Contenido

MARCO TERICO CONCEPTUAL...........................................................................1

1.-Marco histrico............................................................................................... 2
2.-Marco de referencia........................................................................................ 3
3.-Marco terico.................................................................................................. 5
3.1.- La determinacin Celular............................................................................ 5
3.2 Obtencin de muestra.................................................................................. 7
3.3 De dnde proviene la muestra?..................................................................8
3.4 Terapias y posibles usos de las clulas madre..............................................8
3.5 Algunas dificultades.................................................................................... 10
BIBLIOGRAFIA.................................................................................................... 11

MARCO TERICO CONCEPTUAL

1.-Marco histrico
Las investigaciones cientficas avanzan da con da; Lo que genera una inquietud
de conocer cmo funcionan los diferentes sistemas biolgicos, qumicos, fsicos
entre muchos otros ms. Dentro de esta inquietud nace la idea de regenerar los
tejidos con las mismas clulas del cuerpo humano mejor conocidas como clulas
madre o troncales. Pero, Cmo se descubren dichas clulas? La siguiente
lnea del tiempo seala los hechos ms importantes de su descubrimiento:
1860 a 1920 se analiza el desarrollo de un embrin y la microscopia de
mdula sea en Alemania.5
1885 Roux mantuvo clulas embrionarias de pollo en un solucin salina 4
1887 Loeb demostr que las clulas aisladas de sangre y tejido conectivo
podran mantenerse vivas por periodos prolongados en plasma o suero. 4
1907 R. Harrison llevo a cabo una serie de estudios para dilucidar la
naturaleza de las fibras nerviosas, con experimentos in vitro con un mtodo
de cultivo, el cual consista en poner explantes de embrin de rana en una
gota de lquido linftico que colgaba de un cubre objetos y se sellaba sobre
un porta objetos con una presin (la gota colgante) 4
1911 W. y M. Lewis trabajaron en la preparacin de medios de cultivos con
soluciones salinas y aportaron valiosa informacin sobre los efectos de la
concentracin de sales, pH. 4
Hasta ese momento uno de las mayores dificultades era mantener los cultivos
libres de contaminacin por microorganismos, ya que proliferaban y se apropiaban
del cultivo.
1940 La tcnica de asepsia fue perfeccionada con el uso de antibiticos
como penicilina y estreptomicina en el medio de cultivo por Alexis Carrel. 4
1956 Se realizan los primeros trasplantes de mdula sea realizados en
pacientes humanos (E.E.U.U.) 5
1959 Los experimentos en ratones demuestran la existencia de Clulas
madres sanguneas residentes en la mdula (Inglaterra)5
1961 Se establece las propiedades de las clulas para trasplantes de
medula sea de ratn, este descubrimiento sent las bases para todas las
investigaciones actuales(Canad) 5
1968 Se logran los primeros trasplantes alognicos de mdula humana
evitando reacciones de rechazo(E.E.U.U) 5
1969 Se aplica la tecnologa para separar las clulas madre de mdula
sea para diseccionar la jerarqua de la clula(Canad) 5
1978 El descubrimiento de estas clulas en el cordn umbilical humano
las cuales son trasplantables(E.E.U.U) 5
1993 La pluripotencialidad de las clulas se demuestra a travs de los
experimentos con ratones 5
1994 los pacientes con corneas daadas son tratados con xito(Taiwn) 5
 1996 Primera clonacin de un mamfero: la oveja Dolly(Escocia) 5
2001 Se forma por primera vez una organizacin para la colaboracin en la
investigacin de clulas madre: la red de clulas madre.
Clulas madre de la dermis identificadas en el tejido de la piel de adultos
(Canad) 5
2002 Purificacin completa de las clulas pluripotentes de los ratones
capaces de regeneracin de la medula sea in vivo (Canad). Se forma la
sociedad internacional para la investigacin de clulas madre. Creacin del
Foro Internacional de Clulas madre (ISCF) fomentando la colaboracin
internacional, promoviendo buenas prcticas y acelerando el proceso en la
ciencia biomdica.5
2005 James Till y McCulloch Ernest ganan el premio lasker de
experimentos en los que identificaron por primera vez clulas madre y
prepararon el escenario para todas las investigacin actuales. 5
2006 el mdico japons Shinya Yamanaka hizo un descubrimiento que
revolucion nuestra comprensin de la fisiologa celular, Se generan las
primeras clulas pluripotentes inducidas(iPS)7
2007 Mario Capecchi, Martin Evans y Oliver Smithies ganan el premio nobel
de Fisiologa de Medicina por sus descubrimientos que permitieron la
modificacin gentica de lnea germinal en los ratones, Se identifican
clulas madre intestinales de mamferos (Holanda) 5
2008 Sam Weiss es galardonado con el premio Gairdner por el
descubrimiento de las clulas madre neurales.5
2009 Clulas iPS creadas con un mnimo de alteracin genmica residual
(Canad) 5
2010 Las clula madre adultas reprogramadas directamente a las
neuronas, msculo cardiaco y sanguneas (Canad, E.E.U.U). Clulas Ips
creadas por transfeccin de ARNm (E.E.U.U). Primera prueba clnica de
clulas madre embrionarias humanas derivadas para el tratamiento de
lesiones de la mdula espinal (E.E.U.U). Aislamiento de clulas
pluripotentes de la sangre capaces de formar las clulas en el sistema
sanguneo (Canad) 5

