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Gmez, Alberto; Zarante, Ignacio; Martnez, Julio Csar; Valdivieso, Mara Alexandra;
Rubio, Leyla Luz; Tarazona, Gretty Paola; Snchez-Medina, Mario

Evaluacin de alergenos presentes en polvo y ambiente de algunas bibliotecas de

Bogot, D.C.
Universitas Mdica, vol. 46, nm. 1, 2005, pp. 13-20
Pontificia Universidad Javeriana
Bogot, Colombia

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Colombia

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Proyecto acadmico sin fines de lucro, desarrollado bajo la iniciativa de acceso abierto

Evaluacin de alergenos presentes en polvo y ambiente de
algunas bibliotecas de Bogot, D.C.
RESUMEN
Introduccin. Este trabajo busc identificar la presencia
de alergenos en el polvo y el ambiente de las colecciones de
cuatro bibliotecas de Bogot, D. C., y su implicacin en la
salud de sus trabajadores.
Mtodos. A partir de las muestras tomadas del ambiente y
el polvo se realizaron tcnicas de cultivo microbiolgico,
sonicacin, cuantificacin y electrofresis de protenas.
Resultados. Los hongos en el ambiente que se presentaron
con mayor frecuencia fueron Cladosporium sp., seguido
por Penicillium sp. y Aspergillus sp. No se observ creci-
miento de hongos en las muestras de polvo. Se selecciona-
ron al azar muestras de polvo para la deteccin de caros
con resultados negativos. Otra fraccin de las muestras se
utiliz para la cuantificacin y la electrofresis de prote-
nas en la que se puso en evidencia un patrn de bandas
comn en las cuatro bibliotecas. La poblacin de indivi-
duos alrgicos fue positiva en la prueba cutnea frente a
caros (DpDf) en 7 de 9 casos. La capacidad alrgica a los
caros se confirm mediante la determinacin de IgE es-
pecfica (Dp1) en la que 5 de 9 casos presentaron anticuerpos
13
Alberto Gmez*
Ignacio Zarante*
Julio Csar Martnez* *
Mara Alexandra Valdivieso* **
Leyla Luz Rubio* ***
Gretty Paola Tarazona* ****
Mario Snchez-Medina*****
especficos. Ninguno de los individuos reaccion frente a
los hongos (Penicillium sp., Cladosporium sp. y Alternaria
sp.). Se encontraron niveles sricos elevados de IgE total y
eosinofilia nasal, lo cual se correlaciona con el estado cl-
nico de los pacientes.
Conclusiones. La ausencia de caros y de hongos en las mues-
tras tomadas sugiere que la sintomatologa clnica inducida
por el ambiente o el polvo de las bibliotecas puede ser el
resultado de una reaccin a alergenos distintos a caros y
hongos.
Palabras clave: alergia, caros, bibliotecas, hongos.
* Profesor asociado, Instituto de Gentica Humana, Facultad de
Medicina, Pontificia Universidad Javeriana, Bogot, D. C.,
Colombia.
** Profesor asistente, Instituto de Gentica Humana, Facultad de
Medicina. Pontificia Universidad Javeriana, Bogot, D. C.,
Colombia.
*** Instituto de Gentica Humana, Facultad de Medicina. Pontifi-
cia Universidad Javeriana, Bogot, D. C., Colombia.
**** Facultad de Ciencias, Pontificia Universidad Javeriana, Bogo-
t, D. C., Colombia.
* * * * * Director cientfico, Asociacin Colombiana de Diabetes, Bogo-
t, D. C., Colombia.
UNIVERSITAS MDICA 2005 VOL. 46 N 1
14
ABSTRACT
Introduction. This work was focused on the identification
of allergens present in the dust and environment of four
public libraries in Bogot, Colombia, and to define their
implication in the health of library workers.
Methods. Microbiological investigations together with
sonication, quantification and protein electrophoresis were
performed on environments and dust samples of these
libraries.
Results. These studies showed three main types of fungi on
these environments: Cladosporium sp., Penicillium sp., and
Aspergillus sp., the last of which was only found in one of
the libraries. No growing of fungi could be detected in the
dust samples collected. A statistically randomised study was
performed on the collected dust in search or mites, but no
mites could be detected in these libraries. Another fraction
of the dust was used for protein quantification and
electrophoresis, in which we found a common banding
pattern. The population studied was diagnosed as allergic,
