MTODOS

DE
CALIBRACIN
 Calibracin

Conjunto de operaciones para establecer, bajo

ciertas condiciones especficas, la relacin entre las
seales producidas por un instrumento analtico y
los correspondientes valores de concentracin o
masa de los patrones de calibrado.

Los patrones de calibrado son cantidades de analito conocidas,

cuya respuesta al instrumento se utiliza para comparar con la
respuesta de la muestra.
 Curva de Calibracin

Grfico que representa la respuesta de un

mtodo analtico en funcin de la concentracin
o masa de los patrones.
Respuesta

Respuesta lineal

Intervalo lineal
CC
 Sensibilidad
Capacidad de un mtodo para detectar un cambio en la
concentracin del analito.

SENSIBILIDAD DE CALIBRACIN: Es la pendiente de la curva de calibracin.

dR A mayor pendiente mayor sensibilidad.

m Depende de los factores instrumentales .
dC

SENSIBILIDAD ANALTICA: Es el cociente entre la pendiente de la curva de

calibracin y la desviacin estndar de la seal.

m dR dC 1 Desventaja: debe ser evaluada en

j cada concentracin de inters ya que
SR SR SC
SR vara con C.
 Lmite de Deteccin
Es un nmero con unidades de concentracin o de masa que
simboliza el ms bajo nivel de concentracin o de masa que el
procedimiento puede detectar como distinto del blanco.

Se define como la concentracin de analito a la

cual su seal es igual a la seal del blanco ms
tres veces la desviacin estndar del blanco.
Respuesta

y mC yB yLDD yB 3SB
yB+3SB

CLDD 3S B
yB m
CLDD CC
 Lmite de Cuantificacin
Se define de manera anloga al LDD pero es la
concentracin de analito a partir de la cual se pueden
realizar determinaciones cuantitativas con el
procedimiento analizado.
yLDD yB 10SB

Observacin:
Nunca se puede afirmar que un analito no est presente en la muestra.
Se puede decir que no es detectado o que su concentracin est por
debajo del LDD.
 Intervalo de utilidad de la
Curva de Calibracin
[CLDC,CLDL]
Concentracin del Lmite de Cuantificacin y
Concentracin del Lmite de Linealidad
Respuesta

CLDC CLDL CC
 Mtodo de Calibracin Directa
(Estndar externo)
Se realiza una curva de calibracin y se emplea el mtodo de
regresin lineal por cuadrados mnimos
Suposiciones: Relacin lineal entre seal y concentracin
La incertidumbre en la concentracin de los patrones es
desestimable
Todas las mediciones tienen la misma desviacin estndar
(sin importar el valor)

Condicin: la matriz de los patrones debe ser parecida a la de la muestra.

Efecto Matriz: juega un rol muy importante, es el cambio que experimenta
una seal analtica debido a la presencia de otras sustancias presentes en la
muestra, adems del analito. Es un efecto multiplicativo ya que altera la
pendiente de la recta.
 Mtodo de Patrn Interno
(Estndar Interno)
Cantidad conocida de un compuesto diferente del analito,
ausente en la muestra y que se aade a sta.
Para hacer las determinaciones se compara la seal del
analito con la seal del patrn interno

UTILIDAD, cuando:
La cantidad de muestra analizada vara
La respuesta del instrumento vara
Hay prdidas inevitables de muestra
 Mtodo de Patrn Interno
(Estndar Interno)
Se mide la respuesta relativa del detector a una muestra de
cantidad conocida de patrn y analito
Se grafica la relacin entre
Aa/
la respuesta del analito y el AEI

estndar interno vs. la

relacin de las
concentraciones.
Ca/CEI

Para ser estandar interno, no debe interferir con el analito, no

debe estar previamente en la muestra, debe responder en
forma similar al analito ante la modificacin de cualquier
variable y debe tener concentraciones similares al analito
 Mtodo de Agregado de Patrn o
Adicin de Estndar
Consiste en aadir cantidades conocidas de analito al problema
cuyo contenido de analito se quiere saber. Se agregan volmenes
crecientes y se diluye todo a un mismo volumen final.
Se utiliza cuando la composicin de la muestra es desconocida
y/o compleja. Toma en cuenta el efecto matriz.

Suposiciones: El agregado de la solucin patrn no modifica el efecto de

la matriz, este efecto es el mismo en la solucin original y en
la diluida.
La respuesta del detector es lineal.
Todas las mediciones tienen la misma desviacin estndar
(sin importar el valor)
 Mtodo de Agregado de Patrn o
Adicin de Estndar
Volumen de Volumen de
la muestra la solucin
original patrn

VM VP
Seal k C
AV C P

Volumen

VT
Total
T Muestra +
Patrn

Concentracin
del analito en Concentracin
la muestra del analito

Respuesta
patrn
agregado a la
muestra
Seal de la
muestra

Se extrapola la recta hasta

seal cero y se reemplaza en
la ecuacin. V
C A M


CC
Patrn VP
CP
VT VT
Control de calidad Grfico control
Es un grfico en el que se presentan consecutivamente los
valores de las medias muestrales para un determinado
mtodo o proceso de manera de tomar una accin correctiva
lo mas rpido posible.

Grfico de Shewhart

Requiere una distribucin

normal de los resultados y una
desviacin estndar constante

Se estiman la media
poblacional () y la
desviacin estndar () de
los datos muestrales
 110 %

LSA

80 %
LS

LII
M

LI
Mtodo de Recuperacin o Fortificacin
Se agrega una cantidad determinada de patrn del mismo
analito a medir en al menos una de las muestras a
Aseguramiento de la Calidad

determinar. Luego se calcula el porcentaje de

Fecha
X 100

25/02/2014
24/02/2014
03/02/2014
24/01/2014
14/01/2014
03/01/2014
20/12/2013
M
Valor Fortificado medido

16/12/2013
13/12/2013
12/12/2013
13/11/2013
06/11/2013
Valor Fortificado real

29/10/2013
recuperacin como:

02/09/2013
27/08/2013
02/08/2013
02/08/2013
02/08/2013
95

85

75
115

105

90

80
110

100

Valor medio

Fecha
25/02/2014
03/02/2014
24/01/2014
14/01/2014

LSA
20/12/2013

LS

LII
M

LI
16/12/2013
% Recuperacin=
13/12/2013
12/12/2013
13/11/2013
06/11/2013
29/10/2013
02/09/2013
27/08/2013
02/08/2013
02/08/2013
02/08/2013

0.2000

0.0000
Rango

Fecha
25/02/2014
03/02/2014
24/01/2014
14/01/2014
20/12/2013
16/12/2013
13/12/2013
12/12/2013
13/11/2013
06/11/2013
29/10/2013
02/09/2013
27/08/2013
02/08/2013
02/08/2013
02/08/2013

2.70

2.50

2.30

2.10

1.90

1.70

1.50
Valor medio
AOAC: Association of Official Analytical Chemists