Mtodo y composicin para la promocin de la productividad de las plantas leguminosas y los

rendimientos de semilla

RESUMEN

Mtodo y composicin para la promocin de crecimiento de las plantas leguminosas y, ms

particularmente, a aumentar los rendimientos de semillas de plantas leguminosas mediante el
tratamiento de semillas de leguminosas, plantas y plantas de maduracin con un promotor de
crecimiento composicin que comprende como ingrediente activo una cantidad efectiva de
trigonelina.

DESCRIPCIN

Mtodo y la composicin PARA LA PROMOCIN DE LA PLANTA LEGUMINOSAS productividad y

los rendimientos SEED

ANTECEDENTES DE LA INVENCIN:

Esta invencin se refiere en general a un mtodo para la promocin y la regulacin del crecimiento,
los rendimientos de semilla y la productividad de los cultivos de leguminosas por la aplicacin
controlada de una solucin promotora del crecimiento que contiene una concentracin eficaz de
trigonelina. Los aumentos significativos en los rendimientos de semilla y la productividad de los
cultivos de leguminosas como la soja, frijol pinto, guisantes y otros, se realizan cuando las semillas
o plntulas son tratados con la composicin de regulacin del crecimiento de la invencin
particularmente durante los primeros diez das despus de la germinacin. Un aumento dramtico
en el rendimiento de semilla de segunda generacin se ha encontrado al proporcionar la aplicacin
foliar de la composicin promotora del crecimiento a las leguminosas de primera generacin.

Trigonelina es un compuesto natural sabe que est presente en una multitud de plantas y animales
y puede ser representado por la frmula
En. plantas, trigonelline se ha detectado en las gimnospermas, monocotiledneas y dicotiledneas
numerosos. (Willeke, U. et al. Fitoqumica 18, 105 (1979)). La presencia de trigonelina tambin se
ha detectado en los animales, incluidos los mamferos que se han encontrado para excretar
trigonelline en la orina. Tambin se ha encontrado que trigonelline es tpicamente la molcula ms
abundante de la va metablica de nucletidos piridina para la produccin de nicotinamida adenina
dinucletido (NAD), indicando que trigonelline exhibe una funcin reguladora en la biosntesis de
NAD y en la proliferacin celular. (Godavari, HR y col. J. Can Botnica 48, 2267 (1973) y Preiss, J.
et al. Journal of American Chemical Society 79, 4246 (1957)). Otros componentes conocidos de la
va metablica de nucletidos piridina incluyen el cido nicotnico y la nicotinamida. Aunque el uso
de nicotinamida y anlogos del cido nicotnico como ingredientes activos en un regulador de
crecimiento de las plantas se ha descrito en general, la nicotinamida y el cido nicotnico se han
encontrado para ser relativamente ineficaz para la promocin del crecimiento leguminosa planta en
particular cuando se aplica bajo condiciones de nitrgeno abundante. En consecuencia, existe una
necesidad real de una composicin y un mtodo eficaz y econmico mediante el cual se
incrementa sustancialmente la productividad de las legumbres.

Sumario y objetos de la invencin

Por consiguiente, un objeto de la presente invencin es proporcionar una composicin y un mtodo

eficaz y econmico eficaz para la promocin del crecimiento y la productividad global de las
leguminosas.

Es un objeto adicional proporcionar un mtodo que isparticularly eficaz para promover el

crecimiento y la productividad de las plantas leguminosas en condiciones de nitrgeno-
abundante. Es todava un objeto adicional es proporcionar un mtodo por el que se aumenta la
concentracin trigonelline de semillas de plantas leguminosas.

Es an un objeto adicional es proporcionar un mtodo por el que el rendimiento de semilla de

segunda generacin se incrementan significativamente.

Mediante esta invencin se proporciona un mtodo novedoso y eficaz para promover el

crecimiento de plantas leguminosas mediante el cual una composicin promotora del crecimiento
que contiene una concentracin trigonelline eficaz se administra de manera controlable a las
leguminosas y, ms particularmente, a las semillas, plantas de semillero o plantas de maduracin
de la misma.

