Rev. Per. Qum. Ing. Qum. Vol. 14 N. 1 & 2, 2011. Pgs.

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ESTUDIO FITOQUMICO DEL EXTRACTO ETANLICO Y

DE LAS FRACCIONES DE LAS HOJAS DE PIPER ADUNCUM
MATICO

J. Arroyo A.1, P. Bonilla R.2, G. Toms Ch.3, J. Huamn M.3

RESMEN
Se trabaj con Piper aduncum L. matico de Junn (Per). El anlisis fitoqumico determin presencia de:
saponinas, taninos, quinonas, flavonoides y alcaloides. Por anlisis cromatogrfico se observa que hay
mayor cantidad de metabolitos polares. Los marcadores qumicos del extracto etanlico total y metanlico
son los flavonoides y alcaloides. Se determin la cantidad de polifenoles totales.
Palabras claves: Piper aduncum L., marcadores qumicos, taninos, flavonoides, alcaloides.

PHYTOCHEMISTRY STUDY OF ETHANOLIC EXTRACT AND FRACTIONS OF

LEAVES PIPER ADUNCUM L. MATICO

ABSTRACT
We worked with Piper aduncum L. matico from Junn (Per). Their Phytochemistry analysis determined
the presence of saponins, tannins, quinones, flavonoids and alkaloids. The chromatographic analysis
shows that there is a high amount of polar metabolites. The chemical markers of the total ethanolic
and methanolic extracts are the flavonoids and alkaloids. We have also determined the total polyphenol
contents of the extracts.

Keywords: Piper aduncum, chemistry markers, tannins, flavonoids, and alkaloids.

1. INTRODUCCIN aplicacin en seres humano que presentan

Existen frmacos estndares para el
tratamiento de lcera pptica y cncer
gstrico, con limitacin de costos y
reconocidos efectos adversos [1] siendo
necesario investigaciones para incorporar
productos naturales alternativos para este
fin [2]. Esta investigacin se realiz con la
finalidad de obtener un fitomedicamento
del extracto estabilizado de hojas de Piper
aduncum matico validado en animales de
experimentacin con induccin de lcera
pptica y cncer gstrico, para posterior
estas patologas.
Mtodos y procedimientos
El matico fue colectado en La Merced,
departamento de Junn; aplicndose
un estudio descriptivo observacional
farmacobotnico y etnofarmacolgico [3].
La planta fue secada a 40C y molida. El
anlisis fitoqumico determin la presencia de
quinonas, saponinas esteroidales, taninos,
monoterpenos, alcaloides y flavonoides
los cuales fueron identificados mediante

1 Instituto de Investigaciones Clnicas, Facultad de Medicina, UNMSM Lima, Per. jorgeluis_arroyoacaevedo@yahoo.es

2 Instituto de Ciencias Farmacuticas y Recursos Naturales, Facultad de Farmacia y Bioqumica, UNMSM Lima, Per. pabloenriquebr@
yahoo.com
3 Laboratorio de Productos Naturales-Departamento de Qumica Orgnica, Facultad de Qumica e Ing. Qumica, UNMSM. Lima, Per.
gloriaeva7@hotmail.com juanamaria.huamanmalla@gmail.com

