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INFORME

DE

LABORATORIO
FACULTAD MEDICINA HUMANA

DOCENTE: Q.F. JOS VIVANCO VEGA

ALUMNA: BARRIOS PAZOS, ORFA ESTHER

CICLO: V
AO: 3ERO
INFORME DE LABORATORIO 2012

BARRIOS PAZOS, ORFA ESTHER 2


INFORME DE LABORATORIO 2012

PRCTICA N 1

INTRODUCCIN:

El EGO (Examen General de Orina), es una prueba de gran


importancia, se lleva a cabo para tener el conocimiento del
estado en el cual se encuentra el sistema urinario del
paciente as como tambin para que el mdico de un
diagnstico preciso si es que existe enfermedad renal y se le
d el debido tratamiento.
En la actualidad el examen de orina se lleva acabo siguiendo
el debido procedimiento, la muestra debe tomarse
correctamente y bajo las condiciones ms favorables para
evitar errores de interpretacin; es importante etiquetar cada
una de las muestras en presencia del paciente con
informacin suficiente para evitar confusin con otras
muestras.
El recipiente de recoleccin de la muestra debe estar limpio,
debe ser de plstico, translcido y no volverse a utilizar, la
tapa debe cerrar hermticamente de tal manera que el
contenido no se derrame; el diseo del recipiente debe de
permitir que una etiqueta quede aun en condiciones de
refrigeracin o de congelacin.
La recoleccin de muestra de orina es de varios tipos
dependiendo el tipo de paciente:
-Primera miccin de la maana
-Una sola muestra aleatoria
-Muestra programada de corto plazo
-Muestra programada de largo plazo (12 o 24hrs.)
-Muestra por sonda
-Muestra de 2 micciones (8 para azcar y cetona)
-Muestra del chorro medio
El volumen de orina depende del nmero de anlisis
solicitados, sin embargo, debe procesarse un volumen
constante, el volumen ideal es de 12-15ml para el anlisis de
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rutina. El tratamiento se da en base a los resultados obtenidos


en caso que se requiera.

OBJETIVO: Determinar la acidez y basicidad de la orina


Determinar las caractersticas organolpticas de la orina
Determinar varias sustancias qumicas en la orina.

EXAMEN COMPLETO DE ORINA

El examen completo de Orina es la evaluacin fsica, qumica y microscpica


de la orina que permite detectar y medir diversos compuestos presentes
en la orina. Este examen sirve para diagnosticar posibles enfermedades,
ms que para determinar su severidad. En muchos casos se necesita una
biopsia renal para determinar el estado del rgano.

Un anlisis de orina se puede hacer:

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Para el diagnstico inicial de una Infeccin urinaria.


Como examen complementario de diversas enfermedades.
Como parte de un examen mdico de rutina para detectar los signos iniciales
de una enfermedad.
Si la persona tiene signos de diabetes o enfermedad renal, o para vigilar si
est recibiendo tratamiento para tales afecciones
Para verificar la presencia de sangre en la orina.

La muestra es de orina de segundo chorro, si el examen no requiere


recoleccin durante 24 horas. Generalmente es adecuada en hombres, en
cambio en mujeres se debieran limpiar los genitales externos para evitar
contaminacin con secreciones vaginales. Debe ser examinada 30 a 60
minutos despus de haberse tomado. La orina debe ser centrifugada a 3000
rpm durante tres a cinco minutos, y el sobrenadante separado en otro tubo para
el anlisis de color, protenas, pH, concentracin y glucosa. Una pequea
cantidad del sedimento debe ser puesta en una placa para su anlisis bajo
microscopio.

1.- COLOR URINARIO


La orina normal es semi-transparente
y de color amarillo claro. Es ms clara
cuando se encuentra diluida, y oscura
cuando est concentrada. Puede ser
blanca, como en el caso de piuria, o
presencia de cristales; o roja-
cafesosa, en el caso de hematuria. La orina tambin puede ser amarillenta-
cafesosa en caso de coluria (pigmentos biliares en la orina). Por medicamentos
la orina puede cambiar de color.

2.- PROTENAS URINARIAS

Normalmente la excrecin de protenas es menor de 150 mg al da, que


corresponde a la mucoprotena de Tamm-Horsfall segregada por los tmulos
distales. Una medicin adecuada debiera ser efectuada con recoleccin de 24
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horas. En caso de haber proteinuria, la principal protena urinaria en pacientes


con enfermedades renales es la albmina. Niveles elevados de proteinuria, que
persisten en varias mediciones, deben ser tomados en consideracin ya que
implican anormalidades en la permeabilidad glomerular.

