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FACULTAD DE BIOTECNOLOGA

LABORATORIO DE BIOLOGA VEGETAL

INFORME N2

Nombre: Sebastian Guamba, Andrea Segovia

NRC: 2300

Docente: Ing. Grace Tatiana Pez Barrera

Fecha: 18-05-2017

1. Tema: Anatoma y morfologa de la raz en monocotiledneas y


eudocotiledneas.

2. Introduccin

La raz es el rgano fijacin y nutricin de todas plantas vasculares


inferiores y superiores (Rueda, 2014). Despus de la semilla, la raz es la
estructura de la planta que se obtiene de la consecuencia de la
germinacin de la semilla. Su caracterstica en casi todas las plantas se
lo toma con un fototropismo negativo y un geotropismo positivo, an que
en la actualidad se ha demostrado que existen races con caractersticas
contrarias.
Sus funciones principales son la fijacin de la planta al suelo y la
absorcin de agua y sales minerales (Duran, 2012), adicionando a estas
funciones tambin la raz almacena nutrientes que en algunos casos se
puede ingerir la raz como tal, o tambin la funcin de conduccin de
sustancias orgnicas e inorgnicas (Rueda, 2014).
Dependiendo del origen de la raz podemos determinar qu tipo de
morfologa externa y anatoma presenta la planta, diferenciando as el
estudio de monocotiledoneas y eudocotiledneas.

3. Hiptesis
Las races eudicotiledneas y monocotiledneas tienen
diferencias estructurales.
La identificacin de estructuras externas e internas de
monocotiledneas y eudocotiledneas son diferentes por la
distribucin de los tejidos.
A simple vista se puede identificar diferencias morfolgicas entre
las races monocotiledneas y eudocotiledneas.

4. Objetivos
Tomar muestras vegetales respetando normas de bioseguridad.
Identificar y clasificar morfolgicamente los elementos
estructurales de la raz en monocotiledneas y en
eudocotiledneas.
Identificar anatmicamente las partes estructurales de una raz
primaria en monocotiledneas y una raz secundaria en
dicotilednea.
Redactar un informe con correcto uso de mtodo cientfico en base
a la prctica de laboratorio.

5. Materiales
Reactivos: Lugol, safranina, agua destilada.
Materiales de proteccin: Mandil, guantes, mascarillas, gorras o
malla para estudiantes de cabello largo.
Material de laboratorio: 12 Placas portaobjetos, 12 cubre
objetos, 12 pipetas desechables, 2 mecheros de alcohol, 1 papel
especial para limpieza de microscopios, 1 rollo de papel toalla, 12
pinzas, 12 agujas de diseccin, 12 hojas de bistur, 12 mangos de
bistur, 12 tijeras nta fina.
Equipos: Estreos microscopios y microscopios.
Muestra: Material vegetal: Races de eudocotiledneas y
monocotiledneas tiernas y maduras entre estas zanahorias,
rbanos, kikuyo, nabo, frjol, rosa, perefil1, culantro, etc.

6. Procedimiento
Actividades previas:
a) Mantener el material de la actividad de germinacin viable, para poder
seleccionar material fresco en la prctica de anatoma y morfologa de
raz.
b) Definir, hipoctilo, radcula axonomorfo, seminal.

1. Morfologa y anatoma de la raz:


1.1. Estructura de la raz
1.1.1. Sistemas Radicales
En las plantas de frjol y maz (material de
germinacin) se estudi su sistema radical. Se not
que el frjol presenta una raz principal, la cual es
continuacin del tallo. A partir de la raz principal
(pivotante), se deriva las races secundarias.
1.2. Morfologa externa de la raz
Bajo el estreo microscopio se examin una plntula de rbano
(Raphaus sativus sp). Se retir tan solo la tapa de la caja Petri,
ya que los pelos radiculares son muy sensibles a la sequedad.
Se determin:
Cofia: la parte ms apical de la raz.
Meristemo apical: protegido por la cofia.
Zona de alargamiento
Zona de los pelos radicales
Cuello
1.3. Anatoma de la raz
Se tom una raz de cualquier especie, se coloc y se realiz
varios cortes longitudinales. Al microscopio se determin cofia
o piloriza y meristemo apical.
1.3.1. Crecimiento Primario de Eudicotiledneas. Se realiz
varios cortes trasversales en la zona ms joven de la
raz del frjol (Phaseolus vulgaris) determine:
disposicin radical del xilema, regin del cambium,
floema, endodermis y periciclo.
1.3.2. Crecimiento Secundario de Eudicotiledneas. En
cortes trasversales de raz de frjol en la regin ms
viaje, se observ: mdula, xilema secundario, regin
de cambium vascular, floema secundario, etc.
1.3.3. Races Secundarias. En el estreomicroscopio se
observ en cualquier especie eudicotilednea la raz
principal y races secundarias.
1.3.4. Crecimiento primario en Monocotilednea. Se realiz
cortes trasversales de la raz de maz y se observ:
xilema y floema primarios, prericiclo y la endodermis.
7. Resultados