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reacciones qumicas de identificacin y
anlisis CCD en cromatoplacas de slicagel
G-60 empleando agentes reveladores: luz
visible, luz UV 254 y 366nm [4].
Se prepar extractos acuoso y alcohlico.
El extracto acuoso se sec y el extracto
etanlico fue sometido a una cromatografa
en columna con eluyentes de polaridad
creciente se obtuvo extractos: hexnico,
clorofrmico y metanlico.
El anlisis espectral fue realizado con un
espectrofotmetro PHARO 300 (Merck)
entre 190 y 700 nm. La cantidad de fenoles
totales se determin segn el mtodo de
Folin-Ciocalteu.
Preparacin de extractos acuoso y
etanlico
Extracto acuoso: 100 g de hojas secas y
molidas, se sometieron a infusin, luego se
filtr; y se desec mediante refrigeracin a
5 C durante tres das.
Extracto alcohlico: 30 kilos de hojas secas
y molidas fueron maceradas en alcohol
etlico de 96, durante 8 das; con agitacin
constante todos los das, luego se filtr y se
concentr en un equipo rotavapor el solvente
a temperatura 40C, hasta obtener un
residuo untuoso con un peso constante el
cual se le denomin extracto etanlico.
Fraccionamiento
El extracto etanlico (200g) fue sometido
a un proceso de fraccionamiento, por el
mtodo de cromatografa en columna rpida.
Se sembr el extracto en una columna
empacada con slicagel, se eluy utilizando
solventes de menor a mayor polaridad,
(n-hexano, cloroformo, metanol y agua
destilada); las fracciones resultantes fueron
secados a una temperatura regulada ( 40
C); y se les denomin fraccin hexnica
A = n-hexano, fraccin clorofrmica B =
cloroformo, fraccin metanlica C = metanol;
fraccin acuosa E = agua destilada.
La deteccin de metabolitos secundarios
presentes en el extracto etanlico se realiz
mediante reacciones caractersticas como:
Dragendorff y Mayer (alcaloides), Shinoda
(flavonoides), Liebermann-Burchard (este-
roides), Bortranger (quinonas), gelatina (tani-
nos), ndice de espuma (saponinas), cloruro
frrico (compuestos fenlicos), aceites (olor).
La composicin qumica de las fracciones se
determin mediante anlisis cromatogrfico
en capa fina, empleando como fase fija:
slicagel 60-G y fase mvil: diclorometano:
metanol (5:1).
La cantidad de fenoles totales se determin
segn el mtodo de Folin-Ciocalteu usando
cido glico como estndar. Se prepararon
soluciones de 40, 80, 120, 160 y 200 ppm
con las que se construy la curva de cali-
bracin, dando un r2= 0,999. Las fracciones
fueron analizadas por triplicado, y los fenoles
totales se expresaron como equivalentes en
miligramos de cido glico (GAE) por mL de
solucin [5,6]. Para el anlisis espectral del
extracto etanlico y de las fracciones (A-E)
de las hojas de Piper aduncum, stos fueron
sometidos a barrido en el espectrofotmetro
UV-Visible en el rango de 190 a 700 nm.
Resultados y Discusin
Los resultados cromatogrficos en columna
indican una buena separacin de metabolitos
secundarios. La fraccin metanlica presenta
una coloracin ms intensa, debido a la
presencia de gran cantidad de compuestos
polares [7].
Por anlisis cromatogrfico en capa fina se
determin que el extracto etanlico contiene
18 componentes; que el extracto hexnico
contiene 5 componentes, sin alcaloides; que
el extracto clorofrmico contiene 10 compo-
nentes, de los cuales 7 son fenlicos, que
el extracto metanlico contiene 15 compo-
nentes, de los cuales 8 son fenlicos y que
el extracto acuoso contiene 5 componentes,
de los cuales dos son alcaloides [8]. Los re-
sultados del anlisis fitoqumico se muestran
en la Tabla N 1, y 2.
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Tabla 1. Estudio fitoqumico de los extractos acuoso y etanlico de las hojas de matico

Metabolitos secundarios: Rx Extracto acuoso Extracto etanlico

Alcaloides : Dragendorff + ++
Flavonoides : Shinoda ++ +++
Saponinas Espuma ++ +
Fenlicos : Cloruro frrico ++ +++
Aceites : Olor ++ +++
Taninos : Gelatina ++ ++
Esteroides : L. Burchard - +
Aminocido : Ninhidrina - -
Quinonas : Bortranger - +

(-) = Ausencia (+) = Poca cantidad

(++) = Regular cantidad (+++) = Bastante cantidad

Tabla 2. Estudio fitoqumico de las fracciones obtenidas del extracto etanlico de las hojas de matico

