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ISSN 0719-4250
http://jppres.com/jppres
Abstract Resumen
Context: The bioburden present on the pharmaceutical microbiology Contexto: La presencia de carga microbiana en las superficies de un
laboratorys surfaces, may increase the risk of cross-contamination when laboratorio de microbiologa farmacutica, puede aumentar el riesgo de
analytical tests are being carried out; periodic monitoring allows to set contaminacin cruzada durante el desarrollo de las pruebas analticas;
limits that reduce the risk. realizar monitoreos peridicos permite establecer lmites que disminuyan
Aims: To determinate the limits of bioburden present on seven surfaces of dicho riesgo.
the pharmaceutical microbiology laboratory, after the cleaning and Objetivos: Determinar los lmites de la contaminacin microbiana
disinfection process. presente en siete superficies del laboratorio de microbiologa de
Methods: The swabbing method was used for sampling. With a 25 cm2 medicamentos, despus de llevar a cabo el proceso de limpieza y
stencil and a sterile swab, a sample was taken, passing the swab over five desinfeccin.
points of every surface chosen. A total aerobic microbial count and a total Mtodos: Se emple el mtodo de hisopado para la toma de las muestras.
yeast and mold count was done. Finally, the average and the standard Con la ayuda de un hisopo estril y una plantilla de 25 cm2, se tomaron
deviation of the counts was obtained. muestras en cinco puntos de cada superficie. Se realiz el recuento de
Results: The average from the counts obtained on each surface selected microorganismos mesfilos aerobios, mohos y levaduras. Por ltimo, se
for the study, were below the recommended limits by international obtuvo el promedio y desviacin estndar de los recuentos.
entities like the World Health Organization and the European Union, Resultados: El promedio de los recuentos obtenidos en todas las
between others; also, the results generated in this study, allow to classify superficies objeto de estudio, se encontraron por debajo de los lmites
the biosafety cabinet as an ISO 5 area and the other areas as ISO 7. recomendados por entes internacionales como la Organizacin Mundial
Conclusions: Bioburden levels on the tested surfaces are considered low, de la Salud y la Unin Europea, entre otras; as mismo, los resultados
reducing the risk of cross-contamination, which could have a negative generados, permiten clasificar la cabina de bioseguridad como un rea
impact on laboratorys activities. Also, it follows that disinfectant ISO 5 y las dems reas como ISO 7.
concentration used, is effectively. Conclusiones: Se considera que los niveles de contaminacin microbiana
presente en las superficies evaluadas son bajos, disminuyendo el riesgo de
contaminacin cruzada que afecte las actividades propias del rea; as
mismo, se infiere que la concentracin del desinfectante usado es efectiva.
Keywords: Controlled environment: cross-contamination; disinfection; Palabras Clave: Ambiente controlado; contaminacin cruzada;
surfaces sampling. desinfeccin; muestreo de superficies.
ARTICLE INFO
Received | Recibido: February 13, 2016.
Received in revised form | Recibido en forma corregida: April 17, 2016.
Accepted | Aceptado: April 18, 2016.
Available Online | Publicado en Lnea: May 3, 2016.
Declaration of interests | Declaracin de Intereses: The authors declare no conflict of interest.
Funding | Financiacin: This work was financially supported by the Secretara Distrital de Salud de Bogot (Colombia).
Academic Editor | Editor Acadmico: Gabino Garrido.
