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Laboratorio de Biologa Informe de Laboratorio N6

EXPERIMENTO 1: Observacin de Bacterias

RESULTADOS:
Al observar la muestra de bacterias del suelo diluidas aplicandoles una tincin gram
se puede observar la tincin de las bacterias (Figura N1), esta tincin se identifica
como Gram (+), del bacilo granulado, visualizandose teido del color caracterstico
del cristal violeta.

Figura N1. Muestra de colonia de bacterias gram (+).

DISCUSIN:
La forma de las bacterias al microscopio est determinada por la rigidez de su pared
celular. Estas se diferenciar de acuerdo a la estructura y grosor de la pared, en
bacterias Gram + y bacterias Gram - (Danes,199_).

BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

Poseen: Poseen una pared celular ms compleja:


-Pared celular interna. -Pared celular interna.
-Pared de peptidoglucano. -Pared de peptidoglucano.
*Peptidoglucano: es un exoesqueleto que - Bicapa lipdica externa.
da consistencia y forma esencial para
replicacin y supervivencia de la bacteria.

No tiene membrana externa. Membrana Externa: Forma un saco rgido


alrededor de la bacteria, mantiene
estructura y es barrera impermeable a
macromolculas, ofrece proteccin en
condiciones adversas.

Espacio periplasmtico: Espacio entre la


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No tiene espacio periplasmtico. superficie externa de la membrana


citoplasmtica y la interna de la
membrana externa.

La red de murena est muy desarrollada La red de murena presenta una sola
y llega a tener hasta 40 capas. capa.

En la tincin de Gram, retienen la tincin Quedan decoloradas.


azul.

Conservan el complejo yodocolorante. Pierden el complejo yodocolorante.

Poseen otros componentes: cidos Poseen protenas con concentraciones


teicoicos y lipoteicoicos, y polisacridos elevadas.
complejos.

GRAM POSITIVAS:
La envoltura celular de las bacterias Gram-positivas comprende la membrana
citoplasmtica y una pared celular compuesta por una gruesa capa de
peptidoglicano, que rodea a la anterior, esta pared se une a la membrana
citoplasmtica mediante molculas de cido lipoteicoico. La capa de peptidoglicano
confiere una gran resistencia a estas bacterias y es la responsable de retener el
tinte durante la tincin de Gram (Figura N3). A diferencia de las Gram-negativas,
estas bacterias no presentan una segunda membrana lipdica externa.

GRAM NEGATIVAS:
Las bacterias Gram negativas no se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de
Gram (Figura N3). Esta caracterstica est ntimamente ligada a la estructura de la
envoltura celular, por lo que refleja un tipo natural de organizacin. Esta ligadura es
por poseer una pared fina que hace que no se retenga el colorante.

Figura N2 Diagrama de la pared bacteriana.


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Figura N3. Tincin Gram de las bacterias.

Las diferencia entre las de las bacterias Gram positivas y Gram


negativas se evidencian debido a su pared. La pared celular de las bacterias
Gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglucano, adems de dos
clases de cidos teicoicos: En la cara interna de la pared celular y unido a la
membrana plasmtica, se encuentra el cido lipoteicoico, y ms en la
superficie, el cido teicoico que est vinculado solamente en el
peptidoglucano (murena). Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las
Gram negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana
plasmtica exterior (de composicin distinta a la interna) por medio de
lipoprotenas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano unida a una
membrana exterior por lipoprotenas. La membrana exterior est hecha de
protena, fosfolpido y lipopolisacrido. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias
se tien diferencialmente debido a estas diferencias constitutivas de su
pared. Especficamente sera por el peptidoglicano, ya que es el material que
confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Gram positivas lo
poseen en mucha mayor proporcin que las Gram negativas.La diferencia
que se observa en la resistencia a la decoloracin, se debe a que la
membrana externa de las Gram negativas es soluble en solventes
orgnicos,como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa de
peptidoglicano que posee es demasiado delgada como para poder retener el
complejo de cristal violeta/yodo que se form previamente, y por lo tanto este
complejo se escapa,perdindose la coloracin azul-violcea. Pero por el
contrario, las Gram positivas, al poseer una pared celular ms resistente y
con mayor proporcin de peptidoglicanos, no son susceptibles a la accin del
solvente orgnico, sino que este acta deshidratando los poros cerrndolos,
lo que impide que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y
manteniendo la coloracin azul-violcea.

