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Universidad Politcnica Salesiana, Centro de investigacin y Valoracin de la Biodiversidad CIVABI, Av. 12 de Octubre N24-22
y Wilson, Quito, Ecuador.
Resumen
La presente es una investigacin que valora la actividad antibacteriana frente a patgenos nativos gram positivos y gram nega-
tivos y evala la toxicidad frente a Artemia salina en extractos de las hojas del Kuiship (Jacaranda copaia (Aubl.) D.Don). En primer
lugar se entrevistaron a tres Uhi Shu (hombres sabios) para determinar usos medicinales previos. A continuacin se recolect el
material vegetal en la Comunidad de Capirona y se obtuvo el extracto etreo, etanlico y acuoso de las hojas de J. copaia. Se reali-
z un screening fitoqumico, antibiogramas y se determin la concentracin mnima inhibitoria (CMI) sobre bacterias nativas que
presentaron sensibilidad frente a los extractos en los ensayos de difusin en agar. Finalmente se realiz un bioensayo in vitro con
Artemia salina para determinar la toxicidad de los extractos de J. copaia. Como metabolitos secundarios se identificaron: aceites y
grasas, triterpenos-esteroides, catequinas, saponinas, azcares reductores, alcaloides, quinonas, taninos y principios amargos. En los
ensayos antibacterianos las cepas sensibles fueron: S. aureus frente al extracto etreo y E. coli frente al extracto acuoso de J. copaia;
se determin la CMI para estas dos bacterias nativas. En el bioensayo con A. salina se puso de manifiesto que los extractos etreo y
etanlico de J. copaia presentan toxicidad moderada a una concentracin de 1000 ppm.
Palabras claves: : Jacaranda copaia, Artemia salina, concentracin mnima inhibitoria, actividad antibacteriana, toxicidad.
Abstract
The purpose of this study was to assess the antibacterial activity of gram positive and gram negative pathogens and evaluate their
toxicity with respect to Artemia salina in Kuiship (Jacaranda copaia (Aubl.) D. Don) leaf extracts. First, three Uhi Shu (wise man) we-
re interviewed to determine their previous medicinal uses. Plant tissue was gathered from the Capirona Community and ethereal,
ethanolic, and aqueous extracts were obtained from the J. copaia leaves. Then a phytochemical, antimicrobial screening process was
undertaken, determining the minimum inhibitory concentration (MIC) of native bacteria that presented positive or sensitive anti-
bacterial activity when faced with extracts in agar diffusion tests. Finally, an in vitro bioassay with Artemia salina was performed
to determine the toxicity of the J. copaia extracts. The presence of the following secondary metabolites was identified: oils and fats,
triterpenes-steroids, catechins, saponins, reducing sugars, alkaloids, quinones, bitter tannins and constituents. During the antibacte-
rial assays, the sensitive bacterial strains were: S. aureus versus the ethereal extract, and E. coli versus the J. copaia aqueous extract. The
MIC was determined for these two native bacteria. The bioassay for A. salina revealed that the J. copaia ethereal and ethanolic extracts
presented moderate toxicity with a concentration of 1000 ppm.
Keywords: Jacaranda copaia, Artemia salina, minimum inhibitory concentration, antibacterial activity, toxicity.
Forma sugerida de citar: Tapia, W. y G. Armas. 2014. Estudio de la actividad antibacteriana y txica del Kuiship
(Jacaranda copaia). La Granja: Revista de Ciencias de la Vida. Vol. 19(1): 12-20. ISSN: 1390-
3799.
Tena y en la comunidad Capirona, para conocer los tilada) de los extractos fueron evaporados en su to-
usos ancestrales de dicha planta. talidad a bao mara a una temperatura inferior a
Se encuestaron a tres personas consideradas Uhi 40 C y los extractos secos se disolvieron en Dimetil-
Shu (hombre sabio) en sus respectivas comunida- sulfxido DMSO.
