Da Administrao Oral

Ao Efeito Teraputico
Medicamento

Administrao

Desintegrao
Desagregao ETAPA BIOFARMACUTICA
Dissoluo

Frmaco em soluo

Absoro
Distribuio FARMACOCINTICA
Eliminao

Frmaco na biofase

Interao Frmaco-Receptor FARMACODINMICA

EFEITO TERAPUTICO
 I. CONCEITO DE RECEPTOR FARMACOLGICO

1. LANGLEY, J.N.

1878: primeira sugesto da existncia de uma

substncia fisiolgica com a qual pilocarpina e
atropina formariam substncias qumicas com
componentes teciduais.

1905: Receptive substance para explicar os efeitos

de nicotina e curare sobre o msculo esqueltico
 2. EHRLICH, P.
SIDE-CHAIN THEORY"

1. Formao anticorpos (1900)

Side-chains (depois chamados de

receptores) so parte da maquinaria
fisiolgica das clulas sendo capazes de
fixar toxinas

2. Base terica da Quimioterapia (1907)

Corpora non agunt nisi fixata
Quimioreceptores para frmacos
Tratamento qumico da sfilis
(Salvarsan-1909) Proc. R. Soc. Lond. 66:424-448, 1900
Magic Bullet (bala mgica):
1 frmaco 1 alvo molecular
 I. CONCEITO DE RECEPTOR
FARMACOLGICO

Definio: Componente biolgico macromolecular

com que interage especificamente um frmaco
para desencadear seu efeito farmacolgico
 II. PROPRIEDADES GERAIS DOS
RECEPTORES

- NATUREZA: protenas (eg Enzimas)

- TIPO DE INTERAO QUMICA ENTRE FRMACO E

RECEPTOR:
 Enzimas como alvos para Frmacos
ENZIMA FRMACO USO CLNICO
ECA Captopril, Enalapril Hipertenso
COX AINES Inflamao
DOPA decarboxilase Carbidopa Parkinson
Dihidrofolate reductase Metotrexato Cncer
DNA topoisomerase Irinotecan, topotecan Cncer
AND polimerase Citarbine Leucemia
HMG-CoA reductase Lovastatina, Pravastatina.. Hipercolesterolemia
-Lactamase c. clavulnico Infeco
HIV transcriptase AZT (Zidovudina) AIDS
reversa
HIV Protease Indinavir, Rotinavir AIDS
Na,K-ATPase Digoxina Insuficincia cardaca
H,K-ATPase Omeprazole, Pantoprazole lcera pptica
PDE 3, 5 Milrinona, sildenafil IC, disfuno ertil
FORAS QUMICAS E RELAO ESTRUTURA-ATIVIDADE

SELASSIE, 2003
FORAS QUMICAS E RELAO ESTRUTURA-ATIVIDADE
 II. PROPRIEDADES GERAIS DOS
RECEPTORES

A. Sensibilidade: afinidade !
B. Especificidade: REA (Estereoseletividade)
C. Saturao competio

D. Especificidade da resposta celular

NB. Frmacos que no atuam atravs de um receptor
B. ESTEROISOMERISMO: isomerismo devido ao arranjo
tridimensional dos tomos.(molculas idnticas na sua composio e
ligao atmica)

- Enantimeros: substncias com um ou mais centros quirais que so

Imagens de espelho e impossveis de serem sobrepostas
- Diaesteroismeros: imagens de espelho
- Ismeros geomtricos (cis / trans)
SITUAES EXEMPLOS
Enantimeros: atividades Dobutamina, varfarina
semelhantes
Um enantimero ativo, Verapamil (R>>S)
O outro inativo Propranolol (S>>R)
Losartan (R)
Ibuprofeno (S>>>R)
Um enantimero ativo, Bupivacaina (R = cardiotxico)
O outro txico Talidomida (S = teratogno)
D. ESPECIFICIDADE DA RESPOSTA CELULAR

ISOPRENALINA

Rec. 2 Rec. 2

HEPATCITO M. LISO BRNQUICO

glicogenlise relaxamento
 III. DESCRIO QUANTITATIVA DO EFEITO
DE UM FRMACO

1. LEI DE AO DAS MASSAS: LANGLEY (1878)

2. TEORIA DA OCUPAO: CLARK (1930)

The mode of action of drugs on cells (Livro)

