Вы находитесь на странице: 1из 21

RESUMEN 1 PRUEBA HEMATOLOGIA 2013

Hematopoyesis

Conjunto de procesos por el cual el organismo renueva y reabastece sus


clulas sanguneas.

Todas las clulas sanguneas derivan de un precursor comn


llamado Stem Cell.

La Stem Cell va proliferando, diferencindose y madurando formando


colonias precursoras de las distintas clulas sanguneas.

Este proceso en el hombre adulto tiene lugar en la mdula sea de


vrtebras, esternn, coxales, costillas y fmur, fundamentalmente. Es de
tipo amplificada, es decir que una clula madre originar varias clulas
maduras. Las clulas son volcadas al torrente sanguneo por los senos
venosos medulares.

Antes de seguir aclaremos un poco el panorama de las siglas:

CFU: Unidad formadora de colonias. La letra que figura en minscula a la


derecha designar la lnea celular de la cual es precursora, por ejemplo
CFU-meg, forma megacariocitos o sea plaquetas.

BFU-e: Unidad formadora de colonias Burst eritroide.

CSF: Factor estimulador de colonias.

IL: Interleukinas.

Las clulas hemopoyticas se distribuyen en 3 compartimientos dentro


de la mdula sea, que albergan a los distintos tipos de clulas.

1) Compartimiento de las STEM CELL. Este compartimiento


obviamente alberga a las Stem Cell, tambin llamadas clulas madres o
Unidades Formadoras de Colonias o CFU-s ( la "s" es porque fue aislada
por primera vez del bazo (Spleen) de un ratn, pero recordar que en el
hombre adulto la hemopoyesis se realiza en la mdula sea). Este
compartimiento es particularmente bajo en concentraciones de oxgeno.

2) Compartimiento de las clulas Progenitoras o comisionadas. Las


clulas de este compartimiento son pluri, bi o monoptenciales. Son las
precursoras de cada una de las lneas celulares (CFU-gm, CFU-e, etc).
Tiene alto poder de replicacin y amplificacin aunque an se encuentran
inmaduras.
3) Compartimiento de las clulas Morfolgicamente Identificables,
que proliferan activamente para dar las clulas que observamos en un
frotis comn de sangre. Incluye a las clulas precursoras y toda su
progenie.

La hemopoyesis se vale de 3 procesos fundamentales: proliferacin,


maduracin y diferenciacin.

1. PROLIFERACIN: Se da como resultado de la mitosis. Para


comprender esto hay que saber que en todas la clulas se describe
un ciclo celular universal y eventualmente una etapa de reposo (G0).
Cada tipo de clula vara el tiempo de estada en las distintas fases del
ciclo. Este ciclo comprende los siguientes estados:

- G0: Es una etapa muy variable y se considera a la clula como


en estado de reposo o fuera del ciclo.

- G1: Esta se caracteriza por la transcripcin y traduccin proteica. Es


una etapa de longitud variable. Su contenido de ADN es diploide, es decir
son de ADN simple (sin duplicar) y de par homlogo, es decir de 23 pares
de cromosomas.

- S: Es la etapa de sntesis de ADN. Finaliza esta etapa con contenido


tetraploide.

- G2: Es un perodo corto, sin ninguna particularidad.

- M: Mitosis. La clula se divide generando dos clulas con igual


contenido gentico.

2. DIFERENCIACIN: Es el proceso por el cual una clula se distingue


de otra con igual contenido gentico. Esto se consigue dirigiendo su
expresin gentica.

3. MADURACIN: Es el proceso por el cual las clulas de una lnea van


perdiendo y adquiriendo estructuras para cumplir su funcin. Es decir que
se van especializando.

Los procesos de diferenciacin y maduracin son conceptualmente


diferentes aunque ocurren conjuntamente.

A continuacin se vern las caractersticas sobresalientes de los distintos


tipos celulares ms importantes que conforman la hemopoyesis.
Las Stem Cell tienen las siguientes caractersticas:

INDIFERENCIADA.

TOTIPOTENTE. Es importantsimo recordar que puede originar


cualquier tipo de clula sangunea.

EN G0 O EN G1: Se las puede encontrar en estos dos estados.

- G0: representa el 90% de las Stem Cell (algunos autores sostienen que
se trata slo de un 75%).

- G1: representa el 10% ( 25% segn el autor).

La diferenciacin de una Stem Cell de G0 a G1 no es tan importante en


la respuesta hemopoytica normal. Este proceso cobra importancia ante
una hemlisis grande o radiacin letal en donde el organismo se
encuentra en una situacin extrema en donde debe reponer sus clulas
sanguneas lo mspronto posible.