des (Tena, Capirona y a las afueras de Capirona). Se procedi a establecer los siguientes ensayos
Los informantes involucrados fueron dos del sexo para comprobar la actividad biolgica de inhibicin
masculino y una del sexo femenino; sus edades fluc- y su concentracin mnima inhibitoria de acuerdo a
tan entre los 50 y 70 aos. los mtodos de difusin en disco de Kirby - Bauer y
dilucin en caldo descritos en el MAnual de Gama-
2.2 Seleccin y tratamiento de las mues- zo et al. (2005); los ensayos se realizaron por tripli-
cado y cuadruplicado respectivamente. Para la pre-
tras
sente investigacin se utilizaron cepas nativas dos
En la Comunidad de Capirona, se procedi a selec- gram positivas, dos gram negativas y una levadu-
cionar tres rboles de J. copaia con caractersticas si- ra proveniente del Laboratorio de Microbiologa DI-
milares, de stos se tomaron tres muestras de hojas, Serlab - PUCE siendo estas: Staphylococcus aureus
a razn de 2 kilos por muestra; con las que se con- (Cod.EB-I-1), Bacillus pumilus (Cod. EB-I-93), Esche-
form la muestra madre de 6 kilos. La recoleccin se richia coli (s/c), Salmonella sp. (Cod. EB-I-56) y Can-
llev a cabo el da 20 de noviembre del 2011. Adicio- dida albicans (s/c).
nalmente se tomaron tres muestras de flores, frutos, Se determinaron los tamaos de los halos de in-
semillas y corteza. hibicin; los mismos que fueron interpretados de
De la muestra madre se tom 50 g de hojas que acuerdo a las tcnicas de comprobacin de activi-
fueron lavadas con abundante agua y cepillo, se cor- dad teraputica de las plantas medicinales (Alonso,
taron las hojas en pedazos pequeos de 1 a 3 cm; las 2006) donde se consider con actividad antibacteria-
mismas que se utilizaron para realizar maceraciones na positiva o sensible (S) si el halo fue mayor a 9
sucesivas con solventes de polaridad creciente (ter mm; si el halo se encontr entre 6 - 9 mm la activi-
etlico, etanol y agua destilada); el material vegetal dad se consider intermedia o moderada (I) y si el
fresco se coloc en un frasco y se adicion tres ve- halo fue menor a 6 mm se consider actividad bac-
ces el peso de la muestra en volumen del solvente; teriana negativa o resistente (R).
las condiciones fueron: 48 horas de maceracin, uso Se valor la actividad txica in vitro de los ex-
de frascos obscuros para evitar la incidencia de luz tractos de Kuiship mediante el ensayo de toxicidad
solar, 1 hora diaria de agitacin constante y tempe- con Artemia salina por triplicado. Las condiciones de
ratura ambiente. Las maceraciones se realizaron por incubacin de los nauplios en las diluciones de los
triplicado. Transcurridas las 48 horas de maceracin extractos fueron: agua salina al 3,5 % oxigenada, pH
se filtr el contenido y se realiz el screening fitoqu- 8, incubacin durante 24 horas en un lugar obscuro
mico de acuerdo al Manual de Miranda (2000) con y temperatura de 24 C. Transcurridas las 24 horas
el fin de determinar cualitativamente los principa- de incubacin se realiz un recuento tanto de nau-
les grupos de constituyentes qumicos presentes en plios vivos como de muertos.
la planta; todos los ensayos se efectuaron por tripli- Se determin la dosis letal media terica de los
cado. extractos que presentaron toxicidad moderada me-
Transcurridas las 48 horas de maceracin se fil- diante el mtodo de mnimos cuadrados.
tr el contenido y se realiz el screening fitoqumico
de acuerdo al Miranda (2000) con el fin de determi-
nar cualitativamente los principales grupos de cons-
3. Resultados
tituyentes qumicos presentes en la planta; todos los
ensayos se efectuaron por triplicado. 3.1 Informacin etnobotnica obtenida
por entrevista
2.3 Actividad antibacteriana y toxicidad
Los nombres vernculos de la J. copaia en el lugar
Para los ensayos de actividad antibacteriana y toxi- de investigacin (provincia de Napo) son: Pikshi-
cidad los solventes (ter etlico, etanol y agua des- gua, Kuiship, Kupa, Rabo de ratn y Hoja de canoa.
La sabidura a cerca de esta planta al ser un conoci- higua, Kuiship, Kupa, Rabo de ratn y Hoja de ca-
miento ancestral se lo transmite de forma oral y a la noa. La sabidura a cerca de esta planta al ser un co-
misma lnea de sangre es decir de padres a hijos o nocimiento ancestral se lo transmite de forma oral y
de abuelos a nietos. a la misma lnea de sangre es decir de padres a hijos
Las tres personas entrevistadas conocan la plan- o de abuelos a nietos.
ta de estudio y la utilizaron con fines maderables
y medicinales; entre los etno-usos que le dan a la
planta se puede citar para perder peso (30 %), como
cicatrizante (30 %), para tratar infecciones de la piel
(30 %) y para combatir hongos de los pies (10 %). Ca-
be recalcar que en dos encuestas se mencion que
los antiguos guerreros de las tribus beban agua de
esta planta antes de salir a las batallas y durante es-
tas para no cansarse y evitar el hambre.
