VIRUS.

En el siglo XX se descubrieron los virus como causantes de

enfermedades infecciosas, en las cuales no se haba encontrado otro
microorganismo como responsable.
Las caractersticas que diferencian a los virus de otros microorganismos
son: el tamao, que le permiten atravesar filtros que las bacterias por su
mayor tamao no pueden; y la incapacidad para reproducirse en medios
de cultivos biolgicos en el laboratorio, necesitando para su propagacin
de animales o cultivos celulares.
Caractersticas:
-Los virus poseen solo un tipo de cido nucleico de pequeo tamao con
respecto a otros agentes biolgicos, rodeado por una cpside formada
por numerosas copias de protenas.
-Algunos virus poseen adems, una envoltura lipdica de origen celular
por fuera de la cpside, en la cual se insertan glicoprotenas (espculas).
-No presentan sistema enzimtico propio, por lo cual no son capaces de
replicarse por s solos y requieren de clulas animales, vegetales o
bacterias para cumplir su ciclo de reproduccin (parasitismo celular
obligatorio). Los virus carecen de la maquinaria enzimtica para
autorreplicarse, pero al ser incorporados a una clula viva sensible se
comportan de forma activa y utilizan la maquinaria enzimtica de dicha
clula husped, logrando su replicacin.
-En el momento de la multiplicacin los virus (replicacin viral) no
aumentan su tamao para su posterior divisin, a diferencia de las otras
clulas. La partcula viral se desintegra y luego se sintetiza cada una de
sus componentes que se renen por ensamblaje.
-Los tamaos y formas son variables. Tamao vara desde 28nm hasta
300nm.
-Estructura: Virus desnudos, un solo tipo de cido nucleico (ADN o ARN)
rodeado de cpside (ac.nucleico + cpside = nucleocpside); Virus
envueltos, formados por nucleocpside envuelta por una estructura de
origen celular que lo rodea. En esta ltima se insertan glicoprotenas de
origen viral las cuales tienen la funcin de reconocer receptores de
superficie celular especficos.
-cido nucleico, lleva la informacin gentica y constituye el genoma
viral. Puede ser ADN o ARN.

RETROVIRUS - VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA

Los retrovirus son virus envueltos, con genoma de ARN como material
gentico, pero se replican por medio de un ADN intermediario (del
hospedador) usando la enzima transcriptasa inversa (o reversa). Los
vertebrados son su hospedero.
Pertenecen a la familia Retroviridae. Estos virus tienen un dimetro de
80-120nm, que contienen un nucleocpside enrollada dentro de una
cubierta probablemente icosaedrica. La envoltura contiene glicoprotenas
vricas (espculas) y es adquirida al brotar por gemacin a travs de la
membrana plasmtica de la clula husped.
El genoma del retrovirus tiene dos copias de ARN monocatenario de
polaridad positiva. Todos los retrovirus contienen los siguientes genes y
en el mismo orden: gag-codifica protenas estructurales internas; pol-
codifica transcriptasa inversa, la proteasa y la integrasa; env-codifica
protenas de envoltura.
Virus de inmunodeficiencia humana (VIH).
El VIH produce infeccin/enfermedad denominada Sndrome de
Inmunodeficiencia Adquirido (SIDA), que se caracteriza por una
inmunodepresin progresiva que conduce a infecciones oportunistas,
neoplasias secundarias y manifestaciones neurolgicas.
Desde su aparicin hasta la actualidad, la infeccin por VIH ha dejado de
ser una condicin fatal para convertirse una enfermedad crnica que
puede tratarse, siendo la terapia antiretroviral (TARV) uno de los avances
con mayor impacto sobre estos resultados.
La transmisin del VIH ocurre por el intercambio de fluidos con capacidad
infectante (sangre, semen, liquido preseminal, fluidos vaginales, leche
materna) y las principales vas de transmisin son la sexual 66.3%,
sangunea (compartiendo jeringas u objetos corto-punzantes, por
transfusiones sanguneas es muy bajo por los mtodos de control) 18.1%
y transmisin materno-fetal (transmisin vertical) 1.5%.
Taxonoma:
-familia: Retroviridae
-sub familia: Orthoretrovirinae
-genero: Lentivirus

Existen dos tipos de virus, el VIH 1 y el VIH2. Segn el estudio del gen
env existen tres grupos dentro de VIH 1: grupo M (mayor) es el ms
prevalente a nivel mundial e incluye 11 subtipos denominados de la A a
la K; grupo O; y grupo N (no M/no O). VIH 2 tambin tiene 8 subtipos
denominados de la A a la H, siendo los subtipos A y B los ms
prevalentes.
Estos virus tienen una morfologa pleomorfica o esfrica. Recubiertos por
una envoltura lipdica proveniente de la membrana citoplasmtica de la
clula husped. Dicha envoltura cuenta con 75 espculas aprox.
formadas por glicoprotenas de superficie. Su estructura cuenta adems
con una cpside y una matriz proteica. El core presenta forma de cono
truncado, formado por protenas que contienen en su interior el material
gentico viral, en dos monohebras idnticas de ARN de polaridad
positiva, con cap en su extremo 5 y una cadena poli-adenosina en su
extremo 3 ; un ARN de transferencia y tres enzimas necesarias para la
transcripcin viral: transcriptasa, proteasa e integrasa.
El gen precursor gag es clivado en cuatro proteinas:
-p17-18 para VIH 1 y p16 para VIH2
-una protena mayor parte de la cpside, p24-25 para VIH 1 y p26 en VIH
2
-protena de nucleocpside p7
-protena p6 que an est en estudio
El gen pol codifica proteasa, la transcriptasa reversa y la integrasa.
El gen env codifica la glicoprotena de envoltura:
-glicoprotena exterior gp120; contiene dominios responsables de la
unin del virus a receptores de CD4 de la superficie celular.
-protena transmembrana gp41; fija el complejo glicoproteico a la
membrana viral.