Aunque se ha sabido por algn tiempo que trigonelline est presente en un cuerpo de planta, una
determinacin de su funcin precisa en el metabolismo biolgico de las plantas no ha sido
suficientemente investigadas y correlacionados. Sin embargo, como resultado de una extensa
investigacin y desarrollo que se ha descubierto recientemente que al aplicar trigonelline en
concentraciones cuidadosamente controladas a las leguminosas, la productividad de la planta y los
rendimientos de semilla se incrementa de forma inesperada y sustancialmente.

Este muy sorprendente descubrimiento es el resultado de la investigacin cualitativa y cuantitativa

considerable y el anlisis de los experimentos realizados por nosotros para determinar la actividad
hormonal de trigonelina. En el transcurso de nuestra investigacin se ha determinado que
trigonelline promueve la detencin celular preferente en la fase G2 del ciclo celular de
aproximadamente el 40% de la poblacin celular en los meristemos de raz de

Pisuiri sativum. Trigonelina que est presente en las semillas no germinadas se transporta a las
races y brotes de cotiledones de plntulas durante el desarrollo temprano. Aunque se han
encontrado concentraciones de otros componentes de la va metablica de nucletido de piridina
para la produccin de NAD tales como el cido nicotnico y la nicotinamida para promover la
detencin celular en G2 cuando se aade a un medio de cultivo adecuado, se ha descubierto que
trigonelline exhibe el mayor efecto positivo en la clula arrestar. Actualmente se cree que el cido
nicotnico y nicotinamida se convierten a trigonelina produciendo de este modo una concentracin
eficaz para la promocin de la detencin celular. En consecuencia, trigonelina se ha encontrado
que es la primera hormona vegetal identificado qumicamente que controla el ciclo celular en
plantas o animales. (Tramontano et al "Relacin entre Trigonelina La concentracin y la Promocin
de la detencin celular en G2 en las races cultivadas de Pisum sativum", fitoqumica, Vol 21, No.
6, pp 1201-1206 (1982);.. Evans, LS y Tramontano, WA "Es trigonelina una hormona de planta",
American Journal of Botany, 68 (9), 1282-1289 (1981)).

Adems, se ha determinado que la concentracin de trigonelina en las semillas germinadas vara

entre las diferentes especies de plantas. En un esfuerzo para determinar la ubicuidad de trigonelina
en las semillas no germinadas de diferentes especies de plantas para determinar qu especie
particular exhiben una respuesta positiva a la trigonelina como una hormona de plantas, semillas
no germinadas de varias especies de plantas se molieron y se extrajeron con etanol de manera
conocida y la trigonelina concentracin medida. Por procedimientos convencionales, trigonelina se
extrajo y las muestras se inyectaron en un cromatgrafo de lquidos de alta presin

(HPLC) con los estndares de trigonelina apropiados. Los resultados expuestos en la Tabla 1
indican que las altas concentraciones de trigonelina, es decir, mayor que 70 g trigonelline por
gramo de tejido, estn presentes en las semillas no germinadas de todas las leguminosas
ensayadas excepto man. En consecuencia, se detectaron concentraciones relativamente bajas
trigonelina en los cultivos de granos de cereales probados. Los datos de la Tabla 1 indica que las
legumbres contienen concentraciones significativas de trigonelline en sus semillas que demuestran
una propensin de legumbres para responder positivamente a las aplicaciones exgenas de
trigonelline.
Los niveles de concentracin de trigonelina, cido nicotnico y nicotinamida en tejidos de las
plantas a partir de semillas no germinadas a plntulas de 10 das tambin han sido investigados
para Pisum sativum. Se encontr que la cantidad total de trigonelina a partir de semillas no
germinadas a plntulas de 7 da estaba en el intervalo de 70 a 81 g con un aumento en trigonelline
a 101 g en plntulas de 10 das. Por comparacin, las concentraciones de cido nicotnico fueron
de aproximadamente 10% de la concentracin trigonelina y la concentracin de nicotinamida era
menos de 1% de la concentracin trigonelina.

Sobre la base de estos hallazgos, se determin que la aplicacin de trigonelina a las semillas o
plntulas de las leguminosas en particular durante los primeros diez das despus de la
germinacin result en un aumento de forma inesperada y significativamente la productividad de la
planta. experimentos especficos que demuestran la eficacia inesperada de trigonelina en el
crecimiento y la productividad de las leguminosas se presentan a continuacin.
Adems, se ha encontrado que las aplicaciones foliares a plantas de maduracin de cantidades
eficaces de trigonelina produce semillas, que en la plantacin se traducir en una mayor
productividad de la planta. resultados particularmente eficaces se han realizado cuando se aplica la
composicin trigonelline durante el perodo de llenado de vainas o ese perodo desde el inicio de la
elongacin vaina hasta la ampliacin semilla es sustancialmente completa.

