Elaboracin de poli(N-isopropilacrilamida) y determinacin de su temperatura de

transicin conformacional (LCST)

1. Introduccin
Los polmeros se conocen como inteligentes (Smart Polymers) o como convencionales
(Commodities), de acuerdo a la capacidad que poseen estos de responder ante estmulos fsicos o
qumicos que reciben de su entorno, estos estmulos pueden ser cambios de temperatura, pH, luz,
campo elctrico, campo magntico, entre otros, esto se manifiesta cuando los polmeros sufren
cambios drsticos en sus propiedades fsicas y qumicas, lo ms resaltante de esto es que los
cambios que sufre el polmero son reversibles (Schild, 1992).

El poli (N-isopropilacrilamida), pertenece a una clase de polmeros, que sometido a un cambio de

temperatura, estas experimentan una transicin desde la forma expandida a la colapsada.
Comprender el funcionamiento de este tipo de polmero, nos muestra una amplia variedad de
aplicaciones tales como la administracin de frmacos, protesis, elaboracin de materiales
termosensibles (Deshmuk et al, 2000), de esta manera estaramos en la capacidad de disear
materiales polimricos para aplicaciones biomdicas. El poli(N-isopropilacrilamida) muestra una
temperatura de transicin conformacional (LCST: Lower Critical Solution Temperature) de
aproximadamente 32C, cambia drsticamente sus propiedades fsicas y qumicas a esta
temperatura. Esto se da cuando a una solucin acuosa de PoliNIPAAm en agua destilada,
sometemos a un calentamiento, el polmero muestra una transformacin conformacional
repentina, es decir el polmero pasa de la forma expandida a la forma colapsada, lo que lleva a
una precipitacin o dispersin del polmero en el medio acuoso (Rueda et al, 2006).

Los polmeros sensibles a estmulos mantienen la esperanza de convertirse en partes esenciales

de aparatos y sistemas funcionales. Estos materiales responden a pequeas variaciones de
estmulos de su entorno, para generar grandes cambios en su conformacin macromolecular. Uno
de los polmeros sintticos que responden estmulos ms estudiados es poli (N-
isopropilacrilamida) (Kutnyanszky et al, 2012).

2. Resultados
2.1. Polimerizacin del Poli(N-isopropilacrilamida)
Se realizaron 2 reacciones de polimerizacin del PoliNIPAAm, con AIBN como iniciador en 5ml
de dioxano, esta mezcla se calent a 70C durante 2.0 horas. Transcurrido el tiempo de reaccin,
se precipita lentamente la mezcla en 25mL de ter dietlico. La poli(N-isopropilacrilamida)
obtenida se filtra y se seca, el polmero obtenido mediante la reaccin B, qued adherido al vaso
de precipitados por lo que no se prosigui con la determinacin del LCST para esta reaccin, las
cantidades y proporciones empleadas en el experimento se resumen en la tabla 1.

Tabla 1. Resultados obtenidos en la polimerizacin de PoliNIPAAm

Reaccin A Reaccin B
NiPAAm (g) 0.502 0.502
AIBN (g) 0.040 0.040
Estireno (g) - 0.100
PoliNiPAAm obtenido (g) 0.480 -
PoliNiPAAm empleado (g) 0.090 -
Agua destilada (ml) 9 -
Concentracin (%) 1 -
 2.2. Determinacin de la temperatura de transicin conformacional (LCST)
Se disuelve 0.09 gramos del PoliNIPAAm obtenido mediante la reaccin A en 9 ml de agua
destilada para obtener una solucin al 1% en peso. El equipo empleado para determinar LCST se
muestra en la figura 1.

Figura 1a. Chaqueta de calentamiento. Figura 1b. Equipo UV-VIS.

Figura 1c. Configuracin del sistema.

Figura 1. Sistema empleado para determinar el LCST del PoliNIPAAm.

El principio para determinar la transmitancia consiste en hacer pasar un rayo de luz de una
determinada longitud de onda , de intensidad Io, el cual incide perpendicularmente sobre la
solucin acuosa, est la solucin absorbe una parte de la luz incidente Ia, y dejar pasar el resto
It, de forma que se cumple la siguiente relacin: Io = Ia + It. La transmitancia (T) de la solucin
es la relacin entre la cantidad de luz transmitida que llega al detector una vez que haya atravesado
la muestra It, y la cantidad de luz que incidi sobre ella Io, se representa normalmente en tanto
por ciento: % T = It/Io x 100. La temperatura de transicin conformacional (LCST) del poli(N-
isopropilacrilamida) fue determinada mediante el equipo de espectroscopia ultravioleta (UV/VIS)
empleando una longitud de onda de 550 nm, en un bao termostatizado que nos permite variar la
temperatura, adems, se coloc una termocupla flexible dentro del recipiente que contena la
solucin, este dispositivo nos permite medir la temperatura de la solucin en tiempo real a la hora
de medir la transmitancia, todo el sistema configurado en la figura 1, permite medir la
transmitancia de la solucin (%) versus la temperatura (C), subiendo progresivamente la
temperatura y esperando 6 minutos en cada caso para que se estabilice la temperatura, la
transmitancia obtenida para ambos experimentos se muestra en la tabla 2.