Cuello o Zona de
Transicin

Zona de ramificacin

Zona de alargamiento

Zona de proteccin

Ilustracin 1. Raz Eudocotilednea: Sistema Radiales

Muestra: raz de frjol


Tincin: ninguna
Fotografiado por: Andrea Segovia
Cuello o
Zona de
transicin

Zona de
Zona de Ramificacin,
alargamiento Maduracin o
Diferenciacin

Zona de
Proteccin,
Cofia, Kaliptra
o Piloriza Ilustracin 2. Raz Monocotiledneo: Sistema Radiales

Muestra: raz de cebolla


Tincin: ninguna
Fotografiado por: Andrea Segovia

Ilustracin 3. Morfologa Externa

Muestra: rbano
Tincin: ninguna
Fotografiado por: Andrea Segovia
Ilustracin 4. Estructura Externa

Muestra: zanahoria
Tincin: ninguna
Fotografiado por: Andrea Segovia
Tejido
Meristamtico
Cofia

Ilustracin 5. Cofia Tejido Meristemtico

Muestra: raz del frejol


Tincin: Lugol y Safranina
Fotografiado por: Andrea Segovia

Periciclo

Endodermis
Cambium

Xilema
Floema

Ilustracin 6. Corte transversal

Muestra: Raz de Culantro


Tincin: ninguna
Fotografiado por: Andrea Segovia
Floema

Endodermis

Cambium

Xilema

Periciclo

Ilustracin 7. Elementos internos corte transversal

Muestra: raz de frjol


Tincin: ninguna
Fotografiado por: Andrea Segovia

Floema y Mdula
Xilema

Ilustracin 8. Estructura interna de una raz madura

Muestra: Raz de culantro


Tincin: ninguna
Fotografiado por: Andrea Segovia
Xilema

Endodermis
Mdula

Corteza
Floema
Ilustracin 9. Estructura interna de una raz Monocotilednea

Muestra: raz de maz


Tincin: ninguna
Fotografiado por: Andrea Segovia

8. Discusin

La raz es un rgano de la planta que ordinariamente est introducido en


la tierra y ms que nada es la primera estructura de surge de la
germinacin de una planta es decir del embrin (Google, 2017). En las
semillas germinadas a partir de Epictilo surge la primera raz que dar
origen en el caso de una planta Eudecotilednea a una raz principal y en
el caso de una Monocotilednea a una raz fasciculada por el
atrofiamiento de la raz principal (Rueda,2014) como se muestra n las
ilustraciones 1,2 y 3.

Analizando estructuras externas de la raz en el estreo microscopio varia


igual de la planta de donde proviene, en el caso de las Eudocotiledneas
se puede distinguir con facilidad su estructura ya que gracias a la raz
principal la identificacin es ms sencilla, es as que se pudo distinguir
cada zona como se distingue en la ilustracin 5.

Anatmicamente existen similitudes entre Monocotiledneas y


Eudocotiledoneas, en ambas se encuentra la presencia de epidermis
(rizodermis, pelos absorbentes), Exodermis y Endodermis; pero se
pueden diferenciar tambin por la distribucin del Xilema y Floema que
en el caso de Eudocotiledneas forman un anillo entre ellos enlazadosy
presencia de cambium mientras que en Monocoiledneas no existe ese
anillo. En la ilustracin 7 se puede diferenciar que en la raz de frjol se
puede identificar una Banda de Caspery y en la raz de maz no por ende
confirmamos las imgenes obtenidas (Amodeo,2014).

