Curso: Biología Mención

Material Nº 12 Unidad I. Organización, estructura y actividad celular.

EXPRESIÓN GÉNICA.
1. LOS EXPERIMENTOS QUE DEMOSTRARON QUE EL DNA ES EL MATERIAL GENÉTICO.

El concepto de gen fue introducido en 1860 por Mendel (factor mendeliano) y recién alrededor de
1920 se realizaron los primeros experimentos que revelaron al DNA como material genético.

Figura 1. Experimento de Griffith que puso

en evidencia la existencia de un principio
transformante procedente de la cepa S.
Griffith no supo que ese principio
transformante era el DNA.

En la década de los cuarenta, O. T.

Avery, C. MacLeod y M. McCarty
obtuvieron los distintos tipos de moléculas
de las bacterias S muertas y observaron si
transformaban a los neumococos R.
Comprobaron virulencia con el mismo
procedimiento utilizado por Griffith, pero
en vez de inocular bacterias R + S
muertas, inocularon distintas muestras de
cepas R con diferentes sustancias aisladas
de las S. Ni los polisacáridos de las
cubiertas de las S ni otras moléculas
lograron la transformación. El principio
transformante resultó ser el DNA. Los
genes de la cepa S que contenían la
información necesaria para producir la
cápsula se habían introducido en las
bacterias R (Figura 2).

A pesar de esta prueba demostrativa de que

el DNA era el principio transformante
(genes), la comunidad científica se resistió a
aceptar la importancia genética del DNA.

Figura 2. Experiencia de Avery, MacLeod y McCarty.

 En 1952, A. D. Hershey y M.
Chase demostraron que el DNA
del fago T2, un virus que parasita
bacterias, era la molécula que se
introducía en la célula bacteriana
para la reproducción viral
(Figura 3). No obstante,
continuaba resultando necesario
demostrar cómo un compuesto
tan simple podía almacenar y
transmitir tanta información. La
respuesta la proporcionó el
progresivo conocimiento de su
estructura. Desde que, en 1953,
J. Watson y F. Crick mostraron
su modelo de estructura de doble
hélice, que explicaba cómo se
podía almacenar y transmitir la
información genética, ya nadie
dudó de la función y la
importancia del DNA.
Figura 3. Experiencia de Hershey y Chase,
con el bacteriófago T2.

El DNA es la macromolécula portadora de los genes: el DNA es el asiento

molecular de la información genética.

2. RELACIÓN ENTRE GEN Y PROTEÍNA.

Los genes contienen la información para la producción regulada de enzimas y proteínas

estructurales y de esta manera controlan las reacciones bioquímicas y la forma de los
organismos.
El material genético se manifiesta dando forma y función a las proteínas, y debe replicarse con la
suficiente fidelidad como para asegurar la continuidad de las especies, pero al mismo tiempo
permitir algunos cambios (variaciones) que sirven de sustrato para la evolución.

La relación de genotipo y fenotipo en sus distintos niveles se presenta en la siguiente secuencia

de conceptos:

• El fenotipo de un organismo depende del fenotipo de sus partes, que a su vez está
determinado por el fenotipo de sus células componentes.
• El fenotipo de una célula está determinado por su química interna, que es controlada por las
enzimas que catalizan sus reacciones metabólicas.
• La función de una enzima depende de su estructura tridimensional específica, además
depende de su secuencia lineal específica de aminoácidos.
• Las enzimas y las proteínas estructurales, presentes en una célula, están determinadas por el
genotipo de la célula.
• Los genes especifican la secuencia lineal de aminoácidos en las proteínas y por lo tanto los
genes determinan el fenotipo.
• El fenotipo está determinado por el genotipo más la acción ambiental.
2
3. FLUJO DE LA INFORMACIÓN GENÉTICA.

Dogma Central de la Biología Molecular:

Propuesto inicialmente por F. Crick, consiste en la

generación de moléculas de RNA, para permitir la síntesis de
proteínas a nivel citoplasmático.
La expresión del gen requiere de 2 etapas básicas:

• la transcripción o síntesis del RNA utilizando a una

molécula de DNA como molde y
• la traducción o síntesis de proteínas a partir de la
información contenida en el RNA mensajero intermedio
entre los genes y las proteínas.

