Вы находитесь на странице: 1из 4

LABORATORIO N 3 DE BIOQUIMICA: FACTORES QUE AFECTAN LA

ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS

Profesor:

Eduardo Ruiz Durantez

Integrantes:

DIAZ ACOSTA DEISSON GABRIEL 515012

MENDOZA CABRERA MAYRA ALEJANDRA 516040

Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira

Facultad de Ingeniera y Administracin

Palmira, Valle del Cauca

2017
INFORME DEL LABORATORIO
FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS.
1. Gua experimental
En la prctica realizada en el laboratorio se llevaron a cabo 4 pruebas que fueron:
La detencin de la actividad de la Peroxidasa, donde se llev a cabo la
trituracin del material vegetal (espinaca) agregndole 10 ml de agua destilada,
esta mezcla no se filtr. A un tubo que contena 1 ml del macerado, se mezcl 1
ml de (Guayacol 1%) con 1 ml de Perxido de Hidrogeno (2%) el cual se agito y
se pudo observar muy rpidamente aproximadamente en 4 segundos, la
aparicin de un color rojizo que se da por la formacin de quinonas.
Efecto de la temperatura, se tomaron tres tubos de ensayo cada uno con 1 ml
del macerado y se clasificaron un tubo a temperatura ambiente, el segundo se
llev a una temperatura de 37C y el tercero a 100C en bao mara, a cada tubo
que contena parte de estas muestras se les agrego 1 ml de (Guayacol 1%) y 1 ml
de Perxido de Hidrogeno al (2%) y en los tres se observaron cambios
diferentes.
Efecto de la variacin de pH, en cuatro tubos de ensayo que contenan 1 ml del
macerado, se adiciono 1 ml de solucin tampn a pH diferentes, en un cido, un
neutro y dos bases, seguidamente se le agrego 1 ml de (Guayacol 1%) y 1 ml de
Perxido de Hidrogeno al (2%), se logr observar que a pH neutro la reaccin
fue mucho ms rpida que en los otros tubos con diferente pH.
Efecto del cianuro, en un tubo de ensayo se agreg 1 ml del macerado,
adicionndole 1 ml de Cianuro de Potasio al (0.5%), tambin 1 ml de (Guayacol
1%) con 1 ml de Perxido de Hidrogeno al (2%) y se pudo observar que se
intent separar en dos capas, pero su reaccin fue poca debido a que el Cianuro
de Potasio actuaba como inhibidor.

2. CONCEPTOS CONSEPTOS RELEVANTES


Cianuro de potasio: (se utiliz en la prctica de laboratorio como inhibidor) El cianuro de
potasio o KCN es una sal inorgnica denominada sal de potasio del cianuro de hidrgeno o
cido cianhdrico, es altamente soluble en agua, en cidos y bases, es insoluble en etanol o
metanol, fatalmente txico por ingestin, el KCN tiene un olor como el de las almendras
amargas, es una de las pocas sustancias que forman compuestos solubles con el oro
formando un complejo cianurado, y por esto se usa en joyera para el dorado qumico y
para dar brillo a este metal y tambin es utilizado en la minera de oro para extraer el metal
de los minerales lo cual termina siendo letalmente contaminante con fuentes de agua.
Perxido de hidrgeno: (H2O2) comercialmente conocido como agua oxigenada, es un
compuesto qumico con caractersticas de un lquido altamente polar, fuertemente enlazado
con el hidrgeno tal como el agua, que por lo general se presenta como un lquido
ligeramente ms viscoso que sta. Es conocido por ser un poderoso oxidante.
Peroxidasa: Enzima muy extendida en el rbol filogentico de la vida que utiliza como
cofactor el grupo hemo, (cuyo tomo central de hierro forma complejos con diferentes
compuestos, como los cianuros y la hidroxilamina, inhibindose su actividad enzimtica).
Pertenece a la categora enzimtica de las oxidorreductasas, son las que catalizan
reacciones bisustrato de carcter redox donde existe un amplio nmero de sustratos
orgnicos e inorgnicos, utilizando un perxido como oxidante y un segundo sustrato de
caractersticas reductoras que es oxidado por el perxido.