Descripcin de realizaciones preferidas

La preparacin y aplicacin de las composiciones de la regulacin del crecimiento eficaces que

contienen trigonelline para plantas leguminosas, de acuerdo con la presente invencin se exponen
a continuacin para demostrar claramente los resultados inesperadamente superiores pueden
obtenerse mediante el mtodo de nuestra invencin. Se ha de entender claramente que el alcance
de la invencin no se pretende que est limitada por estas realizaciones especficas.

La actividad biolgica de trigonelina, como una hormona de crecimiento de la planta, se ha

investigado con respecto a un nmero de legumbres representativos. En todos los casos, las
plantas se mantienen en condiciones cuidadosamente ambientales propicio para un buen
crecimiento de las plantas. Para los propsitos de la experimentacin, se plantaron semillas de
guisante de jardn (Pisum sativum), soja (Glycine max) y frijol (vulgaris Phaseolous) en una mezcla
de suelo comercial. Cuatro semillas se colocaron en macetas de plstico de dimetro de cuatro
pulgadas con una sola plntula de cada bote permitido sobrevivir despus de la segunda
semana. Los suelos se riegan con una solucin de agua con o sin los compuestos de ensayo como
necesarios del suelo inicial de humectacin a la cosecha final en la madurez. Las plantas se
inocularon con una concentracin efectiva de Rhizobium inculo y 0,25 g de una mezcla de turba-
bacteria adecuada se aplic a cada maceta. Las plantas se regaron con las soluciones de ensayo,
segn sea necesario y, en promedio, cada maceta recibi 100 ml. durante cada riego de rutina. Las
plantas se cosechan cuando los brotes, hojas y vainas eran completamente senescentes. El
nmero de vainas y semillas maduras y ambas masas fresco y seco de semillas maduras se
determinaron en una balanza analtica precisa a 0,01 g para cada planta.

EXPERIMENTO 1

La productividad de las plantas de soja y pinto bean se midi en comparacin con un control
adecuado con los resultados que se presentan en la Tabla 2. La solucin acuosa bsica usada fue
una solucin de Hoagland estndar 25% fuerza que omite todas las fuentes de nitrgeno. La soja
(Glycine max) y judas pintas (Phaseolus vulgaris) se expusieron a una solucin acuosa que
contiene una concentracin molar trigonelline 10 como una inundacin del suelo. Despus de la
exposicin a estas dos soluciones a lo largo de toda la temporada de crecimiento de los
rendimientos de semilla de las plantas eran measuredr
Los resultados de la Tabla 2 demuestran que la aplicacin de una solucin trigonelline de 10 -
3 concentracin molar (0,39 g. Por planta durante toda la temporada de crecimiento) como
tratamiento del suelo a la soja y frijoles pintos significativamente aumenta la productividad de la
planta, segn lo determinado por el rendimiento de semilla, aproximadamente 21% de judas pintas
y 42% para la soja en comparacin con el control.

Experimento 2

En este experimento se determin la productividad de guisantes (Pisum sativum) cuando se

expone a una solucin acuosa que contiene un 10 -3 concentracin molar (0,11 g. Por planta sobre
toda la estacin de crecimiento) de trigonelina como una inundacin del suelo. La solucin bsica
de riego era una solucin Hoagland estndar 25% fuerza que omite todas las fuentes de
nitrgeno. Las plantas fueron expuestas a las soluciones ya sea con o sin trigonelline lo largo de
toda la estacin de crecimiento. Los resultados de este experimento se muestran en la Tabla 3.
Experimento 3

En este experimento los rendimientos comparativos de semillas de guisantes (Pisum sativum)

cuando se expone durante 1 semana de riego de 3 veces en 100 ml por aplicacin con 10 -