Figura 4. Dogma Central de la Biología Molecular.

4. TRANSCRIPCIÓN O SÍNTESIS DEL RNA.

La transcripción consiste en la síntesis de una molécula de RNA a partir de una de las cadenas del
DNA; esta cadena se denomina complementaria o no codificadora (molde o templado); la
otra hebra del DNA se denomina no complementaria o codificadora (Figura 5).

Figura 5. Resumen del proceso de transcripción.

3
Es importante destacar que los RNA que se sintetizan a partir de un fragmento de hebra molde o
templada de DNA puede terminar como: RNA mensajero, RNA de transferencia y/o RNA
ribosomal; estos dos últimos no llevan información para la síntesis de una proteína, pero son
imprescindibles en el proceso.

Cuestiones básicas sobre la síntesis de RNA:

• Todos los RNAs se sintetizan por medio de reacciones catalizadas por RNA
polimerasas, gracias a la información contenida en el DNA que sirve de patrón o
molde. La dirección de la transcripción siempre va en el sentido 5’ a 3’.

• La síntesis se produce por complementariedad de bases. La cadena de RNA que

se forma es complementaria a un fragmento de una de las cadenas de DNA. En
la cadena de RNA no aparecerá la base timina que será sustituida por uracilo.

• Existen notables diferencias en la transcripción de células procariontes y

eucariontes.

4.1. Etapas de la transcripción:

Se estudió inicialmente en Escherichia coli y el proceso consta de cuatro fases:

A) Iniciación o ensamblaje de moléculas.

B) Elongación o crecimiento de la molécula de RNA.
C) Terminación o conclusión de la cadena de RNA.
D) Maduración o transformación del RNA transcrito.

Se hará un breve análisis de cada una de ellas.

A) iniciación.

La RNA polimerasa se une fuertemente cuando entra en contacto con una secuencia específica
de DNA, llamada promotor. En el promotor se encuentran dos cortas secuencias situadas
entre -35 y -10 nucleótidos del inicio (0) de la transcripción. La misión de las secuencias
promotoras es indicar dónde se inicia la transcripción, en cuál de las dos hebras del DNA y en
qué lugar (Figura 6).

DNA
-35 -10 0
TTGACA TATATT

Inicio de la transcripción

Figura 6. Centros promotores y sitio de inicio de la transcripción en la hebra molde o templado de DNA.

4
 B) Elongación.

Después de unirse al promotor, la RNA

polimerasa abre una región localizada de la
doble hélice, de forma que expone los
nucleótidos de ambas cadenas de una
pequeña zona del DNA. Una de las dos
cadenas expuestas del DNA actúa como
patrón para el apareamiento de las bases
complementarias y se inicia la formación de
una cadena de RNA. De esta forma, la
cadena de RNA va creciendo nucleótido a
nucleótido en dirección 5’ a 3’. El proceso de
elongación de la cadena continúa hasta que
la enzima encuentra una segunda secuencia
especial del DNA, la señal de terminación.

Figura 7. Síntesis de una molécula de mRNA.

Durante la elongación de la cadena de RNA, la polimerización alcanza una

velocidad de 30 nucleótidos por segundo a 37º C. Por consiguiente, una cadena
de RNA de 5.000 nucleótidos tarda unos tres minutos en sintetizarse.

C) Terminación.

Existen diversas señales de terminación en el DNA molde que son secuencias que
desencadenan la separación de la enzima RNA polimerasa de la cadena molde y del RNA
transcrito.

D) Maduración.

• En procariontes el RNA mensajero, antes de terminar el proceso de transcripción empieza

a ser traducido, por lo tanto no necesita de maduración. Los RNA ribosomal y de
transferencia se forman a partir de transcritos primarios. La maduración consiste en
modificaciones tales como rupturas de la cadena y añadidos de nucleótidos (-CCA) en el
extremo terminal 3’.