3.- PH URINARIO
El pH urinario normalmente es alrededor de 6.0, y vara dependiendo del
estado cido-base sistmico, entre 4.5 y 8.0. Su mayor uso clnico ocurre en
pacientes con acidosis metablica, donde el pH de la orina puede disminuir a
niveles bajo 5.0. En este caso, si la orina est alcalina, significa que hay un
proceso de acidificacin renal, como en el caso de acidosis tubular aguda.
Para hacer uso de este medio diagnstico se requiere que la orina sea estril,
ya que la infeccin con grmenes que producen ureasa, como el Proteus
mirabilis, pueden alcalinizar la orina a pH de 7.0 o 7.5.

4.- CONCENTRACIN URINARIA


La concentracin urinaria es una respuesta al control de la osmolalidad y
volemia plasmtica. De esta forma, su mejor forma de medicin es la
osmolalidad, y debe ser correlacionada con el estado clnico. Generalmente el
rin normal puede producir una osmolalidad que es 4 o 5 veces mayor que la
plasmtica siendo su valor normal aproximadamente 800 mOsm, concentracin
que vara segn el grado de hidratacin del paciente. Esta medicin es ms til
en los estados de hiponatremia, hipernatremia, poliuria u oliguria.

5.- GLUCOSA URINARIA

Normalmente el tbulo contorneado proximal reabsorbe toda la glucosa filtrada,


si sta se encuentra en concentraciones bajo 180 mg/dl. De esta forma,
glucosuria puede ocurrir como un hecho aislado (secundaria a hiperglicemia) o
como manifestacin de dao renal (glucosuria renal), donde es comnmente
asociada a otras manifestaciones en el caso de disfuncin tubular proximal,
como hiperfosfatemia, hipouricemia, aminoaciduria, acidosis tubular aguda, etc.
Estas asociaciones son parte del Sd. de Fanconi, que puede resultar en
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variadas enfermedades, como mieloma mltiple, o acidosis tubular aguda o


crnica.

6.- CUERPOS CETNICOS URINARIOS.


Estos elementos son producto de la oxidacin de cidos grasos, y normalmente
no aparecen en la orina. En casos de cetoacidosis diabtica, en ayunas, y en la
intoxicacin por metanol, su produccin se encuentra aumentada, por lo que es
posible detectarlos en la orina.

7.- SEDIMENTO DE ORINA.


Es el examen microscpico del sedimento de la muestra centrifugada de orina.

7.1 CRISTALES.
El hecho que se formen cristales en la
orina dependen de muchos factores,
como el grado de sobresaturacin de
sus constituyentes, pH, la presencia
de inhibidores de cristalizacin, etc.
Hay muchos tipos de cristales que
pueden ser observados en pacientes
con distintas alteraciones:

Cristales de cido-rico: se observan solo en orinas cidas, que favorece la


conversin de sales ricas relativamente solubles en cido rico que es
insoluble. Tienen forma romboidea o de rosetas, y se ven en pacientes con
gota, o con nefropata aguda y crnica por uratos.

Cristales de fosfato de calcio u oxalato de calcio: la formacin de los


cristales de oxalato de calcio no depende del pH de la orina, en cambio los de
fosfato de calcio se forman en orina alcalina. Su formacin es idioptica y se
asocia a variados factores de riesgo, como son bajo volumen urinario,
hipercalciuria, hiperuricosuria, factores dietticos como baja ingesta de lquidos
y calcio, alta ingesta de sal y protenas, y antecedentes de clculos de calcio,
entre otros.
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Cristales de fosfato de magnesio: cuando aumenta el pH de la orina (en


infecciones de bacterias que producen ureasa como Klebsiella o Proteus)
disminuye la solubilidad del fosfato lo que causa la cristalizacin del fosfato de
magnesio.

7.2 BACTERIAS.
La presencia de bacterias en la muestra se debe principalmente a infeccin
(ITU), a pesar que en numerosas veces se debe a contaminacin,
especialmente en muestras femeninas. Para identificar la (las) bacteria (s) de la
infeccin se solicita el cultivo bacteriano llamado urocultivo.

7.3 CLULAS EPITELIALES.


Son producto del barrido que hace la orina por el tracto urinario. Son de
relevancia clnica las clulas epiteliales de los tbulos renales, que son
generalmente 1.5 a 3 veces ms grandes que las clulas de la serie blanca, y
tienen un gran ncleo redondo. Debido a que es difcil distinguir las clulas de
origen tubular, de aquellas que se originan en el tracto urinario inferior, slo es
relevante el hallazgo de cilindros de clulas epiteliales para indicar el origen
renal de las clulas. stos sugieren mltiples enfermedades, entre las que se
incluye necrosis tubular aguda, pielonefitis y Sd. nefrtico.

7.4 ERITROCITOS.
Se llama hematuria a la presencia de glbulos rojos en la orina. Puede ser
macro y/o microscpica. El cambio del color, no refleja necesariamente el grado
de la prdida de sangre ya que 1 ml en 1lt induce un cambio de color visible.