AUTOPERPETUABLE Y AUTORRENOVABLE. A partir de ninguna otra


clula del organismo se origina una Stem Cell, por lo tanto esta tiene un
mecanismo de autorrenovacin. Este mecanismo permite mantener
constante la poblacin de Stem Cell. Se da por un tipo de proliferacin
especial que puede ser simtrica o asimtrica:

- SIMTRICA: Es la forma ms comn. La clula pasa de G0 a G1 , se


divide y origina dos clulas: una se diferencia a CFU-linfo (Unidad
Formadora de Colonias-linfocticas) o CFU-gemma (granulocticas,
eritroides, megacariocito, macrfagicas), y la otra vuelve al estado de
reposo (G0). Relacin 1:1. Se mantiene constante la poblacin de Stem
Cell.
- ASIMTRICA: Es menos frecuente y se produce en estados de stress o
por la administracin de ciertos antibiticos como el cloramfenicol. A
diferencia de la anterior la Stem Cell puede dividirse formando dos Stem
Cell. Relacin 1:2. Es decir que por cada Stem Cell que haba ahora hay
dos. De esta manera aumenta la poblacin de clulas Stem Cell.

3. Clulas progenitoras

A partir de la Stem Cell se originan clulas que pierden la capacidad de


producir clulas indiferenciadas, y por el contrario, se comprometen a
formar un tipo celular (unipotenciales) o varios tipos de clula
(pluripotenciales). A estas clulas se las denomina Clulas Progenitoras
o Comisionadas o Comprometidas.

Pluripotenciales:

- CFU-linfo que origina la serie linfoctica.

- CFU-gemma que origina el resto de la clulas: granulocitos, ertitrocitos,


megacariocitos, macrfagos.

Unipotenciales o bipotenciales:

- CFU-e: origina eritrocitos.

- CFU-m: origina monocitos.

- CFU-meg: origina plaquetas.

Las Clulas Progenitoras unipotenciales contienen las siguientes


caractersticas:

LINAJE RESTRINGIDAS: significa que originan un solo tipo celular, por


ejemplo eritrocitos.

RESPUESTA AMPLIFICADA: cada una se divide mltiples veces


originando varias clulas maduras a partir de una progenitora.
El stress aumenta el efecto amplificador de la hemopoyesis.

EN G1: Estas clulas se encuentran mayoritariamente en G1, no se


observan en G0.

Autorrenovabilidad y Autoperpetuabilidad: Casi no existe esta


capacidad.

Repasemos la idea final de la va evolutiva:


4. Regulacin de la hemopoyesis

El control de la hemopoyesis se ejerce tanto por el microambiente,


anteriormente mencionado, como por los factores humorales de
estimulacin e inhibicin:

Los factores estimulatorios son un conjunto


de protenas llamadas citoquinas, que favorecen el crecimiento de
clulas sanguneas normales. Comprende al conjunto de interleukinas
(IL), factores estimuladores de colonias, factores de crecimiento e
inhibidores de la hematopoyesis.

Las citoquinas actan por lo general sobre receptores de


membrana de las clulas blanco que median una actividad
de tirosina quinasa(participan procesos de transduccin de ADN).

Circulan en general en ttulos bajos en condiciones basales


aunque diversos estmulos como el stress pueden aumentar los
niveles.

Los efectos de las citoquinas se pueden producir sobre las clulas


que se encuentran que se encuentran en su
proximidad fsica (actividad paracrina), sobre la propia clula para
regular la produccin (actividad autcrina) o sobre organos a
distancia (yendo por la sangre hasta alcanzar el rgano), actividad
a distancia (endcrina).

De acuerdo a la citoquina y a la clula que interacta puede


producir un efecto estimulatorio o inhibitorio.

Los efectos de las citoquinas se ejercen tanto sobre las Stem Cell,
como sobre las Clulas Progenitoras, sobre las Clulas
Morfolgicamente Reconocibles y sobre toda la progenie en los
distintos estados de maduracin.

Los factores de estimulacin ms conocidos son: IL1, IL2 y IL3.


* La Interleukina 3 estimula para la produccin de todas las clulas
sanguneas.

En algunas enfermedades la mdula sea deja de funcionar, por lo tanto,


no se producen clulas sanguneas (hay pancitopenia). A estos pacientes
se les puede dar factores estimuladores de colonias para reactivar a la
mdula.

