrico (NO). Los neutrfilos pueden activarse por la accin
cialmente las debidas a Uncinar_ias, Trichuris trichiura y de las citocinas IFN-y, TNF-a y otras. La accin antimicro
Ascaris lumbricoides. Estas reacciones son inducidas por biana intracelular es desaffollada por los componentes gra
citocinas IL-J y el factor GM CSF que actan sobre las clu nulares del neutrfilo, mientras que la cxtracclular es media
las rnicloides. da por el agua oxigenada. Las membranas de los neutrfilos
na mediate sus receptores del complemento y de las inmuno
La participacin de las subpoblacioncs THl y TH2 de globulinas (Fe), fijan dichas sustancias, convirtiendo a los
las clulas CD4 puede ser selectiva, siendo ms eficaces las neutrfilos en partcipes de las reacciones citotxicas depen
TH1 contra los parsitos intracelulares y las TH2 contra los dientes de estos dos factores.
extracelulares. Las principales citocinas que liberan los lin
focitos y que intervienen en los procesos inmunitarios en Accin de los eosinfilos en las parasitosis. Es comn
parasitosis son: IL-2, IL-4, TNF-a e IFN-r. La IL-2 que observar eosinofilia y niveles altos de IgE en el curso de laS
suele estar disminuida en el paludismo y en las tripanoso helmintiasis con invasin tisular. La IgE con su estimulacin
miasis africana (Trypanosoma brucei) y americana a los mastocitos se desarrolla para reforzar la accin prima
(T,ypanosoma cruzi). Al ser inyectada en ratones infectados,
1ms la
, bacte- ria de los eosinfilos sobre los gusanos. En la accin de los
ue C3b se restablece !a actividad de las clulas Te y se produce eosinfilos contra los helmintos participan tambin las cito
antgea mayor cantidad de inmunoglobulinas de los tipos IgM e lgG cinas IL-4 e I L -.S liberadas por la clula TH2. Tambin exis
or para antiparasitarias, disminuye por consiguiente, la cantidad de te el factor prorhotor de la estimulacin de los eosinfilos
parsitos de la sangre. IFN-r tiene efectos favorables en (ESP) liberado por los linfocitos T, que atrae a los eosinfi
muchas parasitosis producidas por protozoarios y helmintos, los hacia el parsito. Por un lado los eosinfilos utilizan
como: Ttypanosoma cruzi, Toxoplasma gondii, Leishmania mecanismos de destruccin dependientes del 02, reforzados
donovani, Plasmodium vivax, Entamoeba histolytica y
1 sangre
por las citocinas TNF-a y GM-CSF. Por otro lado, al fijarse
Schistosoma mansoni.
1, colap-
lgE o lgG sobre el helminto, el eosinfilo se adhiere al anti
cuerpo por intem1edio de su receptor Fe, provocando de esta
Accin de los macrfagos en las parasitosis. La acti forma la liberacin del contenido de sus grnulos, que con
vacin de los macrfagos frente a !os parsitos est regulada tienen protena bsica principal (PBM), sobre el parsito,
por las citocinas liberadas por el linfocito T, IFN-y, GM producindole perforaciones sobre su superficie.
la inmu CSF, IL-3 e IL-4. El macrfago a su vez segrega TNF-a y
se recu CSF, que refuerzan la inmunidad frente a los parsitos, al Accin de los mastocitos en las parasitosis. El masto
sa basa activar otras clulas, inclusive otros macrfagos o estimular cito contiene en sus grnulos, mediadores preformados que
, e obser- su proliferacin. La opsonizacin de los parsitos con el puede liberar en forma inmediata. Los mastocitos son acti
5 indivi C3b de! complemento y los anticuerpos, refuerzan la tarea vados por las clulas T, interaccionan con los cosinfilos y
:lepreso de la fagocitosis de los macrfagos, como se puede observar participan en grado importante en la eliminacin de los gu
iciencia, en' Tiypanosoma brucei que pueden ser captadas por mono sanos.
rrollo de citos de la sangre, as como tambin por macrfagos hepti
cos. Ciertos productos como una proteasa liberados por los
mastocitos son capaces de producir cambios en la permeabi
{ HEL- Muchas veces !os parsitos que son fagocitados pueden lidad intestinal y descamar clulas epiteliales de la capa
evitar ser destruidos por el fagocito, aprovechando esta mucosa, facilitando la expulsin de protozoarios intestina
oportunidad para multiplicarse, como se observa en los ca les. A esta accin de los mastocitos sobre el epitelio, se
clulas sos de Leishmania, Trypanosoma cruzi y Toxoplasma gon agrega la del moco segregado por la mucosa intestinal , el
:1tos, los dii. Al activarse el mactfago puede destruir los parsitos cual favorece la eliminacin de los parsitos, al envolverlos
das NK, intracelulares y extracelulares, como los agentes del paludis en su trama. Los mediadores liberados por los mastocitos
iones de mo e incluso parsitos de mayor tamao como las larvas del producen contraccin de los msculos lisos intestinales,
mismos. Schistosoma, reforzando su accin en este ltimo caso con ayudando as a la expulsin de los parsitos.
refuerza anticuerpos IgG e lgE.
,citos T, Accin de las plaquetas sobre Jos parsitos. Las pla
el endo- Los macrfagos activados por citocinas liberan ms quetas pueden destrnir a Toxoplasma ,gondii, T1ypanosom.a
perxido y superxido de hidrgeno, que actan sobre par cruzi y algunas etapas hi.rvarias de Schistosoma mansoni. Su
sitos tales como Trypanosoma cruzi, Toxop/asma gondii, accin citotxica es reforzada por las citocinas IFN-r y TNF
olan las Leishmania, P/asmodiwn, filarias y csquistosomas. El factor -a. Desde el momento en que las plaquetas tienen receptores
os CD4 de necrosis tumoral TNF-u segregado por las clulas linfoi Fe superficiales, pueden mediar en la toxicidad dependiente
'J;ardia. des y principalmente por macrfagos, tiene accin protecto- de los anticuerpos.
ra P/as-

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60 - Inmunidad

ADCC
Citlisls

:r:S:S?--s

Linfocito T.

y
Anticuerpos
+
Clula plasmtica

Clulas NK Macrfago

Degranulacin
..
Protena bsica,
protena .catinca,
l
Perforina; granzima:
l
Estatldo respiratorio
de.superficie
peroxidasaf perforina

FiGURA 5.4: los antgenos del helminto, procesados por macrfagos, son expuestos por el CMH II a los linfocitos T y
B. Estos ltimos se transforman a clulas plasmticas que elaboran anticuerpos. Los linfocitos T producen el factor
promotor de la estimulacin de eosinfilos (ESP), que atrae eosinfilos hacia el parsito. Los anticuerpos del tipo
lgE se unen a los mastocitos, los cuales se degranulan produciendo mediadores qumicos que actan produciendo
vasodilatacin, descamacin de la mucosa intestinal y contraccin de los msculos lisos del intestino. Los anticuer
pos del tipo lgG, al unirse a la superficie del parsito, permite la intervencin de eosinfilos, clulas NK, macrfagos
y plaquetas, mediante el receptor Fe que poseen. Eosinfilos y clulas NK se degranulan y liberan perforinas y los
macrfagos producen estallido respiratorio de superficie, ejerciendo sus acciones efectoras sobre el gusano, en lo
que se denomina inmunidad celular mediada por anticuerpos {ADCC, por sus siglas en ingls).

Respuest,a celular en las helmintiasis. La interaccin liberadas por los mastocitos, mientras que la heparina produ
entre las clulas en las helmintiasis (FIGURA 5.4), comien cida por los mastocitos inhibe la dcgranulacin de los eo
za cuando los antgenos liberados por el parsito estimlan a sinfilos.
los macrfagos, linfocitos B y linfocitos T. La IgE producto
de los linfocitos B sensibilizan a los mastocitos locales, de Participacin de los anticuerpos en las parasitosis.
tal manera que estos al tomar contacto con el antgeno libe Los parsitos provocan la formacin de anticuerpos por
ran sus molculas efectoras, algunas se encargan de aumen parte de los linfocitos B. En forma paralela a esta respuesta
tar la permeabilidad vascular sangunea alrededor del gusa especfica, en muchas infecciones parasitarias aumentan las
no, en tanto que otras como el factores quimiotctico de los IgG inespecficas, que son liberadas por los linfocitos B
eosinfilos (ECF) se encarga de atraer a este tipo de clulas. estimulados por sustancias mitgenas parasitarias. Los anti
Los eosinfilos son atrados tanto por el factor ECF como cuerpos especficos son eficaces para eliminar los parsitos
por el promotor de la estimulacin de los eosinfilos (ESP), libres extracelulares e impedir su ingreso dentro de las clu
secretados por los linfocitos T. Los eosinfilos en colabora las, pero son incapaces de controlar y eliminar los parsitos
cin con el anticuerpo especfico ejercen su accin citotxi intracelulares.
ca sobre el parsito mediada por clulas dependiente de
anticuerpos (ADCC, por sus siglas en ingls). Con las enzi Los mecanismos accin de los anticuerpos sobre los
mas de sus grnulos el eosinfilo controla las sustancias parsitos son: ( 1 ) Provocar la lisis del parsito a travs del

ERRNVPHGLFRVRUJ
Procesos inmunitarios 6 1

complemento, deSpus de haberse fijado sobre el mismo, consecuente disminucin de la secrecin de IL-2 e IFNy y
como se observa en los esporozoitos de Plasmodium, en disminucin de produccin de IL-1 y de la expresin de
T,ypanosoma y en algunos helmintos intestinales. (2) Blo CMH II.
quear la unin del parsito a una nueva clula hospedadora,
como se ve el caso de los rnerozotos de Plasmodium cuan Lesiones inmunopatolgicas de las parasitosis. Puede
do el anticuerpo especfico bloquea el receptor del glbulo existir aumento de tamao de los rganos: esplenomegalia,
rojo por el cual penetran los merozotos dentro del eritrocito. adenomegalia y hepatomegalia en el paludismo, en la toxo
Adems los anticuerpos pueden prevenir e! escape de proto plasmosis y en la leishmaniosis visceral. La formacin de
zoarios que se encuentran dentro de las vacuolas lisosoma inmunocomplejos en los riones en paludismo por Plasmo
les. (3) Reforzar la fagocitosis, proceso que aumenta con la dium malariae. Son comunes las reacciones de hipersensibi
pm1icipacin del complemento, como se observa en las in lidad caracterizadas por crisis asmticas, choque anafilctico
fecciones por Plasmodium, y Trypanosoma brucei. (4) Cola en infecciones por Toxocara canis o por ruptura de quistes
borar en la citotoxicidad mediada por anticuerpos en infec hidatdicos. Es probable tambin que la fiebre, la anemia, las
ciones motivadas por Ttypanosoma cruzi, Trichinella spira alteraciones pulmonares y la diarrea del paludismo agudo
lis, Schistosoma mansoni y filarias. Los anticuerpos que estn relacionadas con la excesiva liberacin de citocinas
median en estas reacciones contra los parsitos son la lgE y del tipo TNF.
la IgG4.
INMUNOSUPRESIN
Escape de los parsitos a la respuesta inmune. Puede
realizarse: ( l ) Agrediendo al hospedador. La capacidad de
Leishmania donovani de diseminarse a rganos y vsceras,
Consiste fundamentalmente en la supresin de la activi
dad de los macrfagos y de los linfocitos T y B, que puede
puede estar en relacin con la propiedad que tiene de ser
diez veces ms resistente al complemento que Leishmania
medirse por la falta de capacidad de fagocitosis o de produc
tropica cuya lesin es una lcera cutnea localizada y carece
cin de inmunoglobulinas y linfoquinas. La inmunosupre
sin es la ausencia de la facultad inmune. La inmunosupre
de poder invasor. (2) Ocultndose dentro de las clulas hos
) pedadoras, como Leishmania y Toxoplasma gondii, que
sin puede ser debida a:
estn fuera del alcance de los anticuerpos. Sin embargo
(1) Tolerancia natural frente al antgeno. En este
deben protegerse de los perxidos y superxidos y de las
enzimas lisosmicas. Toxoplasma gondii evade la accin del
caso no existe respuesta inmunolgica alguna, a pesar de
que el sistema inmunolgico est intacto, siendo una falta
estallido respiratorio penetrando en el macrfago a travs de
una va no fagoctica. Leishnwnia se une a los receptores del
natural de reaccin frente a noxas detenninadas.
complemento para evitar el estallido respiratorio y adems
poseen la enzima superxido-dismutasa, que las protege (2) Induccin mediante enfermedades. Se observa
contra los superxidos y su cubierta superficial compuesta alteracin y disminuCin de la respuesta inmunolgica en
por lipo-fosfo-glucano (LPG) que elimina los metabolitos de trastornos proliferativos de las clulas inmunocompetentes
oxgeno. Para hacer frente a las enzimas lisosomales Ldsh como se ve en los linfomas, mielomas, leucemias, en la
mania poseen la proteasa Gp63, que hidrolizas las enzimas ocupacin de los rganos productores de linfocitos general
contenidas en los lisosomas. Las paredes rgidas de los quis mente por medio de tumores malignos y en el curso de in
tes de los protozoarios o de los huevos de helmintos prote fecciones crnicas corno la sfilis, tuberculosis, lepra, mico
os T y
gen al parsito durante esta etapa de su evolucin y evita la sis, virosis agudas y crnica y en especial la enfermedad
factor accin del sistema inmune. (3) Mimetizndose, ciertos par causada por el VIH.
I tipo sitos corno Ttypanosoma brucei y Plasmodium han desarro
:iendo (3) Induccin por agentes fsicos. Las radiaciones
icuer-
llado un mecanismo de evasin que consiste en alterar la
ionizantes, como los rayos X, son inrnunosupresoras .
1fagos
estructura antignica de su cubierta superficial que cubre la
y los
membrana celular subyacente, con lo que protege al parsito
en lo
contra las respuestas inmunes del hospedador. Algunos hel (4) Induccin por mtodos quirrgicos. La remocin
mintos, como las larvas de Schistosoma, fijan en su capa de rganos o tejidos que producen clulas inmunitarias,
superficial antgenos perteneclenles al hospedador como ser disminuye la inmunidad. La extraccin de rganos que con
las molculas del CMH, con los cuales se "disfrazan", ocul tienen tejidos linfoides como ganglios, amgdalas, apndice,
produ tando as sus antgenos propios al sistema inmunitario del timo o bazo, puede traducirse en una disminucin considera
hospedador. (4) Inmunosuprimiendo al hospedador, estrate ble de la respuesta inmunitaria.
gia empleada por las larvas de Trichinella spiralis, que son
los ca-
capaces de producir un factor soluble citotxico para los (5) Induccin por corticoides. Los medicamentos,
linfocitos y adems pueden escindir pptidos de la IgG. depresores del sistema inmune, ms utilizados son cortisona,
itosis. Otros parsitos como Plasmodium Jalciparum segregan corticosterona, cmtisol, triancicolona, dexametasona, pred
os por
antgenos solubles termoestables que son capaces de fijar el nisona y prednisolona. Todos tienen accin inmunosupreso
: puesta anticuerpo contra el protozoario, disminuyendo la accin del ra, actuando sobre los linfocitos T y B, inhibiendo la sntesis
tan las
mismo contra el parsito. cidos nuclicos y protenas, lo cual se traduce en una dis
is anti
itos B
minucin de inmunoglobulinas y linfoquinas. Los corticoi
rsitos La inmunosupresin inespecfica es frecuente en las des actan tambin sobre los macrfagos, intem1mpiendo el
parasitosis, tanto para las respuestas mediadas por clulas proceso normal de preparacin y presentacin del antgeno.
s clu
rsitos como por los anticuerpos; esta inmunosupresin puede de Los corticoides reducen la respuesta de la IgG, pero no la de
berse a la sobrecarga de antgenos libres en los macrfagos, lgM.
a la secrecin de IL-1 o a la liberacin de prostaglandinas y
otras sustancias anti-inflamatorias por parte de ellos. En los (6) Induccin por citostticos. Se observa en la admi
>re los
linfocitos T de paciente con Leishmaniosis puede observarse nistracin de las siguientes drogas: _ purnas, azathioprina,
1s del la disminucin y an falta de respuesta de las mismas, con la pirimidina, aminopterin, amethopterin, ciclofosfamda, gas

ERRNVPHGLFRVRUJ
62 Inmun idad

mostaza, clorambucil. un aumento de lgM. Presentan infecciones pigenas y for


man autoanticuerpos IgM .contra elementos de la sangre y de
f7). "lnduccin por antiicrbia.nos. SuCed_e _ cOn acti los tejidos; .
nomycit D, mitomycin C, puromicin y cloranfenicol.
Inmunodeficiencia variable comn. En estas personas
INMUNODEFICIENCIAS se presenta la agammaglobulinernia entre los 20 y 30 aos,
afectando a ambos sexos por igual, no parece ser una enfer
Se denomina inmunodeficiencia a un estado anormal medad hereditaria. Existe un notorio dficit del funciona
deficitario de los mecanismos de defensa del orgariismo. miento de los linfocitos B, a lo que puede agregarse a veces
Iteraciones de los linfocitos T. Faltan las inmunoglobulinas
igual que en el caso de fallas en el cromosoma X, pero este
Las inmunodeficiencias se clasifican en especficas e cromosoma no est afectado en este caso.
inespecficas y en primarias y secundarias.
Hipogammaglobulinemia transitoria del lactante.
Se dice que las inmunodeficiencias son especificas Son nios con defectos en las inmunoglobulinas, probable
cuando afectan a las clulas B y T, en cambio, son inespec mente de ido a la falta de apoyo de los linfocitos TCD4, ya
ficas cuando alteran las funciones de los fagocitos o corres que los lmfoc1tos B son aparentemente normales. Son nios
ponden a anomalas de las fracciones del complemento. lbiles. a las infecciones pigenas hasta los 2-3 afios, pero
posteriormente recuperan la capacidad de produccin de las
Las inmunodeficiencias primarias o innatas se producen inmunoglobulinas.
por fallas propias de las clulas del sistema inmunolgico de
origen, , siendo a menudo genticas. Las inmunodeficiencias
DEFICIENCIAS PRIMARIAS DE LINFOCITOS T
secundarias o .adquiridas obedecen a factores extrnsecos
tales como medicamentos, txicos, desnutricin, irradiacio
nes, citostticos o infecciones. Las deficiencias de linfocitos T pueden ser de tipo fun
.
c10nal con presencia de linfocitos T o pueden ser debidas a
la carencia total de este tipo de clula. Como el linfocito T
Los individuos con inmunodeficiencias e inmunosupre tiene una accin de estimulacin sobre el linfocito R es
.
s10nes son altamente susceptibles a las infecciones produci lgico suponer que las deficiencias por linfocitos T ;ean
das, no solamente por microorganismos habitualmente agre
combinadas (humoral y celular) .
sivos Y patgenos como Staphylococcus aureus y Strepto
coccus pneumoniae, sino tambin por muchos otros agentes
que corrientemente no acostumbran producir cuadros infec Deficiencia de CMH clase II. Esta deficiencia es debi
ciosos en el hombre, pero que aprovechan el estado de la da a la falta de expresin de las molculas CMH II en las
cada de las defepsas, para desarrollai; cuadros patolgicos. c.lula presentadoras de antgeno (CPA), macrfagos y
linfocitos B. Obedece a deficiencias en las protenas promo
toras que se unen en la regin 5 ' no traducida de los genes
DEFICIENCIAS PRIMARIAS DE LINFOCITOS B de CMH clase 11. Los nios con esta deficiencia hacen fre
cuentes infecciones gastrointestinales.
Las fallas ocurridas en los linfocits B pueden afectar
sus funciones, su cantidad y en casos extremos las deficien Anomala de Di George. Es debida a defectos en la
cias pueden deberse a la ausencia total de i<ls mismas. formacin de las bolsas farngeas durante la etapa embriona
ria. Los nios presentan amplia separacin de los globos
Agammaglobulinemia ligada al cromosoma X ( X oculares, implantacin baja de las orejas y acortamiento del
LA). Es una enfermedad de origen gentico ligada al cromo surco subnasal en el labio superior. Adems pueden presen
soma X, en su gen X-LA, que afecta a v.rones, quienes si tar cuadros de tetania neonatal por aplasia de las glndulas
bien poseen clulas pre-B en sus mdulas en cantidad nor paratiroides, que tambin proceden embrionariamente de las

ue ? se pueden encontrar en la sangre, ni en los tejidos


mal, no las pueden madurar a 11infocitos B funcionales, los bolsas farngeas. La deficiencia en linfocitos T depende del
grado en que el desarrollo del timo fue afectado.
lmfo1des. En estos nios lo!'i ganglios son muy pequeos y
caresen de amgdalas. No se detectan en el suero sanguneo Ataxia telangiectasia hereditaria. La deficiencia es
lgA, IgM, IgD ni lgE y solamente estn presentes mnimas motivada por roturas de los cromosomas 7 y 1 4 en los sitios
cantidades de IgG. La madre puede suministrarle al nio cuyos genes regulan los receptores de las clulas T y las
IgG. durante el primer ao de vida corno mximo. Por eso, a cadenas H pesadas de las inmunoglobulinas. Los nios son
parttr del 2 ao de vida hacen frecuentes infecciones bacte atxicos y su marcha es tarda y vacilante recin hacia el ao
rianas, que solo pueden combatirse con la administracin
y medio de vida. Hacia los 6 aos presentan capilares dilata
permanente de inmunoglobulinas.
os (telangiectasias) tanto en la piel como en los ojos. Es
importante el dficit de linfocitos T as como de lgA y a
Deficiencias de IgA. Una de cada 700 personas de raza veces IgG2 e lgG4. Desarrollan frecuentes infecciones pre
lanca no ticn IgA, lo que es raro en otras razas. Los que ferentemente pulmonares y sinusales.
tienen este detecto padecen enfermedades por imnunocom
plejos (hipersensibilidad de tipo II). Alrededor del 20% de Sndrome de Wiskott Aldrich. Este sndrome est
los individuos con esta deficiencia tambin carecen de IgG2, ligado a defectos en el cromosoma X. Hay funcin deficita
Ig03 o IgG4. En estos individuos hay tendencia a repetir ria de las clulas T. Puede coincidir con plaquetas pequeas,
cuadros pigenos diversos. escasas _Y anormales, eczema grave e irifecciones pigenas y
oportunistas. Se observan valores normales de IgG, bajos de
Deficiencias de lgA e IgG y aumento de IgM. En IgM y altos de lgA e IgE. Los varones afectados por esta
. estos individuos los dficit de IgA e IgG se acompaan de enfermedad carecen de la molcula de superficie celular

ERRNVPHGLFRVRUJ
Procesos inmunitarios - 63

que es un ligando para la molcula de DEFICIENCIAS DEL COMPLEMENTO


grc y de adhesin intercelular 1 (ICAM- 1).
El dficit gentico de las distintas fracciones del com
Inmunodeficiencia combinada grave (IDCG). Ms plemento componentes de la va clsica, se ha venido diag
)ersonas del 50 % de las IDCG es debida a los defectos de las clulas nosticando cada vez con mayor frecuencia. La alteracin de
30 aos, B y T, especialmente en el gen de la cadena de los recepto las fracciones C l q, Clr, Cls, C2 y C4 desa1Tolla enfermeda
ta enfer res para las IL-2, IL-3, IL 4, IL-7, IL-9 e IL-15, Los nios des por inmunocomplejos como el lupus eritematoso. El
mciona que presentan esta enfennedad tienen infecciones gastroin dficit de C3, factor H o factor I origina susceptibilidad a las
a veces testinales frecuentes y neumonas por Pneumocystis jirove enfermedades pigenas, por alterar el proceso de opsoniza
obulinas cii, candidiasis bucal y cutnea. Las vacunas con microorga cin regido por C3, Las anomalas de CS, C6, C7, y CS y las
iero este nismos atenuados pueden ser fatales para estos pacientes. Es de los componentes de la va alterna properdina y factor D,
una inmunodeficiencia incompatible con la vida, los nios predisponen a las infecciones por Neisseria meningitidis y
no sobrepasan los 2 mios de vida, salvo caso de que se les Neisseria gonorrhoeae. El edema angioneurtico hereditario
actante. haga trasplante de mdula sea. En el examen de sangre es debido al dficit del inhibidor de C l del complemento.
robable muestran muy pocos linfocitos y lo mismo ocurre con los sta molcula es responsable de la disociacin de C l activa
CD4, ya tejidos linfoides en donde inclusive pueden faltar por com do. Es una enfermedad hereditaria de carcter autosmico
m nios pleto. La enfermedad es tres veces ms frecuente en varones dominante que se puede adquirir en edades ms avanzadas.
os, pero que en mujeres. Un grnpo de pacientes con IDCG poseen Como resultado del dficit del inhibidor se liberan cinina 2 y
in de las deficiencias genticas de las enzimas de las purinas PNP bradicinina. Estas sustancias actan sobre las vnulas pos.
(purina nuclesido fosforilasa) y de la ADA (adenosina capilares, a cuyo nivel, por contraccin de sus clulas endo
dcsaminasa), que lleva a la acumulacin de productos txi teliales favorecen la formacin de orificios intercelulares
ST cos para las clulas precursoras linfoides. provocando la salida del plasma. Los pacientes sufren fre
cuentes episodios de tumefaccin en varias partes del cuer
ipo fun INMUNODEFICIENCIAS SECUNDARIAS po, los que pueden ser de mal pronstico y sumamente gra
ebidas a ves si afectan las vas respiratorias altas, desencadenando
focito T Las inmunodeficiencias secundarias son debidas a fac crisis de asfixia.
:o B; es tores ambientales o extrnsecos, que actan debilitando las
T sean defensas de los organismos normales. La malnutricin pro DEFICIENCIAS DE LOS FAGOCITOS
teico-calrica es la causante ms frecuente de inmunodefi
ciencias en grados variables en los nios, qu9 se acompaan Para que la funcin del fagocito en el mecanismo de
es debi a menudo con una disminucin marcada de los linfocitos T, defensa se desarrolle de una manera normal, es necesario
ll en las hacindolos ms sensibles a las infecciones oportunistas. que los mismos se encuentren cuantitativamente dentro de
fagos y Los frmacos que inhiben la reproduccin celular como son las cifras considerad;ls como adecuadas, as como tambin
promo las sustancias citotxicas utilizadas en la quimioterapia anti deben mostrar cualitativamente que sus respuestas fisiopa
JS genes cancerosa tambin dan cuadros de inmunodeficiencias. Las tolgicas son las que se dan habitualmente frente a los diver
.cen fre- grandes quemaduras producen inmunodeficiencias por la sos estmulos biolgicos.
gran prdida de inmunoglobulinas, hecho que tambin se
observa en los procesos extendidos y crnicos del aparato Deficiencia cuantitativa. Es la deficiencia debida a la
os en la gastrointestinal. La deficiencia frrica, el paludismo crnico, disminucin del nmero de los granulocitos neutrfilos que
nbriona la leishmaniosis visceral, a lepra lepromatosa, las enfenne se conoce con el nombre de neutropenia, la que puede ser de
; globos dades virsicas como el sarampin y el VIH, trastornos varios tipos:
coto del linfoproliferativos (leucemias y mielomas), los rayos X,
prescn sustancias radioactivas y hormonas como la corticosterona. l. Neutropenia hereditaria o familiar. Puede ser fatal
lndulas dentro del primer ao de vida o relativamente benigna y de
te de las El sndrome de la inmunodeficiencia adquirida (SIDA) hallazgo accidental.
nde del ocasionado por los virns VIH 1 y VIH2, es un motivo muy
importante de inmunodeficiencia actual. Estos virus infectan 2. Neutropenia cclica. Se manifiesta con ciclos de 21
las clulas T cooperadoras por medio de la glucoprotena de das, caracterizndose por fiebre, malestar general, lceras
ncia es envoltura Gp l 20 del virus que se adhiere al receptor CD4 de bucales, artritis, dolor farngeo, lceras cutneas y dolor
os sitios la clula. Adems de las clulas T son infectados los macr abdominal que duran una semana de evolu'Cin y que luego
T y las fagos, las microglias, las clulas dendrticas estimulantes de desaparecen en las dos semanas siguientes, repitiendo nue
1os son las clulas T y las clulas dendrticas foliculares. Una vez vamente la sintomatologa cclica.
ia el ao que el virus penetra dentro de la clula T, el ARN vrico,
s dilata mediante la transcriptasa inversa, se convierte en ADN y se 3. Neutropenia familiar cclica. Igual que la anterior
ojos. Es incorpora al genoma celular de la clula hospedadora, para
pero que se ve en grupos familiares,
lgA y a posteriormente destruir en forma progresiva a todas las clu
nes pre- las infectadas.
4. Neutropenias en las inmunodeficiencias. Suele
verse en diversos tipos de inmunodeficiencias como la
La consecuente gran disminucin de las clulas TCD4
agammaglobulinemia del nio ligada al cromosoma X, la
me est (cooperadoras), anula las defensas mediadas por clulas y
disgenesia reticular y la inmunodeficiencia ligada al cromo
dcficita deja al individuo indefenso frente a microorganismos opor soma X con hper IgM. En este grupo la neutropenia puede
:qucas, tunistas de todo tipo. De esta manera el SIDA es reconocido ser transitoria, cclica o permanente.
>genas y por las frecuentes infecciones oportunistas, el bajo recuento
bajos de de TCD4 en sangre, poca variacin de las cifras de TCDS y
5. Neutropenia adquirida. Puede observarse durante
por esta poca respuesta a las pruebas intradrmicas cutneas de tipo
el empleo de ciertos frmacos, aplicacin de rayos, en ls
celular retardadas.
enfermedades autoinmunes que comprometen a los leucoct-

ERRNVPHGLFRVRUJ
tos, en ciertos tipos de neoplasias, en infecciones graves con organismo animal y humano desarrolla frente a las sustan
gran toxemia, en el hiperesplenismo, en la leucemia y en la cias extraas y agresoras, que pueden alterar la nornialidad
anemia aplstica. de su constitucin biolgica y fisiolgica. Toda reaccin de
defensa significa un esfuerzo colectivo de todos los tejidos,
Deficiencia cualitativa (funcional). por mantener en condiciones ptimas la integridad y el fun
cionamiento de todos y cada uno de los rganos que compo
l. En la quimiotaxis. Este defecto se observa en la nen la unidad corporal. Es comprensible que estas funcio
enfermedad de Chediak-Higashi, que es una entidad patol nes, que son cumplidas por el sistema inmunolgico, deben
gica con deficiencia de los polinucleares, caracterizada por estar perfectamente reguladas, de manera a evitar que ellas
albinismo parcial culo-cutneo, fotofobia, mayor suscepti sean exageradas o deficitarias y que en caso de no ser ya
bilidad a las infecciones virales y pigenas, hepato necesarias, cuando el microorganismo ha sido eliminado,
esplenomegaha, linfadenopatas y ulceras cutneas. El deje de producirse la reaccin inmunolgica que ya no cum
sndrome del leucocito perezoso en el que adems de la ple la funcin de defensa, para que as todo vuelva a la nor
deficiencia de los neutrfilos en la respuesta a las quimio malidad.
taxinas, presenta disminucin notoria de su movilidad, des
arrollando infecciones recidivantes ms bien leves, tales Los factores que intervienen en esta regulacin de la
como otitis, estomatitis y fcbrculas frecuentes. respuesta inmunitaria son numerosos y se relacionan con e!
antgeno, el anticuerpo, los inmunocomplejos, los linfocitos,
2. En las opsoninas. Se observa cuando hay defectos los idiotipos de las inmunoglobulinas, el sistema neuroend
en las opsoninas C3b (termolbil) y las debidas a lgM e IgG crino y la constitucin gentica ligada al CMH, o no ligada
(tennoestables): los pacientes que.tienen deficiencias cong al mismo.
nitas del sistema de complemento (sndrome de Leiner)
pertenecen al primer caso y los enfermos que tienen anomal Participacin del antgeno en la regulacin de la
as funcionales de las clulas B corresponden al segundo respuesta inmune. Los antgenos, con la colaboracin de
caso, presentando ambos la caracterstica predisposicin al las interleucinas, activan a las clulas fabricadoras de anti
desarrollo fcil de las infecciones pigenas. cuerpos (plasmocito B), para producir la inmunog\obulinas
especficas. Cuando la respuesta inmunolgica ha logrado el
3. En la formacin de oxgeno y agua oxigenada, objetivo de eliminar el antgeno c01respondicnte, las clulas
Este defecto existe en la enfennedad granulomatosa crnica, B dejan de recibir el antgeno en los receptores de su mem
en donde los leucocitos tienen la incapacidad de formar agua brana y por lo tanto no se activan para producir anticuerpos,
oxigenada en el ciclo de la glucosa durante la fagocitosis, con lo cual el sistema inmunolgico vuelve a su estado de
con lo que seguramente la accin antibacteriana de los fago reposo, producindose la disminucin y hasta la desapari
citos disminuye. cin de los anticuerpos especficos de la sangre circulante.