• En eucariontes cada gen eucariota se transcribe separadamente (monocistrónico), con

un control transcripcional independiente para cada uno. Los distintos RNA transcritos en los
eucariontes presentan una serie de especializaciones no encontradas en procariontes.
De gran importancia es el hecho que los genes eucariontes poseen en su estructura exones
e intrones, situación no observada en procariontes (Figura 8).
El número de intrones varía para cada gen,
Intrón sin embargo, su número aumenta a medida
Transcrito que el organismo es más complejo y de
Exón Exón Exón
reciente evolución. Se ha propuesto que los
5` AAAAAA(A)n
intrones promueven la recombinación
Intrones genética (vía crossing-over), y por lo tanto
Empalme aumentan la velocidad de evolución (de
RNA
cambio).
m

Exón Exón Exón

5` AAAAAA(A)n Figura 8. Procesamiento del mRNA en
eucariontes.
5
 4.2. Procesamiento diferencial del RNA mensajero.

Algunos pre mRNA (RNA heteronuclear)

pueden ser procesados en más de una forma.
En algunos casos se utiliza el mismo gen para
producir una proteína en un tejido y otra
distinta en otro tejido. Esto es posible porque
algunos genes producen moléculas de pre-
mRNA que tienen múltiples patrones de
empalme. Se ha observado que estos pre-
mRNA presentan un segmento que puede ser
Intrón o Exón. Este procesamiento
diferencial del RNA nuclear permite, a las
células de cada tejido, producir su propia
versión de mRNA correspondiente al gen
específico (Figura 9).

Figura 9. Procesamiento diferencial del RNA mensajero.

5. CÓDIGO GENÉTICO.

El código genético es el “diccionario” usado para

lograr la traducción de la información genética,
escrita en lenguaje nucleotídico de cuatro
bases nitrogenadas, a un “idioma”
aminoacídico escrito con un abecedario de
veinte letras. Los veinte aminoácidos que
encontramos formando parte de las proteínas
de un ser vivo, están representados en el
código genético de la agrupación de tres bases
nucleotídicas (triplete o codón) de las cuatro
existentes. Este código fue “descifrado” por
Marshall, Nirenberg, Heinrich Matthaei,
Robert Holley y Har Gobind Khorana, 10
años después que James D. Watson y Francis Figura 12. Código genético.
Crick “desentrañaran” el misterio de la
estructura del DNA.

Cada triplete constituye un codón; existen en total 64 codones; 61 de ellos codifican

aminoácidos y 3 son codones de término para el cese de la traducción. Tal cantidad deriva de una
relación matemática simple: los cuatro nucleótidos (A, U, C y G) se combinan de a tres, por lo que
pueden generarse 64 (43) combinaciones; en cambio la relación de 41 o 42 nucleótidos, no
permitirá generar una cantidad adecuada de combinaciones para codificar los 20 aminoácidos.

El código genético es:

• universal
• degenerado
6
6. TRADUCCIÓN O SÍNTESIS DE LAS CADENAS POLIPEPTÍDICAS.

La síntesis de las cadenas polipeptídicas es la segunda etapa observada en el dogma central, y es

el proceso por el cual la información lineal, escrita con cuatro letras (A, U, G, C), se traduce en
información tridimensional, escrita con 20 letras (20 aminoácidos). Si bien esta etapa es, en sus
fundamentos, similar entre procariontes (bacterias) y eucariontes, existen diferencias que serán
mencionadas a medida que se avance en el desarrollo del tema.

6.1. mRNA, el transportador de la información.

El mRNA es la molécula responsable de transportar la información lineal, que debe traducirse a

información tridimensional (proteínas). En bacterias, el mRNA es traducido, sin mayor
modificación, aún cuando su síntesis no haya concluido. Por esto, se puede decir que en bacterias
la transcripción y traducción son eventos paralelos, que ocurren en un mismo compartimiento (en
el citoplasma celular). En el caso de los eucariontes, los eventos de transcripción y traducción se
hallan separados, espacial y temporalmente.
Los mRNA se sintetizan fundamentalmente en el núcleo de la célula eucarionte y se combinan con
diversas proteínas, formando complejos ribonucleoproteicos heterogéneos nucleares o hnRNP.

6.2. Ribosoma, “la fábrica de proteínas”.

Microscópicamente, la estructura sub-celular relacionada con la síntesis proteica es un corpúsculo

denominado ribosoma (Figura 10). Esta estructura está formada por una sub-unidad menor y una
mayor.