Modelo: O efeito do frmaco diretamente proporcional

frao de receptores ocupados

R+F RF E

Afinidade Efeito
Binding Farmacologia clssica
FARMACOLOGIA CLSSICA:
Estudos comportamentais
FARMACOLOGIA CLSSICA:
medida in vivo: presso arterial
FARMACOLOGIA CLSSICA:
Medida in vitro: rgo isolado
FARMACOLOGIA CLSSICA moderna:
Medida in vitro: clula / Patch Clamp
 ENSAIO DE BINDING:
ASPECTO PRTICO

*L+ R * LR

*L
* LR
R
FILTRO

* LR *L
 EQUAES E PARMETROS

k+1
R+F RF E
k-1

Afinidade Efeito
Binding Farmacologia clssica

[R]tot . [F] Emax . [F]

[RF] = E=
Kd + [F] CE50 + [F]

Kd = k-1 / k+1
BINDING e representaes grficas
Figure 2-2 Measurement of receptor
binding ( adrenoceptors in cardiac cell
membranes).

The ligand was [3H]-cyanopindolol, a

derivative of pindolol . Measurements of
total and non-specific binding at
equilibrium.

Non-specific binding is measured in the

presence of a saturating concentration of
a non-radioactive -adrenoceptor
agonist, which prevents the radioactive
ligand from binding to -adrenoceptors.

The difference between the two lines

represents specific binding.

Specific binding plotted against

concentration (rectangular hyperbola)
and against log concentration (sigmoid
curve).

Scatchard plot gives a straight line

 REPRESENTAES GRFICAS
Velocidade vs Log
Velocidade vs Concentrao Concentrao
20 20 Vmax
Vmax
V

15 15

KM
V max / 2 10 10

V
5 KM 5 Controle
+ Inibidor
0 0
0 20 40 60 80 100 1 10 100 1000
[S] [S]
Grfico de Lineweaver-Burk
(dos inversos) Grfico de Scatchard
0.4 2
1/V

0.3
-1/KM
V / [S]
1/Vmax
0.2 1

0.1 Vmax
+ Inibidor
Controle
1/Vmax
0
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0 5 10 15 20 25
1 / [S] V
-1/KM
 SCATCHARD

-1/Kd
LIGADO / LIVRE (B/F)

A
B C
Bmax

LIGADO (B)
 BINDING: ENSAIO DE COMPETIO

*L * LR
+ R
C CR
100
*L LIGADO (%)

Cheng-Prusoff
50
CI50 = Ki . (1 + Kd/[*L])

0
CI50 CI50

Log COMPETIDOR (M)

BINDING E SCREENING FARMACOLGICA

Binding de 3H-flunitrazepam: curva de competio

100
Clonazepam
% Midazolam
Diazepam
B
O Bromazepam
U 50 Zolpidem
N
D

0
0.1 1.0 10.0 100. 1000.
nM
 AUTORADIOGRAFIA EM CORTES DE CREBRO DE RATO
Ligante: 3H-Flunitrazepam

LIGAO: TOTAL NS
Corte
Hipocampo Medial 1
Crtex
Medial 2
Hipocampo
Cerebelo Posterior
 IV. ACOPLAMENTO RECEPTOR-EFETOR e
TRANSDUO DO SINAL

- Modelo esttico: Modelo da chave e fechadura

- Modelos dinmicos: modificao conformacional do receptor /

Efetor / segundo mensageiro

- Modelo do ajuste induzido (Koshland)

- Modelo dos dois estados (Changeux;Colquhoun)
 MODELO CHAVE E FECHADURA (FISCHER -1894)

9 Inicialmente desenvolvido para enzimas (substratos)

Cada fechadura tem sua prpria chave
9 Depois aplicado interao frmaco-receptor: o
frmaco a chave que tem que se ajustar,
especificamente e produtivamente, fechadura
 MODELO CHAVE E FECHADURA: limitao

MODELO ESTTICO:

No explique porque certas

chaves no abrem a
fechadura (antagonistas) ou
abrem somente parcialmente
(agonistas parciais)
 CONCEITO DE ATIVIDADE INTRNSECA E ANTAGONISMO

Curvas Cc efeito
para uma serie de
STEPHENSON e ARINS: alquil trimetilammonio
primeiros a descrever a no leo de cobaia
existncia de agonistas Stephenson
parciais (Br. J. Pharmacol. 11:
379-393, 1956)

Arins (1954) : Atividade intrnseca

(efeito mximo do agonista - IUPHAR 1995)
Emax frmaco = 1 agonista total
= -------------------- com = 0 antagonista
Emax agonista total 0 < < 1 agonista parcial

Stephenson (1956) e: Eficcia

E = f (S) com S = e . ocupao fracional
STEPHENSON, R.
Eficcia: caracterstica do frmaco que descreve sua
capacidade de ativar o receptor

Distingue duas propriedades dos frmacos: sua

capacidade de se ligar ao receptor (afinidade) e de
ativar (eficcia) o mesmo uma vez ligado.

