IDENTIFICACION DE Lactobacillus

EN HECES DEL LANGOSTINO

Litopenaeus vannamei

ALUMNO: ALEJOS SNCHEZ, ULISES V.

INTRODUCCIN

Las bacterias lcticas probiticas o probiticos, como en este caso

los Lactobacillus son organismos vivos que se encuentran en la
naturaleza y que, al ser parte de la dieta de los camarones,
mejoran su capacidad inmunolgica natural y su capacidad de
reaccin sin dejar en sus cuerpos residuos perjudiciales para la
salud.
MATERIAL Y MTODOS
MATERIAL USADO:
Muestra de heces de langostino
Lminas cubre objeto
Un tubo falcon
Agar M.R.S.
Un Matraz Erlenmeyer 100 ml
Una probeta 500 ml
Autoclave
Agua destilada
Un tubo de pendor
Una Micropipeta 1000
Asa de barrido
Cajas Petri de cristal
Cmara de flujo laminar
Incubadora
MTODOS
Para realizar la identificacin de Lactobacillus en heces del
langostino Litopenaeus vannamei, procedemos a identificar el lugar
de donde se extraer la muestra.
Antes de ello de proceder a preparar el medio de cultivo Agar
M.R.S., y despus se realizar a hacer el conteo de las UFC
(Unidades Formadoras de Colonias)
PREPARACIN DE MEDIO DE CULTIVO AGAR M.R.S.
(MAN, ROGOSA Y SHARPE)

Se debe tener todo el material a Formula (en gramos por litro)

usar, totalmente lavado y - Proteosa peptona N 3 10.0
- Extracto de carne 8.0
esterilizado para poder realizar un
- Extracto de levadura 4.0
buen medio de cultivo Agar M.R.S.,
- Glucosa 20.0
solo selectivo para Lactobacillus. - Monoleato de sorbitn 1 ml
Suspender 64 g del medio en un - Fosfato dipotsico 2.0
litro de agua destilada. Reposar 5 - Acetato de sodio 5.0
minutos y mezclar calentando a - Citrato de amonio 2.0
- Sulfato de magnesio 0.2
ebullicin durante 1 2 minutos.
- Sulfato de manganeso 0.05
Esterilizar en autoclave durante 15
- Agar 13.0
minutos a 121 C. - pH final: 6.4 0.2
 INSTRUCCIONES
1. Para identificacin del Lactobacillus se realizaran 4 repeticiones y un
testigo con aproximadamente 12 ml de Agar M.R.S. para cada caja
Petri; entonces para preparar 60 ml de Agar M.R.S., para cinco
placas Petri se utilizara:



= = .

2. Para cinco cajas Petri se utilizara 3.84 gramos de medio cultivo, se
ajustara a 2% de cloruro de sodio.
 PROCEDIMIENTO
1. Preparar y autoclavar el Agar M.R.S.
2. Plaquear: el matraz enlermeyer se destapa cerca del mechero,
se flamea el extremo del matraz por la llama y se vierte hacia
la placa Petri esterilizada, se sella la placa Petri por los
extremos laterales con parafilm.
3. La muestra de heces de langostinos (Litopenaeus vannamei) se
extraer con la ayuda de dos laminas cubre objeto para
colocarlo en un tubo falcn de un comedero de un estanque de
la Facultad de Ingeniera Pesquera y Ciencias del Mar
4. Se procedi a pesar la muestra de heces; P = 0.3 gramos.
5. Luego se llev la muestra a la cmara de flujo laminar.
6. Utilizando la micropipeta se le adicion 1000 , de solucin salina NaCl al
2 %, para homogenizar la muestra, a travs de movimientos continuos.
7. Se dej reposar la muestra.
8. Se realiza la siembra con una micropipeta graduada a 50 , esta
cantidad se sembr en las 4 placas Petri con el medio de cultivo Agar
M.R.S.
9. Se realiz el barrido con la asa de barrido por todo el medio de cultivo,
dejndose una placa de testigo.
10.Se procede a sellar las 4 placas Petri sembradas, con papel parafilm y
lleva a la incubadora por 24 horas, y luego se realizara el conteo de las
UFC (Unidades Formadoras de Colonias).
RESULTADOS
Del trabajado realizado de obtuvieron los siguientes resultados.

REPTICIONES NUMERO COLOR DIAMETRO FORMAS

R-1 0 UFC
R-2 0 UFC
R-3 1 UFC Cremosa 3 ml Circular
R-4 0 UFC
Testigo
CONCLUCIONES
Se concluye que de las 4 repeticiones realizadas solo en la R 3
se obtuvo una sola UFC, color cremosa con 3 mm de dimetro.
De acuerdo con los resultados, solo se pudo observar una UFC,
esto se debi a que la muestra obtenida de heces de langostino
del comedero de un estanque la FIPCM, estuvo en tratamiento
con antibiticos, por lo cual cabe precisar que para obtener un
mejor resultado o mas UFC el langostino Litopenaeus vannamei,
no debio haber estado con antibiticos.