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Por otra parte, se puede observar orina de color cef-rojiza sin la presencia de
eritrocitos, como es en el caso de hemoglobinuria y mioglobinuria. La hematuria
microscpica se define como la presencia de ms de 5 eritrocitos por campo
microscpico de gran aumento. Se puede originar en cualquier segmento del
tracto urinario. Cuando se presenta con dolor son causadas por nefrolitiasis,
infarto renal o ITU. Se presentan en forma sin dolor si son por coagulopatas,
tumores (en cualquier parte del tracto), enfermedad poliqustica, enfermedades
glomerulares o tubulares, dao post traumtico, post ejercicio, TBC, entre
otras. Por todas estas causas es que el significado de hematuria aislada vara
segn el contexto clnico.

7.5 LEUCOCITOS.
Generalmente se ven neutrfilos en infecciones, donde el urocultivo
generalmente es positivo. Puede ser negativo para la TBC, entre otras causas.
El hecho de observar placas de pus en el sedimento de orina es
patognomnico de ITU.
Adems de neutrfilos, se pueden observar eosinfilos y linfocitos, donde la
presencia de eosinfilos indicara nefritis intersticial aguda, y de los ltimos,
una infiltracin renal, como en la enfermedad tbulo-intersticial crnica.

7.6 CILINDROS.
Los cilindros son aglomeraciones de
protenas que se forman en los tbulos
renales, y es por eso que tienen forma
cilndrica con mrgenes regulares. Tienen
una matriz orgnica, compuesta
principalmente de las mucoprotenas
Tamm-Horsfall. Hay muchos tipos distintos.
Algunos de ellos pueden verse en individuos sanos, mientras que otros pueden
ser diagnsticos para una enfermedad renal.

Cilindros hialinos: No son indicadores de enfermedad, y se observan en


personas post ejercicio, fiebre, deshidratacin, uso de diurticos y mtodos de

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contraste. Se observan poco refringentes, de bordes rectilneos, y extremos


redondeados.
Cilindros hemticos: Estn formados por eritrocitos o restos de ellos. Son
diagnsticos de glomerulonefritis aguda o vasculitis.
Cilindros de glbulos blancos: Se forman por leucocitos principalmente. Se
originan en enfermedades tbulo-intersticiales o pielonefritis aguda. Pueden
verse en alteraciones glomerulares tambin.
Cilindros de clulas epiteliales: Se asocian a necrosis tubular aguda y
glomerulonefritis aguda en los cuales se descaman las clulas epiteliales de los
tbulos renales.
Cilindros grasos: Generalmente son cilindros de clulas epiteliales que en sus
citoplasmas poseen gotas de colesterol o colesterol ester, o se pueden ver
libres en la orina. Se observan en varias
glomerulopatas, especialmente en Sd.
nefrtico.
Cilindros granulosos: Son cilindros de
protenas agregadas o de clulas
antiguas que se han desintegrado. Se
ven principalmente en necrosis tubular
aguda.
Cilindros creos: Son la ltima etapa de degeneracin de los cilindros
granulosos, y de observa en nefrones con flujo muy disminuido, por lo que se
asocian a insuficiencia enal avanzada.

1. Materiales y equipos necesarios para realizar un examen completo


de orina

Tubos de ensayo
Laminas porta y
cubreobjeto
Tiras reactivas
Centrfuga
Microscopio
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2. Esquematice la tcnica para procesar un examen completo de orina

En un recipiente limpio se pide al paciente que al levantarse orine pero


que el chorro intermedio caiga al recipiente luego se lleva al laboratorio.
En un tubo de ensayo se pone la muestra y se lleva a centrifugar a
3000 revoluciones por 5 minutos.
El sedimento se coloca en una lmina porta objeto.
En Urocultivo se pone en un recipiente estril y se colorea con
sustancias especializada para poder observar en el microscopio.

3. Examen fsico y bioqumico:


PROPIEDADES FSICAS

Color: La orina normal es semi transparente y de color amarillo claro. Es


ms clara cuando se encuentra diluida, y oscura cuando est
concentrada. Puede ser blanca, como en el caso de piuria, o presencia
de cristales; o roja-cafesosa, en el caso de hematuria. La orina tambin
puede ser amarillenta-cafesosa en caso de coluria (pigmentos biliares en
la orina). Por medicamentos la orina puede cambiar de color.

Aspecto: Al agitarse, normalmente se origina espuma blanca. Si hay


proteinuria hay un aumento de la espuma, y con pigmentos y/o sales
biliares se genera espuma amarilla.

Densidad: La concentracin urinaria es una respuesta al control de la


osmolalidad y volemia plasmtica. De esta forma, su mejor forma de
medicin es la osmolalidad, y debe ser correlacionada con el estado
clnico. Generalmente el rin normal puede producir u na osmolalidad
que es 4 o 5 veces mayor que la plasmtica siendo su valor normal

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aproximadamente 800mOsm, concentracin que vara segn el grado de


hidratacin del paciente. Esta medicin es ms til en los estados de
hiponatremia, hipernatremia, poliuria u oliguria.