FACTORES DE INHIBICIN: No se conoce mucho acerca de los


mismos, por lo tanto no es tan importante saberlos (a los fines del
examen, si tens tiempo leelos).

5. Etapas de la hematopoyesis

En la vida intrauterina se distinguen 3 etapas de la hemopoyesis. Estas


son:

MESOBLSTICA: Se realiza en el saco vitelino, dura desde el da 15 de


gestacin hasta la semana 10 (primer trimestre). En esta etapa solo se
producen glbulos rojos, no se producen glbulos blancos.

HEPATOESPLNICA: Se realiza en el hgado y tambin en el bazo pero


en menor medida. Abarca del 3er. al 6to. mes (segundo trimestre).

MEDULAR (mieloide): Se realiza en la mdula sea y abarca desde el


sexto mes hasta toda la vida adulta.
Protenas integrales:
_ Banda 3: ms abundante, codificada por un gen cr.17. Contribuye al
Intercambio iones cloruro y bicarbonato.
_ Glicoforinas: A, B, C y D, afloran a la superficie de los GR
contribuyendo a determinar los grupos sanguneos.
Estas dos protenas contribuyen a fijar el citoesqueleto a la bicapa
lipdica.
_ Bomba Na-K: dependiente de ATP, regula intercambio Na y K.
_ GLUT 1: realiza transporte de glucosa a travs de la membrana.

Protenas estructurales:
_ Espectrina (bandas 1 y 2): protena ms abundante del citoesqueleto.
Es la unin de 2 dmeros (c/u cadena cr.1 y cr.14) Interacciones
funcionales
Con actina, protena 4,1 y ankirina.

_Protena 4,1: estabilidad unin entre espectrina y actina y al anclaje del


esqueleto a la bicapa.
_ Protena 2,1 o Ankirina: punto de anclaje del esqueleto a la bicapa,
especialmente a la banda 3.
_ Actina: se une a la espectrina
_ Protena 4,9: necesaria para configuracin molecular de actina

La relacin funcional de protenas del citoesqueleto entre s y con la


doble capa lipdica, se traduce en dos tipos de interacciones:
Interacciones horizontales: mantienen estabilidad citoesqueleto.
Interacciones verticales: unen el citoesqueleto a la bicapa lipdica.

Hemoglobina
La hemoglobina (Hb) es una protena globular, que est presente en altas
concentraciones en lo glbulos rojos y se encarga del transporte de O2
del aparato respiratorio hacia los tejidos perifricos; y del transporte de
CO2 y protones (H+) de los tejidos perifricos hasta los pulmones para
ser excretados.
Est formada por un grupo protsico (hemo), ms una porcin
proteica (globina).

Grupo hemo= protoporfirina IX + Fe++ (ferroso)


Tipos de hemoglobina

Hemoglobinas embrionarias:
_ Gower 1 22, componente ms grande de la Hb emb.
_ Gower 2 22 componente menor de la Hb emb.
_ Portland I 22 tiene mayor afinidad por el O2 que la Hb A

Hemoglobinas fetales:
_ F0 2G2
_ F1 2A2
Presentes al nacimiento en una proporcin 7:1. La ms importante en
feto
y neonato(65-95%), en la vida adulta en condiciones normales se
encuentra solo
como trazas( < 1%).

Hemoglobinas adulto:
_ A 22, 97% de la Hb adulto, RN20-40%
_ A2 22 2,5% adulto, 0,5% neonato

Funcin de la hemoglobina
_ transporte de O2 desde los pulmones a los tejidos.
_ transporte de CO2 desde los tejidos a pulmones.
_ Sistema tampn

P 50: aquella tensin de O2 en la cual la Hb est saturada al 50%.


A mayor afinidad de la Hb por O2 menor ser la P50 y viceversa.
As el P50 est inversamente relacionada con la afinidad por O2.

La afinidad del O2 y Hb est regulada:


_ temperatura
_ pH
_ 2,3 DPG

Efecto Bohr: relacin entre el aumento en la concentracin de CO2


O pH en la sangre y el descenso de la afinidad de la Hb por el O2.

Destruccin de los GR
Los macrfagos del recubrimiento interno de los vasos del bazo y
tambin del hgado, fagocitan los GR envejecidos, anormales o
fragmentados.
La Hb liberada por la destruccin es fagocitada y digerida por el SFM,
liberando:
_ Hierro
_Aminocidos
_Bilirrubina
Stem cell
Clula progenitora (troncal) con capacidad de
auto-renovacin (a)- diferenciacin (d)- proliferacin plasticidad.

