A espectrofotometria uma tcnica analtica cujo seu objetivo
determinar a concentraes de compostos orgnicos e inorgnicos presentes nas solues atravs da luz, podendo ser identificados por seus espectros caractersticos. Para esta tcnica, utiliza-se o espectrofotmetro que o aparelho que analisa a interao da luz com a matria e a partir da, permitido a realizao de diversas anlises. A luz liberada caracterizada como sendo uma radiao eletromagntica que apresenta um comportamento de campos eltricos e magnticos oscilantes, com certos comprimentos de ondas distintos. H duas lmpadas presentes no espectrofotmetro, uma luz branca para cores visveis e infravermelhas, e outra para luz ultravioleta, onde um prisma (seletor) reflete para o monocromador que faz a difrao em uma luz monocromtica, de acordo com o comprimento de onda emitido. Quando o comprimento de onda esta entre 400 a 700 nm, ela pertence classe da cor visvel, menor que 400nm classificado como ultravioleta e maior que 700nm como infravermelho, como mostra a Figura 1.
Figura 1 - Comprimentos de Onda da Luz
O seletor serve para selecionar o melhor comprimento de onda para
leitura no espectrofotmetro ou baseado O principio da espectrofotometria esta baseada na Lei de Lambert- Beer, que estabelece que a absorbncia diretamente proporcional concentrao da soluo da amostra. Para determinar a absorbncia da amostra utilizado o espectrofotmetro, que composto por duas lmpadas (cujas j foram citadas), onde a luz vai ser refletida no monocromador, que faz com que apenas uma cor de luz seja emitida. Esta luz passar pela cubeta, que um recipiente prprio para soluo, onde ela pode ser feito de quartzo, vidro e acrlico, mas recomenda-se que seja de quartzo, porque o vidro e o acrlico absorver UV, causando reflexo de luz invisvel. Assim que a luz passar pela cubeta, vai chegar ao detector, onde ele vai detectar a frao de luz recebida e transferir as informaes para a tela do computador acoplado ao aparelho. Para realizar a anlise em um espectrofotmetro, deve-se preparar uma soluo quebrando a amostra no solvente escolhido dentro de um balo volumtrico (geralmente o solvente a gua). Na cubeta primeiramente colocado o solvente puro para minimizar os erros que podem vir acontecer, este procedimento chamado de leitura em branco. Aps esse procedimento, medida a absorbncia da amostra. Para que se tenha um resultado de melhor preciso necessrio que o equipamento esteja calibrado e seja manuseado de maneira correta, de acordo com o manual de instrues.
Referncias
Fundamentos de Qumica Analtica - West, Donald M.; Holler, F. James; Skoog,
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Harris, Daniel C.; Anlise Qumica Quantitativa;traduo Carlos Alberto Riehl...[et
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Jones, Loretta; Atkins, Peter Princpios de Qumica - Questionando a Vida Moderna
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Lenhinger, Albert Lester; Princpios de Bioqumica.3.ed. Guanabara Koogan, Rio de