PROPIEDADES QUMICAS

pH: El pH urinario normalmente es alrededor de 6, y vara dependiendo


del estado cido-base sistmico, entre 4.5 y 8. Su mayor uso clnico
ocurre en pacientes con acidosis metablica, donde el pH de la orina
puede disminuir a niveles bajo 5. En este caso, si la orina est alcalina,
significa que hay un proceso de acidificacin renal, como en el caso de
acidosis tubular aguda.

Para hacer uso de este medio diagnstico se requiere que la orina sea
estril, ya que la infeccin con grmenes que producen ureasa, como el
Proteus mirabilis, pueden alcalinizar la orina a pH de 7.0 o 7.5.

Protenas: Normalmente la excrecin de protenas es menor de 150mg


al da, que corresponde a la mucoprotena de Tamm-Horsfall segregada
por los tmulos distales. El grado de proteinuria se puede clasificar:

o Microalbuminuria: 150 - 300 mg en orina de 24 horas, y no es


indetectable con las tcnicas convencionales. Es importante ya
que es detectada en etapas tempranas de la nefropata de la
diabetes mellitus. Tambin puede ser una microproteinuria
funcional (en estados febriles, embarazo, post ejercicio) o postural
(asociado a la posicin de pie).

o Proteinuria se define como una concentracin de protenas en la


orina mayor de 300mg/24h. Si es mayor de 3.5g/24h,
generalmente se asocia a sndrome nefrtico.

Glucosa: El tbulo contorneado proximal reabsorbe toda la glucosa


filtrada, si sta se encuentra en concentraciones bajo 180 mg/dl. De esta

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forma, glucosuria puede ocurrir como un hecho aislado (secundaria a


hiperglicemia) o como manifestacin de dao renal (glucosuria renal),
donde es comnmente asociada a otras manifestaciones en el caso de
disfuncin tubular proximal, como hiperfosfatemia, hipouricemia,
aminoaciduria, acidosis tubular aguda, etc.

Cetonas: Estos elementos son producto de la oxidacin de cidos


grasos, y normalmente no aparecen en la orina. En casos de
cetoacidosis diabtica, en ayunas, y en la intoxicacin por metanol, su
produccin se encuentra aumentada, por lo que es posible detectarlos
en la orina.

Bilirrubina: Su presencia nos puede indicar daos del parnquima


heptico, ictericia obstructiva u obstrucciones biliares.

Urobilingeno: Daos severos y crnicos del parnquima heptico,


ictericia hemoltica, patologas del tracto gastrointestinal.

4.- El examen microscpico del sedimento.

Parar poder analizar el sedimento urinario primero se debe proceder a recoger


la muestra de orina (se recomienda el chorro medio de la primera orina de la
maana), luego centrifugamos de 1500 a 3000 RPM, retiramos el
sobrenadante, se recoge el sedimento agregando una gota de solucin salina y
lo observamos al microscopio, loq eu podemos encontrar es:

CLULAS

LEUCOCITOS

ERITROCITOS

CELULAS EPITELIALES

CRISTALES

DE ACIDO URICO
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FOSFATO TRIPLE

OXALATO DE CALCIO

URATO

5. Interprete el examen completo de orina que realiz en su prctica


(deber esquematizar los pasos 3 y 4 de cada una de las muestras
procesadas)

Empleamos tiras reactivas para el


examen:
Las tiras reactivas de orina consisten
en unas pequeas cintas de plstico
rgido, de unos pocos centmetros de
longitud y alrededor de medio
centmetro de anchura, a las que
van pegados unos reactivos, que
son diferentes dependiendo de lo que se quiera analizar.
Los reactivos son unos pequeos cuadraditos de un material poroso, de
colores suaves. Segn las tiras, puede haber diferente nmero de ellos a lo
largo de la misma.

TIPOS
Fundamentalmente dos:

Cualitativas: o dan positivo, o


dan negativo. Si hay en la orina
la sustancia que buscan, dan
positivo, pero no dan idea de si
hay mucha o poca concentracin
de la misma.

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Cuantitativas: adems de dar positivo, pueden cambiar mucho o


poco de color, dando idea de si hay mucho o poco del producto que
pretenden analizar en la orina.

CMO FUNCIONAN
Estos cuadraditos van impregnados de sustancias que, en contacto con lo que
quieren analizar (por ejemplo, si es un reactivo para azcar en orina, pues al
contacto con esta glucosa) reaccionan cambiando el color.
El cambio de color puede ser desde poco intenso, hasta muy importante.

MODO DE EMPLEO
Normalmente, se pueden utilizar de dos
maneras diferentes:

Empapndolos en el chorro de la
orina.

Recogiendo orina en un recipiente


especfico para ello, y despus
mojando la tira en ella.