Guayacol: Es el fenol derivado de la bencina y se lo denomin cido piroguaycico,


guayol e hidruro de guayacilo, se encuentra mezclado con otros fenoles. Algunas
caractersticas son, que es lquido, incoloro, muy refrigerante y hierve a 200.

3. RESULTADOS

Al someter la peroxidasa a diferentes temperaturas, se pudo visualizar que a una


temperatura de 37C la reaccin catalica aumenta su velocidad un poco, pero no lo
suficiente como para distinguirse del efecto a temperatura ambiente; y a una
temperatura de 100C el efecto de la peroxidasa se inhibe a causa de que la enzima
se ha desnaturalizado.
Al agregar el compuesto guayacol y el perxido de hidrogeno al macerado de
espinaca, este posee gran cantidad de enzimas peroxidasa, se manifest
inmediatamente la coloracin marrn y la formacin de burbujas de H2O, en forma
de efervescencia. Esta reaccin duro aproximadamente 7 minutos hasta que se
detuvo el hervor.
Al ser sometido la peroxidasa a diferentes condiciones de pH, se pudo visualizar
que en pH cido (4) el efecto de coloracin ocurre instantneamente al igual que la
aparicin de burbujas de H2O. En pH neutro (7) el efecto es similar al de pH cido,
solo que en este caso la aparicin de burbujas fue ms espontanea. En pH bsico de
10 tambin fue visualmente evidente la efervescencia de burbujas de H2O, pero lo
que cambio fue el efecto de la coloracin, esto quiere decir que hubo una menor
produccin de quinonas. Cuando se someti la mezcla a un pH de 12, hubo poca
efervescencia y poca coloracin.
Al aadir cianuro al macerado de espinaca y al momento de agregar el guayacol y el
perxido de hidrogeno, no se present coloracin, pero si hubo aparicin de
burbujas en poca cantidad, por lo tanto, la formacin de quinonas fue nula, esta
solucin tuvo un efecto similar al ser sometido a temperatura de 100C, el efecto
inhibidor del cianuro se debe a la reaccin de este con el hierro del grupo prosttico
hemo o hemina de la enzima.
CONCLUSIONES
De la prctica se pueden concluir las condiciones ptimas para el efecto cataltico de la
enzima peroxidasa, teniendo en cuenta que reacciona mayormente en temperatura de 37C
y temperatura ambiente, y que en temperatura de 100C no reacciona, las altas temperaturas
generan mayor cintica en la molcula (hace vibrar los enlaces de H que estabilizan la
mezcla de protenas en la molcula o enzima), esto hace que se desnaturalice porque al
vibrar, sus enlaces se desorganizan y pierden tridimensionalidad.
As como tambin reacciona mayormente en pH entre 4 cido y 7 neutro, con poca
actividad en pH alcalino, el pH modifica la forma inica de la enzima para poder
interactuar y tambin las fuerzas inicas o interacciones inicas que estabilizan la mezcla
de protenas.
Y se debe tener en cuenta que la enzima no reaccione con sustancias que puedan formar
enlaces con el Hierro (Fe) del grupo hemo, porque esto terminara causando inhibicin de
la protena.
Se pudo observar que el Ion Cianuro Fe. Hace que el Ion Fe no tenga la capacidad de
reaccionar con el oxgeno extra del Perxido de Hidrogeno y por lo tanto no pueda cumplir
su funcin.
Por lo tanto, las condiciones ptimas para la actividad enzimtica de la peroxidasa, es en
pH cido cercano al neutro, y temperaturas cercanas a la temperatura ambiente, ya que lo
ms probable es que as sea como se encuentre en la naturaleza.

Похожие интересы