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COSAFA DPTO. CIENCIAS PROF.

SOLANGE PAIRO COLLAO

RECOMENDACIONES QUE DEBEN OBSERVARSE PARA EL BUEN USO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO:

1. El microscopio es un instrumento costoso y de precisin, con muchas partes delicadas, por lo tanto, debemos
darle el mejor cuido posible.
2. Si su Microscopio presenta algn defecto, consulte con su profesor. No trate de arreglarlo Usted.
3. Las lentes del microscopio cuestan casi tanto como todas las dems partes juntas. Mantenga las lentes
limpias. No toque las lentes con los dedos, ya que el sudor las daa. Nunca limpie las lentes con otra cosa que
no sea papel especial para lentes.
4. No permita que lquidos, especialmente cidos o alcoholes, se pongan en contacto con su microscopio.
5. Use siempre cubre-objetos cuando observe en agua u otros lquidos
6. Localice siempre el objeto con el objetivo de menor aumento
7. Cuando no se est usando el microscopio, debe mantenerse siempre cubierto con una funda.
8. Al finalizar sus actividades de laboratorio, tenga en cuenta lo siguiente:
- Antes de apagar la fuente de luz, llevar el dispositivo que regula la intensidad luminosa hasta O (cero).
- Dejar el microscopio con el objetivo de menor aumento en la posicin de enfoque y la platina en su mxima
posicin superior.
- Desenchufar el microscopio y colocarle la funda protectora.

MANEJO DEL MICROSCOPIO:

Conectar el enchufe a la red elctrica.


Girar el conmutador o interruptor de la lmpara hasta lograr la iluminacin ptima.
Colocar el objetivo de menor aumento en el eje ptico del microscopio. Se detecta por un sonido clic del
revlver.
Subir la platina y subplatina al tope mximo superior.
Abrir completamente el diafragma.
Regular la separacin de las lentes oculares de acuerdo a la separacin de sus ojos.
Observar por los oculares y ajustar la separacin de ellos hasta que el campo de iluminacin observado, sea
uno solo homogneo y circular.
Limpiar muy bien la preparacin entregada, preferentemente la zona donde se halla la muestra.
Colocar el preparado en la platina con el cubreobjeto hacia arriba.
Observar por los oculares y usando el tornillo macromtrico proceda a bajar lentamente la platina hasta
obtener una imagen, aproximadamente, ntida y enseguida muy ntida accionando el tornillo micromtrico. Si
no la obtiene, nuevamente desplace la platina al tope mximo superior y repita el paso anterior.
Sin desplazar ni accionar el tornillo macromtrico y micromtrico girar el revlver y reemplazar el objetivo
menor por el objetivo 10x (posicin clic).
Recorra su muestra e identifique las estructuras que desea observar con mayor claridad, una vez
encontradas, pase a un aumento mayor girando el revlver.
Mirar por los oculares y verificar que la imagen es borrosa, luego precise la nitidez de ella accionando el
tornillo micromtrico. Si no lo consigue regrese al objetivo 4x, suba la platina al tope mximo y comience de
nuevo.
Posicin cero: Compruebe que el objetivo menor est en posicin de enfoque, que la platina y la subplatina
se hayan en tope superior y que el carro est centrado.
Por ltimo, cubra el microscopio con la funda de proteccin.

EL MICROSCOPIO

El microscopio (del prefijo micro- y el sufijo -scopio, y estos del prefijo griego - micro-, muy
pequeo, y la raz griega - scop-, ver) es un instrumento que permite observar objetos que son
demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El tipo ms comn y el primero que se invent es el
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microscopio ptico. Se trata de un instrumento ptico que contiene dos o ms lentes que permiten obtener una
imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccin. La ciencia que investiga los objetos pequeos
utilizando este instrumento se llama microscopa.

El microscopio fue inventado por Zacharias Janssen en 1590. En 1665 aparece en la obra de W illiam
Harvey sobre la circulacin sangunea al mirar al microscopio los capilares sanguneos y Robert
Hooke publica su obra Micrographia.

