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HEMATOLOG
CON INTERPRETACIN DE
HISTOGRAMAS Y ESCATERGRAMAS .
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ABBOTT DIAGNSTICOS
UNA DIVISIN DE ABBOTT LABORATORIES
ATLAS DE HEMATOLOGA
CON INTERPRETACIN DE
HISTOGRAMAS Y ESCATERGRAMAS
Abbott Laboratories de Mxico S.A. de C.V.
Marketing Editor: Q.F.B. Alfonso Ortega Seoane.
Gerencia General: Ing. Carlos Garca Monsreal.
Coordinador de la Produccin: Q.F.B. Alfonso Ortega Seoane
Copyright 2002
ISSNN*: 1666-7174
Ao 1 - Edicin 1
Edicin, produccin y realizacin grfica
E.C. S.A.
Cerrito 1136 Piso 5 CE 1010
Buenos Aires, Argentina
/
NDICE
MDULO I
PRLOGO n
FRMULA PLAQUETARIA 58
Las plaquetas 58
Frotis de sangre perifrica: plaquetas 62
BlOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO HEMATOLGICO 64
MDULO II
INTERPRETACIN DE HISTOGRAMAS 67
2.1. Introduccin 67
2.2. Tecnologas aplicadas a la generacin de histogramas y escatergramas 67
2.3. Impedancia elctrica para conteo de eritrocitos y plaquetas 68
2.4. Impedancia elctrica aplicada al conteo y clasificacin de clulas blancas
con reporte de la diferencial de 3 partes 72
2.5. Impedancia elctrica enfocada por flujo para conteo de eritrocitos, plaquetas
y leucocitos 74
2.6. Tecnologa MAPSS (multi-angle-polarized-scatter-separation) 76
CONCLUSIONES 85
BIBLIOGRAFA 93
MDULO
LAS CLULAS SANGUNEAS NORMALES
Y LA HEMATOPOYESIS
La sangre del ser humano, como la de todos los mam- Los granulocitos, caracterizados por sus granulos in-
feros, contiene una serie de clulas especializadas esen- tracitoplasmticos. Entre ellos se encuentran los neutr-
ciales para la supervivencia: los eritrocitos, encargados filos, los basfilos y los eosinfilos.
del transporte de oxgeno a los tejidos; las plaquetas, que Los linfocitos, subdivididos a su vez en clulas T y clu-
intervienen en la coagulacin y en la integridad tisular; las B. Las primeras con capacidad de destruccin
y los leucocitos, que cumplen funciones de defensa del citotxica (CD8) o presentadoras de antgenos (CD4),
husped. mientras que las clulas B son las encargadas de sinteti-
Los leucocitos incluyen a varios tipos de clulas con fun- zar anticuerpos.
ciones diferentes entre s: Los monocitos, encargados de funciones de fagocitosis
tanto en circulacin como en los tejidos.
Representacin esquemtica que muestra la composicin normal de la sangre
La produccin de estas clulas est a cargo de la mdu-
y la relacin proporcional entre las distintas clulas que la conforman. la sea, en donde se desarrollan a partir de clulas
pluripotenciales que van madurando y diferencindose
45% 55%
Neutrfilos Linfocitos
4ta
13
LAS CLULAS SANGUNEAS NORMALES Y LA HEMATOPOYESIS
lula osea
Hematopoyesis
Eriropoyesis
14
LAS CLULAS SANGUNEAS NORMALES Y LA HEMATOPOYESIS
clula madre
Eritrocito
Macrfago
Eosinfilo Neutrfilo
15
LAS CLULAS SANGUNEAS NORMALES Y LA HEMATOPOYESIS
16
FRMULA O SERIE ROJA
LOS ERITROCITOS
Los eritrocitos son clulas altamente especializadas en el La eritropoyesis -que tiene lugar en la mdula sea es el
transporte de oxgeno hacia los tejidos. El conjunto de clu- proceso mediante el cual los progenitores eritroides progre-
las de la serie roja, es decir, desde los progenitores hasta la san a travs de diferentes estadios madurativos, transfor-
clula madura, se conoce con el nombre de entrn, unidad mndose en clulas cada vez ms especializadas y madu-
considerada un verdadero rgano en trminos funcionales. ras, hasta alcanzar la circulacin sangunea.
Proeritroblasto
Eritroblasto basfilo
Requiere 20 horas
para su desarrollo
Necesita 30 horas
para su maduracin
Eritroblasto policromatfilo
Eritroblasto ortocromtico
Expulsin del ncleo
Eritrocito
PROGENITORES ERITROIDES
Nuclolo de gran tamao
E ISLA ERITROBLSTICA
BFU-E. La clula madre que va a dar origen a la serie
roja es la BFU-E (burstformingunit-erythroid), derivada a
su vez de la clula pluripotencial o stem cell, la cual es
capaz, de acuerdo con el estmulo recibido, de diferen-
Mitocondrias ciarse hacia granulocitos, eritroblastos, macrfagos o
megacariocitos.
CFU-E. A medida que el proceso de maduracin pro-
gresa, se desarrolla la CFU-E (colony forming unit-
erythroid), clula sumamente sensible a la accin de la
Polirribosomas eritropoyetina.
Tanto la BFU-E como la CFU-E se encuentran en mni-
mas proporciones en la mdula sea respecto del resto de
los precursores eritroides. Observadas mediante mi-
Representacin de la BFU-CFU con sus principales caractersticas croscopa electrnica, estas clulas se caracterizan por un
morfolgicas. gran nuclolo, abundantes polirribosomas y grandes
mitocondrias, similares en cierto modo a los blastos.
Isla e r i t r o b l s t i c a . La unidad anatmica de la
eritropoyesis es la llamada isla eritroblstica, que consiste
en uno o dos macrfagos rodeados de clulas eritroides
Macrfago
en maduracin. La adhesin entre macrfagos y precur-
sores eritroides ocurre en el estadio CFU-E de madura-
cin celular y contina durante toda la eritropoyesis.
Conforme contina la maduracin, los precursores van
abrindose paso a travs de los macrfagos y, llegado el
momento de la expulsin del ncleo, el eritroblasto se
contacta con una clula endotelial, pasa a travs de un
poro en el citoplasma de sta e ingresa a la circulacin. El
ncleo es expulsado antes de su salida de la mdula sea,
y es fagocitado y degradado por los macrfagos. En el de-
sarrollo de la isla eritroblstica participa la fibronectina y
un sistema de reconocimiento clula-clula, en el cual
Clulas eritroides en maduracin
intervienen hemaglutininas y sialoadhesinas de los pre-
cursores eritroides que interactan con receptores espe-
cficos en la superficie de los macrfagos, que a su vez
Isla eritroblstica: Macrfago rodeado de precursores eritroides en la mdula poseen receptores para eritroblastos (EbR). La isla e-
sea.
ritroblstica es una estructura de tal fragilidad que suele
romperse en el proceso de aspiracin de mdula sea con
aguja, y slo son visibles en muestras obtenidas con este
procedimiento cuando existe una actividad eritroblstica
acelerada como en las anemias hemolticas y en la
Citoplasma azulado
eritroleucemia.
'.8
FRMULA O SERIE ROJA
Ausencia de nuclolos
Ribosomas
Siderosomas
Aumento de la hemoglobina
Molculas de ferritina
presentes en el citoplasma Mitocondrias muy voluminosas
Eritroblasto policromatfllo: Clula de 12 a 15 u.m, cuyo ncleo ocupa cerca Eritroblasto ortocromtico: Clula ms madura, con un pequeo ncleo en
de la mitad de la superficie celular. su interior.
