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Marzo 2012
INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL
DIRECCIN DE PRESTACIONES MDICAS
UNIDAD DE SALUD PBLICA
COORDINACIN DE VIGILANCIA EPIDEMIOLGICA Y APOYO EN CONTINGENCIAS
DIVISIN DE LABORATORIOS DE VIGILANCIA E INVESTIGACIN EPIDEMIOLGICA
Gua rpida para el envo de muestras al LCE para la implementacin del diagnstico de Infecciones 1
Bacterianas y B. pertussis
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INDICE
OBJETIVO ................................................................................................................................... 3
ANTECEDENTES ...................................................................................................................... 3
DIRECTORIO............................................................................................................................ 14
REFERENCIAS ........................................................................................................................ 15
Gua rpida para el envo de muestras al LCE para la implementacin del diagnstico de Infecciones 2
Bacterianas y B. pertussis
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OBJETIVO
Precisar los lineamientos para la toma, manejo y envo de muestras biolgicas y cepas
bacterianas, para la implementacin del diagnstico de Infecciones Bacterianas Invasivas y
Bordetella pertussis en el Laboratorio Central de Epidemiologa (LCE), de acuerdo a las
recomendaciones del Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiolgica, con la finalidad de
disponer de datos que permitan conocer mejor la carga de morbilidad y mortalidad de estas
enfermedades.
ANTECEDENTES
Las Infecciones bacterianas invasivas (IBI) son un conjunto de infecciones que constituyen uno
de los principales problemas de salud a nivel mundial en nios menores de 5 aos por ser una
de las primeras causas de mortalidad y morbilidad. Las IBI estn integradas por un variado
grupo de enfermedades causadas por diversos agentes infecciosos, e inician con algn tipo de
Infeccin Aguda, como el resfriado comn, faringitis, amigdalitis, bronquitis, otitis,
laringotraqueitis y tosferina. stas, evolucionan a enfermedades graves como la Neumona, la
cul es la principal complicacin de las Infecciones Respiratorias Agudas.
Por otro lado, otra de las graves complicaciones es la evolucin a meningitis, una enfermedad
que puede llegar a causar serios daos neurolgicos. Provoca desde pequeas crisis
convulsivas, hasta daos permanentes, como sordera, parlisis cerebral, retraso mental y
psicomotor, hidrocefalia y hasta la muerte del paciente. La letalidad oscila entre 10% y 20%.
Desde 1993 la Regin de las Amricas cuenta con una red de vigilancia regional de
laboratorios, conocida como SIREVA II (Sistema Regional de Vacunas), apoyada por
OPS/OMS y por el Gobierno de Canad. Cada ao, se publican los datos de la vigilancia de la
red de laboratorios de SIREVA II por 19 pases de Amrica Latina, facilitando el anlisis de las
caractersticas fenotpicas (serotipos circulantes y susceptibilidad a los antibiticos) de las
cepas circulantes de Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae y Neisseria
meningitidis responsables de procesos invasivos en Latinoamrica y en el Caribe.
Caso probable de neumona bacteriana: Todo caso sospechoso con una radiografa de trax
en que se identifique un patrn radiolgico compatible con neumona bacteriana.
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Caso descartado de neumona bacteriana: Todo caso sospechoso con una radiografa de
torx donde no se identifique un patrn radiolgico compatible de neumona bacteriana.
Caso inadecuadamente investigado: Todo caso sospechoso sin una radiografa de trax.
Caso probable de meningitis bacteriana: Todo caso sospechoso en que el examen del LCR
es compatible con meningitis bacteriana, es decir, presenta por lo menos una de las siguientes
caractersticas:
- Turbidez
3
- Leucocitos aumentados (> de 100/mm )
3
- Leucocitos entre 10-100/mm y elevacin de protenas (>100 mg/dl) o disminucin de la
glucosa (<40 mg/dl).
Caso descartado de meningitis bacteriana: Todo caso sospechoso en que el examen del
LCR no es compatible con etiologa bacteriana y no se cultiv ni se identific ninguna bacteria
en el LCR o sangre.