3 concentraciones molares de trigonelina (0,03 g. Por planta), cido nicotnico (0,02 g. por planta) y
nicotinamida (0,02 g. por planta), en presencia de nitrgeno, se determin. La solucin bsica de
riego era una solucin Hoagland estndar al 25% que inclua el nitrgeno (N +) en una cantidad de
aproximadamente 1,56 gramos de nitrgeno por maceta. En cada caso las soluciones se aplicaron
como una inundacin del suelo. Los resultados de este experimento se muestran en la Tabla 4.
El anlisis de los datos expuestos en la Tabla 4 muestra que la productividad de la planta en el
caso de aplicacin de trigonelina, como se mide en el rendimiento de semilla, se increment en
aproximadamente 57% en comparacin con el control. El cido nicotnico exhibi un efecto
considerablemente menor sobre la productividad, mientras que la nicotinamida no mostr aumento
en absoluto.

Experimento 4

Se llev a cabo este experimento para determinar el efecto de regulacin del crecimiento de
trigonelina, cido nicotnico y nicotinamida en la soja (Glycine max). En este experimento, la
productividad de la planta, medida por el rendimiento de semillas, se determin tras el tratamiento
con trigonelina (1,04 g. Por planta), cido nicotnico (0,73 g. Por planta) y nicotinamida (0,73 g. Por
planta) a una concentracin molar de 10 -3 aplicada en toda la temporada de crecimiento. La
solucin bsica de riego era una solucin al 25% de concentracin estndar que inclua Hoagland
de nitrgeno (N +) en una cantidad de aproximadamente 3,12 gramos de nitrgeno por maceta
ms de 80 das. Los resultados se exponen en la Tabla 5.

Los datos de la Tabla 5 muestra claramente que trigonelline exhibe el mayor efecto positivo sobre
el crecimiento de las plantas. El rendimiento de semilla aument ms de 100% en comparacin
con el control. En consecuencia, el nmero de vainas por planta se increment en
aproximadamente 66%.

Nuestras investigaciones han demostrado que el tratamiento de las leguminosas, con una
composicin promotora del crecimiento que contiene al menos un 10 -3 se prefiere concentracin
molar de trigonelina y los resultados en el aumento de productividad de la planta de manera
significativa y, ms en particular, aumento de forma espectacular el rendimiento de semilla. Sin
embargo, concentraciones ms bajas de trigonelina como 10 -4 molar tambin resultan en
incrementos positivos en la productividad de la planta.

Adems, se ha descubierto que los resultados particularmente eficaces, de acuerdo con la

presente invencin. se consiguen mediante el tratamiento de plantas leguminosas con la solucin
promotora del crecimiento de la invencin que contiene una concentracin eficaz de trigonelina
durante el perodo de llenado de las vainas que se puede definir como el perodo desde el inicio de
la elongacin vaina hasta la ampliacin semilla es sustancialmente completa. Se ha encontrado
que despus de la cosecha de las semillas maduras de las plantas que han sido tratadas con un
crecimiento trigonelline promocin de solucin como se describe por encima de los rendimientos de
semilla de las plantas cultivadas a partir de tales semillas pre-acondicionado se mejora de forma
inesperada y significativa. La solucin que contiene trigonelline se administra en la forma de una
foliar, pulverizacin a las plantas de maduracin y contiene, preferiblemente, un aditivo tensioactivo
adecuado.

Se realizaron experimentos para determinar el efecto de regulacin del crecimiento de la soja y los
guisantes de jardn de una generacin a la siguiente, cuando la aplicacin de trigonelline a la
primera generacin. Especficamente, trigonelina se aplic al follaje (es decir, hojas, tallos y las
vainas) de maduracin guisante de jardn y plantas de soja durante el periodo de llenado de las
vainas y las semillas se recogieron a continuacin.

Se ha encontrado, como se muestra en las Tablas 6 y 7 a continuacin que trigonelline se sintetiza