FRMULA O SERIE ROJA
forma parte de la isla eritroblstica, o bien, a medida que la comnmente conocido como discocito, es decir, la forma
clula atraviesa la pared del seno medular. El ncleo, inca- que adopta el eritrocito cuando no est sometido a estrs.
paz de atravesar este escollo, queda en la mdula sea y es El discocito puede transformarse reversiblemente por una
rpidamente fagocitado por los macrfagos de la isla. An serie de factores externos (principalmente pH y concen-
se desconoce si el reticulocito as formado se mueve en tracin de albmina) en otras dos formas: el estomatocito,
forma activa o si se traslada siguiendo una diferencia de clula unicncava con forma de copa, y el equinocito,
presiones. caracterizada por la presencia de varias proyecciones
espiculadas que surgen de la superficie celular. En la prc-
El reticulocito an posee mitocondrias, algunos ribosomas,
tica, estas tres formas pueden convivir entre s, lo cual in-
el centrolo y resabios del aparato de Golgi, sin retculo
dicara que en realidad representan distintos estados de
endoplsmico. A la microscopa electrnica se observan
equilibrio de la membrana plasmtica. A pH fisiolgico y
como clulas de forma irregular, con varias organelas re-
en presencia de albuminemia normal, los eritrocitos siem-
manentes en su interior. pre aparecen de forma bicncava. Cuando el pH se eleva
ERITROCITO MADURO o las concentraciones de albmina descienden, o bien, en
presencia de otro tipo de factores, el hemate comienza a
El eritrocito normal tiene el aspecto de un disco bicncavo, proyectar espculas (equinocito). Por el contrario, cuando
con un dimetro promedio de 8 micrones, el cual disminu- el pH es bajo o existe un exceso de albmina plasmtica, se
ye discretamente con el envejecimiento celular. Su nota- transforma de discocito a estomatocito. En ambos casos se
ble flexibilidad le permite una deformabilidad que hace a trata de variaciones reversibles, que, una vez superada la
la clula capaz de atravesar capilares de hasta 2,8 micrones situacin anormal, permiten que el eritrocito vuelva a su
de dimetro. Dicha deformabilidad tiene lugar gracias a forma original.
varios factores: la membrana plasmtica eritrocitaria es
excesiva para la superficie celular, la viscosidad interna El eritrocito transcurre la mayor parte de su vida til (100 a
(dependiente de la concentracin de hemoglobina) y el 120 das) en la microcirculacin capilar, en donde se cal-
radio superficie-volumen de la clula. Un aumento en un cula que viaja una distancia de aproximadamente 250 km
20% de la concentracin de hemoglobina corpuscular en total. A medida que envejece, el glbulo rojo va perdien-
media (CHCM) resulta en un aumento de la viscosidad do progresivamente su membrana, aumenta en forma re-
interna en aproximadamente un 600%, aunque an le lativa la CHCM, y disminuye su deformabilidad, aun-
permite deformarse y atravesar los capilares. Elevaciones que todos estos cambios no se observan morfolgicamente.
superiores impiden esta necesaria flexibilidad. En la
circulacin, la principal causa de disminucin de la de- El eritrocito se comporta como un osmmetro, ya que de-
formabilidad eritrocitaria es la membrana insuficiente, pende directamente de la osmolaridad plasmtica: cuan-
hecho que ocurre en la esferocitosis, por ejemplo. do se lo ubica en una solucin hipertnica, se encoge de tal
forma que las superficies internas de su parte central prc-
El glbulo rojo normal se tie de color rojo-amarronado ticamente se contactan entre s. Del mismo modo, cuando
con Wright y rosa con Giemsa. El tercio central de la clula se lo expone a un medio hipotnico, aumenta peligro-
es de color algo ms plido que la periferia, lo cual refleja samente de volumen hasta incluso romperse si supera su
su forma bicncava. Este aspecto circular, bicncavo, es nivel de hemolisis (cerca de 10 nm o 100 A).
Coloracin central
ms clara
Mitocondrias
Ausencia de ncleo
y otras organelas
Fragmentos
del aparato de Golg
Hemoglobina disuelta
en el citoplasma
Ribosomas
Reticulocito: Clula de forma irregular y carente de ncleo en la que persisten Caractersticas morfolgicas del eritrocito maduro.
algunas organelas remanentes.
20
FRMULA O SERIE ROJA
1. Sideroblastos en anillo. Clulas presentes en trastornos caracterizados por una anomala en la madura-
cin eritrocitaria que determina una eritropoyesis ineficaz e hiperferremia, como ocurre en las anemias
sideroblsticas (alcoholismo, intoxicacin con plomo), en las anemias diseritropoyticas o en ciertas
hemoglobinopatas. Morfolgicamente, los sideroblastos pueden contener granulos de hierro dispuestos en
crculo alrededor del ncleo, tal es la razn por la cual tambin se los conoce como sideroblastos en anillo.
De manera caracterstica se observa, bajo microscopa electrnica, depsitos de hierro dentro de las
mitocondrias, entre sus crestas.
2. Eritrocitos con cuerpos de Howell-Jolly. Restos nucleares que permanecen en el interior de
reticulocitos. Por lo general es uno solo, de no ms de 0,5 micrones de dimetro, a veces varios. Caractersti-
camente se observan en pacientes esplenectomizados, en anemias hemolticas, en anemia megaloblstica y
en estados de hipoesplenismo.
3. Reticulocitos con anillos de Cabot. Estructura anular que se observa en el interior de los reticulocitos
en pacientes con anemia megaloblstica, a veces tambin en los megloblastos intermedios de estos enfermos.
Se cree que representan material remanente de mitosis anormales.
4. Eritrocitos con cuerpos de Heinz. Resultado de protenas desnaturalizadas, sobre todo hemoglobina,
presentes en los eritrocitos de pacientes con talasemia, hemoglobinopatas o anemia drepanoctica. Suelen
adherirse al interior de la membrana celular, protruyendo dentro del citoplasma.
5. Eritrocitos normales. Con forma de disco bicncavo, ligeramente ms plido en el centro que en la
periferia.
6. Microcitos. Glbulos rojos pequeos caractersticos de la anemia ferropnica. Generalmente son
hipocrmicos (por menor hemoglobina) o de tincin irregular (poiquilocroma).
21
FRMUIA o SERIE ROJA
Estomatocitos Esferocitos
22
FRMULA O SERIE ROJA
LAS ANEMIAS
Se entiende por anemia a la disminucin de la concentra- ANEMIA FERROPNICA
cin de la hemoglobina (Hb) por debajo del lmite inferior El aporte insuficiente de hierro a los precursores eritroides
para la edad, sexo y condicin fisiolgica. En trminos fi- condiciona el desarrollo de este tipo de anemia.
siolgicos, dado que la funcin de la hemoglobina es el
transporte de oxgeno, puede decirse que una anemia es la En condiciones normales, el contenido total de hierro del
reduccin de la capacidad de transporte de oxgeno de la organismo en personas adultas sanas es de 2 gramos en las
sangre. mujeres y de hasta 6 gramos en los hombres, y se distribu-
ye en dos compartimientos bsicos: el funcional y el de
CLASIFICACIN DE LAS ANEMIAS almacenamiento. El compartimiento funcional es el que
Existen mltiples clasificaciones propuestas para las ane- incluye al hierro encargado de transportar oxgeno (in-
mias, dentro de las cuales las ms utilizadas son la fisio- cluido en la hemoglobina) y al que forma parte de otras
patognica y la morfolgica. protenas (mioglobina) y enzimas (catalasa, citocromos).
