NORMA TCNICA NTC

COLOMBIANA 5569

2007-12-12

CARNE Y PRODUCTOS CRNICOS.

DETECCIN DE AGENTES COLORANTES.
MTODO DE CROMATOGRAFA DE CAPA DELGADA

E: MEAT AND MEAT PRODUCTS. DETECTION OF

COLOURING AGENTS. METHOD USING THIN-LAYER
CHROMATOGRAPHY

CORRESPONDENCIA: esta norma es una adopcin idntica

por traduccin (IDT) de la norma
ISO 13496:2000.

DESCRIPTORES: carne; productos crnicos;

determinacin de colorantes;
colorantes - carne; productos crnicos;
mtodo de cromatografa de capa
delgada; ensayo.

I.C.S.: 67.120.10

Editada por el Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin (ICONTEC)

Apartado 14237 Bogot, D.C. - Tel. (571) 6078888 - Fax (571) 2221435

Prohibida su reproduccin Editada 2007-12-21

 PRLOGO

El Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin, ICONTEC, es el organismo

nacional de normalizacin, segn el Decreto 2269 de 1993.

ICONTEC es una entidad de carcter privado, sin nimo de lucro, cuya Misin es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y proteccin al consumidor. Colabora con el
sector gubernamental y apoya al sector privado del pas, para lograr ventajas competitivas en
los mercados interno y externo.

La representacin de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalizacin Tcnica

est garantizada por los Comits Tcnicos y el perodo de Consulta Pblica, este ltimo
caracterizado por la participacin del pblico en general.

La NTC 5569 fue ratificada por el Consejo Directivo de 2007-12-12.

Esta norma est sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en
todo momento a las necesidades y exigencias actuales.

A continuacin se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a

travs de su participacin en el Comit Tcnico 44 Productos crnicos.

ALIMENTOS LA CALI S.A. INSTITUTO COLOMBIANO

ASOCIACIN COLOMBIANA DE AGROPECUARIO -ICA-
PORCICULTORES -FONDO NACIONAL IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA.
DE LA PORCICULTURA- KOYOMAD PRODUCTOS CRNICOS S.
BGC ALIMENTOS ESPECIALES A.
CARULLA VIVERO S.A. LABORATORIO ASBIOQUIM LTDA.
FEDERACIN NACIONAL DE PROMOTORAS UNIDAS LTDA.
AVICULTORES -FENAVI- PURIFICACIN Y ANLISIS DE FLUIDOS
FEDERACIN NACIONAL DE LTDA.
COMERCIANTES -FENALCO- SALSAMENTARIA VILASECA LTDA.
INDUNARDI S.A. SCARCOL
INDUSTRIA SALSAMENTARA EL SCARCOL E.C.
BOHEMIO LTDA. SUIZO S.A.
INDUSTRIAS DE ALIMENTOS ZEN S.A. UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

Adems de las anteriores, en Consulta Pblica el Proyecto se puso a consideracin de las

siguientes empresas:

ALICO S.A. AVESCO S.A.

