Apoptosis Otak

Avelia Iliq

102009131

Avelftcb@gmail.com

Fakultas Kedokteran

Universitas Kristen Krida Wacana

Pendahuluan
Peningkatan radikal bebas dalam tubuh akibat paparan asap rokok dapat menimbulkan
kerusakan sel. Telah diketahui melalui percobaan invivo bahwa oksidan asap tembakau akan
mengurangi tingkat antioksidan intraseluler dalam sel paru. Diperkirakan bahwa tiap hisapan
rokok mengandung bahan oksidan dalam jumlah yang sangat besar. Oksidan tersebut antara
lain aldehyde, epoxide, peroxide, dan radikal bebas lain yang dapat bertahan lama dalam
saluran pernapasan sehingga menyebabkan kerusakan alveoli. Bahan lain seperti nitrit oksida,
radikal peroksil, dan radikal yang mengandung karbon ada dalam fase gas. Radikal bebas
juga dapat dijumpai pada fase tar. Penelitian lain juga menemukan bahwa perokok akan
mengalami peningkatan neutrofil dalam saluran napas bawah yang mempunyai peran pada
peningkatan lebih lanjut kadar radikal bebas (Arief, 2010).
Apoptosis adalah mekanisme biologi yang merupakan salah satu jenis kematian sel
terprogram. Apoptosis digunakan oleh organisme multisel untuk membuang sel yang sudah
tidak diperlukan oleh tubuh. Pada umunya apoptosis berlangsung seumur hidup dan bersifat
menguntungkan tubuh, contohnya pemisahan jari pad embrio. Apoptosis yang dialami oleh
sel-sel yang terletak diantara jari menyebabkan masing-masing jari menjadi terpisah satu
sama lain. Bila sel kehilangan kemampuan untuk melakukan apoptosis maka sel tersebut
dapat membelah secara tak terbatas dan akhirnya menjadi kanker.
Tergantung dengan stimulusnya, apoptosis dapat diinisiasi oleh dua jalur utama yaitu
jalur intrinsic melalui jalur mitokondria dan jalur ekstrinsik baik melalui mediasi reseptor
kematian sel ataupun sebagai respon dari stimulus seperti sitokinin (Shawn, 2005).
 Garcinia mangostana L. merupakan nama latin yang diberikan untuk tanaman manggis
yaitu tanaman buah yang berasal dari hutan tropis di kawasan Asia Tenggara (Malaysia atau
Indonesia). Di Indonesia manggis disebut dengan berbagai macam nama lokal seperti
Manggu (Jawa Barat), Manggis (Jawa), Manggusto (Sulawesi Utara), Mangustang (Maluku)
dan Manggih. Secara umum, kandungan kimia yang terdapat dalam kulit manggis adalah
xanthone,rsinon, flavonoid, dan tannin Senyawa xanthone mempunyai kemampuan sebagai
antioksidan.
Oksidasi adalah jenis reaksi kimia yang melibatkan pengikatan oksigen, pelepasan
hidrogen, atau pelepasan elektron. Proses oksidasi adalah peristiwa alami yang terjadi di alam
dan dapat terjadi dimana-mana tak terkecuali di dalam tubuh kita. Antioksidan bersifat sangat
mudah teroksidasi atau bersifat reduktor kuat dibanding dengan molekul yang lain. Jadi
keefektifan antioksidan bergantung dari seberapa kuat daya oksidasinya dibanding dengan
molekul yang lain. Semakin mudah teroksidasi maka semakin efektif antioksidan tersebut.
Antioksidan didefinisikan sebagai senyawa yang mampu menunda, memperlambat atau
menghambat reaksi oksidasi makanan atau obat.

Materi dan Metode Penelitian

Model yang digunakan

Sampel penelitian yang digunakan adalah tikus betina bunting dipapar asap rokok
selama umur kebuntingan 6-17 hari dan diberi ekstrak kulit manggis.

Rancangan Penelitian
Rancangan penelitian ini adalah rancangan acak lengkap (RAL) dengan asumsi semua
perlakuan dikondisikan sama dari mulai pengambilan persiapan sampel sampai dengan
pengerjaan serta kondisi laboratorium

Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Kandang Hewan Coba Fakultas
Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Surabaya. Dilaksanakan mulai bulan maret 2014
selama 3 bulan.
Materi Penelitian
Bahan yang digunakan adalah ekstrak kulit manggis, rokok, alkohol, formalin, gliserol,
kit apoptag, hormone Pregnant Mare Serum Gonadotropin(PMSG), Hormon Human
Chorionic Gonadotropin (HCG).Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah kotak
paparan asap rokok berupa koks yang dimodikasi dibuat vakumsehingga asap tidak keluar
ruangan untuk mengasap tikus, kandang, spuit, needle 22 G, gunting bedah, scalpel, pinset,
sonde, pipet, dan mikroskop.