Clulas troncales
Pluripotenciales (a y d)
CFU-ML (1xc/10.000 cl de la MO)
MSC : mesenquimtica, genera osteocitos, adipocitos, condriocitos,
estroma de MO, msculo liso, neuronas (Mesengnesis)
Multipotenciales (a y d)
CFU-S, CFU-GEMM
Bipotenciales (a y d limitada)
CFU-GM, CFU-EM
Unipotenciales (a y d limitada)
BFU-E, CFU-E, CFU-G, CFU-M,
CFU-Mk

El 5% de las clulas troncales pluripotenciales entraran en divisin y


diferenciacin, para lo cual deben pasar de:

Go G1 - S - G2- M
SCF o c-kit ligand

Presente en: MO, SP y cordn umbilical.


Se identifica: inmunofenotpicamente porque
expresan Antigeno CD34

Evolucin de las determinaciones en el hemograma


Determinaciones manuales (hemograma completo)
- Coeficientes de variacin elevados

Autoanalizadores
Coulter 1956 - Mtodo impedancia elctrica
Dispersin de luz sobre campo oscuro
Lser
Citometra de flujo

MAYOR PRECISIN Y EFICIENCIA


Los contadores celulares determinan bsicamente el nmero y volumen
tridimensional de partculas que atraviesan sus zonas sensitivas y los
recuentos se efectan por uno
de estos dos procedimientos:

Deteccin de una modificacin en la impedancia elctrica cuando


una clula pasa a travs de un orificio.

Deteccin de la dispersin de la luz cuando una clula atraviesa la


zona del correspondiente sensor.

Existe tambin la combinacin de ambos mtodos en un mismo aparato,


y la,
incorporacin adicional de otro tipo de mtodos fsicos como: otro lser
transversal o radiofrecuencia o citoqumicos lo que permite una
diferenciacin de los rasgos ms ntimos de la clula, lo que ampla el
simple recuento hasta la determinacin de reticulocitos, eosinfilos,
basfilos, clulas inmaduras y atpicas, en algunos modelos es posible
incluir anticuerpos monoclonales lo que los hace mucho ms especficos.

El mtodo de la impedancia elctrica se basa en el principio de que la


sangre posee una baja conductividad de electricidad, pero puede ser
diluida en lquidos de buena conductividad, a un flujo constante. Al existir
una corriente elctrica entre dos electrodos, el paso de cada clula a
travs de un orificio en el sistema, modifica la diferencia de potencial
entre el electrodo interno y el externo a dicho orificio y ello origina un
impulso elctrico. La amplitud de este impulso es directamente
proporcional al tamao de la clula y el nmero de impulsos, al nmero
de clulas contadas.

Contadores de clulas
El anlisis electrnico implica el uso de una disolucin de la sangre a
travs de un hueco que contiene una corriente elctrica. Este paso de
clulas cambia la impedancia entre las terminales (principio de Coulter).
En lneas generales el principio Coulter indica una partcula que es
forzada a atravesar un orificio, por el que circula una corriente elctrica,
produce un cambio en la impedancia a travs del orificio que es
proporcional al volumen de la partcula que est atravesando ese orificio.
Este pulso en la impedancia se origina por el desplazamiento de
electrolito causado por la partcula, ya que en las soluciones electrolticas
la carga es transportada por los iones disueltos, y estos encuentran un
impedimento a circular cuando una partcula obstruye parcialmente la
abertura.
Desviacin izquierda: aumento de clulas inmaduras de la seria
granulocitica, se denomina as por el lugar donde se ubican estas clulas
en el reporte manual del hemograma.

Constantes hematolgicas:
Corresponden a ndices calculados a partir de la determinacin de la
hemoglobina, hematocrito y el recuento de glbulos rojos. Estos son el
volumen corpuscular medio (VCM), hemoglobina corpuscular media
(HCM) y concentracin de hemoglobina corpuscular media (CHCM).
El VCM describe el tamao o volumen de los glbulos rojos expresado
en femtolitros(fL), oscilando su valor normal entre 80 y 100 fL y
relacionando el hematocrito con el recuento de glbulos rojos (Rcto. GR.)
La HCM indica la hemoglobina contenida en un hemate, se expresa en
picogramos (pg) y relaciona la concentracin de hemoglobina (Hb) con el
recuento de hemates.
Finalmente, la CHCM mide la concentracin media de hemoglobina en
relacin al hematocrito (%).

