ANLISIS CLNICOS

Manejo y transporte de muestras

en microbiologa
ROBERTO LPEZ LPEZ
Doctor en Farmacia. Analista clnico.

El control de calidad en el laboratorio clnico implica un control

preanaltico, es decir, anterior a la obtencin de la muestra. La exactitud
comienza al asegurarse una obtencin adecuada de sta mediante la
utilizacin de recipientes apropiados para su recoleccin y otras tcnicas.
Hay que tener en cuenta que una vez que se haya obtenido la muestra,
pueden originarse errores en su transporte y manejo. En el presente trabajo
se repasan los diferentes tipos de muestras en microbiologa y su correcto
manejo y conservacin.

A la hora de obtener muestras Si es posible, debe obtenerse la

para bacteriologa hay que muestra antes de iniciar el trata-
tener en cuenta una serie de aspec- miento. Si esto no fuera posible debe
Asegurar la mnima contami-
nacin externa.
Recoger la muestra en el estadio
tos fundamentales: informarse al laboratorio sobre los de la enfermedad ms adecuado.
antibiticos que est recibiendo el Tomar muestra en cantidad
La muestra debe ser representa- paciente. suficiente.
tiva del proceso que se va a estudiar. La muestra debe ser tomada Emplear recipientes estriles.
La cantidad recogida debe ser del lugar en el que sea ms proba-
suficiente para asegurar un examen ble hallar los microorganismos Las causas ms frecuentes de fra-
completo y adecuado. sospechosos. caso son las siguientes:
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Fallo en las tcnicas de cultivo.
Toma de muestras inadecuada.
Deficiencias en el transporte.
Tipos de muestra
Las muestras utilizadas en el anli-
sis microbiolgico se pueden clasi-
ficar en tres tipos:
Muestras de zonas que albergan
flora normal. Piel, boca, tracto res-
piratorio, genitales externos, exu-
dados vaginales, uretrales etc. Una
muestra de estas zonas tendr flora
normal, lo que debe tenerse pre-
sente al valorar los resultados de
los exmenes microbiolgicos.
Muestras de zonas normalmente
estriles pero cuya secrecin o exu-
dacin implica el paso a travs de
una segunda zona que contiene
flora normal. A este grupo perte-
nece la orina, secreciones de vas
respiratorias inferiores, etc. Se rea-
liza una toma de muestra lo ms
asptica posible que minimice la
contaminacin por la flora normal.
Muestras de zonas normalmente
estriles que no son secreciones o exuda-
dos. Sangre, lquido cefalorraqu-
deo (LCR), etc.
La toma de muestra se realiza
por mtodos cruentos aspticos y
deben tomarse todas las precaucio-
nes necesarias para evitar contami-
naciones.
Manejo de las muestras
Las muestras deben se inoculadas
en el medio de cultivo adecuado.
Si no pueden ser inoculadas nada
ms llegar al laboratorio, deben ser
conservadas de forma adecuada
(tabla 1). Como norma general, las
muestras deben ser refrigeradas a
4-6 C. El perodo de refrigeracin
vara con el tipo de muestra. Con
la refrigeracin se pretende evitar
un crecimiento excesivo de flora
acompaante y mantener viables
los posibles patgenos.
Las muestras normalmente asp-
ticas, como la sangre o LCR,
deben ser mantenidas en estufa, no
refrigeradas. Dado que en estas
localizaciones no existe flora nor-
mal, se presume que los posibles
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ANLISIS CLNICOS
Tabla 1. Conservacin de algunos tipos de muestra en microbiologa
Nevera (4 C) Estufa (37 C)
Hongos LCR
Parsitos Hemocultivo
Micobacterias
Urocultivo
Exudados vaginal y uretral
Exudado de heridas
Exudados farngeos y nasales
Esputo
Coprocultivo
microorganismos que puedan con- Un medio de transporte habitual
tener sern agentes patgenos es el conocido como medio de
(tabla 2), as que lo que se intenta Stuart: agar semislido amortiguado
es favorecer su crecimiento. que contiene tioglicolato de sodio
Desde que la muestra es recogi- como agente reductor. Este medio
da hasta su procesamiento es fun- mantiene un pH favorable e impide
damental que no se contamine, tanto la deshidratacin de las secre-
que no se produzca una prolifera- ciones durante su transporte como al
cin excesiva de flora bacteriana y oxidacin o autodestruccin enzim-
que los posibles microorganismos tica de los patgenos presentes. Se
patgenos presentes en la muestra utiliza para el transporte de exuda-
permanezcan viables. Para esto es dos farngeos, conjuntivales, nasales
importante que la muestra sea y heridas. El medio de Cary y Blair
recogida, transportada y manipu- se utiliza para el transporte de mues-
lada de forma adecuada. tras fecales.
Cuando sea necesario enviar
muestras fuera del laboratorio (p.
Un medio de transporte ej., a un laboratorio de referencia),
deben tomarse precauciones espe-