9. Conclusiones

Se concluy que la morfologa externa de a raz eudocotilednea


est dispuesta por: cofia, zona meristemtica, zona de
alargamiento, zona de maduracin y cuello de la raz.
A simple vista se pudo identificar los sistemas radiculares de las
plantas eudocotiledneas por presencia de una raz primarias y
secundaria, y a su vez monocotiledneas por la presencia de
races de igual tamao.
Al analizar la anatoma de la raz concluimos que est compuesta
por: epidermis, corteza, endodermis, estele. Se puede diferenciar
las plantas monocotiledneas y eudocotiledneas por analizar la
distribucin del xilema y floema en la estela y la presencia del
cambium.

10. Cuestionario
La planta de maz presenta un sistema radical denominado
fibroso, analice las diferencias con el sistema pivotante.
Se considera un sistema radical fibroso a las plantas que sus races
tienen igual tamao tanto longitudinalmente como en grosor, estas
races toman el nombre de races seminales que tienen de origen
de una radcula atrofiada desde la germinacin y es de ah donde
se forman races secundarias al contrario que un sistema pivotante
consta de una raz principal y races secundarias (Rueda, 2014)
Por ende el maz no tiene una raz principal definida.
Que reactivos reemplazaron a los sealados en los
procedimientos de tincin, Cules son sus observaciones al
respecto?
En la identificacin de la cofia no se utiliz todos los materiales para
una tincin Gram necesaria para tejidos vegetales ya que no fue
necesario porque se utiliz races recin germinadas. Se utiliz
safranina y lugol l cual tio a la cofia de color rosa.
11. Bibliografa

DURAN, M. (JUNIO de 2012). ORGANOGRAFIA VEGETAL.


Presentacin de PowerPoint - UAEH. ESTADO DE HIDALGO,
MEXICO.

AMODEO, G. (2014). ANATOMIA DE LA RAIZ. Buenos Aires,


Argentina.Recuperado el 18 de 05 del 17 de:
http://www.dbbe.fcen.uba.ar/contenido/objetos/Anatomiaderaiztall
oyhojaBdV.pdf

RUEDA, D. (2014). Botnica Sistmatica. Quito: Publi&compu.


FACULTAD DE BIOTECNOLOGA
LABORATORIO DE BIOLOGA VEGETAL
INFORME N3
Nombre: Sebastian Guamba, Andrea Segovia
NRC: 2300
Docente: Ing. Grace Tatiana Pez Barrera
Fecha: 18-05-2017

12. Tema: Adaptaciones y modificaciones de la raz: micorrizas y ndulos


bacterianos

13. Introduccin
En 1880 el patlogo forestal A. B. Frank, fue el primero en descubrir
la estructura de las micorrizas, mediante un estudio de incrementar la
produccin de trufas, las pudo observar, adems de encontrar su
estructura, encontr tambin las funciones que realizaba ya que en otros
estudios se deca que era una planta parasita, le dio el nombre de
mykorhiza que significa hongo-raz (Andrade, 2010).
Las micorrizas es un conjunto de hifas fngicas que envuelven a
las races de la planta o en algunos casos como las ectomicorrizas
penetran a la raz, las hifas se van ramificando poco a poco y se van
uniendo a las dems ramificaciones de la planta o de otras plantas
(Camargo , Montao, De la Rosa, & Montao, 2012). Realiza un
mutualismo o una asociacin simbitica entre el micelio de un hongo y la
raz de una planta (Navarro, s.f.).
La relacin que tienen es que la planta le proporciona carbohidratos
al hongo, mientras que el hongo le permite una mejor captacin de
nutrientes, minerales y agua, adems le ofrece proteccin contra
patgenos, todos salen beneficiados de esta integracin (Camargo ,
Montao, De la Rosa, & Montao, 2012). Tenemos 7 clases de
micorrizas: Ectomicorriza, micorriza arbuscular, micorriza de orqudea,
micorriza ericoide, ectendomicorriza, micorriza arbutoide y micorriza
monotropoide (Andrade, 2010).
Los ndulos bacterianos son bacterias fijadoras de nitrgeno, en
esta simbiosis genera beneficios en ambos lados, la planta proporciona
compuestos carbonados a la bacteria y la bacteria da nitrgeno que
puede ser utilizado para la creacin de protenas (Gonzales, 2016). Estas
bacterias invaden a los pelos absorbentes, estos entran en la corteza, se
dividen hasta formar los mdulos (Rueda, 2015).
Las bacterias Rizhobium captan el nitrgeno del ambiente y los
transforman en amonio, se lo realiza a travs de una enzima llamada
nitrogenas que les sirve para la produccin de protenas, viven en las
races de las plantas entre grupos: papilionceas, mimosceas y
cesalpinceas, que juntas forman 1200 especies, para realizar este
procedimiento es necesario la captacin de carbohidratos, productos de
la fotosntesis, exudados radiculares, todo estos elementos se los
obtiene de la simbiosis con la planta a la cual esta unida (Paredes, 2013).