Consequncia: Um Emax no corresponde necessariamente a

100% ocupao dos receptores mas pode ocorrer aps
ocupao de uma pequena frao dos mesmos

Receptores de reserva
 RECEPTORES DE RESERVA

Conceito: em alguns tecidos, agonistas com grande eficcia

podem produzir Efeito mximo mesmo que somente uma
pequena frao dos receptores sejam ocupados.

A capacidade de Reserva depende do tecido e do

frmaco

Consequncia: No-linearidade entre ocupao dos receptores

e Efeito

CE50 < Kd
Eficcia intrnseca ( - Furchgott, 1966; Kenakin, 1987)
= estmulo, produzido por um agonista, ao ocupar um
nico receptor

k1
D + R DR E
k2

[R]tot . [D]
E= f

Kd + [D]

Caractersticas do tecido Caractersticas do frmaco

 O que EFICCIA ?

Explicao mecanstica ?.modelos ?

I. ATIVAO GRADUAL (Ajuste induzido - Koshland)

Diferentes agonistas podem induzir diferentes graus de

modificao conformacional
II.A. MODELO DE DOIS ESTADOS, SIMPLES
(modelo original de Del Castilo & Katz, 1957)
 II.B. MODELO DE DOIS ESTADOS, REVERSVEL
(Atual)

Consequncias:
Atividade constitutiva (Costa & Herz, 1989)
Agonistas inversos (Braestrup et al., 1982: DMCM)
AGONISTAS INVERSOS NA
CLNICA

Mol. Pharmacol. 64: 1271, 2003

III. MODELO TERNRIO COMPLEXO
(para receptores acoplados protena G)
(De Lean et al., 1980)

Consequncias: atividade constitutiva e agonistas inversos

 POTNCIAS E EFICCIAS RELATIVAS

Three drugs with presumably different receptor affinities and potencies.

 V. TIPOS DE RECEPTORES: 4 SUPERFAMLIAS
Estrutura molecular e mecanismo de transduo de sinal
4 SUPERFAMLIAS:

Estrutura molecular

Figure 3-3 General structure of four receptor

families. The rectangular segments represent
hydrophobic &alpha;-helical regions of the
protein comprising approximately 20 amino
acids, which form the membrane-spanning
domains of the receptors. Type 1: ligand-gated
ion channels. Many ligand-gated ion channels
comprise four or five subunits of the type
shown, the whole complex containing 16-20
membrane-spanning segments surrounding a
central ion channel. Other structural types are
shown in Fig. 3.16.Type 2: G-protein-coupled
receptors. Type 3: kinase-linked receptors.
Most growth factor receptors incorporate the
ligand-binding and enzymatic (kinase) domains
in the same molecule, as shown, whereas
cytokine receptors lack an intracellular kinase
domain but link to cytosolic kinase molecules.
Other structural variants also exist.Type 4:
nuclear receptors that control gene
transcription.
O COMPLEXO RECEPTOR GABAA
O COMPLEXO RECEPTOR GABAA

Cl-
Figure 3-9 Bidirectional control of a target enzyme, such as adenylated cyclase by Gs and Gi.
Heterogeneity of G-proteins allows different receptors to exert opposite effects on a target enzyme.
We present the crystal structure of the
active state ternary complex composed
of agonist-occupied monomeric 2AR
and nucleotide-free Gs heterotrimer

Rasmussen e cols., Nature 2011

Figure 3-8 The function of the G-protein.
The G-protein consists of three subunits which are anchored to the membrane through attached
lipid residues. Coupling of the -subunit to an agonist-occupied receptor causes the bound GDP to
exchange with intracellular GTP; the -GTP complex then dissociates from the receptor and from
the -complex, and interacts with a target protein. The -complex may also activate a target
protein. The GTPase activity of the -subunit is increased when the target protein is bound, leading
to hydrolysis of the bound GTP to GDP, where - upon the subunit reunites with .
Figure 3-13 G-protein and second messenger control of cellular effector systems. AA, arachidonic
acid; DAG, diacylglycerol; IP3, inositol trisphosphate.
Regulao de clcio intracelular
 V. TIPOS DE RECEPTORES: 4 SUPERFAMLIAS
Estrutura molecular e mecanismo de transduo de sinal
4 SUPERFAMLIAS:

Estrutura molecular

Figure 3-3 General structure of four receptor

families. The rectangular segments represent
hydrophobic &alpha;-helical regions of the
protein comprising approximately 20 amino
acids, which form the membrane-spanning
domains of the receptors. Type 1: ligand-gated
ion channels. Many ligand-gated ion channels
comprise four or five subunits of the type
shown, the whole complex containing 16-20
membrane-spanning segments surrounding a
central ion channel. Other structural types are
shown in Fig. 3.16.Type 2: G-protein-coupled
receptors. Type 3: kinase-linked receptors.
Most growth factor receptors incorporate the
ligand-binding and enzymatic (kinase) domains
in the same molecule, as shown, whereas
cytokine receptors lack an intracellular kinase
domain but link to cytosolic kinase molecules.
Other structural variants also exist.Type 4:
nuclear receptors that control gene
transcription.
Figure 3-15 Transduction mechanisms
of kinase-linked receptors. The first
step following agonist binding is
dimerisation, which leads to
autophosphorylation of the intracellular
domain of each receptor. SH2 domain
proteins then bind to the
phosphorylated receptor and are
themselves phosphorylated. Two well-
characterised pathways are shown:
The growth factor (Ras/Raf/mitogen-
activated protein [MAP] kinase)
pathway (see also Ch. 5); the cytokine
(Jak/Stat) pathway (see also Ch. 13).
Several other pathways exist, and
these phosphorylation cascades
interact with components of G-protein
systems.
VI. TIPOS DE ANTAGONISMO

CONCEITO: O efeito de um frmaco diminuido ou abolido pela presena

de um outro.

CLASSIFICAO: Gaddum (1955): antagonismo supervel e no

supervel.

I. Antagonismo supervel: A inibio exercida pelo antagonista

vencida quando se aumenta suficientemente a concentrao do
agonista.

Representao grfica: CE50 : e Emax: :

Mecanismo molecular:

I.1. Antagonismo competitivo reversvel:

I.2. Antagonismo alostrico:
 Antagonismo competitivo reversvel:
grfico de Schild e PA2

10-8M 10-7M 10-6M

Figure 2-8 Competitive antagonism of isoprenaline by propranolol measured on isolated guinea pig
atria.
A. Concentration-effect curves at various propranolol concentrations. Note the progressive shift
to the right without a change of slope or maximum.
B. Schild plot. The equilibrium constant (KB) for propranolol is given by the abscissal intercept
 Antagonismo alostrico
Ex : GABAA: agonista Inverso BZP e GABA

Agonista Cl-

+
- II. Antagonismo no supervel: A inibio exercida pelo antagonista
no vencida mesmo quando se aumenta suficientemente a
concentrao do agonista.

Representao grfica: CE50 : (ou ) e Emax: :

Mecanismo molecular:
- II.1. Antagonismo competitivo irreversvel

II.2. Antagonismo no competitivo (bloqueio da cadeia de

eventos entre ocupao dos receptores e produo do
efeito)
- NB: Antagonismo qumico; Antagonismo fisiolgico
Figure 2-9 Hypothetical
agonist concentration-
occupancy curves in the
presence of reversible and
irreversible competitive
antagonists.

The concentrations are

normalised with respect to the
equilibrium constants, K, (i.e.
1.0 corresponds to a
concentration equal to K and
results in 50% occupancy).
 Antagonismo no competitivo
Ex : rec. NMDA: bloqueador de canal

Poliaminas K+ Zn+2

Glutamato
Glicina

Stio do Mg+2
Na+
Stio do MK-801
Ca+2
VII. IN VIVO: RELAO ENTRE DOSE DO FRMACO E
RESPOSTA DO PACIENTE

Curva Dose-Resposta gradual

Potncia ( CE50 )
Eficcia ( Emax:)

Curva Dose-Resposta quantal

J. AVALIAO DA SEGURANA DE UM FRMACO

- Medida da toxicidade: DL50

- ndice teraputico:

DL50 / DE50

Limitaes: Avalia exclusivamente a letalidade

Teste de toxicidade animal e no humana
No avalia o risco de reaes txicas idiosincrticas

- Margem de segurana (MS) = DL1 / DE99

- Faixa / Janela teraputica
(avalia mais adequadamente
a segurana no uso clnico)

Faixa teraputica = CTmin / CEmin

Quando devemos considerar que um ndice teraputico baixo (estreita

faixa teraputica) ?