En 1665 Robert Hooke observ con un microscopio un delgado corte de corcho y not que el
material era poroso, en su conjunto, formaban cavidades poco profundas a modo de celditas a las que
llam clulas.
A mediados del siglo XVII un holands, Anton van Leeuwenhoek, utilizando microscopios simples de
fabricacin propia, describi por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glbulos rojos.
El microscopista Leeuwenhoek, sin ninguna preparacin cientfica, puede considerarse el fundador de la
bacteriologa.

1608 Zacharias Jansen construye un microscopio con dos lentes convergentes.


1611 Johannes Kepler sugiere la manera de fabricar un microscopio compuesto.
1665 Robert Hooke utiliza un microscopio compuesto para estudiar cortes de corcho y describe los
pequeos poros en forma de celdas a los que l llam "clulas". Publica su libro Micrographia.
1674 Leeuwenhoek informa su descubrimiento de protozoarios. Observar bacterias por primera vez 9
aos despus.
1828 W. Nicol desarrolla la microscopa con luz polarizada.
1838 Schleiden y Schwann proponen la teora de la clula y declaran que la clula nucleada es la unidad
estructural y funcional en plantas y animales.

EL MICROSCOPIO PTICO: Es un microscopio basado en lentes pticos. Tambin se le conoce como


microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de campo claro.

El desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Los
microscopios de Leeuwenhoek constaban de una nica lente pequea y convexa, montada sobre una
plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se iba a examinar (la muestra o espcimen). Este uso
de una nica lente convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros
aparatos pticos.
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PARTES DE MICROSCOPIO PTICO Y SUS FUNCIONES

1 * Ocular: Lente situado cerca del ojo del observador. Capta y ampla la imagen formada en los
objetivos.

2 * Objetivo: Lente situado en el revlver. Ampla la imagen, es un elemento vital que permite ver a travs
de los oculares.

3 * Condensador: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin.

4 * Diafragma: Regula la cantidad de luz que llega al condensador.

5 * Foco: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

6 * Tubo: Es la cmara oscura que porta el ocular y los objetivos. Puede estar unida al brazo mediante una
cremallera para permitir el enfoque.

7 * Revlver: Es el sistema que porta los objetivos de diferentes aumentos, y que rota para poder utilizar
uno u otro, alinendolos con el ocular.

8 * Tornillos macro y micromtrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina o el tubo hacia
arriba y hacia abajo. El macromtrico permite desplazamientos amplios para un enfoque inicial y el
micromtrico desplazamientos muy cortos, para el enfoque ms preciso. Pueden llevar incorporado un mando
de bloqueo que fija la platina o el tubo a una determinada altura.
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9 *Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparacin, que
permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminacin situada por debajo. Dos pinzas
sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera que permite mover la
preparacin. Puede estar fija o unida al brazo por una cremallera para permitir el enfoque.

10 *Brazo: Es la estructura que sujeta el tubo, la platina y los tornillos de enfoque asociados al tubo o a la
platina. La unin con la base puede ser articulada o fija.

11 * Base o pie: Es la parte inferior del microscopio que permite que ste se mantenga de pie.
EL MICROSCOPIO COMPUESTO:

Tiene ms de una lente objetiva. Los microscopios compuestos se utilizan especialmente para examinar
objetos transparentes, o cortados en lminas tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o
ampliar las imgenes de objetos y organismos no visibles a simple vista.

El microscopio ptico comn est conformado por tres sistemas:

El sistema mecnico est constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y detener los
instrumentos a observar.
El sistema de iluminacin comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de tal manera que
producen las ranuras de luz.
El sistema ptico comprende las partes del microscopio que permiten un aumento de los objetos
que se pretenden observar mediante filtros llamados "de antigel subsecuente".

SISTEMA O PARTES MECNICAS DEL MICROSCOPIO

La parte mecnica del microscopio comprende el pie, el tubo, el revlver, el asa, la platina, el carro y el
tornillo micromtrico. Estos elementos sostienen la parte ptica y de iluminacin; adems, permiten
los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.