La tincin requiere de tres reactivos qumicos que se aplican en


secuencia. El primer reactivo es la tincin primaria se utiliza Cristal Violeta su
funcin es impartir color a todas las clulas con el fin de establecer un
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contraste de color tindolas de morado. El segundo reactivo es un agente


decolorante se utiliza alcohol etlico al 95 % este alcohol tiene doble funcin:
deshidratante de protenas y solvente de lpidos, disuelve los lpidos de la
parte externa de la pared dejndola ms porosa, de esta manera el complejo
Cristal Violeta es removido de la capa de mureina de las bacterias Gram
negativas mientras en la pared ms gruesa de las Gram positivas retienen el
tinte en su interior. El tercer reactivo es el colorante de contraste Safraina, le
da a las clulas decoloradas un color que contraste con el colorante primario
o sea rojo en el caso de las bacterias Gram negativas. De esta manera los
tipos de clulas se pueden distinguir de acuerdo al colorante absorbido.
(Mota, 2011)
La fijacin y afinidad que hay al hacer una tincin a la bacteria
depende de su estructura, especficamente su pared celular, debido a que las
bacterias Gram + presentan una pared celular gruesa compuesta por
peptidoglucano que les da mayor resistencia y retencin durante la tincin
gram; en cambio las bacterias Gram - tan solo posee una pared fina que
provoca que no se retenga el colorante.

EXPERIMENTO 2: Observacin de Cianobacterias

RESULTADOS:
Al observar la azolla (helecho de agua) triturada en el microscopio aplicando el
squash se observa el interior de sus clulas (Figura N4) en las que se identifican
sus clulas vegetativas (Figura N5), heterocistos y acinetos (Figura N6),entre otras
estructuras dentro de la Ababeana azollae.

Figura N4. Muestra de Azolla-Anabaena.


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Figura N5. Anabeana azollae;Clulas vegetativas (1); heteroquistes (2).

Figura N6. Identificacin del Acineto y Heterocisto.

DISCUSIONES:
La asociacin Azolla-Anabaena (nica simbiosis conoc.ida entre una
pteridofita y una cianofcea) es de tipo simbitica. Anabaena es un simbionte
extracelular que habita en cavidades formadas por en las hojas del helecho
(envs del lbulo superior de las hojas), del que obtiene proteccin fsica y
qumica, a la vez un aporte de nutrientes minerales y compuestos
energticos.Por su parte, Azolla est en disposicin de utilizar sustancias
nitrogenadas sintetizadas por la cianofcea que fija el nitrgeno atmosfrico.
(Moore, 1969). Por ejemplo en un laboratorio se logr separar Azolla de
Anabaena, evidenciandoce que es imposible que crezca en medios carentes
de N combinado, y an cuando este se encuentre en abundancia el
crecimiento es menor que en plantas que con el microsimbionte. (Becking,
1978).
La simbiosis Azolla-Anabaena es por lo tanto unreficiente fijador de N 2
atmosfrico, adems de reunir una serie de caractersticas, como fcil
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propagacin, rpido crecimiento, produccin de abundantes hojas con un alto