Pembuatan Sediaan Ekstrak Kulit Manggis

Bahan ekstrak yang dibutuhkan untuk keperluan penelitian adalah 250 gram serbuk
kulit manggis. Kulit manggis dikeringkan dengan jalan dihamparkan diatas tampah dan
diangin-anginkan selama 1 minggu. Selama proses pengeringan, kulit manggis mengalami
penyusutan berat sebesar 30% sebagai akibat kandungan air yang menguap, dan pada
akhirnya diperoleh berat 1.050 gram. kulit manggis kering dihaluskan dengan menggunakan
alat penghalus blender. Kemudian diayak dengan menggunakan ayakan tepung dan
menghasilkan 420 gram serbuk kulit manggis. Dari 420 gram serbuk biji pepaya yang
digunakan dalam penelitian sebanyak 250 gram, setelah menjadi ekstrak dilakukan
pembuatan suspensi ekstrak kulit manggis dengan menggunakan (Carboxy Methyl Cellulose)
CMC 0,5%.

Membuntingkan Tikus
Tikus betina disuntik dengan hormone Pregnant Mare Serum Gonadotropin (PMSG
atau Foligon) dengand osis 10 UI. Empat puluh jam kemudian disuntik dengan hormone
Human Chorionic Gonadotropin (HCG atau Chorulon) dan langsung dikawinkan dengan
tikus jantan secara monomatting. Tujuh belas jam kemudian dilakukan pemeriksaan vagina
plug. Tikus betina yang positif terlihat vagina plug dihitung umur kebuntingan hari ke nol.

Perlakuan Paparan Asap Rokok dan Ekstrak kulit Manggis

Pada umur kebuntingan hari ke enam, tikus betina bunting dipapar dengan asap rokok.
Cara pemaparan asap rokok yaitu tikus betina bunting dimasukan dalam boks papar yang
sudah disambung dengan rokok yang dibakar dan asapnya dialirkan kedalam boks melalui
selang. Paparan asap rokok diberikan sebanyak 3 batang (Reza, 2012, Tia dkk. 2013).
Tikus bunting dibagi menjadi 5 kelompok. Tiap kelompok terdiri dari 4 tikus bunting.
Kelompok kontrol negatif (K-) adalah tikus bunting yang diberi aquades pada umur
kebuntingan hari ke 6-17 secara peroral. Kelompok kontrol positif (K+) adalah tikus bunting
yang hanya diberi paparan asap rokok pada umur kebuntingan hari ke 6-17. Kelompok
perlakuan I (PI) adalah tikus bunting yang diberi paparan asap rokok dan ekstrak kulit
manggis 50 mg/kg BB pada umur kebuntingan hari ke 6-17 secara peroral. Kelompok
perlakuan II (PII) adalah tikus bunting yang diberi paparan asap rokok dan ekstrak kulit
manggis 100 mg/kg BB pada umur kebuntingan hari ke 6-17 secara peroral. Kelompok
perlakuan III (PIII) adalah tikus bunting yang diberi paparan asap rokok dan ekstrak kulit
manggis 150 mg/kg BB pada umur kebuntingan hari ke 6-17 secara peroral.

Pemeriksaan Luaran Kebuntingan

Tikus didekapitasi pada umur kebuntingan 18 hari. Selanjutnya dipreparasi plasenta,
dikeluarkan fetusnya untuk diamati terjadinya cacat konginental. Pengamatan cacat
konginental meliputi berat fetus, panjang foetus, jumlah jari, kondisi mata, dan kelainan
tulang dengan pewarnaan alizarin.