El pie y soporte: Contiene la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de
Y o bien es rectangular.
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La columna o brazo: Llamada tambin asa, es una pieza en forma de C, unida a la base por su parte
inferior mediante una bisagra, permitiendo la inclinacin del tubo para mejorar la captacin de luz
cuando se utilizan los espejos. Sostiene el tubo en su porcin superior y por el extremo inferior se adapta
al pie.
El tubo: Tiene forma cilndrica. El tubo se encuentra en la parte superior de la columna mediante un
sistema de cremalleras, las cuales permiten que el tubo se mueva mediante los tornillos.
El tornillo macromtrico o macroscopico: Girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del
microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a un mecanismo de cremallera. Estos movimientos
largos permiten el enfoque rpido de la preparacin.

El tornillo micromtrico o microscopico: Mediante el ajuste fino con movimiento casi imperceptible que
produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y ntido de la preparacin. Lleva
acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm, que se utiliza para precisar sus
movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

La platina: Es una pieza metlica plana en la que se coloca la preparacin u objeto que se va a
observar. Presenta un orificio, en el eje ptico del tubo, que permite el paso de los rayos luminosos a la
preparacin. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmvil; en otros casos puede ser
giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.
Las pinzas: Son dos piezas metlicas que sirven para sujetar la preparacin. Se encuentran
en la platina.
El revlver: Es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los objetivos. Al
girar el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posicin de trabajo, lo que se
nota por el ruido de un pin que lo fija.

PARTE O SISTEMA PTICO DEL MICROSCOPIO:

Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de lentes que lo componen.
Est formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta una imagen de la muestra que el ocular luego
ampla.

El ocular: Se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a la cercana de la pieza
con el ojo del observador. Tiene como funcin aumentar la imagen formada por el objetivo. Los oculares son
intercambiables y sus poderes de aumento van desde 5X hasta 20X. Existen oculares especiales de
potencias mayores a 20X y otros que poseen una escala micromtrica; estos ltimos tienen la finalidad de
medir el tamao del objeto observado.
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Los objetivos: Se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y producen el aumento de las
imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan cerca de la preparacin que se examina.
Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersin

PARTE O SISTEMA DE ILUMINACIN:

Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la preparacin u
objeto que se va a observar en el microscopio de la manera adecuada. Comprende los siguientes elementos:

Fuente de iluminacin: se trata clsicamente de una lmpara incandescente de tungsteno


sobrevoltada; en versiones ms modernas con leds. Por delante de ella se sita un condensador (una
lente convergente) e, idealmente, un diafragma de campo, que permite controlar el dimetro de la parte
de la preparacin que queda iluminada, para evitar que exceda el campo de observacin produciendo
luces parsitas

El espejo: Necesario si la fuente de iluminacin no est construida dentro del microscopio y ya


alineada con el sistema ptico, como suele ocurrir en los microscopios modernos. Suele tener dos caras:
una cncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara cncava se emplea de
preferencia con iluminacin artificial, y la plana, para natural (luz solar). Los modelos ms
modernos no poseen espejos sino una lmpara que cumple la misma funcin que el espejo.

Condensador: Est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos
luminosos sobre el plano de la preparacin, formando un cono de luz con el mismo ngulo que el del
campo del objetivo. El condensador se sita debajo de la platina y su lente superior es generalmente
planoconvexa, quedando la cara superior plana en contacto con la preparacin cuando se usan objetivos
de gran abertura (los de mayor ampliacin); existen condensadores de inmersin, que piden que se
llene con aceite el espacio entre esa lente superior y la preparacin. La abertura numrica mxima del
condensador debe ser al menos igual que la del objetivo empleado, o no se lograr aprovechar todo su
poder separador. El condensador puede deslizarse verticalmente sobre un sistema de
cremallera mediante un tornillo, bajndose para su uso con objetivos de poca potencia.