and was shown to react positively to skin tests against mites
(Dp1) in 7/9 cases. The serum levels of total IgE and nasal
eosinophilia were found to be elevated in these patients,
which correlates which their clinical state.
Conclusion. The absence of mites in the dust of these
libraries suggests that the allergic symptoms may result
from a reaction against allergen different from the classical
mites.
Key words: allergy, mites, libraries, fungi.
INTRODUCCIN
El ser humano vive en un medio en el que abundan sustan-
cias capaces de producir reacciones inmunolgicas. El con-
tacto con un antgeno produce no slo incremento de una
reaccin inmunitaria como mecanismo defensivo, sino tam-
bin reacciones que pueden ser nocivas para los tejidos[1].
Hay antgenos exgenos en el polvo, el polen, los ali-
mentos, los frmacos, los agentes microbianos y las sustan-
cias qumicas, que desarrollan reacciones inmunolgicas que
van desde leves molestias, como el prurito cutneo, hasta
enfermedades potencialmente mortales como el choque
anafilctico[1]. Los hongos saprofitos, por ejemplo, son
alergnicos. Los mohos, por su parte, son importantes
alergenos del ambiente y se encuentran localizados en forma
restringida en determinadas reas o diseminados ampliamen-
te con variaciones estacionarias y diurnas, desencadenadas
por las condiciones del clima. Alternaria tenuis y
GMEZ A., ZARANTE I., MARTNEZ J.C.,VALDIVIESO M.A., RUBIO L.L., TARAZONA G.P., SANCHEZ M.M., EVALUACIN DE ALERGENOS...
Cladosporium sp. son fuentes de alergenos encontrados en el
exterior de las viviendas y merecen especial atencin en aque-
llas personas que trabajan en agricultura. Penicillium sp. y
Aspergillus sp. son los alergenos ms importantes en stanos
o cuartos con ambientes hmedos[1].
Las diversas reacciones producidas por el contacto con es-
tos antgenos corresponden a hipersensibilidad o alergias que
pueden ser desencadenadas por la interaccin de los antgenos
con un anticuerpo humoral o por reacciones inmunes mediadas
por clulas[1]. La hipersensibilidad es una caracterstica del
individuo y se pone de manifiesto al segundo contacto con el
antgeno que la provoca[1]. Coombs y Gell [2] describieron
cuatro tipos de reacciones de hipersensibilidad: hipersensibili-
dad tipo I o inmediata, mediada por IgE; hipersensibilidad tipo
II o citotxica, dependiente de anticuerpos; hipersensibilidad
tipo III, mediada por complejos inmunes, e hipersensibilidad
tipo IV o retardada, mediada por clulas.
Este trabajo pretende evaluar la presencia de alergenos en
el polvo y el ambiente de las colecciones de cuatro bibliote-
cas de Bogot, D. C., causantes de reacciones alrgicas en el
personal que labora en dichas reas. Para lograrlo se han uti-
lizado tcnicas de cultivo microbiolgico, sonicacin,
cuantificacin y electrofresis de las protenas contenidas en
el polvo; y tcnicas inmunolgicas como la prueba cutnea,
IgE total, IgE especfica y eosinofilia nasal, empleadas en el
diagnstico de alergia de los trabajadores de la biblioteca
que manifestaron sntomas alrgicos causantes del deterioro
de su salud y disminucin del rendimiento laboral.
La determinacin srica de IgE total mostr que los indi-
viduos alrgicos (grupo en estudio) producen abundantes
anticuerpos IgE especficos para Dermatophagoides
pteronyssinus. En algunos casos se observ que los niveles
elevados de IgE especfica no son lo suficientemente signifi-
cativos como para aumentar la IgE total.
MATERIALES Y MTODOS
Poblacin de estudio. La poblacin de estudio fue una mues-
tra de 16 trabajadores de cuatro bibliotecas de Bogot, nueve
de los cuales presentaban sntomas caractersticos de alergia
y se encontraban en sitios ricos en polvo, y en quienes era
posible descartar una simple irritacin de las mucosas. Las
bibliotecas seleccionadas fueron incluidas por conveniencia
y su ambiente se determin en una temperatura promedio de
19,54oC y una humedad relativa promedio de 65,9%.
Criterios de inclusin. Se incluyeron auxiliares de biblio-
teca que presentaban los siguientes sntomas sugestivos de
alergia al estar en sitios ricos en polvo: rinorrea, enrojeci-
miento de la mucosa nasal, coriza y exantema drmico.