La sub-unidad menor presenta el

sitio de reconocimiento y unión al
mRNA y la sub-unidad mayor posee
la enzima que efectúa la unión
peptídica y los sitios para los tRNA,
denominados: sitio P (por peptidil),
sitio A (por aminoacil) y sitio E (por
exit, salida).

Figura 10. Anatomía de un ribosoma.

6.3. tRNA, el vehículo de los aminoácidos.

Los tRNA son las moléculas adaptadoras que permiten traducir el código de nucleótidos a
aminoácidos para la síntesis de proteínas. Reconocen tripletes de nucleótidos (codones) por un
extremo de su molécula (anticodón) y en el otro extremo (3’) llevan un determinado
aminoácido, que la maquinaria traduccional (el ribosoma) se encarga de unir covalentemente con
otros aminoácidos, siguiendo en este caso el molde de tripletes que trae el mRNA.

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 6.4. Aminoacil-tRNA sintetasa, una
enzima clave.

El aminoácido se une a su correspondiente

tRNA por la acción de una enzima llamada
aminoacil-tRNA sintetasa. Esta reacción se
desarrolla en dos pasos:

1. Activación del aminoácido.

2. Unión del aminoácido al tRNA.

Figura 11. Hipótesis Wobble.

Algunos investigadores se refieren a esta reacción como la carga del tRNA. La energía usada en
la carga del aminoácido a su correspondiente tRNA, queda depositada en la unión química entre el
aminoácido y el tRNA. Esta energía será utilizada posteriormente por la actividad peptidil
transferasa presente en la subunidad mayor del ribosoma para la formación del enlace peptídico.

6.5. Etapas de la síntesis de cadenas polipeptídicas.

En términos generales, se puede afirmar que la traducción es similar en procariontes y

eucariontes, salvo algunas particularidades que los diferencian. En las secciones siguientes se
concentrará la explicación en la maquinaria traductora de la bacteria Escherichia coli. En dichas
secciones, se mencionarán las diferencias con el sistema eucarionte.

A) Iniciación.

Es la unión de la subunidad menor a la región del mRNA que contiene el codón de inicio AUG.
Posteriormente se une el tRNA iniciador cargado con el residuo N-formilmetionina. Por este
motivo, el primer aminoácido incorporado durante la síntesis de muchas proteínas bacterianas es
una metionina modificada, la N-formilmetionina (Figura 12).
El inicio es algo diferente en los eucariontes, donde el mRNA es reconocido por la subunidad
menor sólo cuando ésta ha unido previamente la molécula de tRNA iniciador cargado con el
residuo aminoacídico metionil, y algunos factores de iniciación eucarióticos.

Figura 12. Formación del complejo de iniciación.

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B) Elongación.

El proceso de elongación de la cadena polipeptídica sobre un ribosoma se puede considerar como

un ciclo de tres etapas (Figura 13):

1) El tRNA cargado que se introduce en el sitio A, vacío, quedará cerca de la

N-fornilmetionil-tfMetRNA, que está localizada en el sitio P.

2) Formación del primer enlace peptídico cuando la N-formilmetionina del tRNA iniciador se une
al residuo aminoacídico unido al segundo tRNA ubicado en el sitio A. El ribosoma se desplaza
tres nucleótidos en dirección del extremo 3´ del mRNA, quedando libre un nuevo sitio A.

3) Los procesos citados se repiten de forma sucesiva codón tras codón. Se calcula que se
agregan a la cadena, en promedio, cinco aminoácidos por segundo, deteniéndose la
incorporación cuando al sitio A llega a alguno de los codones de término.

Figura 13. Elongación de la cadena polipeptídica.

C) Terminación.

En esta etapa, el sitio A del ribosoma es abordado por alguno de los codones de término y
ocupado por un factor de terminación, RF en las bacterias y eRF (eucaryotic releasing factor) en
eucariontes. La cadena polipeptídica terminada se libera del último tRNA. Se disocian las sub-
unidades ribosomales y el mRNA, quedando disponibles la subunidades ribosomales para ser
utilizados en una nueva síntesis (Figura 14).

Figura 14. Terminación de la traducción.

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7. MUTACIONES.