La mayora del hierro funcional (80%) se encuentra en la
La clasificacin fisiopatognica distingue a las anemias, de
hemoglobina.
acuerdo con su mecanismo de produccin, en aquellas por
disminucin en la produccin de eritrocitos, entre las cua- El compartimiento de almacenamiento de hierro est re-
les estn las ferropnicas, las aplsicas, etc., y en anemias presentado por la hemosiderina y la ferritina, y contiene
por aumento de la prdida de eritrocitos, como es el caso cerca del 15-20% del hierro corporal total. Si los depsitos
de las hemolticas y las secundarias a hemorragias. de hierro son normales, slo existen trazas de hemo-
siderina en el organismo, especialmente en las clulas
La clasificacin morfolgica se basa en el aspecto que los
reticuloendoteliales de la mdula sea, bazo e hgado. En
glbulos rojos presentan en el frotis de sangre perifrica en
situaciones de sobrecarga frrica, el hierro se almacena
las distintas anemias. De esta forma se distinguen: las ane-
mias microcticas hipocrmicas, como la ferropnica, las
macrocticas como la anemia megaloblstica, las normo- Frotis de sangre perifrica en la anemia ferropnica. Eritrocitos pequeos
cticas normocrmicas como las anemias de los trastornos (microcitosis) y plidos (hipocroma), con leucocitos y plaquetas normales.
crnicos, etctera.
Eritrocitos hipocromos
Microcitos
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FRMULA O SERIE ROJA
en las clulas en forma de hemosiderina, como en el caso (3) requerimientos excesivos, o (4) prdida crnica de
de la hemosiderosis. sangre.
La mayor parte del hierro almacenado est bajo la forma El bajo aporte diettico de hierro es la causa ms comn de
de ferritina, un complejo protena-hierro que est presente anemia ferropnica en los nios, quienes, adems, presen-
en todos los tejidos, aunque principalmente en hgado, tan un aumento de los requerimientos de dicho mineral
bazo, mdula sea y msculo esqueltico. En condiciones debido al ritmo acelerado de crecimiento. En los adultos,
normales, slo circula una muy pequea proporcin de por el contrario, el aporte promedio de hierro de la dieta
ferritina en plasma; se estima que por cada microgramo occidental supera las necesidades diarias, y esta no es una
por litro de ferritina plasmtica existen 8 mg de hierro al- causa de anemia.
macenado. Como la ferritina plasmtica procede directa- La absorcin intestinal disminuida de hierro ocurre en el
mente de los sitios de almacenamiento titulares, su medi- contexto de sndromes de malabsorcin, en los cuales exis-
cin es un buen indicador del estado de las reservas de te una disminucin de la absorcin generalizada.
hierro del organismo. Hay tres situaciones puntuales en las
que no puede utilizarse la ferritina plasmtica como medi- En situaciones de requerimiento excesivo, como en el
da de las reservas de hierro: en las hepatopatas, en enfer- embarazo y en la lactancia, el aporte diettico de hierro no
medades inflamatorias, y en ciertos tumores. En estas cir- alcanza a cubrir las necesidades del organismo y puede
cunstancias, los niveles de ferritina pueden ser inusualmente desarrollarse una anemia.
elevados a pesar de contar con reservas normales de hierro. La prdida crnica de sangre es la causa ms comn de
anemia ferropnica en los adultos y es lo primero que debe
En el plasma, el hierro es transportado por una protena
descartarse. El origen de la prdida puede ser gastro-
llamada transferrina, que es una p-globulina sintetizada
intestinal (lceras, gastritis, cncer de colon) o ginecolgico
por el hgado cuya misin es ceder hierro a los receptores
(metrorragias, neoplasias). Al iniciarse la prdida crnica
celulares de los precursores eritroides de la mdula sea.
En un adulto normal, cerca del 33% de la transferrina se
encuentra saturada por hierro. Mdula sea en las anemias megaloblsticas. Hipercelularidad marcada que
se extiende a zonas habitualmente de mdula grasa. Aumento de la
El ritmo y la absorcin intestinales de hierro dependen del eritropoyesis en grado tal que los elementos eritroides igualan o superan a los
contenido total de hierro del organismo y de la actividad mieloides. Nidos de megaloblastos con disociacin ncleo-citoplasmtica:
eritropoytica. Cuando la demanda aumenta, la absorcin citoplasma abundante con ncleo inmaduro (no picntico). Tambin se
observan grandes polimorfonucleares maduros con hipersegmentacin nu-
de hierro tambin lo hace, y viceversa. El balance negativo clear. Los megacariocitos pueden presentar cambios similares o ser relativa-
de hierro puede ocurrir, entonces, por varios motivos: (1) mente normales.
bajo aporte diettico, (2) absorcin intestinal disminuida,
Neutrfilo
hipersegmentado
Hipercelularidad
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FRMULA O SERIE ROJA
de sangre, las reservas en forma de ferritina o hemosiderina la anemia es importante, aparecen en circulacin glbulos
son suficientes para mantener niveles normales de hemo- rojos nucleados. Los neutrfilos tambin son de mayor volu-
globina, as como de ferremia y saturacin de transferrina. men (macropolimorfonucleares) y estn hipersegmenta-
La deplecin progresiva de estas reservas puede acabar por dos, es decir, tienen ms de seis lobulillos nucleares.
disminuir los niveles de hierro srico y de saturacin de La deficiencia de vitamina B,, o de folato tiene lugar en
transferrina, que todava no producen anomalas del entrn. dietas insuficientes, en sndromes de malabsorcin o en
Hasta este grado de prdida de sangre aumenta la activi- situaciones de aumento de los requerimientos. La dieta de
dad eritropoytica en la mdula sea y la expansin del un adulto normal excede las necesidades diarias de ambos
entrn, pero van desapareciendo progresivamente los compuestos, por lo cual, cuando una anemia megaloblstica
sideroblastos de la mdula. Por lo tanto, la anemia aparece es el resultado de un aporte insuficiente de la dieta, esto
cuando se deplecionan todos los depsitos, y se acompaa ocurre en situaciones particulares, como en vegetarianos
de niveles bajos de ferremia y saturacin de transferrina, estrictos, en alcohlicos crnicos o en estados de
as como de disminucin de la ferritina srica. malnutricin generalizada. Por el contrario, los sndromes
El diagnstico de anemia ferropnica se basa en el labora- de malabsorcin son la causa ms comn de este tipo de
torio: la hemoglobina y el hematcrito estn disminuidos, anemias. En el caso de la vitamina B12, la anemia perni-
habitualmente en grado moderado, y se asocian con ciosa es un tipo de anemia megaloblstica en la que
microcitosis, hipocroma y cierto grado de poiquilocitosis. clnicamente existe un marcado compromiso neurolgico.
El origen de esta anemia es la disminucin de la absorcin
El hierro srico, la ferritina y los niveles de saturacin de la
de dicha vitamina debido a una gastritis atrfica que con-
transferrina estn descendidos. Los leucocitos y las
diciona la casi total ausencia de clulas parietales, con la
plaquetas son normales en nmero y morfologa.
consecuente ausencia de factor intrnseco, el cual se une a
ANEMIA MEGALOBLSTICA B, 2 en el estmago para evitar su destruccin por el cido
clorhdrico.
La anemia megaloblstica es la consecuencia de un dficit
de vitamina B , o de cido flico. Ambos compuestos ac- Algunos frmacos, como la difenilhidantona y los
tan como coenzimas en la sntesis de ADN, sin compro- anticonceptivos orales, dificultan la absorcin de folato y,
meter a la sntesis de ARN ni de protenas. Cuando existe con el tiempo, pueden favorecer el desarrollo de una ane-
una deficiencia de vitamina B [2 o cido flico, hay un mia megaloblstica.
agrandamiento citoplasmtico sin la correspondiente sn- En situaciones especiales, como el embarazo y la lactancia,
tesis de ADN, lo cual trae como consecuencia una existe un dficit relativo de cido flico debido a un aumen-
eritropoyesis ineficaz y el desarrollo de megaeritrocitos anor- to de los requerimientos, aunque esto difcilmente lleve a
males con tendencia a la hemolisis. una anemia megaloblstica si no se unen otros factores.
