Efeitos da administrao do Midazolan em doses diferentes em jiboias...

DOI: 10.1590/1089-6891v18e-22230

5.05.00.00-7 MEDICINA VETERINRIA

EFEITOS DA ADMINSTRAO DO MIDAZOLAM EM DOSES

DIFERENTES EM JIBOIAS Boa constrictor LINNAEUS, 1758 (SQUAMATA:
BOIDAE)

EFFECTS OF MIDAZOLAM IN DIFFERENT DOSES IN REDTAIL BOA Boa

constrictor LINNAEUS, 1758 (SQUAMATA: BOIDAE)
Simone Borges Salgueiro De Simone1
Lria Queiroz Luz Hirano1*
Andr Luiz Quagliatto Santos1
1
Universidade Federal de Uberlndia, Uberlndia, MG, Brasil.
*
Autora para correspondncia - liriaqueiroz@yahoo.com.br

Resumo
Objetivou-se comparar os efeitos de duas doses de midazolam em Boa constrictor. Utilizaram-se
20 jiboias, divididas em dois grupos. O grupo 1 (G1), composto por dez animais, recebeu 1 mg/kg
de midazolam e o grupo 2 (G2), tambm com dez animais, 2 mg/kg, pela via intracelomtica. Os
animais do G1 apresentaram dficit de tnus da cabea, tnus muscular, manipulao e locomoo
por 3,89 1,18 horas e os representantes do G2 por 5,47 2,08 horas. Nenhuma jiboia, em ambos os
grupos, manifestou ausncia de reao postural de endireitamento ou alcanaram sedao profunda;
entretanto, observou-se reduo da agressividade, intenso relaxamento muscular e uma dificuldade
de serpentear em todos os exemplares. O tempo de retorno s condies pr-sedativas foi de 4,65
1,22 horas para o G1 e de 6,2 2,37 horas para o G2. No foram observadas diferenas significativas
nas avaliaes da frequncia cardaca e respiratria entre os grupos. Concluiu-se assim que 1 mg/kg
de midazolam provoca nas jiboias o mesmo efeito que 2 mg/kg, porm na menor dose o tempo de
recuperao menor, podendo ser utilizado para a conteno farmacolgica de Boa constrictor, ou
em associaes que visem um efetivo relaxamento muscular.
Palavras-chave: benzodiazepnico; conteno farmacolgica; rpteis; serpentes.

Abstract
The objective of this study was to compare the effects of midazolam in Boa constrictor. We used
20 redtail boas, divided into two groups of ten animals each. Group 1 (G1) received 1 mg/kg of
midazolam and group 2 (G2) 2 mg/kg, by intracelomic injection. The specimens of G1 presented
reduction of head tone, muscle tone, manipulation, and locomotion for 233.50 71.34 minutes and
the representatives of G2 for 328.50 125.35 minutes. No redtail boa belonging to both G1 and G2
presented absence of postural righting reflex or achieved analgesia. However, all specimens tested
showed intense muscle relaxation and difficulty to move in. The turnaround time to pre-sedation
conditions were 279 73.55 minutes for G1 and 372 142.27 minutes for G2. There were no statistical
differences between evaluations of heart and respiratory rates in both groups tested. We concluded,
therefore, in redtail boa, midazolam at the dosage of 1 mg/kg causes the same effect as 2 mg/kg, but
with shorter recovery time, and it can be used to contain Boa constrictor or in associations aimed at
an effective muscle relaxation.
Keywords: benzodiazepinic; pharmacological restraint; reptiles; snakes.

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Recebido em: 26 janeiro de 2013

Aceito em: 04 novembro de 2016

Introduo

O objetivo principal da criao de jiboias em cativeiro o abastecimento do mercado de animais

