Ingeniera en Biotecnologa de los Recursos Naturales

Fsico Qumica
Integrantes:
Varela Sebastian
Ponce Camila
Grijalva Nicolas
Carvajal Karol
Basantes Christopher
Tema: REACCIONES MULTISUSTRATOS
Las reacciones simples de transformacin enzimtica se dan con un solo sustrato y
un solo producto.

Pero en sistemas biolgicos casi esto no se da a salvo de casos excepcionales de

reacciones de isomerizacin. Las reacciones donde intervienen ms de un sustrato
son las ms comunes.

CARACTERSTICAS
Transferencia de un grupo funcional especfico
De un sustrato a otro por ejemplo grupos fosfato o metilos
Reacciones redox en que los sustratos son coenzimas redox.
Ejemplos de COENZIMAS REDOX.
1. NAD+
2. NADH
3. FAD/FADH

NOMENCLATURA
1. En cuanto al nmero de sustratos o productos:
 2. En cuanto al orden en que los sustratos entran y salen:

Desplazamiento secuencial: Ordenadas y Aleatorias.

Doble desplazamiento: Ping-pong

MTODO DE CLELAND

Se sigue el siguiente sistema de nomenclatura para la representacin de reacciones

enzimticas:

Para esquematizar los sistemas de las reacciones se lo realiza de la siguiente

manera:

El progreso de las reacciones se lo simboliza con una lnea horizontal.

La entrada de sustratos y salida de productos se los representa con flechas
de acuerdo a la direccin:
Si es un sustrato Si es un producto

REACCIONES BISUSTRATO

Ocurren cuando una enzima cataliza una reaccin con dos sustratos y se obtienen
dos productos.

Alrededor del 60% de las reacciones enzimticas.

ORDEN DE ENTRADA Y SALIDA DE SUSTRATO PRODUCTO

Reacciones

Consecutivas o de Ping-Pong o de doble

desplazamiento nico. desplazamiento.

Ordenadas Aleatorias

Reacciones consecutivas o de desplazamiento nico

Todos los sustratos se unen a la enzima antes de que se libere cualquier producto.
Se forma un complejo ternario entre la enzima y ambos sustratos. Son de dos tipos:
ordenadas y aleatorias.

Reacciones consecutivas ordenadas

Tienen un orden consecutivo de ligacin de sustrato y liberacin de productos.
Tienen un sustrato gua, el cual permitir que los dems sustratos se unan.

EJEMPLO

En el mecanismo secuencial ordenado, la coenzima se une siempre primero y el

lactato se libera siempre primero. Esta secuencia se representa como sigue, en una
notacin de Cleland:

La enzima se estructura como un complejo ternario: primero, comprende a la

enzima y los sustratos y, despus de la catlisis, a la enzima y los productos.
Reacciones consecutivas aleatorias

Los sustratos se ligan sin un orden, es decir cualquiera de los sustratos puede ligarse
primero seguido por el otro sustrato.

EJEMPLO

Se puede ejemplificar fcilmente con la reaccin de la creatina quinasa, donde se

forma fosfocreatina y ADP a partir de ATP y creatina:

Tanto la creatina como el ATP se pueden unir primero, y posteriormente se puede

liberar en primer lugar la fosfocreatina o el ADP.

Las reacciones secuenciales al azar tambin pueden representarse en la notacin de

Cleland:

Aunque el orden de ciertos sucesos es al azar, la reaccin tambin pasa a travs de

complejos terciarios, que incluyen primero a los sustratos y despus a los productos.

Reacciones ping-pong o de doble desplazamiento

Reacciones de transferencia de grupos en donde uno o ms productos son liberados

antes de que todos los sustratos se liguen a la enzima.

Sustituto intermedio de la enzima. No se forma compuesto ternario.

Reaccin en dos fases:

PING: Un grupo funcional del A (sustrato) es trasnferido a P (producto) formando

E`.

PONG: El grupo funcional es desplazado de la E por B (segundo sustrato) y se

obtiene Q (segundo producto).