ALIMENTOS FRIKO S.A. AVIDESA MC POLLO S.A.
ALMACANES XITO S.A. BIANLISIS
ASINAL LTDA. BIOCONTROL LTDA.
ASOCIACIN COLOMBIANA DE BIOQUILAB LTDA.
MICROBIOLOGA CARNES LOS SAUCES LTDA.
ASOCIACIN NACIONAL DE INDUSTRIALES CHR HANSEN
-ANDI- COMESTIBLES DAN S.A.
CONGELADOS AGRCOLAS S.A. INVIMA INST. NACIONAL DE VIGILANCIA
DAALBERT INTERNACIONAL COLOMBIA DE MEDICAMENTOS Y ALIMENTOS
DISPROALQUMICOS S.A. JHONSON DIVERSEY COLOMBIA LTDA.
ECOLAB COLOMBIA S.A. LABORATORIO BIOCONTROL LTDA.
FABRICA DE ESPECIAS Y PRODUCTOS EL LUCTA GRANCOLOMBIANA LTDA.
REY S.A. MINISTERIO DE LA PROTECCIN SOCIAL
FEDERACIN NACIONAL DE GANADEROS NULAB LTDA.
FRIGORIFICO LA PARISIENNE OLIMPICA S.A.
FRIGORIFICO SAN MARTIN DE PORRA LTDA. POLLO ANDINO LTDA.
FRIGORIFICOS COLOMBIANOS S.A. POLLO FIESTA LTDA.
FRIGORIFICOS GUADALUPE S.A. POLLO SAVICOL LTDA.
FUNDACIN INTAL POLLOS VENCEDOR
FUNDACIN UNIVERSIDAD DE LA SABANA PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
FUNDACIN UNIVERSIDAD JORGE TADEO POZO ANTIGUO LTDA.
LOZANO PROCAMPEN
FUNDACIN UNIVERSITARIA AGRARIA DE PRODUCTOS CRNICOS WALKER
COLOMBIA SALSAMENTARIA INDUCOLCARNES LTDA.
GIVAUDAN COLOMBIA S.A. SECRETARA DISTRITAL SALUD DE
GRIFFITH COLOMBIA S.A. BOGOT
INDUSTRIAS ALIMENTICIAS MOSELA LTDA. SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE
INSTITUTO COLOMBIANO -SENA-
AGROPECUARIO ICA TECNAS S.A.
INTERNATIONAL LIFE SCIENCES TECNIAGRO S.A.
INSTITUTE ILSI NOR ANDINO UNIVERSIDAD DE LOS ANDES

ICONTEC cuenta con un Centro de Informacin que pone a disposicin de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales y otros documentos relacionados.

DIRECCIN DE NORMALIZACIN
NORMA TCNICA COLOMBIANA NTC 5569

CONTENIDO

Pgina

1. OBJETO .......................................................................................................................1

2. REFERENCIAS NORMATIVAS ...................................................................................2

3. TRMINOS Y DEFINICIONES .....................................................................................2

4. PRINCIPIO....................................................................................................................2

5. REACTIVOS .................................................................................................................2

6. EQUIPO ........................................................................................................................4

7. MUESTREO..................................................................................................................4

8. PREPARACIN DE LA MUESTRA DE ENSAYO.......................................................5

9. PROCEDIMIENTO........................................................................................................5

9.1 MUESTRA DE ENSAYO ..............................................................................................5

9.2 MUESTRAS GRASOSAS ............................................................................................5

9.3 MUESTRAS NO GRASOSAS ......................................................................................5

9.4 TRANSFERENCIA DE COLORES DE POLIAMIDA EN POLVO ................................6

9.5 ELUCIN Y CONCENTRACIN DE COLORES AISLADOS .....................................6

9.6 SEPARACIN POR CROMATOGRAFA DE CAPA DELGADA ................................6

9.7 CONFIRMACIN..........................................................................................................7

10. INFORME DE ENSAYO ...............................................................................................7

NORMA TCNICA COLOMBIANA NTC 5569

Pgina

BIBLIOGRAFA......................................................................................................................13

DOCUMENTO DE REFERENCIA..........................................................................................14

ANEXOS

ANEXO A (Informativo)
SINNIMOS Y NMEROS DE IDENTIFICACIN DE AGENTES COLORANTES
SINTTICOS SOLUBLES EN AGUA ......................................................................................8

ANEXO B (Normativo)
POSIBLE INTERFERENCIA POR COLORES ........................................................................9

ANEXO C (Informativo)
ESPECTRO DE ABSORCIN ...............................................................................................11
NORMA TCNICA COLOMBIANA NTC 5569

CARNE Y PRODUCTOS CRNICOS.

DETECCIN DE AGENTES COLORANTES.
MTODO DE CROMATOGRAFA DE CAPA DELGADA

1. OBJETO

Esta norma especifica un mtodo cromatogrfico de capa delgada para la deteccin de

agentes colorantes sintticos solubles en agua, en la carne y en los productos crnicos.