Las partes de la planta con fines medicinales que
utilizan son las hojas (50 %) y semillas (50 %). Para
las infecciones y hongos se lavan la zona afectada
con la decoccin de las hojas y el emplasto de estas
se lo aplica sobre la lesin; como cicatrizante se apli-
ca un emplasto de las hojas sobre la herida y para
bajar de peso se toma la decoccin de las semillas y
el emplasto de estas se lo aplica sobre el abdomen.
El uso del material vegetal es del 50 % en decoccin
y el otro 50 % en emplasto.
Figura 1. Halo de inhibicin S. aureus
Las hojas como droga vegetal son utilizadas en
cualquier momento del crecimiento de la planta;
mientras que las semillas se las utiliza cuando estas 3.2 Screening fitoqumico
caen del rbol.
Los nombres vernculos de la J. copaia en el lu- Los resultados de screening fitoqumico obre la J.
gar de investigacin (provincia de Napo) son: Piks- Copaia con ter, etanol y agua se presentan en la Ta-
bla 1.
Tabla 1. Screening fitoqumico de los extractos de J. copaia para identificacin de compuestos. = presencia.
3.3 Sensibilidad de las bacterias - difu- sider como actividad antibacteriana positiva o sen-
sin en agar sible (S) si el halo fue mayor a 9 mm; si el halo se
encontr entre 6 - 9 mm la actividad se consider in-
Se determinaron los tamaos de los halos; los mis- termedia o moderada (I) y si el halo fue menor a 6
mos que fueron interpretados de acuerdo a las tc- mm se consider actividad bacteriana negativa o re-
nicas de comprobacin de actividad teraputica de sistente (R), tal como se presenta en la Tabla 2 y la
las plantas medicinales Alonso (2006) donde se con- Figura 1.
Tabla 2. Tamao e interpretacin del halo de inhibicin; actividad antibacteriana sensible (S), intermedia (I) y resistente
(R).
Tabla 5. Conteo de nauplios en los extractos de J. copaia. 1= primer ensayo; 2= segundo ensayo; 3= tercer ensayo; T =
total de nauplios vivos; P = porcentaje de mortalidad.
Al observar que en la comunidad Huitos y en un halo de inhibicin promedio de 8,87 mm. A pe-
los sectores aledaos a la Comunidad de Capirona sar de que las dos plantas aqu citadas pertenecen a
las dos especies de Jacaranda (Jacaranda obtusifolia y la misma familia y gnero se puede evidenciar que
Jacaranda copaia) exhiben similares usos como cica- J. copaia presenta una actividad antibacteriana ms
trizantes y desinfectantes; por lo que es posible de- potente.
ducir que estas especies tienen metabolitos secunda- En el estudio de la actividad antibacteriana con-
rios similares. tra cepas de Pseudomona aeruginosa y la toxicidad
El estudio fitoqumico y antibacteriano de los ex- aguda de las hojas de Jacaranda decurrens (Univer-
tractos de las hojas de Jacaranda coerulea L. Griseb sidad Nacional de la Plata, 2011) realizado en Brasil,
(Capote et al., 2011) realizado en Cuba; presenta en probaron la toxicidad de esta planta de acuerdo a
los ensayos antibacterianos inhibicin de S. aureus OECD Guideline for Testing of Chemicals, conclu-
frente a los extractos de acetato de etilo y acuoso yendo que el extracto etanlico de J. decurrens no
con halos entre 7 y 9 mm de dimetro y E. coli que presenta toxicidad aguda. En la presente investiga-
tambin fue ensayada, es resistente ante todos los cin se determin el grado de toxicidad de Jacaranda
extractos. En la presente investigacin de Jacaranda copaia a travs de bioensayos con Artemia salina; el
copaia (Aubl.) D. Don. se determin que S. aureus es extracto acuoso tampoco present toxicidad alguna,
sensible frente al extracto etreo con un halo de in- mientras que los extractos etreo y etanlico no pre-
hibicin promedio de 14,4 mm y que E. coli tambin sentan alta toxicidad, pero si moderada, a una con-
presenta sensibilidad frente al extracto acuoso con centracin de 1000 ppm.