Pemeriksaan Apoptosis
Preparat otak janin yang telah dibuat pada objek glass dicelup dalam xylol sebanyak
dua kali, alkohol bertingkat (100%, 90%, 80%, 70% dan 30%) dan aquadest secara berurutan.
Selanjutnya dicuci dalam PBS dengan pH 7,4 sebanyak 3 kali masing-masing selama 5
menit. Selanjutnya direndam dalam hidrogen peroksidase (H 2O2)3% selama 5-10 menit.
Direndam dalam 1% BSA dalam PBS selama 10-30 menit pada suhu ruangan. Ditambahkan
antibodi primer apoptag selama 1 jam pada suhu ruangan. Dicuci dalam PBS ph 7,4 selama
3x5 menit. Ditambahkan SA-HRP (Strep Avidin-Horse Radish Peroksidase) selama 30-60
menit pada suhu ruangan. Dicuci dalam PBS pH 7,4 selama 3x5 menit. Ditambahkan
Cromogen DAB (3,3-diaminbenzidine tetrahydrochloride) selama 10-20 menit. Dicuci dalam
aquadest selama 3x5 menit pada suhu ruangan kemudian ditambahkan dengan counterstain
methyl green selama 3 menit. Dilakukan mounting dengan entellan. Pengamatan dilakukan
dengan menggunakan mikroskop pada perbesaran 40, 100, 400 kali. Penentuan sel tropoblast
yang mengalami apoptosis dapat diketahui dari perubahan warna kecoklatan pada sel plasenta
dibandingkan dengan kontrol dengan menskoring preparat yang positif mengalami apoptosis
dan menskoring intensitas warnanya menggunakan.1

Pengantar
 Anestesiologi adalah spesialisasi muda dan berkembang. Efek tertunda anestesi yang
tidak baik karena intervensi potensial tidak dapat dipelajari secara langsung pada manusia.
Anestesi untuk operasi obstetri dan pediatrik adalah tidak dapat dihindari sebagai ibu hamil
dan bayi baru lahir hadir dengan kondisi yang mengancam jiwa yang membutuhkan
pembedahan atau tinggal berkepanjangan di unit perawatan intensif. Meskipun,
perkembangan otak dimulai selama trimester terakhir kehidupan intrauterin, otak manusia
belum sepenuhnya berkembang pada saat lahir dan terus tumbuh selama beberapa tahun
pertama kehidupan postnatal. Sebuah pencarian literatur secara acak dilakukan menggunakan
pencarian kata apoptosis, anestesi umum, dan otak berkembang 1979-2011 untuk efek
anestesi umum pada otak berkembang di PubMed dan literatur dipublikasikan secara relevan.

Sejarah

Anak-anak kecil terkena singkat, anestesi tunggal tidak menunjukkan bukti efek
samping jangka panjang pada otak, menurut sebuah studi Denmark yang baru. Studi pada
hewan muda dan primata manusia telah menunjukkan bahwa beberapa kelas anestesi umum,
pada konsentrasi dalam kisaran yang digunakan untuk anestesi, membunuh sel-sel, dan
menghasilkan neurodegeneration, ketika otak berkembang. Penerapan data hewan ke manusia
menjalani anestesi awal kehidupan masih belum pasti, sebagian karena kesulitan dalam
membedakan paparan anestesi dan patologi pada hewan untuk efek klinis yang bermakna
pada pasien, namun data tidak dapat diabaikan.

Fisiologi synaptogenesis

Hal ini juga diketahui bahwa semua elemen kunci dari pembangunan saraf terjadi
selama tahap awal perkembangan otak, yang merupakan waktu kerentanan yang besar. Pada
tahap awal ini, penghalang darah-otak (Blood-Brain Barrier) tidak lengkap, memungkinkan
akses ke otak untuk zat yang biasanya akan dicegah. Neurogenesis, gliogenesis, dan
synaptogenesis terjadi pada tingkat yang tinggi dengan migrasi, pembentukan sinaps,
diferensiasi, dan pematangan sel-sel saraf. Proses synaptogenesis tergantung pada sinyal saraf
yang konstan, komunikasi, dan pengolahan umpan balik. Sebuah persentase yang sangat kecil
neuron yang tidak membuat koneksi bermakna dan umpan balik selama synaptogenesis
dianggap berlebihan dan ditakdirkan untuk mati melalui proses pemangkasan alami
apoptosis, atau bunuh diri saraf, proses ini disebut sebagai kematian sel terprogram.
 Para neurotrophins, sebuah keluarga faktor pertumbuhan yang terdiri dari faktor
pertumbuhan saraf (NGF), yang diturunkan dari otak faktor neurotropik (BDNF), dan faktor
neurotropik (NT-3, NT-4, dan NT-5), yang dikenal untuk mendukung kelangsungan hidup
neuron , diferensiasi, dan beberapa bentuk plastisitas sinaptik dan oleh karena itu memainkan
peran penting dalam synaptogenesis dari otak mamalia. Sistem transduksi sinyal yang
memediasi fungsi biologis beragam neurotrophins diawali melalui dua kelas yang berbeda
dari reseptor membran plasma. Mereka adalah tropomyocine reseptor kinase (TRK) reseptor
dan reseptor P75 neurotropik (P75ntr). Data saat ini menunjukkan bahwa fungsi fisiologis
utama P75ntr tidak hanya pengaturan aktivasi reseptor Trk dan sinyal tetapi juga aktivasi Trk-
independen kaskade transduksi sinyal. Kaskade Kedua Trk-tergantung dan Trk-independen
memodulasi aktivasi atau fosforilasi kinase kinase-B protein (PKB) serin / treonin, faktor
penting dalam kelangsungan hidup jalur utama neuron. The neurotrophins disintesis dan
dilepaskan oleh neuron dan kedua biosintesis dan sekresi tergantung pada aktivitas neuronal.
Depresi yang luas dari aktivitas neuronal dapat mengganggu kelangsungan hidup-
mempromosikan sinyal yang diatur oleh neurotrophins dan klinis digunakan untuk
mempromosikan apoptosis.