Como su nombre lo indica, en la anemia megaloblstica los
precursores eritroides y los eritrocitos son anormalmente ANEMIAS HEMOLTICAS
grandes. En la mdula sea, los megaloblastos tienen un Las anemias hemolticas se caracterizan por la disminu-
citoplasma muy abundante, intensamente basfilo, y un cin de la vida media del eritrocito debido a su destruc-
ncleo desproporcionadamente pequeo. El desarrollo de cin prematura intravascular o extravascular (en el siste-
un ncleo picntico denso que ocurre en la secuencia ma reticuloendotelial). Esto trae como consecuencia un
normal de la eritropoyesis est retrasado o no se produce, aumento de la actividad eritropoytica medular en un
creando un manifiesto asincronismo, es decir, una disocia- intento por compensar la prdida de hemates y la acumu-
cin ncleo-citoplasmtica evidente. Los precursores de lacin de productos del catabolismo de la hemoglobina
los granulocitos tambin muestran asincrona ncleo- (bilirrubina indirecta y urobilina).
citoplasmtica originando metamielocitos gigantes y caya- Las anemias hemolticas se dividen en dos grandes grupos:
dos con hipersegmentacin nuclear. Los megacariocitos anemias intrnsecas o corpusculares, cuando el defecto radi-
tambin pueden ser ms voluminosos, con ncleos ca en el propio eritrocito y lo hace ms frgil y destructible;
multilobulados, aunque a veces son de aspecto relativa- y anemias extrnsecas o extracorpusculares cuando existe una
mente normal. Acompaando a estos cambios se observa agresin externa que destruye al glbulo rojo, dentro de los
una marcada hipercelularidad medular relacionada sobre vasos sanguneos. La mayora de las anemias corpusculares
todo con aumento del nmero de eritroblastos anormales son hereditarias, mientras que las extracorpusculares sue-
(megaloblastos) que frecuentemente se ubican en "nidos". len ser adquiridas.
Gran parte de la mdula, normalmente grasa, puede estar
La mdula sea en las anemias hemolticas evidencia
convertida en mdula roja. La proporcin mieloeritroide,
una marcada actividad eritropoytica, lo cual se mani-
habitualmente de 3:1, puede transformarse en 1:1.
fiesta como un aumento de la relacin eritroide/mieloide.
La sangre perifrica muestra glbulos rojos de volumen y A veces se observa incluso hematopoyesis extramedu-
forma variables (anisocitosis), pero siempre normocrmicos. lar. En la sangre perifrica se observa un aumento nota-
La mayor parte de ellos son macrocticos, con volmenes ble de los reticulocitos. Esta hiperactividad medular es
corpusculares medios de ms de 100 jo3. De manera carac- ineficaz en casos de hemolisis muy rpidas o en estados
terstica, el nmero de reticulocitos es bajo y, a veces, cuando de depresin previa.
25
FRMULA O SERIE ROJA
oxidativo eritrocitario. Es una enfermedad ms prevalente frmacos pueden provocar hemolisis por mecanismos
en individuos de raza negra y se transmite ligado al X. Los inmunolgicos, como la alfametildopa, el cido mefe-
sntomas se observan en homocigotos. nmico, sulfonamidas, fenotiacinas, entre otros.
La anemia drepanoctica o anemia de clulas falciformes En la anemia hemoltica microangioptica, los eritrocitos
surge a partir de la sntesis anmala de la hemoglobina en se fragmentan al atravesar trombos en la microcirculacn
la cual hay una sustitucin del aminocido valina por (coagulacin intravascular diseminada, sndrome urmico
glutamato en la cadena beta. La hemoglobina resultante, hemoltico) o prtesis valvulares cardacas, es decir, por
llamada hemoglobina S, al desoxigenarse se polimeriza, una agresin mecnica.
distorsionando a los hemates, los cuales adoptan una mor-
fologa falciforme o en hoja de acebo. Esto trae dos conse- TALASEMIAS
cuencias clnicas en los homocigotos: anemia hemoltica Comprenden un grupo heterogneo de enfermedades
crnica y obstruccin de los pequeos vasos que ocasiona hereditarias cuyo denominador comn es un defecto en la
lesin isqumica tisular. sntesis de una o ms cadenas de globina de la hemoglo-
Las anemias hemolticas autoinmunes suelen observarse bina. De acuerdo con el tipo de cadena que no se sintetiza,
en distintas enfermedades, como el lupus y algunas las talasemias se identifican como talasemia alfa, beta,
neoplasias. El frotis suele mostrar "pilas de monedas", gamma o delta. Las dos primeras son las ms comunes, la
anisocitosis y poiquilocitosis significativas, con numero- alfa en las poblaciones que rodean al Mar Mediterrneo y
sos microesferocitos y reticulocitos en gran cantidad, in- la beta en los asiticos.
cluso eritrocitos nucleados. La prueba de Coombs directa La mayora de las talasemias se heredan en forma auto-
evidencia IgG o IgG ms complemento. Cuando los smica dominante, existiendo la posibilidad de estados
anticuerpos que reaccionan contra el eritrocito son crio- homocigotos y heterocigotos. El desequilibrio en la snte-
aglutininas se puede estar en presencia de infecciones sis de cadenas de globina obedece a un defecto en el
por Micoplasmapneumoniae, mononucleosis infecciosa, RNAm tanto cuantitativo como cualitativo.
linfomas u otros trastornos linfoproliferativos. Varios Dentro de la beta talasemia, la ms frecuente en nuestro
medio, se distinguen tres variantes clnicas:
Frotis de sangre perifrica de un paciente con talasemia beta mayor. Se obser-
van eritrocitos en diana, hipocrmicos y microcticos. Talasemia mayor o anemia de Cooley: en los homocigotos,
es la forma ms grave y comienza a manifestarse desde la
Eritrocitos hipocrmicos
FRMULA O SERIE ROJA
lactancia con anemia severa, ictericia y hepatoesple- Talasemia intermedia: en los heterocigotos beta 0 (ausen-
nomegalia. Las alteraciones de los huesos planos llevan a cia de sntesis de cadenas beta). El cuadro es similar al de
deformidades craneofaciales y la hipoxia crnica determi- la talasemia mayor, aunque de menor intensidad.
na alteraciones cardacas, endocrinas e inmunolgicas. La Talasemia menor o rasgo talasmico: en los heterocigotos
anemia es hipocrmica microctica, con eritrocitos en dia- de beta + (produccin disminuida de cadenas beta). Estas
na y reticulocitosis. El hierro est aumentado en plasma y personas no suelen tener manifestaciones clnicas o, a lo
en los depsitos. Existe un incremento de hemoglobina sumo, una discreta anemia hipocrmica microctica con
fetal mayor al 60%. hierro normal y elevacin de la hemoglobina A2.