Abbreviations | Abreviaturas: AEMPS: Agencia Espaola de Medicamentos y Productos Sanitarios; PIC/S: Pharmaceutical Inspection Co-
operation Scheme; SDA: Agar Saboreaud Dextrosa; TSA: Agar Tripticasa Soya; UE: Unin Europea; UFC: Unidades Formadoras de
Colonia; USP: Farmacopea de los Estados Unidos de Amrica
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Charry y Gmez Lmites de biocontaminacin en superficies
que si stos se dividieran para obtener la concentra- liz hipoclorito de sodio para la desinfeccin de las
cin de microorganismos en un rea de 25 cm2, el superficies. Un ejemplo de ello es la investigacin
promedio de los recuentos en todas las superficies realizada por Corpas (2012), quien estableci interva-
estaran por debajo de 1 UFC, lo cual impedira rea- los de tolerancia de contaminacin en un laborato-
lizar el anlisis de los datos y la clasificacin de las rio de microbiologa de alimentos, obteniendo
reas. Lo anterior, se ve soportado por los resulta- promedios de 0,9 UFC de microorganismos mesfi-
dos obtenidos en la investigacin realizada por Salo los aerobios en todas las superficies y promedios de
et al. (2000), donde se compararon tres mtodos pa- mohos que fluctuaban entre 0,7 y 1 UFC, luego de
ra la toma de muestras en superficies de doce labo- realizar la desinfeccin con hipoclorito de sodio al
ratorios, entre ellos el mtodo por contacto en placa 2%. Por otra parte, los resultados obtenidos por Ca-
y el de hisopado (con un rea de muestreo de 100 llejas e Izquierdo (2009), tambin revelaron recuen-
cm2), encontrando que la diferencia entre los mto- tos microbianos bajos, en los mesones y pisos de
dos no fue estadsticamente significativa en cuanto cuatro laboratorios de la Pontificia Universidad Ja-
a la precisin y porcentaje de recuperacin micro- veriana de Bogot (Colombia), luego de la desinfec-
biana, cuando se eliminaron datos atpicos. As cin con hipoclorito de sodio a concentraciones en-
mismo, en la investigacin realizada por Hedin et tre 0,122 y 100 ppm. Los recuentos de microorga-
al. (2010) donde se compar el mtodo de contacto nismos tanto mesfilos aerobios como de mohos y
en placa y el mtodo de hisopado en dos modalida- levaduras, se encontraron entre 1 y 5 UFC. Aunque
des, uno sembrando el hisopo directamente sobre los resultados obtenidos en el presente trabajo y en
diferentes agares y otro llevando el hisopo a caldo los mencionados previamente, muestran que el de-
para luego sembrar en agar (como se hizo durante sinfectante usado cumple con su objetivo respecto a
este estudio), se obtuvo como conclusin que no mantener bajas concentraciones de agentes micro-
hubo diferencias significativas entre los mtodos bianos en las superficies, es importante establecer la
evaluados. periodicidad de la rotacin de los desinfectantes y
El promedio bajo de los recuentos microbianos considerar otros principios activos con amplio es-
despus de realizar la limpieza y desinfeccin, con- pectro de accin y de bajo riesgo para el personal
cordaron con otros estudios donde tambin se uti- que lo manipula y/o est expuesto (USP, 2015).
Los lmites de la contaminacin microbiana, ex- perficie durante el anlisis de las muestras, ya que
presados en la Tabla 3, fueron determinados a partir el material que se ingresa al equipo puede contener
de los recuentos despus de la limpieza y desinfec- partculas de polvo, adems, el alcohol deja de ser
cin, debido a que las pruebas analticas se realiza- efectivo cuando se evapora (Hedin et al., 2010). Una vez
ron luego de llevar a cabo dicha actividad. Para las se efectuaron estos cambios, se obtuvieron buenos
superficies del rea de siembras se sumaron dos resultados, pero no se tuvieron datos suficientes
desviaciones estndar (DS) ya que por su cercana al para establecer, desde el punto de vista estadstico,
lugar de anlisis de las muestras, el control de la que las medidas fueron efectivas para el control de
biocontaminacin debe ser ms estricto, mientras la contaminacin.
que para las superficies del rea de aprestamiento y Teniendo en cuenta que la clasificacin de las
lavado, se sumaron tres DS, teniendo en cuenta que reas no se puede basar nicamente en la carga mi-
son reas que no tienen contacto con la muestra crobiana presente en las superficies, se considera
abierta y no estn cerca de ella durante el anlisis. necesario determinar tambin, la concentracin de
En el caso de la cabina de bioseguridad, no se aplic la biocontaminacin y material particulado presen-
la regla prctica del intervalo (no se sum la DS), tes en el aire de cada una de las reas que confor-
debido a que el riesgo de contaminacin es alto man el laboratorio de microbiologa de medicamen-
cuando la muestra se manipula abierta dentro del tos, para caracterizar de forma ms completa la ca-
equipo, por lo tanto, esta superficie debe cumplir lidad ambiental; acompaando stas determinacio-
los parmetros establecidos para un rea altamente nes, con el seguimiento y control del porcentaje de
asptica como la Grado A (ISO 4.8), segn lo descri- humedad relativa y temperatura ambiental ya que
to en la Tabla 2. dichos parmetros influyen directamente en el cre-
En la cabina de bioseguridad, antes y despus de cimiento microbiano (USP, 2015).
