MTODO DE ROSSE-GOTTLIER (MOJONNIER)

Es el mtodo de determinacin de grasa en leche y productos lcteos ms

exacto que se conoce, encontrando especial aplicacin en aquellos casos en
los cuales las determinaciones volumtricas no son lo suficientemente exactas,
tal como en el anlisis de helados, quesos, leche evaporadas, condensada y en
polvo. Este mtodo se fundamenta en la extraccin de la grasa con una mezcla
de ter etlico y de petrleo en presencia de amoniaco y etanol. El amoniaco
reduce la acidez y disuelve las protenas, disminuyendo as la viscosidad lo que
a su vez facilita la disolucin de la grasa, adems ayuda a disolver las
partculas de compuestos fosfatados. El alcohol evita la formacin de una
mezcla gelatinosa que tiende a formarse cuando se agita la leche con los
dems reactivos. El ter etlico acta como solvente de la grasa, pero cuando
se utiliza solo, disuelve adems una pequea cantidad de la fase acuosa que
contiene lactosa y otros slidos no grasos; para corregir este defecto se utiliza
ter de petrleo que adems de actuar como solvente de la grasa disminuye la
solubilidad de la fase acuosa en el ter etlico, eliminando as de la mezcla
etrea cualquier componente no graso.
La extraccin se realiza por agitacin de la muestra con los reactivos en un
frasco especial que facilita la decantacin del extracto etreo superior, el cual
se separa arrastrando la grasa disuelta. El extracto etreo se coloca en un
plato de aluminio previamente pesado y tarado, donde por calentamiento en
una plancha elctrica se evapora la mezcla de solventes, seguidamente el
residuo se somete a desecacin al vaco, se enfra en un desecador y se pesa.
El porcentaje de grasa en la mezcla se calcula por diferencia de peso.

Materiales:
Tubos de extraccin de grasa.
Platos de aluminios.
Aparato de Mojonnier
Desecador de vidrio.
Reactivos:
Amoniaco concentrado.
Etanol de 95
ter etlico
ter de petrleo.
Agua destilada.

Procedimiento:
1) Ajustar la temperatura de la muestra a 20C y transferir 10 g con pipeta
gravimtrica a un tubo de extraccin rotulado.
2) Adicionar 1,5 mL de amoniaco (2 mL si la muestra esta cida) y mezclar
bien.
3) Adicionar 10 mL de etanol. Mezclar bien.
4) Agregar 25 mL de ter etlico tapar con un tapn de caucho sinttico y
agitar vigorosamente durante un minuto.
5) Adicionar 25 mL de ter de petrleo y repetir la agitacin vigorosa.
Puede adicionarse unas gotas de solucin de fenoltaleina si se desea
para visualizar fcilmente la separacin de las capas liquidas.
6) Dejar en reposo hasta que el lquido superior se presente claro o
centrifugar.
7) Decantar la fase etrea en un plato de aluminio.
8) Repetir la extraccin de la fase acuosa remanente en el tubo por dos
veces consecutivas, utilizando solamente 5 mL de etanol y 15 mL de
cada solvente orgnico y decantando siempre la capa etrea, la cual se
deja caer sobre el plato de aluminio conteniendo el primer extracto.
9) Evaporar los extractos obtenidos sobre una placa de aluminio a una
temperatura que no provoque proyeccin de la grasa.
10) Desecar en el horno a 135C durante 5 minutos aplicando no menos de
20 pulgadas de vaco.
11) Enfriar el residuo desecado en un desecador hasta que alcance la
temperatura ambiente y pesar rpidamente.
12) Calcular el porcentaje de grasa contenido en la muestra por
diferencia de peso entre el plato de aluminio vaco y con el extracto
graso.