Ejemplo

Las reacciones que transfieren grupos amino entre aminocidos y alfa-cetocidos

son ejemplos clsicos de mecanismos de doble desplazamiento. La enzima aspartato
aminotransferasa cataliza la transferencia de un grupo amino desde el aspartato al
alfa-cetoglutarato:

La secuencia de sucesos se puede describir en el diagrama siguiente:

Despus de que el aspartato se una a la enzima, este separa el grupo amino del
aspartato para formar un intermediario de la enzima sustituida. Posteriormente,
sale el primer producto: el oxalacetato. El alfa-cetoglutarato, el segundo sustrato, se
une a la enzim, acepta el grupo amino de la enzima modificada y despus libera
glutamato el producto final.

GRFICA DE REACCIONES CONSECUTIVAS

GRFICA DE REACCIONES PING-PONG

APLICACIN
Caracterizacin qumico-Fsica de la peroxidasa de palma Chamaerops excelsa
 Universidad DSalamanca

Nazareth Hidalgo Cuadrado (2011)

Las peroxidasas catalizan la oxidacin de una gran variedad de sustratos orgnicos

e inorgnicos, utilizando el perxido de hidrgeno o un hidroperxido orgnico
como molcula aceptora de electrones como la enzima Frrrica nativa. Las
reacciones en las que estn implicadas las peroxidasas son reacciones bisustrato y
siguen un mecanismo Ping-Pong (Cleland, 1970, 1990).
 Mtodo experimental

PURIFICACIN DE PEROXIDASA DE PALMERA Chamaerops excelsa:

Recoleccin y limpieza de las hojas.
Homogeneizacin.
Extraccin de pigmentos mediante reparto bifsico.

Pasos de la purificacin

A. Hojas limpias y cortadas.

B. Congelacin en N2lquido.
C. Polvo obtenido tras la trituracin.
D. Homogeneizacin en agua.
E. Decantacin inicial.
F. Reparto bifsico final.
 Esquema del mecanismo ping pong
En los mecanismos de reaccin Ping-Pong, ya que las tres formas de la enzima:
SIMILARES
E (enzima en estado nativo)
CoI (compuesto I)
CoII (compuesto II)
Es razonable que AH2 tiene alguna afinidad por E as como por CoI y CoII, y si los
sitios activos en CoI y CoII no estn demasiado ocupados para la adsorcin de H2O2,
tambin el H2O2 mostrar algo de afinidad por CoI y CoII

ESTUDIOS CINTICOS DE LA PEROXIDASADE PALMA

La peroxidasa de palma Chamerops excelsa, en presencia de H2O2, oxida a un
determinado nmero de sustratos orgnicos (ABTS, guayacol, o-dianisidina,
ofenilendiamina) siguiendo un mecanismo Ping-Pong Bi-Bi. En cuanto a su
especificidad por sustratos, presenta mayor afinidad por los sustratos con ms
tomos aceptores de enlaces por puente de H, as tiene mayor afinidad para el
sustrato ABTS que para el resto de los sustratos estudiados, debido a sus 10 tomos
aceptores (Hidalgo Cuadrado et al., 2011a).
BIBLIOGRAFA
Cardell Rosales, L. (2013). Bioqumica mdica (Vol. I). Recuperado a partir de
http://gsdl.bvs.sld.cu/cgi-bin/library?e=d-00000-00---off-0prelicin--00-0----0-10-0---0---0direct-
10---4-------0-1l--11-zh-50---20-preferences---10-0-1-00-0-0-11-1-0gbk-
00&a=d&c=prelicin&cl=CL1&d=HASH144603c37e4fece4af332d.10.4.3

Hidalgo, N. (2011). Caracterizacin qumico.fsica de la peroxidasa de palma Chamaerops

excelsa. Obtenido de Vniversidad D SALAMANCA:
https://gredos.usal.es/jspui/bitstream/10366/110695/1/DQFI_Hidalgo_Cuadrado_N_Caracteri
zacion.pdf

Voet, D., & Voet, J. G. (2006). Bioqumica. Ed. Mdica Panamericana. Recuperado a partir de
https://books.google.com.ec/books?id=r5bedH_aST0C&pg=PA504&lpg=PA504&dq=UNI%C3%
93N+ORDENADA+DE+LOS+SUSTRATOS&source=bl&ots=RmjQkSyaW7&sig=YfJZTN_E3tp_NxI25
mtEXGAd-
mE&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwjG3sy5xeLNAhXKqR4KHbISBmAQ6AEIKzAD#v=onepage&q=UN
I%C3%93N%20ORDENADA%20DE%20LOS%20SUSTRATOS&f=false