INSTRUCCIONES DE USO

Revisin 0 Abril 2010

AGAR EOSINA Y AZUL DE METILENO (AGAR E.M.B)
Agar Eosina y azul de Metileno (AGAR E.M.B) presentacin 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catlogo 1039

USO PREVISTO
Agar Eosina y Azul de Metileno est recomendado para el aislamiento, cultivo y diferenciacin de bacilos entricos
gram negativos en muestras clnicas.

FORMULA EN g/l
Peptona Bacteriolgica 10.00 Eosina Y 0.04

Lactosa 5.00 Azul Metileno 0.065

Sacarosa 5.00 Agar Bacteriolgico 13.50

Fosfato Dipotasico 2.00

Final pH 7.2 0.2 at 25C

PREPARACION
Agar Eosina y azul de Metileno (AGAR E.M.B) presentacin 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catlogo 11039(Medio
deshidratado)
Suspender 36 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien. Calentar agitando frecuentemente. Dejar hervir
durante un minuto o hasta disolucin completa. Distribuir en recipientes adecuados y esterilizar en autoclave a 121C
durante 15 minutos. Enfriar a 45-50C. Remover con cuidado, evitando la formacin de burbujas y verter cuidadosamente
en placas de Petri. NO SOBRECALENTAR. Las placas preparadas deben almacenarse 8-15C. El color es azul-tornasol. La
esterilizacin reduce el azul de metileno, dejando el medio de color naranja. El color prpura puede ser restaurado
mezclando el medio suavemente. El medio reducido debe mezclarse para que el azul de metileno se oxide, de otro modo,
aparecer una zona oscura en la parte alta de la placa, que se ir extendiendo gradualmente hacia el fondo.

El medio deshidratado debe ser homogneo, libre de floculos y de color beige claro. Si hay algn cambio fsico no utilizar
el medio.

PRINCIPIO Y APLICACION
AGAR EOSINA Y AZUL DE METILENO (E.M.B) es un medio diferencial similar al Agar Levine (Cat. 1050) y es utilizado
para el aislamiento de Enterobacterias. El uso de Eosina y Azul de Metileno permite la diferenciacin entre organismos
fermentadores y no fermentadores de lactosa. Es muy utilizado en bacteriologa mdica. La Peptona aporta nitrgeno,
vitaminas, minerales y aminocidos esenciales para el crecimiento. La Sacarosa se aade adems de la lactosa como
carbohidrato fermentable, para detectar coliformes que fermentan la sacarosa ms rpidamente que la lactosa. La
Eosina y azul de metileno son inhibidores parciales de bacterias Gram-positivas e indicadores de pH. Debido a la lactosa
y la sacarosa en el medio se puede diferencia en cultivo primario Salmonella y Shigella las cuales son lactosa negativo y
pueden ser diferenciados de otras lactosa negativos y sacarosa positivos tales como Proteus vulgaris, Citrobacter y
Aeromonas. El Fosfato dipotsico acta como buffer del sistema y al Agar bacteriolgico es el agente solidificante.

TIPO DE MUESTRAS

Heces, orina

La recoleccin, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo segn Recomendaciones y Standards en
Microbiologa Clnica.

LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com

PROCEDIMIENTO

1.- Inocular en superficie. Estras paralelas con el asa o hisopo

2.- Incubar a 35 2C durante 24-48 horas

3.- Lectura e interpretacin de los resultados

Salmonella y Shigella colonias translucidas color mbar o incoloras

Coliformes que fermentan la lactosa o la sacarosa producen colonias de azul oscuras con centros oscuros a verdosas
con brillo metlico. Otras coliformes como Entrobacter colonias aspecto mucoide, colonias rosas. Enterococcos faecalis
parcialmente inhibidos aparecen como colonias incoloras. Estafilococos, Estreptococos y levaduras pueden crecer en este
medio. Algunas bacterias gram-negativas no fermentadores pueden aparecer como no fermentadores de lactosa. A
veces son necesarios los test bioqumicos para identificacin del gnero.

CONTROL MICROBIOLOGICO
Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de clulas tipo, despus de incubacin a
temperatura de 35 2C y observados despus de 24 - 48 horas.

Microorganismos Desarrollo Color Colonia

Enterobacter aerogenes ATCC 13048 Bueno Rosa
Escherichia coli ATCC 25922 Bueno Verde con brillo metlico
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Bueno Incolora
Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 Bueno Incolora
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inhibido Incolora

BIBLIOGRAPHY
American Public Heath Association. Diagnostic Procedures and Reagents. 2nd Ed. APHA, Inc. New York, 1950
A.P.H.A Examination of dairy products. 10th Ed. APHA, Inc. New York, 1953. Society of American Bacteriologists. Manual of
Microbiological Methods MacGraw-Hill New York, 1957.

Diagnostico in vitro
Solo para uso profesional

Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad

www.condalab.com

ALMACENAMIENTO 25C

Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratacin.

Utilizable hasta la fecha de caducidad. 2C

Laboratorios Conda S.A

C/ La Forja 9 28850 Torrejn de Ardoz
Madrid, Espaa

LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com