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INTEGRANTES:
CRISTHIAN BENALCAZAR
SHARON ORTIZ
GEOVANNA PUCHAICELA
PATRICIA TORRES
FECHA: 09-05-2017
NRC: 4162
SmaI
La enzima de restriccin SmaI fue extrada por primera vez del bacilo gramnegativo Serratia
marcescens perteneciente a la familia de las enterobacterias. Pertenece a las enzimas de
restriccin de Tipo II, es decir, corta ambas cadenas de DNA y utiliza como cofactor Mg 2+.
Tiene la caracterstica de reconocer una secuencia corta (5 CCCGGG 3), no metilada,
palndromas y realizar un corte de tipo romo mediante una actividad cataltica hidrolasa.
(REBASE , s.f.)
Imagen 1. Captura de pantalla. Programa bioinformtico Rebase. Descripcin de la enzima SmaI. Enz Num 1704.
(REBASE , s.f.)
Imagen 2. Captura de pantalla. Programa bioinformtico BioLabs. Enzimas que reconocen la secuencia
5 CCCGGG 3. (BioLabs, s.f.)
Imagen 3. Captura de pantalla. Programa bioinformtico BioLabs. Descripcin de las propiedades y uso de la enzima
Smal. (BioLabs, s.f.)
APLICACIONES
Figura 1. Un esquema de la nueva estrategia para la terapia gnica de la enfermedad NARP causada por la mutacin Mt8993T G.
Cuando Se transfect el NARP3-1 cybrids con el plsmido que contiene el gen fusionado
(pMACSKkII-pCoxIV-SmaI), el mutante mtDNA fue eliminado por completo, y slo una
pequea cantidad de mtDNA de tipo salvaje se detect (Figura 2, da 2).
Debido a que la cantidad de ADN total aplicada a cada carril de la figura 2 era la misma, la
seal de transferencia de Southern en cada muestra refleja el contenido de ADNmt en clulas
individuales.
Estos resultados indican que las enzimas de restriccin importadas en las mitocondrias son
segregadas con seguridad dentro del compartimiento de la matriz mitocondrial sin atacar el
ADN nuclear, al menos en las condiciones de cultivo celular usadas aqu.
Para confirmar si la expresin transitoria de las endonucleasas de restriccin dirigidas a las
mitocondrias puede aplicarse de forma segura para terapia in vivo, se introdujeron dos tipos de
plsmidos, uno que expresaba -galactosidasa y el otro que expresaba EcoRI dirigido
mitocondrialmente, en hmster.
Bibliografa
BioLabs. (s.f.). Smal. Obtenido de https://www.neb.com/products/r0141-smai
REBASE . (s.f.). SmaI. Obtenido de The Restriction Enzyme Database:
http://rebase.neb.com/rebase/enz/SmaI.html
Tanaka, M., Borgeld, H. J., Zhang, J., Muramatsu, S. I., Gong, J. S., Yoneda, M., ... & Shamoto,
M. (2002). Gene therapy for mitochondrial disease by delivering restriction endonuclease SmaI
into mitochondria. Journal of biomedical science, 9(6), 534-541.