Mekanisme Neuroapoptosis

Berdasarkan karya Ikonomidou et al dan pekerjaan orang lain selama beberapa tahun
terakhir, diterima secara luas bahwa anestesi umum sering digunakan mempotensiasi
transmisi melalui penghambatan gamma-amino-asam butirat jenis A (GABA A) reseptor dan
transmisi rangsang berkurang melalui N-methyl-D-aspartic acid (NMDA) reseptor glutamat
di puncak synaptogenesis menyebabkan neurodegeneration apoptosis luas. Selanjutnya,
berdasarkan studi oleh Jevtovic-Todorovic et al, ternyata paparan anestesi umum di puncak
synaptogenesis menyebabkan pembelajaran yang signifikan dan kekurangan memori
kemudian hari dalam hidup dibandingkan dengan kelompok kontrol, dan semakin
memperlebar jurang di masa dewasa.

Pada orang dewasa, GABA A reseptor aktivasi menyebabkan masuknya ion klorida
(Cl-) ke dalam sel. Hal ini menyebabkan hyperpolarization dan dapat menyebabkan
pelindung saraf dalam banyak model hipoksia dan iskemia. Namun, dalam perkembangan
otak, terutama selama synaptogenesis, konsentrasi intraseluler Cl-tinggi, aktivasi GABA hasil
reseptor A Cl-penghabisan dan depolarisasi dari kenaikan neuron. Oleh karena itu,
depolarisasi-dimediasi dalam konsentrasi kalsium intraseluler mencapai tingkat yang dapat
berbahaya bagi sel, yang menunjukkan bahwa tindakan excitotoxic GABA A dapat
menyebabkan cedera saraf. Ketidakseimbangan antara input rangsang dan penghambatan
dalam sistem saraf pusat selama synaptogenesis dapat memicu apoptosis dan perubahan
morfologi duri dendritik

Persiapan Umum Anestesi diinduksi Apoptosis Neuronal

Apoptosis terjadi melalui jalur biokimia yang berbeda mengakibatkan aktivasi caspase
efektor sebagai langkah terakhir. Jalur adalah:

Intrinsik jalur atau mitokondria tergantung jalur

Ekstrinsik jalur atau reseptor-dependent jalur
Neurotropik tergantung faktor jalur
Sel saraf jalur bergantung atau penghapusan sel saraf

Intrinsik jalur atau mitokondria tergantung jalur

Jalur intrinsik atau mitokondria melibatkan regulasi bawah dari protein apoptosis anti
dari keluarga (B-sel limfoma-2)-2 BCL super (ex: bcl-x 1), menghasilkan peningkatan
permeabilitas membran mitokondria dengan peningkatan pelepasan sitokrom-c ke dalam
sitoplasma. Hal ini pada gilirannya mengaktifkan caspas-9 dan caspas-3 yang mengakibatkan
kematian sel apoptosis neuronal. Sebuah studi pada otak tikus, 7 hari setelah usia pasca
kelahiran oleh Yon et al, menemukan bahwa mitokondria-tergantung cascade akan diaktifkan
dalam waktu 2 jam dari paparan anestesi umum

Jalur Ekstrinsik atau reseptor- tergantung jalur

Jalur ekstrinsik atau reseptor-tergantung jalur diaktifkan oleh aktivasi reseptor

kematian yang melibatkan pembentukan yang merangsang kematian sinyal kompleks (DISC),
hal ini mengandung Fas (Fas: Legenda / reseptor, protein transmembran, anggota dari tumor
necrosis factor keluarga juga dikenal sebagai CD95). Hasil pembentukan DISC dengan
peraturan dari tingkat protein Fas dan aktivasi caspas-8 yang mengaktifkan caspas-3,
mengeksekusi kematian sel. Berdasarkan waktu, ternyata anestesi umum diinduksi aktivasi
dari jalur intrinsik terjadi sebelum aktivasi jalur ekstrinsik.