contenido de N, rpida descomposicin en el suelo, etc. (Ashton, 1976).
Las cianobacterias presentan diversidad de formas: Unicelulares,
pluricelulares filamentosas, filamentosas ramificadas, no ramificadas, con
heterocistes (clulas vegetativas diferenciadas que se encuentran
regularmente a lo largo de un filamento o en un extremo del mismo).
Su pared celular es semejante a la pared celular de las bacterias
gram negativas, no contiene celulosa pero es muy resistente debido a la
presencia de polisacridos unidos a polipptidos. Adems secretan una
sustancia mucilaginosa que les confiere la defensa contra predadores ya que
puede ser txica.
Algunas especies forman clulas especiales con pared exterior
engrosada (Acinetos) que les permite permanecer latentes cuando las
condiciones ambientales son desfavorables (sequa, oscuridad, congelacin).
Estos acinetos se rompen durante la germinacin para dar paso a la
formacin de nuevos filamentos vegetativos.
Las membranas fotosintticas son a menudo complicadas y forman
multicapas ,la membrana plasmtica puede presentar invaginaciones o
mesosomas parecidos a los de las bacterias gram positivas, la membrana
celular contiene cidos grasos con dos o ms enlaces dobles en la cadena
hidrocarbonada a diferencia de los dems procariontes que poseen cidos
grasos saturados.
Tienen una sola forma de clorofila, la clorofila A y todas ellas tienen
pigmentos biliproteicos (ficobilinas) que funcionan como pigmentos
accesorios de la fotosntesis. Una clase de ficobilinas, las ficocianinas, es
azul y junto con el verde de la clorofila es responsable del color azul verdoso
de los microorganismos.
Protoplasma (citoplasma), separado en cromoplasma (perifrico y
pigmentado) y centroplasma (central, granuloso e incoloro). Nucleoplasma
contiene el ADN puede aparecer en forma de pequeos grnulos, pueden
aparecer granos de volutina, cianoficina y ribosomas. Los pigmentos que se
encuentran en el citoplasma son: clorofila a, c, carotenoides, ficoxantina,
ficocianina C, de color azul, ficocianobilina, ficoeritrina C, de color rojo,
ficoeritrobilina entre otros.
Poseen pigmentos fotosintticos en los cromatforos de los
cloroplastos. Tambin utiliza el agua como fuente de electrones para realizar
la fotosntesis. (Gama 2004)
Envoltura mucilaginosa (viscosa y gelatinosa).
Carece de mitocondria y aparato de Golgi. (Villee,1996)
Variaciones estructurales:
Vescula de gas y heterocisto: Entre las estructuras citoplasmticas
estn las vesculas de gas, que son comunes en las especies que viven en
aguas libres, su funcin es regular el ndice de flotabilidad celular para
ubicarse en la zona ptima de iluminacin para la fotosntesis.
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La capacidad de fijar N2 confiere a las cianofitas regula la relacin


entre el fsforo y el nitrgeno de las aguas. No obstante, cuando dicha
relacin se desva a favor del fosfato, se desarrollan cianofitas que introducen
nitrgeno combinado en el sistema. La fijacin de nitrgeno requiere la
presencia de la enzima nitrogenasa, que contiene cobalto.La nitrogenasa es
sensible al oxgeno de manera que la mayor velocidad de fijacin ocurre bajo
tensiones reducidas de oxgeno.(Posada,2005)
Heterocisto: Clulas de pared gruesa,citoplasma generalmente
hialino (Figura N7) , sin ncleos donde ocurre la fijacin del nitrgeno.Son
redondos y aparentemente vacos, usualmente distribuidos regularmente en
los filamentos o en un extremos. No poseen nucleo ni cloroplastos; tienen
conexiones intercelulares con clulas adyacentes y existe intercambio mutuo
de materiales entre ellas, con productos derivados de la fotosntesis.(Gama,
2004).Tienen conexiones intercelulares con las clulas vegetativas
adyacentes, de tal manera que existe un continuo movimiento de los
productos de la fijacin de nitrgeno desde los heterocistos hacia las clulas
vegetativas y de los productos fotosintticos desde las clulas vegetativas
hacia los heterocistos (Todar, 2004).
Su funcin es intervenir en la fijacin de nitrgeno atmosfrico

Figura N7. Identificacin de Heterocisto.


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EXPERIMENTO 3: Observacin de Protozoarios

RESULTADOS:
Al cortar el abdomen de una termita se pueden evidenciar protozoarios (Figura N8)
que habitan dentro de esta.

Figura N8. Protozoarios de abdomen de termita.

DISCUSIONES:
Los protozoarios son organismos unicelulares
Reino Protista, subreino Protozoa Eucariotas.
Posee bacterias y protozoarios flagelados que no viven en concentraciones altas de
oxgeno.
Dentro de la muestra se pueden observar protozoos flagelados como:
Trichonympha (flagelado),este protozoario convierte la celulosa en
carbohidratos solubles.Las triconinfas son excavados especializados con
cientos de flagelos que viven en el tubo digestivo de las termitas. Estos
flagelados anaerobios carecen de mitocondrias pero tienen complejos de
golgi (Figura N9). Las triconinfas ingieren astillas de madera que comen las
termitas.Estas triconinfas dependen de las bacterias endosimbioticas para
digerir la celulosa de la madera,por eso es un ejemplo de mutualismo.
(BERG, 1997). (SMALLWOOD, 1980).
Mixotricha paradoxa: Es es una especie de protista que vive como
simbionte en el interior de la termita Mastotermes darwiniensis y que a su vez
aloja varias especies de bacterianas simbiticas. establece relaciones
mutualistas con varias bacterias. Aunque presenta cuatro flagelos
posteriores, no los usa para la locomocin, sino principalmente como timn.
Para la locomocin, utiliza Treponema spirochetes, una especie de bacteria
helicoidal (Figura N10), que se encuentran fijadas a la superficie de la clula.
Estas le proporcionan un movimiento similar al producido por los cilios.
Mixotricha tambin aloja bacterias con forma de bacilo sobre la superficie de
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la clula segn un patrn ordenado. Adems, presenta bacterias esfricas