habitual es el conocido ciales para mantenerlas en ptimas
como medio de Stuart: condiciones, as como para evitar
la rotura del envase. Para ello, la
agar semislido muestra se envasa en un recipiente
amortiguado que hermtico, bien tapado, que se
coloca dentro de un segundo reci-
contiene tioglicolato piente hermtico irrompible.
de sodio como agente Entre ambos recipientes debe colo-
reductor carse un material absorbente que
retenga el contenido en caso de
rotura. El envase externo debe
identificarse con el rtulo de mate-
Uno de los medios de recolec- rial biomdico/agentes biolgicos.
cin ms empleados para muestras Si la muestra es sangre, se separa el
de tipo exudado son los hisopos. Se suero y se enva en un tubo estril.
trata de varillas de madera o alam-
bre con punta de algodn, alginato
de calcio o dacrn (polister). Exis- Principales muestras
ten en el mercado hisopos que van en microbiologa
incorporados en tubos de plstico
que contienen diversos medios de Muestras del tracto respiratorio
transporte. Una vez recogida la Exudado farngeo. La muestra se
muestra, el hisopo se introduce en recoge con una torunda de algodn
el medio de transporte. frotando las reas amigdalares,
Los medios de transporte consisten donde se observe exudacin y for-
en agar semislido, que carece de macin de cpsulas.
nutrientes pero que contiene agentes Exudado nasal. La muestra se
reductores cuya funcin es prolongar toma introduciendo un hisopo por
la viabilidad de los microorganismos. la fosa nasal y rotando suavemente.
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Tracto respiratorio inferior
El esputo es una de las muestras
menos relevantes de las recibidas
en el laboratorio, dado que se con-
tamina de forma fcil al pasar por
el tracto respiratorio superior. Para
una obtencin adecuada del esputo
se aconseja lo siguiente:
Recoger la muestra a primera
hora de la maana.
Que se trate de una expectora-
cin profunda.
Cuando la muestra deba ser de
gran calidad (como en el caso de
los hongos) se puede recurrir a
otros mtodos de obtencin tales
como:
Lavado broncoalveolar.
Cepillado bronquial.
Aspirado transtraqueal.
Biopsia pulmonar.
Aspirado.
Coprocultivo
En el caso de tratarse de un copro-
cultivo, se mete un escobilln en
aquella zona donde se observe san-
gre, moco o pus y se guarda en un
medio de transporte adecuado.
En el caso del estudio de parsi-
tos, dado que se eliminan de forma
intermitente, la muestra se debe
recoger durante tres das alternos y
guardar en nevera hasta su envo al
laboratorio.
Para la investigacin de oxiuros
se utilizar la preparacin con
cinta de celofn. Se proporcionan
una serie de portaobjetos con papel
adhesivo transparente. A primera
hora de la maana se separa y se
pasa por los bordes del ano, pegn-
dola de nuevo al porta. Se debe rea-
lizar durante 6 das consecutivos.
Urocultivo
Se realiza en un frasco estril y se
puede hacer de tres formas:
Miccin. Tras un lavado con
agua y jabn de los genitales
externos, la orina se debe recoger a
primera hora de la maana y de la
mitad de la miccin.
Sondaje. Debe realizarse por per-
sonal experto, dado que se puede
provocar una infeccin. Es importan-
te recordar que en los pacientes que
ya son portadores de sonda la mues-
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Tabla 2. Principales microorganismos
aislados en diferentes muestras
biolgicas
Heridas
Estaphylococcus aureus
Estreptococcus pyogenes
Pseudomonas
Exudado conjuntival
Estreptococcus pneumoniae
Neisseria gonorrhoeae
Exudado uretral y vaginal
Neisseria gonorrhoeae
Candida albicans
Gardnerella vaginalis
Trichomonas
Exudado farngeo
Estreptococcus pyogenes
Estaphylococcus aureus
Neisseria meningitidis
Esputo
Hongos
Mycobacterium tuberculosi
Mycoplasmas
Coprocultivo
Salmonella
Shigella
Yersinia
Escherichia coli
Urocultivo
Proteus mirabilis
Pseudomonas
Serratia
tra se debe recoger de forma directa
de la sonda, pero nunca de la bolsa.
Puncin suprapbica. Permite
extraer la orina de forma directa de la
vejiga.
Exudado genital
En el caso de exudados uretrales se
introduce el hisopo unos 2 cm. Se
requiere la toma de dos muestras:
una para gonococos y otra para cla-
midias y ureoplasmas.
En el caso de exudados vaginales
y cervicales, se toma la muestra
con un hisopo. El exudado cervical
se obtiene introduciendo un hiso-
po en el canal cervical y girndolo
durante unos 30 segundos. En el
caso del exudado vaginal, la mues-
tra se toma introduciendo el hiso-
po en el interior de la vagina, pre-
ferentemente en la zona de moco y
pus.
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Tabla 3. Muestras representativas para anaerobios