Podemos concluir que: El cultivo de tejidos nos ayuda a resolver problemas

bsicos de la biologa celular, ya que el mantener las clulas fuera de su
organismo de procedencia implica controlar su entorno y la influencia de tejidos
adyacentes se pierde, lo que permite conocer los requerimientos celulares
mnimos. Abre la puerta a la experimentacin in vitro a todas las reas de la
biologa, se obtuvieron ventajas considerables al trabajar con clulas aisladas en
vez de organismos completos; Lo que hace posible trabajar con clulas humanas.
4
2.-Marco de referencia

Blastmera Cada una de las clulas que forman el embrin y que llevan en
su ncleo la informacin gentica del mismo. Cada una de estas clulas
son totipotenciales y se producen por un proceso de segmentacin del
embrin, con divisiones celulares muy rpidas y que al final van a formar
una esfera denominada blstula.9
Blastocito: Etapa temprana del embrin que se forma a los pocos das de
fertilizacin. Da alrededor de 200 clulas (Clulas madre embrionarias) las
cuales se pueden especializar en todas las clulas del organismos.7
Blstula: Es una fase temprana de embriones de desarrollo en animales.
Tambin se le llama blasto esfera. Se produce por la hendidura de
un vulo fertilizado y se compone de una capa esfrica de alrededor de 128
clulas con un gran espacio lleno de lquido llamado blastocele en el polo
animal del embrin. (EcuRed, 2016)
Clulas madre embrionarias o clulas ES (embryonic sterm cells): Son
clulas inducidas a proliferar indefinidamente mientras retienen su carcter
totipotente 1
Clulas madre pluripotentes: Son capaces de generar todas las
estructuras del embrin (ectodermo, mesodermo, clulas germinales).6
Clulas madre: Son clulas que tienen la capacidad de dividirse
indefinidamente y que pueden dar origen a clulas ms especializadas.
Adems generan ms clulas madre.6
Clulas madres comprometidas: Pueden dar origen a una pequea
poblacin de clulas. Ej. Hemangioblasto da origen a todos los vasos
sanguneos. 6
Clulas progenitoras o precursoras: Ya no son clulas madre, debido a
que sus divisiones no crean otra clula progenitora similar, se divide para
formar uno o pocos tipos celulares relacionados, dependiendo del ambiente
celular en el que se encuentre. 6
Ectodermo: genera la capa externa del embrin, produce la capa
superficial (epidermis) de la piel y tambin da origen al sistema nervioso.6
Endodermo: que llega a ser la capa ms interna del embrin y produce el
epitelio del tubo digestivo y de sus rganos asociados( incluidos los
pulmones)6
Mesodermo: Se sita intercalado entre el ectodermo y el endodermo,
Genera la sangre, el corazn, los riones, las gnadas, los huesos, los
msculos y los tejidos conectivos. 6
Tejidos: Son combinaciones de tipos celulares, que deben conservar sus
diferencias mientras coexisten en el mismo ambiente, teniendo un ciclo
celular donde nacen y mueren clulas a diferentes ritmos, durante todo ese
periodo se deben preservar una organizacin, teniendo tres factores que
posibilitan la estabilidad estructural:
 o Comunicacin celular: Cada tipo de clula especializada controla
su entorno buscando seales provenientes de otras clulas, la
supervivencia depende de estas seales.
o Adhesin intercelular selectiva: Contienen molculas de adhesin
en sus membranas plasmticas que tienden a unirse con otras
clulas del mismo tipo de molcula.
o Memoria Celular: Patrones especializados de expresin de genes,
que se mantienen en forma estable a lo largo de la vida de modo que
las clulas preservan su naturaleza. 3
3.-Marco terico
El organismo contiene clulas madre multipotentes, incluso en el adulto, las cuales
no son tan fcil utilizar como las clulas madre embrionarias pluripotentes. La
investigacin de las clulas madre en los teratomas y en tipos de tumores
relacionados ha conducido al descubrimiento que su comportamiento refleja una