Ejemplo.
Si en un hemograma se encuentra lo siguiente:
Hemates de 3.500.000 x mm3
Hemoglobina: 8.0 gr/dL
Hematocrito: 25%
VCM = 25 x 10/ 3.5 = 71.4 fL
HCM = 8.0 x 10/ 3.5 = 22.8 pg
CHCM = 8.0 x 100/25 = 32%
Si el VCM est disminuido se define como microcitosis, es decir los
hemates son pequeos en relacin al normal y si est aumentado define
como macrocitosis.
La HCM y CHCM, en cambio, definen la croma del glbulo rojo, si estn
disminuidas se dice que existe hipocroma

Recuento de reticulocitos:

INDICE DE PRODUCCION RETICULOCITARIA


Normalmente los reticulocitos maduran dos das en mdula sea y 1 da
en sangre perifrica, sin embargo, en casos de anemia esta situacin
cambia y con hematocritos disminuidos la salida de los reticulocitos
desde la mdula sea es ms temprana, determinado por un estmulo
eritropoytico compensador que lo facilita, lo que se
conoce como desviacin reticulocitaria, pero que no necesariamente
indica un aumento de la regeneracin eritroblstica.

Se considera que con un hematocrito de 45%, los reticulocitos maduran 1


da en sangre perifrica, con 35% lo hacen en 1,5 das, con 25% es de 2
das y cuando el hematocrito es de 15% los das de maduracin en
sangre es 2,5 das.

El ndice de produccin reticulocitaria (IPR) considera estas variables y


expresa las veces en que se ve aumentado la produccin de reticulocitos
en relacin a una condicin basal y establece una razn entre al valor de
reticulocitos corregidos y el
nmero de das de maduracin en sangre perifrica segn el hematocrito
del paciente, de la siguiente manera:
VALORES NORMALES:
Adultos y nios = 0.2 - 1.5%
Recin nacidos = 2.0 - 6.0%
METABOLISMO DE LOS GLOBULOS ROJOS
Los hemates maduros no tienen ncleo, mitocondrias ni retculo
endoplsmico; sin embargo, s poseen enzimas citoplasmticas
que son capaces de metabolizar la glucosa y formar pequeas
cantidades de adenosn trifosfato (ATP) y la forma reducida de la
nicotnamida- dinucletido fosfato, NADPH. La glucosa es
prcticamente el nico combustible utilizado por los hemates.
Penetra en ellos rpidamente por difusin facilitada, para
convertirse en glucosa-6-fosfato (G6P).

El 80-90% se convierte en lactato mediante la va glucoltica. A


partir de una reaccin colateral
(shunt de Rapaport ) se obtiene el mediador de la afinidad de
la Hb por el O2, el 2,3-
difosfoglicerato (2,3-DPG). El 10% de la glucosa es sometida a
oxidacin por medio de un cortocircuito de la
hexosamonofosfato. Esta va mantiene el glutatin en forma
reducida para proteger a la Hb y la membrana del eritrocito de
la oxidacin por radicales libres (perxidos y superxidos) y por
oxidantes exgenos (frmacos y toxinas).
El NADPH sirve a los hemates de muchas e importantes formas:
Mantiene la flexibilidad de la membrana celular.
Mantiene el transporte de iones a travs de la membrana. Permite
regenerar el ATP que
proporciona la energa necesaria para que la membrana del hemate
mantenga til la
bomba de sodio-potasio, evitando as que el sodio y el agua penetren en
su interior, lo
que provocara su destruccin. Es decir, contribuye a mantener la forma
del hemate.
Mantiene el hierro de la Hb en forma ferrosa (Fe+2), en lugar de frrica
(Fe+3) que provoca
la formacin de metahemoglobina que no transporta oxgeno.
Evita la oxidacin de las protenas de los hemates.

La maduracin eritroblstica conlleva la desaparicin de prcticamente


todas las vas presentes en cualquier otra clula. El eritrocito maduro es
incapaz de sintetizar lpidos o protenas y obtener energa a travs del
ciclo de Krebs y la fosforilacin oxidativa. Su nica fuente energtica es
la gluclisis anaerobia, cuyo rendimiento neto es de 2 ATP por cada
molcula de glucosa oxidada. Esta fuente energtica es suficiente para
que desarrolle funciones que permiten su supervivencia en circulacin. El
eritrocito presenta 4 vas metablicas: gluclisis anaerobia (va de
Embden-Meyerhof), metabolismo xido-reductor (va de pentosas fosfato
y sntesis de glutatin), metabolismo nucleotdico, y sistema diaforsico.
Gluclisis anaerobia

