PRODUCCIN DE HONGOS COMO CONTROLADORES

BIOLGICOS DE INSECTOS

INTRODUCCIN:

El control biolgico es una prctica agrcola en constante crecimiento que

busca la destruccin total o parcial de patgenos e insectos plaga,
frecuentemente mediante el uso de sus enemigos naturales (Spardo y Gullino,
2004). Existen numerosos reportes sobre la utilizacin de microorganismos
entomopatgenos, que por su capacidad de producir enfermedad y muerte en
insectos, son utilizados como agentes de control biolgico (Asaff et al., 2002).
De los diferentes microorganismos empleados, los hongos tienen mecanismos
de invasin nicos que les permiten atravesar de forma directa la cutcula o la
pared del tracto digestivo de los insectos, lo que los hace excelentes agentes
de control biolgico actuando como insecticidas de contacto (Charnley y
Collins, 2007). Los insectos, por su parte, tienen mecanismos de defensa
contra las agresiones de los entomopatgenos, que involucran barreras fsicas,
defensas humorales, defensas celulares y de comportamiento social (Marmaras
et al., 1996).

El hongo B. bassiana es conocido como entomopatgeno desde 1835, ao en

que se descubri causando la muerte de gusanos de seda (Commonwealth
Mycological Institute, 1979). Se encuentra de forma natural en suelos y sobre
diversos rdenes de insectos (colepteros, dpteros, heterpteros, hompteros,
lepidpteros, tisanpteros) as como sobre caros tetranquidos, por lo que ha
sido utilizado para el control de plagas de dichos rdenes en diversos pases
(WRIGHT y KNAUF, 1994; KuROGl et al, 1993; LANDA et al., 1994).

El hongo entomopatgeno Beauveria bassiana est siendo estudiado de

manera intensiva como agente de control biolgico, para insectos y otras
plagas de artrpodos, por su amplia gama de organismos diana (Diane & Brett;
2007). Adems de ser un parsito necrtrofo, B. bassiana puede ser saprfito
facultativo y puede existir en la plantas como endfito (Ownley et al; 2008). El
potencial de este microorganismo en el control biolgico de insectos ha
permitido su inclusin en diversos programas de manejo integrado de plagas
que atacan cultivos de importancia econmica en el mundo. En Cuba,
actualmente se utiliza en el control biolgico de insectos plaga como la broca
del caf (PromaBroca, 2004).

En el proceso de desarrollo de un agente de control biolgico como producto,

es necesario l estudio de su modo de accin y los metabolitos que en l
participan a fin de garantizar aspectos del conocimiento que contribuyan a las
fases de seleccin, optimizacin de la produccin y ventajas de su uso.
OBJETIVOS:

- Describir los mecanismos de accin y respuesta que se establecen

durante la relacin Beauveria bassiana-insecto.
- Comprender la importancia del uso de los hongos como controladores
biolgicos contra enfermedades y/o plagas.

MATERIALES:

Materiales de laboratorio:
- Twean 80
- Asperzor
- Placa Petri
- Mechero
- Asa bacteriolgica
Material biolgicos:
- Cultivo de Beauveria bassiana
- Larvas de choclo

DISCUSIN:

Los hongos entomopatgenos tienen diferentes atributos que determinan su

virulencia frente a sus hospedantes, incluyendo la produccin de enzimas
hidrolticas. Estos inician su proceso infectivo en los insectos hospederos
cuando las esporas viables son retenidas por contacto en la superficie del
integumento, mientras encuentran un espacio propicio para establecer la
asociacin patgeno-hospedero (Jones, 1994) y formar los tbulos germinales y
a veces el apresorio, que facilitarn la invasin del hongo. (Hajek, 1997; Asaff
et al., 2002; Barranco et al., 2002).