Criterios de exclusin. Se excluyeron aquellos auxiliares
que, estando en lugares ricos en polvo, no manifestaban snto-
mas alrgicos; tambin aqullos que estaban tomando algn
medicamento, en especial antihistamnicos, que interfiriera con
la prueba cutnea. Por consiguiente, solamente se incluyeron
pacientes con sntomas de alergia sin tratamiento.
Toma de muestras del ambiente. Para seleccionar los es-
tantes, se disearon planos de cada coleccin. Posteriormen-
te, se colocaron cajas de Petri desechables que contenan los
medios agar Sabouraud y agar extracto de malta y se ubicaron
en la parte superior, media e inferior de los estantes, donde
fueron expuestas por 12 minutos. Luego, se incubaron a tem-
peratura ambiente y se observaron diariamente durante 7 das.
El nmero de estantes se determin tomando el 10% del total
de estantes de cada coleccin de las bibliotecas en estudio,
as: Biblioteca Central, Pontificia Universidad Javeriana, 92
estantes; Biblioteca Eclesistica, Pontificia Universidad
Javeriana, 25 estantes; Biblioteca Fundacin Santa Fe, 12
estantes, y Archivo General de la Nacin, 39 estantes.
Procesamiento de muestras del ambiente. Las colonias de
hongos que se presentaron en las muestras se aislaron mediante
pases sucesivos. Posteriormente, se realiz el examen
microscpicoempleando la tcnica con cinta adhesiva transpa-
rente que, de acuerdo con la literatura, es la ms adecuada[3].
Toma de muestras de polvo. En los estantes selecciona-
dos se recogieron muestras de polvo de diferentes sitios como
la superficie de los estantes, los libros y las revistas, usando
una aspiradora Black & Decker, modelo Metal SX1000. Las
muestras obtenidas se transfirieron a bolsas de polietileno
(por cada muestra de polvo se obtuvieron tres alcuotas) utili-
zando una cabina de flujo laminar y, luego, se almacenaron a
4C antes de ser procesadas.
Cultivo de muestras de polvo. El polvo recolectado se
emulsion en solucin salina al 0,85% y se incub a tempera-
tura ambiente por 24 horas. Posteriormente, se hizo siembra a
profundidad de la emulsin con asa redonda en cajas de Petri
con agar Sabouraud dentro de la cabina de flujo laminar ver-
tical. Luego, se incubaron las cajas a temperatura ambiente y
se observaron diariamente durante 7 das[4].
Deteccin de caros en muestras de polvo. Se selecciona-
ron aleatoriamente 30 muestras. Cada una se pes en una
balanza analtica; una parte de la muestra se examin en l-
minas excavadas y otra parte se analiz en el estereoscopio[5].
Preparacin del extracto de protenas. Las muestras de
polvo se diluyeron con solucin tampn PBS en relacin 1:3
(1 g de polvo con 3 ml de solucin tampn PBS) y 30 l de
inhibidor de proteasas PMSF(del ingls, Phenyl Methyl
Sulphonyl Fluoride) (Sigma, USA, Ref. P-7627). Las mues-
15
tras se sometieron a un proceso de sonicacin correspondien-
te a dos ciclos de 15 minutos cada uno con descansos de 7
minutos. Se centrifugaron a 13.200 rpm por 30 minutos a 4C,
se recuper el sobrenadante (sonicado) y se almacen a 4C[6].
Cuantificacin de protenas. La cuantificacin proteica
del sonicado se efectu por el mtodo de Lowry modificado
para conocer la concentracin proteica total. Para ello, se uti-
liz el estuche BCA Micro Protein Determination (Sigma,
USA, Ref. 690).