exticos e silvestres de serpentes(1). Para se obter sucesso na clnica de animais silvestres, a conteno
qumica devidamente realizada fundamental. O estresse um importante fator a ser considerado,
sendo definido como o conjunto de reaes do organismo frente a agresses fsicas, psquicas,
infecciosas, entre outras, que causem a quebra da homeostase. A captura, transporte, colheitas de
material para exames laboratoriais e tratamento so fatores relevantes causadores de estresse e o
estmulo prolongado da conteno fsica pode levar o animal morte(2). Desse modo, o objetivo da
conteno qumica minimizar os riscos, tanto para o animal como para o manipulador(3).
Embora exista relatos acerca da ausncia de necessidade da administrao de medicao pr-anestsica
(MPA) em rpteis(4), muitos autores sugerem a utilizao de agonistas -2, benzodiazepnicos ou
anticolinrgicos para um melhor relaxamento muscular, reduo da dose necessria dos anestsicos
e para a realizao de uma boa conteno(5),(6),(7). Dentre as vantagens que estes frmacos promovem
esto a perda dos reflexos medulares e da atividade muscular, alm da reduo da agressividade,
ponto fundamental tratando-se de animais silvestres(8).
Benzodiazepnicos so frmacos tranquilizantes que agem no sistema nervoso central (SNC),
potencializando os efeitos do cido gama-aminobutrico (GABA), mediante o aumento da afinidade de
conexo entre o receptor GABA e seu transmissor primrio. Embora sejam amplamente empregados
como medicamento pr-anestsico ou na conteno qumica de mamferos, h poucos estudos sobre
a utilizao isolada de benzodiazepnicos em rpteis(8),(9). Em serpentes, o emprego desses frmacos
limita-se ao relato da utilizao do midazolam em procedimentos pouco invasivos ou durante colheitas
de sangue e exames de diagnstico por imagem, sem detalhar os efeitos sedativos ou a durao de
estgios(10).
O MIDAZOLAM, um benzodiazepnico derivado de 1,4 benzodiazepina, capaz de promover
adequado miorrelaxamento, reduzindo a tonicidade muscular, no entanto, pode levar hipotenso
e bradicardia em mamferos(8). Em crocodilianos da espcie Crocodylus porosus, o uso isolado
desse frmaco mostrou-se vantajoso na conteno qumica para colheita de amostras biolgicas e
transporte, com diminuio dos nveis bioqumicos de marcadores de estresse quando comparado
com a conteno fsica e insignificante reduo da frequncia cardaca(9).
Em virtude da escassez de protocolos para a conteno qumica de serpentes e a ausncia de
estudos com o uso isolado de benzodiazepnicos nesses animais, objetivou-se avaliar e comparar os
efeitos clnicos, cardiovasculares e respiratrios do midazolam nas doses de 1 e 2 mg/kg, pela via
intracelomtica (Ice) em Boa constrictor.

Materiais e Mtodos

Conduziu-se o experimento no Laboratrio de Ensino e Pesquisa em Animais Silvestres (LAPAS) da

Universidade Federal de Uberlndia - UFU com 20 exemplares de Boa constrictor hgidas, de ambos

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os sexos, mediante licena do Instituto Chico Mendes de Conservao da Biodiversidade ICMBio