Se ha sugerido que iones divalentes como el Ca+2 y el Mg+2 reducen las

fuerzas de repulsin electrosttica de la superficie de la del insecto, por lo que
pueden afectar su hidrofobicidad y promover la adhesin pared celular fngica-
cutcula, creando condiciones favorables para el establecimiento de la espora y
la subsecuente invasin del hospedero (Barnes y Moore, 1997; Kershaw y
Talbot, 1998; Wessels, 1999). La germinacin de la espora se inicia con el
hinchamiento de la misma, que es favorecido por una humedad alta (70%
durante 14h); la germinacin es disparada por mensajeros que generalmente
son carbohidratos presentes en las protenas cuticulares del insecto.

La hidratacin de la espora es favorecida por la accin antidesecante de su

cubierta mucilaginosa, que adems funciona como protector ante la presencia
de polifenoles txicos y enzimas, secretadas por sistema inmune del insecto.
Durante este proceso intervienen enzimas extracelulares relacionadas con la
patognesis tales como: proteasas, lipasas, ureasas y quitinasas entre otras,
que hidrolizan los componentes cuticulares. La presencia de enzimas
hidrolticas suele facilitar cada etapa de infeccin del hongo y adicionalmente
puede ser importante en la invasin del hemocele del insecto (Zhanga et al;
2008).

Una vez dentro del insecto, el hongo prolifera formando cuerpos hifales
secundarios, que se ramifican en la procutcula conformada principalmente de
fibrillas lameladas de quitina embebidas en una matriz protenica que acta
como cubierta fsica protectora ante las secreciones extracelulares del
patgeno. Posteriormente, los cuerpos hifales se encuentran con la capa
epidrmica y con su respectiva membrana basal y se diseminan a travs del
hemocele (Deshpande, 1999). As, invaden diversas estructuras como tejidos
musculares, cuerpos grasos, tubos de Malpighi, mitocondrias, hemocitos,
retculo endoplsmico y membrana nuclear. Sirviendose de su humedad y su
agua interna para su desarrollo y crecimiento, generando que el insecto pierda
su tamao normal y adopte y aspecto seco.

Al agotarse los nutrientes, el hongo inicia un crecimiento miceliar invadiendo

todos los rganos del hospedero. Finalmente, las hifas penetran la cutcula
desde el interior del insecto y emergen a la superficie iniciando la formacin de
esporas cuando la humedad relativa es adecuada (Gillespie y Claydon, 1989).
Esto no pudo observarse, debido que para su visualizacin, se necesita la
elaboracin de una CMARA HUMEDA; la cual es un sistema donde se le
proporcione al hongo una humedad constante mediante el uso de un algodn
embebido en agua; permitiendo que las hifas salgan y crezcan sobre el insecto.

Cabe destacar que durante la penetracin del hongo desde la cutcula del
insecto hasta el hemocele, la hifa queda inmersa en protenas, quitina, lpidos,
melanina, difenoles y carbohidratos; algunos de ellos son nutrimientos pero
otros pueden inhibir su crecimiento, ya que el insecto activa su sistema inmune
a travs de procesos como la melanizacin, fagocitosis, nodulacin y
encapsulamiento (St. Leger y Roberts, 1997). Sin embargo, los hongos
desarrollan una serie de actividades que les permiten evitar este tipo de
defensas, tales como cambios en la pared celular y produccin de sustancias
inmunomodulatorias o toxinas fngicas (Khachatourians, 1991). Por ltimo,
cabe resaltar que en la experiencia no se observ pudricin, esto fue debido
que Beauveria bassiana produce antibitico que no permiten efecto.