Extracto N- Hexnico Clorofrmico Metanlico Etanlico Acuoso

Alcaloides: Dragendorff - ++ ++ ++ +

Flavonoides: Shinoda + +++ +++ +++ ++

Saponinas: Espuma - + + + +

Fenlicos: Cloruro
++ + +++ ++ ++
frrico

Aceites: Olor - - - - -

Taninos: Gelatina - - - - -

Esteroides: L. Burchard - - + + -

Aminocido: Ninhidrina - - - - -

Quinonas: Bortranger - - + - -

(-) = Ausencia (+) = Poca cantidad

(++) = Regular cantidad (+++) = Bastante cantidad

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Fig 1. Caractersticas espectrales de las fracciones de Piper aduncum
Las caractersticas espectrales (Fig.1) co-
munes de las fracciones son las siguientes:
hacia 200 nm se observan absorciones en
las fracciones hexnica y clorofrmica, un
mximo de absorcin en 230 nm para las
fracciones acuosa, hexnica, metanlica y
etanlica (con desplazamiento hacia menor
longitud de onda debido a un proceso de
complexacin intramolecular) segn su
intensidad, en 240 nm para las fracciones
hexnica y clorofrmica siendo ms inten-
sa en la hexnica, alrededor de 270 nm
para las fracciones metanlica, acuosa y
etanlica indicadas segn su intensidad de
absorcin, un hombro entre 310 350 nm
para las fracciones metanlica, acuosa y
etanlica segn su intensidad, un mximo de
absorcin hacia 418 nm para las fracciones
clorofrmica y hexnica siendo la primera
ms intensa, una absorcin ligera hacia 535
nm para las fracciones clorofrmica y hex-
nica, otra absorcin ligera en 610 nm para
las fracciones clorofrmica y hexnica, y un
mximo de absorcin alrededor de 670 nm
para las fracciones clorofrmica, hexnica,
acuosa (con desplazamiento batocrmico
hacia un mayor longitud de onda), etanlica
y metanlica indicadas segn su intensidad
de absorcin.
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Fig. 2. Fenlicos en las fracciones de Piper aduncum
El comportamiento espectral de las fraccio-
nes frente a la luz UV-VIS en el espectro-
fotmetro PHARO 300 (Merck) entre 190
y 700 nm indica diferentes espectros de
absorcin (Fig.1). Cada fraccin muestra
un espectro caracterstico de la muestra
estudiada, sus picos y valles de absorcin
sirven para determinar la identidad de la
muestra estudiada y el extracto preparado..
Los solventes empleados para realizar el
fraccionamiento preliminar se depositaron
en celdas de cuarzo de 1 cm emplendose
como blanco antes de construir el espectro
caracterstico.
Las caractersticas espectrales de las
fracciones, muestran la complejidad de
los grupos cromforos presentes en cada
fraccin y que son responsables de la ac-
tividad biolgica mostrada por el extracto,
que predominantemente corresponderan a
compuestos fenlicos y especficamente a
flavonoides.
La Figura 2 muestra los resultados promedio
desviacin estndar de los fenlicos totales
en las fracciones. Los mayores valores se
encontraron en las fracciones metanlica,
66
hexnica y etanlica, lo que hace preveer
que estas fracciones tendran una buena
actividad antioxidante [9].
2. CONCLUSIONES
La fraccin metanlica presenta una colora-
cin ms intensa, debido a la presencia de
compuestos polares.
Segn la marcha fitoqumica se ha determi-
nado que los marcadores fitoqumicos tanto
en el extracto etanlico como en el extracto
metanlico de hojas de matico, son los
compuestos fenlicos y alcaloides.
3. AGRADECIMIENTOS
Los autores expresan su agradecimiento al
Fondo para la Innovacin, la Ciencia y la
Tecnologa (FINCyT) por el financiamiento
de este trabajo de investigacin. Al lnstituto
Quimioterapetico S.A. (IQFARMA) y al
Profesor Freddy Quispe Jacobo Jefe de
Investigacin, Desarrollo e Innovacin de
Productos Naturales y Agroindustriales.
Arequipa Per.
4. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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