Seales de direccionamiento

de protenas I

Dra. Leonor Roguin

Qumica Biolgica Superior
 Premio Nobel de Medicina 2013

J Rothman, Yale University R Schekman, California Univ T Sudhof, Standford Univ

 Vas de trnsito de protenas

Protein targeting or Protein sorting: envo de una protena a su destino celular

Seales de direccionamiento de protenas

Secuencias seal (sorting signals or

signal sequence)
 Seales de direccionamiento de protenas

Secuencias seal (20-50 aa)

secuencias N-terminal
secuencias internas
secuencias conformacionales (signal patch)

Secuencias seal N-term de algunas protenas que translocan

al retculo endoplsmico
 Direccionamiento de protenas al retculo endoplsmico

SRP (Signal Recognition Particle) : Partcula de reconocimiento de la seal

Secuencias seal para el direccionamiento de protenas al ncleo

Seales de localizacin nuclear (NLS:Nuclear

Localization Signals): pueden estar
localizadas en cualquier lugar de la secuencia de
aminocidos (N-term, C-term o secuencias internas)

El transporte es bidireccional:

Importacin Exportacin

Histonas Subunidades ribosomales

Polimerasas asociadas a RNA
Factores de transcripcin
Secuencias seal para el direccionamiento de protenas al ncleo

NLS: Nuclear Localization Signal

 Secuencias seal para el direccionamiento de protenas al ncleo

Se transportan protenas totalmente = importina

plegadas o partculas ya ensambladas

El receptor de importacin se asocia y

disocia a repeticiones Phe-Gly en
protenas de los poros nucleares

Los complejos viajan a travs de

poros nucleares. La hidrlisis de GTP
en el citosol provee la direccin del
transporte.
Secuencias seal para el direccionamiento de protenas a la mitocondria

Ejemplo de secuencias conformacionales N-term

Hlice anfiptica

(B)

(A)

(C)

(A) y (B) Secuencia seal N-term de una subunidad de la citocromo

oxidasa (protena de la membrana interna mitocondrial) . Esta protena
tambin tiene una secuencia interna hidrofbica para insertarse en la
membrana

(C) Unin de la secuencia seal de la alcohol deshidrogenasa (protena

de la matriz mitocondrial) a su receptor
Direccionamiento de protenas a la matriz mitocondrial

La hidrlisis de ATP y
el potencial de membrana
dirigen las protenas a la matriz

++++++
----------
 Direccionamiento de protenas a la matriz mitocondrial

Ver complejidad del complejo Tom (translocasa de la membrana externa mitocondrial)

y Tim (translocasa de la membrana interna mitocondrial)

La Hsp70 de la matriz se disocia cuando se hidroliza ATP y hace ciclos de unin

al pptido
 Transporte vesicular

Va secretoria (exocitosis): se inicia en el RE, pasa por el Golgi y

termina en la MP, con desvos hacia endosomas y lisosomas
Va endoctica: se inicia en la MP y termina en lisosomas, con rutas
de reciclaje a la MP ( )
Va recuperacin: desde endosomas pasa al Golgi y/o RE
Diferentes tipos de vesculas revestidas (coated vesicles)

El transporte vesicular es selectivo

Seleccionar la protena carga

Cubiertas proteicas (coats)
Dar forma a la vescula
 Estructura de la clatrina

Vas endoctica/secretoria

triskelion
 Formacin de una vescula revestida con clatrina

El ensamble de la cubierta de clatrina favorece la curvatura de la membrana

Las protenas adaptadoras se ubican entre la clatrina y la membrana
Estas protenas seleccionan receptores que capturan las protenas cargo
Protenas adaptadoras (Adaptor Proteins) en vesculas revestidas con clatrina

Seleccionan los receptores cargo

Unin de clatrina

Seleccin de la protena cargo

Las ears / tambin reclutan protenas accesorias

Robinson & Bonifacino, Current Opinion in Cell Biology, 13:444-453, 2001

 Protenas adaptadoras

Seleccin de la protena cargo

Secuencias seal Protenas adaptadoras

Tyr-X-X- (YXX ) AP-1, AP-2 ()

Asn-Pro-X-Tyr (NPXY) AP-2 (), ARH, Dab2

Leu-Leu (LL o diLeu) AP-1, AP-2 ( y/o )

Clatrina + AP1 TGN a endosomas

Clatrina + AP2 Membrana plasmtica a endosomas

(ARH/Dab2) (internalizacin)

Bonifacino & Traub, Annu. Rev. Biochem, 72:395447, 2003

 Protenas adaptadoras

Clatrina
+ ++ ++ --

YXX YXX YXX YXX

diLeu diLeu diLeu
NPXY (no)
AP-3/4 TGN a endosomas/
lisosomas
Braulke & Bonifacino, Biochimica et Biophysica Acta, 1793: 605614, 2009
 Protenas adaptadoras

Clatrina + GGA TGN a endosomas

Secuencias seal Protena adaptadora

cluster de aminocidos cidos / Leu-Leu (DXXLL) GGA (VHS)

Robinson & Bonifacino, Current Opinion in Cell Biology, 13:444-453, 2001

 Protenas adaptadoras

Clatrina + AP1 TGN a endosomas

Clatrina + GGA TGN a endosomas

Por qu diferentes protenas adaptadoras?

Seleccin de diferentes protenas cargo

Direccionamiento a distintos compartimientos

Diferentes compartimientos dadores

Distintas direcciones
Endocitosis mediada por receptor de la LDL
 Receptores normales y mutantes de LDL

Asn-Pro-X-Tyr (NPXY): seal del receptor de LDL que interacta con ARH o Dab2
 Descubrimiento del receptor de LDL

Hipercolesterolemia familiar
Joseph L. Goldstein (left) and Michael S.
Falta de receptores Brown. Nobel Prize in Physiology or
Receptores mutantes (>1100) Medicine on October 15, 1985

Hipercolesterolemia autosmica recesiva

Mutaciones en ARH (Autosomal Recessive Hypercholesterolemia)

Joseph L. Goldstein; Michael S. Brown. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2009;29:431-438
Garuti et al, JBC 280: 40996-41004, 2005
 Endocitosis de transferrina mediada por receptor

YXX seal de internalizacin del receptor de transferrina (AP2)

V, L, I, M, F

Recordar que YXX tambin es seal para el direccionamiento desde TGN

(endosomas, lisosomas)
Estructura del complejo YXX y la subunidad de AP-2

Dominio C-term de 2 en
complejo con el pptido
DYQRLN

2 + DYQRLN

Tanto mutaciones en YXX como

mutaciones en la protena adaptadora
pueden afectar o bloquear la interaccin

Bonifacino & Traub, Annu. Rev. Biochem, 72:395447, 2003

Modelo de activacin del complejo AP-2 cuando une YXX

PIP2

AP-2 inactivo AP-2 activo

Bonifacino & Traub, Annu. Rev. Biochem, 72:395447, 2003

 Cambio conformacional de AP-2

Secuencias seal

ExxxLL ()

YXX ()

AP-2 inactivo AP-2 activo

Conformacin cerrada Conformacin abierta

Jackson et al., Cell, 141:1220-1229, 2010