Los agentes colorantes que se pueden detectar con el mtodo son:

Tartrazina

Amarillo quinolina

Amarillo ocaso FCF

Amaranto

Punz 4R

Eritrosina

Azul patente V

Indigotina

Negro brillante PN

Negro 7984

Verde rpido FCF

Azul VRS

Los sinnimos y nmeros de identificacin de estos agentes colorantes se enumeran en el

Anexo A.

Los colores y extractos de plantas que se ha observado que no interfieren con este mtodo se
presentan en la Tabla B.1. Los colores naturales que en algunos casos han demostrado
interferir con este mtodo se presentan en la Tabla B.2.

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2. REFERENCIAS NORMATIVAS

Los siguientes documentos normativos referenciados son indispensables para la aplicacin de

este documento normativo. Para referencias fechadas, se aplica nicamente la edicin citada.
Para referencias no fechadas, se aplica la ltima edicin del documento normativo referenciado
(incluida cualquier correccin).

ISO 3696:1987, Water for Analytical Laboratory Use - Specification and Test Methods.

AOAC 46.1.08:1995, Official Methods for Analysis (AOAC International).

3. TRMINOS Y DEFINICIONES

Para los propsitos de esta norma se aplica el siguiente trmino y definicin.

3.1 Deteccin de agentes colorantes. Deteccin de la presencia o ausencia de agentes

colorantes, de acuerdo con el mtodo especificado en la presente norma.

4. PRINCIPIO

Los agentes colorantes se extraen de una muestra con agua caliente, y se adsorben sobre
polvo de poliamida en polvo. Los agentes colorantes extrados se purifican en una columna
cromatogrfica y los colores se eluyen de la columna. Los agentes colorantes se identifican
mediante cromatografa de capa delgada.

5. REACTIVOS

Use solamente reactivos de grado analtico reconocidos, a menos que se especifique algo
diferente.

5.1 Agua que cumpla al menos con el grado 3 de acuerdo con la ISO 3696.

5.2 ter de petrleo con un intervalo de ebullicin de 40 C a 60 C.

5.3 Metanol.

5.4 Amonaco, solucin acuosa al 25 %, 20 = 0,910 g/ml.

5.5 cido actico, 100 % fraccin en masa, 20 = 1,050 g/ml.

5.6 Citrato trisdico dihidratado.

5.7 Propan-1-ol

5.8 Acetato de etilo

5.9 2-metil-2-propanol

5.10 cido propinico

2
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5.11 Solucin eluyente para cromatografa de columna

Mezcle 95 volmenes de metanol (vase el numeral 5.3) con 5 volmenes de solucin de

amoniaco (vase el numeral 5.4).

5.12 cido actico. Solucin de metanol al 50 %.

Mezcle 1 volumen de cido actico (vase el numeral 5.5) con 1 volumen de metanol (vase el
numeral 5.3).

5.13 Polvo de poliamida en polvo con 0,05 mm a 0,16 mm de tamao de partcula.

5.14 Arena granulada fina lavada en cido clorhdrico, neutralizada y calcinada.

5.15 Colores patrn de referencia

La pureza de los colores patrn puede variar, de manera que es necesario conocer la pureza
de los colores que se van a usar como patrones. La pureza se debe determinar con el mtodo
AOAC 46.1.08.

NOTA Los colorantes certificados para alimentos tambin se pueden usar como patrones.

5.16 Soluciones patrn de referencia para cromatografa de capa delgada

Prepare en forma separada soluciones en agua de cada uno de los colores patrn de referencia
(vase el numeral 5.15) con un contenido de color patrn de aproximadamente 1 g/L.

Prepare soluciones de indigotina el mismo da de uso. Se pueden almacenar otras soluciones

por lo menos durante 3 meses (las soluciones de eritrosina por 1 mes) cuando se almacenan
en la oscuridad.

5.17 Eluente para cromatografa de capa delgada: solucin I

Pese, con aproximacin a 0,1 g, 25 g de citrato trisdico dihidratado (vase el numeral 5.6) en
un matraz volumtrico de 1 000 ml. Disuelva en agua, diluya hasta la marca con agua y mezcle.