La glucosa que difunde hacia el interior de los eritrocitos es oxidada a


piruvato mediante un proceso de gliclisis sin consumo de O2
(anaerobio), en un proceso que consta de 2 etapas: (a) Transformacin
de glucosa en Gliceraldehido-3-P (GA3P) y
Dihidroxiacetona-P con consumo de 2 ATP, y (b) Oxidacin de ambos
compuestos a piruvato y lactato con formacin de 2 ATP por cada
molcula de GA3P (total 4 ATP/glucosa); el piruvato se transforma en
lactato por la accin de la LDH (lactato deshidrogenasa) eritrocitaria. La
gluclisis anaerobia posee 3 enzimas que al catalizar reacciones
irreversibles constituyen etapas limitantes: Hexoquinasa (HK) que
transforma glucosa en
Glucosa-6-P (fosfofructoquinasa que transforma
Fructosa-6-P en Fructosa-1,6-diP (F1, 6DP), y piruvatoquinasa (PK) que
transforma el Fosfoenolpiruvato (PEP) en piruvato.
Debido a que la va de Embden-Meyerhof es la nica fuente de energa
del eritrocito, el dficit de una de estas enzimas es suficiente para
bloquear su funcionamiento y ser causa de anemia hemoltica
produciendo un aumento en los niveles de LDH plasmtico.
Una derivacin importante de la gluclisis anaerobia es el ciclo de
Rapaport-Luebering, que transforma 1,3 difosfoglicerato (1,3 DPG)
en 2,3 DPG. El 2,3 DPG mediante fosforilacin se transforma en 3-
Pglicerato y con ello cierra el ciclo. Ambas reacciones son catalizadas por
una misma enzima, con doble funcin: mutasa
y fosfatasa. Aunque la importancia de este ciclo deriva de la funcin
reguladora del 2,3 DPG sobre la funcin hemoglobnica, es probable que
este metabolito constituya un reservorio energtico frente a situaciones,
como una disminucin de pH intraeritrocitario que disminuye la actividad
glucoltica.
El 2,3 DPG es un anin altamente cargado que se une a las cadenas de
la Hb, favoreciendo la liberacin del O2. El aumento de la concentracin
de 2,3 DPG en los glbulos rojos, desplaza la curva de disociacin de la
oxihemoglobina hacia la derecha. Entre los factores que se sabe que
elevan la concentracin de 2,3 DPG en los eritrocitos humanos se
cuentan la disminucin del pH citoslico, las hormonas tiroideas, la
hormona del crecimiento
y los andrgenos. Otra reaccin importante de la gluclisis anaerobia es
catalizada por la enzima gliceraldehido-3-P-DH, ya que mantiene el
NADH en estado reducido, imprescindible para
mantener al Fe de la Hb en estado reducido, a travs de la reaccin
catalizada por NADH diaforasa o citocromo B5-reductasa.
3.2. Metabolismo xido-reductor (va de las
pentosas)

Una va alternativa a la gluclisis anaerobia es el ciclo de la hexosa


monofosfato (va de las pentosas), que en condiciones normales deriva
entre 5-10% del catabolismo de la glucosa. Esta va funciona sin el
consumo de oxgeno, de forma que su actividad puede aumentar 20-30
veces si se produce un brusco aumento de la
oxidacin intracelular. El principal factor limitante es el cociente
NADP+/NADPH y la enzima Glucosa-6P-DH, que precisa del cofactor
NADP+, pero que a la vez es intensamente inhibida por NADPH
(reducido). En el desarrollo de su funcin, el eritrocito suele
hallarse sometido a agresiones oxidantes y el NADPH es por s mismo
insuficiente para amortiguarlas. La clula dispone de un
compuesto, el Glutatin, que en estado reducido (GSH) realiza esta
funcin. El glutatin es un tripptido sintetizado por 2 enzimas que
precisan consumo de ATP. Bajo forma reducida y mediante una reaccin
catalizada por la glutatin peroxidasa, elimina el exceso de
perxido. El nivel de GSH generalmente elevado, se mantiene gracias a
NADPH (de la va de las pentosas) y a la actividad de la
glutatin reductasa. El poder reductor del eritrocito reside en su
capacidad de regenerar NADPH, necesario a su vez, para mantener el
nivel de GSH. El dficit congnito de glucosa-6-P-DH implica
una gran disminucin del poder reductor eritrocitario. Dado que el
glutatin no difunde a travs de membranas eritrocitarias, su
concentracin se mantiene gracias a un sistema en el que intervienen 2
enzimas: deltaglutamilcisteinasintetasa y glutatin sintetasa.