nmero 24326-1 e segundo o parecer N 092/10 do Comit de tica na Utilizao de Animais da
Universidade Federal de Uberlndia (CEUA).
Para a certificao do estado de higidez das serpentes, 15 dias antes da conteno qumica, os animais
foram pesados e submetidos a exame fsico. Na avaliao do estado geral de sade, observou-se
o grau de hidratao por meio da elasticidade da pele e padro de brilho ocular, o escore corporal
pela visualizao e palpao da musculatura paravertebral e exame da cavidade oral para averiguar
alteraes na colorao da mucosa e presena de secreo.
Adicionalmente, avaliou-se a funo cardaca por meio da auscultao da frequncia e ritmo cardacos
(FC), com um aparelho doppler vascular, e frequncia respiratria (FR) por meio da observao dos
movimentos respiratrios e auscultao com o emprego do estetoscpio Os padres comportamentais
de agressividade ou fuga diante da presena humana, interesse e captura de presa viva tambm foram
observados e foi realizado exame coproparasitolgico(5). Certificou-se ainda que nenhum animal
estava em processo de ecdise durante a execuo do experimento, o que poderia interferir no seu
metabolismo(11).
Os espcimes estavam acondicionados individualmente em caixas plsticas que foram numeradas a
fim de identific-los. Os animais foram submetidos a jejum alimentar de 15 dias e foram transferidos
para a sala de anestesia experimental 12 horas antes do procedimento anestsico, onde permaneceram
em jejum hdrico. A temperatura ambiente foi monitorada por um termohigrmetro digital, em
intervalos de uma hora. Para evitar interferncias trmicas ambientais no metabolismo dos rpteis e
esperar a melhor ao dos frmacos utilizados, a temperatura foi mantida dentro da faixa de conforto
trmico das jiboias, de 25 a 30 C, mediante o uso de lmpadas de 100 W(12),(13).
Um gancho foi utilizado para a conteno fsica dos animais, possibilitando maior segurana da
equipe executora. A partir do nmero de identificao das caixas dos animais, eles foram distribudos
aleatoriamente por meio de um programa de randomizao (Random.org, Randomness and Integrity
Services Ltd., Dublin, Irlanda) em dois grupos compostos por cinco fmeas e cinco machos cada. Os
cinco primeiros animais, de ambos os sexos, listados pelo programa constituram o grupo 1 (G1), com
fmeas de peso mdio 2,11 1,10 kg e machos com peso mdio 0,92 0,50 kg, os quais receberam
1 mg/kg de midazolam. O grupo 2 (G2) foi composto por fmeas e machos de peso mdio 1,58
0,28 kg e 0,94 0,34 kg, respectivamente, os quais foram submetidos aplicao de 2 mg/kg de
midazolam.
Em ambos os protocolos, o agente tranquilizante foi aplicado na cavidade celomtica, mediante
prvia antissepsia com gaze umedecida em lcool 70 GL, com o auxlio de seringas estreis de 1 mL,
acopladas a agulhas hipodrmicas 13 x 0,45 mm, no final do tero mdio do corpo, mais precisamente
na linha mediana ventral entre as escamas (Figura 1B)(14).
Previamente aplicao dos frmacos, que correspondeu ao momento basal (MB), avaliaram-se
os parmetros fisiolgicos de frequncia cardaca durante um minuto, por meio de um aparelho
doppler vascular (Figura 1A) e a frequncia respiratria (FR) mediante visualizao dos movimentos
respiratrios. Adicionalmente, foram avaliados os parmetros nociceptivos e motores abaixo(15):
- Bloqueio sensitivo: classificado como ausente ou presente por meio da observao de contraes
musculares e da tentativa de fuga ou agresso, mediante a estimulao por agulha hipodrmica 13
x 4,5 mm na pele e musculatura paravertebral da regio dorsal, no final de cada tero do corpo do
animal. Essa metodologia utilizada em trabalhos de anestesia em ces(16),(17), mas ainda no h relatos
de seu emprego em serpentes e foi estabelecida mediante pilotos realizados em que se observou que o
pinamento de pele nesses animais era dificultado pela pouca elasticidade e alta adeso musculatura.
A avaliao da sensibilidade por meio de agulha hipodrmica mostrou-se eficaz no monitoramento de

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nocicepo, com resposta de afastamento da respectiva regio do corpo estimulada.

- Bloqueio motor: determinado pela observao do tnus de cabea (caracterizado pela capacidade dos
espcimes em sustentar a cabea); do tnus muscular (avaliado pela ausncia de contraes musculares
em todo o corpo do animal); padro de locomoo (no qual se observou a facilidade e velocidade de
locomoo atravs de estmulo manual capaz de promover movimentos de serpentear); facilidade de
manipulao (caracterizada pela aceitao abertura da boca, provocada pelo manipulador). Esses
parmetros foram classificados como (1) quando em correspondncia s respostas do MB, (2) quando
apresentavam resposta intermediria e (3) quando a resposta estava ausente. A observao destes
sinais evidenciou a presena de relaxamento muscular.
- Reao Postural de Endireitamento (RPE): os animais eram posicionados em decbito dorsal e
observou-se a capacidade e o tempo em que os mesmos retornavam posio anatmica da espcie.
Quando o retorno ocorria em at um minuto era considerado presente e aps esse perodo, ausente.
Adicionalmente, foram determinados trs perodos de efeitos do midazolam a partir do momento de
sua aplicao at a recuperao total dos animais (Tabela 1)(5).

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Todos os parmetros citados foram avaliados no MB e aps a aplicao do midazolam, de forma que,
nos primeiros 60 minutos, o monitoramento ocorreu a cada 15 minutos e aps a primeira hora, em
intervalos de 30 minutos at a total recuperao dos exemplares.
Com o objetivo de verificar a existncia de diferenas significativas para os intervalos de tempos das
fases de conteno qumica entre os dois grupos, bem como a diferena entre as medidas de FC e FR
no MB e nos demais tempos de aferio foi aplicado o teste U de Mann-Whitney e comparadas as
sries de dados, duas a duas com nvel de significncia de 5% em um teste bilateral.