3. SEPSIS
Choque Frio o Choque caliente: Piel fra, plida-grisceo o ciantica, disminucin de la
Perfusin manifestada por alteracin en el estado mental, llenado capilar >2 segundos (Choque
fro) o llenado capilar en flash (Choque caliente), Piel seca o caliente, mnimo retraso pulsos
disminuidos (choque frio) o saltones (choque caliente), aumento de la presin diferencial,
pulsos amplios y saltones, presin diastlica baja, extremidades calientes y moteadas (choque
frio), o gasto urinario disminuido <1 mL/Kg/h.
Choque refractario: Choque persistente a pesar del uso de metas dirigidas con agentes
inotrpicos, vasopresores, vasodilatadores y mantenimiento de la homeostasis metablica
(glucosa y calcio) y hormonal (tiroides, hidrocortisona e insulina).
SRIS: Se define como la presencia de dos de cuatro de los siguientes criterios de los cuales
alguno de ellos deber ser forzosamente encontrarse alterado una Temperatura anormal
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corporal central >38.5 o < 36, taquicardia elevacin persistente e inexplicable durante 0.5 a 4
hrs. de la elevacin de la frecuencia cardaca (FC) >2 desviaciones estndar (DE) de la media,
para su edad en ausencia de estmulos externos, medicacin o estmulo doloroso, o
Bradicardia disminucin de la FC inexplicable por ms de 0.5 hrs, y < al percentil 10 para su
edad en ausencia de estmulo vagal, medicacin beta-bloqueante o cardiopata congnita,
Taquipnea, frecuencia respiratoria > a 2 DE sobre la media para la edad, una cuenta
leucocitaria elevado o disminuido para su edad (no secundaria a quimioterapia) >10% de
neutrfilos inmaduros.
Sepsis grave: Sepsis ms uno de los siguientes: disfuncin cardiovascular que responde a la
adecuada administracin de lquidos sndrome de distrs respiratorio agudo (PaO2/FiO2 <
infiltrado bilateral agudo no evidencia de fallo cardaco izquierdo) dos o ms disfunciones
orgnicas (neurolgica, metablica, hematolgica, etc.)
5. LARINGOTRAQUEITIS
Laringotraqueitis aguda leve: Tos traqueal ocasional, en general no hay estridor en reposo,
aunque se puede presentar al toser o llorar, no hay tiros supraesternales o son leves.
Laringotraqueitis aguda Grave: Tos traqueal frecuente y puede ser ms intensa, estridor
larngeo intenso a la inspiracin e incluso puede ser audible a la espiracin con mayor tiraje
intercostal y esternal con dificultad respiratoria y agitacin importantes.
6. TOSFERINA
Caso probable de tosferina: Cuadro agudo de tos de dos o ms semanas de duracin,
acompaada de paroxismos; en nios pequeos tos prolongada aguda con periodos de apnea
y cianosis, estridor inspiratorio o tos emetizante sin otra causa aparente.
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Caso compatible con tosferina: Caso probable que no se confirm por laboratorio ni por
asociacin epidemiolgica. En el estudio de un brote no es necesario confirmar todos los casos
por laboratorio, basta con uno que cumpla con la definicin de caso confirmado por
aislamiento, para considerar a los restantes como confirmados por asociacin epidemiolgica.
Los ensayos que se validarn a corto plazo en el LCE son los siguientes:
a) Identificacin del agente por medio del primoaislamiento y pruebas bioqumicas bsicas de
Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae y Bordetella
pertussis.
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TIPO DE MUESTRAS
La obtencin de las muestras se har exclusivamente a los casos probables en el laboratorio
de la unidad hospitalaria. Las muestras deben ser tomadas durante el episodio agudo de la
enfermedad, preferentemente antes de recibir tratamiento antimicrobiano, a fin de tener la
mayor posibilidad de aislamiento del agente etiolgico. Las muestras que se recibirn son las
enlistadas en la siguiente tabla junto con las medidas que se deben de aplicar.