Despus de haber mojado las tiras, se


sacan y se da tiempo para que hagan
reaccin. Segn lo que se pretenda medir el
tiempo es mayor o menor, pero normalmente esta informacin est includa en
el envase.

Cuando ha transcurrido lo suficiente, se procede a su lectura. Hay diversos


mtodos:

Las tiras cualitativas, que slo dicen si hay o no una sustancia en la


orina: si cambian de color, son positivas. Si no cambian, negativas.
Por ejemplo, los test de embarazo comercializados habitualmente.

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Las tiras cuantitativas, que cambian ms o menos de color segn


cunta sustancia haya en la orina: traen una escala de colores en el
envase; se coloca la tira al lado de dicha escala, y se decide a cul
de los colores correspondientes se parece ms. El nmero que trae
debajo dicho color nos dir la concentracin aproximada en orina.
Por ejemplo, las de medir la glucosa. En este grupo, hay tambin
tiras que miden varias cosas a la vez, como sangre, leucocitos,
glucosa, protenas... En estos casos, la escala de colores del envase
lleva las referencias del color en el mismo orden que la tira. Se
coloca la tira a lo largo de la escala, de forma que el primer cuadro
de la tira coincida con el primero de la escala, el segundo con el
segundo... y se procede a la misma comparacin explicada.

1. Sumerja la tira reactiva en la orina recin recolectada durante un segundo.

2. Elimine el exceso de orina.

3. Lea el resultado comparando las reas reactivas con la escala cromtica


despus de 30-60 segundos.

4. Lea el resultado del rea para leucocitos despus de 60-120 segundos. No


considere cambios de color desarrollados tras 2 minutos.

Se realizo el examen en 6 muestras diferentes:

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INFORME DE LABORATORIO 2012

CONCLUSIONES

El EGO no es ms que una serie de exmenes efectuados


sobre la orina, donde podemos identificar el color, aspecto,
densidad, pH, leucocitos, nitritos, entre muchos otros tipos de
sustancias, por as llamarlos.
Adems de que con este tipo de exmenes podemos
determinar si el paciente tiene tal vez alguna infeccin o
alguna enfermedad al respecto en el sistema urinario.
Todo esto lleva un procedimiento el cual debe efectuarse con
cuidado, sobre todo con limpieza y responsabilidad.

GLUCOSA, CURVA DE TOLERANCIA A LA


GLUCOSA
Glicemia Emzimtica.

INTRODUCCIN:El metabolismo de los carbohidratos en el organismo


animal,consiste esencialmente en los cambios que experimentan
laglucosa y el glucgeno y en mucha menor proporcin la fructosa yla
galactosa. La mayor parte de los glucsidos presentes en elorganismo se
hallan en el organismo en forma de glucgeno (300-400 gr en el hombre
adulto) presente sobre todo en el musculo,hgado. El glucgeno es por
consiguiente la principal reserva decarbohidratos. El principal glucsido
de la sangre circulante es laglucosa. Aunque la glucosa est presente en
el organismo encantidades menores que el glucgeno, se puede
considerar comouna fraccin glucosidica activa, mientras que el
glucgenorepresenta la forma de depsito.

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INFORME DE LABORATORIO 2012

TOLERANCIA A LA GLUCOSA OBJETIVO: EXPLICAR PORQUE AUMENTAN


Y DISMINUYEN LOS NIVELES DE GLUCOSA EN SANGRE Y COMO
INTERVIENE LA INSULINA EN ESTE FENMENO.

Metodo enzimatico para la determinacin de glucosa en sangre y


otros liquidos biologicos

Significacin clnica

1. Cual es la patologa mas comn relacionada con el metabolismo con el


metabolismo de los Hidratos de Carbono?
La patologa ms comn relacionada con el metabolismo de los hidratos de carbono
es la diabetes mellitus

2. Qu objeto tiene el diagnosticos precoz y el control de los pacientes de


los hidratos de Carbono?
El diagnstico precoz y el control de los pacientes diabticos, tienen por objeto
evitar la cetoacidosis y las complicaciones de los sntomas resultantes de la
hiperglicemia, mediante el tratamiento adecuado.

3. Qu produce el exceso de insulina en sangre? Indique 2 causas que puedan


producir este exceso de insulina.
Dado que existen mltiples factores causales de hiper o hipoglicemia, debe
considerarse en cada caso la condicin fisiolgica y/o la patologa presente en el
paciente en cuestin.