Diafragma: El condensador est provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura para ajustarla a
la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para aumentar el contraste, lo que se hace
cerrndolo ms de lo que conviene si se quiere aprovechar la resolucin del sistema ptico.
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ACTIVIDADES PRCTICAS:

Actividad 1:

Objetivo: Montar muestra de Tejido epitelial de revestimiento de la boca.

Materiales: Palo de helado, una tincin o colorante que en este caso corresponde a Azul de metileno, Agua
destilada, Porta objetos, y cubre objetos

Descripcin de la muestra: Este es el tejido que como su nombre indica reviste la boca por dentro. Es este tejido
las clulas se agrupan del mismo modo que en la piel externa.

Instrucciones:

1- Con el palillo frotamos la parte interna de la boca sin hacernos dao.

2- Echamos una gota de agua (mejor destilada) en el portaobjetos y con el palillo que nos frotamos la boca lo
aplicamos a esa gota de agua como si lo estuviramos rebozando.

3- Despus de esto muchas clulas muertas estarn en el portaobjetos, aplicamos un poco de azul de metileno
y despus con un mechero y con cuidado de no quemar el portaobjetos se lo pasamos por la parte inferior para
que el agua se seque.

4- Montar la muestra en el microscopio para comenzar a observarla.

Nombre de la preparacin:

Propsito

Tincin:

Aumento Total:

Descripcin:

Actividad 2:

Objetivo: Montar muestra de Tejido epitelial de la cebolla

Materiales: Epidermis de Cebolla, Colorante (Azul de metileno), agua destilada, porta objetos, cubre objetos.

Descripcin de la muestra: El tejido epitelial de la cebolla est compuesto por millones de clulas entrelazadas,
Estas se agrupan en forma poligonal y protegen el interior de la cebolla.

Instrucciones:

1- Extraer de la cebolla un trozo de este tejido.

2- Exponerlo en el portaobjetos y lavarlo con agua destilada.

3- Aplicar azul de metileno para que sus clulas sean visibles y colocar el cubreobjetos.

4- Acto seguido exponer en el microscopio la muestra y observar primero con su objetivo de rango menor
subiendo paulatinamente.
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Nombre de la preparacin:

Propsito

Tincin:

Aumento Total:

Descripcin:

Actividad 3 :

Objetivo: Montar muestra de Tejido epitelial de la cebolla

Materiales: Epidermis de Cebolla, Reactivo de lugol, agua destilada, porta objetos, cubre objetos.

Descripcin de la muestra: El tejido epitelial de la cebolla est compuesto por millones de clulas entrelazadas,
Estas se agrupan en forma poligonal y protegen el interior de la cebolla.

Instrucciones:

1- Extraer de la cebolla un trozo de este tejido.

2- Exponerlo en el portaobjetos y lavarlo con agua destilada.

3- Aplicar una nfima porcin del reactivo de lugol para que los ncleos de las clulas sean visibles y colocar el
cubreobjetos.

4- Exponer en el microscopio la muestra y observar primero con su objetivo de rango menor subiendo
paulatinamente.

Nombre de la preparacin:

Propsito

Tincin:

Aumento Total:

Descripcin:

Actividad 4 :
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Observacin de muestra de papel milimetrado en el que est escrito el numero 6


Objetivo: Reconocer e identificar qu tipo de imagen es la que observamos en el microscopio segn lo
mencionado en la parte terica de la gua.
Materiales: Muestra fijada de papel milimetrado con nmero 6.
Instrucciones: Observe su muestra en el microscopio con los aumentos sealados por la profesora.

Nombre de la preparacin:

Propsito

Tincin:

Aumento Total:

Descripcin:

Coloque los nombres correspondientes a las partes del microscopio sealadas en el esquema:
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CUESTIONARIO:

1. Coloque los nombres a las diferentes partes del microscopio numeradas e investigue las funciones de cada
una de ellas.
2. Qu otros tipos de microscopios se utilizan en la investigacin biolgica?
3. Qu son objetivos secos?
4. Qu son objetivos de inmersin?
5. Qu son los colores complementarios y que utilidad tendran en microscopa ptica.