CONCLUSIONES:

- La utilizacin de los hongos entomopatgenos en la agricultura ha ido

en aumento en los ltimos aos debido al gran potencial que tienen
en el manejo de plagas, representando una alternativa eficiente al
uso de insecticidas qumicos, considerados altamente nocivos para la
salud del hombre y los ecosistemas. El entendimiento de los
 mecanismos involucrados durante el proceso de infeccin y la
utilizacin de las nuevas tcnicas de ingeniera gentica permitirn la
obtencin de nuevos productos biolgicos efectivos para su
utilizacin en campo y la proteccin de especies benficas de
insectos.
- El mecanismo de patogenicidad de los hongos entomopatgenos es
muy complejo y aun quedan muchas interrogantes por responder. Es
indudable que tal mecanismo es altamente especializado y que la
relacin insecto-hongo es fundamental, siendo ambos organismos
activos. Conocer ms sobre este mecanismo contribuir a la
bsqueda de cepas con caractersticas especiales y a establecer
condiciones de proceso que permitan la obtencin de esporas con
mayor virulencia hacia determinado insecto plaga, sin descartar la
posibilidad de utilizar esporas y metabolitos, o bien solo los
metabolitos con mayor actividad insecticida.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

Asaff Torres, A., Y. Reyes Vidal, V.E. Lpez y Lpez, M. de la Torre, 2002. Guerra
entre insectos y microorganismos: una estrategia natural para el control de
plagas. Avance y Perspectiva 21:291-295.

Barnes SE, Moore D (1997) The effect of fatty, organic or phenolic acids on the
germination of conidia of Metarhizium flavoviride. Mycol. Res. 101: 662-666.

Charnley, A.K., S.A. Collins, 2007. Entomopathogenic fungi and their role in pest
control. In: Kubicek, C.P., I.S. Druzhinina (eds.), Environmental and Microbial
Reationship. The Mycota IV. Springer-Verlag Belin Heidelberg. pp. 159-187.

COMMONWEALTH MYCOLOGICAL INSTITUTE, 1979: CMI Descriptions of

pathogenic fungi and bacteria. N 602: Beauveria bassiana.

Diane JH, Brett HK, Lewis MW, Keyhani NO. 2007. Surface characteristics of the
entomopathogenic fungus
Beauveria (Cordyceps) bassiana. Microbiology;153:34483457.

Gillespie, A.T., N. Claydon, 1989. The use of entomogenous fungi for pest
control and the role of toxins in pathogenesis. Pesticide Science 27:203-215.

Hajek AE (1997) Ecology of terrestrial fungal entomopathogens. Adv. Microb.

Ecol. 15: 193-249.

Jones RL (1994) Role of field studies in assessing environmental behavior of

herbicides. Proc. Brighton crop protection conference. Weeds. Vol. 3. Brighton,
RU. pp. 1275-1282.
Kershaw MJ, Talbot NJ (1998) Hydrophobins and repellents: proteins with
fundamental roles in fungal morphogenesis. Fungal Genet. Biol. 23: 18-33, 83.

Marmaras, V.J., N.D. Charalambidis, C.G. Zervas, 1996. Immune response in

insects: the role of phenoloxidase in defense reactions in relation to
melanization and sclerotization. Archives of Insect Biochemistry and Physiology
31:119-133.

Ownley BH, Griffin MR, Klingeman WE, Gwinn KD, Moulton. KJ, Pereira RM.
2008 Beauveria bassiana: Endophytic colonization and plant disease control. J
Invertebrate Pathol. 98:267-270.

Programa de manejo agroecolgico de la broca del caf (PromaBroca). INISAV-

CNSV-GEAM-CENSA. Ministerio de la Agricultura. Ciudad de la Habana, Octubre
del 2004.

Spardo, D., M. L. Gullino, 2004. State of the art future prospects of biological
control of postharvest fruit diseases. International Journal of Food Microbiology
91: 185-194.

WRIGHT, J. E. y KNAUF, T. A., 1994: Evaluation of Naturalis-L for control of

cotton insects. Brighton Crop Protection Conference: Pests & Diseases: 45-52.

Zhanga YJ, Fengb MG, Fana YH, Luoa ZB, Yanga XY, Wua D, et al. A cuticle-
degrading protease (CDEP-1) ofBeauveria bassiana enhances virulence.
Biocontrol Science and Technology. 2008; 18(6):543-555.