Tabla 2. Valores medidos de transmitancia del PoliNIPAAm a diferentes temperaturas.

PoliNIPAAm ( Elaborado en el laboratorio) PoliNIPAAm ( Aldrich)
Temperatura (C) Transmitancia (%) Temperatura (C) Transmitancia (%)
22.5 99.92 27.5 99.96
27.3 99.26 29.2 98.72
29.3 98.68 30.9 68.79
31.3 97.79 31.9 1.935
32.3 4.812 37.3 0.1073
35.9 0.1507 - -

Al inicio de la medicin, a temperaturas por debajo de su LCST, la solucin polimrica es

transparente, por tanto el porcentaje de transmitancia medido es un valor cercano a 100 %, a
medida que incrementamos la temperatura del bao termostatizado, la transmitancia cae
ligeramente, casi imperceptible, pero al aproximarnos a la temperatura de transicin
conformacional (LCST), la transmitancia cae completamente llegando a ser un valor cercano a
cero, esta diferencia se puede ver en la figura 2.

Figura 2. PoliNIPAAm por encima y debajo de su LCST.

La figura 3 muestra la transmitancia del poliNIPAAm obtenido en el laboratorio disuelto en agua

destilada versus la temperatura. La transmitancia cae a 50% a 31.72C, este sera el valor LCST
del polmero obtenido en el laboratorio.
 110

100

90

80
Punto de inflexin
70
Transmitancia (%)

60

50 O
(31.72;50)
40

30

20

10

0
22 24 26 28 30 32 34 36 38
Temperatura de la solucin acuosa (C)

Figura 3. Determinacin del LCST del PoliNIPAAm (Laboratorio) en una solucin acuosa.

Seguidamente se determin bajo las mismas condiciones, la temperatura de transicin

conformacional (LCST) del PoliNIPAAm comercial comprado de Aldrich, en este caso se
disuelve 0.05 gramos del PoliNIPAAm (Aldrich) en 5 ml de agua destilada para obtener una
solucin al 1% en peso, los resultados obtenidos se muestran en la figura 4.

110

100

90

80
Punto de inflexin
70
Transmitancia (%)

60

50 O
(31.1;50)
40

30

20

10

0
26 28 30 32 34 36 38
Temperatura de la solucin acuosa (C)

Figura 4. Determinacin del LCST del PoliNIPAAm (Aldrich) en una solucin acuosa.
 2.3. Espectroscopia H-RMN del PoliNIPAAm
La figura 5 muestra el espectro RMN de caracterizacin estructural del poli(N-
isopropilacrilamida).

Figura 5. Espectro RMN del PoliNIPAAm.

3. Discusin
Generalmente, los polmeros que muestran un LCST se tratan en trminos de su punto de
enturbiamiento (Tcp) o la temperatura de separacin de fase, por ejemplo, la temperatura a la que
la solucin se vuelve de repente de color lechosa, que se conoce como Tcp. Cualquier reduccin
de la temperatura por debajo de Tcp tender a hacer que la solucin se torne clara debido a la
formacin de una sola fase. Estos tipos de polmeros han recibido una mayor importancia en los
ltimos aos, ya que tienen amplia gama de aplicaciones en la administracin de frmacos (Cui
et al, 2016), biotecnologa (Kobayashi y Okano, 2010), sensores (Jones et al, 2016), nanogeles
termosensibles (Zschoche et al, 2010; 2011), separacin por afinidad trmica y termogelacin
(Liu et al, 2009).

Uno de los polmeros termo-sensibles ms conocido es el poli (N-isopropilacrilamida)

poliNIPAAm. En la presente prctica, se utiliz el monmero de N-isopropilacrilamida para
construir este polmero termosensible. La unidad de monmero tiene tanto restos hidrfobicos
como hidrfilicos. Por esta razn se us dioxano en la reaccin; a fin de que se pueda disolver el
monmero y la reaccin pueda ser homognea en todo el volumen (Schneider y Lynch, 1949). El
dioxano tiene baja toxicidad, su punto de fusin a 101C permite la reaccin a 70C y no est
involucrado en la polimerizacin. Adicionalmente, cuando se precipita con ter dietlico, el
dioxano es miscible pero el poliNIPAAm puede precipitar sin problemas.