1. existe uma diferena menor que duas vezes entre os valores de dose letal
mediana (DL50) e dose efetiva mediana (DE50), ou existe uma diferena menor
que 2 vezes entre as concentraes txicas mnimas e as concentraes
efetivas mnimas no sangue
e 2: o uso seguro e efetivo desses medicamentos requer monitorizao do
paciente.
Cdigo de regulamentos federais nos Estado Unidos (21 CFR 320.33(C), 1997
FRMACOS COM BAIXO NDICE TERAPUTICO

Frmaco Conc. efetiva Conc. txica ndice

Teraputico
cido valprico 30-100 ug/ml >150 ug/ml 5
Carbamazepina 6,5 ug/ml 9 ug/ml 1,4
Ciclosporina 100-400 ng/ml >400 ng/ml 4
Clindamicina
Digoxina >0,8 ng/ml >2 ng/ml 2,5
Fenitona >10 ug/ml >20 ug/ml 2
Fenobarbital 10-25 ug/ml >30 ug/ml 3
Ltio 0,5-1,25 meq/l >2 meq/l 4
Primidona 8-12 ug/ml >12 ug/ml >1
Quinidina 2-6 ug/ml >8 ug/ml 2
Teofilina 10-20 ug/ml >20 ug/ml 2
Warfarina 2,2 ug/ml
 VIII. TERMINOLOGIA
- Additividade: EAB = EA + EB
- Antagonismo: EAB < EA + EB (=0)
- Sinergismo: EAB > EA + EB
- Potencializao: EAB > EA + EB (=0)

O QUE UM EFEITO ADITIVO ? (ADDITIVIDADE)

Um efeito aditivo NO a simples soma aritmtica do efeito de
dois frmacos. Assim, se A e B inibem cada um 30%, o
efeito aditivo no 60%. De fato, se A e B inibem cada
um 60%, o efeito aditivo no pode ser 120%

Aditividade de doses: o efeito da combinao o efeito previsto

baseado nas potncias (e doses) dos dois frmacos: considera-
se que existe aditividade quando um frmaco (o menos potente)
atua como se fosse uma simples forma diluda do outro.
.UMA EXPLICAO TERICA

Pharmacol. Rev. 58: 621, 2006

 E UM EXEMPLO PRTICO
..baseada em falta de desenho experimental apropriado

Isto sinergismo ?
No
!! nH > 1

2 4

FEMS Microb. Lett. 253:171-184, 2005

 SINERGISMO: CAUSAS ?

Farmacocintica
- Inibio enzimtica.
Ex: ritonavir e saquinavir (CYP3A4)

Farmacodinmica
- efeito final resultante da ao de dois frmacos
em alvos moleculares distintos.

Ex: Antinocicepo: fentolamina + paracetamol

Infeces:
AIDS: combinao em dose fixa de lamivudina,
zidovudina e nevirapina
- Hiperreatividade: Hipersensibilidade / Supersensibilidade
- Hiporeatividade: O efeito do frmaco diminue quando
administrada de maneira contnua ou repetitiva.
- Tolerncia: Diminuio gradual da resposta (dias, semanas)
- Taquifilaxia: Diminuio rpida da resposta (minutos)

FENMENO GERAL de tolerncia:

Deslocamento da curva dose-efeito para direita
Pode no ocorrer com a mesma intensidade para todos os
efeitos do frmaco
Ex. BZP: efeito sedativo ansioltico

MECANISMOS:
- PK: auto-induo enzimtica
- PD: nmero receptores (desensibilizao)
- PD: Modificao do receptor/fosforilao (desensibilizao)
- PD: Exausto de mediadores (taquifilaxia)
- PD: adaptao fisiolgica (Ex. tolerncia comportamental
- psicofrmacos) Graeff & Guimares, 2000
DESENSIBILIZAO
Figure 3-14 Desensitisation of G-protein-
coupled receptors (GPCRs).
Homologous (agonist-specific)
desensitisation involves phosphorylation of
the activated receptor by a specific kinase
(GPCR kinase, GRK). The phosphorylated
receptor (P-R) then binds to arrestin,
causing it to lose its ability to associate with
a G-protein, and to undergo endocytosis,
which removes the receptor from the
membrane. Heterologous (cross-
)desensitisation occurs as a result of
phosphorylation of one type of receptor as a
result of activation of kinases by
another.PKA and PKC, protein kinase A and
C, respectively.
 PSICOFARMACOLOGIA: CURVAS DOSE-
RESPOSTA EM FORMA DE U INVERTIDO
(em sino / Bell-shaped, U-shaped, inverted U-shaped)

Causas:
Alterao de
comportamentos adaptativos
Perda de seletividade de
efeitos com dose elevada
Auto-inibio (< Cc)
Desensibilizao (< Cc e
Tempo)
Short circuit current (SCC) induzido
por Ach em epitlio de traqueias de
galinha Bindslev, 2008