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II. INSTRUCCIONES:
INTRODUCCIN: Las protenas son macromolculas formadas por cadenas de aminocidos, unidos
entre s por enlaces peptdicos. Las protenas poseen propiedades y caractersticas que las diferencian
entre s, y por medio de ellas, pueden ser separadas y aisladas de sus matrices alimenticias. Entre las
propiedades de las protenas se mencionan: el punto isoelctrico, la solubilidad, la desnaturalizacin, la
hidratacin, la densidad y el comportamiento en presencia de sales.
La solubilidad de una protena depende del grado de hidratacin y del nmero o arreglo de las cargas
sobre la molcula; lo cual depende a su vez de la composicin de aminocidos y de la presencia o
ausencia de otros residuos, como fosfatos, lpidos, carbohidratos y otros. Las molculas de protenas
cargadas se acercan lo suficiente como para formar agregados o precipitados, cuando la constante
dielctrica del medio es reducida por la adicin de acetona, alcohol u otros disolventes. Esto tambin
sucede cuando se consigue la fortaleza inica apropiada mediante la adicin de electrolitos. En
presencia de altas concentraciones de sales, como el sulfato de amonio, se disminuye el grado de
hidratacin y se reduce el nmero de cargas de las protenas y, por tanto, estas se agregan y se precipitan.
La separacin selectiva de protenas puede realizarse con bajas concentraciones de iones de algunos
elementos pesados, como Hg2+, Zn2+ y Cu2+. A pH inferiores al punto isoelctrico de la protena, esta
se carga positivamente y se precipita con aniones; a pH superiores, precipita con cationes.
Un procedimiento para separar protenas de sus disoluciones consiste en ajustar el pH al punto
isoelctrico de la protena de inters. Aqu, la solubilidad de la protena tiene un valor mnimo, y luego
se adiciona una sal neutra, por ejemplo, sulfato de potasio o de sodio. Puesto que las distintas protenas
de una mezcla se precipitan a diferentes concentraciones de una sal, la separacin es factible mediante
el incremento controlado de la concentracin de la sal.
III. LISTADO DE EQUIPOS, MATERIALES Y RECURSOS:
Estufa
Balanza analtica
Vasos de precipitacin
Calentados elctrico
Bureta
Probetas
Papel de filtro tipo Whatman # 40
Agitadores de vidrio
Embudo
Harina de trigo duro
Leche descremada y fresca
Disolucin de NaCl al 2% (m/v)
Disolucin de yodo-yoduro
Disolucin de etanol al 70% (v/v)
cido actico glacial
Alcohol etlico al 95%
Acetona
ter etlico
Agua destilada
Disolucin indicadora de fenolftalena
Disolucin de NaOH al 10%
Gasa o tela fina
Cajas de Petri
IV. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:
1
Lavar la masa bajo el chorro de agua, de manera que se arrastre todo el almidn, hasta que el agua
se encuentre clara, libre de almidn (comprobar con disolucin de yodo-yoduro).
Escurrir al mximo la masa de gluten (glutelinas y prolaminas son insolubles en agua).
Pesar el gluten hmedo y calcular el contenido (%) de gluten hmedo de la harina.
Dividir el gluten hmedo en 2 porciones iguales.
Desmenuzar y pesar la primera porcin. Colocar la muestra en un vaso de precipitacin. Agregar
50 ml de una disolucin de etanol al 70% (v/v) con el fin de disolver las prolaminas presentes.
Guardar en refrigeracin la disolucin etanlica de prolaminas para analizar su contenido de
protenas posteriormente.
Desmenuzar y pesar la segunda porcin. Desecar en una caja de Petri a 110 oC durante 2 horas.
Calcular el contenido (%) de gluten seco en la harina.