Por otro lado, en cuanto al poliNIPAAm obtenido, una solucin acuosa del polmero se somete a
transiciones entre el estado soluble y el estado insoluble en agua. Y esto se da dependiendo de su
distinta estructura altamente ordenada bajo diferentes temperaturas. El poliNIPAAm se ha
investigado intensamente ya que posee un intervalo de Tcp que va desde los 30 C a los 34 C
en agua (independiente de la concentracin de polmero) (Schild et al, 1990 y Fujishige et al,
1989). Fujishige et al. Estudiaron los cambios conformacionales de solucin acuosa de
poliNIPAAm con cambio de temperatura (Fujishige et al, 1989). Ellos reportaron que la solucin
acuosa de poliNIPAAm se somete a la transicin de ovillo a glbulo al calentarla. Debajo de su
LCST, existen cadenas de poliNIPAAm como ovillos debido a enlaces de hidrgeno de los grupos
amida con agua. Pero encima de su LCST se considera que los enlaces de hidrgeno se debilitan
plausiblemente y las energas cinticas de las molculas se hacen ms grandes que la energa de
enlace de hidrgeno entre el agua y las molculas. As, las interacciones hidrofbicas entre los
grupos de cadena principal hidrofbicas y los grupos isopropilos se vuelven dominantes, lo que
provoca un cambio en la conformacin de las cadenas de polmero de poliNIPAAm, de ser
lineales y flexibles a ser colapsados en glbulos debido a la agregacin intra o intermolecular de
restos hidrfbicos. Las interacciones que conducen a la atraccin entre el polmero-agua y
polmero-polmero son los factores dominantes para la determinacin del comportamiento de
LCST. Los factores estructurales que mejoran las interacciones polmero-agua dan lugar a
aumento de la LCST. Por el contrario, el incremento en las interacciones polmero-polmero
disminuye el valor de LCST. Precisamente, el ajuste de la LCST de poliNIPAAm a un rango de
temperatura ms amplio ofrece una mayor ventana de aplicaciones (Jain et al, 2015).

Como se menciona lneas arriba, Fujishige et al. (1989) haban demostrado que el Tcp era
independiente de la concentracin o del peso molecular de las cadenas del poliNIPAAm.
Fujishige et al. (1989) y ms tarde Schild et al. (1990), demostraron, mediante mediciones del
peso molecular con GPC, que el Tcp del poliNIPAAm no se modificaba significativamente con
variaciones del peso molecular cuando este iba en rdenes de por lo menos 5x104 de peso
molecular. Lo nico que modificaba el Tcp era la entropa configuracional del polmero, es decir,
la cantidad de grupos hidrofbicos. La mezcla de clorometilestireno con N-isopropilacrilamida
en un copolmero estadstico baja la temperatura de transicin de 32C (que corresponde al
homopolmero de poliNIPAAm) hasta 29C (Rueda et al, 2010). El resultado obtenido en nuestro
caso concuerda con los resultados obtenidos por Fujishige et al. (1989) y Schild et al. (1990). Las
mediciones con termocupla fueron ptimas para determinar la temperatura de transicin ptima
de LCST. En cuanto a la reaccin con estireno, la incorporacin de grupos hidrofbicos en la
cadena de poliNIPAAm debieron disminuir la temperatura de transicin, tal como lo que obtuvo
Rueda et al. (2010). Sin embargo, esto no puedo verificarse por problemas de solubilidad.
Posiblemente a temperaturas ms bajas y en un solvente que no llegue al punto de congelacin a
la temperatura de cero C, se pueda estudiar su LCST.

Con respecto al poliNIPAAm de Sigma Aldrich, al ser evaluado a una concentracin igual al
poliNIPAAm obtenido en laboratorio (de 1%) y al no importar el peso molecular de polmero,
cuando este es muy alto, es posible que la ubicacin de la termocupla y la homogenizacin de la
temperatura dentro de la cubeta haya influido en la medicin de la temperatura, tanto como en la
medida de la transmitancia. Schild et al. (1990) hall que cadenas polimricas muy cortas
aumentaban la temperatura de transicin de 32 a 34C; sin embargo, en nuestro caso, la
temperatura Tcp de sigma disminuy un grado, hasta 31 C. Si la termocupla se encontraba en el
fondo de la cubeta, y el haz de luz monocromtica pasa por el centro de la cubeta y a media altura,
es posible que no coincidiera la medicin coordinada.
4. Cuestionario
a) Calcular el rendimiento de la polimerizacin.
El rendimiento () se determina de la siguiente manera:

= 100

Masa real del poliNIPAAm: = 0.480

Masa terica del poliNIPAAm:

= +

= 0.500 + 0.040 = 0.540

Rendimiento de la polimerizacin
0.480
= 100 = 89%
0.540

Se obtuvo un rendimiento alto para la polimerizacin de NIPAAm (=89%) en comparacin con

estudios realizados por (Ringsdorf et al, 1991), que obtuvieron un rendimiento menor (=60%)
para las mismas condiciones exceptuando que la temperatura de reaccin que utilizaron fue menor
(60C).