la desinfeccin, se obtuvieron recuentos promedio Aunque los valores obtenidos a partir de los mo-
inferiores a 1 UFC (Tabla 1), lo cual demostr que la nitoreos son tiles para conocer las variaciones de
carga microbiana en la superficie de trabajo de este la recuperacin microbiana en un rea especfica y
equipo fue baja (en el 47,7% y el 81,8% de los mues- bajo circunstancias previamente estandarizadas, no
treos despus de la desinfeccin, no hubo creci- es adecuado inferir que el lograr los niveles estable-
miento para el caso de los microorganismos mesfi- cidos como de control garantizan la ausencia total
los aerobios y mohos y levaduras respectivamente), de riesgo para la muestra a analizar; pero stos,
pero debido a que en algunos casos se observ cre- permiten evaluar si el rea se comporta de manera
cimiento luego de aplicar el desinfectante, se esta- tpica o se estn presentando variaciones que re-
bleci como medida correctiva la necesidad de presentan el riesgo de la prdida de control y es ne-
agregar al alcohol etlico al 70%, un desinfectante cesario tomar medidas al respecto, ya que es all
cuyo principio activo fue el amonio cuaternario donde el monitoreo adquiere valor, permitiendo
(Timsen), adems, se estableci que era adecuado identificar y corregir una prctica de trabajo inacep-
aumentar la frecuencia de la desinfeccin de la su- table (USP, 2015); por tal razn, dentro de la imple-
mentacin de los parmetros del monitoreo am- rio de Microbiologa de Medicamentos, el lmite de
biental, tambin se recomienda establecer lmites accin en la cabina de bioseguridad se estableci
de accin, los cuales sirven de gua a los profesiona- como un recuento > 3 UFC, segn lo sugerido en el
les encargados, ya que les permite contar con valo- captulo 797 de la USP, y para las dems superficies,
res puntuales para identificar cundo se podran los recuentos superiores a los descritos en la Tabla
estar presentando dichas situaciones atpicas y as 2.
mismo actuar al respecto. Para el caso del Laborato-
Tabla 3. Lmites de recuento establecidos para el laboratorio de Microbiologa de Medicamentos y su clasificacin, segn
los parmetros establecidos por algunas organizaciones internacionales reconocidas.
Finalmente, se plantea considerar para un cumplen con las recomendaciones establecidas por
prximo trabajo de investigacin, la descripcin de organizaciones internacionales reconocidas en el
la flora microbiana presente en las superficies luego mbito de la salud y la fabricacin de productos
de la limpieza y desinfeccin, ya que, si bien, hasta farmacuticos seguros. Estos lmites permiten dis-
el momento no se han registrado casos de contami- minuir el riesgo de que ocurra contaminacin cru-
nacin cruzada en muestras, material, reactivos y/o zada durante el desarrollo de las pruebas analticas,
medios de cultivo por la presencia de un agente mi- aumentando la confiablidad de los resultados emi-
crobiano ambiental, es necesario identificar los mi- tidos. Tambin fue posible establecer lmites de ac-
croorganismos ambientales predominantes en el cin, los cuales se basaron en las recomendaciones
rea, su interaccin con el desinfectante y los ries- de las organizaciones previamente mencionadas en
gos que conllevan su presencia y concentracin pa- ste documento.
ra los procesos realizados en el laboratorio. As Se clasificaron las reas que componen el Labo-
mismo, se sugiere incluir en el monitoreo de las ratorio de Microbiologa de Medicamentos, de ma-
reas, la determinacin de la concentracin del ma- nera que la cabina de bioseguridad se clasific co-
terial particulado no viable y el seguimiento de mo un rea ISO 4.8/Grado A y el resto de las reas
parmetros como la humedad relativa y la tempera- fueron clasificadas como ISO 7/Grado C.
tura. Es necesario continuar realizando el monitoreo
de superficies y revisar el cambio de los lmites, a
CONCLUSIONES medida que se obtienen ms datos a travs del
tiempo y se observan variaciones en las respectivas
Los recuentos microbianos en cada una de las
desviaciones estndar.
siete superficies evaluadas, antes y despus de reali-
zar el proceso de limpieza y desinfeccin, permitie-
CONFLICTO DE INTERS
ron establecer lmites de contaminacin microbiana
para el laboratorio de microbiologa de medicamen- Los autores declaran no poseer conflicto de inters.
tos de la Secretara de Salud de Bogot, los cuales