propiedad destacable: colocadas en medio conveniente, pueden ser inducidas a
proliferar indefinidamente mientras retienen su carcter totipotente. Se le llaman
clulas ES.
Las clulas ES tienen una importancia doble. Primero desde el punto de vista
mdico ofrecen la perspectiva de una fuente verstil de clulas para reparar
tejidos daados o defectuosos de un adulto. Segundo: las clulas ES posibilitan el
control ms preciso de las formas de modificacin gentica, permitiendo generar
animales que presenten en recombinacin gentica, una secuencia de DNA
construido artificialmente, se han ideado procesos de seleccin para encontrar
entre miles de ellas.
Muchos tejidos del cuerpo del adulto tambin contienen clulas madre; pero a
estas, cuando se les permite diferenciarse, normalmente slo dan lugar a una
gama muy restringida de tipo celulares diferenciados.
3.1.- La determinacin Celular
La determinacin es un proceso gradual por el cual pasan las clulas para
diferenciarse. Las clulas no pasan directamente de un estadio pluripotencial a
uno determinado por una sola etapa de diferenciacin, sino que atraviesan una
serie de restricciones progresivas; El significado de determinacin en trminos
moleculares aun es confuso pero al menos incluye: Los genes regulan el tipo de
diferenciacin escogido empiezan a funcionar.
Estos cambios manifiestos en la bioqumica y funcin celulares estn procedidos
por un proceso cuyo resultado es el compromiso de la clula a un destino cierto.
Aunque la clula o tejido no se diferencia fenotpicamente con respecto a su
estado no comprometido, su destino de desarrollo ha llegado a ser restringido.
El proceso de compromiso puede ser dividido en dos estados (Harrison 1933;
Slack 1991) El primero es la especificacin se dice que est especificado
cuando son capaces de diferenciarse automticamente al colocarse en un
ambiente neutral, como una placa de Petri o un tubo de ensayo. El segundo es la
determinacin, cuando es capaz de diferenciarse automticamente aun cuando
se le coloca en otra regin del embrin 6
El fenmeno de la especificacin condicional depende de las interacciones de
las clulas con otras clulas lo cual restringe el destino de uno a ms
participantes, debido a que el destino de la clula depende de las condiciones con
las que la clula se encuentre.
Especificacin autnoma En este caso, si una blastomera se quita del embrin
temprano, producir los mismos tipos celulares que hubiese generado de haber
formado parte del embrin, adems el embrin perder esas clulas.
Por ultimo tenemos la Especificacin sincitial especificacin de las regiones del
cuerpo mediante interacciones entre regiones citoplasmticas antes de la
celularizacin del blastodermo 6
Cada tipo celular especializado tiene una memoria de la historia de su desarrollo y
queda fijado en su destino especializado, pueden ocurrir algunas
transformaciones. Descubrimientos nos han aportado una percepcin ms
optimista sobre lo que pueden hacer las Clulas madre y sobre cmo se pueden
utilizar de forma excepcional.
Pueden dar lugar a todos los tejidos y tipos celulares del todo el cuerpo, se
integran perfectamente en cualquier sitio adoptando el carcter y comportamiento
de las clulas normales. Actualmente los experimentos sugieren que ser posible
utilizar las ES para remplazar las fibras musculares esquelticas en pacientes con
distrofia muscular entre muchos ms casos. Prometiendo ser muy tiles en la
reparacin de los tejidos, por lo menos factible utilizar tejidos adultos para generar
clulas ES personalizadas.2
 Fig. 3-1. Algunos tipos
celulares diferenciados
representativos del cuerpo
de los vertebrados. La
progenie del gameto
femenino fecundado debe
dividirse en cientos de tipos
celulares. Los tipos celulares
estn organizados en
relacin a la capa germinal
que les da origen.