El NIPAAm tiene alta actividad en la polimerizacin por radicales libres, debido a la interaccin
entre sus grupos funcionales (NH y C=O) de los monmeros por medio de enlaces de hidrogeno
(Diner et al, 2002)

b) Cul es el mecanismo de polimerizacin?

El mtodo que se us en la prctica fue el de polimerizacin por radicales libres del NIPAAm
iniciada por AIBN.

Iniciacin
N
N

H3C N CH3
70C
CH3 N N 2 H3C C + N N

CH3 CH3
AIBN

CH3
N N
O
HC CH3
O NH
H3C C + H3C NH
CH3 CH3 CH3
H3C CH3
NIPA
 Propagacin

CH3
H3C CH3

N HN O
O O NH CH3
H3C
HC CH3 H3C CH3
HC O
H3C NH HN CH3
N
CH3 CH3
CH3

CH3

H3C CH3
O NH
HN O N
CH3 H3C CH3
H3C
HC O CH2 CH CH2 HC
H3C n
N HN CH3 O
CH3 NH NH
CH3
H3C CH3 H3C CH3

Terminacin

Por combinacin

H CH2 CH CH2 HC + HC CH2 CH CH2 H

n n
O O O O
HN NH NH NH

H3C CH3 H3C CH3 H3C CH3 H3C CH3

H CH2 CH CH2 CH CH CH2 CH CH2 H

n n
O O O O
HN NH NH NH

H3C CH3 H3C CH3 H3C CH3 H3C CH3

Por desproporcionamiento

H CH2 CH CH2 HC + HC CH2 CH CH2 H

n n
O O O O
HN NH NH NH

H3C CH3 H3C CH3 H3C CH3 H3C CH3

H CH2 CH CH2 CH2 CH CH CH CH2 H

n n
HN
O
NH
O + O
NH
O
NH

H3C CH3 H3C CH3 H3C CH3 H3C CH3

c) Caracterizacin: Asumiendo que el espectro que se anexa corresponde al

PoliNIPAAm sintetizado, determinar que seales del espectro RMN-1H
corresponden a qu tipo de protones en la estructura del polmero.

Figura 6. Seales del espectro RMN-1 H con sus correspondientes protones.

 d) Explicar en qu consiste el fenmeno de transicin conformacional.
Los materiales sensibles a estmulos pueden inducir transiciones conformacionales en su
estructura en respuesta a estmulos externos como cambios de temperatura, pH, campos elctricos,
solventes, fuerza inica, etc. (Schmaljohann, 2006).

Dentro de los materiales sensibles a la temperatura, el ms investigado es el poliNIPAAm y sus

copolmeros. EL PoliNIPAAm presenta a transicin conformacional reversible de su estado
hinchado a colapsado dentro de un rango estrecho de temperatura alrededor de 32C en medio
acuoso. Por debajo de esta temperatura el poliNIPAAm permanece hinchado y soluble dentro de
la solucin, pero casi inmediatamente despus de pasar por encima de esta temperatura, el
poliNIPAAm colapsa y precipita en la solucin (Hirokawa y Tanaka, 1984).

Esta temperatura de transicin conformacional se denomina LCST (Lower critical solution

temperature), la cual se puede modificar por la adicin de copolmeros (copolmeros mas
hidrofbicos bajaran el LCST y copolmeros ms hidroflicos subirn el LCST).

Termodinmicamente las molculas de agua deben reorientarse alrededor de las regiones no

polares del NIPAAm, imposibilitando que se formen enlaces hidrogeno, estas estructuras han sido
denominadas clatratos. Este fenmeno tambin conocido como efecto hidrofbico, reduce la
entropa (S) y en vez de observarse un mayor desorden en el sistema, el sistema se ordena
parcialmente y como consecuencia S en negativo. A altas temperaturas la entropa domina a la
entalpia (H) de los enlaces de hidrogeno y una vez que la energa libre (G) se convierte en
positiva, ocurre la transicin y separacin de fases (Schild, 1992).

Por debajo de la LCST, la estructura coil (vase figura 7) es favorecida con una mxima
interaccin entre el polmero y el agua. A temperaturas mayores, los enlaces de hidrgeno
pNIPAAm H2O se debilitan y la tendencia del sistema a minimizar el contacto entre el agua y
las superficies hidrofbicas se incrementa y se produce la atraccin tanto entre grupos
isoproplicos vecinos (interacciones hidrofbicas) como entre grupos amida vecinos
(interacciones hidroflicas), entonces se da la transicin de estructura coil a globule (Schild,
1992).

Figura 7. Transicin conformacional de un polmero sensible a la temperatura (Weber,

Hoogenboom y Schubert, 2012).
5. Bibliografa
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