Fundamentos del metodo


El esquema de reaccin es el siguiente:
GOD
glucosa + O2 + H2O cido glucnico + H2O2

POD
2 H2O2 + 4-AF + fenol quinona coloreada + 4 H2O

Reactivo de Trabajo: de acuerdo al volumen de trabajo, colocar en una probeta


500 partes de agua destilada, 50 partes de Reactivo 4-AF, 50 partes de Reactivo

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INFORME DE LABORATORIO 2012

Fenol y llevar a 1000 partes con agua destilada. Agregar 3 partes de GOD/POD
previamente homogeneizadas. Mezclar por inversin, sin agitar. Rotular y fechar.
Muestra
Suero o plasma
a) Recoleccin: se debe obtener suero o plasma de la manera usual. Tambin
es posible realizar la determinacin en lquido cefalorraqudeo. Adems,
cuando no es posible extraer sangre venosa o en casos de extrema urgencia,
la determinacin se puede realizar en sangre capilar.
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma, se recomienda el
uso de Anticoagulante G.
c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros o plasmas con hemlisis
visible o intensa deben ser desproteinizados.
Las muestras de lquido cefalorraqudeo hemorrgicas deben ser
centrifugadas antes de procesar.
No se observan interferencias por: bilirrubina hasta 200 mg/l, cido
ascrbico hasta 75 mg/l, cido rico hasta 200 mg/l, hemlisis ligera.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: los hemates y leucocitos
son los responsables de la destruccin enzimtica de la glucosa sangunea,
siendo mxima a 37oC, razn por la cual debe centrifugarse la sangre
dentro de las dos horas posteriores a la extraccin, hasta obtener un
sobrenadante lmpido y transferir a otro tubo para su conservacin. En
estas condiciones la glucosa es estable 4 horas a temperatura ambiente o
24 horas refrigerada (2-10C).
En caso de no poder procesarse la muestra de la forma antes indicada,
deber adicionarse un conservador en el momento de la extraccin para
inhibir la gluclisis.

Materiales
Espectrofotmetro o fotocolormetro.
Material volumtrico adecuado.
Frasco de vidrio color caramelo.
Tubos de fotocolormetro o cubetas espectrofotomtricas de caras
paralelas.
Bao de agua a 37C.
Reloj.

Condiciones de reaccin
Longitud de onda: 505 nm en espectrofotmetro o en
fotocolormetro con filtro verde (490-530 nm).
Temperatura de reaccin: 37oC
Tiempo de reaccin: 10 minutos
Volumen de muestra: 20 ul
Volumen de Reactivo de Trabajo: 2 ml
Volumen final de reaccin: 2,02 ml

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INFORME DE LABORATORIO 2012

Procedimiento
En tres tubos de fotocolormetro marcados B (Blanco) S (Standard) y D
(Desconocido) colocar:

B S D
Standard - 20 ul -
Muestra - - 20 ul
Reactivo de Trabajo 2 ml 2 ml 2 ml

Incubar 10 minutos en bao de agua a 37oC. Luego leer en espectrofotmetro a


505 nm o en fotocolormetro con filtro verde (490-530 nm) llevando el aparato a
cero con el blanco.

Estabilidad de la mezcla de reaccin final


El color de reaccin final es estable 1 hora, por lo que la absorbancia debe ser leda
dentro de este lapso.
Los detergentes, metales pesados y cianuros son inhibidores enzimticos.

Tubo B Calibra el
B S D Fotocolormetro
Tubo S para reconocer el
reactivo y da el valor del
factor.
Tubo D es el que dara el
resultado

Fotocolorimetro

Grupo 1
D = 220

F = 0.008

D X F = 220 x 0.008 = 1.76 g/l

Calculo de los resultados


glucosa g/l = D x f donde f = 1,00 g/l
S

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INFORME DE LABORATORIO 2012

Valores normales
Suero o plasma: 0,70 - 1,10 g/l 70 110mg/dl.
Liquido Cfalo Raqudeo: 0.40 0.79 g/l

Resultados
Grupo 1: B= 220
B x f = 1.76 g /l HIPERGLICEMIA
Grupo 2: B = 70
B x f = 0.56 g/l HIPOGLICEMIA
Grupo 3: B = 130
B x f = 1.04 g/l NORMAL

Curva de tolerancia a la Glucosa

Esta prueba se realiza cuando existen


dudas referentes al diagnostico de una
diabetes, para diferenciar una diabetes
sacarina y la glucosuria renal o para
determinar una tendencia hacia la
diabetes mellitus en los hijos de padres
diabticos o bien se efecta en personas
que desean asegurarse de no padecer la
enfermedad en forma latente o potencial.
La prueba de tolerancia a la glucosa consiste en someter al paciente en
estudio a un rgimen hidrocarbonado 2 o 3 das antes de la prueba. Adems
no debe ingerir alimentos desde el da anterior.

1. se le extrae sangre en ayunas y se le hace vaciar la vejiga.


2. se le administra glucosa pura 100 g en 500ml de agua con jugo de
limn bien fra.

BARRIOS PAZOS, ORFA ESTHER 21


INFORME DE LABORATORIO 2012

3. Se obtienen muestras de sangre y de orina a los 30 minutos (Muestra


1), a los 60 minutos (Muestra 2), 90 minutos (Muestra 3), 120
minutos (Muestra 4).
4. Se efectan las determinaciones de la glucosa sangunea en todas las
muestras y se investiga y dosa en caso positivo la glucosuria.