endosimbiontes dentro de la clula que actan como mitocondrias, de las
cuales carece Mixotricha. En total, aloja cuatro especies de bacterias
simbiontes.Sagan, 2001)

Figura N9. Trichonympha.

Figura N10. Mixotricha paradoxa.

La relacin que existe entre la termita y los protozoarios flagelados es la simbiosis


(Smallwood,1980). Las termitas no logran degradar la celulosa solas, para eso
necesitan a los protozoos que no solo digieren la celulosa sino que tambin se
alimentan de ella, los protozoos tienen unas bacterias especiales que recogen las
sobras y producen nitrgeno que es absorbido por las termitas.
Las termitas han establecido una relacin simbitica con unos protozoos flagelados
que degradan la celulosa y la transforman en nutrientes asimilables por el insecto.
Estos protozoos viven en el tubo digestivo de las termitas, y pueden representar
hasta un tercio del peso del insecto. A su vez, los protozoos estn asociados con
bacterias que les proporcionan ciertas enzimas digestivas.(Green,1980).

EXPERIMENTO 4: Observacin de Algas Pluricelulares


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RESULTADOS:
Al observarse la muestra de la microalga se identifican sus estructuras celulares,
que al compararla con informaciones de algas se puede identificar a esta como
Oedogonium sp.

Figura N11. Muestra microscpica de alga pluricelular.

DISCUSIONES:
Caractersticas del Oedogonium sp:
Oedogonium tiene 330 especies; Poseen un ciclo vital caracterstico.Se caracteriza
por constituirse por filamentos no ramificados con clulas cilndricas alargadas con
un solo cloroplasto y numerosos pirenoides (reserva de almidn). Posee un disco de
fijacin que le permite fijarse a cualquier sustrato. Para su clasificacin es necesario
tener todo su ciclo de vida.Son algas verdes filamentosas.
Se pueden presentar en nuestros acuarios de varias formas: Como manchas verdes
en las paredes de vidrio, pelitos cortos cubriendo toda una superficie de un tronco o
una hoja, como pelos (filamentos) largos, muchas veces llegando hasta la superficie
o formando motas.
Algunas clulas que conforman estas algas presentan unos anillos en su extremo
ms ancho (Figura N12). Estos anillos nos indican que la clula se puede dividir.
(Hirn, 1900).
Filamentos no ramificados, de clulas cilndricas o capitadas, con la clula terminal
redondeada y la basal de fijacin. Cloroplasto parietal reticulado, con varios
pirenoides.
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Figura N12. Oedogonium sp.

EXPERIMENTO 5: Observacin de Hongos: micorriza

RESULTADOS:
Al observar al microscopio micorriza (Figura N13) se puede identificar sus
estructuras vegetativas y reproductivas caractersticas (Figura N14).

Figura N13. Micorriza.


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Figura N14. Partes de la Micorriza.

DISCUSIONES:
Son relaciones mutualistas de hongos del suelo con la races de muchas plantas,
ayuda a que la planta adquiera nutrientes minerales como el fosfato.(MADER, 2001)
El hongo digiere y absorbe nutrientes orgnicos del suelo y algunos penetran
directamente a las clulas de la raz, tambin absorbe agua y la transporta a la
planta, el azcar producida fotosintticamente por la planta pasa de la raz al hongo.
(AUDESIRK,AUDESIRK, 1996).
Gracias a la micorriza la planta es capaz de explorar ms volumen de suelo del que
alcanza con sus races, al sumrsele en esta labor las hifas del hongo; tambin
capta con mayor facilidad ciertos elementos (fsforo, nitrgeno, calcio y potasio) y
agua del suelo. La proteccin brindada por el hongo hace que, adems, la planta
sea ms resistente a los cambios de temperatura y la acidificacin del suelo
derivada de la presencia de azufre, magnesio y aluminio. Por si todo esto fuera
poco, algunas reacciones fisiolgicas del hongo inducen a la raz a mantenerse
activa durante ms tiempo que si no estuviese micorrizada.