14. Hiptesis
Se visualiz micorrizas y ndulos bacterias en las muestras de los
cultivos llevados a clases.
15. Objetivos
Identificar endomicorrizas, ectomicorrizas y ndulos bacterianos.
Redactar un informe con correcto uso de mtodo cientfico en base
a la prctica de laboratorio.

16. Materiales
Reactivos: Colorantes: Azul Tripan 0,05% en lactoglicerol, HCl 0.1
N, KOH al 10 %, Lactoglicerol, metanol, violeta de genciana, lugol,
alcohol, safranina, agua, alcohol de mechero, aceite de inmersin.
Materiales de proteccin: Mandil, guantes, mascarillas, gorras o
malla para estudiantes de cabello largo.
Material de laboratorio: Placas portaobjetos, cubre objetos,
pipetas desechables, mechero de alcohol, papel especial para
limpieza de microscopios, papel toalla, pinzas, aguja de diseccin,
hojas de bistur, mangos de bistur, agua.
Equipos: Estreos microscopios y microscopios.
Muestra: Material vegetal: Muestras de micorrizas de varios
cultivos y de asociacin con pino o ciprs; muestras de ndulos
bacterianos formados en races de la planta de haba, frjol, trbol.

17. Procedimiento
2. Preparacin de las races
a) Se lav las races de la planta con el fin de eliminar los restos
suelo que an permanece unidos a ellas.
b) Se cort la parte area de la planta justo en el punto donde
comienzan las races.
c) Se introdujo las races en un tubo de ensayo.
d) Para favorecer la visualizacin de las hifas, vesculas y
arbsculos del hongo micorrizgeno, se someti a la raz a un
proceso de aclarado que duro ms o menos tiempo en funcin
del tipo de raz (ms cuanto ms vieja sea, mayor cantidad de
materias tnicas contenga etc.)
e) Se Cubri las races con una solucin KOH al 10%.
f) Se calent los tubos con las races durante 20 minutos (ms
tiempo si stas son gruesas o tienen mucho tanino, ya que
necesitarn un mayor aclarado).
g) Una vez enfriados los tubos se elimin la solucin y se volvi a
lavar las races con agua.
h) Se ech nuevamente en el tubo, cubriendo las races, una
solucin de HCl (0,1 N), para neutralizar el KOH que haya
podido quedar en la raz.
i) Se dej actuar durante 2 minutos y se elimin el lquido. Si la
raz no ha quedado blanca (por ejemplo, mantiene colores
amarillentos) habr que repetir el proceso de aclarado, dejando
actuar ms tiempo al KOH.
j) Tincin: Se utiliz un colorante especfico para teir las hifas del
hongo (Azul Tripan 0,05%)
k) Se ba las races del tubo con el colorante (Azul Tripan 0,05%
en lactoglicerol) y se calent durante 5 minutos.
l) Despus sacamos los tubos y dejamos enfriar.
m) Se elimin el colorante y se aadio lactoglicerol para quitar el
exceso, se mezcl bien y se hizo que salga el colorante.
n) La operacin se repiti hasta que las races no tian el
lactoglicerol.
o) Se observ.

3. Ndulos bacterianos.
a) Se lav las races de la planta con el fin de eliminar los restos
suelo que an permanece unidos a ellas.
b) Se separ todos los ndulos de la raz, y se presion el porta
objetos.
c) Se hizo el extendido en espiral
d) Se dej secar a temperatura ambiente
e) Se fij la muestra con metanol durante un minuto o al calor
(flameado 3 veces aprox.)
f) Se agreg violeta de genciana y se esper 1 min. Todas las
clulas Gram positivas y Gram negativas se tien de color azul-
purpura.
g) Se enjuago con agua.
h) Se agreg lugol y se esper entre 30 segundos y 3 minutos
i) Se enjuago con agua.
j) Se agreg alcohol y se esper entre 15 y 20 segundos
k) Se enjuago con agua.
l) Tincin de contraste agregando safranina o fucsina bsica y se
esper 1-2 min Este tinte dejar de color rosado-rojizo las
bacterias Gram negativas.
m) Se enjuago con agua.
n) Para observar al microscopio ptico es conveniente hacerlo a
100x con aceite de inmersin.