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Haemophilus influenzae
En casos de otitis media, epiglotitis, laringotraqueobronquitis, infecciones sistmicas, meningitis y sepsis.
Tipo de muestra: Exudado farngeo, exudado nasofarngeo, lquido cefalorraqudeo y hemocultivo.
Neisseria meningitidis
En casos de meningitis bacteriana. Tipo de muestra: lquido cefalorraqudeo y hemocultivo.
Exudado nasofarngeo
a) Toma de muestra: Se pide al paciente que se siente y coloque su cabeza hacia atrs. Se introduce un
hisopo de alginato de calcio, dacrn o nylon (nunca de algodn en caso de sospechar Bordetella) por las
fosas nasales hasta la nasofaringe, sin tocar los cornetes y tratando de producir un acceso de tos. El hisopo
se mantiene in situ de 10-15 segundos durante el acceso de tos, despus de lo cual se retira rpidamente.
b) Envo de muestra: Si la muestra no se va a procesar de inmediato, el hisopo se mantiene en un medio de
AMIES modificado con carbn activado y se mantiene a temperatura ambiente el menor tiempo posible. Si se
sospecha de Bordetella pertussis se mantiene a 4C.
Liquido cefalorraqudeo
a) Toma de Muestra: La obtencin de la muestra es responsabilidad exclusiva del mdico quien la tomar
bajo rigurosas condiciones de asepsia. Se deben recuperar unos 5 mL los cuales se conservan en tubos de
vidrio estriles con tapn de rosca.
b) Envo de muestra: La muestra no debe refrigerarse, ni acompaarse de hielo. Cuando el envo tarda ms
de 24 horas, la muestra debe enviarse inoculada en medios especficos. De preferencia en frascos de
hemocultivo.
Hemocultivo
a) Toma de muestra: Se limpia el sitio de la puncin con una torunda de algodn impregnada con etanol al
70% o solucin de yodo al 2%. Si se trata de un adulto, se toman de 5 a 8 mL de sangre total, sin
anticoagulante, o de 2 a 3 mL si se trata de un nio. De inmediato la sangre se inyecta a travs del tapn
(previamente desinfectado con alcohol) de un frasco para hemocultivo.
b) Envo de muestra: El frasco del hemocultivo se empaqueta bien en un recipiente con doble cubierta para
evitar su ruptura. No hay que refrigerarlo.
Lquido Pleural.
a) Toma de muestra: Se recomienda que la toma de este tipo de muestra la realice exclusivamente el
cirujano. Para la obtencin del liquido de derram pleural se requiere la colocacin de pleurotoma cerrada e
instalacin de sello de agua por los riesgos que existen durante el procedimiento (hemorragia pulmonar,
neumotrax o descompensacin hemodinmica).
Nota: Es esencial que todas las muestras sean enviadas de manera inmediata al laboratorio para su
procesamiento, ya que estos microorganismos son exigentes y no sobreviven por mucho tiempo. El tiempo
mximo es de 2 horas despus de la toma. Si hay que mantener por ms tiempo se recomienda poner en
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CONSIDERACIONES GENERALES
a) En el caso de muestras de LCR si no se puede enviar la muestra en forma inmediata, se puede
inocular en un frasco para hemocultivo chico o en 1 mL de caldo infusin cerebro corazn
enriquecido y transportarla al laboratorio a temperatura ambiente. Enviar resultados de examen
citoqumico.
c) Para prevenir la coagulacin de los lquidos pleurales adicione una pequea cantidad de polianetol
sulfonato de sodio (SPS) o de heparina estril en el tubo donde se va a recoger la muestra.
CEPAS
Para enviar cepas de S. pneumoniae, H. influenzae y N. meningitidis al laboratorio de
CONDICIONES referencia se debe emplear el medio de transporte de AMIES modificado con carbn
PARA EL ENVO activado.