Neurotropik tergantung faktor jalur

 Lu et al. bukti yang disajikan bahwa anestesi umum klinis digunakan atau diberikan
pada puncak perkembangan otak biasanya 7 hari dari usia postnatal pada tikus yang
menyebabkan kerusakan neuroapoptotic di otak berkembang melalui otak, faktor neurotropik
yang diturunkan (BDNF) kaskade apoptosis dimodulasi. Mekanisme rangkap bermain di
induksi anestesi jalur neurotrophin-dimediasi apoptosis, satu melalui Trk-dependent dan
kaskade apoptosis kedua Trk-independen atau P75ntr-dependent. Pentingnya jalur baik
tampaknya menjadi wilayah otak tertentu. Dalam thalamus, anestesi menyebabkan penurunan
tingkat protein BDNF dan diaktifkan PKB tingkat, tanpa efek pada tingkat P75ntr dan
mengakibatkan aktivasi caspase-9 dan caspase-3, yang mengarah ke neurodegeneration
apoptosis. Di sisi lain dalam korteks serebral, anestesi menyebabkan peningkatan kadar
BDNF sekaligus mengurangi tingkat PKB diaktifkan dan meningkatkan caspase-9 dan
caspase-3, menunjukkan aktivasi kaskade Trk-independen dan P75ntr-dependent.

Sel saraf jalur bergantung atau penghapusan sel saraf

Sebuah pertanyaan penting tentang penghapusan anestesi umum neuron diinduksi

adalah ketika neuroapoptosis dari perkembangan otak permanen atau ketika itu hanya sebuah
fenomena sementara dan reversibel. Studi terbaru tentang otak terkena anestesi klinis yang
relevan di puncak synaptogenesis (biasanya 7 hari kehidupan postnatal pada tikus dan 35-40
hari pada babi guinea) menunjukkan penurunan yang signifikan dalam kepadatan saraf di
semua wilayah kortikal dan subkortikal otak rentan. Meskipun pemangkasan fisiologis
neuron berlebihan umumnya diamati dalam otak mamalia berkembang, hanya sebagian kecil,
biasanya kurang dari 1% dengan beberapa variasi regional. Memprihatinkan adalah
kenyataan bahwa anestesi umum klinis yang relevan sangat membahayakan kelangsungan
hidup neuron yang berkembang, mengarah ke peningkatan yang mengkhawatirkan dalam
penghapusan saraf. Meskipun pemeliharaan nilai gas darah normal termasuk saturasi oksigen
arteri, tekanan darah, dan gula darah ke seluruh administrasi anestesi, neuron dewasa
mengalami apoptosis yang signifikan.

Klinis Relevansi

Sebelum data hewan yang dipublikasikan, beberapa studi kohort manusia telah
menunjukkan adanya hubungan antara operasi besar pada periode neonatal dan hasil
perkembangan saraf yang buruk. Bayi prematur yang menjalani laparotomi memiliki hasil
perkembangan saraf yang lebih buruk dibandingkan dengan kontrol berimbang dan anak-
anak lahir dengan atresia esofagus telah meningkat secara jangka panjang pada masalah
pembelajaran emosi dan perilaku dibandingkan dengan populasi umum.

Baru-baru ini, Wilder et al, menggunakan kelompok kelahiran yang didirikan besar
dan dipelihara di Mayo Clinic. Melihat anak-anak yang menjalani operasi atau tidak sebelum
usia 4, mereka menemukan risiko ketidakmampuan belajar meningkat pada anak yang telah
menerima jumlah anastesi. Menariknya, tidak ada bukti untuk peningkatan risiko asosiasi
setelah hanya satu ekposur. Hubungan antara cacat dan beberapa eksposur untuk anestesi
bertahan ketika penyesuaian dibuat untuk penyakit kronis.