El genoma de VIH tambin contiene otros genes denominados: tat, rev,

vif, nef, vpr y vpu, encargados de la regulacin de la sntesis y de la
organizacin de las partculas virales infecciosas.

Replicacin del VIH.

Los pasos del virus de VIH en el proceso de replicacin comienzan
cuando la partcula viral completa se une, por intermedio de las
glicoprotenas gp120 y gp41, a la clula husped. Este proceso es
mediado por el receptor CD4 y sus co receptores, CCR5 o CXCR4,
presentes en las clulas (LT CD4+, macrfago, monocito, cel.dendritica,
etc.). Luego se fusionan la membrana vrica y celular, permitiendo la
penetracin del virus encapsulado. La cpside se desintegra liberando el
ARN al citoplasma celular y luego se activa la retrotranscriptasa viral,
generando una copia de ADN a partir de ARN viral. El ADN formado se
transporta desde el citoplasma hacia el ncleo de la clula husped y all
se produce la integracin del ADN, copia al ADN celular mediado por la
enzima viral integrasa, pasndose a llamar ADN proviral.
La etapa de transcripcin est controlada por una combinacin de
protenas vricas y celulares, que interactan con los elementos
reguladores del ADN proviral.
Del ncleo salen ARNm que codifica precursores polipeptidicos y que
durante la traduccin producen cadenas de protenas virales, que luego
de ser procesadas conformaran las protenas finales de las diversas
estructuras del nuevo virion.
El ensamblaje del nuevo virion sintetizado se produce en el citoplasma,
donde se forma un complejo entre las dos molculas de ARN viral y las
protenas codificadas por los genes gag y pol.
Estas estructuras salen de la clula por brotacin adquiriendo la bicapa
lipdica de la clula husped, en la que estn insertas las protenas de
superficie y transmembrana. En esta etapa de liberacin se produce la
maduracin del virus, siendo capaces de infectar nuevas clulas.
El alto grado de variabilidad del VIH es una caracterstica relevante de
este virus, que le permite escapar de la respuesta inmune antiviral. La
regin ms variable del genoma es la que codifica las glicoprotenas de
envoltura (evaden el sistema inmune) y la ms constante es la de los
genes gag y pol. La variabilidad se debe a la funcin de la transcriptasa
reversa, quien no corrige los errores durante la retrotranscripcin.