1) Basal O
2) 30 min. O
3) 60 min. O
280 o 4) 120 min. O
5) 180 min. O
190 o

180 o
160 o
150 o

Conclusiones: Podemos afirmar que los niveles de glucosa pueden


aumentar o disminuir por la intervencin de factores biolgicos,
patolgicos y externos. Tambin diferimos en que la insulina influye en
los niveles de glucosa ya que su funcin es regularla, cuando hay un buen
uso de la insulina se da la Hiperglicemia Fisiolgica y cuando no hay se
da la Hiperglicemia Crnica o Diabetes

PRACTICA N5

PERFIL LIPIDICO

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INFORME DE LABORATORIO 2012

Colesterol Enzimtico

MTODO ENZIMTICO PARA LA DETERMINACIN DE COLESTEROL EN


SUERO O PLASMA

SIGNIFICACIN CLNICA

1.- QUE SIGNIFICADO CLNICO LE DA UD. A LA DETERMINACIN DEL


COLESTEROL TOTAL EN FORMA AISLADA?

El examen de colesterol total generalmente se hace como parte de un perfil


lipdico, que tambin verifica los niveles de LDL, HDL y triglicridos. Pero ni
indica nada definido, solo da indicios de un sndrome hipercolesteronmico,
que se tendr que descartar o confirmar con un perfil lipdico en la se
especifiquen los valores de los otros componentes del colesterol total.

FUNDAMENTO

2.- ESQUEMATICE LOS FUNDAMENTOS DEL MTODO?

lipasa

Esteres de colesterol colesterol + acidos grasos.

CHOD

Colesterol + O2 colest. en 3 ona + H2O2


POD
H2O2 + 4AF + fenol 4(p.Benzoquinosa monoimino) fenozona
+

4H2O

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INFORME DE LABORATORIO 2012

REACTIVOS

Standard
Enzimas: 4 AF, Buffer, concentraciones finales.
CHE >= 100 u/l
Goods: 50 m mol/l.
CHOD >= 100 u/l
Colato de sodio: 0,2 m mol/l
4 AF= 0,2 m mol/l.

MUESTRA

1) Pasos para la obtencin del suero:

a) Las muestras de sangre se extrajeron


de una vena antecubital de cualquiera
de los dos brazos en yubos de esnsayo
preparados para evitar la coagulacion.
Se utiliz un torniquete para ayudar a la
extraccin.
b) Los dems tubos fueron centrifugados
en una centrfuga refrigerada a 4C, a
3.000 r.p.m., durante 15 minutos.

2) Sustancias que pueden interferir en la reaccin:

Los anticoagulantes comunes


Los sueros con hemlisis visible o intensa producen valores falsamente
aumentados por lo que no deben ser usados.
Alcohol
Frmacos anticolesteronemicos.

3) Que precauciones debe tener con una muestra que no se va a


procesar de inmediato

El colesterol en suero es estable no menos de una semana en


refrigeracin y dos meses en congelar sin agregado de conservadores.
Contaminacin de las muestras

4) MATERIAL PARA EL PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

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INFORME DE LABORATORIO 2012

Fotocolorimetros
Tubos de Fotocolorimetro
Pipetas, micropipetas
Un bao de agua a 37 C
Probeta
Un reloj
Frasco de vidrio (color caramelo)

5) Tiempo de estabilidad del color de la reaccin final: 2 horas.

Tubo B Calibra el
Fotocolormetro
Tubo S para reconocer el
reactivo y da el valor del
factor.
Tubo D es el que dara el
resultado

VALORES DE
REFERENCIA:

Hombres: 1,72 2,48 g/l.

Mujeres: 1,75 2,40 g/l.

Clculos

Colesterol (g/l) = f x D
D = 150 F = 0.013
F = 0.013 g/l

Grupo 01: D = 150

D = 220 F = 0.013
GRUPO 02:
D=220

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INFORME DE LABORATORIO 2012

HDL Colesterol

Reactivo precipitante para la separacin de HDL en suero.

SIGNIFICACIN CLNICA

6) Que significado tiene para Ud. La determiancion del HDL?


La HDL sirve para remover el colesterol de las paredes de las arterias y
devolverlo al hgado. Niveles altos de HDL (superiores a 45 mg/dl) se
considera que protegen las arterias del peligroso estrechamiento y, as,
contribuyen a prevenir los ataques cardacos. En un estudio, los niveles de
HDL por debajo de 35 mg/dl fueron estrechamente predictivos de muerte
por enfermedad arterial coronaria

FUNDAMENTO

7) Esquematizar los fundamentos del mtodo.- Parte del perfil lipdico


solicitado

Las HDL se separan precipitando selectivamente las LDL y VLDL mediante el


agregado de sulfato de dextran en presencia de iones de Mg++. En el
sobrenadante separado por centrifugacin quedan las HDL y se realiza la
determinacin.