4. En la formacin de mieloperoxidasas. Esta enzima Pari-icipacin del anticuerpo en la regulacin de la


puede faltar congnitamente, pero no siempre este defecto respuesta inmune. Se ha comprobado que la administracin
va acompaado de mayor susceptibilidad a las infecciones. de un antgeno conjuntamente con su anticuerpo IgM es
pecfico, en un individuo diferente al dador del anticuerpo,
5. En la degranulacin. En la enfermedad de Chediak
refuerza la respuesta inmunitaria, en comparacin con la
obtenida mediante la inyeccin del antgeno solamente. En
Higashi existe al parecer un proceso de degranulacin retar
cambio, si en vez de utilizar IgM, se emplean anticuerpos
dado, con menor aporte de enzimas lisosmicas dentro de IgG especficos mezclados con el antgeno correspondiente,
las vacuolas fagocticas, con lo que el poder bactericida de la respuesta inmunitaria es inferior a la del antgeno solo. Es
los macrfagos se encuentra disminuido. evidente que en este caso el anticuerpo se une al antgeno
compitiendo con las clulas B, dependiendo este hecho de la
Causas coadyuvantes en las deficiencias de fagocitos. concentracin de la lgG inyectada y de la afinidad que sta
tiene en su unin con el antgeno, comparada con el grado
l. Enfermedades. Pueden deberse a mielomas mlti de afinidad de los receptores del linfocito B para el mismo
ples, diabetes mellitus, lupus eritematoso, insuficiencia re antgeno.
nal, artritis reumatoide, shock infeccioso grave, insuficiencia
heptica y enfermedad de Hodgkin. Participacin de los linfocitos en la regulacin de la
0

respuesta inmune. Tanto el linfocito T como el B influyen


2. Deficiencias. En agammaglobulinemias, deficiencias en la naturaleza de la respuesta celular y humoral, impidien
de C3 y de C5. do el desarrollo de autoanticuerpos como lo realiza la clula
TCD4, elaborando citocinas TGF, IL-4 e IL-10 que supri
3. Medicamentos. Tales como corticoides, colchicina, men parcial o totalmente la respuesta inmunitaria. La IgE
fenilbutazona, indometacina, citostticos, algunos antibiti puede ser regulada por las clulas T, mediante la citocina IL
cos, quimioterpicos, etc. -4 que aumenta su produccin o por medio del IFN-y que la
suprime.
4. Drogas. Cualquier tipo de drogadiccin, incluyendo
el alcoholismo. Participacin de los sistemas nervioso y endcrino
en la regulacin de la respuesta inmune. Es bien conocido
REGULACIN DE LA RESPUESTA INMUNOLGI el efecto negativo que tiene la situacin del_ stress frente a
CA las infecciones, aunque es dificil demostrar este hecho me
diante conteos celulares y estudios laboratoriales. Se conoce
La respuesta inmunolgica es un mecanismo que el adems que el sistema nervioso participa en el control direc-

ERRNVPHGLFRVRUJ
Procesos inmunitarios - 65

1s sustan- to o indirecto de la produccin de cmiicoesteroides, la hor las inmunodeficiencias, que ya se han comentado, existen
mna[idad mona del crecimiento, la adrenalina y la tiroxina, as como experiencias que demuestran la presencia de factores gell
accin de est comprobado que los tejidos linfoides tienen inervacin ticos que explican las diferencias de susceptibilidad o resis
>s tejidos, simptica. Los linfocitos tienen receptores para varias hor tencia a determinados tipos de microorganismos, que suelen
y el fun- monas y neurotransmisores, como ser los esteroidcs, la observarse en algunas familias y en sus descendientes y que
e compo- adrenalina, la noradrenalina, las encefalinas, las endorfinas. se ha podido corroborar en cobayos, en donde la resistencia
ts funcio- La endorfina segn la dosis puede actuar como supresora o heredada a la toxina diftric se observ que era controlada
co, deben activadora de la respuesta inmune; lo mismo puede decirse por un solo gen con herencia de carcter dominante. Los
que ellas de los corticoesteroides. genes que gobiernan el CMH influyen notablemente en la
no ser ya calidad de la respuesta inmune frente a los agentes infeccio
liminado, Participacin del factor gentico en la regulacin de sos.
la respuesta inmune. Adems de las causas genticas de
l no cum-
1 a la nor-

in de la
an con c!
.infocitos,
:uroend-
no ligada

n de la
racin de
s de anti-
lobulinas
ogrado el
as clulas
su mem-
ticuerpos,
estado de
desapari-
:ulantc.

in de la
nistracin
lgM es-
1ticuerpo,
m con la
nentc. En
1ticuerpos
iondiente,
solo. Es
antgeno
:cho de la
1 que sta
: el grado
el mismo

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l la clula
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ERRNVPHGLFRVRUJ
Captulo 6

HIPERSENSIBILIDAD

Los fenmenos de hipersensibilidad o alrgicos, son HIPERSENSIBILIDAD DE TIPO I (ANAFILCTICA)


evidentemente respuestas inmunolgicas diferentes o altera
das, distintas de las clsicas. Siempre hace falta la exposi La hipersensibilidad de tipo I que depende de la IgE
cin a un antgeno inicialmente, para hacer sensible al orga puede ocasionar cuadros leves como el de la intoxicacin
nismo, luego necesita un perodo para que la sensibilidad se alimenticia, u otros cuadros extremadamente graves como el
instale y finalmente la sensibilidad puede ser demostrada del choque anafilctico. La IgE combinada con el antgeno
por una segunda exposicin al mismo antgeno. Esta forma (alergeno) en la superficie de los mastocitos y basfilos,
de desaITollar el cuadro es totalmente similar a los fenme hace que stos liberen sustancias de accin farmacolgica
nos inmunolgicos clsicos, que llevan a la formacin de bien conocida, que desencadenan el cuadro alrgico. Un
defensas humoral y celular, pero se diferencia de ellos, por tiempo se design este tipo de hipersensibilidad con los
que habitualmente las reacciones de hipersensibilidad pro nombres de alergia reagnica o alergia atpica. La reagina
ducen daos lesionando al organismo. fue posteriormente identificada como IgE y el trmino de
atpica significa fuera de lugar o inusual y haca referencia
CLASIFICACIN inclusive a los antgenos desconocidos. Se describen dos
clases de hipersensibilidad inmediata dependientes de la IgE
Son cuatro las hipersensibilidades que puede desarrollar (tipo 1), una de las cuales presenta reaccin general, conoci
el sistema inmune. Algunos autores agregan una quinta clase da como hipersensibilidad anafilctica general o anafilaxia y
de hipersensibilidad a la clasificacin de Gell y Coombs, a la segunda es de tipo local, llamada tambin hipersensibili
la que llaman hipersensibilidad estimuladora. Esta servira dad anafilctica local o atpica.
para explicar la patogenia de la enfermedad de Graves
Basedow, en donde frente a los antgenos de las clulas La IgE no es capaz de atravesar la placenta, por lo cual
tiroides se producen autoanticuerpos del tipo IgG, que esti no hay transmisin pasiva de la hipersensibilidad de madre a
mularan la produccin hmmona! al unirse posteriormente a feto. Existe sin embargo predisposicin familiar a las aler
los receptores antignicos de la membrana de las clulas gias. La transmisin pasiva por inyeccin del suero de una
tiroides, activando la adenilciclasa de la membrana, la que persona a otra es posible e incluso se pueden sensibilizar
se encargara posterionnente de iniciar el ciclo de produc tejidos como la piel mediante inyecciones locales. La desen
cin de T3 y T4. sibilizacin se consigue haciendo producir niveles altos de
anticuerpos en las fracciones IgG e IgM contra el alergeno,

TABLA 6.1

CLASIFICACIN DE LA HIPERSENSIBILIDAD DE GELL Y COOMBS.

Tipo ! Tipo ll Tipolll Tipo IV

Retardada o celular
Sinonimia Anafllctica Citotxica Complejo inmune dependiente de
linfocitos T.
lnmunqglo bulina
lgE lgG-lgM lgG, lgM u airas Ninguna
anticuerpo

Participacin
No Si Si No
complemento

Glbulos blancos,
Clulas afectadas Mastocitos, basfilos glbulos rojos, Clulas tisulares Clulas tisulares.
plaquetas.

Accin del complejo-


Productos qumicos Productos de Citlisis por
inmune sobre vasos y Linfoquinas
casuales mastocitos complemento.
tejidos.

Enfermedad por factor


Anafilaxia/Alergia Reaccin de Alergia en
Rh/reacciones
Cuadros clnicos alimenticia/Fiebre de Arthus/Enf. del infeccione/Dermatitis
transfusionales/trombo
heno suero/Neumonitis. de contacto.
citopenia.

ERRNVPHGLFRVRUJ
Hipersensibilidad - 67

Primer contacto con el Ag Segundo contacto con el Ag

Ep'i euomuc so

Captacin de Ag
11CA)

la IgE
icacin
orno el
1tgeno

Z
sfilos, Presentacin del Ag
::ilgica
:o. Un
:on los

"T''
reagina
tino de
erencia
en dos
, la lgE
;onoci
Produccin de lgE
alergeno especfica
Y
lgE
laxia y LinfocitoTH
nsibili-

FCRtR1
lo cual
nadre a Fijacin de la lgE
ts aler alergeno especfica
de una al receptor FCRtR1
ibilizar
desen
ltos de
!rgeno, Vasoilatacin
Histamina +
Permeabilidad Vascufar
Leucotrienos
Micro_trmb,os
Activacin del
Activaci(>n de C$ mastoclto por el Ag,
con degranulacin
+-
Edema
Tryptasa

BronCocohstriccin plaquetario
lf

FIGURA 6.1 : mecanismo de la hipersensibilidad tipo l. E n un primer contacto el antgeno alergnico, que ingresa al
organismo, es captado por las clulas presentadoras de antgenos (CPA), interactuando con los linfocitos TH y B
para la produccin de lgE. sta se une especficamente con el FcE-RI de los mastocitos y permanece ah. En un se
gundo contacto con el antgeno alergnico, ste se une a la lgE de los mastocitos, produciendo su degranulacin,
liberando mediadores (histamina, leucotrienos, prostaglandina, tryptasa, factor activador de plaquetas}, que produ
cen vasodilatacin, aumento de la permeabilidad vascular, con edema, activacin de C3 y broncoconstriccin.

fracciones que se encargan de bloquear el alergeno en la iniciales sub-letales que sensibilizaban al animal y pasado
sangre circulante antes de su unin con la IgE. Por supuesto, un cierto tiempo, para que se estableciera el terreno de hi
que la cada o disminucin de estos anticuerpos en sangre persensibilidad, las inyecciones posteriores producan un
vuelve a restablecer el estado de hipersensibilidad. cuadro de choque, an empleando dosis menores que las
inyecciones primarias. Los factores necesarios para que se
Anafilaxia o hipersensibilidad anafilctica general. produzca el choque anafilctico son:
Es el cuadro ms grave de la hipersensibilidad inmediata.
Los primeros trabajos sobre el terna fueron debidos a Richet 1. Inyeccin preparadora, de la sustancia alergizante.
y Portier ( 1902) en experiencias en perros, al intentar produ
ci,r inmunidad en ellos contra toxinas de anmonas de mar.
tis
2. Perodo de incubacin, o intervalo de tiempo nece
Pudieron observar entonces, que despus de inyecciones sario para que los linfocitos T puedan inducir en los linfoci-

ERRNVPHGLFRVRUJ
68 - Inmunidad

tos B la produccin de IgE especfica y que el anticuerpo se 5. Los mediadores liberados por los mastocitos tienen
fije sobre los mastocitos y basfilos. tres ,reas principales de accin: (a) accin quimio
atrayente ejercida por IL-5, IL-8 e INF- y sobre los neutrfi
3. Inyeccin desencadenante, de sustancia idntica a los, eosinfilos y basfilos; (b) accin activadora ejecutada
la preparadora, administrada en forma soluble, en cantidad por la histamina (vasodilatacin, permeabilidad vascular),
suficiente y por una va de absorcin rpida (circulatoria). por el factor activador plaquetario (rnicrotrombos), por la
tryptasa (enzima proteoltica que activa C3) y, por la cinino
genasa ( elabora cininas que producen vasodilatacin y ede
ma) y; (c) accin espasmgena producida por la histamina,
En el cuadro de choque mortal, los sntomas se mani
fiestan por vmitos, taquipnea, taquicardia, cada de la pre
sin arterial y muerte por colapso. El choque anafilctico los leucotrienos LTC4 y LTD4 y las prostaglandinas PGD2
vara de una especie animal a otra y, el cuadro desarrollado que desan-ollan contraccin de la musculatura lisa bronquial,
por el humano se asemeja al que se observa en los cobayos, edema de la mucosa y aumento de actividad de las clulas
con respiracin acelerada, taquicardia, hipotensin y muerte mucgenas.
en pocos minutos. Cuadros menos graves pueden presentar
los mismos sntomas, pero de menor intensidad, observn Existen dos tipos de mastocitos: !os mastocitos de la
dose a veces diarreas y emisin de orina. Pueden actuar mucosa intestinal y pulmonar y los mastocitos del peritoneo
como antgenos sensibilizadores, protenas, polisacridos o y el tejido conjuntivo
antgenos conjugados, siendo suficiente cantidades mnimas
de dichas sustancias. El tiempo mnimo necesario para que Mediadores de la anafilaxia. Son las sustancias elimi
se produzca IgE especfica y se establezca la sensibilidad a nadas por los mastocitos, dmante el proceso de degranula
un determinado antgeno es de ocho das, llegndose a la cin. Estos mediadores pueden ser primarios como la hepa
mxima hipersensibilidad alrededor de las 3 semanas. rina, histamina, serotonina y factor quimiotctico eosinfilo
o secundarios como los leucotrienos, bradiquinina y activa
La IgE es el anticuerpo que interviene en la anafilaxia, dores plaquetarios.
es producida principalmente por plasmocitos situados en las
formaciones linfoides que se encuentran en las submucosas l. Histamina. Procede de la histidina al actuar sobre
del tubo digestivo y del aparato respiratorio, tiene la capaci ella una decarboxilasa. Produce contraccin de los msculos
dad de fijarse mediante su fraccin Fe a los receptores glico lisos, siendo muy sensible en el humano los de los bronquios
protecos de los mastocitos y basfilos que estas clulas y de las vnulas. Ocasiona por lo tanto trastornos respirato
poseen en nmero elevado. El estado de hipersensibilidad rios, sobre todo con dificultad en la espiracin y cada de la
anafilctico puede ser transmitido pasivamente de un animal tensin arterial {por vasodilatacin capilar que sigue a la
a otro. El animal receptor necesita desde varias horas hasta vasoconstriccin venular). La lristan1ina pierde esta accin
un da despus de la inyeccin del suero para volverse sensi por oxidacin o rnetilacin, transformndose en cido imi
ble; esta sensibilidad le durar a su vez unas tres semanas dazolactico y en metilhistamina. La serotonina tiene una
aproximadamente. El hecho de que sean varias horas las que accin similar a la histamina, produciendo una rpida con
se necesitan para sensibilizar pasivamente a los animales, se traccin de los msculos lisos y aumentando la permeabili
debe a que es fundamental la unin de la lgE del dador con dad vascular, pero no tiene participacin en la anafilaxia,
las clulas cebadas del receptor, para que la hipersensibili por el hecho de que no se encuentra presente en las clulas
dad se establezca. cebadas.

Mecanismos de induccin y efectores de hipersensi 2. Heparina. Es una sustancia mucopolisacrida de


bilidad de tipo l. Siguen los pasos siguientes: conocida accin anticoagulantc que se encuentra en los
grnulos de las clulas cebadas.
1. El proceso comienza con la penetracin del antgeno
o alergeno (primer contacto) en el organismo, sea a travs de 3. Bradiquininas y otras quininas. Son sustancias que
las mucosas o bien por la va parenteral. tienen en comn la lenta contraccin del msculo liso, con
efecto vasodilatador y aumento de la permeabilidad capilar;
2. Los alergenos son captados por las CPA, las que los la bradiquinina y otras quininas proceden de los quininge
procesan y entregan a las clulas TH, stas a su vez actan nos que son alpha-globulinas plasmticas y no productos
sobre las clulas B productoras de IgE alergeno-especficas derivados de los mastocitos. El ciclo de activacin comienza
mediante la accin de IL-4. con la sntesis y liberacin de pre-calicrena por parte de los
mastocitos y los basfilos, que se transforma en calicrcna
3. Las lgE alergeno-especficas se unen a los receptores que es una enzima que acta sobre las globulinas alpha pro
del tipo FcE-RI de los mastocitos y los sensibiliza. duciendo la bradiquinina y termina con la formacin de
quininogenasa que es la que acta sobre el quiningeno.

4. Leucotrienos. Son denominados tambin o sustan


4. Cuando el mastocito sensibilizado con IgE alergeno
especfica en su superficie, se pone en contacto nuevamente
(segundo contacto) con el alergeno, se forman enlaces cru cias de reaccin lenta de la anafilaxia (SRS-A), son produc
zados con las fracciones hipervariables de las IgE. Esto tos oxigenados del cido araquidnico que reciben las deno
ocasiona un aumento de Ca+2 intracelular, que activa la libe minaciones de LTB4, LTC4 y LTE4, liberados por el tejido
racin de los mediadores contenidos en las granulaciones pulmonar en las personas sensibles que se exponen al ant
del mastocito. En este proceso de activacin de los mastoci geno especfico, lo que ocasiona espasmo del msculo liso
tos se liberan adems IL-4, IL- 5 e IL- 6, con efectos estimu bronquial, amnento de la permeabilidad, prdida de lquido
lantes sobre los propios mastocitos y sobre los linfocitos B y secrecin de moco. El leucotrieno LTB4 es liberado tam
productores de IgE, as como JL-8 e IL-9 que producen acti bin por los leucocitos, teniendo un fuerte poder quirniotc
vacin celular inflamatoria (FIGURA 6.1). tico sobre los mismos.

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Hipersensibilidad - 69

,s tienen Eosinfilo REGULADORES DE LA MEDIADORES DE LA Mastocito/Basfil o


ANAFILAXIA INFLAMACIN
quimio-
1eutrfi- (INHIBIDORES DE LOS
jecutada MEDIADORES DE LA
ascular), INFLAMACIN)
,1, cinino-
por la
___.,. Arilsulfatasa Leucotrieno
n y ede-
Histamina
stamina,
,S PGD2
unquial,
; clulas
transformacin
Factor de
plaquetaria
os de la
eritoneo Factor quimiotctico
de los eosinfilos

as elimi- FIGURA 6.2: regulacin de la inflamacin por el eosinfilo. El factor quimiotctico de los eosinfilos es secretado por
granula- los mastocitos, el cual recluta a los eosinfilos, que actan como reguladores de la inflamacin. El eosinfilo secreta
la hepa- arilsulfatasa, histaminasa y fosfolipasa D, los cuales inhiben a los leucotrienos, la histamina y al factor de transfor
)sinfilo macin plaquetaria.
f activa-

ar sobre 5. Factor quimiotctico de anafilaxia cosinoflico 2. Antihistamnicos. Actan mejor como preventivos
11sculos (ECF-A). Es un factor que atrae eosinfilos y que es libera que durante las crisis; previenen espasmo bronquial, son

'1
ronquios do por los mastocitos. Los eosinfilos son capaces de liberar eficaces en el tratamiento del prurito y del edema.
:::spirato- in situ, sustancias que intervienen en la re,rulacin de la
ida de la anafilaxia, tales como la arilsulfatasa B y la histaminasa que 3, MetiJxantinas. Producen relajacin del msculo liso
ue a la se hallan presentes en sus grnulos, las que son capaces de y broncodilatacin; las ms usadas: cafena, teofilina y teo
a accin inactivar los Jeucotrienos y la histamina, reduciendo por lo bromina.
ido imi-
X
tanto la respuesta anafilctica, tambin contienen la fosfoli

1
pasa D que inhibe los factores de transformacin plaquetaria 4. 'Antiserotoninas. Poco usadas por tratarse del cido
; ene una
ida con- (FIGURA 6.2). lisrgico que tiene actividad alucingena.
meabili-
tj
_:+

11
1afilaxia, 6, Factores de activacin plaquetaria (FAP). Son en 5. Corticoides. An por la va endovenosa no son tiles
s clulas
rl su mayor parte fosfolpidos, producidos por las clulas ceba
das, tras su estimulacin por el antgeno y que motivan el
en los cuadros agudos, pero pueden utilizarse en el bronco
espasmo persistente y en la baj a tensin arterial.
agregamiento de las plaquetas y la liberacin de serotonina.
rida de Prevencin de la anafilaxia. La desensibilizacin de
1 en los Sustancias que participan en la anafilaxia. Adems un estado alrgico-anafilctico puede conseguirse inyectan
de los mediadores liberados por los mastocitos, hay otra do pequeas dosis del antgeno causante, por una va de
j sustancias que tienen participacin en la anafilaxia. absorcin lenta corno la subcutnea y separadas por ciertos
1cias que intervalos de tiempo. Estas pequeas dosis consiguen liberar
liso, con l. Prostaglandinas (PGE). Se denominan as, porque una cantidad mnima de sustancias de los rnastocitos y bas

1
l capilar; se pens en un comienzo que eran sustancias sintetizadas en
1ininge- l la prstata, pero hoy se sabe que son otros los tejidos que las
filos (histamina, serotonina), que pueden ser controladas por
el organismo sin que se produzca el cuadro grave del choque
reductos producen. anafilctico. Conviene administrar previamente antihistam
omienza nicos cuando se va a realizar este proceso de desensibiliza
te de los

1
Las prostaglandinas previenen la liberacin de histami
alicrena ,' na y leucotrienos, aunque bajas concentraciones de PGE dan
cin y disponer adems de adrenalina para los casos de ur
gencia. Esta desensibilizacin es transitoria y dura apenas
pha pro- un resultado opuesto aumentando la secrecin de dichas unos das, restablecindose otra vez el estado de hipersensi
1cin de sustancias. Por otro lado las PGE tienen accin antilinfocti bilidad.
:::no. ca contra las clulas T y B.
1
1
Anafilactgenos. Son anafilactgenos el suero heter
> sustan- 2. Anafilotoxinas. Son sustancias biolgicas que indu logo o sus fracciones, antibiticos (especialmente penicilina
produc- cen la liberacin de histarninas por parte de los mastocitos; y derivados), hormonas, vitaminas, compuestos farmacol
as deno-
el tejido 11 actan como tales las fracciones de C3a y CSa del comple gicos diversos de aplicacin corriente en teraputica huma

1
mento. na, caros, plenes, pelos, plumas, alimentos, polvos, secre
1 al ant- ciones de insectos, bacterias, hongos, parsitos y toxinas de
culo liso DROGAS MODERADORAS DE LA ANAFILAXIA abejas.

1
::: lquido
ido tam- l. Catecolaminas. Son la adrenalina, efedrina, propa Tratamiento de la anafilaxia. Los sntomas anafilcti
1imiotc- nolol, isoproterenol. Actan como bronco dilatadores y rela cos leves, se pueden controlar con la administracin de 0,5
jantes de los msculos lisos. mi de adrenalina al 1:1.000, repitiendo la dosis en los casos
,
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70 - Inmunidad

graves cada cinco minutos si es necesario. En caso de pica mediante inyecciones intradrmicas, escarificaciones o par
duras de abejas debe administrase adrenalina por va inme ches adhesivos en la piel.
diatamente en caso de shock hipotensivo. Cuando la res
puesta a la adrenalina no es ptima, puede deberse a obs 2. Pruebas para provocacin de cuadros alrgicos.
trucciones de las vas respiratorias o a trastornos en el ritmo Para el efecto se usan alergenos muy diluidos, que se sumi
cardiaco, para lo cual se colocarn cnulas de oxgeno intra nistran por l a va de acceso de la atopa (respiratoria, digesti
nasales y en caso de obstruccin larngea la traqueotoma es va, cutnea, conjuntiva!) y se observan las reacciones alrgi
indispensable. Si no hay respuesta satisfactoria debe repetir cas obtenidas; su uso es muy limitado.
se la dosis a los 5 minutos. Una vez recobrado el paciente se
puede indicar difenhidramina en dosis de 50 a 80 rng intra 3. Test oftlmico. Con antgenos especficos, pueden
muscular, la cual es til para la urticaria y el angioedema. La ofrecer quizs ms sensibilidad que los cutneos, pero tienen
aminofilina 0,25 a 0,50 mi, por va endovenosa est indicada tambin un riesgo ms elevado, por lo cual no es recomen
en el bronco espasmo, lo mismo que los corticoides, que dable su uso.
pueden usarse adems para controlar la hipotensin.
Lo mismo puede decirse del test de Prausnitz-Kstner,
Atopa o enfermedad anafilctica local. Los cuadros o reaccin de fijacin pasiva de la lgE de un dador sensible
encasillados en este grupo son conocidos vulgannente como en la piel de un receptor normal.
alergias, los que tienen una frecuencia aproximada de mor
bilidad del J O % dentro de la poblacin general, siendo habi
4. Dosificacin de IgE. La concentracin plasmtica de
tualmente de carcter hereditario y coincidiendo con nivel
la IgE puede encontrarse aumentada 3 a 5 veces sobre la
elevados de JgE. La sensibilizacin se realiza mediante el
cifra normal en los casos de alergia. La dosificacin se reali
ingreso espontneo de antgenos ambientales, que entran en za por el mtodo de ELISA o de RIA. La determinacin de
contacto con la piel, la conjuntiva ocular, se introducen por
IgE especfica contra un alergeno determinado se efecta
inhalacin en las vas respiratorias y, pueden ingresar por
por et procedimiento de RIA
ingestin en el aparato digestivo. El fenmeno de la reac
cin alrgica tiene los mismos mecanismos que los de la
anafilaxia, ya que intervienen las mismas clulas, la IgE e 6. Eosinofilia. Es un elemento prcticamente infaltable
idnticos mediadores. El proceso atpico se facilita muchsi en los cuadros de atopa o de alergia.
mo por el hecho de que la IgE se produce preferentemente
en los rganos linfoides submucosos de las vas areas y del 7. Otros test. La dosificacin de histamina y el test de
tubo digestivo, por l a existencia de los mastocitos en esos la degranulacin de los basfilos son pruebas que no han
mismos tejidos y por el fcil acceso de los antgenos a las sido suficientemente estandarizadas como para ser utilizadas
clulas cebadas (mastocitos cargados de granulaciones). en los laboratorios clnicos corrientes.

Se denominan alergenos a los antgenos que determinan Tratamiento de las atopas. En primer lugar debe
los cuadros de hipersensibilidad en general y en especial a evitarse que el alergeno especfico, una vez que se lo cono
los de tipo alrgicos o atpicos. Los alergenos pueden ser ce, tome contacto con el individuo sensible, evitando de esta
productos de origen microbiano o parasitario, polen, fibras, manera, las cremas, lociones, alimentos o perfumes, que han
polvo casero, frutas, chocolate, mariscos, moluscos, nueces, demostrado comportarse como sustancias alergnicas en un
condimentos, pelos de animales, plumas, piel y secreciones, determinado individuo.
o bien medicamentos corno aspirina, opiceos, antibiticos,
etc. En segundo lugar se desensibilizar a la persona sensi
ble mediante la aplicacin del alergeno por la va subcut
Los cuadros de alergia humana ms frecuentes son: nea, lo que tiene por objeto estimular la produccin de anti
cuerpos en la fraccin IgG, para que frente a futuros ingre
l. Alergia cutnea. Provocada por contacto de la piel sos espontneos del antgeno puedan fijarse sobre l, por su
con sustancias alergnicas tales como lociones, tinturas, mayor concentracin srica, actuando as como bloqueado
cremas, sustancias qumicas diversas, lana, pelos de anima res de los alergenos, impidiendo la unin de los mismos con
les. l a IgE. La dcsensibilizacin tambin consigue disminuir la
IgE, al existir una menor respuesta de las clulas cebadas y
consiguientemente una reduccin en la demanda de lgE para
2. Alergia alimenticia. Es muy frecuente, se manifiesta
los receptores de esta inmunoglobulina por los mastocitos y
por nuseas y vmitos, a veces con diarrea y urticaria. Puede
basfilos, lo que hace disminuir la sntesis de IgE por los
ser motivada por leche, chocolate, pescados, mariscos, di
linfocitos B.
versas frutas.
Por ltimo pueden usarse diversos medicamentos como
3. Alergia por picadura de insectos. Son motivadas
los simpaticomimticos ( efedrina, isoprenalina, orciprenali
por abejas, avispas y hormigas.
na, terbutalina, salbutamol, fenoterol, etc.), los anticolinrgi
cos (atropina), los corticosteroides, las metilxantinas
DIAGNSTICO DE LA HIPERSENSIBILIDAD AT (teofilina y sus sales), los antihistamnicos, el ketotifeno y el
PICA RELACIONADA CON LA !GE cromoglicato sdico,
1. Intradermorreacciones. Utilizando antgenos solu HIPERSENSIBILIDAD DE TIPO II (CITOTXICA)
bles se pueden producir fenmenos cutneos observables en
los casos positivos (eritema, ppula, edema): que indicarn
la presencia de mastocitos con lgE sensibles al antgeno Las inmunoglobulinas que intervienen en las reacciones
especfico inyectado. Las pruebas pueden ser realizadas de hipersensibilidad de tipo II son la IgG y la lgM. En el

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Hipersensibilidad - 71

es o par-

1lrgicos.
se sumi
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+
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-Kstner,
sensible

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el test de
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.1tilizadas
Gornplemen_to

LIS!$ . FGOCTO.SIS ., . cAMIC3l,


gar debe
lo cono Efectores
lo de esta
, que han FIGURA 6.3: hipersensibilidad tipo 11. El antgeno, por un lado genera anticuerpos en su contra y por el otro se une a
la superficie de la clula diana. Los anticuerpos del tipo lgG e lgM se unen al antgeno sobre la superficie de la clula
diana. Una vez ocurrido esto, se activa el complemento, formando el complejo de ataque a la membrana (CAM}, los
:as en un

neutrfilos y macrfagos fagocitan a la clula diana y los eosinfilos y clulas NK producen perforaciones que cau
na sensi san la lisis de la clula diana.
subcut-
1 de anti proceso citotxico el anticuerpo se une al antgeno que se oxidasa de la membrana con eliminacin de oxgeno. La
os ingre halla situado en la membrana de las clulas diana o a un activacin de la fosfolipasa A agregada a este proceso favo
l, por su hapteno fijado sobre ella (FIGURA 6.3). La clula que po rece tambin la produccin del cido araquidnico. El fago
Jqueado see el antgeno especfico en su membrana, se une a anti cito mediante su receptor C3 toma contacto con el C3b pre
;;mos con cuerpos del tipo IgG o IgM por su fraccin Fab. La clula sente en la superficie de la clula diana, lo que ocasiona un
ninuir la as unida a los anticuerpos, hace adherencia con los fagoci estmulo o refuerzo para el desarrollo de la va ltica del
ebadas y tos, por intermedio de sus receptores Fe producindose la complemento y, el desarrollo de su complejo final de ataque
IgE para fagocitosis. Tambin pueden hacer contacto con las clulas a la membrana (CAM).
1tocitos y NK, las cuales se degranulan, produciendo perforaciones en
por los la clula diana. Por ltimo la unin de los anticuerpos con La hipersensibilidad txica de tipo II se observa en las
los antgenos, produce la activacin del complemento desde enfermedades autoinmllllCS, en las reacciones frente a diver
C l ,4,2,3, hasta C9, producindose la lisis de la clula. sos frmacos y en las isoinmunizaciones (reacciones pos
tos corno transfusionales, incompatibilidad materno-infantil y en los
:iprenali Los fragmentos del complemento y la IgG, pueden rechazos de ala-injertos).
:olinrgi unirse a las clulas diana o a los microorganismos actuando
lxantinas como opsoninas sobre los fagocitos, as como pueden achrnr Existen procesos autoinmunes en los cuales se produ
feno y el incrementando la capacidad lisosmica de los mismos. cen autoanticuerpos contra ciertas formaciones tisulares, que
Cuando el fagocito toma contacto con la clula diana, lo Juego determinan lesiones debidas a mecanismos de hiper
;JCA)
hace a travs de sus receptores Fe unindose con el anticuer sensibilidad de Tipo II. Dos son los cuadros clnicos ms
po en su porcin Fab hipervariable, con lo cual se estimula conocidos: el sndrome de Goodpasture y la miastenia
la liberacin del cido araquidnico, precursor de las prosta gravis. En algunos pacientes con nefritis se forman anticuer
:acciones glandinas y leucotrienos. La misma unin de los receptores pos contra la glucoprotena de la membrana basal, general
VI. En el Fe de los fagocitos con la IgG e IgM activa el complejo mente JgG, que en la mitad de los casos fijan tambin frac-

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1!: 72 - Inmunidad

Complemento

Complejo antigeno-anticuerpo i
l
C3a,C5a

Mastocito Neutrflo

Microtrombos Histamina Enzimas proteoltlcas

Isquemia ---- I.___N_Ec__


R o__
s 1_s____.-------'
FIGURA 6.4: hipersensibilidad del tipo 111. Los complejos antgeno-anticuerpo que se depositan sobre la membrana
basal de los vasos sanguneos y que posteriormente pasan a los tejidos, activan el complemento. ste al producir
las anafilotoxinas C3a y C5a, recluta a los neutrfilos, los cuales se degranulan, liberando el contenido de sus lisoso
mas, produciendo la necrosis del tejido. Contribuyen a la necrosis el complejo de ataque a la membrana (CAM) y los
microtrombos de plaquetas, por isquemia. El fenmeno se encuentra amplificado principalmente por accin de los
mastocitos, produciendo vasodilatacin por la histamina liberada.

ciones de complemento. En este cuadro denominado sndro El rechazo hiperagudo de injertos como es el que se
me de Goodpasture hay necrosis glomerular con depsitos produce en algunos casos de transplantes renales, es una
de fibrina y en un cierto nmero de estos pacientes se aso reaccin que se presenta desde los pocos minutos hasta las
cian al cuadro renal, sntomas del rea pulmonar. La miaste 48 horas de la operacin, debindose al tipo II de hipersensi
nia gravis caracterizada por la extrema debilidad muscular, bilidad.
presenta anticuerpos contra los receptores de acetilcolina de
la superficie de las membranas de las fibras musculares. Un HIPERSENSIBILIDAD DE TIPO lll (COMPLE.10
cuadro parecido a la miastenia gravis es el sndrome de INMUNE)
Lambert-Eaton, caracterizado tambin por la debilidad
muscular, se distingue del sndrome de Goodpasture porque En este tipo de hipersensibilidad los complejos inmunes
presenta defectos en la liberacin de acetilcolina. Se han formados por un anticuerpo precipitante y un antgeno solu
sealado tambin la presencia de autoanticuerpos del tipo ble, se depositan en los vasos y en las membranas basales,
hipersensibilidad tipo II contra los microsomas tiroideos y estimulando la accin del complemento y la aglutinacin o
contra las clulas de los islotes pancreticos. agrupamiento de los trombocitos, los que en conjunto llevan
a la inflamacin aguda por lesin de los vasos y tejidos afec
Diversos frmacos pueden ocasionar hipersensibilidad tados, ocasionando adems procesos de trombosis y necrosis
de tipo II usando como dianas las clulas sanguneas, espe (FIGURA 6.4).
cialmente los eritrocitos y las plaquetas. Entre los frmacos
que determinan hipersensibilidad de tipo II se encuentran el La diferencia principal de la hipersensibilidad de tipo
sedormid que provoca cuadros de prpura trombocitopnica, IIl con la hipersensibilidad de tipo II, es que en la hipersen
la penicilina, las sulfamidas, la quinina y otros frmacos que sibilidad de tipo II participan anticuerpos dirigidos contra
producen anemias hemolticas. El mecanismo ms frecuen antgenos ubicados en las superficies de las membranas de
temente observado en dichas anemias es el que se inicia con las clulas y tejidos, en tanto que en las reacciones ocasiona
!a fijacin de la droga o su metabolito sobre la superficie del das por la hipersensibilidad de tipo IIT intervienen anticuer
eritrocito y al dirigir el anticuerpo especfico su accin con pos contra complejos antgenos-anticuerpos _ extravasado a
tra el frmaco, ayudado por las fracciones del complemento, los tejidos.
se produce la lisis del glbulo rojo.

ERRNVPHGLFRVRUJ
Hipersensibilidad - 73

Los anticuerpos que intervienen en la hipersensibilidad Enfermedad del suero acelerada. Se observa en per
de tipo III son precipitantes y fijadores de complemento de sonas que han recibido una inyeccin de suero heterlogo
las clases IgG e IgM y su unin con el antgeno soluble lleva varios aos antes y sus linfocitos tienen memoria inmunol
a la formacin de complejos inmunes cuyos tamaos y can gica produciendo una respuesta de anticuerpos IgG ms
tidades estarn en ntima relacin con las concentraciones rpida, frente a una nueva inyeccin del mismo tipo de sue
respectivas de los antgenos y anticuerpos correspondientes. ro. El cuadro se manifiesta en 2-4 das y los sntomas son
El complejo activa por un lado el sistema complemento y parecidos a los del cuadro anterior.
produce a la vez una aglutinacin de las plaquetas. Las pla
quetas determinan la formacin de microtrombos que se Reaccin de Arthus. Se produce por la inyeccin local
traducen en procesos de isquemia y posteriormente de ne y repetida de un antgeno en la piel, cuando existe un alto
crosis, liberndose aminas con actividad sobre los vasos nivel del anticuerpo especifico IgG circulante, lo que ocasio
sanguneos que provocan vasodilatacin, El sistema del na un complejo inmunolgico in situ, que provoca la necro
complemento libera anafilotoxinas (C3a y CSa), que actan sis del tejido, luego de un perodo de edema y eritema. La
sobre los mastocitos y los basfilos liberando histamina de causa de este fenmeno es la formacin de un precipitado
accin vasodilatadora, Las fracciones C3a, CSa y CSb67 intravascular y trombosis.
poseen accin quimiotctica sobre los neutrfilos, los que a
su vez, mediante las enzimas proteolticas producen dao Neumonitis por comple.io inmune. Este cuadro se ha
tisular con necrosis causando vasodilatacin capilar median denominado enfermedad de los granjeros, se observa en
te sus enzimas formadoras de quininas y sus protenas poli personas que se exponen a la aspiracin de grandes cantida
catinicas. des de polvo, conteniendo principalmente hongos, como se
ve en los que trabajan en silos, recoleccin de granos y
Los cuadros debidos a los inmunocomplejos desarrolla manejo de productos agrcolas en depsitos, Los esporas
dos en el humano pueden ser agrupados en varias categoras: micticos impregnan los alvolos pulmonares y estimulan el
( 1) los debidos a infecciones moderadas y persistentes con desarrollo de la lgG e lgM, Ante la estimulacin repetida
la participacin de antgenos microbianos tales como los posterior por el antgeno se pueden desarrollar cuadros alr
observados en el curso de enfermedades debidas a Mycobac gicos pulmonares dependientes de lgE como asma, rinitis y
terium !eprae, Plasmodium vivax, Leishmania donovani, tambin fenmenos de tipo Arthus pulmonar con precipita
Streptococcus del grupo viridans, Staphylococcus aureus dos de complejos IgG -+ antgeno en los capilares pulmona
(endocarditis), T1ypanoso111a brucei (tripanosomiasis africa res.
na), virus de la hepatitis y virus del dengue (forma heinorr
gica); (2) los observados en los procesos autoinmunes, Eliminacin de inmunocomplejos. Los inmunocom
mbrana debidos a la formacin permanente de anticuerpos contra plejos existentes en el suero se unen al receptor CRl de los
1roducir autoantgenos; en este caso los sistemas encargados de eli
, lisoso eritrocitos y son transportados al hgado. En dicho lugar son
minar los complejos antgeno-anticuerpo circulantes no son liberacls por el factor l. El macrfago heptico, la clula de
VI) y los suficientes y dichos complejos se depositan en tejidos del
1 de los cerebro, hgado, riones, pulmones, corazn, sistema vascu
Kupffcr, se encarga de la captacin del inmunocomplejo
liberado mediante sus receptores Fe y los receptores para el
lar, articulaciones y pieL Las principales enfermedades auto complemento, Por otra parte el complemento acta sobre los
inmunes causadas por inmunocomplcjos son la artritis reu grandes complejos transformndolos en pequeos complejos
:! que se matoide, el lupus eritematoso sistmico, la polimiositis, la solubles, que pueden ser captados directamente por los
:, es una poliarteritis, la dermatomiositis, la vasculitis cutnea, la macrfagos tisulares,
hasta !as alveolitis fibrosante y las crioglobulinemias; (3) los ocasio
persensi- nados por la formacin de inmunocomplejos en mucosas,
Deteccin de inmunocomplejos. La determinacin de
como la mucosa pulmonar debidos a la inhalacin repetida
inrnunocomplejos en la hipersensibilidad de tipo III, puede
de actinomicetos y hongos que se observan en la neumonitis
realizarse en los tejidos y en la sangre circulante. En los
IPLEJO del granjero y en la de los cuidadores de palomas y (4) los
distintos rganos los inmunocomplcjos fijados pueden de
cuadros especficos de la enfermedad del suero primaria,
tectarse mediante las pruebas de inmunofluorescencia que
enfermedad del suero retardada y el fenmeno de Arthus.
identifican las inmunoglobulinas usando anticuerpos anti
inmunes IgG o detectando el complemento utilizando anticuerpos
no solu Enfermedad del suero primaria. Se observa tanto en anti-complemento marcado. En la sangre, los inmuno
basales, animales como en el humano por la inyeccin de suero cornplejos circulantes se encuentran unidos a los hemates o
nacin o heterlogo. Los sntomas pueden aparecer al 6 o 7 da, libres en el plasma, Es mejor investigar los que se encuen
.to llevan caracterizndose por fiebre, malestar general, erupciones, tran en el plasma separado rpidamente de los eritrocitos,
dos afee edemas, artralgias, adenomegalias, leucopenia, eosinofilia, para evitar que stos, bajo la accin del factor I liberen los
necrosis albuminuria y hematuria. inmunocomplejos que poseen, La determinacin en el plas
ma se ejecuta mediante el agregado de poli-etil-glicol (PEO)
La enfermedad del suero primaria se debe a la presencia que hace precipitar a los inmunocomplejos y no acta sobre
l de tipo concomitante del antgeno todava circulante y de los anti la IgG libre, de tal manera que al centrifugar la mezcla se
upersen cuerpos que empiezan a formarse; el complejo antgeno + obtienen los inmunocomplejos en el sedimento. Estos pue
>s contra lgG puede depositarse en diferentes lugares del cuerpo, den ser dosificados por inmunodifusin radial, RIA o nefe
ranas de principalmente en los vasos sanguneos y en el rin, en lometra.
>casiona donde se los identifica por inmlUlofluorescencia usando
anticuer conjuga dos anti-IgG o anti-C3 cuando hay fijacin de com HIPERSENSIBILIDAD DE TIPO IV (RETARDADA
vasado a plemento. Incluso puede ocurrir durante el cuadro liberacin POR LINFOCITOS T)
de histamina y quininas por los mastocitos al degranularse
bajo la accin de las anafilotoxinas C3a y CSa, al producirse Corresponde al tipo N de Ge!I y Coombs. Denmfnada
la reaccin en cadena del complemento. tambin sensibilidad retardada, tiene como caractensttca Ja

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74 - Inmunidad


oJ +
Medio externo Haptenos

Epldi!rmis
o Q_ Comp!ejo hapteno
o- --+ protema

o
o
Protena
Clula de
-- Langerhans

Dermis o

Linftico aferente Regin paracortical

Ganglio

Corteza

,.