El anlisis de los extendidos de sangre puede entregar una llada de muestras de sangre ampla y completa la infor-
variada gama de informacin. Las alteraciones en la cantidad, macin obtenida en el recuento automatizado; de he-
forma y aspecto tintreo de los glbulos rojos constituyen uno cho, existen varias enfermedades que exhiben un valor
de los principales elementos para el diagnstico de condiciones normal en el nmero de las diversas especies celulares
patolgicas en hematologa. aunque su morfologa sea patolgica. Entonces, la ob-
servacin morfolgica adquiere vital importancia a la
ANLISIS MORFOLGICO hora de localizar y evaluar el origen de alteraciones
DE SANGRE PERIFRICA hematolgicas que no son detectadas en un recuento
automatizado, puesto que no slo se estudia la forma de
El anlisis de rutina de una muestra de sangre incluye la
los glbulos rojos, leucocitos y plaquetas, sino que ade-
determinacin de valores fsico-qumicos, el recuento de
ms puede ponerse en evidencia la presencia de enfer-
clulas y la observacin microscpica de los elementos par-
medades parasitarias como malaria, paludismo o
ticulados. Los analizadores automticos hematolgicos
microfilariasis y, ocasionalmente, bacteriemia.
permiten obtener de manera rpida y precisa el recuento
de los distintos tipos celulares presentes en una muestra Existen dos tcnicas que comnmente se utilizan para vi-
de sangre y sugieren un diagnstico sobre la base de los sualizar muestras de sangre perifrica; la primera involucra
valores encontrados. La observacin microscpica deta- la observacin de sangre fresca y la segunda conlleva la
29
FRMULA O SERIE ROJA
Fig. 1
Cabeza
Fig-2
Zona de
neutrfilos y
Zona de linfocitos Trayectorias de eleccin monocitos
30
FRMULA O SERIE ROJA
fue descrito anteriormente. Se coloca una gota de sangre Los leucocitos son las nicas clulas nucleadas presentes
en uno de los extremos del portaobjetos y, con el borde de en sangre perifrica; se pueden diferenciar: eosinfilos,
otro, colocado a 45 grados con respecto al primero, tocar la basfilos, neutrfilos, monocitos y linfocitos. En linfocitos y
gota y esperar a que la sangre se distribuya por capilari- monocitos el citoplasma aparece de color azulado o gris; se
dad. Se desliza la muestra hacia adelante, con un movi- pueden observar granulaciones que en los neutrfilos a-
miento moderadamente rpido pero constante, en senti- parecen de colores pardos, en los eosinfilos anaranjadas
do longitudinal, hasta que la gota quede bien extendida. y en los basfilos de color azul oscuro. Con este aumento
Se deja secar al aire y se colorea. (100 x) se realiza el recuento leucocitario. Las plaquetas
presentan una porcin perifrica azulada y granulos cen-
TCNICAS DE COLORACIN DE trales rojos. La apreciacin de detalles morfolgicos de las
EXTENDIDOS DE SANGRE clulas de la sangre se realiza con objetivo de inmersin en
La tincin de May-Grnwald-Giemsa y la de Wright son aceite (100 x); con ste se observan detalles de los hemates
las coloraciones utilizadas con ms frecuencia para los ex- de forma, tamao y coloracin, se realiza el recuento de los
tendidos de sangre, y ambas son modificaciones del m- diferentes tipos de leucocitos (recuento diferencial
todo original de Romanowsky. La tintura bsica contiene leucocitario) y se estima el tamao, forma y nmero de
azul de metileno y eosina. En la tincin de Wright se utiliza plaquetas.
bicarbonato de sodio y en la de May-Grnwald-Giemsa
EVALUACIN DE LOS ELEMENTOS DE LA SERIE
bicromato cido, para convertir el azul de metileno en azur
de metileno. Esta conversin no es completa y tiende a con- ROJA: ASPECTO NORMAL
tinuar dentro de la botella de preparacin, por lo que el co- El frotis de sangre normal puede entregar importante in-
lorante se modifica al pasar el tiempo, debiendo estable- formacin sobre las alteraciones cualitativas de las clulas
cerse las condiciones de tincin para cada tanda nueva de de la serie roja; sin embargo, obtener datos de variaciones
colorante que se prepare. El pH ptimo de la solucin debe cuantitativas resulta ms complicado.
encontrarse en el rango de 6,5 a 6,8 y los colorantes se La evaluacin debe realizarse en base a criterios de for-
disuelven en alcohol metlico. Si las clulas aparecen ex- ma, de tincin, de dimensin y de presencia de inclusio-
cesivamente azules puede que el colorante haya sido pre- nes. Como la distribucin de los glbulos rojos en la pel-
parado mucho tiempo atrs, que est demasiado alcalino, cula de sangre obtenida al formar el extendido resulta
mal preparado o que los extendidos sean muy gruesos. Este irregular, para determinar la morfologa real de las clulas
tipo de tincin tambin se denomina panptica, ya que se en la muestra debe localizarse un rea del frotis en la que
colorean tanto los elementos bsicos como los cidos que exista una mnima distancia intercelular sin que se obser-
se encuentran en el extendido. El azul de metileno es un ve superposicin. En otras reas del extendido pueden
componente bsic.o que tie estructuras acdicas de la encontrarse clulas superpuestas o muy separadas, y en
clula impartindoles una coloracin azul-violcea; la ambos casos es ms probable la visualizacin de "artefac-
eosina y el azur de metileno son compuestos cidos que tos" que constituyen alteraciones artificiales en las clu-
tien estructuras alcalinas, otorgndoles coloracin rojo- las que no se encuentran en la muestra original o conser-
anaranjada y rojo-violcea, respectivamente. vada en condiciones fisiolgicas y que, por lo tanto, care-
cen de valor diagnstico. Por ejemplo, en algunas reas
Las muestras, una vez teidas, se pueden observar al mi-
de un extendido normal donde el espesor de la pelcula
croscopio ptico inicialmente con objetivos de poco au-
de sangre sea muy elevado, es posible que las clulas rojas
mento (40 x) para tener una idea global del aspecto del
aparezcan pegoteadas entre s, dando un aspecto de pila
frotis. En las extensiones de sangre sobre portaobjetos se
de monedas que recibe el nombre de "rouleaux", el que
diferencian tres zonas: cabeza, cuerpo y cola (figura 2). La
no debe observarse en el rea de visualizacin ptima. La
cabeza es la lnea en la cual se apoy un portaobjetos sobre
persistencia del fenmeno en el rea de observacin ideal
el otro antes de hacer la extensin, el cuerpo corresponde
sugiere una condicin patolgica en la que una abun-
a la regin intermedia del frotis y la cola es la porcin final,
dante cantidad de paraprotenas recubre las clulas rojas,
en la que la extensin es delgada y algo deshilachada. La
favoreciendo la atraccin intercelular en lugar de la usual
distribucin de las clulas en estas tres zonas no es uni-
repulsin electrosttica que debera prevalecer entre di-
forme. En forma general, puede decirse que las clulas
chas clulas.
de mayor tamao se sitan en los bordes y en la cola
(neutrfilos, monocitos, eosinfilos, etc.), mientras en el El aspecto de los hemates en un frotis de sangre normal
cuerpo se encuentra una mayor proporcin de clulas debe ser homogneo en tamao, forma y coloracin. El
menores (linfocitos, micromieloblastos, etc.) en distribu- dimetro promedio, que puede objetivarse con un
cin regular. En la cola las clulas adoptan una disposicin micrmetro ocular o por comparacin con el ncleo de un
en cordones y a menudo se presentan deformadas, des- linfocito pequeo (que usualmente presenta un tamao
truidas o difciles de reconocer. Una forma bastante acon- difcilmente alterable), debe encontrarse en el rango de
sejada de recorrer el preparado es en zigzag por los bordes. 7,2 a 7,9 micrmetros. La forma normal de las clulas
Los hemates son los elementos ms abundantes y apare- eritroides es redondeada, presentando una zona central
cen de color rosa plido, con una zona central ms clara. clara con un reborde exterior rojo-anaranjado.