Di Maggio et al, melakukan studi kohort menggunakan York catatan Negara Bagian
New bantuan medis membandingkan anak-anak yang mengalami perbaikan hernia sebelum
usia 3 cocok dengan mereka yang tidak menjalani operasi. Setelah disesuaikan untuk
beberapa faktor perancu potensial, mereka menemukan anak-anak yang memiliki perbaikan
hernia dua kali risiko diagnosis gangguan perilaku atau perkembangan. Menggunakan
kelompok kelahiran Mayo, Sprung et al, dibandingkan anak-anak yang lahir dengan operasi
caesar di bawah anestesi umum, dengan mereka yang lahir dengan persalinan sesar di bawah
anestesi regional dan mereka yang lahir dengan persalinan vagina. Mereka menemukan
bahwa anak-anak dilahirkan oleh persalinan sesar di bawah anestesi regional memiliki risiko
kurang dari kesulitan belajar daripada mereka yang lahir dengan persalinan pervaginam dan
tidak ada perbedaan antara mereka yang lahir melalui bedah caesar di bawah anestesi umum
dan kelahiran pervagina. Namun, alasan untuk ini tidak jelas.

Keterbatasan dengan bukti klinis

Hal ini sangat sulit untuk menginterpretasikan data klinis dari penelitian ini. Hal ini
sebagian karena data hewan tidak bisa tepat menginformasikan usia paparan, yang
penting, durasi anestesi mungkin menyebabkan cedera dan hasil yang paling mungkin
relevan dengan anestesi
Pengujian anak pada usia dini hanya akan mendeteksi masalah-masalah neurologis
utama dan tes psikometri pada anak-anak miskin memprediksi hasil akhir. Studi
prospektif memakan waktu beberapa tahun dan dapat menderita kerugian untuk
menindak lanjutinya. Studi retrospektif mungkin lebih cepat, tetapi paparan tidak
dapat dikendalikan dan / atau data dari pemaparan mungkin tidak lengkap, dan teknik
anestesi mungkin sudah ketinggalan zaman
 Masalah terbesar, bagaimanapun, bahkan lebih membingungkan. Anestesi biasanya
terkait dengan operasi atau prosedur diagnostik. Operasi dapat mengakibatkan stres
inflamasi atau humoral yang mungkin mempengaruhi hasil sendiri. Pembedahan juga
dapat berhubungan dengan septik, metabolisme, hemodinamik, peristiwa pernapasan,
dan sangat mungkin untuk memiliki patologi, yang juga akan mempengaruhi hasil
neurobehavioral. Bayi yang memerlukan operasi mungkin prematur atau memiliki
kelainan genetik atau kromosom, yang semuanya dapat dikaitkan dengan
keterlambatan perkembangan
Pentingnya setiap neurotoksisitas anestesi terkait mungkin bahkan lebih sulit untuk
mengungkap ketika kita mempertimbangkan manfaat potensial dari anestesi. Hal ini
ditetapkan bahwa bayi menjalani operasi besar yang memiliki anestesi tidak memadai
atau analgesia memiliki hasil yang lebih buruk. Hal ini diduga bahwa operasi dan
hasil nyeri pada metabolisme yang berbahaya, imunologi, dan tanggapan humoral
yang bisa setidaknya sebagian dikurangi dengan anestesi memadai dan analgesia

Kemajuan Praklinis dalam Pencegahan Apoptosis

Akhir trimester ketiga anestesi harus dikurangi atau dihindari. Waktu operasi mungkin
menjadi pertimbangan penting. Terutama pada anak-anak yang sangat muda, apa saja yang
dapat ditunda sampai setelah lonjakan pertumbuhan otak harus ditunda, jika menunggu tidak
berarti risiko tambahan untuk pasien. Manajemen anastesi harus dibuat sederhana dan dosis
harus serendah mungkin. Olney et al. telah mengusulkan bahwa efek obat anestesi pada janin
dan bayi baru lahir g-aminobutyric acid dan N-methyl-D-aspartic acid reseptor menyebabkan
translokasi protein Bcl-2-terkait untuk membran mitokondria, yang menyebabkan kaskade
apoptosis. Jika kita bisa mengganggu kaskade apoptosis pada abnormal menghambat neuron,
kita mungkin dapat mencegah induksi anestesi apoptosis neuronal. Beberapa cara untuk
melakukan ini, ditemukan pada hewan laboratorium adalah:

Melatonin

Melatonin adalah sebuah hormon yang dikeluarkan oleh kelenjar pineal pada malam
hari, ditunjukkan untuk memodulasi kaskade mitokondria-dependent apoptosis in vitro,
melalui penghambatan jalur mitokondria-dependent apoptosis sampai mengatur tingkat
protein bcl-xL dan mengatur turunnya kadar protein sitokrom c, dan dengan demikian
mencegah induksi anestesi degenerasi neuronal apoptosis.
 Beta-estradiol

Beta-estradiol adalah hormon steroid terbukti memainkan peran penting dalam

regulasi sampai tingkat PKB terfosforilasi, sehingga mengatur kegiatan caspas-9 dan caspas-
3 akhirnya melindungi kematian sel apoptosis terhadap anestesi ,dengan menawarkan klinis
dicapai dan berpotensi berguna untuk pencegahan strategi.