REACTIVOS PROVISTOS

Reactivo Dextran
Reactivo magnesio

MUESTRA

8) Sustancias que pueden inferir en la reaccin:

Anticoagulantes distintos de la heparina


bilirrubina mayor de 50 mg/l.
drogas anticolesteronemicas

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INFORME DE LABORATORIO 2012

9) Precauciones que se debe tener con una muestra que no se va a


procesar de inmediato:

Se recomienda refrigerar la muestra hasta la realizacin del ensayo.


Algunos autores mencionan estabilidad de 3 das a 4C que se
prolongan al congelar.

10)Tiempo de estabilidad del color de la reaccin final:

2 horas.

Valores de referencia:

Edad HDL hombres HDL mujeres

0-19 0.30-0.65 0.30-0.70

20-22 0.35-0.70 0.35-0.75

30-39 0.30-065 0.35-0.80

50-59 0.30-0.65 0.35-0.85

LDL Colesterol

Reactivo precipitante para la separacin de las HDL en sueros.

SIGNIFICACIN CLNICA

11) QUE SIGNIFICADO CLNICO LE DA UD. A LA DETERMINACIN DE


LDL COLESTEROL?

El valor elevado de esta beta lipoprotena (valor critico: 1,9 g/l) es considerado
como factor de riesgo para el desarrollo de enfermedad cardiaco coronaria.

LDL es altamente insoluble. Ya que constituyen la principal fuente de


suministro de colesterol y de lipoprotena acarreadora de colesterol; adems
se cataboliza tanto por vas mediadas por receptores.

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INFORME DE LABORATORIO 2012

Se ha identificado la presencia de receptores de LDL en orificios recubiertos en


la superficie celular que tiene el propsito de captar el LDL. Este proceso esta
mediada va apolipoprotena B-100, apo-E y receptores B/E, lo que permite la
adquisin subsecuente de colesterol y su utilizacin por la clula.
Es importante reconocer que el 70% de los receptores para C-LDL se
encuentran en los hepatocitos, lo que permite que el hgado reutilice el
colesterol. El colesterol introducido a las clulas por este proceso mediado por
receptores limita la sntesis de colesterol al inhibir la actividad de la enzima que
regula la tasa de este proceso, la reductasa de la 3-hidroxi-3-metil glutaril
coenzima A (HMG-CoA). Esto brinda a las clulas un medio para regular su
contenido de colesterol; por ejemplo, se piensa que el colesterol dietario de los
quilomicrones remanentes disminuye los receptores hepticos del LDL.

12)ESQUEMATICE LOS FUNDAMENTOS DEL MTODO?

Las DLD se separan del suero precipitndolas selectivamente mediante el


agregado de polmeros de alto peso molecular.

REACTIVOS PROVISTOS

Reactivo precipitante: Solucin 10g/l de sulfato de polivinilo.

13)Sustancias que pueden interferir en la reaccin

Los sueros hipertriglicerridemicos producen sobrenadantes turbios, la


bilirrubina interfiere en niveles mayores de 50 mg/l.

14)Precauciones con la muestra que no se va a procesar de inmediato

Se conserva en el refrigerador ( 2 10C) durante no mas de 24 horas


contadas a partir del momento de la extraccin.

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TRIGLICRIDO

SIGNIFICACIN CLNICA

15)QUE SIGNIFICADO CLNICO LE DA UD, A LA DETERMINACIN DE


LOS TRIGLICERIDOS?

De este modo una cantidad de triglicridos superior a 200 mg/dL en sangre es


considerada hipertrigliceridemia. Esta afeccin no tiene por qu estar asociada
a un aumento significativo en los niveles de colesterol. Un nivel alto de
triglicridos puede provocar ateroesclerosis, lo cual incrementa el riesgo de
problemas cardiovasculares.

16)ESQUEMATICE LOS FUNDAMENTOS DEL MTODO?

Tg lipasa glicerol + ac. Graso.

Glicerol + ATP glicerol 1 fosfato ADP

Glicerol 1 F + O2 H2O2 Dihidroxiacetona.

2H2O2 + 4AF + diclorofenol PGO complejo.

REACTIVOS PROVISTOS

Buffer
Enzimas
Standard

MUESTRA

17)Sustancias interferentes:

Bilirrubinemia mayor a 50 mg/l.

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INFORME DE LABORATORIO 2012

18)Precauciones de la muestra que no se procesa de inmediato

Refrigerar.

PROCEDIMIENTO (no se realizo en practica)

B S D

Standard 20 ul.

Muestra 100 ul.

R. de trabajo 2 ml. 2 ml. 2 ml.

Incubar 5 minutos en Bao Maria


Retirar del bao y enfriar.
Leer con fotocolorimetro.

Valores de referencia de triglicridos: 0.35g/dl

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