,, "
;

I
I
I
I
1

Sensibilizado Memoria

FIGURA 6.5: fase de sensibilizacin den el fenmeno de hipersensibilidad por contacto. las molculas pequeas
{haptenos) al ingresar a la piel se unen con una protena portadora, que de esta forma son reconocidas por las clu
las de langerhans. sta se dirige al ganglio linftico correspondiente, en donde es reconocido por el linfocito TH.

lenta respuesta despus de la exposicin al antgeno de cho sustancias que se fijan a la membrana de la clula receptora
que ( 1 2 a 48 horas), la falta de tejido especfico de respues timodependiente, pudiendo actuar para este proceso antge
ta, la relacin con los linfocitos T y sus secreciones las lin nos de bajo peso molecular, que podran ser considerados
foquinas, su no dependencia de los anticuerpos, su manifes ms bien como haptenos. El antgeno es captado por un
tacin por infiltrados linfocitarios, la respuesta a los esteroi macrfago, el cual se encarga de pasar la informacin al
des y la imposibilidad de desensibilizar. La hipersensibili linfocito T, sobre el que influyen los linfocitos TH y en caso
dad retardada relacionada con los linfocitos T, no es la mis de activacin se forman los linfocitos efectores Te y los
ma cosa que la inmunidad celular debida a los linfocitos T. linfocitos T de memoria. Los linfocitos efectores ejercern
Difiere en el hecho de que la hipersensibilidad no siempre su accin productora de linfoquinas y citotxica. La respues
est en relacin con la proteccin del organismo como suce ta en el primer contacto se realiza despus del plazo de una
de con la inmunidad. semana, pero los contactos sucesivos tienen plazo de solo 24
a 48 horas. La accin citotxica que el linfocito realiza sobre
En la hipersensibilidad de tipo IV actan corno antge la clula portadora del antgeno, no necesita !a intervencin
nos los virns, las bacterias, los hongos, los protozoarios, las del complemento ni de ningn tipo de anticuerpo. Esta ac
clulas normales o tumorales o sus fracciones proteicas, cin citotxica Tipo IV es muy importante en ciertas enfer-

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Hipersensibilidad - 75
medades autoinmunes y en el rechazo de injertos y tumores. Hipersensibilidad de tipo tuberculnico. Descrita por
Mediante las linfoquinas de accin quimiotctica sobre los Koch, es el tipo de hipersensibilidad dependiente de los
macrfagos y neutrfilos, se consigue conformar un infiltra linfocitos T. Para esta reaccin puede usarse la tuberculina
do celular con linfocitos, macrfagos y neutrfilos, en con bruta de Koch (OT) o un deriVado purificado de prote
centraciones variables, dependiendo de varios factores, co nas (PPD) obtenido a partir de la OT. La tuberculina bruta
mo ser el tipo de antgeno, las defensas y el tiempo que ha se consigue mediante el crecimiento de razas bovinas de
transcurrido desde el inicio del proceso. Mycobacterium bovis en caldo glicerinado durante 4 serna"
nas, se concentra en bao mara al 1/10 de su volumen y se
La hipersensibilidad de tipo IV no puede transmitirse filtra, terminndose as la preparacin de la OT. Para su uso
de un animal a otro mediante la inyeccin de suero sangu se diluye al 1/1.000. La PPD se obtiene a partir de la OT
neo, pero puede hacerse mediante las clulas T. Las clulas precipitada con cido tricloroactico. En el precipitado se
T son las responsables de este tipo de hipersensibilidad y recoge una protena de bajo peso molecular (2.000 Da), que
guardan memoria especfica por mucho tiempo contra el contiene toda la actividad tuberculnica, la cual al ser !iofili"
antgeno determinante. La reaccin de sensibilidad coman zada, mantiene muy estable sus caractersticas antignicas.
dada por las clulas T, moviliza varios tipos de clulas y las
dirige hacia el sitio de la reaccin. En los individuos sensibles la prueba cutnea de la
tuberculina comienza a mostrar hacia las 12 horas una fuerte
Existen tres tipos de reacciones de hipersensibilidad migracin de linfocitos T, desde los capilares hacia el sitio
retardada: ( l ) la hipersensibilidad de contacto que muestra de la inyeccin. A las 24-48 horas se detectan en el dermis
reaccin entre 48 y 72 horas: (2) la hipersensibilidad de del rea de sensibilizacin linfocitos principalmente del tipo
tipo tuberculnico que tambin produce reaccin entre 48 y CD4 y en proporcin un 50% menor CD8 y CDI. Un por
72 horas y; (3) la hipersensibilidad granulomatosa que se centaje de clulas CD4 logra infiltrar adems la epidermis,
manifiesta mediante una reaccin tarda a los 21 a 28 das. mientras los monocitos infiltran las zonas perivascularcs de
los capilares de la dermis. Tanto los linfocitos como los
Hipersensibilidad por contacto (dermatitis de con rnacrfagos y los queratinocitos expresan molculas HLA
tacto). Es una reaccin eccematosa en el sitio de contacto DR. Actan como CPA los macrfagos y entre ellos las
con el alergeno. La hipersensibilidad de contacto es un fen clulas de Langerhans. Si el proceso tuberculnico reaccio"
meno reacciona! esencialmente epidrmico, que lo diferen nal es muy prolongado, puede convertirse e1l una reaccin
cia de los tipos tuberculnico y granulomatoso que suelen ser granulomatosa, debido probablemente a los restos de antge
drmicos o ms profundos. Los agentes ms frecuentes son nos tuberculnicos que persisten en la dermis.
haptenos que poseen molculas de tamao muy pequeo que
no logran ser antignicas por si mismas. Actan como hap Hipersensibilidad granulomatosa. Este tipo de hiper
tenos metales (rquel, cromo, hierro, cobre, mercurio, cobal sensibilidad es debido a la presencia dentro del rnacrfago,
to), ropas (fibras vegetales, animales o sintticas), caucho, de microorganismos, partculas antignicas o inmunocom
cosmticos (tintes, sustancias depilatorias, cremas), plantas plejos, que la clula no puede destruir. Todo ello conduce a
ornamentales, hiedra venenosa y el zumaque venenoso. la formacin de granulomas de clulas epiteloides. La for
Estos haptenos al ser depositados sobre la piel, penetran en macin de granulomas puede inducirse por antgenos bacte"
la epidermis y se conjugan en forma covalente con protenas rianos como los de Mycobacterium tuberculosis, Mycobac
normales del organismo, dando un complejo hapteno teriwn leprae, por sustancias corno berilio, circoni, slice,
protena en los estratos medios y basales epiteliales. Las talco o por enfermedades como la sarcoidosis. Cuando las
clulas de Langerhans derivadas de las clulas dendrticas sustancias provocadoras son de naturaleza inorgnicas, no se
foliculares, se encargan de transportar el complejo antigni acompaan de infiltracin linfocitaria. Las clulas cpitelioi
co, para lo cual migran a travs de los linfticos aferentes des observadas en los granulomas son grandes, aplanadas,
hasta la zona paracortical del ganglio regional, en donde con retculo endoplsmico aumentado, diferencindose de
presentan el antgeno a las clulas TCD4 (Fig. 29.9) los macrfagos por la falta de \isosornas. Tambin es fre
cuente observar en los tejidos granulomatosos la presencia
lUeas de clulas gigantes multinucleadas de Langehans, que
s clu El proceso de sensibilizacin se realiza entre 10 y 14
quizs procedan de los macrfagos.
rH. das. Con la penetracin de nuevas partculas de haptenos y
estando sensibilizado el terreno, las clulas de Langerhans
que lo captan en la superficie epitelial lo transportan como En resumen, los granulomas se caracterizan por presen
siempre a los ganglios regionales, presentando el complejo tar al corte una zona central constituida por macrfagos,
!ceptora hapteno-protena a los linfocitos TCD4+ de memoria que ya clulas epiteloides y clulas de Langehans que no siempre
recuerdan este antgeno; las clulas TCD4+ activadas libe estn presentes. En esta rea central pueden presentarse
, antge
derados ran lFN-y que induce la formacin de ICAM-1 (molculas adems focos de necrosis celular. Por fuera del centro existe
por un de adhesin intercelular) y de CMH II ( complejo mayor de generalmente una zona de linfocitos que lo envuelve y debi
1cin al histocompatibilidad de tipo II), en los queratinocitos epite do a la proliferacin de los fibroblastos pueden observarse
en caso liales y en !as clulas endoteliales de los capilares dn11.icos. depsitos de fibras colgenas.
'c y los Los queratinocitos activados liberan IL-1, fL-6 y CM-CSF
jercern que fomentan la proliferacin y atraen a los linfocitos T al Pruebas cutneas de hipersensibilidad retardada
espues foco reacciona!. Intervienen en este proceso las clulas de para el diagnstico de enfermedades infecciosas.
' de una Langerhans aportando nuevos complejos a los linfocitos ya
solo 24 ubicados en el sitio de la reaccin y, participan tambin en 1. Enfermedades bacterianas: Bruce/la melitensis
a sobre el proceso rnacrfagos que fueron activados por citocinas (melitina), Francisella tularensis (tularina), Nocardia spp.
vencin IFN-y e IL-2, La prostaglandina E (PGE) que inhibe la ela (nocardina), Mycobacterium tuberculosis (tuberculina),
sta ae boracin de IL- 1 e IL-2 sintetizada por queratinocitos y Mycobacterium leprae (lepromina) y Burkholderia mallei
s enfer- macrfagos interviene en esta reaccin como sustancia mo (maleina).
deradora (FIGURA 6.5).

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,76 - Inmunidad

2. Enfermedad por Ch/amydia trachomatis: reaccin 5. Enfermedades por protozoarios: Toxop!asma gon
de Frei para el linfogranuloma venreo. dii (toxoplasmina), Leishmania spp. (Reaccin de Montene
gro).
3. Enfermedad por el virus de la parotiditis: reaccin
de Enders. 6. Enfermedades por helmintos: Echinococcus grnnu
losus (reaccin de Casoni para el diagnstico de la hidatido
4. Enfermedades por hongos: Dermatophytes sis), Trichinella 5piralis (reaccin de Bachman).
(tricofitina, microsporina y epidermofitina), Coccidioides
inmitis ( coccidioidina), Histoplasma capsulatum
(histoplasmina), Paracoccidioides brasiliensis
(paracoccid i o i d i n a ) , Blastomyces dermatitides
(blastomicetina).

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na gon
ontenc- Captulo 7
, gram1-
idatido- INMUNIZACIONES
Como ya se vio, la inmunidad que involucra a los linfo lidad de las principales enfermedades que padece la humani
citos se adquiere en la medida que nos vamos enfrentando a dad e incluso erradicarlas, como ya se ha lo grado con la
los distintos microorganismos patgenos que nos agreden y viruela y est a punto de concretarse con la poliomielitis.
que la inmunidad bsica que tenemos desde el nacimiento
no cambia con las infecciones que desarrollamos durante la Segn su contenido, las vacunas de aplicacin humana
vida. Ambas inmunidades, innata y adquirida, compuestos se pueden clasificar en:
por clulas y compuestos diversos, funcionan en forma coor
dinada de manera de dar una respuesta rpida y especfica l. Vacunas con microorganismos vivos atenuados.
frente a los mltiples agresores. Las principales vacunas con microorganismos vivos atenua
dos, se utilizan para prevenir el sarampin, la rubola, la
La inmunidad adquirida durante el curso de la vida parotiditis epidmica, la poliomielitis (Sabn), la tuberculo
puede conllevar una respuesta de tipo humoral, dependiente sis (BCG), la fiebre amarilla, la viruela, los adenovirus.
de las inmunoglobulinas producidas por los linfocitos B o
puede tener una base celular, en la que participan los linfoci Las vacunas con microorganismos vivos deben tener la
tos T. La inmunidad adquirida puede ser espontnea, cuando seguridad de que los microorganismos que ellas contienen
sucede en el curso de la vida intrauterina por pasaje de los sean capaces de producir solamente una enfermedad sub
anticuerpos maternos a travs de la placenta (IgG) en forma clnica o asintomtica benigna, pero no la enfermedad clni
pasiva o se desarrolla a consecuencia de las enfenne<lades ca que ella tiene que proteger. Para ello debe1rneleccionarse
infecciosas en forma activa. La inmunidad adquirida puede perfectamente las razas de los microorganismos mutantes
ser artificial, si es que se la produce utilizando procedimien avirulentos lo que es posible mediante mtodos tales corno:
tos mdicos especiales, la que a su vez es activa, mediante el ( 1) pasajes sucesivos en los animales, corno sucede en el
uso de las vacunas o pasiva con el empleo de los sueros virus vacuna} de los bovinos, que tiene un mnimo poder
inmunes. patgeno localizado en el humano o el virus de rabia del tipo
de la "calle" transformado en virus rbico de tipo "fijo",
Las vacunas confieren inmunidad activa, de aparicin mediante inoculacio'nes sucesivas en cerebro de conejos, que
tarda, necesitando varas semanas o meses para ello, sus muestra prdida de su virulencia cuando es inyectado por
efectos son ms duraderos, pudiendo alcanzar varios meses, va subcutnea; (2) pasaje en medios de cultivo ace\ulares,
aos y an toda la vida. Su uso es generalmente preventivo, procedimiento utilizado por Pasteur para la fabricacin de la
es decir, antes de que la enfermedad se manifieste. Excep vacuna anticarbuncosa para los bovinos y el clera para las
cionalmente las vacunas se aplican como tratamiento en el gallinas y por Calmette y Guerin en la fabricacin de la
curso de las enfermedades. vacuna BCG contra la tuberculosis; (3) pases en medios de
cultivos de clulas corno sucede con la vacuna que protege
Los sueros inmunes proveen inmunidad pasiva, son contra el sarampin, la rubola, la papera, la fiebre amarilla
anticuerpos ya formados, tienen accin inmediata al inyec y la poliomielitis y (4) manipulacin gentica, obtenindose
tarlos, su efecto es ms bien pasajero durando solo das o mutantes en los cuales se eliminan los genes relacionados
algunas semanas, relacionado con el tiempo de vida de las con la virulencia, con !a capacidad de reproduccin en los
inmunoglobulinas que son sus integrantes especficos. El organismos vivos y con la produccin de toxinas.
uso principal de los sueros es para el tratamiento de las en
fermedades bacterianas y txicas. Algunas veces se emplean Las vacunas con microorganismos atenuados tienen
como preventivos ante la inminencia del desairollo de una varias ventajas sobre las vacunas con microorganismos
enfermedad como es el caso de la rabia o el ttanos, cuando muertos. Si bien es cierto que ambas vacunas producen ttu
ya no existe tiempo para esperar la formacin de anticuer los aceptables de anticuerpos IgG, la inactivacin puede
pos. afectar a los antgenos del microorganismo, de tal manera

VACUNAS
que la produccin cualitativa de anticuerpos no abarque las
especificidades que se necesitan para producir una inmuniw
dad completa y segura. Una segunda ventaj a de las vacunas
E! trmino vacuna deriva del hecho histrico de haberse con microorganismos atenuados, es que los microorganis
empleado por primera vez las secreciones pustulosas de la mos utilizados se multiplican en los sitios del organismo en
viruela del ganado vacuno para la inmunizacin contra la donde son necesarios que se desarrollen los procesos inmu
viruela humana. nitarios. As puede verse que la vacuna anti-poliomielitis
oral con virus atenuado que se administra por va oral pro
Mediante la vacunacin se consigui controlar la ma voca la sntesis de IgAs contra la replicacin del virus, la
yora de las enfermedades infecto-contagiosas que desde el que acta en la mucosa gastrointestinal y protege contra la
comienzo de la humanidad diezmaban la poblacin mundial posterior penetracin del virus, hecho que no sucede con la
y, lo que es ms importante todava, ha logrado demostrar aplicacin de la vacuna con virus muerto administrada por
que, mediante los programas de inmunizacin a escala mun inyeccin intramuscular, que no desarrolla IgAs y por lo
dial, se puede conseguir minimizar la morbilidad y la marta- tanto la inmunidad que provoca es defectuosa. Las vacunas
anti-poliomielitis con virus atenuados, por lo tanto dan una

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78 Inmunidad

inmunidad intestinal ms fuerte, evitando que los virus sal rante (fago beta). Es fundamental el empleo de un medio de
vajes puedan proliferar en la puerta de entrada intestinal y a cultivo adecuado que use todos los ingredientes que faciliten
la vez difundirse al medio ambiente permitiendo una circu la produccin de la toxina, as como un crecimiento micro
lacin mayor de los mismos. La mayor ventaja de las vacu biano acelerado. Una vez producida la toxina se la convierte
nas con microorganismos muertos es la seguridad que tienen en toxoide mediante la accin combinada def formol al
de no desarrollar la enfermedad que se busca proteger, te 4: 1.000 y calor moderado de 37 C, proceso que se produce
niendo en cuenta que los microorganismos que contienen lentamente en el plazo de un mes; la toxina puede tambin
estn todos muertos. Las vacunas con microorganismos transformarse en toxoide espontneamente por envejeci
atenuados pueden ocasionar enfermedades, al mutar los miento al cabo de 1 a 3 aos. La purificacin del toxoide
microorganismos vivos avirulentos en virulentos, riesgo que mediante precipitaciones fraccionadas consigue eliminar
existe siempre con las vacunas atenuadas anti-poliomielitis y sustancias agregadas, que corresponden a la bacteria o bien
anti-sarampin. al medio de cultivo. Los toxoides obtenidos son solubles en
agua, pudiendo ser utilizados as. Tambin se los puede
2. Vacunas con microorganismos muertos (ntegros precipitar con sales o acoplarlos a otras bacterias, con lo que
o fracciones). Las ms conocidas son las que inmunizan ganan en poder inmunolgico.
contra: coque\uche, fiebre tifoidea, peste, clera, rabia, po
liomielitis (Salle), gripe, meningitis meningocccica y ence 4. Vacunas combinadas o polivalentes. Las vacunas
falomielitis. Las vacunas de este tipo contienen microorga de uso humano pueden combinarse entre s, siempre que la
nismos ntegros mue1tos o inactivados. Estn compuestas de mezcla no demuestre efecto antagnico. Probablemente no
suspensiones de microorganismos virulentos, seleccionados sea recomendable aplicar varias vacunas de virus vivos ate
especialmente por la tenencia de antgenos inmunizantes nuados al mismo tiempo, pero en la prctica se han desan-o
superficiales. La inactivacin se puede efectuar mediante llado mezclas de este tipo que son muy tiles y sin efecto
procedimientos fsicos como el calor y los rayos ultraviole antagnico. Las vacunas combinadas ahorran tiempo en !a
tas o qumicos como el formol, fenol, beta-propiolaetona, inmunizacin y economizan personal mdico. Las vacunas
entre otros, La concentracin de microorganismos de las combinadas de ms amplia difusin en el humano son la
diferentes vacunas es de 1.000 a 10.000 millones de micro DPT vacuna anti-diftrica, anti-coqucluche y anti-tetanica,
organismos/mi. La concentracin requeridas para que la vulgarmente llamada vacuna triple y la vacuna triple viral
inmunizacin sea correcta, depende de la especie del micro contra el sarampin, rubola y parotiditis epidmica.
organismo usado en la preparacin de la vacuna. Las vacu
nas que estn compuestas por antgenos purificados, lgica 5. Vacunas producidas por vectores. Se conocen
mente utilizan las fracciones inmunizantes en forma exclusi como vectores determinados microorganismos que han sido
va, procurando eliminar los antgenos y sustancias que no modificados genticamente para que incluyan genes de otros
intervienen en el desarrollo de la inmunidad y que incluso microorganismos o genes creados artificialmente. El vector
pueden ser nocivos. avirulento transporta _dicho gen, el cual al ser inoculado
como vacuna carece de todo poder patgeno, pero estimula
Los antgenos purificados pueden ser de tipo: ( 1) Poli la formacin de anticuerpos contra los antgenos que sern
sacridos como son los que se encuentran en la cpsula de codificados por el gen incorporado. Se utilizan como vecto
Streplococrns pneumoniae y Neisseria gonorrhoeae, uti res ciertos virus, como el de la vacuna (Cow-pox) antiguo
lizndose generalmente varios tipos de antgenos pertene componente de la vacuna antivarilica y bacterias de la fa
cientes a los tipos de los microorganismos que con mayor milia Enterobacteriaceae.
frecuencia ocasionan cuadros patolgicos. Las vacunas bac
terianas que utilizan antgenos polisacridos son: anti 6. Vacunas producidas por genes clonados. El proce
neumocccica, preparada con polisacridos de 23 tipos de so de donacin de determinados genes para producir grandes
Streptococrns pneumoniae, anti- meningoeccica monova cantidades de protenas se ha empicado en bacterias, virus y
lente de tipo A o de tipo C y la polivalente que incluye todos levaduras. La primera vacuna producida para uso humano a
los tipos de meningococos con antgenos inrnungenos, anti partir de un gen clonado es la utilizada para proteger contra
Haemophilus influenzae tipo b, anti-Streptococcus tipo B y la hepatitis B, sintetizada por levaduras.
anti-Escherichia coli tipo Kl. (2) Protenas, pueden hacer
referencia a las protenas de la pared celular de Neisseria Conservacin de las vacunas. Las vacunas una vez
meningitidis tipo B, los antigenos de cubierta de Bordetella terminadas deben conservarse a temperaturas entre 2 C y
pertussiS, la protena M de Streptococcus tipo A Entre las 1 O C an durante el transporte, puesto que cuanto menos
vacunas proteicas virsicas est la hemaglutinina del virus tiempo se las exponga a temperaturas altas, tanto ms man
de la gripe. (3) los lipo-polisacridos presentes en casi to tienen su potencia inmunolgica. Las vacunas ms lbiles
das las bacterias Gram negativas, pueden ser usados en de son las que contienen virus atenuados, soportando mucho
terminadas condiciones para proteger contra los efectos que menos las temperaturas altas del verano.
producen las endotoxinas.
Cada tipo de vacuna tiene las indicaciones precisas de
3. Vacunas con toxoide o anatoxina. Las de uso las condiciones en las que debe mantenrsela, as como el
humano son la vacuna antitetnica y la vacuna antidiftrica. tiempo mximo durante el cual pueden ser utilizadas. El
Estas vacunas pueden ser solubles o precipitadas con alum llamado "sistema de la cadena de fro", para el transporte de
bre, siendo las ltimas preferidas por su mayor efecto esti las vacunas, consigue que las mismas se mantengan refrige
mulante sobre la produccin de anticuerpos. Para la fabrica radas, desde el mismo momento en que se las retira de pro
cin de las anatoxinas o toxoides que se utilizan como vacu duccin, hasta que llegan a los lugares en que deben ser
nas, debe seleccionarse previamente la cepa bacteriana ms utilizadas. Para cumplir con la cadena se deben utilizar
conveniente en cada caso, teniendo en cuenta sobre todo la cmaras frigorficas todo el tiempo, a fin de garantizar la
capacidad toxignica, capacidad que en el caso de Coryne conservacin de las vacunas.
bacterium diphteriae se encuentra ligada a un fago tempe-

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Inmunizaciones" 79
1edio de
faciliten Riesgos de la vacunacin. A consecuencia de la vacu para las enfermedades propias de la infancia y la edad en la
1 micro nacin pueden producirse dolor local, alteracin del estado que las complicaciones vacunales son menos frecuentes,
Jnvierte general, decaimiento y fiebre. Estos sntomas suelen ser
rmol al transitorios. Algo ms importante son las artritis, artralgias El nio presenta anticuerpos maternos IgG que le con
produce (en la vacunacin de la rubola) y convulsiones (en la vacu fieren inmunidad pasiva contra las infecciones, por perodos
tambin nacin anti-coqueluche). La vacunacin repetida con toxoi de tiempo variables segn las diferentes enfermedades: de 8
nvejeci des puede provocar cuadros graves de amiloidosis y neopla a 15 meses contra el sarampin, la rubola y la parotiditis y,
toxoidc sias y se ha descrito un aumento de mortalidad por encefalo de 3 a 6 meses contra la poliomielitis. La lgG materna atra
liminar pata con convulsiones en nios vacunados con la vacuna viesa perfectamente la barrera placentaria, persiste en la
1 o bien DT en Italia (Campania). No es recomendable practicar la sangre del nio con cifras bastante altas durante 2 a 4 meses.
1bles en hiperinmunizacin cuando se usan toxoides, siendo conve La IgAs suministrada por el calostro y la leche materna
s puede niente espaciar el tiempo de las aplicaciones, en las vacunas protege al nio contra las infecciones intestinales, por lo que
n lo que de este tipo. las diarreas y los cuadros de gastroenteritis son ms frecuen
tes en nios sometidos a la alimentacin artificial. El nio
La vacuna contra la gripe pandmica provoc en el ao presenta la capacidad de desarrollar anticuerpos de la clase
vacunas 1976 una mayor incidencia del sndrome de Guilln-Barr lgM desde antes del nacimiento e JgG despus del primer
e que la entre los vacunados, aunque su frecuencia no sobrepas de l mes de vida. La imnunidad celular del nio ya se encuentra
tente no caso cada 85.000 vacunados. La hipersensibilidad a las pro desarrollada al nacer.
vos ate tenas del huevo existente en las vacunas virsicas o a los
desarro antibiticos que se usan como conservadores para evitar la Dosis. Las vacunas con bacterias o virus atenuados, que
n efecto contaminacin bacteriana, pueden producir cuadros alrgi tienen microorganismos capaces de reproducirse en la perso
}O en la
cos de diversa intensidad. na vacunada, necesitan por lo general una sola dosis, salvo
vacunas caso de interferencia, como puede suceder en la vacuna anti
> son la Las vacunas que contienen virus vivos atenuados son poliornielitis, que hay que repetir la dosis una o dos veces
tet8.nica, generalmente de mayor riesgo, ya que pueden tener efecto para asegurar la inmunizacin. Las vacunas que contienen
)!e viral teratgeno en las embarazadas, sobre todo la vacuna antirub toxoides o microorganismos inactivados deben tener dosis
ola, o pueden desarrollar la enfermedad que pretenden de refuerzo cuyo nmero es variable con cada tipo de vacu
proteger, sobre todo en las personas que presentan inmuno na.
conocen deficiencias por diferentes causas. No es conveniente aplicar
1an sido corticoides en ninguno de los pacientes vacunados con virus Esquema de vacunacin. El programa de vacunacin
de otros vivos atenuados. Pueden observarse cuadros de encefalitis recomendado desde la niez es el siguiente:
'.I vector en las vacunaciones contra el sarampin, rubola, viruela y
1oculado fiebre amarilla. La vacunacin anti-poliomielitis constituida Edad Vacuna.
stimula por tres tipos de virus atenuados, puede desarrollar en e1 De 1 a 2 meses _ _ BCG.
.te sern tubo digestivo, el virus de tipo III puede desarrollar una De 2 a 3 meses _ __l dosis de pentavalente
o vecto reactivacin de su virnlencia, produciendo el cuadro clnico _ _ _ _ _ __ _ 1 dosis poliomielitis polivalente
antiguo de la poliomielitis, observndose actualmente en EEUU la _ _ _ _ _ _ __ _ Anti-rotavirus
le la fa- paradoja de que existe mayor nmero de casos de poliomie - - - - -- - -Anti-neumococo
litis paraltica post-vacunacin, que los que se producen en De 4 a 5 meses _ _ _2 dosis de pentavalente
forma espontnea motivados por virus naturales. _ _ _ _ _ _ _ 2 dosis poliomielitis polivalente
l proce _ _ _ _ _ _ __ _ Anti-rotavirus
grandes La vacuna antivarilica adems de los cuadros encefal - - - - - - - - -Anti-neumococo
, virns y ticos ya citados, puede provocar diseminacin cutnea gene De 6 a 7 meses _ _ _3 dosis de pentavalente
1mano a ralizada de la vacuna en nios con eczema, sarna o, enfer
- - - - - - - - Anti-neumococo
:r contra medades pigenas de la piel. =- - - - -- - 3 dosis poliomielitis polivalente
De 12 a 15 meses Triple viral
El virus SV40 de los simios, puede contaminar las va A los 18 meses 3 dosis poliomielitis polivalente
una vez cunas que emplean el cultivo de clulas de tejidos de monos De 20 a 24 meses _ _Refuerzo de pentavalente
2 e y para la produccin de las mismas, virus que se ha demostra De 4 a 6 aos _ _ _ ,Refuerzo tetnica-diftrica (DT)
) menos do patgeno para el sistema nervioso central humano, del _ _ _ _ _ _ _ __,Refuerzo de poliomielitis polivalente
s rnan cual se lo ha aislado en repetidas oportunidades. _ _ _ _ _ __ _ R , efuerzo de triple viral
s lbiles De 9 a 1O aos _ _ Refuerzo tetnica (T)
1 mucho VACUNACIN _ _ _ _ _ _ _ _ _ R , efuerzo triple viral
_ _ _ _ _ _ __ _ .Refuerzo anti- neumococo
Va de administracin. Se utilizan diferentes vas de Cada 1 O aos _ __ _Refuerzo tetnica (T)
'Cisas de acuerdo con las diversas clases de vacunas de uso humano:
como el la va oral en la vacuna contra la poliomielitis, la va in En caso de epidemias de otras enfermedades preveni
,das. El tradrmica en la antivarilica y la BCG, la subcutnea en la bles se utilizarn las vacunas correspondientes en cada caso.
porte de triple viral y anti-fiebre amarilla, la intramuscular en la
refrige DPT, DT, antitfica y en la antigripal. VACUNAS DE USO HUMANO
de pro
!ben ser Edad. La eleccin del momento oportuno para iniciar l. Tetnica. Se aplican tres inyecciones por va intra
utilizar la vacunacin en los nios debe tener en cuenta diferentes muscular de 0,5 m1 de toxoide tetnico precipitado con
ntizar la factores, tales como la eliminacin de los anticuerpos mater alumbre y posteriormente refuerzos cada 8 a 1O aos, o en
nos de la circulacin sangunea, la maduracin del sistema casos de heridas tetangenas. Integra la vacuna pentavalente
imnunolgico del nio, el perodo de mayor susceptibilidad y la DT.

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80 - Inmunidad

2. Diftrica. Integra la vacuna pentavalente y la vacuna nes de 0,5 ml. por va subcutnea profunda, con intervalos
doble DT corno toxoide precipitado. La pentavalente se de 4 a 6 semanas, y refuerzos posteriores cada 2 a 3 aos. La
utiliza en el primer ao de vida y la combinacin DT a partir inyeccin de refuerzo puede hacerse con O,1 mi. por va
de los 4 a 6 aos. intradrrnica. Confiere inmunidad por 2 a 3 aos. En la ac
tualidad se disponen de otros dos tipos de vacunas: una
3. Sarampin. La dosis es de 0,5 mi. de virus atenuado constituida por polisacridos Vi purificados y otra que es
de la cepa de Schwartz. Integra la vacuna triple viral junto elaborada con una cepa atenuada de Salmone!la typhi que
con los virus atenuados de la rnbola y de la parotiditis posee la enzima galactosa epimurasa mutada en tal forma
epidmica. Se la obtiene por cultivos en embrin de pollo. que permite la acumulacin de galactosa txica en el endo
soma bacteriano cuando el microorganismo entra en contac
4. Rubola. La dosis es de 0,5 mi. de vacuna conte to con las clulas M del epitelio intestinal. Estas dos ltimas
niendo virus atenuados, por va subcutnea. Forma parte de vacunas se administran por va oral.
la vacuna triple viral junto los virus atenuados del sarampin
y de la parotiditis epidmica. No debe administrarse a las 13. Peste. Contiene suspensin de bacilos Yersinia
mujeres embara7.adas por el riesgo de las teratognesis. La pestis muertos. Se administran tres inyecciones intramuscu
tasa de encefalitis por rnbola entre los nios vacunados lares de 0,5 ml. con intervalos de 4 a 6 semanas; el refuerzo
alcanza la cifra de 1 en 1 . 000.000. Esta vacuna se la obtiene se hace cada 6 a 1 2 meses. Se aplica solamente a las perso
por cultivo en clulas diploides humanas. nas expuestas. Su accin se basa en la presencia del antgeno
E. La inmunidad en algunos individuos dura ms de 3 aos.
5. Parotiditis. La dosis es de 0,5 ml. de virns atenuados
obtenidos por cultivos en embrin de pollo, en inyeccin 14. Clera. Suspensin de bacilos Vibrio cholerae
subcutnea. Es integrante de la vacuna triple viral. inactivados. Se aplica en inyecciones subcutneas dosis de
0,5 y l ml., separadas por 4 a 6 semanas, con refuerzos cada
6. Poliomielitis oral de tipo Sabn (VOP). 'Obtenida 6 meses. Confiere proteccin a solo el 50% de los vacuna
por cultivo en clulas de rin humano o clulas diploides dos. Esta vacuna est indicada en las reas endmicas o
humanas. Contiene los tres tipos de virus de la poliomielitis cuando se realizan viajes a esas zonas. La combinacin de
(vacuna trivalente) atenuados. Se administra por va oral en microorganismos muertos con la sub-unidad B de la entero
tres dosis. La inmunidad es permanente, pero pueden hacer toxina del microorganismo, en una vacuna oral experimenta
se refuerzos cuando hay riesgos de epidemias. da en Bangladesh ha demostrado ser eficaz en el 85% de los
casos.
7. BCG (anti-tuberculosa). Contiene Mycobacterium
bovis atenuados, tambin conocido con el nombre de bacilo 15. Rabia. Existen varios tipos de vacunas antirrbicas:
de Calmette-Guerin (BCG). Se aplica en inyeccin intradr
mica o subcutnea. No es necesario repetirla mientras la a. CRL. Obtenida por inoculacin en cerebro de ratn
tuberculino-reaccin se mantenga positiva. Como complica lactante, contiene virus inactivados con rayos ultravioletas.
ciones de la vacuna BCG se citan linfadenitis supuradas, Dosis total entre 14 y 20 inyecciones subcutneas, una o dos
infeciones diseminadas y osteomielitis. veces al da.

