OBJETIVO

O objetivo desta experincia foi observar atravs do microscpio

ptico os componentes do sangue humano e suas caractersticas.

MATERIAL

1. Lminas;

2. Tubo de ensaio;

3. Estante para tubo de ensaio;

4. Microscpio tico;

5. Pipeta;

6. Corantes hematolgicos;

7. Metanol;

8. leo de imerso;

9. Luvas;

10.Amostra de sangue (paciente Ignorado).

MTODOS

Execuo de esfregaos do sangue

Os esfregaos do sangue foram efetuados e corados manualmente.

Procedimento
 EXECUO DO ESFREGAO

1. Misturar o sangue invertendo o tubo suavemente para

homogeneiz-lo. Retirar a tampa.

2. Retirar um pouco de sangue do tubo com a pipeta e colocar uma

pequena gota de sangue sobre uma lmina.

3. Com uma mo, segurar a lmina nos cantos opostos

extremidade que contm o sangue.

Com a outra mo segurar outra lmina ou lamela, que ir servir para

espalhar o sangue, e colocar sobre a primeira de modo a fazerem um ngulo
de cerca de 30. Este ngulo mantido durante a execuo do esfregao.

4. Puxar a lmina/lamela superior para trs at contatar com a gota

de sangue. O sangue vai-se distribuir ao longo do bordo desta lmina.

5. Executar o esfregao deslocando a lmina/lamela superior suave,

porm rapidamente ao longo de cerca de 4 cm da lmina inferior.

6. Secar o esfregao ao ar.

7. Identificar.

8. Corar.

9. Observar ao microscpio utilizando leo de imerso.

 Figura 1 Tcnica esfregao sanguneo

Fonte PUC - RS

Condies para um bom esfregao

1. Delgado, isto , os diferentes glbulos devem estar estendidos

em uma nica camada sem superposio, nem formao de gros ou flocos.

2. Completo: a gota de sangue deve ser distendida na sua

totalidade, por isso a mesma no deve ser grande. Deve se levar em
considerao que num esfregao as partes mais ricas em elementos
citolgicos so as bordas.

FIXAO

Foi introduzida a lmina em recipiente com metanol.

EXAME

Utilizou-se a objetiva de 40x.

 O nmero de hemcias varia de 4,5 a 6 milhes por mm3 de
sangue, o nmero de leuccitos de 8.000 a 10.000 por mm3 de sangue e o de
plaquetas de 150.000 a 400.000 por mm3 de sangue.

COLORAO

Introduziu-se a lmina em recipientes com as solues de corantes

hematolgicos (eosina e azul-de-metileno), deixou-se corar por alguns
segundos observando-se a olho nu. Lavou-se a lmina em gua corrente para
retirar o excesso de corante. Secou-se ao ar em repouso.

Ao dos corantes

1. Eosina Corante cido. Cora componentes celulares bsicos

designados por eosinfilos ou acidfilos, de alaranjado.

2. Azul-de-metileno Corante bsico. Cora componentes celulares

cidos designados por basfilos, de azul arroxeado.

3. Clulas policromatfilas Coram de acinzentado por terem

propores idnticas de componentes cidos e bsicos.

4. Granulaes neutrfilas Coram pela ao combinada da eosina

e azul de metileno de rosa acinzentado.

Observao do esfregao

Na observao ao microscpio do esfregao corado pesquisam-se

alteraes qualitativas ou quantitativas dos glbulos brancos, glbulos
vermelhos ou plaquetas e demais aspectos que se julgarem pertinentes do
ponto de vista clnico.

EXEMPLOS de informaes obtidas na observao do esfregao:

Estudo das plaquetas.

 Presena de agregao;

Anisocitose e alteraes da granulao plaquetria;

Estudo da srie leucocitria.

Pesquisa de clulas atpicas;

Desvios de maturao;

Alteraes morfolgicas;

Presena de blastos ou outras formas jovens.

Estudo da srie eritrocitria:

- Anisocitose diferentes tamanhos.

- Anisocromia clulas normocrmicas coexistindo com

hipocrmicas.

- Policromatofilia clulas mais azuladas e maiores que um eritrcito

maduro. A cor azulada deve-se ao facto de possurem menos Hb que um
eritrcito maduro e de ainda terem restos de RNA no citoplasma.

- Poiquilocitose diferentes formas, sem predomnio de uma em

particular.

- Formas anormais predominantes: diancitos; dacricitos;

esfercitos; eliptcitos; acantcitos; equincitos; esquiscitos; etc.

- Incluses eritrocitrias:

1. Ponteado basfilo pequenas estruturas azul-escuras

semelhantes a pontos, espalhadas de modo uniforme por toda a rea
hemoglobinizada do eritrcito. O ponteado resulta da precipitao de
ribossomas e RNA durante a colorao.

2. Anis de Cabot estruturas em anel ou em forma de oito que

coram de vermelho arroxeado. Resultam de restos de membrana nuclear ou de
um fuso mittico.

3. Corpos de Howell-Jolly pequenas incluses arredondadas de

cor avermelhadas, consideravelmente maiores do que o ponteado basfilo.
Normalmente encontra-se um por eritrcito e desviado a um dos lados da
clula. Correspondem a restos nucleares (ex. membrana nuclear).

RESULTADO/ DISCUSSO

No experimento com a gota de sangue na lmina, observou-se

atravs de microscopia tica, inmeras hemcias, praticamente da mesma
forma e alguns tipos de leuccitos. Observou-se algumas clulas jovens
(bastes), alguns neutrfilos (vrios ncleos), e eosinfilos. Tambm se
observou a presena de linfcitos (ncleos grandes). Por fim, outros aspectos
mal puderam ser observados devido a qualidade da amostra oferecida.

CONCLUSO

Com a aula prtica baseada na observao microscpica de clulas

do tecido sanguneo humano, foi possvel concluir que preciso um pouco de
tcnica e prtica para que o esfregao sanguneo seja satisfatrio, e que os
corantes so de fundamental importncia para a visualizao dos leuccitos.

Observando a lmina, pode-se perceber que as hemcias se

apresentam em maior nmero que as restantes clulas. Os leuccitos so as
clulas constituintes do tecido sanguneo que apresentam maiores dimenses,
apesar de serem relativamente pouco numerosos. Estes podem ser
classificados em diferentes tipos, de acordo com a forma e dimenses do
ncleo.
 BIBLIOGRAFIA

Confeco do esfregao sanguneo ideal. Disponvel em:

http://www6.ufrgs.br/favet/lacvet/esfregaco.htm.

LIMA, A. Oliveira; SOARES, J. Benjamin; GRECO, J.P; GALEZZI,

Joo, CANADO, J. Romeu. Mtodos de Laboratrios Aplicados Clnica.
5.ed. Guanabara Koogan, Rio de Janeiro.

MOURA, Roberto A. de Almeida. Colheita de material para exames

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http://www.iceb.ufop.br/decbi/histologia/index.php?option=com_cont
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