3.2 Obtencin de muestra

A partir de un embrin de mamfero se pueden obtener clulas madre
embrionarias totipotentes.1
los medios de cultivo iniciales fueron fluidos normales de los organismos, pero, a
partir de la dcada de los 50, se fabricaron medios de cultivo qumicamente
basados en un solucin salina balanceada la cual contena sales y glucosa, con
pH y presin osmtica, actualmente existen gran nmero de medios bsicos de
usos comn.
A continuacin se mencionarn algunos de los diferentes cultivos que se pueden
realizar.
Cultivo de linfocitos; debido a que la sangre es el tejido ms accesible,
dicho cultivo ha sido ampliamente utilizado en investigacin.
Cultivo de explante de piel, puesto que para la investigacin no se pueden
sacrificar humanos, se utiliza la piel de la cata anterior al codo.
Cultivo de tumores slidos. Como ya sabemos los tumores son de gran
importancia para la investigacin de las clulas madre, lo cual requiere un
procesamiento y manejo adecuado de la muestra para obtener resultados
satisfactorios. 4
Y al separar dichas clulas de sus vecinas normales y ponerlas en un medio de
cultivo apropiado, haciendo as posible que continen dividindose
indefinidamente sin diferenciarse, dentro del cultivo solo pueden sobrevivir,
proliferar y diferenciarse si se dispone de protenas de seal especficas,
acompaado de clulas de sostn adecuadas. Existiendo algn mecanismo que
garantice mientras que alguna se diferencie otras quedan como estas clulas
madre 1
3.3 De dnde proviene la muestra?
No podemos hablar de clulas madres, muestras y cultivos sin saber o considerar
la pregunta De dnde proviene la muestra? En primera instancia la fuente de
clulas madre era el blastocito, el dilema; para obtenerlas hay que destruir un
blastocito, lo cual conlleva a un dilema tico y constante vigilancia a nivel mundial.
En las ltimas dos dcadas se ha descubierto reservas de clulas madre en el
organismo del adulto, lo que permitira ya no obtenerlas de los embriones. La
desventaja de estas clulas es que no son tan flexibles ni duraderas como las del
embrin7
Actualmente las clulas ME humanas pueden obtenerse mediante dos tcnicas
principales:(Fig. 3.3) La primera pueden ser derivas de la masa celular interna de
embriones humanos, como los que sobran de la tcnica de fecundacin in vitro, La
segunda pueden ser generadas desde clulas germinales derivadas de fetos de
aborto espontaneo (Gearhart 1998). Para ambos casos las clulas obtenidas son
pluripotentes. Otros mtodos estn en medios experimentales. 8

Fig. 3.3 Cuatros modos principales de

obtencin de clulas madre pluripotentes
humanas. Se ha documentado que los
mtodos A y B funcionan; los mtodos C y
D siguen siendo experimentales.
A= Las clulas desde la masa clulas
interna de un blastocito son cultivadas y
se vuelven clulas madre embrionarias
pluripotentes
B=Las clulas germinales primordiales de
un feto son recolectadas y se vuelven
clulas madre embrionarias pluripotentes
8