DE CEPAS
Procedimiento:
1. Realizar una siembra masiva de la cepa en el medio de cultivo de acuerdo al tipo de
cepa:
a) Si es Streptococcus pneumoniae en agar sangre de carnero al 5%.
b) Si es Haemophilus influenzae en agar chocolate
c) Si es Neisseria meningitidis en agar chocolate agar sangre de carnero al 5% Agar
Thayer-Martin.
2. Incubar de 18 a 24 horas a 35-37C en tensin parcial de CO2.
3. Cosechar el desarrollo con asa estril o con hisopo de dacrn o rayn e introducir el
hisopo en un tubo que contiene el medio de transporte de AMIES, cerrar el tubo, sellar con
parafilm y rotular el tubo: Nombre del paciente, microorganismo, fecha de siembra, tipo de
muestra que proviene y anexar la informacin solicitada (formato nico de envo de
muestras).
4. Enviar inmediatamente al Laboratorio.
NOTA: Se recomienda que el volumen del medio de transporte no sea mayor de 3 mL para
evitar la dilucin de los microorganismos presentes en la muestra. El tiempo de viabilidad
de los microorganismos presentes en la muestra se incrementa si se utiliza medio de
transporte de AMIES entre 48 a 96 hrs. Si se utiliza medio de transporte de Stuart, la
viabilidad disminuye entre 24 y 48 hrs.
Para enviar cepas de Bordetella pertussis u otras especies de Bordetella se debe emplear
el medio de transporte de AMIES modificado con carbn activado.
Procedimiento:
1. Realizar una siembra masiva de la cepa en el medio de cultivo Bordet-Gengou,
2. Incubar hasta 72 hrs en aerobiosis y en bolsas de plstico.
3. Cosechar el desarrollo con asa estril o con hisopo de dacrn o rayn e introducir el
hisopo en un tubo que contiene el medio de transporte de AMIES, cerrar el tubo, sellar con
parafilm y rotular el tubo con la clave de microorganismo, anexar la informacin solicitada
(formato nico de envo de muestras al InDRE).
4. Enviar inmediatamente por un medio confiable de mensajera
5. Avisar por va telefnica al laboratorio de referencia del envo de las cepas.
6. En caso de que no sea posible el envo inmediato, se puede mantener la cepa en este
medio en condiciones de refrigeracin y puede ser funcional durante tres das como
mximo.
Todas las cepas debe de venir perfectamente bien etiquetada, sealando el nmero de
resiembras, diagnstico solicitado, con el formato nico de envo de muestras
correctamente llenado, resumen de la historia clnica y oficio de solicitud de estudio. La
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falta de alguno de estos documentos o las condiciones inadecuadas de la cepa son causa
de rechazo temporal. Se notificar al usuario las condiciones de arribo de muestra/cepa en
cada caso.
El resto de las Delegaciones si as lo desean pueden enviar muestras al LCE, pero deben tener
en cuenta que el costo del embalaje y envo debe ser cubierto con recursos propios.
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Av. Hroes de
Nocupetaro y
HOSPITAL Nicols de ocatvio.mendozao@imss.gob.mx
Qumico Octavio 01 (44)
7 MICHOACN GENERAL Regules Col.
Mendoza Ortiz 33121738
REGIONAL No. 1 Centro. C.P. ocmetiz1@hotmail.com
58000. Morelia,
Mich.
VPN:
HOSPITAL Av. Ruiz
832061327 antonia.hernandez@imss.gob.mx
GENERAL Cortines S/N, Q.B.P. Antonia
01 (744) 445-
8 GUERRERO REGIONAL NO.1 Col. Alta Hernndez
53-53 Ext. marytoni13@hotmail.com
"VICENTE Progreso, Albinez
51330 y
GUERRERO" Acapulco, Gro.
51334, 51809
VPN:
Ejrcito 814131324 o
HOSPITAL Mexicano y 1300, 1311
GENERAL DE Calle Amistad Q.F.B. Ixtlacihua
9 SINALOA ZONA CON S/N. Col. Adolfo Refugio Aguilar 01(669) armonia.aguilar@imss.gob.mx
MEDICINA Lpez Mateos. Solano 98322799
FAMILIAR No. 3 C.P. 82149. 01(669)
Mazatln, Sin. 9847865, 66,
67 Ext. 31369
Calzada Emilio VPN:
Rabasa s/n. 831041325
HOSPITAL Q.F.B. Maria
Col. Centro.
