Universidad Alas Peruanas

Facultad de Medicina Humana y Ciencias de la Salud

Escuela Acadmico Profesional de Enfermera
Informe PL N3- MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA Presentado: 03/09/16

Iturriaga Ocampo C., Pinto Silva N., Portugal Cabrera Y.

1. Resultados

AISLAMIENTO DE BACTERIAS: MTODO SIEMBRA EN PLACA POR

ESTRAS

Para siembra de orina y heces: Agar Macconkey

Nos colocamos las Tomamos cada Se retira y se deja

barreras de una de las placas enfriar un momento, con
bioseguridad para Petri sin abrir y con el mechero encendido
nuestra proteccin, un marcador se pone alrededor las
Como se
luego se realiz el dividimos en 4 placas, nos cercioramos
realiz:
lavado de manos y colocando que nuestro barbijo este
se desinfecto el nuestros nombres. bien colocado y
rea de trabajo con evitamos hablar,
leja. Sacamos las Para preparar el seguidamente se toma
placas Preti, agar Macconkey la placa y se le agrega
mantenindolas primero se realiza el agar Macconkey
cerradas para no la operacin para esperamos 24 horas
contaminar nuestro saber cuntos para hacer la siembra
medio de cultivo. mililitros de agua que se har con un asa
utilizaremos para que se esterilizara en el
las 12 placas y los mechero hasta que este
gramos de agar , de color rojo, se toma
en una pipeta se la muestra y con
mide el agua y se cuidado se abre la placa
le agrega al y se hace una estra.
matraz.
Se espera otras 24
Una vez listo se horas para puedan
enciende el crecer las bacterias.
mechero
colocndole
encima el matraz
agregando el agar
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macconkey que al
inicio es de color
rosado se espera
que hierba y se
tapa con un tapn
de algodn y gasa
para evitar que se
contamine

Para siembra de secrecin farngea: Agar Sangre

Tomamos cada una Hacemos el mismo Se espera 24 horas

de las placas Petri procedimiento para para que se gelatinice
Como se sin abrir y con un preparar el agar una vez pasadas estas
realiz: marcador dividimos con la diferencia horas se hace la
en 4 colocando que este es el agar siembra que se sacara
nuestros nombres. sangre al con un hisopo estril de
comienzo es de la boca de nuestra
color amarillo y compaera se abre
luego se agrega cuidadosamente la
sangre placa y se hace una
desfribinada, se estra, para desechar el
espera que hierba hisopo se quema y se
y se retira del elimina en la bolsa de
mechero. color rojo.

Despus se Todas las integrantes

realizan los del grupo realizan el
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mismos pasos del mismo procedimiento.

agar anterior.

Conclusin:

2. Discusin

3.3.3 Condiciones generales

La orina es un excelente medio de cultivo para la proliferacin bacteriana, por
esta razn, la muestra debe ser procesada dentro de las 2 horas despus de
haber sido obtenida o debe refrigerarse a 4 C (mximo 24 horas) hasta su
procesamiento.
Generalmente el desarrollo de dos o ms tipos de colonias (en pacientes sin
sonda vesical) indican que la muestra se ha contaminado por recoleccin
incorrecta o demora en la siembra.

Segn el artculo del ministerio de salud del ao 2005 observamos que el tiempo
adecuado para obtener la muestra es dos horas antes de ser procesadas para
poder tener resultados ptimos, lo cual nosotros no cumplimos debido al
desconocimiento y muchas de nuestras compaeras tomaron la muestra en ese
momento o el da anterior y es por eso que algunas muestras salieron
contaminadas.

NORMAS DE SEGURIDAD:
1. Es imprescindible el uso de bata de laboratorio.
2. Al iniciar y finalizar las prcticas, el estudiante se lavar las manos con
agua y jabn.
3. El lugar de trabajo debe estar siempre limpio y ordenado. Antes de
comenzar cada prctica es conveniente desinfectar la superficie de trabajo.
Los desinfectantes ms habituales para esto son la leja y el alcohol (etanol
96).
3. Los microorganismos deben manejarse siempre alrededor de la llama. Se
deben evitar los desplazamientos innecesarios por el laboratorio, ya que
pueden crear corrientes que originen contaminaciones o producir accidentes.
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5. Durante las prcticas est prohibido comer, beber y fumar. Cuando se