31
FRMULA O SERIE ROJA
El aspecto microscpico de los glbulos rojos puede ser variado. Cada alteracin de la forma, nmero y coloracin
se relaciona de manera directa o indirecta con una condicin patolgica subyacente.
Glbulo rojo hipocrmico Zona central con palidez Disminucin de la Anemia con dficit de hierro,
prominente sntesis de hemoglobina talasemia, anemia sideroblstica
Ovalocitos (eliptocitos) Hemates con forma elptica Protenas del Eliptocitosis hereditaria
citoesqueleto anormales
32
FRMULA O SERIE ROJA
33
FRMULA O SERIE BLANCA
LOS GRANULOCITOS
En la hematopoyesis, las clulas destinadas a formar la tituye el precursor ms precoz de esta serie visible al mi-
serie granuloctica, es decir, neutrfilos, eosinfilos y croscopio ptico, en promielocito, el cual es rico en granu-
baslos, sintetizan protenas y las almacenan en granulos los azurfilos.
citoplasmticos que le dan el aspecto caracterstico. Estos Posteriormente al promielocito aparecern granulos espe-
granulos, primarios o azurfilos, definen la conversin del cficos que definirn la progresin hacia mielocitos de
mieloblasto, una clula virtualmente agranular que cons- tipo neutrfilos, eosinfilos o basfilos. Una vez determi-
Mieloblasto
-Comienzo de la formacin
de los granulos primarios
Srnulos azurfilos
Peroxidasa-positivos
Enzimas lisosomales Las clulas no se dividen ms
lisozima
elastasa -Se forman.los granulos
proteinasa 3 secundarios
o.-1 antitripsina
Factores bactericidas
o protenas catinicas
defensinas
factores bactericidas
azurfilos-derivados
protena bactericida
incrementadora
de permeabilidad
Srnulos secundarios
^eroxidasa-neqativos
Mielocito Se inicia
lactoferrina la diferenciacin
lisozima de los granulos
protena ligadora
deB
otras protenas
34
FRMULA O SERIE BLANCA
NEUTRFILOS
Los neutrfilos constituyen la variedad predominante de Mieloblasto. Clula de gran ncleo ovalado, mltiples nuclolos y con un
citoplasma carente de granulos o con muy escasos granulos azurfilos.
granulocitos, cerca del 90%. El sistema de neutropoyesis
tiene una alta velocidad de produccin celular y est fina-
mente regulado de modo tal de incrementar la produc-
cin en respuesta a estmulos inflamatorios.
Citoplasma azul
Una vez que el mieloblasto define su camino hacia la pro-
duccin de neutrfilos, la secuencia normal de madura-
cin celular en la mdula sea es la siguiente: mieloblasto Halo perinuclear
> promielocito mielocito -> metamielocito neutrfilo
en cayado > neutrfilo segmentado.
Nuclolos
Entre el mieloblasto y el mielocito se suceden cerca de
cinco divisiones celulares. Luego del estadio de mielocito,
las clulas ya no se dividen ms y ocupan un comparti-
Microperoxisomas
miento medular.
Los neutrfilos maduros son almacenados en la mdula
antes de ser liberados a la circulacin durante cinco das. Granulos primarios
o azurfilos
Una vez en la sangre su permanencia en ella es fugaz
-cerca de seis horas promedio-ya que pasan rpidamente
hacia los tejidos en donde ejercen sus funciones durante
uno o dos das antes de su muerte. Promielocito. Es la primera clula que presenta granulos primarios azurfilos,
peroxidasa-positivos.
Granulos citoplasmticos. A medida que los precursores
del neutrfilo van madurando, van sintetizando las dis-
tintas protenas que integrarn los caractersticos granu- Citoplasma azu
los citoplasmticos. Mientras que el mieloblasto es una
clula prcticamente agranular, el siguiente estadio, el flicroperoxisoma
promielocito, ya posee grandes granulos peroxidasa-posi-
tivos, los granulos primarios o azurfilos. Los mielocitos
Halo perinuclear
agregan los granulos secundarios, peroxidasa-negativos,
que coexistirn con los primarios en los siguientes esta-
Granulos primarios
dios evolutivos. Los neutrfilos maduros poseen ambos o azurfilos
tipos de granulos, aunque los secundarios son casi el do-
ble de los primarios. Los granulos azurfilos (primarios, Ncleo aplanado
peroxidasa-positivos) son voluminosos, de aproximada- sobre un lado
mente 500 nm, visibles al microscopio ptico, mientras
que los secundarios (especficos o peroxidasa-negativos) Isla de granulos rojizos
son pequeos (200 nm) y no suelen verse a la microscopia
ptica sino como un puntillado rosado citoplasmtico ca- Granulos secundarios
racterstico de estas clulas a partir del estadio de visibles como un puntillado rosado
mielocito.
Mielocito. De forma caracterstica, es la primera clula que presenta, adems
Adems de mieloperoxidasa, los granulos primarios contie- de granulos primarios, granulos secundarios especficos, ya sea de neutrfilos,
n e n numerosas enzimas lisosomales (lisozima, elastasa, eosinfilos o basfilos.
35
FRMULA O SERIE BLANCA
Granulos secundarios
Unin filamentosa
Granulos primarios
EOSINFILOS
Ncleo con forma de herradura
Los eosinfilos tambin cumplen funciones de defensa,
aunque su actividad bactericida es mucho menor que la
de los neutrfilos. En sus granulos almacenan protenas
con funciones citotxicas para parsitos, por lo cual se
Neutrfilo en cayado. Es un estadio intermedio entre la forma precedente y el
neutrfilo segmentado. Bsicamente se observa una promdizacin de las considera que tienen cierta accin de defensa contra este
invaginaciones nucleares. tipo de organismos. Asimismo, los eosinfilos estn impli-
36
FRMULA O SERIE BLANCA
Granulos esfricos
con tintes rojos
Granulos oscuros
Distribucin regular y voluminosos
de los granulos
Ncleo conforma
de haba o lobulado
Distribucin
desordenada
Eosinfilo. El ncleo es tpicamente bilobulado. Sus granulos acidfilos con- de los granulos
tienen peroxidasa.
37
FRMULA O SERIE BLANCA
La diferenciacin
concluye en el timo
La diferenciacin
contina en
la mdula sea
Linfoblasto Prolinfocito
Linfocito T
Plasmocito
A n t g e n o s de superficie de linfocitos y plasmocitos
Linfocito B
Linfoc'rtos B Plasmocitos
CD19 DQ
LlNFOPOYESIS
Los linfocitos, de la misma manera que el resto de los
leucocitos, derivan de la stem cell medular. Se acepta que
los linfocitos T, B y NK surgen a partir de un precursor en
comn, aunque an se desconoce si se trata de un precur- Prolinfocito
sor exclusivo de los linfocitos o si es compartido con otra de
las series celulares. A diferencia de la serie mieloide, en la Los linfoblastos son clulas esfricas de ncleo grande y nuclolos prominen-
diferenciacin de los precursores de los linfocitos no exis- tes, a medida que se produce la maduracin, la cromatina se compacta estre-
chamente.
ten etapas morfolgicas caractersticas que puedan ser re-
conocidas como tales. Por lo tanto, slo se distinguen los
diferentes elementos celulares mediante la identificacin NK: clulas pro-B, clulas pro-Ty clulas pro-NK. A partir
de antgenos especficos utilizando anticuerpos mono- de all, la diferenciacin en linfocitos B y en NK continua-
clonales. De esta manera se distinguen tres precursores r en la mdula sea, mientras que la correspondiente a los
comprometidos con la diferenciacin en linfocitos B, T o linfocitos T prosigue en el timo.