Interaccin hemo-hemo
La entrada de O2 en el interior del tetrmero de Hb permite una
captacin ms fcil de las siguientes molculas de este gas, es decir la
incorporacin de O2 a una cadena aumenta la
afinidad que por este gas tienen el resto de las cadenas que todava no
han reaccionado con l, esta es la base del denominado efecto
hemohemo o de cooperatividad. Este mecanismo tan eficiente de
transporte de O2 no podra ser posible si no fuera por la forma sigmoide
de la curva de disociacin entre el O2 y la Hb, producto del fenmeno de
cooperatividad recin sealado. Si cada uno de los cuatro grupos hemo
de la molcula de Hb se unieran a O2 independientemente de los otros,
la curva de disociacin del O2 sera de forma hiperblica como la de la
mioglobina.
Como se muestra en la figura 3-9, tal curva hiperblica que presenta la
mioglobina no es buena para el transporte de O2, ya que al no existir
cooperacin hemo-hemo se aprecia una gran afinidad por el O2, lo que le
incapacita para transportarlo, favoreciendo lo que realmente es su
funcin, que en el caso de la mioglobina es el almacenamiento de O2 en
los tejidos.
Para que la Hb cumpla con su papel fisiolgico debe ligar O2 con una
afinidad apropiada. Si la ligazn O2-Hb fuera demasiado dbil la sangre
no podra oxigenarse en la circulacin pulmonar, si fuera muy fuerte slo
una escasa cantidad de O2 sera descargada a los tejidos.

La afinidad del O2 por la Hb es convenientemente expresada en trminos


de P50, y corresponde a aquella tensin de O2 en la cual la Hb est
saturada al 50%. A mayor afinidad de la Hb por O2 menor ser la P50 y
viceversa. De este modo la P50 est inversamente relacionada a la
afinidad por O2. La P50 normal para la sangre humana en condiciones
fisiolgicas a pH de 7,4 y
temperatura de 37C es de 26 + 1 mm Hg. Existe un gran nmero de
factores genticos y medioambientales que afectan la afinidad por O2 de
la sangre humana (figura 3-10). Los tres determinantes primarios de la
afinidad de la sangre completa son: temperatura, pH y 2,3 DPG
intraeritrocitario.

a) Temperatura
La relacin entre temperatura y afinidad por O2 es un fenmeno
apropiado desde el punto de vista fisiolgico. De este modo, en
condiciones de hipotermia relativa, las demandas metablicas son
comparativamente ms bajas. Debido a la desviacin a la izquierda en la
curva de disociacin del O2, menos cantidad de O2 es liberado a los
tejidos. A la inversa, si la temperatura aumenta sobre lo normal, la
desviacin de la curva a la derecha resulta en
una diminucin de la afinidad por O2 y as mayor descarga de O2.
En individuos homeotermos, como es el caso del hombre, solamente se
permiten leves variaciones en la temperatura corporal, y para que este
fenmeno (P50/T) sea fisiolgicamente importante debe ser
pronunciado. El efecto del pH y del 2,3 DPG intraeritrocitario ser
descrito ms adelante, por ahora baste decir que el aumento del pH y la
disminucin del 2,3 DPG desvan la curva de saturacin hacia la
izquierda, es decir aumentan la afinidad de la Hb por O2. Un efecto
contrario, es decir desviacin hacia la derecha y disminucin de
laafinidad por el O2 se produce si disminuye el pH y aumenta el 2,3 DPG
intraeritrocitario.
b) Efecto Bohr
Bohr, Hasselbach y Krogh, descubrieron que la afinidad de la Hb por el
O2 disminuye al aumentar las cantidades de CO2. Estudios
posteriores demostraron que este efecto era debido primariamente a una
reduccin en el pH. Los investigadores rpidamente dilucidaron el
significado de estas observaciones. Concluyeron
que un organismo liga y descarga O2 y CO2 recprocamente: el O2 es
captado por los pulmones a medida que el CO2 es expelido. En
los tejidos ocurre el proceso inverso. Debido al efecto Bohr, el
intercambio de CO2 facilita el intercambio de O2 y viceversa. Sobre
un rango de pH fisiolgico, la P50 vara inversamente con el pH. Esto
corresponde al denominado efecto Bohr alcalino. A medida que el CO2
es expelido durante la circulacin a travs de los pulmones hay un
correspondiente aumento en el pH y una disociacin a la izquierda en la
curva de disociacin del O2. De
este modo el relativo aumento en la afinidad por O2 favorece la unin del
O2 a la Hb. A la inversa, a medida que la sangre circula a travs de los
capilares el CO2 entra al plasma y glbulos
rojos. Debido a la abundancia de anhidrasa carbnica en los glbulos
rojos, rpidamente se forma cido carbnico:
CO2 + H2O H2CO3. La ionizacin de este cido dbil (H2CO3H+
+HCO3-) provoca una disminucin en el pH intracelular. Debido al efecto
Bohr la afinidad de la Hb por el O2 disminuye, resultando en una mejora
en la descarga de O2 a los tejidos. As, el efecto Bohr permite un ciclo
fisiolgicamente
apropiado para el trasporte de O2 y CO2 en el organismo.
El hecho de que los protones se unan ms fcilmente a la estructura
desoxi (T) que a la oxi (R), es debido a que hay grupos especficos sobre
la molcula en este estado cuando las uniones salinas se han formado,
que tienen una mayor afinidad por ellas. Se han identificado tres lugares
que contribuyen al efecto Bohr alcalino:
el imidazol de la histidina 146 (HC3), el grupo amino N-terminal de la
cadena , y el imidazol de la histidina 122 (H5).