manipulan microorganismos hay que evitar llevarse las manos a la boca,
nariz, ojos, etc. Prcticas de Microbiologa Clnica (1 D.E.) 6
6. Libros, carpetas, abrigos y cualquier otro material que no se utilice en la
realizacin de la prctica deben estar apartados del lugar de trabajo.
7. Para deshacerse del material contaminado se utilizarn los recipientes
adecuados, que sern esterilizados posteriormente. Nunca se debe tirar nada
contaminado por la fregadera o a la basura comn.
8. Bajo ningn concepto debe sacarse ninguna muestra contaminada del
laboratorio.
9. No se debe pipetear nunca con la boca. Utilizar siempre pipeteadores
manuales.
10. En caso de accidente (ruptura de material, derramamiento de
microorganismos, etc.) se comunicar inmediatamente al instructor.

Segn la DIPLOMATURA EN ENFERMERIA CURSO 2008 que nos muestra pautas

para seguir durante el proceso de cultivo podemos apreciar que cumplimos con todas
ellas lo cual nos indica que en el procedimiento de realizar los cultivos evitamos en su
mayora cualquier tipo de contaminacin.

3- presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases

Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmsfera con tensin de
oxgeno normal. Algunas pueden obtener el oxgeno directamente de variados
sustratos. Pero los microorganismos anaerobios estrictos slo se
desarrollarn adecuadamente en una atmsfera sin oxgeno ambiental. En un
punto intermedio, los microorganismos microaerfilos crecen mejor en
condiciones atmosfricas parcialmente anaerobias (tensin de oxgeno muy
reducida), mientras los anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz
de adaptarse a cualquiera de las citadas condiciones.

Segn este artculo del ao 2012 nos hace mencin de que la mayora de bacterias
son anaerbicas por lo cual la muestra de cultivo debe mantenerse en esas
condiciones y fue eso lo que realizamos.

CULTIVO DE MICROORGANISMOS
El cultivo de microorganismos consiste en proporcionarles las condiciones
fsicas, qumicas y nutritivas adecuadas para que puedan multiplicarse de
forma controlada. En general, podemos distinguir cultivos lquidos y slidos en
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funcin de las caractersticas del medio y cultivos discontinuos y continuos en

funcin de la disponibilidad de nutrientes en el medio.

Dentro de este articulo encontramos consideraciones generales respecto al cultivo

de microorganismos y a su vez nos menciona que existen medios lquidos,
semislidos y slidos para el cultivo y que los mas ptimos son los slidos que a su
vez son los que nosotros utilizamos

3. Conclusin

Podemos concluir que la tcnica que empleamos respecto al proceso del cultivo fue
la ms optima posible ya que en concordancia a varios artculos, nuestro
procedimiento fue el adecuado, pero a pesar de eso en cuanto a la obtencin de la
muestra fue donde pudimos encontrar errores y consideramos que la existencia de
algunas placas contaminadas se debe a este factor errneo en muchas de nuestras
compaeras, pero a pesar de eso a su vez observamos varias placas en buenas
condiciones.

4. Referencias bibliogrficas

- http://www.ins.gob.pe/repositorioaps/0/4/jer/-1/Manual_%20_Procedimientos_
%20Bacteriologicos_%20IIH.pdf
Ministerio de Salud / Lima 2005
- http://www.unavarra.es/genmic/microclinica/practicas.pdf1
- DIPLOMATURA EN ENFERMERIA CURSO 2008-2009
- https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-un-
laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf
Medios de Cultivo en un Laboratorio de Microbiologia 2012
- http://www.unavarra.es/genmic/microgral/Tema%2002.-%20Cultivo%20de
%20microorganismos.pdf
Microbiologa general 2014
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5. Anexos

Preparacin de los medios de cultivo:

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Siembra en placa por estras:

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Resultados de la siembra:

Cuestionario
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1. Qu es un medio de cultivo?

Es el material alimenticio artificial preparado en el laboratorio donde pueden crecer los

microorganismos. Debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesario y
debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

2. Qu tipo de nutrientes requieren los microorganismos para poder crecer en un

medio de cultivo?
Hidratos de carbono, suero, bilis, sangre completa.