l-karnitin

l-karnitin merupakan turunan l-lisin dan peran utamanya terletak pada pengangkutan
asam lemak rantai panjang ke dalam mitokondria untuk memasuki siklus -oksidasi dan
netralisasi produksi acylCoA beracun dalam mitokondria, yang berkorelasi dengan proses
patologis berbagai penyakit termasuk berbagai SSP seperti penyakit neurodegenerative. Bax
adalah protein proapoptotic, protein pori yang membentuk sitoplasma yang translocates ke
membran mitokondria bagian luar, mempengaruhi permeabilitas dan menginduksi sitokrom-c
rilis dari ruang intermembrane dari mitokondria ke sitosol, kemudian mengarah ke kematian
sel. Anestesi kombinasi nitrous oksida (75%) dengan isoflurane (0,55%) menghasilkan
regulasi-up yang signifikan terhadap protein Bax dibandingkan dengan yang kontrol,dan
efek ini diblokir oleh coadministration l-karnitin (300 atau 500 mg / kg) sehingga melindungi
sel saraf.

Xenon

Pretreatment dengan xenon dicegah nitrous oxide dan isoflurane-induced

neuroapoptosis (in vivo dan in vitro) dan penurunan kognitif (in vivo). Pretreatment Xenon
meningkat Bcl-2 ekspresi dan penurunan kedua rilis sitokrom-c dan protein 53 (P53)
sehingga mencegah ekspresi degenerasi saraf.

Lithium

Lithium dikembalikan terfosforilasi ERK1 / 2 tingkat (tetapi tidak Akt) dan mencegah
cedera ketamin-propofol dan induksi. Bagaimanapun hal ini perlu dicatat bahwa aktivasi dari
ERK1 / 2 ditunjukkan hanya dengan dosis yang lebih tinggi dari lithium (6 mg / kg) yang
dipelajari. Meskipun 3 mg / kg tidak menghambat apoptosis, efeknya vis--vis ERK1 / 2
aktivasi masih harus didefinisikan.
 Dexmedetomidine

Dalam dosis dexmedetomidine vivo ketergantungan dicegah induksi isoflurane cedera

di hippocampus, thalamus, dan korteks. Isofluran yang dinduksi dalam waktu jangka panjang
menyebabkan gangguan memori. Defisit neurokognitif dicegah dengan pemberian
dexmedetomidine, yang juga menghambat induksi isoflurane caspase-3 ekspresi dalam
Organotypic dan dalam hippocampal in vitro.

Erythropoietin

Erythropoietin juga menunjukkan bukti terhadap N-methyl-D-aspartic acid

neurotoksisitas antagonis reseptor pada neonatus tikus ratand dan hipoksia-iskemik tikus
neonatal yang terluka.2

Mungkin anda tidak tahu kalau tubuh anda setiap saat berganti. Proses pertumbuhan pada
dasarnya bukanlah pengembangan sel atau pertambahan sel, tapi penggantian sel. Kecuali sel
otak, sel lain di tubuh anda sekarang sudah sepenuhnya berbeda dengan sel yang anda miliki
saat anda bayi. Semua sel waktu anda bayi sudah mati dan digantikan dengan sel-sel baru
seiring bertambahnya waktu.

Kematian sel ini adalah hal yang wajar. Jika tidak, kamu akan merasa kesulitan dengan tidak
berfungsinya sel, katakanlah sel kaki, karena ia sudah terlalu tua. Biologi menyebut kematian
sel sebagai apoptosis.

Apoptosis sudah terprogram secara genetik pada inti sel sendiri. Seperti halnya manusia, sel
juga akhirnya tua dan mati. Apoptosis mendasar bagi pertumbuhan normal, fungsi sistem
kekebalan tubuh dan pencegahan kanker. Yup, kanker sendiri adalah pertumbuhan sel yang
terus menerus. Jika sel ini tidak mati, maka kita bisa terkena kanker.

Tapi selama ini para ilmuan tidak mampu mengamati langsung saat-saat sekaratnya sel. Hal
ini disebabkan oleh keterbatasan teknologi mikroskop. Bukan berarti mikroskop tidak mampu
melihatnya, hanya saja, mikroskop tidak mampu melihat semuanya, depan belakang kiri
kanan atau isi tubuh sel saat ia sekarat. Mampu mengamati secara total adalah penting bagi
ilmuan karena hal ini dapat menambah pengetahuan kita mengenai perubahan struktur sel
mahluk hidup.
Dan ini pun terjawab sudah hari ini. Sebuah laporan penelitian baru saja diterbitkan oleh
jurnal ilmiah Proceedings of the National Academy of Sciences, mengenai pengamatan
pertama kalinya kejadian apostosis secara totalitas. Para ilmuan Universitas Buffalo berhasil
mengembangkan pendekatan pencitraan biofotonik yang mampu memonitor perubahan
makromolekul sel di saat sel tersebut mati.