Electrofresis de protenas. La electrofresis (SDS-PAGE)
del sonicado de polvo se realiz en un gel de poliacrilamida
en gradientes de 4 a 12% a 150 voltios constantes durante
una hora en una cmara de doble celda Mini Protean II (Bio-
Rad). Despus del corrido electrofortico, los geles se colo-
rearon con azul de Coomassie[7]. Para esta prueba se
incluyeron las muestras cuya concentracin de protenas era
mayor de 15 mg/dl.
Prueba cutnea. Se utilizaron los siguientes extractos
alergnicos: malezas, gramneas, DpDf (del latn,
Dermatophagoides pteronyssinus-Dermatophagoides
farinae), Penicillium sp., Aspergillus sp., Alternaria sp.,
Cladosporiumsp.; se establecieron los patrones y se purifica-
ron en diluciones de 1/100. Como control positivo se utiliz
histamina en proporcin de 1/10 y, como control negativo,
solucin salina glicerinada.
Se limpi la zona de la prueba con algodn embebido en
alcohol; luego, con jeringa de insulina, se aplic
intradrmicamente 0,1 ml del alergeno correspondiente en el
brazo, espaciados 3 cm, aproximadamente, uno de otro. Pasa-
dos 15 minutos de aplicado el control positivo, se hizo la
lectura con una regla y se obtuvo el dimetro en milmetros
del habn y del eritema. Se consider como una prueba posi-
tiva a la reaccin de cualquiera de los alergenos que tuvieran
el dimetro del habn mayor o igual al control positivo[8].
Cuantificacin de IgE total. La IgE total se determin con el
analizador Immulite (ensayo inmunomtrico quimioluminiscente),
donde la quimioluminiscencia combina alta sensibilidad de deteccin,
rapidez en los anlisis y mayor estabilidad de los reactivos. El estuche
utilizado sugiere menos de 150 UI/ml[9]como valor de referencia para
individuos mayores de 15 aos.
Cuantificacin de IgE especfica para caros. La IgE
especfica se determin con el analizador Immulite (Diagnostic
Products Corporation, USA) para la deteccin en suero de
anticuerpos IgE especficos del alergeno para caros D.
pteronyssinus-Dp 1. El estuche utilizado sugiere como valo-
res de referencia los siguientes: menor de 0,35 ng/ml, negati-
vo para el alergeno de caros, y mayor de 100 ng/ml, muy
positivo para el alergeno de caros.
UNIVERSITAS MDICA 2005 VOL. 46 N 1
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Eosinofilia nasal. Al grupo de estudio se le tom una
muestra de cada fosa nasal, de la cual se realiz un extendido
que se ti con colorante de Wright. El resultado se expres
en porcentaje y el valor de referencia fue menor del 10% para
cada fosa nasal[9].
Anlisis estadstico. Las diferencias entre valores porcen-
tuales se evaluaron con la prueba de ji al cuadrado con un
nivel de confianza del 95%. Las comparaciones entre prome-
dios se realizaron con la prueba t de Student con un nivel de
confianza del 95%.
Durante el muestreo de las bibliotecas se tuvieron en cuenta
las condiciones ambientales, como la temperatura y la hume-
dad. La temperatura promedio oscil entre 17 y 22C.
Las bibliotecas de la Pontificia Universidad Javeriana y
de la Fundacin Santa Fe se encontraron por encima del ran-
go normal para este tipo de ambiente, el cual se encuentra
entre 17 y 19C[10]. La humedad relativa promedio se deter-
min entre 61 y 72%, y en la totalidad de las bibliotecas se
encontr por encima del rango normal comprendido entre 50
y 60% (figuras 2 y 3).

