OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACION

Dar las pautas para la esterilizacin apropiada de los materiales del

laboratorio de microbiologa.
I. INSTRUCCIONES

1. Preparacin del material a esterilizar:

Placas Petri
- Colocar las parejas de placa y envolverlas en grupos no mayores
de 3 con papel kraft doblando los extremos del paquete hacia
atrs.
- Anotar la fecha de esterilizacin, nmero de placas que contiene.
Pipetas
- Taponar la boquilla con algodn (ayudarse con una gua o similar)
el fragmento sobrante se elimina flameando al mechero.
- Clasificar de acuerdo al volumen y envolverlas individualmente
con papel kraft (tiras de 4 x 40 cm. aproximadamente) de la
siguiente manera:
o Hacer un doblez pequeo en la punta del papel y a partir
de ella comenzar a envolver la pipeta.
o Rotar para que la empaquetadura sea un espiral y no debe
quedar floja.
o Rematar girando el papel sobrante de modo que quede
asegurado.
- Anotar la medida de la pipeta, fecha de esterilizacin.
Tubos de prueba
- Preparar tapones de algodn adecuados con dobleces al interior
para que no se abran, no deben ser muy apretados, ni flojos, ni
cortos, ni largos.
- Hacer grupos de tubos taponados en nmero no mayor de 10, de
tamaos iguales y empaquetados con papel Kraft, doblando los
extremos del paquete hacia atrs.
- Anotar el tamao de los tubos, fecha de esterilizacin.
Probetas matraces y otros frascos.
- Colocar tapones de algodn y proteger stos con papel Kraft
sujetados con liga o pabilo (usar pabilo si es esterilizado por calor
seco).
- Anotar la fecha de esterilizacin.
Esptulas de vidrio, cucharas, cuchillos, tijeras,
accesorios de la licuadora, etc.
- Envolver con papel Kraft individualmente. Los accesorios de la
licuadora (el fondo de rosca, la cuchilla y el anillo de cierre) deben
envolverse juntos.
- Anotar en cada caso la fecha de esterilizacin.
Medios de cultivo diluyente y otros similares.
- Contenidos en matraces o frascos similares
- Taponar con algodn y proteger ste con papel Kraft el cual se
sujeta con liga o pabilo.
- Anotar el nombre del producto que contiene la cantidad, fecha de
preparacin.
- Contenido en tubos.
o Taponarlos con algodn, colocarlos en grupos dentro de
recipientes y protegerlos con papel Kraft el cual se sujeta
con liga o pabilo.
o Anotar el nombre del producto que contiene fecha de
esterilizacin
 2. Esterilizacin
Materiales de vidrio y metal:
- En calor seco a la temperatura y tiempo indicados en la metodologa
- En calor hmedo a la temperatura y tiempo indicados en la metodologa

Medios de cultivo, diluyentes y otros similares:

- En calor hmedo a la temperatura y tiempo indicado para cada
caso (Etiquetas de medios de cultivo, metodologas y catlogos).
Luego de esterilizarlos se registrara la fecha de su esterilizacin.
- Otros materiales (filtros de membrana, guantes quirrgicos, etc.)
En calor hmedo a 121C 1C x 15 minutos

3. Vigencia de materiales y medios de cultivo

esterilizados
- Material de vidrio y metal: 7 das
- Medios de cultivo, diluyentes y otros similares:
o Vigencia 1 mes a 4C 2C 02 semanas a T ambiente
a excepcin de aquellos cuyo uso es recomendado el
mismo da o al da siguiente que se prepara. Segn
indique el catlogo correspondiente.
o Descartar los tubos y los matraces cuyo volumen del
fluido ha disminuido mas del 10% (ver marca del nivel del
fluido).

4. Control de la Esterilizacin

- Para verificar la esterilizacin en autoclave se utilizara un

Indicador (STERIKON, Bacillus stearothermophilus, cada 15 das)
y testigo una (01) vez al da para cada esterilizacin.
- El testigo se usara todos los das, en la primera esterilizacin,
colocndolo al azar en los materiales, el cambio de color de beige
a marrn - negro significan una buena esterilizacin, registrar los,
Control de Esterilizacin: Autoclave.
- El Indicador se usara cada 15 das, se colocara 1 ampolla en cada
nivel de la autoclave durante el proceso. Se incuban a 60 1C
por 24 -48 horas, como control se usara una ampolla sin
esterilizar. La eficiencia de la esterilizacin es la permanencia del
color violeta de la ampolla.