Patogenia.
Las personas VIH+ presentaran anomalas del sistema inmune, dentro
de ellas:
-severa linfopenia, a predominio de LT CD4+
-reacciones de hipersensibilidad cutnea retardada disminuida o ausente
-prdida de la funcin citotxica de las clulas NK
-alteracin funcional de los monocitos
-hipergammaglobulinemia policlonal
Las molculas CD4 sirven de receptor para el VIH, por eso el virus no
solo infecta a los LT CD4+, sino tambin a todas aquellas clulas que
presenten estos receptores (monocitos de sangre perifrica, precursores
de clulas T de la medula sea y timo, y macrfagos tisulares). El virus
acta alterando la funcin global (disminucin funcin y numero) de los
LT perifricos y de las clulas presentadoras de antgeno, e inhibe la
maduracin de los precursores de la medula sea. Todo esto trae como
consecuencia la disminucin de la respuesta inmune del husped, luego
destruccin de la inmunidad y finalmente muerte por infecciones
oportunistas.
Una vez que las partculas virales ingresan al cuerpo, viajan a travs de
las secreciones vaginales o semen, atraviesan las mucosas y all se
encuentran con las CPA. Estas clulas reconocen el antgeno viral y lo
incorporan a su superficie o lo integran por fagocitosis. Los macrfagos
son incapaces de destruir las partculas virales, solo las procesan. Por
tanto, una vez que el virus atraviesa la mucosa puede: quedar dentro de
un macrfago; puede ser presentado a los LT CD4 por las CPA; o puede
adherirse directamente a los LT CD4+ y comenzar a multiplicarse en su
interior.
Los LT CD4+, los macrfagos con virus en su interior o los virus libres se
dirigen a los ganglios linfticos regionales. All, en los centros germinales,
se encuentran las clulas foliculares detrticas que tienen receptores CD4
en su superficie, lugar donde se van a unir las partculas virales libres de
la circulacin. Una vez unidos a estas clulas, podrn ser presentados a
los LT que circulando por la sangre lleguen al ganglio y se contacten con
estas clulas. De esta manera las partculas se diseminan a todo el
cuerpo sembrando varios rganos, sobretodo rganos linfoides como
bazo, ndulos linfticos, amgdalas, etc. Si bien la diseminacin es
sistmica, el blanco fundamental del VIH es el sistema inmune y dentro
de este los LT CD4+. Los LT CD4+ que producen virus tienen una vida
de 1 o 2 das, por lo tanto una vez liberada la partcula viral deber
buscar nuevas clulas con receptor CD4 para infectar y continuar con su
ciclo de replicacin. En la fase aguda el nmero de LT CD4+ decrece en
20-40%.
Se considera que una persona VIH+ est en etapa SIDA cuando tiene
alguna de las 26 complicaciones (infecciones o enfermedades
diagnosticas de estadio SIDA) o tienen un conteo de LT CD4 menor a
200/L. Cuando un paciente entra en este estadio est ms propenso a
adquirir infecciones oportunistas y neoplasias asociadas a esta patologa.
La respuesta inmune que se activa ante la infeccin por VIH es
inicialmente la respuesta celular, y entre las 3 semanas y 3 meses luego
de la exposicin al virus, aparece la respuesta humoral.
Respuesta celular:
-LT CD8+ citotoxicos reconoce la superficie de las clulas infectadas a
travs del MHC I y procede a la destruccin por efecto citolitico directo de
la clula infectada.
-LT CD8+tambien pueden actuar liberando citoquinas que atraen al foco
nuevas clulas defensivas
-LT CD4+reconocen partculas virales presentadas por CPA a travs del
MHC II.
Respuesta humoral:
Los LB reconocen CPA y reaccionan activndose, produciendo
anticuerpos contra antgenos de envoltura, de matriz, nucleocpside viral
y frente a proteinas reguladoras. Si bien el sistema inmune responde con
una respuesta humoral, la rapidez con que el virus elabora partculas
virales hijas con diferentes variabilidades antignicas, permite evadir la
neutralizacin por parte de los anticuerpos. Las gp160 son altamente
variables y al mutar dejan de ser reconocidas por los anticuerpos.
La deteccin de anticuerpos se puede dar a las 2-8 semanas despus de
la infeccin. Los primeros marcadores serolgicos en ser evidenciados
son IgG anti p24 e IgG anti p120, seguidos de IgG anti gp41Durante los
primeros meses de la infeccin existe un aumento de anticuerpos anti
p24 y una disminucin de antgeno p24. Luego de ese tiempo el ttulo de
tales anticuerpos permanece estable.
Luego de la infeccin aguda sigue una fase de infeccin activa
inaparente con duracin de 1-15 aos, en la que el paciente permanece
asintomtico pero con declinacin lenta y progresiva de su sistema
inmune.

Mtodos diagnsticos.
Ventana serolgica: periodo que transcurre desde la adquisicin de la
infeccin por VIH y la presencia de concentraciones detectables de
anticuerpos en sangre.
Sensibilidad: capacidad del test para identificar una muestra positiva
como tal.
Especificidad: capacidad del test para identificar una muestra negativa
como tal.
El diagnstico de la infeccin por VIH se hace por mtodos indirectos,
mediante la bsqueda de anticuerpos contra el virus.
 Pruebas de tamizaje
-ELISA: enzimo inmunoensayo. Es una prueba muy sensible. Detecta
anticuerpos producidos contra todos los tipos de VIH y cubre todos los
subtipos circulantes. Las pruebas de cuarta generacin combinan la
deteccin de anticuerpos de VIH con la deteccin de antgeno viral p24,
para disminuir la ventana serolgica
-Prueba de aglutinacin
-Prueba de enzimo inmuno anlisis (Dot- Blot)
Prueba de confirmacin
A todos los resultados positivos por serologa de tamizaje se le debe
realizar una prueba confirmatoria, por un procedimiento de alta
especificidad, como lo es la prueba de Western Blot. Este consiste en la
separacin de protenas virales por su peso molecular mediante
electroforesis.
Resultado:
Positivo: Presencia de bandas p24, p34 y gp41 o gp120/160
Negativo: ausencia de bandas
Intermedio: cualquier patrn de bandas que no cumpla el criterio de
positivo.

Una prueba de tamizaje + no implica infeccin por VIH. Solo un test

de tamizaje +, ms una prueba de confirmacin +, permite hacer el
diagnostico de infeccin por VIH.

La terapia antiretroviral (TARV) tiene la finalidad de reducir al mximo y

por mayor tiempo la replicacin viral, lo que se objetiva por una
disminucin de la carga viral. Tiene adems como objetivo restaurar o
preservar el sistema inmune de la persona infectada. Su aplicacin ha
disminuido la morbi-mortalidad y ha mejorado la calidad de vida as como
tambin los aos de sobrevida de los pacientes.

Bibliografa utilizada:
Temas de Bacteriologa y Virologa mdica. 3 edicin. Oficina del
Libro. Montevideo, Uruguay. 2008.