RESULTADOS

Anlisis del crecimiento de hongos en el ambiente. Se

observ crecimiento significativo de hongos tpicos de
ambientes interiores y se obtuvo Cladosporium sp. en
83,3% en la biblioteca de la Fundacin Santa Fe, en 78,3%
en la Pontificia Universidad Javeriana, en el Archivo Ge-
neral de la Nacin en 53,1% y en la Biblioteca Eclesisti-
ca, 46,7%. El segundo ms frecuente fue Penicillium sp.,
el cual se present en 100% en la Biblioteca Eclesistica;
32,6% en la Pontificia Universidad Javeriana; 25% en el
Archivo General de la Nacin, y 16,7% en la Fundacin
Santa Fe. Aspergillus sp. se present en el Archivo Gene-
ral de la Nacin en 3,1%; esta fue la nica biblioteca en la
cual se aisl este tipo de hongo. Tambin encontramos, en
17,3% del total, algunas estructuras micticas indetermi-
nadas que corresponden a hifas estriles (figura 1).
Figura 2. Promedio de temperatura en bibliotecas

Figura 1. Distribucin porcentual del crecimiento de hongos en el ambiente. Figura 3. Promedio de la humedad relativa en bibliotecas.

GMEZ A., ZARANTE I., MARTNEZ J.C.,VALDIVIESO M.A., RUBIO L.L., TARAZONA G.P., SANCHEZ M.M., EVALUACIN DE ALERGENOS...
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Anlisis de muestras de polvo. En la siembra a profundi-

dad de las muestras de polvo recolectadas, no se observ cre-
cimiento de hongos (tabla 1). En las muestras seleccionadas
para el anlisis de caros, se pudo determinar que presentan
diversidad de polvos y elementos contaminantes (restos de
insectos y piedras), pero no se observaron caros en las mues-
tras analizadas (tabla 2).

Bibliotecas Nmero de Nmero

estantes de cultivos
positivos
Pontificia Universidad Javeriana 92 0
Eclesistica Universidad Javeriana 25 0
Archivo General de la Nacin 39 0
Fundacin Santaf 12 0
Tabla 1. Resultados del crecimiento de hongos en muestras de polvo.

Bibliotecas Nmero de Nmero de

estantes caros
Figura 5. Electroforesis SDS-PAGE del sonicado de polvo de bibliotecas.
General de la Universidad Javeriana 12 0
Eclesistica de la Universidad Javeriana 6 0
Archivo General de la Nacin 9 0 Prueba cutnea. De los alergenos empleados para esta
Fundacin Santaf 2 0 prueba, el que present mayor reaccin en los pacientes fue el
extracto Dp/Df con 75%, seguido del extracto de malezas con
Tabla 2. Resultados de los anlisis de caros en muestras de polvo.
25% y gramneas con 12,5%. Los extractos de hongos no
provocaron ninguna reaccin en los pacientes del grupo en
En la prueba de cuantificacin de protenas, se observ estudio (figura 6).
una alta concentracin proteica en la totalidad de las mues-
tras analizadas (figura 4). El comportamiento electrofortico
del sonicado mostr que las protenas presentes en el polvo
estn por debajo del peso molecular del patrn de albmina,
es decir, 66 kd, con un patrn comn de bandas (figura 5).

Figura 4. Promedio de la concentracin proteica (ug/mL) del sonicado Figura 6. Distribucin porcentual de los trabajadores segn respuesta a
por biblioteca. alergenos en la prueba cutnea.

UNIVERSITAS MDICA 2005 VOL. 46 N 1

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Cuantificacin de IgE total. Los niveles sricos de IgE
total superiores al valor de referencia de 150 UI/ml se consi-
deraron indicativos de posibles pacientes alrgicos. El 44,4%
del grupo de estudio present niveles elevados; el 55,6%
restante se encontr dentro de los niveles normales (figura 7).
Figura 7. Distribucin del grupo segn niveles de IgE total (UI/mL).
Cuantificacin de IgE especfica (RAST). Los niveles de
IgE especfica inferiores a 0,35 ng/ml se consideraron negati-
vos para el alergeno de carosDp1; niveles superiores a este
valor se consideraron positivos. El 66,6% del grupo en estu-
dio fue positivo para la prueba de RAST y el 33,4% restante
se consider negativo (figura 8).
Figura 8. Distribucin del grupo en estudio segn niveles de
IgE especfica.
GMEZ A., ZARANTE I., MARTNEZ J.C.,VALDIVIESO M.A., RUBIO L.L., TARAZONA G.P., SANCHEZ M.M., EVALUACIN DE ALERGENOS...
Eosinofilia nasal. Se tom como cifra lmite el 10% de
eosinfilos en fosa nasal; aqullos que presentaron valores
mayores del 10% se consideraron pacientes atpicos. El 75%
del grupo en estudio present eosinofilia mayor del 10% y el
25% restante se consider normal (figura 9).
Figura 9. Distribucin de la eosinofilia nasal del grupo en estudio.
DISCUSIN
La enfermedad alrgica es una entidad patolgica que se pro-
duce por la relacin inadecuada del individuo susceptible
con su medio ambiente. El contacto repetido de los alergenos
con clulas de su sistema inmune, resulta en la produccin de
cantidades elevadas de IgE, considerada como la molcula
efectora de la entidad patolgica alrgica.
De 168 cajas de Petri expuestas al ambiente de las biblio-
tecas, se observ crecimiento de hongos en el 58,9%; el 41,1%
no present crecimiento y el 7,1% se consider contaminado.
La humedad y la temperatura elevadas se correlacionaron con
la presencia de hongos en el ambiente, pero no con la ausen-
cia de caros en el polvo, debido a que estas condiciones
podran favorecer el crecimiento de estos artrpodos.
Segn la literatura, la mayora de los alergenos son prote-
nas de bajo peso molecular que estn entre 5 y 70 kd[11]. Las
protenas encontradas en este estudio cumplen este requisito,
por lo que se consideraron como posiblemente alergnicas.
El alto porcentaje de sensibilizacin al extracto de caros en
la poblacin estudiada se puede deber a una exposicin pro-
longada a estos hipotticos alergenos en sitios diferentes a
estas bibliotecas.