10 CHIAPAS GENERAL DE Otilia Urbina ma.urbina@imss.gob.mx
C.P. 29000. 01 (961)
ZONA No. 2 Castaeda
Tuxtla Gutirrez 6123155 Ext.
, Chiapas 61324
Avenida
HOSPITAL Politcnico Q.F.B. Ma. 01 (998) 267
QUINTANA GENERAL Manzana No 1 Cecilia del 8704, 05, 00.
11 maria.sosam@imss.gob.mx
ROO REGIONAL No. Lote 1 Regin Socorro Sosa
17 509. Cancn, Matu Ext. 1027
Q. Roo.
Nota: Para cualquier duda sobre este procedimiento podrn pedir informes o consultas va
correo electrnico a la direccin siguiente: contacto@laboratoriosanangel.mx o al telfono 01
800 0032786 de 7 am a 12 pm.
Recipiente primario (1): Este debe ser un frasco o tubo de cierre hermtico y de material
resistente para evitar derrames. La muestra debe de ir acompaada de los siguientes
documentos:
La unidad concentradora deber colocar los sellos correspondientes los cuales debern ser
adheridos a la parte interna del recipiente terciario (ver ms abajo).
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ellas para ser entregadas en el LCE del CMN La Raza dentro de un tiempo mximo de 48 hrs.
Para cualquier duda sobre este procedimiento podrn pedir informes o consultas va correo
electrnico a la direccin siguiente: contacto@laboratoriosanangel.mx.
La muestra debe enviarse en un sistema de triple embalaje basado en las normas oficiales
mexicanas (NOM-051-SCT2/1995, gua de la OMS, Ginebra (1997), NOM-003-SCT/2000).
Recipiente secundario (2): El recipiente primario debe ser colocado por la compaa
transportadora en un segundo recipiente tambin hermtico, a prueba de filtraciones, que
protege el o los recipientes primarios. En el recipiente 2 se deber de colocar material
amortiguador que garanticen que la muestra contenida en el recipiente primario no se derrame
y las muestras y las cepas deben enviarse a temperatura ambiente. Estos recipientes se
componen de: hielera grande medidas 43X34X29 y refrigerantes en gel de 750 g de peso (este
material tambin ser proporcionado por la compaa que transportara la muestra).
Recipiente terciario (3): Paquete externo que protege los recipientes 1 y 2 de los elementos
externos del ambiente, a fin de evitar posibles daos fsicos y filtracin de agua, mientras se
encuentra en trnsito. Estos recipientes se componen de: caja y bolsa de cierre hermtico que
tambin sern proporcionadas por la compaa que transportara la muestra.
Etiquetados
Recipiente secundario: Se deben especificar las indicaciones necesarias en relacin al riesgo
biolgico que representan las muestras y, en su caso, cualquier otro tipo de riesgos
secundarios.
Recipiente terciario: Debe incluirse los datos tanto del remitente como del destinatario.
Debern colocarse los siguientes tipos de etiquetas en la parte externa del paquete:
a. Etiqueta de Riesgo Biolgico para Sustancias Infecciosas
b. Etiqueta de Riesgo Secundario, en el caso de que las muestras sean conservadas a
baja temperatura con hielo seco o nitrgeno lquido.
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Red IMSS
a) Debe verificarse que el nombre de la muestra sea el mismo en oficio y el formato nico de
envo de muestra.
b) Escribir con letra de molde, de preferencia a mquina y enviar en original.
c) Que la cantidad de muestra enviada sea de acuerdo a los estudios solicitados.