Una mutación es un cambio en la secuencia o el

Normal número de nucleótidos del DNA de una célula.
La mayoría de las mutaciones implican solo una
sustitución de nucleótidos y se las denomina
mutaciones de punto o puntuales.
Otros cambios en la secuencia de aminoácidos
de una proteína pueden ser resultado de la
delección (pérdida) o adición (suma) de
nucleótidos dentro de un gen, esto tiene como
Sustitución
consecuencia el desplazamiento del “marco de
Sustitución de una
o pocas bases. lectura” del gen, lo que causa la síntesis de una
proteína completamente “nueva” e
invariablemente defectuosa.

Agentes mutágenos.

1. Agentes Químicos: se encuentran en

Adición alimentos y sustancias de uso cotidiano; el
tabaco, algunos colorantes, el ácido acético
(presente en el vinagre).
adición de una
o pocas bases.

2. Radiaciones ionizantes: aproximadamente

el 82% de las radiaciones a las que nos
exponemos son de origen natural y una gran
Deleción parte de esta radiación natural corresponde
a la emanación del gas radón radiactivo que
escapa de la tierra.
pérdida de una
o pocas bases.

PREGUNTAS

1. Los genes tienen las siguientes funciones en relación con la información genética, excepto:

A) expresión
B) conservación
C) maduración.
D) almacenamiento
E) transmisión

2. Si el codón del RNA mensajero es: 5’ A U G 3’ , el anticodón que le responde es:

A) 5’ UAC 3’
B) 5’ TAC 3’
C) 3’ UAC 5’
D) 3’ CAU 5’
E) 3’ AUC 5’

10
3. Cada gen puede existir en variadas formas, distintas unas de otras, siendo pequeñas sus
diferencias. Al respecto se puede afirmar correctamente:

I) Las formas distintas de un gen se denominan alelos.

II) La variación de un gen provoca variación en la proteína.
III) La variación alélica causa variación hereditaria dentro de cada especie.

A) Sólo I
B) Sólo III
C) Sólo I y III
D) Sólo II y III
E) I, II y III

4. El proceso de transcripción y traducción es posible observarlo en:

I) Neuronas.
II) Bacterias.
III) Cloroplastos.

A) Sólo I
B) Sólo II
C) Sólo I y II
D) Sólo II y III
E) I, II y III

5. La cantidad de proteína que debe producirse y el momento de su síntesis está determinada

por

I) la información contenida en los genes.

II) la regulación de la expresión génica.
III) los estímulos ambientales.

A) Sólo I
B) Sólo III
C) Sólo I y III
D) Sólo II y III
E) I, II y III

6. El aminoácido alanina es codificado por los siguientes codones: GCU, GCC, GCA y GCG. Esto
significa que el código genético

A) está traslapado.
B) es universal.
C) es degenerado.
D) combina cuatro bases nitrogenadas.
E) codifica cada aminoácido con cuatro codones.

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7. Las proteínas, sean enzimas o proteínas estructurales tienen por función

I) determinar el fenotipo.
II) ejecutar la información genética.
III) inhibir la variación alélica.

A) Sólo I
B) Sólo II
C) Sólo III
D) Sólo I y II
E) I, II y III

8. Para la síntesis de una proteína de 617 aminoácidos, el RNA mensajero debe contar (sin
considerar codón de inicio y de término), con

I) 1851 nucleótidos.
II) 617 tripletes.
III) 617 bases nitrogenadas.

A) Sólo I
B) Sólo II
C) Sólo III
D) Sólo I y II
E) I, II y III

9. Las mutaciones pueden causar un desplazamiento del “marco de lectura” del gen y el producto
puede ser una proteína defectuosa. Este desplazamiento es causado a nivel de la secuencia de
nucleótidos por

I) sustitución.
II) delección.
III) adición.

A) Sólo I
B) Sólo I y II
C) Sólo I y III
D) Sólo II y III
E) I, II y III

10. Al comparar la organización del genoma Eucarionte y Procarionte, es posible afirmar que es
(son) característica (s) exclusiva (s) del primero la presencia de

I) intrones.
II) secuencias no codificantes altamente repetidas.
III) secuencias reguladoras de la expresión génica.

A) Sólo I
B) Sólo II
C) Sólo III
D) Sólo I y II
E) I, II y III

DMSE-BM12

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