Resultados e Discusso

As fases de latncia dos animais de G1 e G2 no diferiram significativamente. Quinze minutos

aps a aplicao do midazolam, observou-se discreto relaxamento muscular (escore 2) em 85% dos
animais. Os demais exemplares alcanaram este escore aos 30 minutos aps a administrao do
frmaco. Os achados do presente estudo contradizem Brazenor e Kaye(18) e Bonath e Zschege(19),
que relataram um perodo de induo do midazolam em rpteis variando entre 40 a 60 minutos;
entretanto, os autores no citaram a realizao de controle de temperatura ambiente e a deposio do
frmaco nesses trabalhos foi por via intramuscular, o que pode influenciar o metabolismo e absoro
do benzodizepnico.
Em mamferos, os benzodiazepnicos reduzem a agressividade, provocam amnsia e alteraes
psicomotoras, possuem ao ansioltica, miorrelaxante e praticamente nenhuma ao analgsica(8).
Em rpteis tambm foram relatadas reduo da agressividade, relaxamento muscular e alterao
psicomotora. Em crocodilianos, a aplicao de 5 mg/kg por via intramuscular de midazolam reduziu
significantemente o nvel de marcadores bioqumicos de estresse e teve um resultado positivo no
comportamento ps-sedao quando comparada com a conteno fsica isolada, o que os autores
sugerem ser um indcio de que, nesses animais, o benzodiazepnico tambm cause amnesia(9). Nas
jiboias avaliadas, no se observou alterao de comportamento no perodo aps a sedao e todos os
animais se alimentaram em at sete dias aps a conteno qumica.
Em ambos os protocolos propostos, o nvel de sedao mximo alcanado foi o estgio 2 definido
por Malley(15). Essa denotao foi consolidada pela presena de intenso relaxamento muscular,
incapacidade de sustentar a cabea e reduo ou ausncia da agressividade. Os animais do G1
permaneceram neste estgio por 233,50 71,34 minutos e os representantes do G2 por 328,50
125,35 minutos (Tabela 2). A aplicao de 1,5 mg/kg, por via intramuscular em Trachemys scripta,
tambm mantidas em temperatura tima para rpteis, proporcionou um tempo mdio de conteno
qumica de 82 minutos, inferior ao do presente estudo(20). Essas variaes nas respostas individuais
e entre espcies demarca a importncia de estudos acerca de frmacos para conteno qumica em
rpteis das diversas subclasses.
Mesmo os animais alcanando efetivo relaxamento muscular, fato este caracterizado pela dificuldade
de locomoo que as serpentes apresentaram e que foram evidenciados pela presena de espasmos e
incoordenao, no foi observada a perda da reao postural de endireitamento (RPE). Assim, pode-
se dizer que os espcimes em questo no alcanaram o perodo hbil da anestesia que, segundo
Bennett(5), definido como sendo o intervalo de tempo entre a perda e o retorno da reao postural de
endireitamento (Figura 2).

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Outros estudos com o uso do midazolam em doses entre 1 e 2 mg/kg, por via intramuscular, em rpteis
da subclasse Testudinata, tambm relataram a presena de facilidade de manipulao e relaxamento
muscular nos exemplares com leve sedao(20),(21). As serpentes do presente estudo apresentaram
reduo da agressividade; entretanto, no alcanaram uma sedao profunda, o que faz necessria
a associao desse benzodiazepnico com outros frmacos, como os dissociativos e opioides, para
efeito mais intenso em procedimentos invasivos(22).
Os protocolos propostos no so indicados isoladamente para cirurgias, pelo fato de no promoverem
ausncia de resposta ao estmulo nociceptivo. Contudo, os animais apresentaram comportamentos
letrgicos, com indiferena ao meio e aproximao humana e, ao serem estimulados pela agulha
hipodrmica, demonstravam pequenas reaes de fuga ao estmulo.
O tempo de recuperao dos animais do G1 foi de 279,00 73,55 minutos, enquanto no G2 este fato