38
FRMULA O SERIE BLANCA
Vacuolas claras
Granulos azurfilos
(teidos de rojo)
Pequeos
granulos rosados
Pequeos glbulos
incoloros
Ncleo arrionado
Halo perinuclear
Citoplasma
con prolongaciones
agudas Ncleo hendido
Surco nuclear
Ncleo tpico
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FRMULA O SERIE BLANCA
Cuerpos de Russe
Ncleo
excntrico
Cromatina gruesa
y conglomerada
Cuerpos
de Russel
Secreciones
Citoplasma reticulado
Depresiones perifricas
producidas por eritrocitos
adyacentes
41
FRMULA O SERIE BLANCA
LAS LEUCEMIAS
LEUCEMIAS AGUDAS
Las leucemias agudas se caracterizan por su evolucin
relativamente rpida y por la proliferacin de clulas
muy indiferenciadas (blastos). Representan la neopla-
sia maligna ms frecuente en la infancia, aunque pue-
de observarse a cualquier edad.
La etiologa se desconoce, aunque se considera que es- Leucemia aguda linfoblstica - L1
tas leucemias son el resultado de la interaccin entre
factores genticos, ambientales e inmunolgicos. Hay
ciertos factores clsicamente asociados al desarrollo de
la leucemia, como la exposicin a radiaciones ionizantes,
algunos qumicos (benceno, pesticidas) o agentes
alquilantes. Del mismo modo, ciertas condiciones
genticas constituyen una predisposicin a la leucemia
aguda, como la trisoma 21, la anemia de Fanconi, el
sndrome de Bloom, la agammaglobulinemia congni-
ta, etc. Sin embargo, la mayora de los afectados son
previamente sanos.
La clasificacin de las leucemias agudas se basa en la
morfologa de la mdula sea, y en las caractersticas
inmunolgicas y citogenticas de las clulas malignas.
Las leucemias pueden ser linfoblsticas o mielobls- Muchas clulas grandes
y heterogneas
ticas, de acuerdo con el progenitor medular compro-
metido en el desarrollo maligno. D e n t r o de las Leucemia aguda linfoblstica - L2
leucemias agudas linfoblsticas (LLA) se distinguen,
a su vez, tres tipos (Ll a L3) y dentro de las leucemias
mieloblsticas agudas (LMA), 8 tipos diferentes (MO
a M7). En conjunto comprenden los 11 tipos de LA
que en la actualidad reconoce el grupo cooperativo
franco-americano-britnico (FAB). Esta clasificacin
morfolgica de las LA es la nica que se considera en
la actualidad.
Desde el punto de vista inmunolgico, las LLA pue-
den clasificarse en B tempranas, comunes, pre-B, B o
T, con caractersticas antignicas propias. Algunas
leucemias agudas mieloblsticas como la MO o la M7
slo pueden identificarse con precisin por medio de
inmunorreactivos o por microscopia electrnica. En
muchos de los casos de LA se encuentran alteracio-
nes cromosmicas; se sabe que en ms del 50% de las
LMA ocurre as. El tratamiento de una LMA es ms
exitoso en sujetos que no presentan alteraciones Leucemia aguda linfoblstica - L3
cromosmicas, e incluso se ha definido una clasifica-
cin de LMA por riesgos a partir de los trastornos
genticos, que permite predecir la posibilidad de lo- Leucemias linfoblsticas, estadios L1-L3.
42
FRMULA O SERIE BLANCA
Citoplasma escaso
Moderados
Ncleo
redondo
Granulos
nucleares
oscuros
Fragmentos citoplasmticos
Citoplasma abundante
semejantes a plaquetas
Leucemia aguda mieloblstica - M5 monoctica Leucemia aguda mieloblstica - M6 eritroleucemia
grar remisin completa del padecimiento, duracin biologa molecular permite el diagnstico preciso de
de la misma y supervivencia. Las translocaciones estas entidades y, adicionalmente, controlar la respues-
cromosmicas t (15; 17) y t (8:21), y las inv-16 son ta al tratamiento.
alteraciones cromosmicas que ocurren respectiva- La expansin clonal de blastos en la mdula sea des-
mente en LMA-M3, LMA-M2 y LMA-M4, y su iden- plaza al resto de las series celulares, las cuales sufren
tificacin por medio de cariotipo o de mtodos de una disminucin crtica de sus componentes. Esto es
43
FRMULA O SERIE BLANCA
44
FRMULA O SERIE BLANCA
CLASIFICACIN MORFOLGICA DE
LAS LEUCEMIAS AGUDAS ( F A B )
Pro-B (pre-pre B) +
Comn + +
Pre-B + +
T +/- +
LLA = leucemia linfoblstica aguda; Clg = inmunoglobulina de citoplasma; Slg = inmunoglobulinas de superficie;
TdT = desoxinucleotidiltransferasa terminal.
MO
Ml/2/3 +
M4/5 +
M6 +
M7
los casos, linfocitos de tipo B, que son defectuosos desde La leucemia de clulas vellosas es una enfermedad
el punto de vista inmunitario. El diagnstico depende linfoproliferativa que se origina en los linfocitos B. Las c'
del hallazgo de linfocitosis absoluta persistente en la lulas leucmicas son de tamao intermedio o grande (10-
sangre con un incremento en el porcentaje (> 50%) de 18 mcm) que se caracterizan por tener prolongaciones en
pequeos linfocitos con ncleos redondos en la mdula el citoplasma, a manera de "pelos"; adems, poseen
sea. fosfatasa acida positiva.
45
FRMULA O SERIE BLANCA
MONOCITOS Y MACRFAGOS
Para la identificacin de
las clulas maduras
se observa la estructura
nuclear y las propiedades
del citoplasma
Se desarrollan
en la mdula sea
Monoblasto
Microvellosidades
citoplasmticas Circunvoluciones
cerebroides del ncleo
Nuclolos
Granulos
Ncleo lobulado
Cromatina en acmulos
Granulaciones
Surcos nucleares
Citoplasma con aspecto
de vidrio esmerilado
Granulaciones
finas
Vacuolas
47
FRMULA O SERIE BLANCA
monocito maduro, que es una clula ms pequea, ms can en los sinusoides del hgado y tambin fagocitan
activa funcionalmente y que ha perdido su capacidad de eritrocitos y otros elementos celulares, constituyendo im-
mitosis. portantes sitios de almacenamiento de hierro. Los ma-
crfagos de los alvolos pulmonares, de la lmina propia
LOS MONOCITOS del tracto gastrointestinal, y de los lquidos pleural y
El monocito maduro es una clula.mvil de aproximada- peritoneal reflejan en su morfologa su funcin especfica
mente 12 a 15 mcm de dimetro, cuyo ncleo ocupa cerca de fagocitosis de microorganismos, clulas y detritus de
de la mitad del rea celular, generalmente est ubicado en acuerdo con su localizacin tisular.
una posicin excntrica y de forma irregular, descrita por
La mayora de los macrfagos tienen un dimetro de en-
lo comn como clula "en herradura". En el interior del
tre 25 y 50 mcm, con un ncleo excntrico fusiforme que
ncleo puede distinguirse una caracterstica red de
contiene uno o dos nuclolos en su interior y una fina cro-
cromatina que forma acmulos ubicados perifricamente.
matina que tiende a formar acmulos en forma similar a
Al microscopio electrnico se distinguen uno o dos nuclolos
pequeos rodeados de cromatina. lo observado en los monocitos. El citoplasma evidencia
gran cantidad de granulos y vacuolas claras cercanas a la
El citoplasma contiene un nmero variable de granulos y periferia, lo cual evidencia la activa pinoctosis celular.
vacuolas. A la microscopa electrnica pueden observar- Numerosos y prominentes microtbulos y microfilamen-
se numerosas mitocondrias pequeas y elongadas, un tos citoplasmticos permiten el movimiento celular. De
complejo de Golgi bien desarrollado y una cantidad va- hecho, los macrfagos activados se distinguen por sus
riable de ribosomas y polirribosomas. Lo que distingue al notables pseudpodos.
monocito es la gran cantidad citoplasmtica de micro-
tbulos y microfibrillas, generalmente dispuestas alrede- La principal caracterstica morfolgica de los macr-
dor del ncleo. Los granulos citoplasmticos son similares fagos, independientemente del sitio en el cual se locali-
a los observados en los granulocitos, densos, homogneos cen, es la presencia de lisosomas que con frecuencia se
y que contienen fosfatasa acida y arilsulfatasa, por lo observan fusionndose con fagosomas para formar
tanto, son lisosomas primarios. Luego de la endocitosis, lisosomas secundarios. Dentro de estos ltimos pueden
los lisosomas se fusionan al fagosoma, formando los verse material de digestin de clulas, bacterias y otros
lisosomas secundarios. detritus.
