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Microbiologa Ambiental
Practica de Laboratorio
Presentado por
Ella Hernndez
Cdigo: 39461984
Andrs Daza
Cdigo: 1065638850
Grupo colaborativo
358010_2
Tutor
Francy Tatiana Pea
1. Pesamos10 gramos de una muestra de agua residual, y la mezclamos con los 90 ml de agua
peptonada.
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Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente
Informe de Prctica de Laboratorio Microbiologa Ambiental
2. Realizamos diluciones seriadas desde 10-1 hasta 10-6. Esta tcnica es simplemente una serie de
diluciones simples que amplifican el factor de dilucin rpidamente, comenzando con una
pequea cantidad inicial de muestra. La fuente del material para diluir en cada paso viene del
material diluido en el tubo anterior. En una dilucin seriada el factor de dilucin total en cualquier
punto es el producto del factor de dilucin individual en cada uno de los tubos.
3. Tomamos las 6 cajas de Petri con agar y marcamos cada una con dilucin 10 -2 10-4 10-6
4. Sembramos las diluciones 10-2 10-4 10-6 tomando 0,1 ml de cada dilucin por superficie, con
ayuda del rastrillo homogenizamos la microgota sobre la superficie del agar sin romperlo.
5. Incubar por 24 horas a 37C y realizar el recuento.
6. Realizamos los clculos y sacamos el promedio aplicando su respectiva formula.
Recuento
Nc (Numero de colonias) x fd (Factor de dilucin) x 10 (Factor de correccin) = UFC (unidades
formadoras de colonia).
Muestra N 1. (10-2)
(116)(100)(10) = 116.000 UFC/ml muestra
Muestra N 2. (10-4)
(248)(10.000)(10) = 24.800.000 UFC/ml muestra
Muestra N 3. (10-6)
(638)(1.000.000)(10) = 638.0000.000 UFC/ml muestra
1. Tomamos una colonia de bacterias que los estudiantes y realizamos un frotis en una lmina
portaobjetos, colocando una gota de agua y con ayuda del asa redonda homogenizamos para
expandir el frotis en la lmina.
2. Secamos al aire libre la muestra y fijamos al calor la muestra en el mechero (se coloca 3 veces
rpidamente sobre el fuego la lmina)
3. Una vez la muestra estuvo fijada colocamos varias gotas de cristal violeta, dejando por un minuto
y luego lavamos en el grifo para quitar el exceso de colorante.
4. Colocamos unas gotas de Lugol, y dejamos por un minuto, lavamos.
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Procedimiento
1. Tomar 110 ml de agua del inodoro, la cual se inoculo con una asada de cultivo de E. coli,
agitamos muy bien.
2. Colocamos la muestra en la parte superior de la campana de filtracin permitiendo el paso del
agua de un lado al otro.
3. Con unas pinzas estriles retiramos la membrana y colocaos sobre el agar nutritivo.
4. Incubamos por 24 horas a 37C y observar el nmero de colonias con las caractersticas tpicas de
E. coli y Coliformes totales.
Los Coliformes son microorganismos como bacilos Gram negativos, no esporulados, aerobios o
anaerobios facultativos que fermentan la lactosa con produccin de cido y gas. La mayora de los
Coliformes pueden encontrarse en la flora normal del tracto digestivo del hombre o animales, por lo cual
son expulsados especialmente en las heces, por ejemplo Escherichia coli. Por esta razn, su presencia
constante en la materia fecal, los Coliformes son el grupo ms ampliamente utilizado en la microbiologa
como indicador de prcticas higinicas inadecuadas y contaminacin de los cuerpos de agua.
La enzima caracterstica de los Coliformes, -D-Galactosidasa se fija en el sustrato Salmon-
GAL y es la causa del color rojo de los Coliformes.
La enzima caracterstica de los E.coli, -D-Glucuronidasa se fija en el sustrato X-Glucuronida y
es la responsable de que las colonias positivas E.coli presenten un azul oscuro o violeta.
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Conclusiones
Esta prctica nos ense a diferenciar tipos de bacterias gracias a su coloracin y por sus formas de
agrupamiento, aprendimos a conocer su reaccin ante los productos qumicos, y conociendo sus
propiedades ya que se puede diferenciar los tipos de bacterias a los de los hongos.
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Referencias
Anexo