18. Resultados
Ndulo
Bacteriano

Ilustracin 10. Nudo bacteriano

Muestra: alverja
Tincin: ninguna
Fotografiado por: Sebastian Guamba

Rhizobium

Ilustracin 11. Rhizobium

Muestra: Trbol rojo


Tincin: ninguna
Fotografiado por: Sebastian Guamba
Rhizobium

Ilustracin 12. Rhizobium

Muestra: alverja
Tincin: Lugol
Fotografiado por: Sebastian Guamba

Micorriza

Ilustracin 13. Micorrizas

Muestra: trbol blanco


Tincin: ninguna
Fotografiado por: Sebastian Guamba
Ilustracin 14. Micorrizas

Muestra: Aliso
Tincin: Azul de lactofenol
Fotografiado por: Sebastian Guamba

Micorriza

Micorrizas

Ilustracin 15. Microrrizas

Muestra: Trbol blanco


Tincin: ninguna
Fotografiado por: Sebastian Guamba

19. Discusin
Al tener los resultados de la prctica de laboratorio se observa a las
micorrizas y ndulos bacterianos unidos a las races de las plantas con el
que realizan simbiosis, que beneficia ambos, valga la redundancia las
micorrizas no son races parasitas, todo lo contrario.
Los tipos de micorrizas ms comunes son las endomicorrizas que
penetran a la raz y las ectomicorrizas que envuelven a la raz, ambos
tipos de micorrizas ayudan a la planta en la captacin de agua, nutrientes
y minerales que favorecen en los procesos fotosintticos que realizan las
plantas (Camargo , Montao, De la Rosa, & Montao, 2012).
En la imagen 4 y 5 se pudo observar las micorrizas sin ningn tipo de
tincin, se las lavo un poco para que l se pueda distinguir levemente, en
ellas se ve unas races medias trasparentes unidas a una mucha ms
gruesa, ah estn las micorrizas, se ve como rodea a la raz e incluso
parece que penetra a la misma para realizar la simbiosis (Rueda, 2015).
En la imagen 5 se ve a las micorrizas, pero con un aclarado y luego con
el azul de lactofenol, se logra ver a las hifas como van envolviendo a las
races.
En la imagen 1 se puede ver a los ndulos bacterianos que son pequeos
tumores o ndulos (Moreria, s.f.), estas transforman el nitrgeno y lo
convierten en amonio para que la planta lo pueda aprovechar (Rueda,
2015).
Los ndulos bacterianos contienen bacterias Rhizobium y por clulas ms
pequeas que contienen peroxisomas y RE tubular, cada ndulo tiene
una zona meristemtica que lo permite crecer y fijar el nitrgeno
(Gonzales, 2016).
Las bacterias Rhizobium se las pudo observar en la imagen 2 y 3 y se
logr identificar que son bacilos gram negativo, tienen la capacidad de
fijadoras en las plantas, esto beneficia a la planta para la actividad
fotosinttica y al medio ambiente ya que disminuye las cantidades de
nitrgeno en la atmosfera, generalmente se los encuentre en las races,
pero en las Azorhizobium se los puede localizar en los tallos de las
plantas (Marugan, s.f.).
20. Conclusiones
En las previas investigaciones y prcticas en el laboratorio se
puede distinguir la estructura de las micorrizas como la de los
ndulos bacterianos, se pudo ver las hifas de las micorrizas en las
observaciones, se complic un poco la visualizacin por la poca
cantidad de hifas presentes en las muestras de laboratorio, se
pudo ver el mutualismo que realizan los hongos y las plantas para
su supervivencia.
De la misma manera sucedi con los ndulos bacterianos y su
actividad simbitica con las races de las plantas, que igualmente
ambas salen beneficiadas, se pudo ver que cuando los ndulos
pueblan a las races de las plantas ya sean primarias o
secundarias, ellos las enredan y poco a poco se forma el ndulo.
Tiene bastantes aplicaciones en el sector de la biotecnologa por
su gran apreciacin de nutrientes que benefician, su importancia
en proteger a la planta de agentes patgenos.