Clases de micorriza:
Ectomicorriza: Forman un manto exterior a la raz y crecen entre las
paredes celulares.Se caracterizan porque desarrollan una espesa capa de
micelio sobre la zona cortical de las races absorbentes de la planta las hifas
del hongo no penetran en el interior de las clulas de la raz, si no que se
ubican sobre y entre las separaciones de stas. Se pueden observar a simple
vista (Figura N15). Este tipo de micorrizacin predomina entre los rboles de
zonas templadas, se producen principalmente sobre especies forestales y
leosos, siendo especialmente caracterstico en hayas, robles, eucaliptos y
pinos. Los hongos que la forman son tanto Basidiomycota como Ascomycota.
(MADER,2001).

Endomicorriza: Penetra solo la pared celular. Sea cual fuera el caso, la


presencia del hongo brinda la planta una mayor superficie de absorcin de
minerales.Se caracterizan por colonizar intracelularmente el crtex radical o
sea que no hay manto externo que pueda verse a simple vista. Las hifas se
introducen inicialmente entre las clulas de la raz (Figura N16), pero luego
penetran en el interior de stas, formando vesculas alimenticias y
arbsculos. Por ello este grupo se las conoce tambin como micorrizas
vesculoarbusculares (MVA) los cuales constituyen la simbiosis ms
extendida sobre el planeta. Los hongos que la forman pertenecen a la
divisin Glomeromycota y se dan en todo tipo de plantas, aunque predominan
en hierbas y gramneas.(MADER,2001).

MORFOLOGIA INTERNA:
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Las hifas penetran las clulas epidermales de races jvenes detrs de la regin
meristemtica. La penetracin de pelos radiculares es comn en algunas especies de
husped. Luego, la hifa puede crecer por completo intracelularmente o ser principalmente
intercelular, lo cual es posible que dependa de la especie hospedera. Las hifas son
sumamente variables en tamao e irregulares en forma; las anastomosis (rollos complejos),
y las vueltas cerradas ocurren entre y dentro de las clulas. Las hifas son no septadas
cuando ellas estn creciendo activamente; sin embargo, los septos se forman cuando las
condiciones de crecimiento se ponen desfavorables y el hongo est muriendo.
Gerdemann(1968) dice que el hongo crece a lo largo de la corteza, pero no invade la
endodermis ni infecta clulas que contienen cloroplastos. Brevemente despus de la
infeccin, el hongo forma arbsculos dentro de las clulas corticales (GERDEMANN, 1968).

Figura N15. Endomicorrizas.

Figura N16. Ectomicorrizas.

Absculos:
Se encuentra entre la pared y la membrana celular (Figura N17). Tienen diversas
funciones como:
Fragmentacin de la vacuola.
Migracin del ncleo una posicin ms central.
Aumenta el nmero de organelos.
Reorganizacin del citoesqueleto.
Aumenta la membrana plasmtica.
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Figura N17. Arbsculo de micorriza.

BIBLIOGRAFA:

Bacteriologa general: principios y prcticas de laboratorio pg.63


Becking, J. H. 1986. Nitrogen fixation by the Azolla-Anabaena
symbiosis. In: Proceeding of International Atomic Energy Agency. The role
of isotopes in studies on nitrogen fixation and nitrogen cycling by blue-
green algae and the Azolla-Anabaena Azollae association. IAEA, TECDOC
325. Vienna, Austria. Pp 53-61
Biologa de microorganismos - Brock . 10 Edicion. Michael T.
Madigan, John de M. Martinko, Jack Parker.
Gama Fuertes, M, 2004.Biognesis y Microorganismos, segunda edicin,
pgina 167.
M.Pirez, M.Mota., 2011.Morfologa y estructura bacteriana, pgina 23.
Cirujano s. (2009). Un Helecho Acutico pone en Peligro el Ecosistema
de las Marismas de Doana. El diario del jardn botnico. Peridico
Semestral. n. 3 primavera/ verano.
Biologa/ Silvia S. Mader/ 2001/ sptima edicin.
Biologa 3/ evolucin y ecologa/ Teresa Audesirk, Gerald Audesirk/
1996/ cuarta edicin.
Biologa/ William L. Smallwood; Edna R. Green/ 1980/ dcima edicin/
pag.333.
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