Las clulas madre de los tejidos adultos pueden ser ms verstiles de lo que
parece (Alberts, y otros, Histologa, la vida y la muerte de las celulas en los
tejidos); Las clulas madre se encuentran en la mdula espinal, la pulpa de los
dientes, la retina, la sangre, la placenta y el cordn umbilical, por mencionar
algunas fuentes.
3.4 Terapias y posibles usos de las clulas madre
Los seres humanos no regeneran rganos, los nios pueden regenerar la yema de
los dedos, pero aun esta capacidad se pierde en la edad adulto, la capacidad de
regenerar los rganos constituira una revolucin mdica, lo que genera diferentes
programas de investigacin desde la formacin de tipos celulares particulares y su
ambiente apropiado hasta la formacin de tejidos y rganos.
Regeneracin sea: Mientras que los huesos fracturados pueden cicatrizar.
Las clulas seas en los adultos generalmente no regeneran para tener un
puente en el amplio hueco. Los mismos factores paracrinos y endocrinos
que estn involucrados en la osificacin endocondrial tambin estn
involucrados en la reparacin de la fractura incremento la posibilidad de que
el nuevo huevo pueda crecer si se proporcionaban los factores paracrinos y
el ambiente extracelular apropiados. Lo que ocasiono que desarrollaron un
gel de colgeno que contiene plsmidos que transportan el gen de la
hormona paratiroidea humana, a medida que las clulas migraban hacia la
matriz de colgeno, incorporaban el plsmido y producan hormona
paratiroidea. Este tipo de tratamientos tiene el potencial de ayudar a las
personas con grandes fracturas seas as como aquellas con osteoporosis.
Otra aproximacin es encontrar la mezcla correcta de factores paracrinos
para regular a las clulas madre y producir hueso normal. 8
Regeneracin neuronal. Aunque el sistema nervioso central se caracteriza
por su capacidad para cambiar y reproducir nuevas conexiones, tienen muy
poca capacidad regenerativa, sin embargo las neuronas del sistema
nervioso perifrico tienen un poder regenerativo que involucra la
regeneracin de los axones daados. Cuando un axn es daado, las
clulas se schwann se dividen para formar un camino a lo largo del cual el
axn puede regenerar desde el muon proximal. Una estrategia es
encontrar los caminos que aumenten la poblacin de las clulas madre
neurales adultas y dirigir su desarrollo de modo que se sorteen las lesiones
causadas por enfermedad o trauma. 8
Experimentos con roedores se han extrado clulas madre neuronales del
adulto, se han mantenido en cultivo y despus se han implantado en el
cerebro de un husped, donde curiosamente se ajustan en comportamiento
a las condiciones de su nueva ubicacin 2
Regeneracin muscular: La doctora Mayana Zatz, de la Universidad de Sao
Paulo, Brasil, comenta con buen humor que su investigacin sobre distrofia
muscular con clulas madre se ver beneficiada con muchos donantes
ahora que su equipo ha obtenido clulas madre a partir del tejido adiposo
que se extrae durante la liposuccin. Estas clulas derivadas de la grasa se
han usado en el laboratorio para producir distrofina, una protena esencial
para el funcionamiento de los msculos que deja de producirse en las
clulas de las personas con distrofia muscular. El procedimiento ha
 funcionado en roedores y perros con este padecimiento, por lo que en los
prximos aos se auguran ensayos clnicos con seres humanos 7
Regeneracin sangunea: la variedad de tipos celulares sanguneos que
puede generar una sola clula madre hematopoytica va de mieloides
como linfoides as como a nuevas clulas madre igual a ella, se estn
desarrollando tratamientos para pacientes como leucemia pueden ser
irradiados o ser tratados qumicamente para destruir las clulas
cancergenas junto con el tejido hematopoytico restante y despus pueden
recuperarse con una transfusin de clulas madre hematopoyticas, las
cuales pueden ser de un donante inmunolgicamente compatible o de una
muestra sea de propio paciente leucmico, previamente extrada por un
sistema de clasificacin celular.3
3.5 Algunas dificultades
Los experimentos e investigaciones tienen ciertas dificultades como son: El
rechazo inmunitario, para lo cual se han desarrollado mtodos para solucionar
este problema, no obstante se pueden evitar este tipo de inconvenientes si se
obtiene los tipos de clulas madre correctos a partir del organismo del paciente.
Por ejemplo recuperar zonas con quemaduras con clulas de la piel sana del
paciente
Es necesario resolver cuestiones ticas muy serias y vencer enormes problemas
tcnicos.
BIBLIOGRAFIA

1 (Alberts, y otros, Desarrollo de los organismos pluricelulares)

2 (Alberts, y otros, Histologa, la vida y la muerte de las celulas en los tejidos)

3 (Alberts, y otros, Mantenimiento y renovacion de los tejidos , 2011)

4 (Alvarez, 1996)

5 (Evolucin de las clulas madre , 2016)

6 (Gilbert, 2005)

7 (Beyer, 18)
8 (Gilbert, Implicaciones medicas de la biologia del desarrollo, 2005)

9 (bernabeu, 2016)