Mezcle 80 volmenes de esta solucin de citrato con 20 volmenes de solucin de amoniaco

(vase numeral 5.4) y 12 volmenes de metanol (vase el numeral 5.3).

Para evitar o reducir la interferencia del azafrn, crocina o crocetina se recomienda usar
solucin de cromatografa II (vase el numeral 5.18).

5.18 Eluente para cromatografa de capa delgada: solucin II

Mezcle 6 volmenes de propan-1-ol (vase el numeral 5.7) con 1 volumen de acetato de etilo
(vase numeral 5.8) y 3 volmenes de agua.

5.19 Eluente para cromatografa de capa delgada: solucin III

Mezcle 50 volmenes de 2-metil-2-propanol (vase el numeral 5.9) con 12 volmenes de cido

propinico (vase numeral 5.10) y 38 volmenes de agua.

3
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6. EQUIPO

El equipo de laboratorio usual, y en particular, el siguiente:

6.1 Equipo mecnico o elctrico para homogeneizacin, con capacidad para homogeneizar
la muestra de laboratorio.

Use una cortadora de rotacin de alta velocidad, o un molino con un plato con aberturas de
mximo 4,00 mm de dimetro.

6.2 Tubos de centrfuga de 75 ml de capacidad, fabricados en vidrio.

6.3 Matraces de fondo plano de 250 ml de capacidad y con tapa de vidrio esmerilado.

6.4 Matraces de fondo redondo con 100 ml de capacidad, con uniones en vidrio esmerilado.

6.5 Centrfuga que opera a una aceleracin radial de 2 000 gn aproximadamente.

6.6 Rotoevaporador.

6.7 Columna de cromatografa de vidrio, con filtro poroso y llave, con una longitud
aproximada de 20 cm, dimetro de 30 mm, tamao de poro de 40 m a 100 m (grado de
porosidad P 100 de acuerdo con la norma ISO 4793 [2]).

Coloque un poco de lana de vidrio en la columna y agregue de 1 g a 2 g de arena (vase el

numeral 5.14).

6.8 Recipiente plstico de 10 ml de volumen aproximadamente, con tapa.

6.9 Placas de capa delgada recubiertos con una capa celulosa en polvo de 0,10 mm de
espesor, o equivalente.

Son adecuadas las placas listas para uso.

6.10 Micropipetas con una capacidad aproximada de 5 l.

6.11 Medidor de pH con una exactitud dentro de 0,1 unidad de pH.

7. MUESTREO

El muestreo no es parte del mtodo especificado en la presente norma. En la norma ISO 3100-1
se presenta un mtodo de muestreo recomendado o NTC que corresponda.

Es importante que el laboratorio reciba una muestra que sea verdaderamente representativa y
que no haya sufrido dao ni cambio durante el almacenamiento o transporte.

Utilice una muestra representativa de al menos 200 g. Almacene la muestra de manera que se
eviten su deterioro y el cambio en la composicin.

4
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8. PREPARACIN DE LA MUESTRA DE ENSAYO

Homogeneice la muestra de laboratorio con un equipo apropiado (vase el numeral 6.1). Cuide
que la temperatura del material de la muestra no aumente por encima de 25 C. Si se usa un
molino, pase la muestra al menos dos veces a travs del equipo.

Llene con la muestra preparada un recipiente adecuado hermtico al aire. Tape el recipiente y
almacnelo de manera que se eviten el deterioro y el cambio en la composicin de la muestra.
Analice la muestra apenas sea posible, pero siempre dentro de un lapso de 24 h a partir de la
homogeneizacin.

9. PROCEDIMIENTO

ADVERTENCIAS Si la muestra contiene indigotina, la temperatura en ningn momento durante el anlisis

debe exceder los 35 C. La indigotina se descompone parcialmente en la solucin de cromatografa I, de manera
que se debe usar la solucin II.

La eritrosina es sensible a la luz. Cuando se hagan pausas durante la realizacin del anlisis, las soluciones y
placas se deben almacenar en la oscuridad. Igual sucede con la indigotina.