Sistema tampn
Dependiente del efecto Bohr, la unin de protones a la Hb representa el
sistema tampn ms importante para mantener neutro el pH intracelular.
Es decir, la mayor parte del CO2 producido en los tejidos pasa a los
hemates donde se hidratan rpidamente gracias a la accin de la
anhidrasa carbnica eritrocitaria, se genera H2CO3 que se disocia a H+
y HCO3-, siendo la Hb capaz de captar este hidrogenin y equilibrando
de este modo el pH intracelular.
As mismo, el bicarbonato formado en los eritrocitos pasa a constituir en
el plasma el sistema amortiguador ms eficaz de que
dispone la sangre.
VALOR ABSOLUTO Y REALIVO

VALOR ABSOLUTO: N de clulas diferenciadas por mm3

VALOR RELATIVO: porcentaje diferenciado de clulas dado por el hemograma


de Schilling o Frmula Diferencial.

Rcto. Leucocitos en cmara x mm3 N Cl. Dif. x mm3

Rcto.leuccocitos en frotis (100 cel) % clulas diferenciadas

V. Absoluto = % cl. dif. x Leuc.x mm3

100

EJERCICIOS

I Calcular rango normal de valores absolutos para cada una de las clulas
diferenciadas.

II Calcular los valores absolutos:

1 Recuento leucocitos: 15000 x mm3


Netrfilos: 60%

Linfocitos: 30%

2 Recuento leucocitos: 4800 x mm3


Netrfilos: 58%

Linfocitos: 60%

3 Recuento leucocitos: 10000 x mm3


Netrfilos: 48%

Linfocitos: 48%

4 Recuento leucocitos: 3000 x mm3


Netrfilos: 55%

Linfocitos: 18%

5 Recuento leucocitos: 40000 x mm3


Netrfilos: 57%

Linfocitos: 18%
6 Recuento leucocitos: 8000 x mm3

Neutrfilos: 53%

Linfocitos: 27%

Eosinfilos: 12%

7 Recuento leucocitos: 3000 x mm3


Netrfilos: 78%

Linfocitos: 25%

8 Recuento leucocitos: 4500 x mm3


Netrfilos: 34%

Linfocitos: 19%

Monocitos: 30

LEUCOCITOS VERDADEROS": cuando aparecen en sangre perifrica


eritroblastos en gran cantidad y en la frmula diferencial se encuentra un
porcentaje > 10%, se debe corregir el recuento de leucocitos (falsamente
aumentado) para obtener el recuento de "leucocitos verdaderos" (Ej.
Eritroblastosis fetal).

Rcto. "leucocitos verdaderos" = Rcto. Leuc. no corregido x 100

% eritroblasto + 100

EJERCICIOS

Calcule el recuento de leucocitos verdaderos

1 Recuento leucocitos 25000 x mm3 y al frotis se encuentra un 20% de


eritrobalstos.

2 Recuento de leucocitos 15000 x mm3, 120% eritroblastos

3 Recuento leucocitos 12000 x mm3, 22% eritroblastos

4 Recuento leucocitos 30000 x mm3, 110% de eritroblasto

5 Recuento leucocitos 14000 x mm 3, eritroblasto ortocromtico 20%,


eritroblasto policromtico 18%

Вам также может понравиться