8. Fiebre amarilla. Dosis de 0,5 rnl. de virus atenuado b. DEV. Obtenida por cultivo en embrin de pato. Vi
(cepa 1 7D), por va subcutnea. Confiere inmunidad por rus inactivado por betapropiolactona. Dosis total 1 2 a 20
unos 1O aos aproximadamente. Puede provocar cuadros inyecciones subcutneas, una o dos veces al da.
alrgicos en personas sensibilizadas al huevo de gallina.
c. Clulas diploides humanas. La vacuna contra la
9. Adenovirsica. La vacuna que ha sido usada con rabia obtenida en estas clulas se estima que confiere mejor
mayor xito en reclutas en EEUU, contiene adenovirus de proteccin que las anteriores, est exenta de reacciones se
los tipos 4 y 7 naturalmente avirulentos, razn por la cual no cundarias, es inocua y se aplica en solo 5 dosis de inyeccio
se los inactiva. nes subcutneas con intervalo de 3 a 5 das. Contiene virus
inactivado con betapropiolactona o trifosfato.
lO. Viruela. Contiene virus atenuados de Vacunavirus,
obtenidos de la linfa cutnea de terneras inoculadas o por 16. Influenza. Obtenida del lquido alantoide del em
cultivo en embrin de pollo. Se aplica por escarificacin brin de pollo, contiene virus muertos. Aplicacin en dos
drmica. La primera aplicacin se acostumbraba a suminis dosis, inyecciones subcutneas separadas por 6 a 8 semanas;
trar a los 6 meses de vida y luego cada 1 O aos, salvo caso inmunidad por tmo a dos aos. Se recomienda su uso para
de epidemias. Como a partir del ao 1977 la viruela ha sido personas de edad avanzada o con enfermedades crnicas
erradicada del mundo, actualmente no es ya aconsejable cardiovasculares. Puede dar reacciones en personas alrgicas
utilizarla. al huevo de gallina.

11. Coqueluche. Contiene una emulsin de bacilos de Las vacunas antigripales deben ser anualmente contro
la especie Bordetella pertussis inactivados. Forma parte ladas' para decidir el tipo de virus que debe usarse en su
integrante de la vacuna pentavalente. No existe en forma preparacin, el que debe concordar con el tipo que presenta
monovalente, ya que no se acostumbra usar la vacuna anti el virus circulante en la poblacin. No se recomienda utilizar
coqueluche en forma separada. la vacuna en menores de 13 aos.

12. Tfica (tifoidea). Vacuna que contiene bacilos Sal 17. Meningocccica. Utiliza la fraccin del microorga
monella typhi inactivados, a veces combinados con Salmo nismo constituida por el polisacrido capsular purificado;
nella paratyphi A y B (TAB). Se administran 2 a 3 inyeccio- solo hay buenas vacunas para los grupos A, B, Y y W 135.

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Inmunizaciones - 81

ntervalos La de tipo C no protege a menores de 2 aos, aunque hay 30. Encefalitis j aponesa. Contiene virus inactivados.
, aos. La quienes recomiendan en nios menores de esta edad aplicar
por va cualquier tipo de vacuna anti-meningocccica pero con la 31. Encefalitis oriental, occidental y rusa. Contienen
En la ac condicin de que hagan refuerzos. virus muertos.
mas: una 18. Pentavalente (Difteria, ttanos, tos convulsa,
:a que es hepatitis B y Hib.). Contiene 5 agentes, toxoides tetnico y 32. Rotavirus. Hay dos vacunas disponibles. Una
typhi que diftrico, bacilos de coqueluchC (Bordetella pertussis), poli humana monovalente G l , P(8) y una humana-bovina penta
tal forma sacrido de membrana de Haemophilus influenzae tipo b y valente G l , G2, G3, G4, P(8). Las dos vacunas son efectivas
1 el endo HBsAg recombinado. Se administra en inyecciones tres en casos de diarrea t,>Tave por rotavirus, aunque presentan
:n contac dosis separadas 2 meses una de otra. Las complicaciones algunas diferencias segn la gravedad de la diarrea. Son
)S ltimas debidas principalmente al antgeno coqueluche son de tipo vacunas a virus atenuado. Se aplica en 3 dosis a pnrtir de las
neuroptico (encefalopatas, convulsiones, espasmos o 6 semanas de vida. Se recomienda a los 2, 4, y 6 meses de
sndrome de Rey). Estas complicaciones se presentan una edad para la pentavalente y a los 2 y 4 meses de edad para la
Yersinia vez cada 2.000.000 de vacunados. Vacunas purificadas ac monovalente. La edad mxima para administrar estas vacu
:ramuscu tuales han bajado este porcentaje de reacciones de intoleran nas es de 32 semanas.. Ambas vacunas tienen riesgo mnimo
l refuerzo cia. de producir invaginacin intestinal.
las perso- 19. DT (Vacuna doble). Contiene toxoide tetnico en
1 antigeno igual concentracin que la pentavalente y toxoide diftrico 33. Virus del papiloma humano, HPV. Se trata de
3 aos. con una concentracin reducida al 20% de la pentavalente . vacunas profilcticas que previenen infecciones por los ge
Es recomendada para el uso en nios desde los 4 a 6 aos, notipos de HPV asociados con mayor frecuencia al cncer
cholerae con refuerzo despus de l O aos si es necesario. cervicouterino. Existen comercialmente dos vacunas, una
dosis de bivalente, con los genotipos 16 y 18 y una tetravalente con
rzos cada 20. Triple viral (anti-Sarampin, rubola y parotidi los genotipos 6, l l , 16 y 18. los genotipos 16 y 18 pertene
s vacuna tis). Se administra en una sola inyeccin subcutnea alrede cen a un grupo de por lo menos 13 HPV que tienen un alto
rnicas o dor de los 12 meses. La proteccin puede durar toda la vida, riesgo de formar canceres ano-genitales y se asocian con
nacin de pero es recomendable hacer refuerzos en las epidemias. No cerca del 70% de los cnceres cervicouterinos. Los genoti
la entero pos 6 y l l son de bajo riesgo oncognico, pero se asocian
conviene administrar esta vacuna durante los procesos febri
crimenta- con el 90% de las vemigas genitales. La vacunas son part
5% de los les, en el embarazo, cuando hay depresin de anticuerpos, ni culas purificadas de la cpside del HPV, obtenidas mediante
en personas sensibles a la protena del huevo de gallina; tecnologa de ADN recombinante. La serie de inmunizacio
tampoco debe administrarse junto con las garnmaglobulinas nes debe completarse antes del inicio de la actividad sexual.
irrbicas: y en caso de que stas hayan sido inyectadas, debe esperarse Para la prevencin del cncer cervicouterino, se recomienda
un mnimo de 3 meses para aplicar esta vacuna. vacunar a nias adolescentes entre 9 y 13 aos de edad, en
l de ratn tres dosis para ambaS vacunas.
avioletas. 21. Tifus exantemtico. Se aplican dos dosis de vacu
una o dos nas separadas por 4 a 6 semanas de intervalo, con refuerzos Control de las vacunas. Todas las vacunas deben pasar
cada 6 a 12 meses. por varias pruebas de control de la calidad antes de ser auto
rizada su expedicin al pblico: ( 1) antigenicidad estandari
pato. Vi zada; (2) ausencia de reacciones secundarias cuando se la
22. Hepatitis B. Se utiliza la vacuna con ADN recom
l 12 a 20 aplica; (3) dosificacin de potencia; (4) ausencia de conta
binante, obtenida en levaduras que contienen antgenos de la
minacin por bacterias, virus u hongos; (5) ausencia de fac
superficie del virus de la hepatitis B. Est incluida en la
tores txicos y (6) determinacin de la dosis, va de adminis
vacuna pentavalente.
tracin y refuerzos necesarios.
contra la
ere mejor 23. Neumocccica. Vacuna polivalente que contiene 23
;iones se Contraindicaciones generales de toda vacunacmn.
serotipos de Streptococcus pneumoniae, preparada con ant
inyeccio Son contraindicaciones de vacunacin los procesos infeccio
geno polisacrido capsular. Dosis 0,5 ml. por va subcutnea
iene virus sos de cualquier etiologa, corticoterapia, medicacin inmu
o intramuscular; confiere inmunidad por 4 a 5 aos.
nosupresiva, trastornos nerviosos evolutivos, hipersensibili
dad a los componentes de la vacuna corno las protenas del
24. Haemophilus injluenzae tipo b (Hib). Contiene huevo y las del tejido nervioso, el embarazo (vacunas terat
e del em esta vacuna un polisacrido capsular purificado de la bacte genas) o depresin inmunolgica de causa variable. Un es
)n en dos na. Se la incluye en la vacuna pentavalente. pacio de tiempo ms largo entre las dosis de las vacunas no
semanas;
disminuye la eficacia inmunolgica.
uso para 25. Carbunco. Contiene bacterias muertas de Bacillus
crnicas
: alrgicas
anthracis. SUEROS

26. Tularemia. Contiene microorganismos atenuados Los sueros usados en el tratamiento de las enfermeda
de Francisella tularensis. des txicas o infecciosas, son generalmente de procedencia
te contro
.rse en su animal y se los obtiene mediante inyecciones repetidas de la
27. Fiebre Q. Contiene microorganismos muertos de sustancia contra la cual se quiere obtener anticuerpos. Las
presenta
da utilizar
Coxiella burnetti. sustancias inyectadas son generalmente toxoides o tambin
microorganismos (o fracciones de los mismos). En vez de
28. Varicela-wster. (Hay de 2 tipos) Una contiene los animales puede usarse . el humano para obtener estos
virus atenuados y otra virus muertos. anticuerpos, los que son de mejor calidad y eficacia en rela
1icroorga-
cin a los de procedencia animal. Los sueros preparados en
1urificado; equinos pueden presentar cuadros de choque anafilcticO; un
y W 135. 29. Hepatitis A. Contiene virus inactivados.

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82 - Inmunidad

caso en 1 0.000 aplicaciones o de enfermedad del suero ob no tiene efecto si la exposicin data ms de 6 das. No ofre
servada en el 1 5 a 20% de las aplicaciones. A partir de los ce proteccin contra la hepatitis B. La dosis es de 0,5 ml
sueros se pueden extraer las inmunoglobulinas-anticuerpos, para individuos con menos de 25 kilos, 1 mi. para indivi
las que al ser inyectadas parenteralmente confieren una in duos de 25-50 kg y 2 mi para individuos de ms de 50 kg,
munidad inmediata pasiva, poco duradera contra enfermeda aproximadamente 0,02 mi por kilo de peso.
des txicas e infecciosas. Entre los sueros de mayor uso
mdico se tienen: 2. GSI para hepatitis B. Se administra en la dosis de
0,06 ml/kg, antes que transcurran 7 das de la exposicin al
1. Suero antitetnico. Existen los tipos equino y huma contagio.
no: ( l ) El suero de tipo equino se prepara en caballos por
inyeccin del toxoide tetnico. La unidad de potencia nor Control de los sueros. En los sueros se debe controlar:
teamericana del suero equivale a 2 unidades internacionales. ( 1 ) la potencia mediante procedimientos in vivo e in vitro;
Para el tratamiento se aplica 50.000/1 00.000 U[ por va (2) la esterilidad o ausencia de contaminacin por bacterias
intramuscular. Para prevencin 5.000 a 1 0.000 U1. (2) El y hongos; (3) la ausencia de factores txicos y (4) debe de
tipo humano (hi pertet). Su potencia teraputica equivale a terminarse la dosis y las vas de inyeccin.
1 0 veces la del suero equino. Para el tratamiento se usa la
dosis de 3.000/1 0.000 U! y para la profilaxis 500 U! son Accidentes del suero. La aplicacin de suero heterlo
suficientes. go equino puede ocasionar el choque anafilctico con la
frecuencia de un caso cada 10.000 inyectados, el fenmeno
2. Sueros antiofidicos. Preparados por medio de inyec de Arthus, mostrando lesiones en el sitio de la aplicacin del
ciones de venenos de ofidios a equinos. En Amrica del Sur suero y la enfermedad del suero acelerada o tarda. Los ries
se disponen de 4 tipos de sueros anti-ofidicos, los que co gos que ocurren en la aplicacin del suero de tipo humano se
rresponden a los 4 tipos de venenos producidos por los refieren principalmente a las infecciones que pueden ser
gneros de serpientes Crotalus, Bothrops, Lachesis y Micru transmitidas por va transfusional, entre las que se destacan
rus. [?entro de cada gnero los venenos son antignicamente las infecciones por el VIH y por e! virus de la hepatitis B.
similares, por lo que la antitoxina preparada contra uno de
ellos sirve para tratar las mordeduras de todas las especies Aplicacin conjunta de sueros y vacunas. Como los
de ese gnero. Los sueros anti-ofidicos utilizados en nuestro sueros confieren imnunidad pasiva de corta duracin debido
continente son: ( l ) Suero anti-bottpico utilizado en las al escaso tiempo de vida de la IgG, es necesario estimular
mordeduras de las serp,ientes del gnero Bothrops. La canti mediante las vacunas a la inmunidad activa capaz de iniciar
dad de veneno inyectada puede llegar a unos 300 mg de la produccin de los anticuerpos propios, inmunidad activa
veneno seco en los casos graves. (2) Suero anti-crotlico, que ser ms duradera. La aplicacin de sueros y vacunas se
se utiliza contra los envenenamientos por mordeduras de puede realizar inyectando previamente el suero en un deter
Crotalus (serpiente cascabel). En los casos graves la ser minado lugar del organismo y la vacufla en otro sitio poco
piente inyecta l 50 mg de veneno seco. (3) Suero anti tiempo despus. Los anticuerpos estimulados por la vacuna,
elapdico, se usa en accidentes debidos al gnero Micrurus irn suplantando los inyectados.
o corales. (4) Suero anti-laqusico usado en las mordeduras
INMUNOPOTENCIACIN
de Lachesis. (5) Suero anti-ofdico polivalente, que contie
ne partes iguales de los sueros anti-botrpico y anti
crotlico.
Se denomina inmunopotenciacin en inmunologa
cuando se produce la intensificacin de la respuesta inmu
3. Suero antirrbico. Es de tipo equino; se administra nolgica, la que puede estar aumentada en cuanto a veloci
a razn de 40 UVkg. El 50% del suero se utiliza para infil dad, intensidad y durabilidad; los agentes que son capaces
trar la zona de la herida y el resto por va intramuscular.
de producir inmunopotenciacin pueden ser en primer trmi
Existe adems la inmunoglobulina humana con anticue1pos
no inespecficos como por ejemplo: ( 1 ) las emulsiones de
antirrbicos que se utiliza en la dosis de 20 UVkg, por va
agua y aceite, ms ciertos compuestos orgnicos como el
intramuscular, su uso est indicado en las mordeduras gra
adyuvante de Freund de tipo completo, que contiene vaseli
ves, mltiples, de animales silvestres y en todos los casos en
na, Tween 80 y micobacterias muertas o el de tipo incom
que se calcula que puede existir un perodo de corto incuba pleto que carece de las rnicobacterias; (2) ciertos compues
cin para la ,enfermedad. tos inorgnicos tales como las sales de sulfato de aluminio
y potasio, el hidrxido de aluminio y e! fosfato de calcio; (3)
4. Suero anti-botulnico. Preparado contra las toxinas los polinucletidos sintticos entre los que se destacan los
A-B-E. Se administra por va endovenosa o intramuscular. homorribopolmeros de doble cadena hbrida, formada por
cido poliadenlico y cido poliuridlico (Poli A-U), este
5. Suero antidiftrico. Se emplea en la dosis de 20.000 potenciador acta sobre las clulas T, las clulas auxiliares
a 1 20.000 UI por va intramuscular, segn !a gravedad del que procesan el antgeno y quizs tambin sobre las clulas
caso. B formadoras de anticuerpos; (4) las hormonas, nucleti
dos cclicos, la prostaglandina y ciertos medicamentos
6. Otros sueros. Son de menos uso en la prctica los como los antiinflamatorios no esteroides; (5) las bacterias
sueros anti-arcnidos, los sueros anti-escorpinidos y los y productos derivados de las mismas entre los que se destaca
sueros anti-centpedos. la BCG, que ha demostrado aumentar la respuesta antitumo
ral contra ciertos tipos de cncer, las endotoxinas bacteria
GLOBULINAS SillCAS HUMANAS INMUNES (GSI) nas de los bacilos Gram positivos que estimul.an principal
mente las clulas B, pero que actan tambin sobre las clu
las T y los macrfagos; (6) las linfoquinas son productos de
l . GSI para proteccin de hepatitis A. Protege del 80 linfocitos y otras clulas, que regulan la respuesta y pueden
al 90% de las personas cuando se administra precozmente;

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Inmunizaciones - 83

No ofre aumentarla; (7) las interleucinas o interleuquinas que son tiendo bastante bien la temperatura de la ebullicin del agua
le 0,5 mi factores activantes producidos por los linfocitos y los
macrfagos, la IL-1 que es un factor activante de los linfoci y la del autoclave a 126 C.
ra indivi
6. Formacin de toxoide o anatoxina. Mediante la
de 50 kg, tos, producida por macrfagos, estimula el desaITolJo de las
clulas T y la IL-2 que es una protena sintetizada por los
linfocitos T en respuesta a los estmulos antignicos y mi accin del formol, las exotoxinas pierden su poder txico, y
1 dosis de tognicos y (8) los interferones. se transforman en toxoides o anatoxinas. Las endotoxinas no
se modifican por la accin del formol, no siendo transforma
osicin al das en toxoides.
TOXINAS Y ANTITOXINAS
7. Poder inmungeno. Tanto la exotoxina como el
controlar: En muchos microorganismos productores de enferme
dades, los trastornos que ellos provocan durante el desarro toxoide tienen un poder inmungeno muy elevado, indu
: in vitro; ciendo la formacin de anticuerpos especficos, las antitoxi
bacterias llo de la accin patgena, se deben principalmente a la ac
cin de sustancias txicas, productos que se han clasificado nas. Las endotoxinas poseen muy escaso poder inmungeno.
debe de-
8. Empleo de las antitoxinas. Se utilizan las antitoxi
en exotoxinas y endotoxinas, entendiendo que las exotoxi
nas son segregadas al medio externo luego de su desarrollo
intracelular, en cambio las endotoxinas necesitan que se nas o sueros antitxicos para neutral izar las exotoxinas. Las
heterlo endotoxinas no pueden ser neutralizadas por un mecanismo
produzca la lisis bacteriana para poder liberarse. Esto no
:o con la similar.
siempre es cierto, ya que existen excepciones como es el
fenmeno
caso de la exotoxina tetnica la que para su liberacin nece
:acin del
sita tambin de la lisis. 9. Tipo de bacterias. Las endotoxinas son producidas
Los ries por bacilos Gram negativos y las exotoxinas por bacterias
umano se tanto Gram negativas como Gram positivas.
1eden ser Las antitoxinas son anticuerpos que tienen la capacidad
destacan de neutralizar las toxinas, sean stas bacterianas o de cual
:itis B. quier otro origen. Los microorganismos de importancia en CARACTERISTICAS DE ALGUNAS EXOTOXINAS
medicina humana que liberan exotoxinas son: Clostridium
tetani, Clostr;dium botulinum, Shigella dysenteriae, Coryne 1 . Difteria. Es producida por una raza lisognica de
Como los
bacterium diphteriae, Staphylococcus aureus y varias espe Co,ynehacterium diphteriae; su peso molecular es de
'.m debido
cies de C/ostridium agentes de gangrena gaseosa. Otras 62.000 a 72.000 Da. Para su mejor produccin necesita de
estimular
intoxicaciones que puede sufrir el humano son las motivadas hierro. Su accin txica principal se ejerce sobre el corazn,
de iniciar
por venenos de serpientes y artrpodos. sistema nervioso central e hgado y ms raramente sobre
lad activa
acunas se otros rganos.
CARACTERSTICAS DE LAS ENDO Y EXOTOXJ
2. '.Tetnica. Es una protena producida por Clostridium
un deter
iitio poco NAS
a vacuna, tetani peso molecular 150.000 Da, necesita ciertas sustan
l. Modo de liberacin. Las exotoxinas son habitual cias para su produccin, tambin necesita de hierro para su
mente segregadas por las bacterias y las cndotoxinas co produccin. Su toxicidad es muy elevada. La toxina es tam
rrientemente se liberan mediante el mecanismo de la lisis, bin llamada tetanoespasmina, acta sobre el sistema ner
aunque existen algunas excepciones. vioso produciendo espasmos y contracturas musculares.

2. Naturaleza qumica. Las exotoxinas son de natura 3. Botulnica. Existen 8 tipos de toxinas botulnicas: A,
nunologa
sta inmu
a veloci leza proteica, en cambio las endotoxinas son lipopolisacri B, Cl, C2, D, E, F y G, siendo el humano sensible a los
:1 capaces dos, en donde la fraccin polisacrida tiene una ubicacin tipos A, B, E y F, las aves y diversos mamferos a los tipos
ms externa en la bacteria que corresponde al antgeno O y C y D. La molcula original est compuesta de neurotoxina
ner trmi
dones de otra fraccin ms interna, el llamado lpido A, que es asiento y hemaglutinina, con peso molecular de 900.000 Da y relati
de la toxicidad. va baja toxicidad, que con la accin de las enzimas activado
1 como el
ras como la tripsina se descompone en compuestos polipp
ne vaseli
!O incom 3. Especificidad. Al ser inyectadas las endotoxinas a tidos ms pequeos, que son mucho ms txicos. Las toxi
:ompues los animales de expelimentacin, producen una serie de nas de los tipos A, B y C tienen un poder txico muy eleva
aluminio fenmenos reaccionales que son muy semej antes para todas do.
;alcio; (3) las exotoxinas de las bacterias Grarn negativas, vale decir,
stacan los son alteraciones inespecficas que no permiten individuali 4. Toxina de C/ostridium perfringens. La toxina alpha
mada por zar una bacteria determinada. Las exotoxinas, en cambio, se de este microorganismo es una fosfolipasa que tiene accin
,-U), este fijan en forma selectiva sobre ciertos rganos o tejidos sen sobre los lpidos de las membranas celulares, provocando
auxiliares sibles, por lo que las reacciones que determinan son espec necrosis celular, hemlisis y toxcmia.
as clulas ficas segn sea el tipo de bacteria que la produce.
nucleti S. Toxina letal de Bacillus anthracis. Est compuesta
camentos 4. Toxicidad. El poder txico-letal de las exotoxinas es de tres fracciones: I (factor edematgeno), II (antgeno pro
bacterias muy elevado, el que se calcula entre 103 y l 0-9 mg/kg de tector) y III (factor letal), que actan sinrgicamente, dando
se destaca peso para las diferentes clases de las mismas, siendo, en aumento a la permeabilidad vascular, provocando edemas,
antitumo cambio, muy baj o para las endotoxinas, entre 10 1 y 103 mg/ hemorragias, trombosis, cuadro txico y fallo circulatorio.
bacteria kg de peso.
principal 6. Enterotoxina de Shigella dysenteriae. Provoca
las clu- prdida de lquidos a nivel intestinal, con diarrea y produce
1ductos de 5. Sensibilidad al calor. Las exotoxinas son termolbi alteraciones del endotelio vascular cerebral ocasionando
y pueden les y las endotoxinas son habitualmente termoestables, resis- trastornos neurolgicos.

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84 Inmunidad

7. Enterotoxina de C/ostridium difficile. Es citotxica, 4. Trombocitopenia. Es motivada por las endotoxinas


produciendo cuadros de colitis con necrosis y formacin de se produce el agregamiento y la lisis de las plaquetas, con la
seudomembranas en el colon y ocasionando diarreas con liberacin de sustancias que actan sobre los vasos sangu
prdida de lquidos y electrolitos. neos (quininas).

8. Enterotoxina de Eschericltia co/i, Peso molecular 5. Vasoconstriccin. Afecta a las vnulas perifricas,
1 02.000 Da, termolbil, su porcin activa tiene peso mole es motivada por las quininas, puede ocasionar un cuadro de
cular 20.000 Da, ocasiona gastroenteritis con fuerte diarrea, shock, coagulacin intravascular, diarrea sanguinolenta y
deshidratacin y desequilibrio electroltico. microembolias.

9. Enterotoxina de Staphylococcus aureus. Produce Produccin de toxinas bacterianas in vitro. Para la


cuadros de intoxicacin alimenticia con nuseas, vmitos y produccin de toxinas bacterianas in vitro se escoge la raza
diarreas. del microorganismo con mayor propiedad toxignica dentro
de la especie bacteriana seleccionada. Se la siembra en un
10. Enterotoxina de Vibrio cholerae. Es tennolbil, medio de cultivo lquido adecuado para la produccin de
peso molecular 82.000 Da, determina gran prdida de agua y toxina. La germinacin debe durar el tiempo necesario para
electrlitos en el intestino por la produccin de diarrea acuo que se obtenga la mxima produccin de toxina. Se procede
sa. posteriormente a la filtracin del lquido cultivado con buj
as clarificantes y luego esterilizantes, separando de esta
11. Toxina de Pseudomonas aeruginosa. Es una pro manera los cuerpos bacterianos del medio de cultivo. La
tena termolbil que inhibe la sntesis proteica, produciendo extraccin final de la toxina del medio de cultivo, se hace en
necrosis celulares, alteraciones hepticas y tiene accin letal base a procedimientos de precipitacin fraccionada, filtra-
sobre los animales de experimentacin. La toxina del bacilo cin o ultracentrifugacin.
piocinico posee accin similar a la toxina diftrica.
Produccin de antitoxinas para uso mdico. Se utili
12. Toxina de Bordetella pertussis. Produce alteracin za el toxoide contra el cual se desea preparar la antitoxina.
de la funcin ciliar del epitelio respiratorio, determinando Se inocula dicho toxoide generalmente a equinos, en canti
cuadros patolgicos por dicha causa. dades pequeas, al comienzo, que se van aumentando de
volumen progresivamente en las inyecciones sucesivas pos
13. Hemolisinas. Son producidas por diversas especies
teriores. Se extrae la sangre del animal utilizado, cuando la
titulacin de una muestra de prueba, seala que las antitoxi
bacterianas, poseen accin sobre eritrocitos de diversos
animales; son elaboradas por Staphylococcus aureus, Strep nas han llegado a un nivel ptimo.
tococcus pyogenes (estreptolisinas O y S) y Clostridium
pe,jringens (toxinas alfa y beta). En el suero o plasma estn presentes los anticuerpos
antitxicos especficos para la toxina inyectada. Se precipita
14. Leucocidinas. Son toxinas que destruyen fagocitos,
el suero o el plasma con sulfato de amonio para obtener las
globulinas de la sangre y entre ellas las inmunoglobulinas en
generalmente se las observan no muy diferenciadas de las
las que se encuentran !os anticuerpos. Se separa el precipita
hemolisinas; estn presentes en Streptococcus pyogenes,
do por filtracin; este precipitado se disuelve en solucin
Staphylococcus aureus, Clostridium aedematiens y Clostri
fisiolgica y luego se lo purifica extrayndole mediante
dium septicum. dilisis las sales indeseables, por ltimo se dosifica su poder
15. Necrotoxinas. Producen lesiones citotxicas en
antitxico para su uso mdico.
diversos tipos de clulas de los tejidos: la necrotoxina de
Staphylococcus aureus, la exfoliatina producto del mismo DOSIFICACIN DE TOXINAS Y ANTITOXINAS
microorganismo que es responsable de necrlisis aguda o
sndrome de Lyell que ocasiona exfoliacin cutnea. Necro Principales mtodos in vivo.
sis tisulares pueden tambin deberse a la accin txica de
varios tipos de Clostridium. DLM (Dosis letal mnima). Es la menor cantidad de
toxina que produce la muerte del 100 % de los animales
ACCIN BIOLGICA DE LAS ENDOTOXINAS inoculados dentro de un plazo de tiempo conocido.

l. Fiebre. Es una de las reacciones ms constantes DLSO (Dosis letal 50 % ). Es igual que la anterior, pero
producida por las endotoxinas, que aparece dentro de los 1 5 con la diferencia que busca determinar el poder letal sobre el
a 2 0 minutos d e l a inoculacin d e las mismas a los animales 50 % de los animales inoculados.
de laboratorio y que persiste por unas tres horas (pirgeno
exgeno), pudiendo actuar tambin a travs de los macrfa Tambin se usan el L+ (lmite letal) y el L (lmite
gos y neutrfilos, los que al captar la endotoxina pueden inactivo).
secretar IL-1 .
Principales mtodos in vitro.
2. Leucopenia. La leucopenia inicial que producen las
endotoxinas, se debe a la adherencia de los leucocitos al lnmunoprecipitacin. Se realiza en medios lquidos,
endotelio capilar. es un procedimiento ideado por Ramn. Se basa en el fen
meno de zona, por el cual el antgeno y el ai1ticuerpo tienen
3. Leucocitosis. Sigue inmediatamente a la leucopenia la mxima floculacin en los tubos en que se encuentran en
inicial. proporciones equivalentes. Existen toxinas, las de efecto

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Inmunizaciones - 85

dotoxinas necrosante, que pueden titularse por la inhibicin de la desconoce si estn presentes en algunas de las dems inmu
as, con la necrosis de los cultivos de clulas sensibles. noglobulinas.
os sangu-
Toxoidc o anatoxina. A paitir de las exotoxinas bacte Usos de las antitoxinas. Se las utiliza para el trata
rianas pueden formarse toxoides o anatoxinas, ya sea es miento de las enfermedades debidas a factores txicos
erifricas, pontneamente por envejecimiento, o bien por la accin del (Difteria, ttanos, botulismo, emponzoamientos de ser
cuadro de formol, agregado en la proporcin del 4:1.000 y mantenido pientes, araas, escorpiones, entre otros).
nolenta y en estufa a 37 C durante un mes. Los toxoides son exotoxi
nas que han perdido casi totalmente su poder txico, pero Usos de la anatoxina o toxoide. Se utilizan los toxoi
que conservan su capacidad de estimular la formacin de des para inmunizar al humano y a los animales contra en
o. Para la anticuerpos. fennedades provocadas por microorganismos txicos, como
ge la raza es el caso del ttanos y de la difteria. Asimismo se utilizan
ica dentro Tipo de inmunoglobulina en la antitoxina. Los anti los toxoides de preferencia sobre las toxinas para la produc
bra en un cuerpos antitxicos pertenecen principalmente a la fraccin cin de sueros anti txicos en animales debido a su baja
uccin de IgG. Hay muy poca o nula pa1ticipacin de la IgM y se toxicidad.
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SECCIN 1 1 1

EL LABORATORIO DE
MICROBIOLOGA

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Captulo 8

LABORATORIO DE MICROBIOLOGA I :
EQUIPAMIENTO,
ESTERILIZACIN Y DESINFECCIN

La identificacin correcta de los microorganismos in nas. No es un aparato diseado para el trabajo de rutina
fecciosos causantes de enfermedades es fundamental, a fin microbiolgica y, en cierto modo, es ms usado en los traba
de poder establece un tratamiento correcto para la persona jos de investigacin y para aquellas pruebas que no resuelve
afectada. La habilidad de alcanzar esto depende de la rela el microscopio ptico. Una fuente de electrones reemplaza a
cin correcta entre los clnicos y los microbilogos. Los la luz visible del microscopio ptico, los que pueden enfo
clnicos deben saber de la complejidad de las pruebas, del carse mediante mandos elctricos o magnticos que actan
tiempo que demandan realizarlas, de la sensibilidad y la como tas lentes de los microscopios pticos. Los preparados
especificidad de las mismas. Los microbilogos, por otro para la observacin no tienen sustancias colorantes corrienM
lado deben estar al tanto del cuadro clnico de los pacientes tes, sino que estn impregnados por sales metlicas capaces
y deben estar capacitados para poder aconsejar a los clnicos de frenar el paso de los electrones y ofrecer as el contraste
sobre la interpretacin de los resultados. Un punto importan para la observacin microscpica, segn sea mayor o menor
te es la recoleccin de especmenes para la realizacin de las la precipitacin del metal sobre las estrncturas en estudio;
pruebas, los cuales deben corresponder a sitio donde proba tambin se puede usar la tincin negativa con cido fos
blemente puedan ser encontrados los microorganismos, fotngstico. Las imgenes obtenidas pueden ser ampliadas
antes de la medicacin con antimicrobianos y en la forma fotogrficamente conservando gran nitidez en los detalles.
correcta. Como equipo necesario para los estudios de microscopia
electrnica se tiene el micrtomo de cortes ultra finos. El
El laboratorio de microbiologa debe proveer informa microscopio electrnico de barrido realiza observaciones de
cin precisa sobre la presencia o ausencia de microorganis las superficies de los objetos dando imgenes tridimensiona
mos en las muestras recolectadas y de ser posible, proveer les.
informacin sobre la susceptibilidad de los microorganismos
aislados. Adems las pmebas laboratoriales son llevadas a Microscopio ptico. (FIGURA 8.1 Y 8.2) Consta de
cabo para detectar la respuesta inmune al agente infeccioso. varios sistemas: el de soporte, el de iluminacin, el ptico y
el de ajuste o enfoque. El sistema de soporte, est a su vez
El microbilogo tambin debe estar capacitado para formado de las si gu ientes partes: pie, brazo o vstago, revol
interpretar el mecanismo de transmisin de los distintos ver, platina y carro. El revolver es una pieza giratoria en la
microorganismos, a fin de poder aconsejar sobre las medidas que se enroscan las lentes objetivas, pudiendo contener 3 a 6
preventivas para cada uno. As mismo, este conocimiento le orificios. La platina es el sitio donde se coloca el carro,
faculta ser asesor de los sistemas de vigilancia y control de dispositivo que permite mediante tornillos de mando, efec
la transmisin de enfermedades infecciosas. tuar desplazamientos de atrs a delante y de derecha a iz
quierda. E! pie es la pai1e sobre la que asienta el microsco
A fin de llevar a cabo los anlisis microbiolgicos, el pio y el vstago sostiene todo el equipo de lentes al que se
une por un sistema de cremalleras. El sistema de ilumina
cin est constituido por las sigu ientes partes: fuente de luz,
laboratorio debe estar dotado con una serie de equipos, los
cuales deben encontrase en ptimas condiciones para asegu
rar la realizacin correctas de las pruebas de identificacin espejo, condensador, diafragma y filtros. Como fuente de
de los microorganismos. A continuacin se detallan algunos luz se puede utilizar la luz natural durante el da, sobre todo
de los principales equipos de laboratorio: para las observaciones a bajo aumento, pero es ms comn
el uso de la luz aitificial elctrica, cuya fuente luminosa
puede estar fuera del microscopio o bien incluida dentro de
MICROSCOPIOS
l. Los focos de luz utilizados pueden ser bombillas de filaM
mento incandescente, o bien, para el caso en que se quiera
Fundamentalmente existen dos tipos de microscopios: obtener mayor intensidad de luz y, a la vez longitudes de
ptico y electrnico. El microscopio ptico actual es usado ondas luminosas ms bajas y ricas en rayos ultravioletas
tanto en los trabajos de rutina como en los de investigacin, estn en uso las lmparas de mercurio y de halgeno. El
en todas las ramas de las ciencias biolgicas y su descubri espejo es cncavo por un lado y plano por el otro. Est colo
miento data del siglo XVTL El microscopio electrnico, en cado debajo del condensador en los microscopios sin fuente
cambio, inventado en el siglo XX. luminosa incluida, sirve para reflejar la luz de un foco lumi
noso externo cualquiera, dirigiendo los haces a travs del
Microscopio electrnico. (FIGURA 8.1) Con ms de condensador. Cuando el microscopio tiene fuente luminosa
1 00.000 aumentos y un ndice de resolucin de 0,001 m, incluida no necesita espejo.
permite hacer estudios de los virus y de las estructuras de los
microorganismos, siendo su empleo ms significativo en El condensador orienta y concentra los rayos lumino
virologa y en la investigacin de finas organelas bacteria- sos en un foco que atraviesa al objeto de observacin situa-