3. Qu es un cultivo de microorganismo?
Es el crecimiento de poblaciones microbianas de forma artificial controlada en un
medio.
4. Qu finalidad tiene el utilizar medios de cultivos solidos?
Se utiliza para obtener colonias aisladas de microorganismos. Los medios solidos
constituyen la mayor parte de los medios de cultivo que se emplean en microbiologa.
En los medios de cultivos solidos la multiplicacin bacteriana se manifiesta por una
formacin macroscpica denominada colonia bacteriana, que es el resultado de la
multiplicacin de una sola clula bacteriana.

5. Cmo nos podemos dar cuenta que existi crecimiento de microorganismos

en un medio lquido?
La multiplicacin bacteriana en los medios de cultivo lquidos se manifiesta
generalmente por el en turbamiento de este, estimular y promover la seleccin de
algn o algunos microorganismos e impedir que otros se multipliquen, identificar al
microorganismo estudiado mediante pruebas bioqumicas.

6. Cmo se manifiesta el crecimiento de los microorganismos en un medio de

cultivo solido?
Se manifiesta por una formacin macroscpica denominada colonia bacteriana, que
es el resultado de la multiplicacin de una sola clula bacteriana.

7. Escribe el nombre de 5 medios de cultivo que pueden ser empleados en el

laboratorio de microbiologa.
AGAR TSI
AGAR NUTRITIVO
AGAR BASE SANGRE
AGAR MACCONKEY
AGAR TSI AGAR CITRATO
AGAR LIA MUELLER HINTON
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8. De dnde es obtenido el extracto agar-agar para la preparacin de medios de

cultivos?
Se obtiene principalmente de las algas rojas.

9. Por qu es necesario esterilizar la mesa antes de realizar el vaciado del medio

de cultivo en las cajas de Petri?
Para evitar que se contamine nuestro medio de cultivo y nos de un resultado falso.

10. Por qu la base de muchos medios de cultivo es una infusin de extractos de

carne y peptona?
Se utiliza para bacterias patgenas que requieren nutrientes complejos similares en
composicin de los lquidos orgnicos del cuerpo.

11. Escribe la composicin qumica para cada medio de cultivo de utilizaste.

Agar macconkey:
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil
desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que
utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de agua y alimentos. Todas las especies
de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.

Agar base sangre:

Medio para propsitos generales, para el aislamiento y cultivo de numerosos
microorganismos.
Con la adicin de sangre, el medio es til tanto para el aislamiento y cultivo de
microorganismos aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes a partir de una
gran variedad de muestras, como para la observacin de reacciones de hemlisis.
Tambin, este medio de cultivo, puede utilizarse como medio base para preparar el
medio agar chocolate.

Cuestionario
1. Qu es un cultivo puro de microorganismos?

Un cultivo puro es aquel que contiene una sola clase de microorganismos. Slo
despus de haber obtenido un cultivo puro se puede identificar un microorganismo
y/o estudiar sus caractersticas bioqumicas o de otro tipo. La obtencin de un
cultivo puro se hace mediante una tcnica de aislamiento.
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Qu es un inoculo?

Es la cantidad o nmero de grmenes infectantes que son introducidos accidental o

voluntariamente en los tejidos vivos o en medios de cultivos

2. Qu tipo de tcnica empleaste para la siembra de microorganismos?

Tcnica de los 4 cuadrantes

3. Qu finalidad tiene humedecer el hisopo con una solucin salina estril?

Para que al tomar la muestra de la garganta de nuestra compaera no lo contamine

con algunas otras bacterias en el aire y tambin para que el hisopo este limpio y nos
permita realizar la muestra.

4. Por qu se recomienda enfriar el asa de platino en el medio del cultivo ya

preparado antes de realizar el sembrado por estras de los microorganismos?

Para que el asa quede estril completamente y no se deshaga lo que es el agar y se

pueda realizar el cultivo adecuadamente

5. En qu consiste el aislamiento por estras?

Consiste en, mediante un asa de siembra previamente esterilizada, rayar la superficie

de cultivo de una placa Petri de forma que en cada pasada sea menor el nmero
de clulas depositado, las ltimas pasadas debern depositar un nmero tan bajo de
clulas que, una vez incubadas, se formen colonias puras.

6. Cmo es el patrn que observas en el tamao y cantidad de colonias de cada

placa?
Observamos en pequeas partculas de aproximadamente 1 a 2 mm acumuladas en
grades cantidades