Espordicamente Habitualmente

Tracto respiratorio LCR

Sistema genitourinario Lquido sinovial
Lquido pleural
Pus de infecciones profundas

Las muestras de gonococos se Anaerobios

transportan en medio Stuart y las Se trata de bacterias que no sobre-
de clamidias y micoplasmas en un viven en presencia de oxgeno.
sistema tampn con sacarosa y Normalmente aparecen en LCR y
antibiticos. en el lquido sinovial, aunque
tambin puede haber anaerobios
Hemocultivo en el intestino, en el tracto respira-
Despus de tomar las medidas ade- torio y en el sistema genitourina-
cuadas de desinfeccin se debe rio (tabla 3).
tomar la muestra, a poder ser, Estas muestras se suelen obtener
cuando el paciente sufra un con una aguja o catter y jeringa,
aumento de temperatura por enci- expulsando el aire contenido en la
ma de 38,5 C. misma.
Exudados conjuntivales
Se recogen con una torunda en la
zona de la lesin. Se debe realizar
Las muestras antes de utilizar ningn tipo de
de gonococos colirio; de ser as, esperar 24 horas
para hacer la toma.
se transportan en medio
Stuart y las de clamidias Exudados de heridas
y micoplasmas El procedimiento a seguir es el
siguiente:
en un sistema tampn
con sacarosa Limpieza de la zona con agua y
jabn, secando con una gasa estril.
y antibiticos Eliminar la costra.
Tomar la muestra con una
torunda empapada en solucin
salina.
Lo normal es la obtencin de 3 Si se trata de una ampolla se
muestras en 24 horas con un inter- debe pinchar con una aguja estril.
valo superior a una hora, aunque
generalmente se realizan 2-3 extrac- Hongos
ciones separadas unos 30 minutos. Unas 75 especies de hongos son
Se extraern para cada hemocultivo responsables de la micosis y gene-
unos 10 ml, que se pondrn en dos ralmente atacan a la piel (pitiria-
frascos: uno para grmenes aerobios sis, tias), pelo y uas, aunque
y otro para anaerobios. tambin pueden aparecer en algu-
A la hora de la obtencin de la nas mucosas (vaginal, bucal). Las
muestra se deben tener en cuenta micosis profundas (LCR, sangre,
una serie de aspectos: pulmn) son muy raras.
En el caso de la piel, se toman
No es aconsejable obtener la las escamas de la periferia por ras-
sangre a travs de un catter, por- pado con lanceta o bistur y se
que ste puede estar contaminado. recogen en un frasco estril. El
Es conveniente tomar las pelo se arranca con ayuda de una
muestras en lugares diferentes. pinza, mientras que en el caso de
Hay que evitar una posible conta- las uas se puede raspar la zona
minacin de la piel. afectada o cortar un fragmento.
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