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90 - El laboratorio de microbiologa

MICROSCOPIO ELECTR NICO MICROSCOPIO PTICO

Fuente de electrones

Lmpara

Condensador
Condensador
electromagntico

Platina
Direccin
Soporte de l a de la luz
muestra
Objetivo
Objetivo
electromagntico Direccin
de los
electrones
Ampliacin
electromagn-tica Ocular

Visor binocular

Pantalla
fluorescente

o o

FIGURA 8.1: diagrama comparativo bsico de los microscopios electrnico y ptico.

do sobre la platina. Hay varios tipos de condensadores: el un nmero ( 1 , 2, 3, etc.), que debe coincidir con el nmero
condensador de luz directa o campo claro, el condensador de del objetivo que debe ser usado para la observacin mi
campo oscuro y el condensador de contraste de fase croscpica.
(FIGURA 8.2). El condensador de campo claro o de luz
directa hace que los rayos luminosos sigan una trayectoria El diafragma est ubicado por lo general en la base del
perpendicular a la lente y la atraviesen libremente. Con este condensador. El diafragma puede impedir el pasaje de los
condensador la observacin microscpica se basa en el efec haces luminosos (disminuir la iluminacin del objeto) cuan
to diferencial luz y sombra y en los colores del preparado. El do se lo cierra, con lo cual se mejora la visualizacin de
condensador de campo oscuro presenta en su interior un algunos detalles microscpicos. Generalmente los bajos
espejillo lineal circular en posicin oblicua, que refleja la aumentos necesitan que se obture el diafragma y los aumcn
luz recibida, hacindola pasar tangencialmente al emerger tos grandes (lente de inmersin) precisan que se lo abra
de la lenfe del condensador en su paite superior, atravesando completamente. Existe una extensa variedad de filtros para
de esta manera el campo microscpico desde la periferia del ser usados. As por ejemplo los filtros azules disminuyen la
mismo. El condensador posee en el centro de la lente supe intensidad del rojo. En los microscopios de inmunofluores
rior una plaqueta circular negra, opaca a los rayos de la luz, cencia se usan filtros excitadores que dejan pasar rayos ul
que impide el paso de los haces luminosos directos, pero que travioletas, filtros frenadores que impiden el pasaje de los
deja camino por una estrecha ranura circular perifrica, a los mismos, filtros acalricos y filtros atenuadores del rojo. Los
rayos tangenciales. Este condensador es usado generalmente portafiltros estn situados generalmente a continuacin de la
para la observacin de preparaciones frescas. Las clulas y fuente luminosa, en el condensador o, entre el objetivo y el
los microorganismos aparecen iluminados por la luz que ocular.
reflejan al recibir los haces luminosos tangenciales, mientras
que el fondo del preparado se observa oscuro. El condensa Sistema ptico. Comprende las lentes denominadas
dor de contraste de fase est fabricado para ofrecer un con lentes objetivas y lentes oculares, adems se incluyen los
traste mayor en las observaciones en fresco. Estn construi prismas que forman parte de los microscopios binoculares.
dos de tal manera que el paso de los haces luminosos, se
hace solamente a travs de una ranura circular. Deben ser
Los objetivos son las lentes enroscadas en el revolver,
usados nicamente con la lente objetiva de apertura lumino
llevan grabado un nmero que significa la magnitud de su
sa igual correspondiente, por lo cual cada condensador lleva
poder de amplificacin o magnificacin, precedido por un

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Equipamient, esterilizacin y desinfeccin -. 91

Oculares

Carro Revolver

Distancia focal y aumento de objetivos


5-Gn,m 0,5-1,5mm O,1 5-0,20 mm

Vstago
Objetivos

Campo oscuro Campo claro Contrilste de fase


Tomillo del

*
Condensador
or Platina

Condensc1dor Objetlvo i

Preparacin
Conexin -IIUl""'Jll
Lmpara

e1ct11ca
Pie Condensado T
TIpos de condensadores

FIGURA 8.2: Esquema detallado de las partes del microscopio ptico. A la derecha arriba, se observan los distintos
objetivos con sus respectivas distancias focales y abajo los tipos de condensadores y la trayectoria que siguen los
haces de luz y su incidencia sobre la preparacin.

signo (x) (xl O, x40, x lOO). La distancia de trabajo de estos de la imagen en el microscopio, se dispone de dos tornillos
objetivos con respecto al preparado que se observa con ruedas de cremallera, que permiten hacer movimierttos
(FIGURA 8.2), va disminuyendo a medida que aumenta la de ascenso y descenso del tubo ptico, el macromtrico
magnificacin: X I O (5-6 mm), x40 (0,5-1,5 mm) y x !OO ejecuta movimientos mayores o groseros y el micromtrico
(0,1 5-0,20 mm). El poder de resolucin de los objetivos (perilla de menor tamao) realiza movimientos finos o pe
x100 alcanza a 0,25 .un aproximadamente, vale decir, que queos. El condensador puede ser regulado en sus movi
esa es la menor distancia que puede existir entre dos puntos mientos de ascenso y descenso, as como en sus desplaza
cercanos, para que puedan ofrecer detalles separados a la mientos laterales y antero posteriores, todo lo cual se ejecuta
vista del observador. El objetivo xlOO debe usarse siempre con tornillos de mando, consi guindose el alineamiento y
con aceite de inmersin, el que debe limpiarse cuidadosa centrado de los rayos luminosos.
mente una vez terminado el uso. Esta lente lleva tambin
pintado un aro negro o rojo para su rpida identificacin. Se Ma1_1tfnimiento del microscopio ptico. 1. Limpieza
denominan objetivos acromticos aquellos que han elimina de las lentes ( objetivos, oculares, condensador), con papel
do la aberracin cromtica de las lentes de gran aumento de seda especial para este uso, todos los das. 2. Limpieza
(colores parsitos). Se conocen como objetivos plan acrom del resto del microscopio con un pao de algodn suave, en
ticos aquellos que adems de la correccin sealada arriba, forma semanal. 3. Colocar un poco de aceite liviano para
permiten un enfoque total del campo microscpico, sin la mquinas en todas las piezas mviles y cremalleras, una vez
distorsin causada por la esfericidad de la lente objetiva cada 3 meses. 4. Cubrir el microscopio con una bolsa de
mero interior, mostrando el campo microscpico parejamente tela, mientras no se Jo utilice. 5. En los climas hmedos y
l llll- enfocado tanto en el centro como en la periferia, Algunos calientes guardar el microscopio en una cmara cerrada, con
objetivos de gran aumento tienen incorporado un diafragma un foco de filamento de 40 W permanentemente encendido,
o iris, muy til para las observaciones en campo oscuro. con el objeto de calentar y secar el ambiente para impedir !a
;e del Sealemos por ltimo los objetivos de contraste de fase, que proliferacin de hongos sobre las lentes y los prismas.
le los tienen generalmente la abreviacin Ph (Phase) y un nmero
uan grabados (Phl, Ph2, Ph3, etc.), que deben ser usados con el
)n de AUTOCLAVE (FIGURA 8.3)
condensador de contraste de fase como se describi anterior
bajos
men
mente. Se lo utiliza para la esterilizacin de materiales de labo
abra ratorio, consta de las sigu ientes partes:
Los oculares son piezas que se deslizan libremente
para dentro del cuerpo del tubo situado en la parte superior del
en la microscopio, tienen grabado un nmero que significa su 1. Fuente de calor (a gas, querosn o elctrica).
,ores capacidad de magnificacin o aumento (x5, xlO, xl5). Para
>s ul averi guar el aumento o magnificacin en que se trabaja, 2. Cmara de esterilizacin cilndrica (caldera), en
le los basta con multiplicar el nmero del objetivo por el nmero cuyo fondo tiene un soporte, debajo del cual se carga Uf:,rua
, . Los del ocular, por ejemplo, objetivo x40 combinado con ocular hasta un determinado nivel. Sobre el soporte se dispone de
de la una canasta para acomodar los materiales que deben ser
> y el
x1O dan un aumento igual a 400. El aumento mximo para
microscopios pticos es de 1.200 (objetivo xlOO y ocular esterilizados.
x 12). El microscopio binocular tiene para la observacin dos
tubos con sus oculares correspondientes (el microscopio 3. Los aparatos de control generalmente se ubican en
:mdas monocular tiene un solo tubo). La visin binocular a partir la tapa que cie1rn la cmara de esterilizacin (vlvula de
n los de un solo objetivo se consigue mediante un juego de pris seguridad, vlvula de escape del vapor de agua, manmetro
es. mas. La mayor ventaj a del microscopio binocular es que y termmetro).
reduce !a fatiga durante el trabajo de microscopa.
)!ver, Manejo, Para la esterilizacin corriente a 1,5 atmsfe
de su Sistema de ajuste o enfoque. Para lograr la formacin ras de presin, 126 C, durante 30-35minutos, debe proce
x un derse de la siguiente manera: una vez colocada la cantidad

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92 - El laboratorio de microbiologa

Vlvula de
co,
Tennmetro sitan
y manmetro seguridad
Vlvula CEN
de
escape
centri

tos entrJ,
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Caldera ACC(:
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de calor cias d
Horno de esterilizac n. destrm
Autoclave
cos ut:l. .
i tnnin"
FIGURA 8.3: equipos utilizados para esterilizacin en los laboratorios de microbiologa. los obj. .

de agua necesaria en el fondo de la cmara, se carga la ca ESTUFA DE ESTERILIZACIN POR CALOR SECO
micro
nasta con los materiales que deben ser esterilizados, se cie (HORNOS) (FIGURA 8.3) para td
posible'
rra hermticamente la tapa dejando la vlvula de escape
abierta; se enciende la fuente de calor, controlando a partir Estas estufas tienen un regulador automtico de la tem herida
de entonces la salida de los gases. Cuando el chorro del peratura y un termmetro de control. Una esterilizacin ,
vapor de agua que sale por la vlvula de escape se vuelve completa se consigue manteniendo la temperatura a 180 C
continuo, se cierra la vlvula de escape y se controla en el durante una hora. El horno se utiliza para esterilizar objetos
manmetro el ascenso de la presin y en el termmetro el de destii
de vidrio. No deben esterilizarse recipientes con lquidos en
la temperatura. hornos.
E4
Al llegar a la presin a l,5 atmsferas se regula la fuen esporo
a
ESTUFAS DE CULTIVO
te de calor para mantenerla constante, contndose a partir de
entonces 30 a 35 minutos que se necesitan para tener una AGEN;
Se utilizan para el cultivo de microorganismos diversos.
esterilizacin completa. Despus de este tiempo se apaga la La temperatura es regulada automticamente segn el uso
fuente de ca!Or y se espera que se enfre y se reduzca la pre que se le da a la estufo de cultivo. Para bacteriologa mdica
sin a cifras normales. Antes de proceder a la apetiura de la se acostumbra regularla a 37 C para hcmoflagelados de
tapa, se abre la vlvula de escape del vapor de agua para importancia mdica a 25-26 C.
comprobar que no haya salida de gases.
EQUIPOS PARA ANAEROBIOS
Indicadores de esterilizacin. Se denominan indicado
res o testigos de esterilizacin: ( 1) ciertos compuestos qu
Se utilizan bombas de vaco para producir anaerobiosis
micos que cambian de color cuando son sometidos por algn
dentro de los recipientes que contienen los medios de culti
tiempo a una determinada temperatura, sirven para controlar
vos sembrados. Sin embargo, no es un elemento imprescin
si los niveles alcanzados por la esterilizacin son correctos y
diblc, ya que existen, desde hace bastante tiempo, jarras y
(2) esporas de bacterias muy resistentes, que incluidas de sobres hermticos capaces de producir vaco en su interior
ntro del proceso de la esterilizacin pueden ser posterior
mediante el uso de sustancias qumicas que al mezclarse
mente sembradas para comprobar si conservan su vitalidad,
consumen oxgeno atmosfrico (bicarbonato de sodio y
se utilizan Bacillus estearothermophilus para el control de la
esterilizacin en el autoclave y Bacillus subtilis variedad cido ctrico), en presencia de agua.
niger para el control de esterilizacin de la estufa seca.
Estas jarras se usan tambin para obtener atmsferas de

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Equipamiento, esterilizacin y desinfeccin - 93

C02 cuando se quieren aislar microorganismos que lo nece C por 10 minutos, pero se necesitan ms de dos horas, a
sitan (Brncel!a, Neisseria). esta temperatura, para conseguir la destruccin de toda for
ma de vida.
CENTRFUGAS
Con la aplicacin de calor hmedo en un autoclave, se
Sirven para los diversos mtodos de estudio, tales como requiere de l atmsfera de presin (medido por manmetro)
centrifugacin de lquidos orgnicos (orina, sangre, lquido a 121 C por 20 minutos, 1,5 atmsferas a 126 C por 10
cefalorraqudeo) y para tcnicas de concentracin de parsi minutos o 2 atmsferas a 134 C por 5 minutos para conse
tos en heces. Segn los usos a los que estn destinadas se guir una esterilizacin adecuada, para la mayora de los
tienen modelos diferentes que utilizan distintos tamaos de objetos. La regla fundamental de la carga del autoclave, es
tubos, con refrigeracin y con alta velocidad. preparar todos los paquetes de manera tal que presenten la
menor resistencia posible al paso del vapor de agua a travs
La lista de equipos necesarios en un laboratorio de de los mismos durante el proceso de esterilizacin. Los pa
microbiologa puede ser muy extensa, y debe adecuarse a las quetes con textiles, que constituyen el grupo ms dificil de
necesidades en cada caso. penetracin del vapor, deben ser colocados parados, con
poco contacto entre ellos, Se debe evitar comprimirlos, su
perponindolos en forma apretada, no sobrecargando el
ACCIN DE LOS AGENTES FSICOS Y QUMICOS
autoclave (se debe cargar la cmara al 70% de su capacidad
SOBRE LOS M ICROORGANISMOS real). En caso de esterilizar lquidos y medios de cultivo,
estos deben ser procesado en forma independiente. De
DEFINICIONES acuerdo al material a esterilizar, deben hacerse algunas co
rrecciones, a fin de conseguir la esterilidad total, los textiles
Esterilizacin, Es un trmino usado para significar la deben esterilizarse a 134 C por 15 minutos o a 121 C por
destruccin total de los microorganismos que hay en los 30 minutos, los lquidos y medios de cultivo a 121 C por 15
instrumentos o materiales usados en cualquier procedimien a 20 minutos.
to mdico-quirrgico.
Si las sustancias que deberan someterse a temperaturas
La desinfeccin es un procedimiento que utiliza sustan superiores a los 80 C se alteraran por dicho procedimiento,
cias denominadas desinfectantes, las que son capaces de existen tcnicas que usan temperaturas inferiores, las que
destruir los microorganismos que causan infecciones. El actan destruyendo la mayora de las bacterias, reduciendo
trmino es empleado para nombrar a los compuestos qumi el contenido bacteriano al mnimo. Entre dichos procedi
cos utilizados para la eliminacin de microorganismos de mientos se encuentra la pasteurizacin en la cual se somete
los objetos y superficies. a los productos alimenticios lquidos (leche, cerveza, jugos)
a 60-65 .e durante 30 minutos y luego se los enfra lenta
La antisepsia utiliza componentes que se conocen con mente. El calentamiento mata la mayora de los microorga
el nombre de antispticos, por su selectiva accin sobre los nismos, pero no elimina a los termfilos ni a las esporas
SECO microorganismos que motivan sepsis. Este trmino se utiliza bacterianas. Este procedimiento evita que se desnaturalicen
para los agentes qumicos empleados en la eliminacin de las protenas de estos alimentos. Otro procedimiento es la
posibles agentes patgenos de piel y mucosas, en caso de stassanizacin (pasteurizacin a temperatura ms alta) que
la tem heridas y traumas. emplea temperaturas superiores a 70 C durante un tiempo
izacin de 15 minutos o menos. El procedimiento de la tindali7..a
1so0 e Germicida o microbicida, se dice de una sustancia que cin o calentamiento intermitente entre 60-90 C, durante 30
objetos destruye los microorganismos pero no los esporos. minutos, en tres sesiones separadas por intervalos de varias
1idos en horas (12-24 hs), durante el cual se mantiene el material a
Esporicida es una materia que es capaz de destruir temperatura ambiente o a 37 C. Con esto se pennite que las
esporos microbianos. esporas bacterianas que hubieran resistido al calentamiento
vuelvan a germinar reproduciendo la forma vegetativa sensi
ble a una nueva aplicacin de calor.
AGENTES FSICOS
tversos.
1 el uso
Temperatura. La gran mayora de los microorganis El calor seco de los hornos de esterilizacin, es un
mdica mtodo muy eficaz, pero no se puede aplicar a textiles ni a
mos resisten muy poco tiempo temperaturas superiores a 60
ados de lquidos. Dependiendo del tipo de objetos a ser esterilizados,
C. Para destruir un determinado tipo de microorganismo, se
necesita menos tiempo a medida que la temperatura aplicada se pueden emplear 160 C por 120 minutos, 170 C por 90 a
es mayor. El tiempo necesario para destruir a un determina 60 minutos 180 C por 40 a 80 minutos, para conseguir
una esterilizacin adecuada. Los elementos a esterilizar
do microorganismo a una temperatura dada, se conoce como
tiempo trmico letal. Si bien muchos microorganismos tie deben estar libres de materia orgnica, grasa o aceite que
: robiosis nen un tiempo trmico letal parecido, es evidente que a ve pueden aislar a los microorganismos de la accin del calor.
de culti ces existen diferencias muy importantes entre los distintos El material a esterilizar debe estar seco, ya que la humedad
prescin microorganismos. El tiempo letal es considerablemente disminuye la temperatma efectiva, por la evaporacin del
Jarras y agua. No se debe abrir la puerta del horno, una vez iniciado
mayor para los microorganismos esporulados.
interior el proceso, porque reduce la temperatura interior de la estufa
1ezclarse y de los materiales que se encuentran adentro. Al definir el
Casi la totalidad de las formas vegetativas bacterianas, tiempo de esterilizacin se debe tener en cuenta tambin el
sodio y los virus, los protozoarios, los hongos y los helmintos mue tiempo que demora la estufa con los materiales en su inter
ren al cabo de 10 minutos de exposicin al vapor de agua o ior, en alcanzar la temperatura establecida. La carga de la
sumergidos en ella, a temperaturas entre 50-70 C. El proce estufa no debe ser superior al 80%. Si se van a esterilizar
,foras de so de esterilizacin es mucho ms eficaz si se calienta a 100

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94 - El laboratorio de microbiologa

vidrios, instrumentales, polvos y aceites se recomienda reali cambios genticos o mutacin, al igual qlle los UV. Como
zar el proceso a 160 C por 120 minutos. fuente de radiaciones gamma se usa el cobalto 60. En la
prctica se utilizan las radiaciones ionizantes para esterilizar cas
La incineracin es un procedimiento de la ms alta materiales que se deterioran por la accin del calor, como por
seguridad, pero solo puede ser aplicado en determinados son los catteres de uso endovenoso, las sondas uretrales, las ;:Jcd
casos cuando el objeto debe ser destruido totalmente. El jeringas desechables, las vlvulas cardacas, los antibiticos, .act
flameado usado para esterilizar el asa bacteriolgica destru las hormonas, las vitaminas.
ye la totalidad de los microorganismos contenidos en ella,
sin embargo, cuando se aplica este procedimiento a otros Ultrasonido. Las ondas sonoras muy altas, por encima tant
1
elementos o equipos como tubos o frascos, el mtodo es de 18.000 Hz, alteran las protenas, con lo que producen la de 1
relativamente til. muerte de los microorganismos. La accin Jeta! del ultraso ernb:%1
'j'i

nido sobre los microorganismos se debe al fenmeno de conc


'..i
Las bajas temperaturas no son nocivas para los mi cavitacin, que es la formacin de burbujas dentro del cito dor
croorganismos si se aplican en forma lenta y gradual, va plasma microbiano, que lo lleva a su desintegracin. Es un enci
riando 1 C cada uno o ms minutos. En cambio, procesos mecanismo til tambin para la obtencin de antgenos,
rpidos de congelacin y descongelacin suelen ser altamen
te letales para casi todos los microorganismos.
enzimas y otros componentes endocelulares.
nece
"
Filtros. Distintos tipos de filtros pueden ser usados para acci6
Desecacin. La desecacin de las bacterias produce la esterilizar gases o lquidos. Su accin se basa en el hecho de inef:i
muerte en fonna rpida, para la mayora de los microorga que las bacterias son detenidas cuando el tamao de los i1'
nismos. Neisseria gonorrhoeae resiste escasos 2 a 3 ninutos poros del filtro es ms estrecho que ellas. Los principales
fuera del cuerpo. Sin embargo Staphylococcus aureus es tipos de filtros son: Chamberland, formados por una mez ,puest
muy resistente y pueden sobrevivir varias horas sobre obje cla de caoln y cuarzo (porcelana no barnizada), Seitz, cons en q :i
tituidos por amianto prensado, Berkefeld, hechos con tierra 0
tos inanimados. Las formas esporuladas resisten por mucho la ac
tiempo a la desecacin. Debe tenerse presente que la liofili de infusorios calcinada, Acetato de celulosa, Nitrocelulosa.
zacin es un procedimiento de desecacin al vaco, a bajas Los filtros se obtienen en el comercio y poseen medidas de
temperaturas, que se utiliza para la conservacin de los mi poros variables, que pueden ir desde algunos micrmetros no so
croorganismos, los cuales, as conservados, pueden resistir hasta 5 nm. Con los filtros de porosidad suficientemente de la"
en forma casi indefinida por muchos afios. pequea, se puede conseguir esterilizar cualquier lquido o da
fluido, siendo un procedimiento usado para conseguir agua
Osmosis. La muerte bacteriana puede sobrevenir en microbiolgicamente potable. Si se utilizan filtros con el
soluciones hipe1tnicas por plasrnlisis o en soluciones tamao adecuado de los poros, se puede detener el pasaje de cierta
hipotnicas por plasmptisis. Se denominan bacterias algunos microorganismos y permitir el de otros, pudiendo
yen
osmfilas las que necesitan un medio hipertnico para su ser usada esta tcnica para aislar microorganismos unos de les, c',Ai!
desarrollo. Las bacterias marinas denominadas halfilas, otros. gonot,,
0
crecen en concentraciones elevadas de cloruro de sodio. S. resist
aureus tiene la habilidad de crecer en medios de cultivo que AGENTES QUMICOS. cacctl:'
contienen hasta 7,5% de NaCl. En la industria de alimentos, das, d:
para conseguir la conservacin de los mismos, se suelen Definiciones. Distintos compuestos qumicos actan en sensil:i
utilizar altas concentraciones de NaCl o de azcar. forma diferente, sobre los microorganismos, pudiendo pro qm(
ducirles la muerte o no. ')

Rayos ultravioletas (UV). Su longitud de onda abarca 7)


de 1 5 a 390 nm. Los UV de procedencia solar que pueden Sustancias microbicida. Producen en forma primaria o qumi:''> 1

atravesar efectivamente la atmsfera son de 287 a 390 nm. directa, la muerte microbiana. en so
La zona del espectro que tiene mayor poder bactericida se susta'
encuentra alrededor de 265 nm. Los UV producen perxidos Sustancias estticas (bacteriostticas en el caso de la lento
oxidantes dentro de los microorganismos, inhibiendo la bacterias). Actan sobre los microorganismos, deteniendo naria
sntesis del los cidos nuclicos. Los UV son rayos poco su desarrollo o crecimiento. En forma secundaria o indire '
di

penetrantes, de accin superficial, incapaces de atravesar cta, al no poder desarrollarse ni reproducirse, producen la e:
vidrios y su accin depende de la intensidad de la fuente muerte de los microorganismos. Debe
generadora y de la distancia a la cual se encuentra el objeto.
Adems de la accin oxidante, pueden producir alteraciones Factores que influyen en la accwn de los agentes
de las protenas. El resultado letal sobre los microorganis qumicos. Con los agentes qumicos difcilmente se pueda
mos se consigue mediante la aplicacin de dosis adecuadas hablar de esterilizacin, pues no se puede garantizar la eli
de radiacin. Si se emplean cantidades sub-letales de UV, minacin total de los microorganismos que podran encon
las bacterias sobreviven, pudiendo presentar mutaciones. En trarse en los distintos objetos. Muchos de ellos, como los
la prctica los UV se utilizan para la inactivacin de vacunas endoscopios, no pueden ser esterilizados sin que se destru
vricas o bacterianas, para desinfeccin de cabinas de siem yan, por lo que para lograr una adecuada desinfeccin y
bras de los laboratorios, de envasado de medicamentos, de eliminar as la gran mayora de los microorganismos poten
bancos de sangre, de cultivo de tejidos y de salas de ciruga. cialmente patgenos que pueda acarrear, deben tenerse en Ti
cuenta todas las recomendaciones. La desinfeccin va de la
Rayos X y radiaciones .gamma. Son sumamente pene mano con la esterilizacin y son los procedimientos bsicos
trantes, con accin ionizante. Si la dosis y .tiempo de exposi para evitar la transmisin de microorganismos en todos los
cin son Suficientes, tienen una definida accih letal sobre procedimientos relacionados con la salud humana. Los fac
casi los microorganismos, por inactivacin del genoma y de tores a tener en cuenta de los agente desinfectantes qumicos
las enzimas. En dosis sub-letales son capaces de inducir son los siguientes

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Equipamiento, esterilizacin y desinfeccin 95
Como
En la 1. Naturaleza qumica. No todas las sustancias qumi ciacin de los mismos, es decir cuanto ms fuerte sea un
erilizar cas tienen la misma accin sobre los microorganismos. As, cido o un lcalis, mayor es su poder microbicida. La ac
, como por ejemplo, los cidos orgnicos son menos letales que los cin microbicida de los cidos y bases inorgnicos es noto
les, las cidos inorgnicos a igual concentracin y algunas sales riamente ms eficaz que la de los . cidos y bases orgnicos.
iticos, b,actericidas actan ms rpidamente que otras. En algunos lcalis o bases, el in metlico tiene de por si
accin microbicida. Se usan por lo general cidos y lcalis
2. Concentracin. Constituye un factor muy impor inorgnicos en la limpieza y desinfeccin de la vidriera del
encima tante, en general se puede decir que a mayor concentracin laboratorio.
.1cen la de la sustancia bactericida, mayor es el efecto letal, sin
tltraso embargo, puede observarse en el caso del etanol, que las 2. Oxidantes. Entre los varios compuestos oxidantes,
eno de concentraciones de mayor poder bactericida oscilan alrede se encuentra el agua oxigenada, la cual es muy efectiva
el cito dor del 70%, decreciendo dicho efecto por debaj o y por pero de accin pasajera, ya que se desdobla por la accin de
Es un encima de dicha concentracin. las catalasas tisulares. El permanganato de potasio es uno
genos, de los desinfectantes oxidantes ms utilizados en heridas,
3. Tiempo de accin. Cualquier sustancia bacte1icida otros menos utilizados son los perxidos metlicos, perbo
necesita un mnimo de tiempo para ejercer su efecto, si la ratos y persulfatos. Entre los halgenos se encuentran el
os para accin es fugaz, an las sustancias de fuerte efecto letal son yodo, que se utiliza en solucin alcohlica al 10 % (tintura
,cho de ineficaces. de yodo) o combinado con detergentes o sustancias orgni
de los cas y el cloro empleado bajo las formas gaseosa o de solu
cipales 4. pH. La accin bactericida de un determinado com ciones de hipoclorito y cloraminas. Entre los desinfectantes
a mez puesto vara generalmente en relacin con el pH del medio oxidantes ms usados, para desinfeccin de las heridas,
cons- en que se encuentra. Existe casi siempre un pH ptimo para estn el agua oxigenada, el permanganato de potasio, la
1 tierra la accin de cada sustancia. tintura de yodo y la povidona yodada. Para la desinfeccin
ilulosa. de la piel en ciruga, suele ser preferida la tintura de yoo.
5. Temperatura. Generalmente las bajas temperaturas
idas de El cloro y sus derivados son muy utilizados en la desinfec
1metros no son favorables para la accin bactericida de la mayora cin del agua, de pisos, mesadas, camillas y diversas super
emente de las sustancias qumicas, casi todas actan mejor a medi ficies nosocomiales.
[Udo O
3. Sales minerales. Las sales microbicidas son las que
da que aumenta la temperatura.
ir agua
6. Especie bacteriana. Existen formas vegetativas de
con el tienen metales pesados, siendo las de mercurio y plata las
saje de ciertas especies bacterianas que son muy lbiles y se destru ms conocidas, que tienen eficacia microbicida hasta dosis
.diendo de una parte en un milln. El nitrato de plata, el argirol, el
yen muy rpidamente an con sustancias bactericidas dbi
1nos de les, como es el caso de Neisseria meningitidis y Neisseria protargol y el colargql (las tres ltimas son sales orgnicas),
tienen SU aplicacin en la prevencin de la conjuntivitis
gonorrhoeae; en cambio hay otros microorganismos que
resisten mucho ms como Staphylococcus aureus o Entero gonoccica del recin nacido.
coccus JGecalis. Dems est decir que las formas esporula
das, de por s muy resistentes, tienen tambin diferencias de Las sales de mercurio ms usadas en la desinfeccin de
tan en sensibilidad entre una especie y otra, para un mismo agente la piel son el rnercurocromo y el mertiolato.
lo pro- qumico.
Desinfectantes orgnicos,
7. Presencia de materia orgnica. Todos los agentes
naria o qumicos actan mejor contra los microorganismos si estn l . Alcoholes. El alcohol etlico es coagulante y des
en solucin acuosa. En cambio, si estn en presencia de hidratante, su mayor poder bactericida lo tiene entre el 60 y
sustancias orgnicas como sangre, plasma, material puru el 80%, en solucin acuosa. Otros alcoholes como el iso
o de la lento u otros lquidos orgnicos, su accin se ve extraordi proplico o el metlico son menos usados debido a su mayor
niendo nariamente disminuida. toxicidad.
indire-
1cen la Condiciones que debe reunir un buen desinfectante. 2. Fcnoles. El fenal es de accin coagulante, muy buen
Debe ser de espectro de accin amplio que incluya bacte microbicida en soluciones de 2-5 gil; como derivados del
rias, virus, hongos y protozoarios. Preferentemente de ac fenal, se tienen el hexaclorofeno con menor toxicidad y
1gentes cin microbicida, no esttico, de accin rpida en el menor causticidad y los cresoles que son derivados metilados y
pueda tiempo posible. Debe ser econmico, de bajo precio, ya que pueden usarse en la desinfeccin de la pieL En el grupo de
la eli la desinfeccin abarca siempre grandes superficies. No las biguanidinas derivadas de los fenoles se tienen sustan
encon debe sufrir alteracin con el tiempo, ni descomponerse, De cias muy activas, poco txicas, con accin rpida en segun
mo los preferencia debe ser soluble en agua y no txico para los dos, efecto residual prolongado. Entre estos compuestos se
destru tejidos humanos. De tensin superficial baja para que facili destaca la clorohexidina, que es muy usada en ciruga para
te la penetracin, no corrosivo e inodoro. el lavado de las manos.
:cin y
potcn
!rse en Tipos de desinfectantes: bsicamente pueden ser 3. Aldehdos. Los dos aldehdos ms usados son el
a de la orgnicos o inorgnicos: aldehdo frmico o fonnol y el aldehdo glutmico o gluta
Jsicos raldehido. El formol tiene accin coagulante sobre las pro
fos los Desinfectantes inorgnicos. tenas y se presenta en solucin acuosa al 40 % (formalina).
os fac- Se lo utiliza para desinfecciones en general en soluciones al
1micos 1. cidos y lcalis. El elevado poder bactericida de los 1O %. Es el compuesto orgnico ms utilizado para el em
cidos y lcalis inorgnicos es debido al gran nivel de <liso- balsamamiento de cadveres y para la conservacin y fija-

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96 El laboratorio de microbiologa

cin de piezas histolgicas. El glutaraldchdo en solucin al 2. Determinando la concentracin microbicida mnima


2 % es activo contra las bacterias, esporos, virus y la ma (CMM), mediante el procedimiento de diluciones, se inves
yora de los hongos, se lo utiliza para la desinfeccin de los tiga cual es la mnima concentracin del desinfectante que
equipos de endoscopa, guantes e instrumentos que no re posee accin bactericida, Para el estudio de esta accin
sisten la esterilizacin por el calor. microbicida, se somete una misma cantidad de microorga
nismos a la accin de cantidades variables del desinfectan
4. Colorantes. Son de muy poco uso como desinfec te, dejndoselo actuar durante 1O minutos, para luego sem
tantes. Segn su concentracin pueden actuar como estti brarlo en medios de cultivo adecuados, observar si existe o
cos o microbicidas. Las bacterias Gram positivas son ms no crecimiento bacteriano. La determinacin de la curva de
sensibles a su accin que las Gram negativas. Se utilizan mortalidad de los microorganismos sometidos a la accin
preferentemente agregados a los medios de cultivos para de los desinfectantes, mediante procedimientos de recuento
evitar el crecimiento de microorganismos contaminantes. de bacterias viables en cultivos practicados a intervalos de
Los colorantes de mayor uso son: azul de metileno, violeta tiempo conocidos, ofrece una visin ms dinmica y com
de genciana, verde brillante y verde de malaquita. prensiva del proceso de la muerte bacteriana.

5. Detergentes. Actan sobre la tensin superficial 3. Se puede comparar el CMM de un desinfectante con
disminuyndola en los lquidos en los que se disuelven. el CMM del fenol, procedimiento que se conoce con el
Estos detergentes llamados tambin tensoactivos, poseen un nombre de coeficiente fenlico. Si el CMM de una sustan
grupo hidrfilo y otro lipfilo, que es confieren la propie cia es de 1/200 y el CMM del fenol para el mismo microor
dad de ser reductores de la tensin superficial. Segn su ganismo es de 1/50, el coeficiente fenlico es de 200/50, lo
carga elctrica, los detergentes pueden ser aninicos o ca que es igual a 4.
tinicos, siendo los catinicos, derivados del amonio cua
ternario, los que tienen mayor poder bactericida. Por ltimo hay que tener en cuenta el hecho de que los
microorganismos pueden hacer resistencia a los desinfec
6. Desinfectantes gaseosoS. Se usan como desinfec tantes mediante cambios fenotpicos o bien por mutacin
tantes gaseosos el formol, el xido de etileno, la beta genotpica.
propiolactona y los glicoles. En la prctica, sin embargo, el
mejor procedimiento para desinfectar ambientes es el que Mecanismo de accin de los desinfectantes. Los
utiliza rayos ultravioletas. Los gases pueden ser utilizados agentes qumicos pueden actuar sobre los microorganismos
cuando no se cuenta con las instalaciones correspondientes mediante diversos mecanismos:
J
de los rayos ultravioletas sealados. '- un cua
l . Alterando la permeabilidad y las funciones de la ' :/:_-- 'ftlego
Determinacin del poder antibacteriano de los de pared celular y de la mer,:ib,rana, provocando su ruptura, de la '
sinfectantes. Los procedimientos que se pueden utilizar como los detergentes y los derivados fenlicos. veces el
para valorar el poder de los desinfectantes son: _to en
-s-:-_:,<mkroo ,
2. Actuando sobre los grupos proteicos como, por
1 . Mediante la determinacin de la concentracin de ejemplo, los metales pesados, sobre los grupos sulfhidrilo. ";- ,.}{gnos -is
,',- gnst(
:_i,?log :-!
inhibicin mnima (CIM), diluyendo el desinfectante hasta
hallar cual es la concentracin nnirna que inhibe el creci 3. Coagulando las protenas, como el fenol, los alco :;z;{--\:':>' pueden%'.'-J
miento microbiano por su accin bacteriosttica. Esta holes, los cidos y los lcalis. , '' ' i
_ 'lJitod ;
bsqueda puede hacerse mediante el procedimiento de la - :<,iiiHirec
inmunodifusin radial (ID), colocando diversas diluciones 4. Atacando la apoenzima de ciertas enzimas microbia -1
del desinfectante en orificios hechos en agar en una placa nas, como lo hacen el cloro y las sales de cianuro, fluoruro
de Petri, la que previamente ha sido sembrada con el micro u oxalato.
organismo testigo, incubando posteriormente la placa por
24 horas a 37 C y determinando el grado de inhibicin del
5. Por simple accin de arrastre ayudando la accin del
microorganismo por la zona sin crecimiento bacteriano
agua en el lavado, es el caso de los jabones y los detergen
alrededor de los pozuelos en las diferentes concentraciones
del desinfectante. Este procedimiento sirve tambin para tes.
comparar la ccin bacte1iosttica de varios desinfectantes
frente a un mismo microorganismo.