9.1 MUESTRA DE ENSAYO

Pese con aproximacin a 0,1 g, 5 g de la muestra de ensayo preparada (vase el numeral 8)

en un tubo de centrfuga (vase el numeral 6.2).

Para muestras grasosas, proceda de acuerdo con el numeral 9.2.

Para muestras no grasosas, proceda de acuerdo con el numeral 9.3.

9.2 MUESTRAS GRASOSAS

Agregue aproximadamente 20 ml de ter de petrleo (vase el numeral 5.2) al tubo de

centrfuga y mezcle con una varilla de vidrio. Decante el ter de petrleo.

Repita este procedimiento tres veces.

9.3 MUESTRAS NO GRASOSAS

Agregue 25 ml de agua en ebullicin (vase la advertencia anterior) y mezcle. Agregue 25 ml

de las soluciones de eluyentes (vase el numeral 5.11).

Revise que el pH sea de 9 0,5, usando el medidor de pH (vase el numeral 6.11). Si no lo es,
ajuste el pH con cido actico (vase el numeral 5.5) o solucin de amonaco (vase el
numeral 5.4).

Mezcle bien. Enfre la muestra en el refrigerador durante 15 min (para impedir turbiedad).

Centrifugue (numeral 6.5) durante 10 min a una aceleracin radial aproximada de 2 000 gn.

Decante la solucin clara en un matraz de fondo plano (vase el numeral 6.3). En el caso de la
indigotina, use un matraz de fondo redondo (vase el numeral 6.4).

Agregue 5 ml de agua al tubo de centrfuga que contiene el residuo. Mezcle y agregue 10 ml de

la solucin de eluyente (vase el numeral 5.11). Mezcle y centrifugue como ya se indic.

5
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Repita el procedimiento hasta que haya sido extrado todo el color de la muestra, y luego
combine todos los extractos.

Evapore el extracto combinado en un bao de agua con aproximadamente 25 ml, con el fin de
eliminar el metanol. En el caso de la indigotina, use un matraz de fondo redondo (vase el
numeral 6.4) y el evaporador giratorio (vase el numeral 6.6) a 35 C.
Agregue 25 ml de agua en ebullicin (vanse las advertencias) y mezcle.

9.4 TRANSFERENCIA DE COLORES DE POLIAMIDA EN POLVO

Utilizando cido actico (vase el numeral 5.5) o solucin de amonaco (vase el numeral 5.4)
ajuste el pH entre 4 y 5.

Agregue 1 g de polvo de poliamida (vase el numeral 5.13) a la solucin tibia (vanse las
advertencias). Agite vigorosamente durante 1 min.

Deje que el polvo forme un sedimento.

Revise que no quede color en la solucin. Si la solucin tiene color, agregue un poco ms de
polvo de poliamida y agite vigorosamente.

NOTA Algunos colores naturales (vase el Anexo B) no se adsorben completamente en el polvo de poliamida,
por lo que la solucin queda coloreada incluso cuando se han adsorbido todos los colores sintticos. Usualmente es
posible decidir, a partir del tipo de muestra, si estos colores naturales estn presentes o no.

Agite y transfiera la suspensin tibia a la columna cromatogrfica (vase el numeral 6.7).

Enjuague el matraz de fondo plano con tres porciones de 10 ml de agua caliente (vanse las
advertencias) y aada los enjuagues a la columna, porcin por porcin. Lave la columna otras
tres veces con 10 porciones de agua caliente (vanse las advertencias) y finalmente tres veces
con 5 ml de metanol (vase el numeral 5.3). Si los colores naturales son eluidos, contine
lavando la columna con metanol hasta que el metanol diluido quede incoloro.

9.5 ELUCIN Y CONCENTRACIN DE COLORES AISLADOS

Coloque un matraz (vase el numeral 6.4) bajo la columna y diluya los colores del polvo de
poliamida con porciones de 5 ml de la solucin de eluyente (vase el numeral 5.1) a una
velocidad de flujo de volumen de dilucin de 2 ml/min, hasta que la poliamida quede incolora.