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ocorreu aos 372,00 142,27 minutos, valores com diferenas significativas (p<0,05) (Figura 3). No
h trabalhos que apontem o uso isolado de benzodiazepnicos em serpentes e os intervalos de durao
desse tipo de protocolo descrito em exemplares de testudinata variam entre espcies e de acordo com
a associao realizada(20),(21). Bienzle e Boyd(21) compararam a aplicao de 2 mg/kg de midazolam
isolado com protocolos contendo cetamina isolada (40 mg/kg) ou associada ao benzodiazepnico
(2 mg/kg de midazolam associado a 20 mg/kg de cetamina) em Chelydra serpentina. Os autores
relataram que, aos 210 minutos, todos os exemplares haviam se recuperado e que a associao dos
frmacos potencializou a sedao, sem prolongar significantemente o retorno s condies basais.
Essa observao refora a recomendao da dose do midazolam em 2 mg/kg para Boa constrictor
com a necessidade da realizao de novos estudos comparando a associao de frmacos sedativos
em serpentes e seus efeitos.

Pelo fato de no apresentarem diferenas entre a intensidade dos efeitos e o tempo de recuperao
de 279 minutos ser consideravelmente extenso, indica-se a dose de 1 mg/kg, por via intracelomtica
em serpentes da espcie Boa constrictor. Segundo Spinosa(8), um incremento nas doses dos
benzodiazepncos no aumenta o grau de tranquilizao, apenas os efeitos adversos, o que pde ser
constatado no presente estudo, uma vez que o dobro da dose apenas prolongou o perodo de sedao,
sem incrementar os efeitos desejados com o uso do benzodiazepnico (Tabela 3).
Assim como no estudo com o emprego de midazolam isolado em Trachemys scripta(20), no foram
observadas diferenas significativas na frequncia cardaca entre G1 e G2, ou dentro dos grupos em
relao ao MB nas jiboias, a FC variou de 27 a 77 bpm (Figura 4).
Bennett(12) afirma que os rpteis podem permanecer em apneia por at 24 horas realizando respirao
percutnea e anaerbica. No presente estudo, optou-se por avaliar a FR e no o tempo de apneia
como Carregaro et al.(23) em pesquisa com cascavis, uma vez que as jiboias no apresentaram apneia
prolongada aps a aplicao do benzodiazepnico. A presena da apneia nas cascavis foi promovida
com o emprego da cetamina, que um frmaco com ao dissociativa; em relao ao midazolam,
a ausncia da apneia era esperada uma vez que no h relatos da ocorrncia desse evento com o uso
isolado de benzodiazepnico em rpteis(9),(18). No se constataram diferenas nas FR entre os animais
do G1 e do G2 assim como nos estudos com o uso de midazolam isolado em Trachemys scripta e
Crocodylus porosus em que os autores relataram ausncia de bradpneia(9),(20) (Figura 5).

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Segundo West et al.(24), serpentes com grau moderado a severo de desidratao devem receber
a reposio de fluidos pela via Ice, para que se tenha uma melhora na absoro das substncias
administradas. Buscando uma melhor ao dos anestsicos, neste estudo tambm optou-se pela via
Ice; entretanto, ao se comparar com a intensidade e o perodo de latncia de pesquisas realizadas com
a aplicao intramuscular de midazolam em repteis, no foi observada diferena entre as duas vias,
por isso indica-se a realizao de estudos farmacocinticos de frmacos administrados na cavidade
celomtica para o melhor entendimento da absoro e metabolismo dessa via.

Concluses

Constatou-se que o midazolam nas doses de 1 e 2 mg/kg em jiboias promove tranquilizao segura,
com efetivo relaxamento muscular e sem alteraes fisiolgicas de FC e FR; no entanto, no provoca
analgesia, contraindicando o seu uso isolado para realizao de procedimentos cirrgicos. Entretanto,
pelo rpido incio de ao e considervel durao de ao e recuperao, o agente pode ser utilizado
para a conteno farmacolgica de Boa constrictor em procedimentos poucos invasivos como
colheitas de amostras biolgicas, exames de diagnstico por imagem e transporte ou em associaes
que visam um efetivo relaxamento muscular. Pela diferena no tempo de recuperao e ausncia de
vantagem na intensidade dos efeitos observados nos dois grupos, indica-se o emprego de 1 mg/kg de
midazolam por via intracleomtica para a conteno farmacolgica de Boa constrictor.

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