1. Oficio solicitando el diagnstico, este debe contener al menos los siguientes datos:
a) Remitir el oficio al Jefe del LCE (Dr. Jos Alberto Daz Quionez).
b) Nombre del mdico que solicita el estudio y algn correo o telfono en cual se pueda
contactar en caso de algn imprevisto.
c) Definir de forma clara el ensayo de laboratorio solicitado.
d) Mencionar el nmero de muestras que se envan para cada diagnstico.
e) Especificar el nombre de cada uno de los pacientes, esto puede indicarse en el oficio o ir en
un documento anexo.
f) La solicitud debe ser enviada en papelera oficial
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DIRECTORIO
RED
NOMBRE PUESTO DOMICILIO TELFONO CORREO ELECTRNICO FUNCIN
IMSS
Mier y Pesado
Dr. Vctor 120, Colonia
Coordinacin del
Hugo Borja Coordinador Del Valle, 5536 1539 6005 1800 victor.borja@imss.gob.mx
proceso
Aburto Mxico DF
03100
Jefe de Divisin de Mier y Pesado
Dr. Csar Laboratorios de 120, Colonia
Gonzlez Vigilancia e Del Valle, 5687 7255 6005 1803 cesar.gonzalezb@imss.gob.mx Operacin del proceso
Bonilla Investigacin Mxico DF
Epidemiolgica 03100
Hospital de
Infectologa,
CMN La Raza,
Dr. Alberto rea de
IMSS, 57245900 Procesamiento de las
Daz Laboratorio Central 6219 1638 alberto.diazq@imss.gob.mx
Jacarandas Ext. 24321 muestras
Quionez de Epidemiologia
esq. Vallejo,
s/n. Mxico DF
02200
Mier y Pesado
rea de
Dr. Joaqun 120, Colonia
Coordinacin de la 5687 7255 Coordinacin con la
Gonzlez Del Valle, 6005 1803 joaquin.gonzalezi@imss.gob.mx
Red Nacional de Red de laboratorios
Ibarra Mxico DF
Laboratorios
03100
Mier y Pesado
Ing. Miguel
120, Colonia Control de la
ngel rea de Control de
Del Valle, 5687 7255 6005 1803 miguel.pachecoh@imss.gob.mx informacin sobre
Pacheco Procesos
Mxico DF muestras y resultados
Hernndez
03100
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REFERENCIAS
1. Programa de Vigilancia de los Serotipos y Resistencia antimicrobiana de Streptococcus
pneumoniae y Haemophilus influenzae. Manual de procedimientos. Organizacin
Panamericana de la Salud-OMS. 4 versin. Junio, 2004. P.p. 33-75.
4. Informe Regional de SIREVA II, 2010. Datos por pas y por grupos de edad sobre las
caractersticas de los aislamientos de Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae y
Neisseria meningitidis, en procesos invasores Organizacin Panamericana de la Salud-OMS.
Washington 2011.
6. Miller MJ, et al. Guidelines for safe work practices in human and animal medical diagnostic
laboratories. MMWR Surveill Summ. 6;61:1-102; 2012
8. Chosewood C & Wilson DE. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 5th
ed. CDC-NIH; 2009
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______________ a __________ de ___________ de 2011.
Lugar da Mes
P R E S E N T E.
Por medio de la presente declaramos que la mercanca transportada por la compaa OCASA,
SOLUCIONES LOGISTICAS, amparada con el nmero de gua _____________________,
consiste en (escribir nmero de muestras) muestras biolgicas infectocontagiosas
procedentes de seres humanos, las cuales si no son manejadas con las normas bsicas de
bioseguridad pueden representar un riesgo biolgico para la persona que tenga contacto
directo con el envi, dichas muestras sern utilizadas para la confirmacin de diferentes
diagnsticos en el laboratorio.
Estas muestras pueden ser transportadas va terrestre o area y deben ser entregadas en un
plazo mximo de 48 hrs a partir de la entrega.
Sin ms por el momento y agradeciendo el apoyo me reitero a sus apreciables rdenes para
cualquier aclaracin.
ATENTAMENTE
________________________
Nombre del Responsable
Datos Complementarios.