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mmma
: inves
nte que Captulo 9
accin
roorga
tfectan
o sem LABORATORIO DE MICROBIOLOGA II:
:xiste o
t1rva de
accin
MTODOS DE OBSERVACIN DIRECTA
cuento
alos de Generalmente se asocia a la Microbiologa con la obser 5. Estudio histopatolgico. El material se obtiene por
y com- vacin directa y la caracterizacin de los microorganismos puncin, biopsia o necropsia.
por intermedio de la identificacin de sus estructuras parti
culares. Los mtodos de observacin directa utilizan colora 6. Xenodiagnstico. Se utiliza, por ejemplo, en el dia
nte con ciones especiales para cada organismo, tcnicas de concen gnstico de T,ypanosoma cruzi.
con el tracin y los criterios de identificacin de los mismos en
sustan base a su morfologa y tamao. Es tan importante como la Hoy en da los procedimientos de biologa molecular
croor correcta identificacin de los microorganismos, la correcta que detectan cidos nuclicos. antgenos proteicos y otro
J/50, lo toma de los especmenes. El microbilogo no solamente tipo de molculas, de los microorganismos, deben ser consi
debe saber reconocer a los microorganismos patgenos, derados como mtodos de diagnstico directo. Si bien no
distinguindolos de los que no lo son y las tcnicas que le constituyen mtodos de "observacin" directa, son realmen
que los permitan observarlo, sino que tambin debe tener los cono te pruebas directas porque detectan molculas propias de los
:sinfec cimientos necesarios para establecer la pautas de calidad de agentes y no del hospedador.
utacin la muestras, el tipo, su forma de recoleccin, su conserva
cin y transporte.
MTODOS DE DIAGNSTICO INDIRECTO

$, Los Las enfermedades infecciosas pueden ser diagnostica


Son procedimientos en los que no se observa en ningn
nismos das semiolgicamente, cuando el mdico recopila los snto
momento al agente que se investiga, sino las reacciones que
mas y signos que presenta el enfermo y construye con ellos
produce en el organismo afectado. Los mtodos pueden ser
un cuadro sindrmico de localizacin del proceso, haciendo
especficos e inespecficos.
luego un diagnstico clnico que resume las caractersticas
s de la
de la entidad nosolgica en su totalidad. An as, pocas
uptura, l)!epecficos. Pueden ser anlisis clnicos de tipo gene
veces el mdico puede hacer el diagnstico etiolgico segu
ro en las enfermedades infecciosas, sealando cual es el ral que suelen orientar hacia una determinada causa. El
microorganismo causal, ya que no existen prcticamente hemograma y la eritrosedimentacin proporcionan datos de
io, por signos patognomnicos indiscutibles. Los mtodos de dia mucho valor presuntivo en el diagnstico de determinadas
drilo. gnstico empleados en cualquiera de las ramas de la bacte enfermedades. As la leucocitosis y la neutrofilia tienen alto
riologa, virologa, micologa, protozoologa o helmintologa significado en las infecciones pigenas agudas, la eosinofilia
s aleo- pueden ser agrupados en dos grandes grupos que son los en las parasitosis verminosas tisulares y la eritrosedimenta
mtodos de diagnstico directo y los mtodos de diagnstico cin acelerada se observa en procesos infecciosos por Es
indirecto. treptococos, en el paludismo y en la tuberculosis.
crobia
luoruro MTODOS DE DIAGNSTICO DIRECTO Especficos. Estos mtodos se basan en el estudio de
las reacciones celulares y humorales inmunolgicas espec
ficas, para diagnosticar en forma indirecta el agente que las
Son procedimientos que permiten demostrar la presen
:in del ocasion. As por ejemplo la presencia de aglutininas anti
cia del agente infeccioso en cualquiera de sus etapas mor
tergen- Salmonella typhi delata una respuesta inmunolgica ocasio
folgicas. Estos mtodos pueden ser:
nada por este microorganismo. Los procedimientos especfi
cos pueden ser: pruebas inmunoalrgicas o reacciones in
1 . Macroscpicos. Solo se utilizan para el diagnstico tradrmicas que utilizan antgenos bacterianos totales o frac
de vermes adultos y artrpodos. cionados, para detectar especialmente inmunidad celular y
pruebas serolgicas que demuestran la inmunidad humoral,
2. Microscpicos. Comprende cualquiera de los ex basadas en la unin especfica del antgeno con el anticuer
menes hecho con la ayuda del microscopio, sea en materia po, usando para ello diversos procedimientos. (Fijacin de
les frescos o coloreados y con la ayuda o no de diferentes complemento, aglutinacin, hemaglutinacin, lisis, precipi
procedimientos tales como campo oscuro, contraste de fase, tacin, inmunofluorescencia, neutralizacin de virulenca,
imnunofluorescencia, etc. radioinmunoensayo, ELISA, etc.).

3. Cultivos. Son ms usados en bacterias y hongos. VALOR DIAGNSTICO DE LOS MTODOS


Permiten aumentar el nmero de microorganismos cuando
ellos son muy escasos y estudiar adems sus propiedades Los mtodos directos son procedimientos de mayor
culturales y bioqumicas. valor para el diagnstico, que los mtodos indirectos y es
conveniente usarlos siempre que sea posible hacerlo. Por
4. Inoculaciones. Pueden ser a veces los procedimien regla general los mtodos directos se utilizan durante la fase
tos ms fciles o ms rpidos para lograr el diagnstico de aguda de las enfermedades infecciosas y los mtodos indi
algunos agentes infecciosos. rectos durante las fases latente y crnica de ellas. Existe una

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98 - El laboratorio de microbiologia

gran variedad de opciones segn cual sea el agente infeccio Tcnicas de recoleccin de especmenes para anlisis m
so causal. Es importante resaltar que todas las pruebas dia microbiolgico. Para la mayora de los estudios microbiol g
gnstica, sean directas o indirectas, poseen sensibilidad y gicos el objetivo principal es el aislamiento del agente cau
especificidad limitadas. El mdico clnico debe tener presen sal de la enfermedad. Por ello es necesario que la muestra flor
te siempre este inconveniente, en el momento de recibir el sea recogida correctamente, que el transporte de lc misma
resultado de un anlisis solicitado, ya que todas las pruebas hasta el laboratorio sea rpido, que la cantidad de material
diagnsticas arrojan resultados falsos positivos y negativos. obtenido sea suficiente y que se tomen !as medidas para de
asegurar que la vitalidad de los microorganismos de la
Ret
TOMA DE MUESTRAS PARA ANLISIS MICRO muestra durante su traslado. Cuando el clnico sospecha la
cm).
BIOLGICO presencia de microorganismos patgenos poco frecuentes o
a l la
difciles de aislar en medios de cultivos corrientes debe
Es fundamental acompaar los especmenes recolecta avisar al laboratorio para que ste seleccione los matriales
dos con los datos del paciente: nombre, edad, sexo, residen necesarios para hacerlo correctamente. Adems es necesario
cia, nacionalidad, estado civil, comienzo de la sintomatolog que el microbilogo indique al clnico la forma adecuada de
a, fecha y hora de extraccin de la muestra, tipo de muestra hacer la extraccin del material. A continuacin se detallan
las tcnicas bsicas para la obtencin de los principales es obt
(sangre, esputo, orina, lquido asctico), lugar de donde se En
extrajo la muestra, tcnica de extraccin (sonda, puncin, pecmenes en la prctica microbiolgica rntinaria.
infe
hisopado), medicacin, historia resumida del cuadro clnico, ners
diagnstico clnico presuntivo y cualquier otra informacin Sangre. Desinfectar la piel con alcohol al 70%, yodado
des
que pueda servir para la interpretacin del microbilogo. al 2% durante 2 a 3 minutos. Extraer 2 a 3 muestras de san
(fus
gre en 24 horas, si es posible, antes de que se administren
con
Los materiales que deben ser destinados para el cultivo antimicrobianos al paciente. Las tomas de sangre deben Deb
de los microorganismos se recolectarn en frascos estriles, estar separadas entre si, como mnimo, 30 a 60 minutos. La pac
sin ninguna clase de fijador y el transporte al laboratorio cantidad de sangre a extraer en cada muestra debe ser entre
la e
deber ser hecho lo ms rpido posible. En caso que no 10 y 20 ml en adultos, 5 a 10 ml en nios y l a 2 rnl en re
pueda remitirse rpidamente la muestra al laboratorio, la cin nacidos. Sembrar cada muestra, por lo menos, en dos
mayora de los especmenes pueden conservarse entre 4-8 C frascos de cultivo, perforando las tapas de goma que tienen,
(no debe congelarse), durante algunas horas, la mayor parte previa desinfeccin y flameo de las mismas. El hemocultivo
de los microorganismos sobrevive bien a temperatura de est indicado en todos los cuadros agudos, presumiblemente
refrigerador. La refrigeracin evita la proliferacin exagera con sepsis: endocarditis, tromboflebitis infecciosas, infec
da de los microorganismos patgenos o de la flora norma, ciones provocadas por catter, shock sptico, cuadros tfi
presentes en la muestra, que podran alterar la interpretacin cos, as corno tambin en los cuadros septicmicos intermi
de los resultados. Es importante tener presente que hay mi tentes. Deben extremarse las medidas aspticas en la torna
croorganismos a los cuales les afecta el frio, como por ejem de muestra para hemocu!frvo para evitar las contaminacio
plo Neisseria. Para este tipo de microorganismos, es reco nes externas. La relacin sangre/medio de cultivo, siempre
mendable poner la muestra en un medio conservador de debe ser superior a 1/15, con lo que se evita, de esta manera,
transporte adecuado para cada caso. la accin bacteriosttica habitual del suero. La toma de
muestra debe ser realizada idealmente durante el momento
La toma de especmenes debe realizarse siguiendo las del ascenso de la temperatura. En la interpretacin de los
tcnicas recomendadas para cada microorganismo, cuidando hallazgos microbiolgicos, deber tenerse en cuenta siem
la asepsia y evitando contaminaciones con microorganismos pre, la posible contaminacin de los cultivos con microorga
de la flora normal. Las muestras que deben ser examinadas nismos de la piel o el aire. Las muestras deben ser revisadas
en fresco inmediatamente, deben ser extradas en el mismo un mnimo de 7 das; en caso necesario se controlarn los
laboratorio, sobretodo para bacterias o protozoarios mviles cultivos hasta un plazo de 3 semanas.
(Treponema pa/lidum, Trichomonas vagina/is, Entamoeba
histolytica). Lquido cefalorraqudeo (LCR). Las muestras se ob
tienen habitualmente por puncin raqudea, el material se
Un vez obtenidas las muestras, deben realizarse prime debe conservar a 37 C para el estudio microbiolgico y a 4
ramente los cultivos en los distintos medios y posteriormen C para las determinaciones citoqumicas. Habitualmente se
te los frotis. en portaobjetos y una preparacin en fresco, extraen dos muestras de 5 m1 cada una en adultos. Es reco
para la observacin directa de los microorganismos. Los mendable sembrar las muestras como mximo una hora
frotis de los especmenes deben ser delgados, para poder despus de su extraccin. Los cuidados de asepsia deben ser
observar en forma extendida y as poder identificar las ca rigurosos para evitar la contaminacin del canal raqudeo
ractersticas de los microorganismos en las muestras. Los durante el procedimiento de toma de muestra. En el labora
frotis secos se fijan con alcohol metlico durante 5 minutos o torio debe centrifugarse la muestra y sembrar el sedimento
mediante un suave flameo, siendo recomendable hacer va en los medios de cultivo adecuados, as como tambin hacer
rias preparaciones, para permitir repeticiones y coloraciones examen en fresco con tinta china, coloracin de Gram y de
especiales si fuese necesario. Para la siembra en medios de Ziehl-Neelsen y pruebas para detectar antgenos bacterianos
cultivos, se tendr en cuenta el tipo de microorganismo que de Neisseria meningitidis, Haemophilus iJ?fluenzae, Strepto
se desea aislar. Para los procesos infecciosos crnicos se coccus pneumoniae y Streptococcus del grupo B.
agregarn medios de cultivo que permitan tambin el creci
miento de rnicobacterias y hongos. Los especmenes obteni Lquidos de puncin. Punzar con jeringa para obtener
dos de lugares que tienen contacto con el exterior, poseen as el espcimen, previa desinfeccin de la piel, al igual que
abundante flora microbiana contaminante, por lo que se para la extraccin de sangre para hemocu!tivo. Se recomien
deben que usar tcnicas de aislamiento de los microorganis da extraer la mayor cantidad de lquido posible. Cuidar de
mos, para poder as identificar a los posibles patgenos. no inyectar burbujas de aire en los viales que podran difi
cultar el crecimiento de anaerobios. Los lquidos de puncin

ERRNVPHGLFRVRUJ
Mtodos de observacin directa 99 M

a anlisis ms frecuentes son: asctico, pleural, sinovial, pericrdico, Abscesos y tejidos. El material purulento o el lquido
crobiol ganglionar y de abscesos. Se debe tener presente que las intersticial de los tejidos se extrae con jeringas estriles. En
ente cau muestras obtenidos de cavidades cerradas, no presentan los casos en los que no se logra aspirar ningn lquido, se
a muestra flora microbiana acompaante. puede inyectar una pequea cantidad (1 a 2 mi) de suero
la misma fisiolgico estril, para luego aspirar.
material Punta de catter. Desinfectar el catter desde el lugar
idas para de entrada en la piel hasta lillOS l O a 15 cm, por encima. Orina. La muestra para los estudios microbiolgicos
OS de la Retirarlo con pinza estril. Cortar el extremo distal (5 a 8 puede ser obtenida mediante la miccin directa, por sondas
specha la cm). Colocarlo en un tubo estril. Enviarlo inmediatamente vesicales o por puncin suprapbica. La miccin espontnea
cuentes o al laboratorio. es el procedimiento ms inocuo para el paciente y es la me
tes, debe jor muestra. Para que la muestra sea representativa de la
nateriales Vas respiratorias altas. condicin clnica del paciente, es recomendable la retencin
necesario de por lo menos 4 horas de la orina en la vejiga (la primera
:::cuada de Extraccin: Se usan hisopos o torundas de dacrn para orina matinal es la mejor). Posteriormente debe realizarse
e detallan obtener muestras de las fosas nasales, faringe o amgdalas. una buena limpieza, con agua y jabn, de los genitales exter
ipales es- En caso de observarse seudomernbranas, como sucede en las nos. Luego debe orinarse espontneamente desechando el
infecciones por C01)'nebacterium diphteriae, deber obte primer chorro, recolectando el segundo. Para evitar la conta
nerse una porcin de las mismas. Las secreciones fcilmente minacin con microorganismos de la flora normal de piel y
', yodado desprendib!es blanquecinas (candidiasis) o grisceas vagina, el varn, debe retraer el prepucio y la mujer debe
as de san (fusoespirilos, cocos Grarn positivos) deben ser extradas separar los labios mayores de la vulva, antes de orinar. El
ministren con minuciosidad y de ser posible, ms de una muestra. cultivo de la orina debe realizarse lo antes posible, una vez
re deben Debe evitarse la contaminacin del hisopo con la saliva del recolectada la muestra. El cateterismo uretral, si bien es un
nutos. La paciente durante la torna de la muestra. En caso de sinusitis, procedimiento que ofrece mayor certeza en los cultivos,
ser entre la extraccin del material debe ser hecha nicamente por tiene el riesgo de introducir una infeccin urinaria al pacien
ml en re- puncin del seno afectado. Algunos microorganismos muy te por el arrastre de microorganismos desde el exterior hacia
s, en dos lbiles (Bordete/la, Neisseria) necesitan un medio de cultivo la vejiga durante el proceso de la colocacin de la sonda. Es
ue tienen, de transporte especial. Es recomendable sembrar placas de por este motivo que no es recomendable utilizarlo sino en
nocultivo Petri con agar-sangre al momento de haber se hecho la ex casos especiales. En pacientes que ya tienen sonda perma
iblemente traccin junto al paciente, para evitar la destruccin de las nente, deber pinzarse previamente la sonda 3 horas antes de
as, infcc- bacterias exigentes. la toma del material, posteriormente se limpia la sonda ex
1dros tfi- terna con una solucin antisptica, punzndola con una je
5 intermi- Vas respiratorias bajas. Las muestras de esputo de ringa de 10-20 ml, aspirando la orina acumulada, de esta
1 la toma forma, en la vejiga. La puncin suprapbica puede usarse en
ben ser tornadas por el mismo paciente, aprovechando los
1minacio nios pequeos o eri enfermos con lesin medular que care
golpes de tos, preferentemente por la maana temprano
' siempre cuando el paciente se despierta. Se debe evitar, en todo lo cen del reflej o voluntario de la miccin.
a manera, posible, la contaminacin con saliva. El material obtenido
toma de por broncoscopa ofrece ms seguridad en los hallazgos Genitales. Las muestras del aparato genital masculino
momento laboratoriales, recordando que la contaminacin con anest para el diagnstico de las enfermedades de transmisin
:m de los sicos puede inhibir el crecimiento bacteriano. Los esputos sexual deben ser obtenidas utilizando asa bacteriolgica,
nta siern- muy lquidos o espumosos que muestren solamente clulas bistur e hisopos o torundas, segn sea el caso. Los agentes
1icroorga epiteliales no son adecuados para exmenes microbiolgi ms frecuentes de uretritis son Neisseria gonorrhoeae y
revisadas cos. Ch!amydia trachomatis, ambos microorganismos muy lbi
)larn los les, resisten poco a la desecacin y a las bajas temperaturas,
por lo que es recomendable realizar siembras directas inme
Odo. En la mayora de las otitis media no es recomen
diatas en el consultorio. El medio de cultivo ptimo para el
dable efectuar la puncin de la membrana del tmpano para
as se ob Neisseria gonorrhoeae es el de Thayer Martn con atmsfe
obtener material. Slo es necesario hacerlo cuando el trata
aterial se ra de C02 Ch!amydia trachomatis debe ser transportado en
miento antimicrobiano para los microorganismos habituales
ico y a 4 un medio especial (2SP) y sembrado en cultivos celulares en
no haya dado resultados satisfactorios. En las otitis externas
!mente se e[ hisopado del conducto auditivo externo permite obtener los cuales crece desatTollando inclusiones intracitoplsmi
Es reco- fcilmente el material que se necesita. En estos casos, cas.
una hora adems de la bsqueda de bacterias debe hacerse una inves
deben ser tigacin micolgica para detectar aspergilosis y candidiasis. En el caso de que se quiera investigar la presencia de
raqudeo Treponema pallidum, se debe tomar la muestra de los chan
:::1 labora cros genitales, presentes en el perodo primario sifiltico.
Ojo y conjuntiva ocular. Las muestras de casos de
edimento Para el efecto se debe limpiar la lcera con una torunda
conjuntivitis se obtienen mediante hisopos o torundas de los
, in hacer embebida en suero fisiolgico estril. Luego de secar la
ram y de
fondos de saco conjuntivales. En las queratitis es necesario
efectuar un raspado suave con bistur oftalmolgico. En los lesin con otra torunda de algodn, se debe esperar que
1cterianos fluya el lquido tisular espontneamente. Con este fluido se
casos de infeccin intraocular el oftalmlogo puede obtener
, Strepto- el humor vtreo o acuoso para su estudio.
hacen preparaciones frescas entre porta y cubreobjetos que
deben ser observadas inmediatamente en el microscopio con
condensador de campo oscuro. Esporos y a veces micelios
Ulceras y drenajes. Tomar previamente muestras con de Candida pueden encontrarse presentes en el esmegma
a obtener hisopos, luego limpiar la lcera con suero fisiolgico estril.
i gual que prepucial , en los casos de inflamacin difusa de la mucosa
Hacer nuevas tornas con hisopos extrayendo el lquido linf balano-prepucial. Las muestras del aparato genital femenino
ecomien tico que aflora. Deben investigarse tanto microorganismos
:uidar de se obtienen del cuello uterino o directamente de la secrecin
aerobios y anaerobios como BAAR. vaginal.
ran difi
: puncin

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100 El laboratorio de microbiologa

Heces. de fase. Utiliza condensadores y lentes especiales que sumi


nistran una visin tridimensional de los microorganismos.
Recoleccin de heces frescas: Se utilizan muestras La microscopa electrnica es un mtodo de observacin
fecales recientes, emitidas en forma espontnea. La cantidad directa de los microorganismos, pero tiene un uso. limitado
que debe recolectarse es variable, siendo suficiente 5 a l O en la mtina, por su costo y complejidad. La microscopa
gramos de heces. Para el efecto se utilizan cucharillas de electrnica est dirigida a la observacin de las estructuras
plstico o de madera desechables. Dicha cantidad se deposi de los microorganismos, principalmente los virus. Se pueden
ta en frascos estriles de boca ancha. La muestra debe ser optimizar los resultados de la microscopa electrnica si se
sembrada lo antes posible, para evitar que microorganismos agrega un anticuerpo especfico que aglutine las patiiculas
lbiles como Shigella se deterioren. En nios que usan paa virales, procedimiento que ha sido denominado inmunomi
les, se debe vigilarlos constantemente para obtener heces croscopa electrnica, utilizado en rotavirus.
recientemente emitidas. Es importante cuidar que la materia
fecal no se encuentre mezclada con orina. En caso de estre El examen directo en fresco se utiliza cuando el espci
imiento es conveniente usar laxantes suaves como el sulfa men que se estudia es fluido y se distribuye homogneamen
to de sodio en pequeas dosis de 5 a l O gramos. No deben te fonnando m1a fina capa al colocrselo entre porta y cubre
utilizarse purgantes aceitosos. En todos los casos las mues objeto como, materiales purulentos, lquidos de puncin,
tras deben ser enviadas lo ms rpido al laboratorio y en ste esputo, orina, sangre. En materiales poco concentrados, la
deben procesarlas de inmediato para poder observar los centrifugacin puede ser necesaria y en los materiales muy
trofozotos mviles de los protozoarios, que pueden perder espesos, la dilucin con suero fisiolgico estril ayudar a
su motilidad en pocos minutos. En caso de dificultad de transparentar el preparado.
obtencin de la muestra, puede tomarse m1a muestra rectal
con hisopo, debiendo hacerse las siembras antes de una hora
de la toma del material. Examen directo con aclarante. Tratndose de materia
les relativamente opacos como pelos, uas o escamas de
piel, en el caso de las micosis y parasitosis superficiales, la
Recoleccin de heces preservadas con lquido fija nica forma de hacer un estudio microscpico es conseguir
dor. Este tipo de muestras se utiliza para deteccin de par separar las clulas constitutivas de las estructuras microsc:
sitos intestinales. Como la distribucin de los mismos no es picas. Esto se consigue empleando lquidos aclarantes, que
uniforme en las heces, se recomienda tornar 4-5 muestras en disuelve las estructuras celulares de las muestras, dejando
das alternos, colocado una pequea porcin cada da en el libres las estructuras microbianas. Para el examen, se coloca
lquido conservante para evitar la descomposicin de las el pelo, raspado de ua o escamas de piel sobre una gota del
materias fecales. Como conservador corriente se utiliza aclarante en el portaobjeto, cubrindolo con un cubreobjeto.
formaldehido al 5 % en agua. El agregado de NaCI al 0,9% Se calienta suavemente la lmina, as preparada, sobre la
al lquido sealado, mejora la conservacin de los elementos llama de un mechero, sin rue llegue a ebullicin, hasta con
microbianos en las heces. Es suficiente poner en los frascos seguir el ablandamiento de las estructuras, para que se pueda
de recoleccin 50 ml del lquido conservador y agregarle, comprimirla sin que se rompa el cubreobjeto. Los principa
con la ayuda de una esptula, 5 a 1O gramos de matelia fe les aclarantes son:
cal. Esta muestra debe ser disgregada minuciosamente en el
lquido para que el efecto del conservador pueda preservar Hidrxido de sodio o hidrxido de potasio al 10-20%.
bien la muestra. Tambin pueden usarse otros conservadores
como el MIF (rncrtiolate rojo - yodo - formalina) que a la Lactofenol con azul de algodn:
par que fija, colorea los parsitos, el PAF (fenol - alcohol - Fenol en cristales _ _ _
_ _ _ _ 20 g
formalina), el PVA (alcohol polivinlico) o el fijador de
Schaudim. cido lctico 20 g
Glicerina _ _ _ _ _
_ _ _ .
_ 40 g
EXMENES DE OBSERVACIN DIRECTA
Azul de algodn (azul de Poirier) _ _0,05 g
Examen directo en fresco. Consiste en la observacin Agua destilada ___ _ _ _ _ _20 mi
del material recin preparado, entre porta y cubreobjeto, sin
Examen con tinta china. Para el efecto, el material en
ningn tipo de coloracin ni sustancia clarificante. Este
procedimiento es muy poco usado en los diagnsticos bacte
estudio debe ser mezclado con una pequea gota de tinta
riolgicos, ya que solo permite identificar la forma de las
china, pura o diluida si fuere necesario. Este procedimiento
bacterias y su motilidad o no. No obstante tiene mucha utili
sirve nicamente para poner en evidencia la cpsula de
dad para hongos, protozoarios y helmintos. Generalmente se
utilizan microscopios pticos con condensadores de campo Cryptococcus neoformans.
claro. Las preparaciones en fresco pueden ser observadas en
microscopios de campo oscuro, el cual posee un condensa Examen con tinta azul negra Parker 51. Este proce
dor especial que impide el pasaje de la luz en forma directa dimiento da buenos resultados en la bsqueda de Malassezia
al ocular, por lo que se observa el campo microscpico total spp., agentes de la pitiriasis versicolor. Es suficiente colocar
mente oscuro. La luz desviada por el condensador de campo las escamas de la piel, en una pequea gota de la tinta Parker
oscuro, incide en forma tangencia sobre la preparacin en 51 azul negra, sobre un portaobjeto y comprimirla con un
fresco de la muestra, visualizndose en forma muy brillante, cubreobjeto, para su observacin al microscopio.
sobre el fondo negro, a los microorganismos y a las clulas.
La observacin con microscopio de campo oscuro se utiliza lnrnunofluorescencia directa. La microscopa fluores
para el estudio de Treponema pallidum, Borrelia spp. y
cente se basa en la utilizacin de fluorocromos, que se fijan
Leptospira spp. Para observar organelas de protozoarios es sobre los microorganismos, son capaces de emitir una onda
muy utilizado el microscopio con condensador de contraste de luz visible, habiendo sido incididos por rayos ultraviole-

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Mtodos de observacin directa 101

e sumi
Asa Agua corriente
lismos.
rvacin
mitado
oscopa
ucturas Violeta
V- 1 min
pueden
:a si se
rtcu\as
unomi-

espci
eamen
r cubre
uncin,
idos, la
es muy
udar a

materia
0 Lugol

mas de
iales, la
FIGURA 9.1: coloracin de Gram.
mseguir
icrosc:
tes, que tas. Se utilizan sueros especficos en contra del microorga Cristal violeta _ _ _ _ 2g
dejando nismo a ser investigado, marcados con isotiocianato de
coloca fluorescena. Esta tcnica se utiliza principalmente para la Etanol 95 _
_ _ _ _ .20 mi
gota del investigacin de microorganismos en cortes de tejidos. La Solucin B
eobjeto. identificacin especfica del microorganismo es sumamente
;obre la rpida y fcil. Oxalato de amonio _ _ 0,8 g
sta con
Aglfa destilada _ _ _ _80 mi
: e pueda Histopatologa. Los estudios histopatolgicos son
,rincipa- muy importantes para el diagnstico de las enfem1edades Ambas soluciones se mezclan 24 hs antes del uso y
producidas por bacterias, hongos y parsitos. Si bien la transcmTido dicho tiempo se filtra.
histopatologa puede ser aplicada en el diagnstico de mu Solucin de lugol
)%. chos microorganismos, cabe sealar sin embargo, que casi
siempre este procedimiento es superado por los mtodos de Yodo _ _ _ _ _ _ g
cultivo. No obstante, en algunos casos constituye el mejor
Yoduro de potasio _ _ 2g
procedimiento diagnstico. En la rinosporidiosis la biopsia
es el nico procedimiento posible de diagnstico y en la Agua destilada _ _ _ 300 mi
cromomicosis es el procedimiento ms rpido y sencillo.
Dentro de las limitaciones de la histopatologa, est el Se disuelve en primer lugar el yoduro de potasio en
hecho de que este procedimiento, por lo general, no puede agua y, posteriormente se le agrega el yodo; debe conser
diagnosticar con seguridad la especie del microorganismo varse el lquido en frasco de color caramelo (marrn) con
causal y en la mayora de los casos el estudio de los carac tapa esmerilada hermtica.
teres culturales y bioqumicos puede afirmar el diagnstico Solucin de safranina
exacto de especie.
terial en Safranina _ ___ _ _2,5 g
de tinta
limiento COLORACIONES MS EMPLEADAS Etanol 95"_ _ _ _ 100 mi
>sula de
Coloracin de Gram. Este es el procedimiento de Para su uso diluir de la siguiente manera:
mayor uso en bacteriologa y micologa, permite clasificar a Solucin madre de safranina _ _ _ _ 1 O mi
los microorganismos en dos grupos: Gram positivos
e proce (bacterias y hongos que se colorean de violeta) y microor Agua destilada _ _ _ _ _ __ _ 90 mi
rlassezia ganismos Gram negativos (bacterias y hongos coloreados
Esta solucin de safranina puede ser sustituida por una
: colocar de anaranjado, si se usa safranina y de rojo si se emplea
solucin de fucsina bsica al 1 : l 000 en agua destilada.
a Parkcr fcsina diluida) (FIGURA 9.1 ).
1 con un Tcnica
Reactivos Frotis fino del material en el portaobjeto.
fluores Cristal violeta modificado por Hucker Dejar secar espontneamente.
: se fijan Solucin A
ma onda Fijar suavemente a la llama (el calor debe ser soporta-
traviolc-

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102 - El laboratorio de microbiologa

Agua ,corrie nte

5 min
Fucsina J

0 ..
'{
Calentar,
NO hervir

0 Al ohol-cido
c 3 min
0 Az l de met leno
u i

FIGURA 9.2: coloracin de Ziehl-Neelsen.

ble con el dorso de mano). etanol que pudo ser escaso o excesivo y a la solucin de
safranina o fucsina que se dej poco o mucho tiempo.
Dejar enfriar espontneamente.
Cubrir el frotis con solucin de cristal violeta. Coloracin de Ziehl-Neelsen. Esta coloracin se usa
para reconocer las bacterias del gnero Mycobacterium, del
Dejar actuar el colorante durante 1 minuto. gnero Nocardia y los Coccidios intesti1wles. Los microor
Lavar con agua corriente durante 15 a 30 segundos. ganismos que se colorean-cOn la fucsina bsica (rojos) y
resisten a la decoloracin por el cido y el alcohol, se deno
Cubrir con solucin de lugol. minan cido alcohol resistente (AAR), los dems microor
Dejar actuar durante l minuto. ganismos y clulas aparecen teidos en azul (FIGURA 9.2).

Lavar con agua corriente durante 15 a 30 segundos. Reactivos



Decolorar con etanol 95 hasta que salga limpio. Solucin alcohlica fenolada de fucsina bsica
Lavar con agua corriente durante 15 a 30 segundos Fucsina bsica _ _ _ _ _ _ _ g
Cubrir con solucin de safranina o fucsina 1 minuto.
Etanol 95 _ _ ___ _ _ _ 1 0 mi
Lavar con agua corriente por espacio de 15 a 30 se Agua fenicada al 5% _ _ _ _ 90 ml
gundos.
Dejar estacionar la solucin 24 hs. Filtrar.
Dejar secar el portaobjeto en posicin inclinada.
Solucin etanol- cido
Descrita por Hans Christian Gram en 1884, a ms de
120 aos de' su descubrimiento, sigue siendo la coloracin cido clorhdrico - - - - --3 ml
diferencial de mayor practicidad para el estudio de las bac
Etanol 95 _ _ _ _ _ _ _ _ 97 ml
terias. La afinidad tintorial de la bacteria por el colorante
violeta, tiene mucho que ver con la estructura de la pared Solucin acuosa de azul de metileno
bacteriana, ya que los microorganismos Gram positivos
Azul de mctileno _ _ _ _ _ __0,3 g
dejan de serlo, cuando por algn motivo pierden la pared.
Las condiciones fisicoqumicas de la pared de estas bacte Agua destilada _ _ _ _ _ _ ! 00 mi
rias son las responsables de retener el complejo formado
por los colorantes bsicos y los mordientes (lugol), que La solucin debe estacionarse 24 hs, filtrar.
posteriormente no pueden ser arrastrados por el alcohol. Tcnica

Los resultados errneos que suelen ocurrir pueden Extendido fino del material sobre el portaobjeto.
deberse a la fijacin incorrecta del frotis cuando an estaba Dejar secar espontneamente.
hmedo, a extendidos muy gruesos, a la precipitacin de la
solucin del cristal violeta, a la solucin de lugol que no Fijar a la llama como en la tincin de Gram.
actu el tiempo suficiente, al lavado insuficiente con agua Colocar la lmina en un soporte elevado.
hecho en cualquiera de las etapas sealadas, al lavado con

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Mtodos de observacin directa - 103

Asa Agua corriente

1 min

0
0
Calentar, hervir

Heces

Azul de metileno

3-5 mln

FIGURA 9.3: coloracin de safranina, para coccidios intestinales.

Cubrir con la solucin de fucsina bsica. Polvo de Giemsa _ _ _ _ _ O, 75 g


:in de
Calentar hasta emisin de vapores durante 5 minutos. Metano! 65 mi
Enfriar con chorro de agua corriente. Glicerol neutro - - - - - 35 mi
se usa
11111, del Cubrir el preparado con alcohol-cido durante 3 minu Agitar la mezcla dos o tres veces al da durante 5 das.
ticroor tos. Dejar a 37 C durante 15 das.
ojos) y Escurrir. Filtrar.
;! deno-
1icroor Gotear el alcohol-cido sobre el frotis 10 segundos. Para el uso diluir con agua neutra 1/1O. O bien 2 gotas
A 9.2). en l mi de agua neutra.
Lavar con etanol hasta que no arrastre ms fucsina.
Tcnica
Lavar con agua corriente durante 15 a 30 segundos.
Realizar un extendido fino del material sobre el porta
Cubrir con la solucin de azul de metileno l min. objeto.
Lavar con agua corriente 15 a 30 seg. Fijar con metano! por 5 minutos.
Dejar secar el portaobjeto en posicin inclinada.
Cubrir el preparado con la dilucin del colorante
El hecho de que algunos microorganismos sean cido Giemsa 1/1O.
alcohol resistentes, se debe a la elevada concentracin lip
Dejar actuar al colorante durante 30 minutos.
dica que poseen en la pared o cubierta (cidos miclicos,
ceras, fosfolpidos). En el proceso de la tincin, el material Lavar con agua corriente por 30 segundos a l minuto.
graso de los microorganismos se ablanda por el calor y deja
pasar el colorante, el cual se une a su estructura interna. El Dejar secar espontneamente.
decolorante cido-alcohol, que se agrega posteriormente en La intensidad del teido puede regularse alargando o
fro, no consigue entrar con la misma facilidad con la cual acortando el tiempo de la coloracin o poniendo ms o
penetr en caliente, por lo que son incapaces de retirarlo en menos gotas de la solucin madre de Giemsa en agua neu
el caso de los AAR. Las decoloraciones prolongadas pue tra. Para obtener coloraciones rpidas en 5 minutos, se pue
den dar resultados errados, por los que debe tenerse en de realizar la coloracin aumentando el nmero de gotas
cuenta este detalle durante la ejecucin de la tcnica. para la solucin de trabajo (8 a l O gotas de solucin madre
por cada ml de agua). Para conseguir preparaciones con
Coloracin de Giemsa. Este colorante se utiliza para coloracin adecuada, debe ajustarse a pH neutro la solucin
estudiar parsitos, principalmente protozoarios de la sangre de trabajo del colorante Giemsa con unas gotas de solucin
y de los tejidos. Las clulas y los protozoarios presentan el buffer de fosfatos.
ncleo de color rojo vinoso y el citoplasma de color azul
claro. Para colorear una preparacin de gota gruesa (para
parsitos hemticos), debe colocarse una pequea gota
Reactivos (aproximadamente 20 \) de sangre por puncin capilar del
Solucin madre de Gicmsa
pulpejo del dedo, venosa o arterial, sobre un portaobjeto,

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'
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104 - El laboratorio de microbiologa

''
. ... ..