Evapore el diluido hasta que seque usando el evaporador (vase el numeral 6.6) a una
temperatura mxima de 35 C (vanse las advertencias).

Agregue 1,0 ml 2,0 ml de solucin de eluyente (vase el numeral 5.11) dependiendo de la

cantidad y nmero de colores y disuelva el residuo. Transfiera la solucin con color a un
recipiente plstico (vase el numeral 6.8).

9.6 SEPARACIN POR CROMATOGRAFA DE CAPA DELGADA

9.6.1 Placas patrn de referencia

Prepare tres placas cromatogrficas de capa delgada patrn de referencia. Con una
micropipeta (vase el numeral 6.10) coloque un punto de aproximadamente 5 l (dimetro < 5 mm)
de cada solucin patrn (vase el numeral 5.16) separadamente en cada placa (vase el
numeral 6.9). Desarrolle estos por separado, uno con cada eluente de cromatografa (vanse
los numerales 5.17, 5.18 y 5.19) en un recipiente no lleno, hasta que el frente del solvente est
6
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aproximadamente de 10 cm a 12 cm de la lnea de siembra. Retire las placas del recipiente y

seque al aire bajo una campana. Almacene las placas en la oscuridad. Los puntos, excepto los
de indigotina, son estables durante varios aos.

9.6.2 Muestras

Usando una micropipeta (vase el numeral 6.10), aplique a una placa de capa delgada (vase
el numeral 6.9) una cantidad apenas visible de solucin de muestra (vase el numeral 9.5).
Seque utilizando un secador de cabello, y en el caso de la indigotina, seque al aire.

Desarrolle la placa en un recipiente no lleno a una altura de aproximadamente 10 cm a 12 cm

usando una solucin de cromatografa adecuada (numerales 5.16, 5.17 5.18). Es decir, la
solucin que d la mejor separacin de los colores detectados en la muestra (vase el numeral 1).
Algunas veces ser necesario preparar una segunda placa de muestra y desarrollarla en uno
de los otros dos diluyentes, para obtener la mejor separacin.

Retire la placa del recipiente y seque al aire bajo una campana.

Compare los puntos de muestra con la placa patrn de referencia apropiada (vase el
numeral 9.6.1).

Se recomienda aplicar diferentes cantidades de soluciones de muestra en el caso de mezclas

de colorantes, debido a que puede haber colorantes presentes en diferentes concentraciones
en el concentrado.

El residuo es causado usualmente por una purificacin inadecuada. Si este es el caso, adsorba
el colorante de nuevo con el adsorbente, lave con agua caliente y retire el adsorbente como ya
se describi.

9.7 CONFIRMACIN

Confirme la identificacin de los colorantes mediante cromatografa del concentrado (vase

numeral 9.6.2) en una mezcla de patrones para los colorantes identificados en el primer
cromatograma.

En caso de duda, eluya el colorante de la placa con una solucin neutra (agua o etanol, 0,2 g/L
de solucin de acetato amnico), un cido (cido clorhdrico 0,1 mol/L) y un lcali (solucin de
hidrxido de sodio 0,1 mol/L) y compare el espectro de absorcin del colorante con el del
patrn. Vase el espectro de absorbancia en el Anexo C.

10. INFORME DE ENSAYO

El informe de ensayo debe especificar:

- Toda la informacin necesaria para la identificacin completa de la muestra.

- El mtodo de muestreo usado, si se conoce.

- El mtodo de ensayo usado, con referencia a esta norma.

- Todos los detalles operativos no especificados en esta norma, o considerados como

opcionales, junto con los detalles de cualquier incidente que pueda haber influido en el
resultado del ensayo.

- El resultado de ensayo obtenido.