en el follaje de vencimiento plantas de guisante de jardn y de soja y que la trigonelina as formado
se transporta a las semillas como se produce la senescencia de la planta. La concentracin
trigonelline en los tejidos vegetales de guisantes y habas de soja se muestra en las Tablas 6 y 7,
respectivamente. un
Muy importante es que ha encontrado adems que la aplicacin foliar de trigonelina a las plantas
de maduracin durante el perodo de llenado de vainas aumenta significativamente la
concentracin trigonelline en las semillas encima de los niveles naturales de trigonelina como se
muestra en la Tabla 8. Cada aplicacin foliar contena aproximadamente 500 ml de una 10 -3 M de
concentracin trigonelline (0,09 g. trigonelline) y aproximadamente 3 g. de un tensioactivo
adecuado y se aplic a cincuenta plantas de guisante de jardn. En el caso de la soja, cada
aplicacin foliar contena aproximadamente 2000 ml de una 10 3 concentracin M trigonelina (0,35
g. Trigonelina) y un tensioactivo adecuado se aplic a treinta plantas de soja.
Por aplicacin foliar como se ha descrito anteriormente de trigonelina a las plantas de guisante de
maduracin durante la primera generacin se encontr que la concentracin de trigonelina en
races de las plntulas aument significativamente. Los resultados de estos experimentos se
exponen en la Tabla 9. Los datos presentados en la Tabla 9 muestra que las concentraciones de
trigonelina en races de las plntulas se aumentaron por un factor de 2 a 3 veces las
concentraciones normales trigonelina.
Por aplicacin foliar como se ha descrito anteriormente de trigonelina a la planta de soja de
maduracin durante la primera generacin se encontr que los rendimientos de semilla de soja
cultivadas en el campo en la siguiente generacin se incrementaron de forma inesperada y
dramticamente. Los resultados de estos experimentos se exponen en la Tabla 10.
Los datos presentados en la Tabla 10 muestran que el rendimiento de semilla de soja en la
segunda generacin se increment 17%, calculado como la masa de semillas por hectrea,
cuando se trata el follaje de la primera generacin con trigonelline. Ms particularmente, la
aplicacin foliar trigonelline aument la densidad de poblacin de plantas 8,5% lo que demuestra
que trigonelline promueve la supervivencia de las plntulas y el aumento de los rendimientos de
semillas de plantas individuales 8.2%. En el caso de los guisantes, las aplicaciones trigonelina al
follaje de la primera generacin de guisantes aumento de los rendimientos de semillas de plantas
cultivadas en el terreno de la segunda generacin, como se muestra en la Tabla 11.
Cuando las plantas se expusieron a trigonelina slo 9 y 10 das antes de la cosecha (# 2 tratado)
no se obtuvieron aumentos en el rendimiento de semilla. Sin embargo, cuando se hicieron dos
aplicaciones trigonelina 12 y 13 das antes de la cosecha (# 1 tratado), se obtuvo un aumento del
rendimiento de 68%. Adems, cuando se hicieron seis aplicaciones trigonelina entre 18 y 26 das
antes de la cosecha (# 3 tratado), se encontr un aumento en el rendimiento de 42%. Estos datos
demuestran que las aplicaciones foliares trigonelina durante el perodo de llenado de vainas (es
decir, # 1 y # 3 tratados tratados) del primer resultado la generacin de un fuerte aumento de los
rendimientos de semilla de las plantas de guisantes en la segunda generacin.

Como se demuestra claramente por los experimentos anteriores, la aplicacin foliar de trigonelina
en la soja y los guisantes de jardn aumentar la concentracin trigonelline en semillas cosechadas
de la primera generacin. resultados particularmente eficaces se han obtenido con aplicaciones
foliares de trigonelline durante el perodo de llenado de vainas, tanto para la soja y los
guisantes. Tales aplicaciones trigonelina exgenos aumentan las concentraciones trigonelina
endgenas en semillas de la primera generacin. Cuando las semillas de la primera generacin se
germinan mayores que las concentraciones normales trigonelina estn presentes en races de las
plntulas. Cuando tales semillas se cultivan en condiciones agronmicas estndar, el aumento de
la concentracin trigonelline en estas semillas y races de plntulas aumenta tanto supervivencia
de las plntulas y semillas rendimientos de plantas en la segunda generacin. De esta manera, la
aplicacin foliar de trigonelline en la primera generacin aumenta los rendimientos de semillas de
plantas de soja y guisante de jardn tratadas en la segunda generacin.

Por supuesto, es de entenderse que la descripcin anterior est destinada a ser ilustrativos en que
las realizaciones descritas se pueden modificar de varias formas dentro del alcance de la
invencin. Por ejemplo, el promotor de crecimiento que comprende una concentracin eficaz de
trigonelina se puede aplicar de forma continua o mediante la adicin de pulsos a las plantas
leguminosas, semillas o plntulas para promover y regular su crecimiento.