-
Agua torriente

0 !. 30 min

0 1]
Fucsina
Heces Calentar,
NO hervir

- L
0 Alcohol-cido
1 min
0 Azul de metileno
3-5 min

FIGURA 9.4: coloracin de Ziehl-Neelsen modificada, para coccidios intestinales.


FIG

desfibrinndola con una aguja, lanceta o la esquina de otro Azul de metileno,_ _ _ _0,3 g
portaobjetos, mediante movimientos circulares durante 1 a
2 minutos. Luego se deja secar espontneamente la prepara Alcohol 95%,_ _ _ _30 mi
cin, en posicin horizontal. No debe fijarse con alcohol. KOH 0,01',,_ _ _ _ 100 mi
Se cubre la lmina con la solucin del colorante Giernsa
diluido, durante 40 minutos. Posteriormente se lava muy Lavado con agua corri_ete.
suavemente el preparado con agua corriente, evitando arras
trar el frotis que no est fijado. Se deja secar el preparado Coloracin de Ziehl-Neelsen (modificada para Coc gar d:
en posicin inclinada. cidios intestinales). Esta coloracin se utiliza para C,yp dec
tosporidium spp., lsospora be/li y Cyclospora cayetanensis do. 0
Si bien no pueden ser observados con el microscopio (FIGURA 9.4).
ptico, pueden ser estudiados los efectos citopatolgicos Cubrir el frotis de heces ya fijado, con el colorante de
provocadas por los virus, revelados en las coloraciones con Ziehl-Neelsen.
Giemsa, como las clulas gigantes multinucleadas, visuali
zadas en infecciones producidas por herpes simple, varicela Calentar hasta que se desprendan vapores (no debe
-zoster, VIH y Paramyxovirus, denominada tambin clulas hervir).
de Tzank. Dejar 20 a 30 minutos.
Los cuerpos de inclusin son estructuras que se obser Lavar con agua corriente.
van dentro de las clulas, durante la invasin virsica; los

j
Decolorar con alcohol-cido durante 1 minuto.
cuerpos de inclusin pueden estar ubicados en el citoplas
ma, en el ncleo o, en ambos lugares a la vez y por su afini Lavar con agua.
dad cromtia pueden ser basfilos o acidfilos, en la colo
racin de Giemsa o con Hematoxilina-Eosina, siendo a Coloracin de contraste con azul de metileno al 0,3%

i
veces muy tiles en el reconocimiento histolgico de las durante un minuto.
virosis, como sucede en la identificacin del corpsculo de Lavar con agua corriente.
Negri en la rabia.
Coloraciones de preparaciones hmedas, para
Coloraci1 de Safranina. Se usa para Oyptospori parsitos intestinales, Son utilizadas usualmente para
dium spp., lsospora belli y Cyclospora cayetanensis visualizar mejor las estructura de los protozoarios intestina
(FIGURA 9.3). les procedentes de heces frescas, conservadas, en forma te a
tap
directa o de procesamientos de concentracin.
Frotis de heces. ,
s
Tell.ido en caliente, hasta - ebullicin durante lminuto 1. Solucin de lugol. Se utiliza para la observacin de
preparados hmedos de materias fecales, en el estudio de s'.
con el colorante safranina al 1 %.
los quistes de protozoarios. Los ncleos aparecen colorea S'
Lavado con agua corriente. dos en color marrn, pudiendo reconocerse las caractersti
cas del cariosorna y de la cromatina. (
Coloracin de fondo con la siguiente solucin:

ERRNVPHGLFRVRUJ
Mtodos de observa<:in directa - 105

o Heces

30 m in a 37 C
0
FIGURA 9.5: tcnica de Kato-Katz.

Reactivo: Se utiliza en igual forma que la solucin lugol.


3. Solucin de Tionina. Empleada para el estudio de
Yodo,_ _ _ _ _ \ g las preparaciones hmedas de heces, permite observar las
Yoduro de potasio_ __ 2 g estructuras de los protozoarios. Se agrega una gota del colo
rante Tionina a una pequea porcin de heces.
Agu a destilada csp_ _ l 00 ml.
Reactivo:
a Coc
Disolver primero el yoduro de potasio en agua y agre
gar posteriormente el yodo. Guardar la solucin en frasco
Oyp Tionina._ _ _ _ _ _ _ 100 mg.
de color marrn con tapa esmerilada, hermticamente cerra
mensis do. Para el uso mezclar una gota de esta solucin con otra Agua csp,_ _ _ _ _ _ 100 ml.
gota de materia fecal lquida previamente preparada en
mtc de suero fisiolgico. MTODOS DE EXMENES DE SANGRE PARA
2. Solucin MIF. Se usa para la observacin de mues PROTOZOARIOS
J debe tras hmedas de heces.
Los procedimientos que se pueden usar para la identifi
Solucin A: cacin de protozoarios en la sangre pueden realizarse sin
Tintura de mertiolate (roja)_ _ 200 ml. recurrir a ninguna tcnica de concentracin ( examen en
fresco y frotis sanguneo) o bien se pueden utilizar mtodos
Formol al 40 % 6 mi. que permiten concentrar a los microorganismos para facili
tar, de esa manera, su hallazgo (gota gruesa, Strout, micro
Glicerol 5 rnl.
Strout y Xenodiagnstico).
Agua destilada csp 270 rnl.
Examen en fresco. Para realizar este examen se colo
1 0,3% Solucin B:
ca una pequea gota de sangre sobre un portaobjeto cu
Yodo 5g brindola con una laminilla. Este procedimiento permite
identificar parsitos mviles como son los tripomastigotes
Yoduro de potasio 10 g de T cruzi, T brucei gambiense, T brucei rhodesiense o
para Agua destilada 100 ml. microfilarias,
e para
estina Disolver el yoduro de potasio en agua y posteriormen Frotis de sangre coloreado. Extendidos de sangre
forma te agregarle el yodo. Guardar en frasco de color marrn con fijados se pueden colorear con las tcnicas de Giemsa o
tapa esmerilada. Wright para diagnosticar los gneros Plasmodium, Trypa
Solucin para uso: nosoma y microfilarias.
;in de
.dio de Solucin A _ _ _ _ _ _ 9,4 ml. Gota gruesa. Tcnica ya descrita con anterioridad en
J!orea Solucin B _ este captulo.
_ _ _ _ _ 0,6 mi.
tersti-
(Estable por 2 a 3 das) Mtodo de Strout. Se utiliza para diagnstico de for-

ERRNVPHGLFRVRUJ
106 - El laboratorio de microbiologa

0 0 Centrifugar

-- <----' '---->
2 1avads

0 Heces
0 Conservante

O
<____, '---->
l
Centrifugar

0
Acetato de etilo
\
0 Sedimento

Fase quistca
0 Sedimento

Fase trofozoitica

FIGURA 9.6: mtodo de formalina-acetato de etilo de Ritchie y Burrows-PAF.

mas mviles de Trypanosoma cruzi en sangre. Se extraen 5 hesivas. Habitualmente se colocan las cajas e n el brazo, en
a l O ml de sangre, que se deja coagular en un tubo estril en los adultos y en el abdomen, en los nios menores. El pa
estufa a 37 C Dos horas despus, cuando' el cogulo se ciente debe estar en reposo_ y ,no tiene que mover el sitio en

:
encuentra totalmente retrado, se extrae el suero y se coloca donde se encuentra aplicada la caja durante los 30 minutos
dentro de un tubo centrfuga. Se centrifuga la muestra du que dura el proceso. Al terminar este plazo se quitan las tarn
rante 1 a 2 minutos a 200-300 RPM para sedimentar los cajas y se revisan las ninfas para determinar si presentan el
glbulos rojos. El sobrenadante se vuelve a centrifugar 1 5 abdomen globuloso, seal de que han succionado sangre.
minutos a 2.000 RPM o durante 3 minutos a 10.000 RPM. Los insectos deben mantenerse a 25-28 C en la oscuridad,
Con el sedimento obtenido se preparan varias muestras examinando en fresco las heces de los mismos a partir de
frescas entre porta y cubreobjeto para su examen microsc los 30 das. En caso de no observarse las formas tripo o los "'"
pico. epimastigotes en dicho plazo, se repetirn los exmenes
microscpicos de las heces de las vinchucas cada 1 5 das
Microhematocrito. Se utiliza para diagnosticar la durante 5 meses.
enfermedad de Chagas. Para el efecto se extrae la sangre
con anticoagulantes corrientes. Con ella se llenan un mni OTROS MTODOS DE DIAGNSTICO PARA PRO
mo de 5 capilares de tubos de hematocrito uno de cuyos 22 xi
TOZOARIOS
extremos se cierra con masilla. Se centrifuga a 1 1.000 RPM
durante 5 minutos. Se corta el tubo a nivel del lmite supe Se puede utilizar la plU1cin de medula sea para el
rior de la capa blanca leucocitaria. Una gota de dicha capa acu
estudio de Leishmania, (pero tambin pueden observarse
se deposita sobre un portaobjeto cubrindola con una lami
nilla. Se examina a 100 y luego a 400 aumentos. Si el resul
otros microorganismos como Histoplasma capsulatum,
Cryptococcus neoformans, microfilarias y otros microorga
tado es negativo deben revisarse los otros 4 capilares de nismos que puedan parasitar el sistema macrofgico en e(
hematocrito centrifugados. monoctico. La puncin lumbar permitir obtener lquid 01
cefalorraqudeo para los casos en que se investigue Acant
Xellodiagnstico. Se utiliza para el diagnstico de las hamoeba, Naegleria o tripanosomas. El lquido linftico de
formas agudas y congnitas de la enfermedad de Chagas. lesiones cutneas es utilizado para la bsqueda de Leishma
Para el efecto se usan triatominos de 3er. estadio (ninfas) de nia (pero tambin puede observarse Mycobacterium le
la especie Triatoma infestans criadas en el laboratorio a prae). El raspado o la biopsia de la crnea se practicar
partir de huevos, alimentadas sobre aves {palomas o galli cuando se investiga la presencia de Acanthamoeba. Adems
nas). En cajitas de madera u otro material similar de boca se podr extraer material mediante rectosigrnoideoscopa
ancha, se colocan entre 5 a 10 insectos. El recipiente se para la bsqueda de Entamoeba histolytica y sondeo duode
recubre con una sola capa de gasa u otro tipo de tela que nal para el estudio de Giardia lamblia. Las biopsias de
permita al triatoma picar a travs de la misma. Se limpia intestino delgado, grueso y recto son tiles para el dia
con alcohol la zona en donde se aplicar la caja. Pueden gnstico de los agentes de patologas intestinales como
colocarse una o dos cajas al mismo tiempo, las que deben Entamoeba h istolytica, Giardia lamblia y Oyptosporidium
ser fijadas perfectamente mediante brazaletes o cintas a d - spp.

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Mtodos de observacin directa - 107

0 Heces
--0 Disgregar en agua l
>
2 1avados

\
Centrifugar

0 Sulfato de cinc
al 33/o

Sedimento

FIGURA 9.7: mtodo flotacin con sulfato de cinc (Faust).

MTODOS DE DIAGNSTICO PARA PROTOZOA aproximadamente 50 mg de heces directamente sobre el


en RIOS Y HELMINTOS INTESTINALES portaobjetos (se denomina frotis grueso de Kato).
pa
en 3. Se cubre la materia fecal con la lmina de celofn
Muchas tcnicas de diagnstico abarcan a varios proto que se retira del lquid humectante, se presiona suavemen
tos zoarios y vermes intestinales en forma general. No obstante
las te el celofn con un tapn de goma. Se invietie luego la
tambin existen pruebas especficas para diagnstico de preparacin, con el cubreobjeto de celofn hacia abajo y se
. el determinado tipo de parsito. la coloca sobre un papel grueso, blando y absorbente sobre
re. una mesa de laboratorio. Se presiona sobre el portaobjeto
ad, Tcnica de Kato-Katz. Es un procedimiento que se
de que en este momento est hacia arriba, haciendo que la
usa tanto para el examen directo, como para el recuento de muestra se extienda hasta un tamao de 20 a 25 mm de
)o los huevos de helmintos en heces (FIGURA 9.5).
nes dimetro. Si la cantidad de heces est bien medida, el mate
las rial no debe fluir por los costados de la laminilla de celofn.
Materiales necesarios: El papel sobre el que se realiza esta operacin absorber
nicamente el lquido sobrante de la solucin humectante.
l . Cubreobjetos de celofn humectable en medidas de
tO- 5. Para el secado y aclaramiento del espcimen se co
22 x 30 a 26 x 32 mm. locan las lminas preparadas, en estufa a 37 C, durante 30
a 60 minutos. Al final de este perodo la preparacin queda
2. Liquido humectante (glicerina 500 ml, solucin seca y el contenido aclarado por la accin de la glicerina,
, el
1rse acuosa de verde de malaquita al 3% , 500 ml). listo para su examen microscpico.
um, 6. La observacin y el recuento de los huevos se reali
ga 3. Malla de acero inoxidable o de plstico fina, cortada
en cuadrados de 4 x 4 cm. za con objetivo 1 O x, debiendo, para el efecto, recorrerse
.co-
dO
toda la preparacin.
1nt 4. Molde de plstico que mide 50 mg. 7. Cuando se usa 50 mg de heces, para determinar
) de cuantos huevos existen en un gramo de materia fecal, debe
ma Procedimiento: multiplicarse por 20 el nmero contado. El factor de consis
/e tencia de las materiales fecales es 1 para las heces slidas y
:ar l . Los cubreobjetos de celofn se deben colocar pre secas, 2 para las semislidas o pastosas y 3 para las lqui
ms viamente dentro del lquido humectante 24 horas antes de das.
)pa su uso.
>de- Tcnica de Ritchie. Es una tcnica general para todo
de 2. Se tamizan por la malla de acero las heces y se toma tipo de parsitos intestinales (FIGURA 9.4).
dia una cantidad equivalente a 50 mg, mediante el molde de
>mo plstico, colocndola sobre un portaobjetos. Una variante Procedimiento:
1 ium ms rpida del mtodo, para procesamiento de muchas
muestras, es no utilizar ni la malla ni el molde, colocando l . Se disgregan 5-10 g de materia fecal en 50 ml de

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108 - El laboratorio de microbiologa

Heces

Papel de filtro

10 das a temperatura
ambiente

FIGURA 9,8: mtodo de cultivo de heces de Harada-Mori para identificacin de larvas de nematodos.

solucin acuosa de formaldehido al 5%. 3. El sedimento sobrante se disgrega en 8 rnl de solu


cin acuosa de NaCJ al 0,9% y 2 ml de acetato de etilo. Se
2. Se tamiza la muestra con malla metlica, de plstico agita durante 30 segundos y se centrifuga a 2.000 RPM
o gasa, que a travs de un embudo se va recogiendo en un
durante 3 minutos. Desechado el sobrenadante, con el nue
tubo de centrfuga, completando el volumen a 1 0 ml con
vo sedimento se realizan las mismas preparaciones que las
solucin de NaCl al 0,9%.
detalladas en el paso 2.
3. Se centrifuga a 2,000 RPM, durante 3 minutos.
Tcnica de tlotacin del sulfato de zinc (Paust). Se
4. Se desecha el sobrenadante. Repetir el procedimien utiliza para observar_huevos de helmintos y quistes de pro
to de lavado 2 veces. tozoarios. No es buen mtodo para la bsqueda de huevos
de Ascari.\ lumbricoides, porque tienen alta densidad y
5. El sedimento se resuspende en 5 ml de la solucin huevos operculados por que se rompen por la presin
de forrnalina al 5%. osmtica. Es el mejor mtodo para bsqueda de ooquistes
6. Se agrega 3 mi de acetato de etilo, se cierra el tubo de Iwspora belli (FIGURA 9.7) .
con un tapn de goma y se lo agita enrgicamente durante
30 segundos. Procedimiento:
7. Se centrifuga durante 3 minutos a 2.000 RPM. Se l . Se disgregan 5-10 g de materia fecal en 50 ml de
desecha el sobrenadante. agua.
8. Se examina el sedimento entre cubre y portaobjeto. 2. Se tamiza la muestra a travs de una malla metlica,
de plstico o gasa, que ayudado por un embudo se va reco
Tcnica de Burrows. Se usa para el estudio de huevos giendo en un tubo de centrfuga, completando el volumen a
de helmintos y protozoarios, en general, pero el conservante 1 O ml con agua.
PAF utilizado conserva mejor las estmcturas de los trofo
zotos de los protozoarios. Esta tcnica es parecida a la de 3. Se centrifuga a 2.000 RPM, durante 3 minutos.
Ritchie. (FIGURA 9.6)
4. Se desecha el sobrenadante. Repetir el procedimien
to de lavado dos veces.
l . Se disgregan 5-10 g de materia fecal en 50 ml de
conservante PAF. 5. Agregar solucin acuosa de sulfato de zinc al 33 %,
(densidad- 1,20) al sedimento.
2. Se tamiza la muestra a travs de una malla metlica,
de plstico o gasa, que por intermedio de un embudo se va 6. Se centrifuga de nuevo a 2.000 RPM durante 3 mi
recogiendo en un tubo de centrfuga, completando el volu nutos, en una centrfuga con cabezales basculantes.
men a 10 mi con una solucin de NaCJ al 0,9%.
7. Con asa bacteriolgica se retiran una o varias gotas
2. La muestra as preparada se somete a dos centrifuga de la superficie del lquido para su examen microscpico, el
ciones a 2.000 RPM durante 3 minutos cada vez, re que puede hacerse directamente o con el agregado de una
suspendiendo siempre el sedimento. Se colocan dos gotas gota de lugol.
del sedimento separadas sobre un mismo portaobjeto, a una
de ellas se le agrega el colorante MIF (Jugo! O, 1 ml, fonnol Mtodo de Baerman. El propsito es recobrar larvas
0, 15 mi y 0,75 ml de tintura roja de mertiolate al l/1 .000); de nematodos de heces. Es el mtodo de eleccin de mayor
la otra gota se mezcla con colorante Tionina. sensibilidad para deteccin de Strongyloides stercoralis

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Mtodos de observacin directa - 109

Gasa

Soporte

FIGURA 9.9: mtodo de Baerman.


solu
o. Se
RPM (FIGURA 9.9). 3. Se coloca un cubreobjeto en la parte superior del
nue tubo haciendo que contacte con la superficie del lquido, sin
te las Procedimiento: que forme burbujas de aire. Despus de 1 minuto se retira el
cubreobjeto, el que se lo coloca con la parte lquida hacia
l . Colocar agua a 37 C en un vaso de sedimentacin, abajo sobre el portaobjeto, para revisarlo en el microscopio,
hasta 2 cm del borde.
t). Se en contraste de fase.
pro-
1evos Tcnica de Willis. Es un procedimiento que se usa
ad y 2. Tomas 5 g de heces frescas y extenderlas en una
capa delgada sobre cuatro capas de gasa. especialmente para huevos de nematodos y cestodos en
sin heces. No est indicado para huevos de trematodos ni para
listes
3. Colocar la preparacin sobre un soporte encima del
los quistes de protozoarios. Tiene la ventaja de ser un pro
vaso de sedimentacin, de manera que las heces no toquen cedimiento muy sencillo y econmico.
directamente el agua, con la gasa hacia abajo sobre el so
porte. Dejar 2 horas a 37 C. Procedimiento: Utiliza una solucin saturada de NaCI
11 de (se puede usar sal comn de cocina) cuya densidad debe
alcanzar por lo menos 1,20. La materia fecal que se utiliza
4. Remover el colador con la preparacin.
es mejor que sea tamizada a travs de mallas metlicas o
Uica, plsticas. La operacin se realiza en pequeos cilindros o
eco- 5. Con la ayuda de una pipeta Pasteur, tomar una por frasquitos con unos 8 a l O rnl de capacidad, en los que debe
1en a cin del sedimento del vaso y mirar al microscopio. Identi colocarse alrededor de 5 ml de la solucin saturada. Luego
ficar las larvas observadas al microscopio. se disgregan 2 a 3 gramos de materia fecal en dicho lquido.
Posteriormente con una pipeta se le agrega lentamente al
Tcnica de Sheather. Es una tcnica recomendada frascos, la solucin saturada de cloruro de sodio, llenndo
1ien- para la bsqueda de ooquistes de Cryptosporidium. los hasta el borde sin derramar el lquido. Se coloca enton
ces un portaobjetos en el borde superior contactando con el
Procedimiento: lquido, evitando que queden burbujas de aire. A los 20
3 %,
minutos se retira el portaobjeto el que puede ser observado
1. Tamizar 2 a 5 gramos de materia fecal. El filtrado se con o sin cubreobjeto en el microscopio.
t mi- suspende en una solucin de NaCI al 0,9%. Se centrifuga a
2.000 RPM durante 2 minutos. Se desecha el sobrenadante. Tcnica de Graham. Se usa para detectar huevos de
Si es necesario se repite la operacin para eliminar resi Enterobius vermicularis. Con este procedimiento se pueden
observar ocasionalmente tambin, huevos de Ascaris lum
otas
duos.
bricoides, Trichuris trichiura y Taenia.
o, el
una
2. A l o 2 ml del sedimento contenido en el tubo
centrfuga se le agrega la solucin de Sheather (Sacarosa Procedimiento:
500 g, agua 320 rnl, fenol 6,5 mi), revolviendo la mezcla
1rvas suavemente con una varilla hasta que el lquido alcance el
ayor l. Se utiliza cinta adhesiva transparente (scotch) de 20
borde superior del tubo. Se centrifuga a 3.000 RPM durante mm de ancho, cortada en trozos de 4 cm de largo. La mues
ra!is 10 minutos. tra debe recogerse por la maana temprano, ai1tes de ningu-

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1 1 0 El laboratorio de microbiologa

na higiene personal. Varios trozos de la cinta se pegan en la el papel de filtro se encuentre siempre sumergido en el
regin perianaL Se las retira enseguida y se las pega en la %,'Ua, pero evitando que el nivel de sta llegue hasta la zona
superficie de portaobjetos para examinarlas en el microsco en donde se encuentra el extendido de materia fecal.
pio. Si los resultados fuesen negativos, se puede repetir el
4. Al finalizar el plazo sealado anteriormente; se ca
procedimiento en forma seriada por 5 das alternados.
lientan los tubos a 56 C, durante 30 minutos para inmovili
Cultivo de heces para nematodos (Harada Mori),
zar las larvas y luego se centrifuga a 2.000 RPM durante 4 a
5 minutos. El sedimento se examina entre porta y cubreob
(FIGURA 9.8) jeto con objetivo de poco aumento ( 1Ox).
Procedimiento: Recoleccin de helmintos adultos. Los helmintos
expulsado con las heces o en forma espontnea por ano,
l . Se extiende una fina pelcula de materia fecal sobre boca o nariz, deben ser lavados y puestos en agua (no en
una de las carillas de una tira de papel de filtro de 15 cm de alcohol ni formol porque contrae los msculos del gusano,
largo por 1,5 cm de ancho, ocupando solamente el tercio impidiendo ver correctamente su morfologa), para su tras
medio de la tira. Si es necesario para su adaptacin a los lado al laboratorio lo ms rpido que sea posible. Se deja a
tubos de centrfuga debe cortarse uno de los extremos del los gusanos en los frascos con agua, durante una noche a 4-
papel en forma cnica. 8 C, y luego que su musculatura se haya relajado por com
pleto se examinan sus estrncturas. Los gusanos pequeos se
2. Se utilizan tubos de ensayo o tubos de centrfuga pueden examinar con una gota de suero fisiolgico isotni
estriles con tapas de algodn o corchos. Se cargan los tu co entre p011a y cubreobjeto y si es necesario se los puede ria y ,_;,,,
bos con 3 mi de agua estril. presionar suavemente. Los progltidcs de tenias deben orgarf
comprimirse previamente entre dos portaobjetos con la nias
3. Se introduce la tira de papel en el tubo hasta sumer lares
gir su extremo inferior en el agua. Los tubos se tapan y se ayuda de pinzas de colgar ropas. En algunos casos el agre
gado de una solucin de glicerina al 50% en agua, ayuda a a 24 ij
colocan parados en gradillas, mantenindoselos a 25-28 C,
en un cuarto oscuro o dentro de un armario durante 7 a 1O clarificar el parsito.
das, aadiendo agua cuando fuese necesario, cuidando que

cultiv*
cierto_;
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estudil

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ERRNVPHGLFRVRUJ
en el
a zona Captulo 1 0
se ca
novili
nte 4 a LABORATORIO DE MICROBIOLOGA III:
brcob-
MTODOS DE CULTIVO
mintos
,r ano,
(no en
Los medios de cultivo artificiales, sin clulas son utili como carne o leche, contienen lpidos en forma de coleste
:usano,
zados principalmente para el diagnstico de bacteria y hon rol, triglicridos y cidos grasos.
u tras
gos, pero tambin para algunos protozoarios. Los virus de
deja a
ben cultivarse en medios de cultivo celulares o en embrio 4. Minerales. Habitualmente se los usa en forma de
1e a 4-
nes, ya que requieren de clulas vivas para el desarrollo de sales inorgnicas. Los elementos qumicos ms utilizados
r com
su ciclo de vida. Los medios de cultivos slidos (con agar) son sodio, calcio, potasio, cloro, fsforo, azufre, hierro,
os se
son los utilizados a gran escala para el crecimiento de bacte cobre y magnesio. El uso de lll1 determinado elemento de
;otni
ria y hongos en colonias, compuestas por millones de micro pende de las exigencias de crecimiento del microorganismo
puede
organismos derivados de una sola clula original. Las colo en estudio.
deben
nias de las diferentes especies tienen caractersticas particu
30n la
lares que ayuda a identificarlas. Toma aproximadamente 1 2 5. Factores de crecimiento y vitaminas. Se han identi
1 agre
a 24 horas a las colonias, de l a mayora de los microorganis ficado los factores X (ligado a la hemoglobina y el hierro) y
yuda a
mos, para volverse visibles a simple vista. Los cultivos pue V (niacina-adenina-nucletido), como necesarios para el
de realizarse tambin en medios lquidos, pero es imposible crecimiento de los microorganismos del gnero Haemop
determinar si hay ms de una especie en el lquido de cultivo h;/us. Ciertos microorganismos necesitan para su desarrollo
algunas de las vitaminas del grupo B. Cualquiera de estos
Los medios de cultivos se usan con los siguientes obje factores o vitaminas deben ser agregados a los medios de
tivos: ( 1 ) aislamientos de los microorganismos; (2) estudio cultivos cuando son necesarios.
de las propiedades culturales, fisiolgicas, morfolgicas,
antignicas y patognicas de los microorganismos; (3) estu 6. Antibiticos y quimioterpicos. El agregado de los
dio de la sensibilidad de los microorganismos a los antimi antimicrobianos puede tener dos objetivos principales: ( 1 )
crobianos; (4) fabricacin de las vacunas; (5) fabricacin de ayuda a l aislamiento ' de los microorganismos, como es el
antibiticos. caso del agregado de la penicilina en los medios de cultivo
en los que se quiere evitar la contaminacin por bacilos o
CARACTERSTICA DE LOS MEDIOS DE CULTIVO cocos Gram positivos, de la estreptomicina si lo que se quie
re evitar es el desarrollo de los bacilos Gram negativos o del
Estado fsico de los medios de cultivo. Los medios de actidione (cicloheximida), que impide la germinacin de
cultivos pueden ser lquidos, slidos y semislidos. Para hongos contaminantes comunes, y (2) el segundo objetivo es
cierto tipo de trabajo son ms tiles los slidos, como por el estudio de la sensibilidad de los microorganismos a los
ejemplo, para el aislamiento de bacterias, en cambio para el anti microbianos.
estudio de las propiedades bioqumicas y fisiolgicas son
mejores los medios lquidos. 7. Colorantes bacteriostticos. Los colorantes con
accin bacteriosttica selectiva, permiten aislar microorga
Ingredientes. Los medios de cultivos pueden contener nismos que no son sensibles al mismo, disminuyendo as la
una gran variedad de sustancias que son mantenidas en solu contaminacin bacteriana en los medios de cultivo.
cin o suspensin en agua, la cual constituye aproximada
mente el 80-95 % de la mayora de ellos. Una lista de los 8. Sustancias indicadoras. Sirven para detectar alguna
principales componentes de los medios de cultivos es como de las propiedades de los microorganismos.
sigue:
9. Sales de hierro. Detectan la produccin de H 2 S pro
l. Protenas. La ms comn es la carne vacuna o sus duciendo ennegrecimiento del medio de cultivo.
derivados, extractos, peptonas y aminocidos. Le sigue en
importancia la sangre total de animales (conejo, oveja, caba 10. Telurito de potasio. Las colonias reductoras de
llo) o sus componentes (plasma, suero, hemoglobina). Tam esta sal se colorean de negro.
bin estn las protenas derivadas de la leche, huevos o ve
getales.
11. Colorantes dicromos indicadores de pH. Se utili
zan el azul de timol, rojo de fenol, azul de bromotimol, agre
2. Hidratos de carbono. Los medios de cultivos pue gados al medio de cultivo le confieren un color determinado
den contener mono, di y polisacrido. Se los usa habitual que vara de acuerdo con el pH del medio. Pueden detectar
mente como fuente de energa para el microorganismo o la formacin de acidez en el estudio de los procesos de fer
para determinar su capacidad fermentativa. mentacin de los hidratos de carbono.

3, Lpidos. No se suelen agregar normalmente lpidos a 12. Sangre. Sirve para detectar la formacin de hemoli
los medios de cultivo. Sin embargo, los productos animales sinas por parte de los diferentes microorganismos.

ERRNVPHGLFRVRUJ
1 1 2 - El taboratorro de microbiolo.9a

13. Agar. Es una sustancia extrada de algas marinas, Esterilizacin. Se hace habitualmente en el autoclave a
tiene la propiedad de que una vez disuelto en el agua del 121 C por 15 a 20 minutos. Esta temperahira y tiempo pue
medio de cultivo mediante la ebullicin, es capaz de solidifi den ser modificados en caso necesario. Otros procedimien
carse cuando la temperatura baj a de 40 C y puede licuarse tos de esterilizacin son menos utilizados (tindalizacin,
,de nuevo cuando se eleva por encima de 90 C, es decir, pasteurizacin, filtracin, rayos ultravioletas)
existe una diferencia apreciable entre la temperatura de li
cuacin y de solidificacin, ofreciendo un amplio margen de Acondicionamiento final. Los tubos de agar en cual
trabajo. Se acostumbra agregarlo a los medios de cultivo en quiera de sus variantes, generalmente deben ser inclinados,
la proporcin de l 5-20 gramos por litro. para que al endurecer ofrezcan mayor superficie de cultivo
(en pico de flauta). El llenado de las placas de Petri estriles
14. Gelatina. Se necesita el agregado de gelatina al con el medio de cultivo estril deseado, se hace mientras el
12%) a los medios de cultivo para que pueda solidificarlos. medio de cultivo slido se encuentra lquido, dejndose la
Sin embargo, su temperatura de licuacin y de solidificacin placa en posicin horizontal hasta su total endurecimiento, si
es de 22 C, por lo que los medios preparados con gelatina es posible dentro de una cmara estril. El agregado de sus
permanecen lquidos cuando se los incuba a 37 C y no sir tancias termolbiles a los medios de cultivos, sustancias que
ven para los trabajos de aislamiento de bacterias en medici no son esteri!izables en el autoclave porque se desnaturali
na. Su uso est limitado al estudio del poder de digestin zan con el calor, tales corno la sangre y sus derivados o el
que tienen algunos microorganismos sobre esta sustancia, huevo, puede hacerse cuando el medio licuado (agar base),
que se puede evidenciar por la falta de la solidificacin del tiene alrededor de 45-50 C para evitar que las protenas se
medio previamente incubado a 37 C y con crecimiento coagulen. Los medios de cultivo finalmente listos para su
bacteriano de 24 horas, cuando se lo somete posteriormente uso deben ser guardados en el refrigerador a 4 C.
a temperaturas inferiores a 22 C, en un refrigerador corrien
te a 4 C. MTODOS DE SIEMBRA

15. Otras sustancias pueden ser usadas dependiendo Para la siembra de las bacterias en los medios slidos se
del microorganismo que se quiera aislar y de las exigencias utilizan los sigu ientes procedimientos (FIGURA 10.1 ) :
nutritivas del mismo.
l . Puntura. Para ello s e atraviesa el agar parado con el
PREPARACIN Y CONTROL DE LOS MEDIOS DE asa o alambre bacteriolgico cargado de microorganismos,
CULTIVO hasta alcanzar el fondo del tubo.

Regulacin del pH. Este control es muy importante en 2. Toque. Se usa para siembra en tubos de agar inclina
todos los medios y existe un pH ptimo para cada medio, el do o en placas de Petri. Con el asa prtando microorganis
cual debe ser respetado para que pueda ofrecer las carac mos se tocan uno o varis'puntos de la superficie del medio
tersticas para las que fue diseado. Si al terminar la prepa de cultivo.
racin de un medio de cultivo, su pH no es el indicado, se
puede efectuar la correccin usando algn (cido actico, 3. Difusin. Se mezcla el material a sembrar con el
clorhdrico) para bajarlo o bien alguna base o hidrxido medio de cultivo licuado (tibio) y luego se lo deja solidifi
(hidrxido de sodio, amoniaco), para aumentarlo. Cualquier car.
medidor de pH que proporcione lecturas con decimales es
suficiente para efectuar este trabajo de regulacin. La ma 4. Inundacin. Los medios con superficie slida se
yora de los microorganismos patgenos para el hombre inundan con el lquido que contiene los microorganismos,
necesitan para su crecimiento un pH neutro o ligeramente retirndose posteriormente el exceso del mismo.
alcalino o ligeramente cido.
5. Hisopado. Se siembra en forma continua y confluen
Medios de cultivo comerciales. Hoy en da se pueden te, con hisopos cargados con el material que se desea sem
encontrar en el comercio, prcticamente todos los medios de brar, frotando toda la superficie del medio de cultivo.
cultivo que se desea. La presentacin comercial de estos
6. Estra (FIGURA 10.2). El mtodo de la estra sim
medios de cultivo, es en forma de polvo desecado, listo para
ple consiste en tomar el material que se desea sembrar con
disolverlo en agua, una vez que se ha pesado la cantidad
deseada. Cada frmula de medio de cultivo lleva en la eti
queta la lista de sus ingredientes, as como la tcnica de su el asa bacteriolgica y luego realizar estras en toda la super
modo de preparacin y esterilizacin. La mayora de los ficie del medio de cultivo. En el mtodo de la estra cruzada,
medios de cultivos sintticos son altamente higroscpicos, se siembra con el asa bacteriolgica 1/3 de la superficie del
por lo que deben tomarse las precauciones del caso, tanto medio en la placa de Petri, Juego con el asa estril se inicia
para la preparacin de los medios de cultivos, como para la un nuevo trayecto de estra, cruzando una sola vez la estra
conservacin posterior de los frascos usados, cerrndolos anterior y cubriendo nuevamente otro 1/3 de la superficie
cuidadosamente para evitar la absorcin de agua que los restante del medio de cultivo no sembrado. nuevamente con
el asa estril se repite la misma operacin iniciando el arras
inutilice.
tre en la segunda estriacin y cubriendo con estras el 1/3
Recipientes. Los medios de cultivo se distribuyen
restante no sembrado. Es importante pasar con asa bacte
riolgica solamente una vez por la siembra anterior, cuando
segn el uso al que estarn destinados en tubos de tapa de se realiza la siguiente estra. De esta forma la carga micro
rosca, tubos de ensayo, balones, botellas, placas, frascos, biana ir disminuyendo con el proceso del estriado y permi
que deben ser convenientemente protegidos para evitar su
tir la separacin en el cultivo de los microorganismos en
ulterior contaminacin luego de la esterilizacin. forma separada, que luego originarn una colonia individual.

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Mtodos de cultivo 1 1 3
)clave a
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enas se
para su

FIGURA 1 0 . 1 : mtodos de siembra.