21. Cuestionario
Investigue sobre los tipos de micorrizas y ndulos bacterianos
y su aplicacin en la agricultura y el desarrollo de
Bioproductos en relacin a estos organismos.
Los tipos de micorrizas son las siguientes:
Ectomicorrizas: las hifas penetran las races secundarias
para desarrollarse (Andrade, 2010).
Micorriza arbuscular: estructura en forma de arbusto
(Andrade, 2010).
Micorriza de orqudeas: se presentan en las orqudeas y un
tipo de hongo llamado Basidiomycotina (Andrade, 2010).
Micorriza ericoide: la planta es de las Ericales (Andrade,
2010).
Ectendomicorrizas: presenta los dos tipos: penetran a la raz
y la envuelven (Andrade, 2010).
Micorriza arbutoide: igual que la ectendomicorriza, de los
gneros Arctostaphylos, Arbutus y Pyrola (Andrade, 2010).
Micorriza monotropoide: solo a la familia Monotropacae
(Andrade, 2010).
En la aplicacin de la agricultura es de reducir los productos
qumicos para proteger el medio ambiente y por razones de salud,
por ellos las micorrizas deben tener un alto porcentaje de
efectividad ya que se debe compensar la disminucin de todos los
qumicos (Blanco & Salas, 1997).
Los ndulos bacterianos son muy aprovechados en la agricultura
porque pueden fijar alrededor de 600kg de nitrgeno por
hectrea/ao en los cultivos de arroz (Moreria, s.f.).
Seale dos aplicaciones biotecnolgicas en el desarrollo de
inoculantes de Rhizobium.
La aplicacin del Rhizobium en la biotecnologa busca mejorar los
cultivos y hacerlos ms resistentes al ambiente, agentes
patgenos, etc.
Nos ayuda a reducir los fertilizantes e insecticidad que
daan los suelos (ArgenBio, 2007).
Utilizacin de biofertilizantes, mejor calidad y seguridad en
el alimento (ArgenBio, 2007).

22. Bibliografa
Andrade, A. (octubre de 2010). Microrrizas: antigua interpretacion
entre plantas y hongos. Recuperado el 18 de 05 de 2017, de
http://www.revistaciencia.amc.edu.mx/images/revista/61_4/PDF/1
1_MICORRIZAS.pdf
ArgenBio. (2007). PQBio Por que biotecnologia. Obtenido de
http://porquebiotecnologia.com.ar/index.php?action=cuaderno&op
t=5&tipo=1&note=8
Blanco , F., & Salas, E. (1997). Micorrizas en la agricultura;:
contexto mundial e investigacion realizada en costa rica.
Recuperado el 18 de 05 de 2017, de
http://www.mag.go.cr/rev_agr/v21n01_055.pdf
Camargo , L., Montao, N., De la Rosa, C., & Montao, S. (01 de
07 de 2012). Microrrizas: una gran union debajo del suelo.
Recuperado el 18 de 05 de 2017, de
http://www.revista.unam.mx/vol.13/num7/art72/art72.pdf
Gonzales, M. (23 de 05 de 2016). Botanica Morfologica.
Recuperado el 18 de 05 de 2017, de
http://www.biologia.edu.ar/botanica/index.html
Moreria, F. (s.f.). Bacterias formadas de nodulos en lugominosas.
Recuperado el 18 de 05 de 2017, de
http://www.publicaciones.inecc.gob.mx/libros/667/cap6.pdf
Navarro, J. (s.f.). Efectos beneficiosos de las micorrizas sobre las
plantas. Recuperado el 18 de 05 de 2017, de
http://www.bioscripts.net/col/Apuntes/Nutricion_Vegetal/Trabajo_d
e_nutricion_vegetal.pdf
Rueda, D. (2015). Botnica Sistmatica. Quito: Publi&compu.
Marugan, V. (s.f.). Carcteristicas proteomica Rhizobium.
Recuperado el 18 de 05 de 2017, de
http://www.um.es/estructura/equipo/vic-
estudiantes/arquimedes2003/pdf/004-Virginiamarugan.pdf
Paredes, M. (2013). Fijacion biologica de nitrogeno en leguminosas
y gramineas. Argentina: Universidad Catolica de Argentina.
Recuperado el 18 de 05 de 2017, de
http://bibliotecadigital.uca.edu.ar/repositorio/tesis/fijacion-
biologica-nitrogeno-leguminosas.pdf

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