En este trabajo se estableci que la microbiota de las co-
lecciones de las bibliotecas es diversa, con mayor prevalen-
cia de Cladosporium sp. y Penicillium sp., debido a que las
condiciones que favorecen su presencia son la acumulacin
de polvo y de materiales orgnicos y la humedad elevada. La
aparicin de hongos en el ambiente de las colecciones no
indica necesariamente que stos sean los causantes de las
alergias de los trabajadores, pues las pruebas cutneas reali-
zadas muestran que la totalidad del grupo en estudio no pre-
sent reaccin alrgica al panel de extractos de hongos
utilizado en la prueba.
La reaccin negativa a los extractos de hongos hace pen-
sar que los sntomas alrgicos del grupo de estudio se deben
a alergenos diferentes a los estudiados. El 11,1% no present
reaccin positiva a ninguno de los alergenos probados, aun-
que llenaron todos los criterios de inclusin establecidos. La
poblacin de estudio present niveles de IgE total elevados
correlacionados con un aumento en la produccin de IgE
especfica, excepto en dos casos en los cuales los niveles de
IgE especfica elevados no fueron suficientemente significa-
tivos como para aumentar los niveles de IgE total.
La prueba cutnea y la prueba de IgE especfica son
confiables y compatibles en personas con alta sensibilidad a
un alergeno determinado[12]; sin embargo, uno de los traba-
jadores del grupo en estudio tuvo una reaccin positiva al
alergeno de los caros en la prueba cutnea y un valor de IgE
especfica para Dp 1 negativa. Este hecho es muy importante
ya que pone de manifiesto la posible reaccin cruzada con la
protena alergnica del caro Df o a una protena diferente a
Dp 1 (Dp2, Dp4, Dp6, Dp9).
La mayora del grupo de estudio (7/9) perteneciente a la
Biblioteca Central de la Pontificia Universidad Javeriana, pre-
sent un alto porcentaje de eosinfilos en la prueba de
eosinofilia nasal, posiblemente a causa de una exposicin
inevitable al polvo de esta biblioteca durante los das de la
prueba, debido a que en esa poca los trabajadores realizaban
la limpieza de las colecciones. En el curso de la limpieza no
se encontraron evidencias de otros insectos caractersticos de
ambientes cerrados, tales como araas y cucarachas.
CONCLUSIONES
La presencia de hongos en los ambientes de estas bibliotecas,
se ve favorecida por la acumulacin de polvo y por la hume-
dad elevada[13]. Hay presencia de hongos en el ambiente,
mas no en el polvo de las bibliotecas. Los hongos no son los
causantes de los sntomas alrgicos en la poblacin estudia-
da. La ausencia de caros en las muestras de polvo no descar-
ta su eventual presencia en estas bibliotecas. Los alergenos
19
de caro son causa relevante dentro de las alergias respirato-
rias en la poblacin estudiada, pero no constituyen la nica
causa. Se confirm la existencia de protenas posiblemente
alergnicas en el polvo de estas bibliotecas. Y, se observ
correlacin entre los niveles de IgE total e IgE especfica en
los individuos afectados.
AGRADECIMIENTOS
Este trabajo se llev a cabo gracias al patrocinio del Instituto
Colombiano para el Desarrollo de la Ciencia y la Tecnologa
Francisco Jos de Caldas, Colciencias. Queremos agradecer a
los investigadores del Instituto de Gentica Humana de la
Pontificia Universidad Javeriana y a los trabajadores de la
Biblioteca Central Pontificia Universidad Javeriana, la Bi-
blioteca Eclesistica, la Biblioteca Fundacin Santa Fe y el
Archivo General de la Nacin que colaboraron en la realiza-
cin del presente estudio.
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