,lidos se
): Cuando se necesita sembrar cantidades exactas y cono Mtodo de la temperatura ptima de crecimiento.
cidas de microorganismos, como es el caso de las siembras Mediante este procedimiento es posible inhibir el desarrollo
o con el de los antibiogramas, debe determinarse previamente la de algunos microorganismos y estimular el de otros.
msmos, concentracin de los microorganismos.
Mtodo de la incubacin aerobia y anaerobia. Al
Cuidados de la esterilidad. Para efectuar la siembra cultivar microorganismos en aerobiosis se inhibe el desa
inclina debern extremarse los cuidados del flameo de la boca de rrollo de los anaerobios y viceversa.
organis los recipientes, la incineracin correcta del asa bacteriolgi
:l medio ca, la apertura por corto tiempo de los frascos, tubos o pla Mtodo de las sustancias bactericidas selectivas.
cas a sembrar. Puede ser til usar tubos o frascos con tapas Muchas especies de microorganismos presentan diferencias
de goma hermticas que podrn sembrarse por puntura con entre si por su sensibilidad a la accin bactericida o bacte
con el agujas y jeringas, como es habitual en los hemocultivos. riosttica de antibiticos, quimioterpicos o desinfectantes.
solidifi- Para mayor seguridad puede disponerse de cmaras de flujo Para aislar un tipo microorganismo, aprovechando estas
laminar para la siembra, que se mantienen estril el ambien diferencias, se pueden agregar a la emulsin de microorga
te de siembra, disminuyendo las posibles contaminaciones nismos las sustancias bactericidas que inhiben selectiva
5Iida se areas. mente el crecimiento de los microorganismos que no se
msmos, desean aislar, pero que no perjudique el desarrollo del mi
MTODOS DE AISLAMIENTO crobio que se pretende obtener colonias puras. Pueden usar
se cidos y lcalis para aislar los bacilos del gnero Myco
)nflucn Son varios los procedimientos que se pueden usar: bacterium (BAAR), la penicilina es utilizada para obtener
ea sem- cultivos de bacilos Gram negativos y a estreptomicina para
Mtodo de la estra cruzada, ya descrito, es el ms conseguir la separacin de microorganismos Gram positi
empleado. vos.
:a sim
Jrar con Mtodo de la mezcla. El material que contiene micro Mtodo con estimulantes del crecimiento. Se basa en
a super organismos de varios tipos, puede mezclarse con agar nutri el uso de sustancias que aumentan en forma especfica el
c:ruzada, tivo licuado tibio, a 40-42 C y dejarlo solidificar ensegui desarrollo del microorganismo que se quiere aislar.
ficic del da , en tubos parados; los aerobios se desarrollan en la su
e inicia perficie y los anaerobios en el fondo del tubo, mientras que Mtodo de la filtracin. Segn el tamao de los poros
la estra los microaerfilos lo hacen en la zona media. Se eligen las de los filtros utilizados pueden ser separados los microorga
1perficie colonias que se desean aislar teniendo en cuenta estas cuali nismos pequeos de los mayores.
nte con dades.
el arras Mtodo de las sustancias indicadoras. En la etapa de
s el 1/3 Mtodo del calentamiento. El calentamiento se usa aislamiento primario o en los repiques secundarios, resulta
a bacte para separar microorganismos resistentes al calor de otros muy til reconocer rpidamente una determinada propiedad
cuando que son sensibles. Es el caso de las esporas y las formas bioqumica o metablica, que establece una diferencia reco
1 micro vegetativas, que al someterlas a 80 C, durante 20 a 30 nocible del microorganismo que se quiere aislar con respec
'/ permi minutos, destruye la mayora de las formas vegetativas, con to a los otros microorganismos contenidos en la misma
)mos en lo cual la siembra posterior en medios adecuados permitir mezcla; por ejemplo los gneros Salmonel!a y Shigella no
iividual. el desarrollo de las esporas que han resistido al calor. acostumbran fermentar la lactosa, en cambio el gnero
Escherichia predominante en !as heces, si lo hace; al agre-

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114 - .El laboratorio de microbiologa

Simple Cruzada

FIGURA. -10:i: -Sienibra Por estras, e n placas d e Petri


vari
na. ,,
gar lactosa a un medio nutritivo en placa de Petri, se puede Propiedades metablicas. Rutinariamente se estudian
den::
em
reconocer la colonia fermentadora de la lactosa mediante un los requerimientos de 02 y C02 de la bacteria, su tempera
indicador de pH agregado al mismo medio de cultivo, el tura ptima de desarrollo, la formacin de pigmentos, la me ':,
que nos seala la formacin de cido alrededor de la colo resistencia al calor, a los cidos y a los lcalis. Las formas
nia. Otras veces puede reconocerse la formacin de H2S, vegetativas son sensibles al calor y a los agentes qumicos,
usando sales de hieITo (gnero Salmonella) o bien la detec las esporas son resistentes a ambas cosas y los BAAR son
cin del tipo de hemlisis utilizada en el genero Streptococ sensibles al calor pero resistentes a los agentes qumicos.
cus.
Propiedades qumicas.. Se estudian, la accin fermen
IDENTIFICACIN BACTERIANA tativa sobre los hidratos de' carbono, la accin sobre las
protenas, los diferentes tipos de enzimas, los productos
Para la identificacin de las bacterias se acostumbra liberados durante el metabolismo bacteriano como ser ci
seguir una serie de estudios en forma sucesiva, que tienen dos orgnicos, anhdrido carbnico, cido sulfhdrico, in tere

i
por objeto individualizar el microorganismo, comparndolo do!. elao,
con algn microorganismo cuyos caracteres son conocidos. ter$
En bacteriologa aplicada a la medicina, no siempre es ne Estructura antignica. La determinacin de la frmu los
cesario establecer un diagnstico exacto del gnero y espe la antignica de un determinado microorganismo es el pro de ri
cie del microorganismo en estudio. Muchas veces es sufi
ciente recurrir a unas pocas pruebas especficas que brinden
cedimiento ms fiel para identificarlo rpidamente. Las
bacterias pueden presentar antgenos somticos, flagelares, 1jJ
un resultado til para establecer el tratamiento. Los estudios capsulares, esporulares, fraccionados, algunos de ellos co cia1i.;
para la identificacin bacteriana son: munes a varios gneros de una misma familia, otros a va dos__
rias especies de un mismo gnero y estn los caractersticos fic
Estudios morfolgicos. Son hechos en medios de de una sola especie. 1J'.
cultivos ptimos para el microorganismo, cuando stos se 3.
.
hallan en pleno crecimiento en la etapa logartmica de su CULTIVO PARA HONGOS
gen:
ces

los 1
desarrollo. :tos medios de cultivos lquidos o semilquidos
.
debern ser usados para el estudio de la formacin de cade
de 1 .
Mtodos de siembra. La siembra de los cultivos pue
nas y flagelos, los medios envejecidos pobres y secos para de realizarse en forma similar a las bacterias, usando para el
observar el desarrollo de las esporas. efecto medios slidos en tubos o placas. La siembra puede
ser hecha por estria, por puntura, por difusin o, lo que es
Reacciones tintreas. Dos coloraciones deben usarse ms usado, por toque.
rutinariamente, la coloracin de Gram que permite la dife
renciacin de las bacterias en Gram positivas (color violeta) Para la realizacin de microcultivos existen varias
y Gram negativas (en color rojo o anaranjado) y la colora tcnicas. Un procedimiento sencillo consiste en utilizar un
cin de Ziehl-Neelsen que clasifica a los bacilos en AAR
(color rojo) de los no AAR (color azul).
medio de cultivo pobre en nutrientes (agar arroz u otro)
para que los hongos desarrollen sus caracteristicas morfol
gicas. La metodologa consiste en depositar un trozo de este
Cultivos. Detectan las necesidades nutritivas del mi medio sobre un portaobjeto estril y sembrarlos con un
croorganismo, su forma de crecimiento en los medios sli poco de la colonia del hongo aislado, se cubre con una la
dos y lquidos, el aspecto y el tamao de la colonia, el tiem minilla y todo el material as armado se coloca dentro de
po que tarda en desarrollar, etc. una placa de Petri estril, apoyndolo sobre una pequea

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Mtodos de cultivo - 11 5

Cscara Membrana colioalantoidea

Cavidad alantoidea
Cavidad amnitica
Embnn

Saco de aire
Albumen

Vitelo

FIGURA 10.3: embrin de pollo.

varilla estril acodada en V que sirve para apoyo de la lmi luego el crecimiento alrededor de cada disco, indicando
na. Se agrega dentro de la placa una torunda de algodn cuales son los compuestos metabolizados por el hongo, que
studian empapada en agua estril de manera a mantener la humedad son caractersticos para cada especie.
mpera dentro de la placa, torunda que debe ser mojada peridica
ttos, la mente cuando se la note algo seca. Para pruebas de fermentacin de glcidos, se dispone
formas de medios de cultivo preferentemente lquidos, conteniendo
irnicos, Los cultivos en tubos o placas as como los rnicroculti el glcido, un indicador de pH y una campnula para reco
\R son vos generalmente se dejan a temperatura ambiente, aunque leccin de gases. Como medio nutritivo suele ser suficiente
cos. algunos cultivos para hongos se incuban a 37 C. Algunos el agua peptonada, como indicador se utiliza el rojo de
hongos pueden crecer en dos o tres das, en cambio hay los fenol o el azul de bromotimol. Las soluciones de azcar al
ennen que necesitan una semana y aquellos que solamente crecen 30 % se esterilizan ,por ultrafiltracin y se agregan 3 a 5
bre las despus de los 15 das. gotas delas mismas en cada uno de los tubos.
1ductos
;er ci Las necesidad de vitaminas a ser estudiadas, se utili
Los macrocultivos sirven para el estudio de los carac
co, in- zan en las siguientes: Biotina, Tiamina, cido Nicotnico,
teres coloniales en sus variados aspectos de tamao, forma, h10sitol, Piridoxina, Pantotenato de Calcio. Cuando se quie
elaboracin de pigmentos, presencia de vellosidades, carac re estudiar la necesidad de una determinada vitamina de la
tersticas de los bordes, del centro y del reverso, en cambio lista, deben agregarse al medio de cultivo todas las dems
fnnu los microcultivos son usados principalmente para el estudio
excluyendo la que se pretende estudiar.
el pro de los rganos de reproduccin
e. Las
elares, CULTIVO PARA VIRUS
En algunas condiciones el medio de cultivo est espe
los co cialmente preparado para estimular la formacin de clami
s a va dosporos, determinacin que se hace necesaria para identi Todos los virus deben ser cultivados sobre clulas
rsticos vivas en pleno desarrollo. La siembra en los diversos me
ficar ciertas especies de hongos.
dios de cultivos se puede hacer en forma directa sin ningn
tratamiento especial del material, cuando se los supone
Existen medios de cultivos para el estudio de los pro
libres de bacterias u hongos como es el caso de la sangre,
cesos fermentativos de azcares, de la asimilacin del nitr lquido cefalorraqudeo o de lquidos obtenidos por puncin
geno, de la utilizacin de diversos hidratos de carbono, de de cavidades cerradas. En caso de tratarse de tejidos orgni
pue los diferentes procesos metablicos y de la determinacin cos deben ser triturados previamente con arena u xido de
para el
)S

de las necesidades vitamnicas. aluminio, en mortero, con la ayuda de suero fisiolgico u


puede
otro diluyente estril. Luego este material debe ser centrifu
que es Propiedades bioqumicas. Para el estudio de los hon garlo por 10 a 1 5 minutos a 2.000 revoluciones por minuto,
gos patgenos puede ser de mucha ayuda para el estudio utilizndose el lquido sobrenadante para las siembras. Si el
para determinados gneros. Pueden estudiarse la utilizacin material se considera que puede tener hongos o bacterias, se
varias de carbono y nitrgeno (auxanograma), de fermentacin de los debe tratar previamente con antibiticos o con ter si es
izar un azcares y la necesidad de vitaminas. que el virus que se pretende aislar no es sensible a l. Tam
J otro) bin puede obtenerse la separacin de las bacterias por
orfol Para el auxanograma se prepara un medio de cultivo ultrafiltracin o centrifugacin fraccionada.
de este bsico en una placa de Petri, sin el elemento a estudiar
;on un (carbono o nitrgeno), en el cual se cultiva el hongo a anali Existen dos grupos de_ medios para siembra de virus:
una la- zar. Se colocan posteriormente discos de papel de filtro con los cultivos en diversas lneas celulares y los cultivos en
1tro de las sustancias a ser analizadas (distintos azcares, en el caso huevos ernbrionados.
equea del auxanograma para utilizacin de carbono) y se observa

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1 1 6 - El laboratorio de microbiologa

Cultivo en clulas vivas. Para el cultivo de los virus Clulas diploides renales fetales humanas (HFDK)
pueden usarse las ms variadas lneas celulares humanas o Clulas pulmonares diploides fetales humanas (HFDL)
animal, adaptada cada una de ellas a las necesidades de los
diversos virus. Las de uso corriente son: Fibroblastos pulmonares embrionarias humanas
(HELF)
Clulas conectivas de ratn (L)
Clulas embrionarias renales humanas (HEK)
Clulas de rin de mono verde (GMK)
Clulas fetales de amgdala humana (HFT)
Clulas de rin de mono Rhesus (Rlv1K)
Cultivo en huevos embrionados. Los embriones de
Clulas de rin de mono (VERO) pollo son probablemente los ms usados, pero se usan tam
bin los de otras aves como patos o pavos. Se utilizan em
Clulas fibroblastos de pollo (CF) briones de edades que oscilan entre 8 hasta 1 5 das
Clulas de carcinoma de crvix humano (HeLa) (FIGURA 1 0.3). La siembra se puede realizar en la mem
brana corioalantoidea, cavidad alantoidea, saco vitelino,
Clulas de amnios humana (HA) saco amnitico, encfalo y en las venas del embrin.

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LABORATORIO DE MICROBIOLOGA IV:


PRUEBAS SEROLGICAS INDIRECTAS
de
llll-

ias La presencia de anticuerpos en el suero sanguneo se por molculas de gran talla y complejidad. Existen amino
m- puede demostrar mediante mtodos o procedimientos de cidos que son indispensables para la funcin antignica de
1110, laboratorio rutinarios. Para ello, se preparan diluciones del las protenas como son el triptfano, la tirosina y la fenilala
suero en estudio, que se enfrentan con un antgeno conocido. nina. Otros antgenos pueden estar constituidos por poli
Las reacciones que se produzcan mostrarn la presencia de sacridos y son muy pocos los antgenos que estn integra
anticuerpos especficos en el suero. Mediante este procedi dos por lpidos. Las combinaciones de estas tres sustancias
miento se realiza el diagnstico indirecto de microorganis protenas, polisacridos y lpidos o de dos de ellas, pueden
mos que motiva la presencia de las inmunoglobulinas es ser relativamente frecuentes en muchos tipos de antgenos
pecficas en el suero. microbianos. El peso molecular de la mayora de los antge
nos proteicos se sita por encima de 10.000 Dalton y de
Se denominan reacciones serolgicas a las que utiliza el l 00.000 Dalton en los polisacridos, conocindose, sin em
suero sanguneo para investigar la presencia de anticuerpos bargo, molculas de menor tamao que tienen poder inmu
o antgenos desconocidos, utilizando para el efecto anticuer nolgico, como la insulina (6.000 Da.), la angiotensina
pos o antgenos conocidos. La gran mayora de las pruebas ( 1 .000 Da) y el glucagn (3.800 Da). En el caso de las mol
indirectas, que se realizan en el laboratorio de rnicrobiolog culas antignicas formadas por haptcnos y molculas trans
ia, son las que miden anticuerpos en contra de los distintos portadoras, estas ltimas alcanzan generalmente el tamao
agentes microbianos. de unos 10.000 Da.

La formacin de anticuerpos es un proceso que se des Cada antgeno debe poseer por lo menos 5 epitopos,
encadena despus de exposicin del hospedador a los ant para que tenga propiedades inmungenas. Los epitopos en
genos, que constituyen las partes de los microorganismos, un antgeno particular pueden ser similares o diferentes. En
las cuales interactan con el sistema inmune. los antgenos formadospor la fusin de haptenos a molcu
las transportadoras, el hapteno acoplado es el que acta
DEFINICIONES BSICAS corno receptor o detenninante antignico. La valencia de
una molcula antignica est dada por el nmero de recepto
Antgeno. Es una sustancia capaz de estimular la pro
res o epitopos. Los receptores estn constituidos corriente
mente por cadenas de 3 a 5 aminocidos o aminoazcares.
duccin de inmunidad, elaborada tanto por los linfocitos T o
inmunidad celular, corno por los linfocitos B o inmunidad El hapteno cuando est acoplado a un antgeno, acta como
humoral. Los antgenos tienen la propiedad de reaccionar determinante antignico y la respuesta inmunolgica que
con los anticuerpos o con los receptores T, en forma espec provoca la muestra (molcula portadora + hapteno) depen
der exclusivamente de l. La molcula portadora puede ser
fica. El antgeno se denomina inmungeno precisamente por
la propiedad que tiene de engendrar la respuesta inmunitaria. un eritrocito ntegro o solamente una molcula proteica
Las molculas de gran tamao estn dotadas de la propiedad corno ser la albmina de huevo, leche o suero sanguneo.
de estimular la formacin de inmunidad. Si bien el tnnino
antgeno involucra tanto a la inmunidad humoral como a !a La capacidad de un antgeno de producir mayor o me
celular, en la terminologa tradicional de la inmunologa se nor cantidad de anticuerpos, depende de la naturaleza qumi
lo utiliza principalmente para referirse a las sustancias que ca del antgeno, de la especie del hospedador que recibe la
forman anticuerpos. estirnulacin antignica y de las vas usadas para la intro
duccin del antgeno. La mayora de los antgenos son poco
Los haptenos son agrupaciones qumicas de pequeo estables y se alteran fcilmente con los cidos, lcalis, desin
tamao que por si solas no son inmungenas, pero que una fectantes y agentes fsicos como el calor. El estado fisico del
vez unidas a una molcula de mayor tamao transportadora antgeno con respecto al medio lquido en el cual se encuen
tra puede ser variable; soluble, insoluble o disperso; posible
pueden engendrar anticuerpos.
mente la excitacin antignica es ms prolongada y es mejor
Los epitopos, o receptores son partes del antgeno que
la respuesta inmunolgica cuando se usan fracciones disper
sas precipitadas, debido quizs a la mayor permanencia in
se encuentran distribuidas en la superficie del mismo y es el situ y al contacto ms prolongado del antgeno con los me
sitio de unin con el anticuerpo. Este sitio se denomina tam
bin determinante antignico. Un antgeno puede tener
canismos de inmunidad. La estructura molecular es impor
tante para decidir la inmunogenicidad de un antgeno. Si
varios epitopos o determinantes antignicos. La regin del bien es cierto, que tanto las molculas lineales corno las
anticuerpo que entra en contacto con el epitopo del antgeno
se la conoce con el nombre de parntopo.
globulares o ramificadas pueden ser inmungenas, cualquier
modificacin de su estructura puede hacer variar la calidad
de la respuesta inmunolgica. Tambin existe una relacin
El antgeno funcional completo, es una sustancia qu bastante estrecha entre la complejidad del antgeno y su
mica compleja. Los antgenos proteicos estn constituidos poder inmungeno, observndose mayor respuesta inmu-

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1 1 8 - El laboratorio de microbiolog a

Ag capsular
Ag esporular

Ag somtico

Ag txico
Ag enzimtico

FIGURA 1 1 . 1 : antgenos bacterianos.

nolgica en las molculas proteicas policatenarias y globula potasio, como es el caso de las vacunas diftrica y tetnica
res que en las lineales. que contienen el toxoide correspondiente precipitado por
esta sal. Tambin se usan otras sales como el fosfato de
Tipos de antgeno. Los antgenos, segn su proceden aluminio, tartrato de aluminio y potasio. El adyuvante com
cia con respecto al organismo que los recibe, pueden ser pleto de Freund es una mezcla de micobacterias, vaselina y
clasificados en endgenos y exgenos. Los antgenos end Tween 80, que puede agregarse a casi cualquier tipo de ant
genos o del propio individuo se denominan tambin auto geno, aunque no para uso humano; el adyuvante incompleto
antgcnos. Los antgenos exgenos o xenoantgenos vuel de Freund es similar al anterior, pero no contiene micobacte
ven a dividirse en: heteroantgenos cuando proceden de nas.
organismos de una especie diferente a la del receptor y
homoantgenos o aloantgenos si proceden de un individuo Complementacin espacial antgeno-anticuerpo. Las
perteneciente a la misma especie animal. El hecho de que las fuerzas que permiten la unih antgeno-nticuerpo pueden
sustancias propias sean desconocidas por el mismo organis ser electrostticas, puentes de hidrgeno, hidrfobas y la de
mo se observa con algunas sustancias que no estn en con Van der Waals. Esta fuerzas son ms manifiestas cuanto
tacto con el sistema inmunitario y que se encuentran aisla ms prximos se encuentren el antgeno y el anticuerpo. A
das, como sucede con la tiroglobulina, los espermatozoides pesar de la especificidad que rige para la w1in del antgeno
y el cristalino. Estos componentes, en determinadas circuns con el anticuerpo, debe reconocerse que a menudo se produ
tancias patolgicas, salen de sus barreras naturales y estable cen reacciones cruzadas de anticuerpos con otros antgenos
cen contacto con el sistema inmunitario. De esta manera el que son similares en algunas de sus propiedades o estructu
sistema inmuno los reconoce como extraos y desarrolla ras con el antgeno que ha engendrado dicho anticuerpo.
reacciones contra ellos formando anticuerpos. Esto suele ocurrir cuando se tratan de microorganismos
pertenecientes a distintas especies de un mismo gnero, los
Pueden actuar como heteroantgenos cada una de las que pueden reaccionar con mayor o menor intensidad frente
estructuras de los microorganismos (citoplasma, membrana a un suero preparado contra uno de ellos.
plasmtica, flagelo, capsula, esporo, enzimas, ncleo, toxi
nas, FIGURA 1 l . l ). En los metazoarios, cada tejido y cada REACCIONES SEROLG!CAS
rgano puede presentar antgenos caractersticos. Cada clu
la a su vez e& un mosaico de antgenos diferentes. Es fre Son muchas las metodologas utilizadas para el dia
cuente la existencia de antgenos comunes entre especies gnstico indirecto, a travs de la deteccin y cuantificacin
que son miembros de un mismo gnero y ms raramente de anticuerpos, de las infecciones causadas por los microor
entre gneros de una misma familia y familias de un mismo ganismos. La caracterstica de todas ellas es que no miden
orden. Se llaman antgenos grupo-especficos, los que se exactamente el estado patolgico del hospedador, solamente
encuentran en los microorganismos de un mismo gnero o determinan el tipo de anticuerpos y la cantidad en contra de
grupo y antgenos tipo-especficos si estn presentes en las los posibles agentes microbianos. La interpretacin de las
razas de la misma especie. Por tener el microorganismo un pruebas serolgicas indirectas que miden anticuerpos, de
mosaico de antgenos, los anticuerpos que pueden engendrar pende del conjunto de datos que hacen al cuadro clnico, un
son tambin mltiples. Cuando se produce la unin antgeno solo resultado de anticuerpos en contra de un determinado
-anticuerpo participan varias inmunoglobulinas al mismo microorganismo puede confundir ms que ayudar si no se
tiempo, buscando cada una de ellas unirse con la fraccin interpreta con-ectamente su significado dentro de este con
antignica que le es especfica. texto. A diferencia de las pruebas directas, en las que la
observacin del agente microbiano, pennite asignar con
Coadyuvantes. Son sustancias que se usan mezcladas mayor seguridad la causa del proceso patolgico a un deter
con el antgeno para aumentar la respuesta inmunolgica. minado microorganismo, la pruebas indirectas solamente
Para tal efecto se utilizan sales de sulfato de aluminio y indican la presencia de anticuerpos en contra de un microor

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Pruebas serolgicas indirecta - 1 1 9

:o

Prnzona zona Postmzona

FIGURA 1 1.2: Fenmeno de prozona, zona y pos-zona, en las reacciones de aglutinacin.

ganismo. Al medir solamente anticuerpos, la limitacin de tener un tropismo especfico por diversos rganos y tejidos,
las pruebas indirectas es que indican solamente el contacto del tipo de inmunidad que desarrolla, del tipo de anticuerpos
nica (infeccin) con el microorganismo. Al igual que las pruebas que estimula, que el microbilogo debe saber para poder
) por directas, las indirectas tambin poseen sensibilidad y especi determinar el tipo de pruebas son tiles, en cada caso.
to de ficidad !imitadas, arrojando resultados falsos positivos y Adems es muy importante conocer los periodos de una
com negativos. E! mdico clnico debe considerar estas limitacio enfermedad, para saber en donde buscar al microorganis
lina y nes en el momento de recibir un resultado de anlisis y el mos, bajo que forma evolutiva se encuentra y por lo tanto
ant microbilogo debe saber seleccionar el tipo de prueba a ser que tipo de anticuerpos son expresados. Tambin es funda
tpleto utilizada, priorizando la sensibilidad o la especificidad, de mental interpretar los periodos de latencia o de ocultamiento
mete- acuerdo a la situacin que . se plantee. No obstante las prue de los microorganismos y bajo que circunstancias pueden
bas indirectas son de gran ayuda para el diagnstico micro reactivarse las patologas causadas por los mismos. No es
biolgico. Hoy en da cada vez ms son utilizados los mto posible interpretar los resultados de las pruebas serolgicas
Las dos indirectos por pruebas cada vez mejores, prcticas, sen sin conocer la condicin clnica y demogrfica del paciente,
1eden sibles y especficas, volvindose una rutina en el laboratorio su edad,' si se trata ' de una embarazada, si es un paciente
la de clnico y microbiolgico. De hecho si no fuese por el desa inmunodeprimido, si es un neonato, el tratamiento adminis
uanto rrollo de las pruebas indirectas, muchas de las enfermeda trado al mismo, entre muchos otros detalles. Un aspecto que
po. A des, sobretodo las producidas por los virus, seran imposi debe tenerse bien claro es la finalidad de la prueba serolgi
geno bles de realizarlas en forma prctica y accesible a todo el ca, es decir, si se trata de un diagnstico clnico, una prueba
1rodu mundo. Es responsabilidad del microbilogo la orientacin de tamizaje, un control rutinario, un seguimiento durante el
genos al mdico clnico sobre la interpretacin de los resultados de tratamiento, un control prenatal. Al igual que la pruebas
ructu pruebas sero!gicas, a fin de poder brindar ayuda para un directas, las indirectas deben estar acompaadas de los datos
ierpo. correcto diagnstico clnico. Cada microorganismo tiene una clnicos y demogrficos del paciente, para un correcto mane
ismos forma peculiar de interactuar con el hospedador, de evadir la jo del diagnstico del caso. El laboratorio de microbiologa,
o, los respuesta inmune, de causar determinadas patologas, de debe mantener una comunicacin fluida con la parte clnica,
frente
Esquema de la aglutinacin Aglutinacin en tubos

1 dia
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Ag Ac Aglutinacin
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Aglutinacin sobre lmina ................,..
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FIGURA 1 1 .3.: Diferencias entre la aglutinacin en lmina y la aglutinacin en tubo.

ERRNVPHGLFRVRUJ
120 El laboratorio de microbiologa

Hemaglutinacin vrica

Virin con
hemagluti nina Aglutinacin de hemates de pollo por
GR de pollo accl n del virus

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Inhibicin de la hemagluti nacin con suero especfico
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Suero antivirus Virus bloqueada cuerpos
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FIGURA 1 1 .4: Aglutinaci-n directa de hemates, por virus e inhibicin de la hemaglutinacin, con el agregado de ,
es apaz '.
anticuerpos especficos anti-virus.
Teniendo:":
na, 'c_Uani
es recom
a fin de tener una retroalimentacin continua al respecto las AGLUTINACIN mos cual:l
pruebas serolgicas y su interpretacin en el diagnstico de ,,;,

las distintas enfermedades causadas por microorganismos. En el proceso de la aglutinacin el anticuerpo


No se abordarn aqu las pruebas que miden inmunidad (aglutinina) tiene la propiedad de conglomerar o aglutinar al
celular. La mayora de estas se realizan a travs de pruebas antgeno (aglutingeno) especfico. Los antgenos usados en
cutneas intradrmicas. Cada caso ser explicado en el cap microbiologa son bacterias, hongos y parsitos o parte de
tulo correspondiente para cada microorganismo. La pruebas ellos. Para que la reaccin antgenoanticuerpo sea visible,
serolgicas que se describen a continuacin son las ms es necesario que la proporcin entre ambos sea equivalente.
utilizadas en la rutina de diagnstico microbiolgico. Cuando se hacen diluciones del suero y se lo pone en pre-

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Pruebas serolgicas indirecta - 121

o + +
)l
GR o partcula Antgeno GR o ltex cubierto Anticuerpo Aglutinacin
de ltex por antgeno

FIGURA 1 1 .5: en el proceso de fabricacin del reactivo, los antgenos cuyos anticuerpos en contra de l se pretende
investigar en el hospedador, se adhieren a la superficie de las partculas durante el proceso de incubacin, por inter
medio de fuerzas hidrofbicas, de Van der Waals y puentes de hidrgeno, quedando fuertemente pegados a ella.
Posteriormente en el laboratorio de microbiologa se hace reaccionar el glbulo rojo o las partculas de ltex con el
antgeno adherido y los sueros de las personas. En el caso de que el paciente tenga los anticuerpos, se producir
una aglutinacin visible

sencia de! antgeno en cantidad constante, la zona de equiva en el curso de las enfermedades infecciosas conociendo los
lencia entre el antgeno y el anticuerpo va precedida por una microorganismos o antgenos con los cuales se los enfren
primera zona o prozotia, en donde existe un exceso de anti tan. La reacciones de aglutinacin se utilizan tambin en el
cuerpos y va seguida de otra zona posterior o postzona en la laboratorio de microbiologa para identificar a las microor
cual hay defecto del mismo. Tanto en la prozona como en la ganismos desconocidos, que han sido aislados de cultivos,
postzona, si bien estn presentes antgeno y anticuerpo, no usando el suero aglutinante tipificador. Por ejemplo, en las
se traduce en ningn fenmeno observable (FIGUA 11.2). bacterias Gram negativas de la familia Enterobacteriaceae
se puede notar tres tipos principales de antgenos:
Factores para la aglutinacin. Intervienen en el fen
meno de la aglutinacin factores que pueden acelerar o re l . Antgeno H (flagelar). Es de naturaleza proteica, y
tardar el desarrollo del proceso, como son: ( 1) temperatura, su peso molecular est alrededor de los 20.000 Da. Morfol
cuya ptima es entre 37 C y 56 C por lo general el proceso gicamente est ligado al flagelo, es termolbil, alcohol-lbil
es mucho ms rpido en el lmite superior (45''-56 C); (2) y formoL:,establc; a! aglutinar con su aglutinina especifica
tiempo de incubacin de la reaccin, es ms corto si se forma grumos grandes.
realiza en lminas (2-3 min) y ms largo si es ejecutado en
tubos; (3) pH, su ptimo suele ser el neutro o a veces ligera 2. Antgeno O (somtico). Es principalmente lipo
mente cido; (4) electrlitos, como el cloruro de sodio cuya polisacrido (tambin llamado antgeno de Boivin), cuya
presencia es fundamental en las reacciones de aglutinacin. fraccin lipdica es la txica y la polisacrida es antignica.
La sustancia polisacrida presenta en el gnero Salmone/la
Mtodos de aglutinacin. Existen dos mtodos princi un ncleo comn constituido por 5 hidratos de carbono (D
pales para estudiar la aglutinacin: el procedimiento en glucosa, D-galactosa, D-glucosamina, D-mannoheptosa y 2
lminas y el que se realiza en tubos. En el procedimiento en ceto-3-cido deoxioctnico), el que es modificado por la
lminas, la mezcla antgeno + anticuerpo es homognea al adicin de otros monosacridos que son los que determinan
comienzo, pero al ir ocmTiendo la reaccin se observan la especificidad de cada antgeno O en este gnero de bacte
cmulos de tamao variable. En el procedimiento en tubos, rias. El antgeno O es formol- lbil, termoestable, alcohol
la suspensin del antgeno que es opalescente al inicio, for estable y cuando es puesto en presencia de su aglutinina
ma grumos sedimentados en el fondo del tubo, cuando ocu especfica aglutina en grumos pequeos.
rre la reaccin antgeno-anticuerpo, dejando el lquido so
brenadante general mente claro (FIGURA 11.3). 3. Antgeno K (capsular). Este antgeno ha sido deno
minado K derivado de la palabra alemana Kapsule. Es de
Ttulo de las aglutininas. Se denomina ttulo de agluti naturaleza polisacrida en la mayora de los casos, pero
nacin a la mxima dilucin del suero que las contiene, que existen los de naturaleza proteica corno los expresados en
es capaz de producir la aglutinacin del antgeno especfico. los pilli de algunas enterobacterias y en Bacillus anthracis.
:lo de Teniendo en cuenta que puede existir el fenmeno de prozo El antiguamente denominado antgeno Vi presente en Sal
na, cuando se utilizan sueros aglutinantes de alta potencia, monella typhi y en algunas cepas de Citrobacter en realidad
es recomendable practicar diluciones elevadas de los mis es un antgeno K.
mos cuando se quiere investigar el ttulo correspondiente.
Bacterias pertenecientes a un mismo gnero suelen
.cuerpo Aglutinacin en Bacteriologa. Las primeras descrip presentar antgenos comunes como se observa en las dife
tinar al ciones del fenmeno de la aglutinacin fueron hechas por rentes especies de Salmone/la o de Escherichia. A veces,
tdos en Grbcr y Durham en el ao 1896, pero el uso prctico en el sin embargo, existen antgenos muy similares entre gneros
arte de diagnstico de procesos infecciosos humanos fue preconiza que no tienen ninguna relacin entre si e inclusive que perte
visible, do por Widal al identificar aglutininas especficas en el sue necen a familias muy separadas unas de otras, como es el
,alente. ro de los enfermos. El fenmeno de la aglutinacin se utiliza caso de los gneros Proteus y Rickettsia. La existencia de
en pre- en bacteriologa para identificar anticuerpos desconocidos antgenos similares implica la posibilidad de formacin de

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122 - El laboratorio de microbiologa

Antgeno ter. Sistema Ag-Ac

Complemento

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FIGU
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.' .
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Glbulos rojos de oveja
2.do. Sistema Ag-Ac pocm;

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Reaccin (- ) direct
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Jsi.
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..
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FIGURA 1 1 .6: reaccin de fijacin de complemento. En una primera fase se ponen en reaccin el antgeno (del micro
organismo que se pretende averiguar su infeccin), el suero del paciente (con o sin los anticuerpos en contra del el uso[
antgeno) y una cantidad fija de complemento. Posteriormente se agrega el sistema revelador, o segundo sistema,
que son glbulos rojos de oveja y hemolisinas. Si hubo reaccin antgeno-anticuerpo y se consumi el complemen
nos, q"
to, no habr hemlisis {resultado positivo). En caso contrario, si no hubo unin antgeno-anticuerpo, habr hemlisis
forma \
{resultado negativo).
Los er:
dehid,{
ocurrir
anticuerpos en el curso de las enfermedades infecciosas, que cubre totalmente los dems antgenos bacterianos, inhibien fabrici
tienen la propiedad de aglutinar a cualquiera de las bacterias do la aglutinacin de los antgenos H y O. Otro hecho a citos; ."
que posean dichos antgenos, sea el agente causal o no, co tener en cuenta es el que las colonias rugosas (R) bacteria hemagi.
mo es el caso de las aglutininas anti-Proteus en el curso de nas presentan una alteracin del antgeno O, modificando las corres:d].
las ricketsiosis. reacciones especficas antgeno-anticuerpo por autoag\utina
cin, esto no sucede con las colonias lisas (S), cuyas propie
El antgeno O es constante y relativamente estable (a dades antignicas estn bien conservadas y no autoag\uti
veces puede faltar una fraccin) en las bacterias. El antgeno nan. p_o, CQ,,
H consta en cambio de dos fases, en las cuales una determi (FIG ;
nada bacteria puede presentar antgenos diferentes segn se Diagnstico en enfermedades infecciosas. Despus de de anti
encuentre en una u otra fase. En este fenmeno, denominado aproximadamente l O das de evolucin, en las enfermedades gelosat]
induccin de fases, la presencia de un antgeno en una de las infecciosas, se pueden identificar aglutininas especficas en el I :
fases no significa que se haya perdido el antgeno de la otra, contra los microorganismos que las producen. Las reaccio pneum
sino que persiste oculto. Es imp01tante tener presente que el nes de aglutinacin de Widal (fiebre tifoidea), de Huddleson ,tidis p