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ANEXO A
(Informativo)

SINNIMOS Y NMEROS DE IDENTIFICACIN DE AGENTES COLORANTES SINTTICOS

SOLUBLES EN AGUA

Tabla A.1

a
Nombre Sinnimo 1 Sinnimo 2 C.I E. N b

Tartrazina FD y C Amarillo N 5 19140 E 102

Amarillo quinolina 47005 E 104
Amarillo ocaso FCF FD y C Amarillo N 6 15985 E 110
Amaranto FD y C rojo N 2 Rojo naftol S 16185 E 123
Punz 4R Rojo cochinilla Rojo cochinilla A 16255 E 124
Eritrosina FD y C rojo N 3 45430 E 127
Azul patente V 42051 E 131
Indigotina FD y C azul N 2 73015 E 132
Negro brillante PN 28440 E 151
Negro 7984 27755 E 152
C
Verde rpido FCF FD y C verde N 3 42053
C
Azul VRS 2045
a
C.I nmero de identificacin segn el ndice de colores [4].
b
E. N. Nmero actual dentro de la Comunidad Europea (CE).
c
E N. No est disponible

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ANEXO B
(Normativo)

POSIBLE INTERFERENCIA POR COLORES

B.1 COLORES QUE NO INTERFIEREN

Se ha observado que los siguientes colores de plantas o extractos de plantas no interfieren con
este mtodo:

Alfalfa

Achiote, Anato (bixina y norbixina)

Antocianinas

-caroteno

-apocarotenal

-cido apocarotnico ster etlico

Cantaxantina

clorofila

complejo cobre clorofilina

oleoresina de pprika

riboflavina

calndula

rojo de remolacha

mostaza

flor de tagetes

tomate

B.2 COLORES QUE PUEDEN INTERFERIR

Se ha observado que en algunos casos los colores naturales interfieren con este mtodo. Su
uso en alimentos y los colores sintticos cuya determinacin se puede ver afectada se dan en
la Tabla B.1.

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Tabla B.1

Crcuma Uso en alimentos Interfiere con el anlisis de

Curcumina Condimento; tambin se usa
como color amarillo
Azafrn Condimento (demasiado
costoso para uso color)
a
Amarillo quinolina (R 104)
Negro brillante PB (E 151)a
Negro 7984 (E 152)a
b
Eritrosina (E 127)
Amarillo quinolina (E 104)a, b
Negro brillante PN (E 151)a,b
Negro 7984 (E 152)b

Safflor Sustituto del azafrn Tartrazina (E 102)b

a
Las interferencias son menores y se pueden considerar insignificantes
b
Para evitar o reducir interferencias de Safflor o azafrn, se recomienda usar solucin de
cromatografa II.

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ANEXO C
(Informativo)

ESPECTRO DE ABSORCIN

Absorbancia

400 500 600 700

Longitud de
Amarillo quinolina
onda, nm
Eritrosina
Tartrazina
Negro 7984
Amaranto
Azul VRS

Figura C.1. Espectro de absorcin de amaranto, negro 7984, azul VRS, eritrosina, tartrazina y amarillo
quinolina

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Absorbancia

400 500 600 700

Longitud de
Amarillo ocaso FCF onda, nm
Negro brillante PN
Verde rpido FCF
Azul patente V
Punz 4R
Indigotina

Figura C.2. Espectro de absorcin de negro brillante PN, verde rpido FCF, indigotina, azul patente V, punz
4R y amarillo ocaso FCF

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NORMA TCNICA COLOMBIANA NTC 5569

BIBLIOGRAFA

[1] ISO 3100-1, Meat and Meat Products - Sampling and Preparation of Test Samples - Part
1: Sampling.

[2] ISO 4793, Laboratory Sintered (fritted) Filters - Porosity Grading, Classification and
Designation.

[3] Colours, Synthetic, Water-soluble. Semi-quantitative Determination by Chromatography

and Spectrophotometry. Nordic Committee on Food Analysis (NMKL), N 134, 1990.

[4] Colour Index, 3ra. Edicin, 1971.

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NORMA TCNICA COLOMBIANA NTC 5569

DOCUMENTO DE REFERENCIA

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION. Meat and Meat Products.

Detection of Colouring Agents. Method Using Thin-Layer Chromatography. Geneve: ISO, 2000,
11 p. (ISO 13496:2000).

14