Apa manfaat praktisnya? Tentu saja ada manfaat kedokteran. Sebagai contoh, dengan
mengetahui secara detil proses apoptosis, ahli farmasi dapat mengembangkan obat yang
molekulnya hanya menyerang bagian tertentu sel kanker, bukannya menyerang seluruh sel
kanker. Penyerangan ini dapat lebih fokus dan berarti lebih efektif dan efisien.

Profesor kimia, fisika, teknik listrik dan medis, prof Paras N Prasad, PhD, yang juga direktur
Lembaga Laser, Fotonik dan Biofotonik Universitas Buffallo mengatakan Teknologi ini
memberi kita peta dinamis perubahan apa saja yang terjadi di dalam sel pada taraf molekul. Ia
memberi kita gambaran yang sangat jelas secara visual mengenai dinamika protein, DNA,
RNA dan lemak (lipid) saat sel meluruh.

Untuk berhasil menangkap citra molekuler sel, tim lintas disiplin universitas Buffallo, yang
mencakup ahli biologi, ahli kimia, dan ahli fisika, yang dipimpin oleh Prasad, melakukan
rekayasa dengan pendekatan biofotonik canggih. Pendekatan ini melibatkan tiga teknik
sekaligus: sistem pencitraan optik non linier (CARS Coherent Anti-stokes Raman
scattering), Fluoresensi tereksitasi dua foton (TPEF Two Photon Excited Fluorescence)
yang mencitrakan jaringan dan sel dengan penetrasi dalam dan Pemulihan fluoresensi pasca
fotobleaching (FRAP Fluorescence Recovery After Photobleaching) yang mengukur
dinamika protein.

Lebih canggihnya lagi, dalam satu scan, empat citra dapat diperoleh, yang mencirikan
persebaran protein, DNA, RNA dan lipid dalam sel. Demikian kata profesor Aliaksandr V
Kachynsky PhD, salah seorang anggota tim Prasad.

Empat citra ini kemudian dapat disatukan menjadi satu citra saja, dengan empat warna yang
mencirikan biomolekulnya. Dalam contoh gambar resmi yang dapat anda lihat di atas, merah
menunjukkan protein, hijau menunjukkan RNA, biru menunjukkan DNA dan abu-abu
menunjukkan lipid. Gambar ini hanyalah satu screen shot saja dari hasil pencitraan yang
diperoleh. Gambar ini merupakan cover jurnal PNAS edisi terbaru.
Salah satu informasi baru yang diperoleh dari teknologi ini adalah kecepatan peluruhan
protein di inti sel. Sebelum apoptosis terjadi, persebaran protein relatif seragam. Saat
apoptosis terjadi, struktur inti meluruh, protein menjadi kacau dan tingkat difusinya
melambat. Demikian kata profesor Artem Pliss PhD, anggota tim Prasad lainnya.

Lebih jauh, profesor Andrey Kuzmin PhD, salah satu anggota tim, sedang menyusun laporan
baru mengenai perkembangan yang diperoleh tim ini, dan akan diterbitkan di jurnal ilmiah,
Biophysical Journal.

Pendanaan atas penelitian ini disediakan oleh beasiswa Yayasan John R. Osei. Penelitian ini
sendiri merupakan bagian dari program penelitian strategis Universitas Buffallo 2020, dalam
bidang Sistem Struktur Nano Terintegrasi.

Daftar Pustaka

1. Afifah, Annise Proboningrat, Fardhan Setyo Alamsyah, et al. (2011) The Effect Of
Mangosteen Peel Extract On Pregnant Rats Exposed To Cigarette Smoke Againts The
Congenital Defects And Placentasl Apoptosis. Journal of PKMP manggis.
2. Septiana Widyasari. (2013) Effect of General Anesthetics on the Developing Brain.
Journal reading anestesi.
3. Pliss, A., Kuzmin, A.N., Kachynski, A. V., Prasad, P.N., 2010. Biophotonic probing of
macromolecular transformations during apoptosis Proceedings of the National
Academy of Sciences, 2010; 107 (29): 12771-12776.