La superficie celular presenta gran cantidad de micro-
vellosidades. En la circulacin, los monocitos representan
entre un 4% y un 8% de los leucocitos sanguneos, perma-
neciendo en ella cerca de 32 horas promedio. Tienden a
adherirse a las paredes vasculares y responden a estmulos
quimiotcticos efectuando movimientos de diapdesis ac-
tiva entre las clulas endoteliales hasta alcanzar los tejidos,
en cuyo interior maduran a macrfagos; adquieren un
mayor volumen celular e incrementan su capacidad fa-
gocitaria mediante un aumento en el nmero de las enzi-
mas hidrolticas en el interior de los lisosomas (fosfatasas,
estearasas, (3-glucuronidasas, lisozima, arilsulfatasas, etc.).
Los monocitos continuamente emigran desde la circula-
cin hacia los tejidos perifricos.
LOS MACRFAGOS
Los macrfagos son monocitos diferenciados en el interior
de diferentes tejidos y se distinguen de sus predecesores
por presentar un mayor volumen celular, un aumento en el
nmero de granulos citoplasmticos, una mayor heteroge-
neidad de la forma celular y un incremento en el nmero
El monocito al ingresar a los tejidos se transforma en macrfago, clula con
de vacuolas claras intracitoplasmticas. La forma del gran capacidad fagoctca y con una vida media de hasta 70 das.
macrfago y ciertas caractersticas morfolgicas y funcio-
nales dependern del tipo de tejido en el cual reside. Los
macrfagos del bazo tienen como funcin el secuestro y la
destruccin de eritrocitos anormales o envejecidos, por lo RECEPTORES Y ANTGENOS DE SUPERFICIE DE
cual evidencian agregados intracitoplasmticos de ferri- MONOCITOS Y MACRFAGOS
tina. Los macrfagos de la mdula sea forman parte de las Los monocitos y los macrfagos tienen diversos receptores
islas eritroblsticas y tambin ejercen funciones de en la superficie celular que representan marcadores de
eritrofagocitosis, almacenamiento y transferencia de hie- origen, migracin y funcin: para la porcin Fe de las
rro. Los macrfagos hepticos (clulas de Kupffer) se ubi- inmunoglobulinas, para diversos componentes del comple-
48
FRMULA O SERIE BLANCA
DISTRIBUCIN DEL
SISTEMA FAGOCTICO MONONUCLEAR
ment, para varias citocinas, para pptidos y pequeas compatibilidad (MHC): HLA-DR, - D P y - D Q . Existe
molculas (serotonina, histamina, sustancia R endorfinas, una amplia variabilidad en la expresin de H L A de
encefalinas), para distintas hormonas (insulina, gluco- acuerdo con el tejido en el cual se e n c u e n t r e el
corticoides, angiotensina), para transferrinay lactoferrina, macrfago: mientras que los ubicados en el bazo contie-
para lipoprotenas, para coagulantes y anticoagulantes nen un alto porcentaje de clulas HLA-DR positivas
(fibringeno, fibrina, al-antitrombina, heparina), para (50%), los macrfagos peritoneales tienen un nmero
fibronectina, para laminina, para agonistas colinrgicos y relativamente bajo (10% a 20%). Diversas linfoquinas,
adrenrgicos, etc. Todo esto demuestra la importantsima especialmente el interfern-y, son capaces de inducir a
interaccin que ejercen estas clulas y sus numerosas fun- los macrfagos a expresar altos niveles de antgenos del
ciones. M H C de clase II, mientras que la prostaglandina E, la
De la misma manera, monocitos y macrfagos contie- alfa-fetoprotena y los glucocorticoides producen una
n e n una serie de antgenos de superficie que los carac- regulacin descendente de la expresin de HLA-DR
terizan y distinguen algunas de sus funciones. Tal es el en estas clulas.
caso de la funcin como clulas presentadoras de Otros antgenos de superficie presentes en los macrfagos
antgenos, para lo cual exhiben en la superficie celular y monocitos son los receptores para CD11, CD14, CD68
molculas de clase II del complejo mayor de histo- y CD4.
49
FRMULA O SERIE BLANCA
WORKING FORMULATION
1982
BAJO GRADO
A Linfoma Unfoctico pequeo con diferenciacin plasmocitoide o sin ella.
B Linfoma folicular de clulas hendidas pequeas.
C Linfoma folicular mixto, de clulas hendidas pequeas y clulas grandes.
G R A D O INTERMEDIO
D Linfoma folicular de grandes clulas.
E Linfoma difuso de clulas pequeas hendidas.
F Linfoma difuso mixto, clulas pequeas hendidas y clulas grandes.
G Linfoma difuso de clulas grandes.
ALTO G R A D O
H Linfoma inmunoblstico de clulas grandes.
I Linfoma linfoblstico.
J Linfoma de clulas pequeas no hendidas.
OTROS
K Clulas vellosas, linfoma cutneo de clulas T, neoplasia histioctica, neoplasia plasmoctica, etc.
PRECURSORES PRECURSORES
- Leucemia/linfoma linfoblstico de precursores B (I) - Leucemia/linfoma linfoblstico de precursores T (I)
52
FRMULA O SERIE BLANCA
La variada gama de clulas que contienen los extendidos de das. Los macrfagos, tienen vida media ms larga que los
sangre perifrica debe su riqueza en mayor proporcin a los neutrfilos, y son responsables de la remocin de clulas
integrantes de la serie blanca o leucocitos, cuya vital partici- daadas y tejidos senescentes o muertos. Existen dos clases
pacin en funciones relacionadas con la respuesta inmune principales de linfocitos: los linfocitos B, que deben su nom-
especfica e inespecfica es frecuentemente reflejada en las bre a que se desarrollan en la mdula sea (de la denomi-
alteraciones cuali-cuantitativas que se ponen de manifiesto nacin inglesa bone marrow) y son los encargados de la
en la sangre de pacientes afectados por patologas infec- produccin de anticuerpos, y los linfocitos T, que se nom-
tocontagiosas. bran as porque completan su desarrollo en el timo, y que
son los responsables de la inmunidad celular, o que incluye
La sangre contiene varios tipos de clulas con diferentes actividades de modulacin de la respuesta inmune de otros
funciones y stas varan desde el transporte de oxgeno a la glbulos blancos y hasta la capacidad de destruir clulas
produccin de anticuerpos. Algunas de estas clulas reali- infectadas por diversos patgenos.
zan sus funciones en el sistema circulatorio mientras que
otras utilizan la sangre como medio de transporte para al- LAS TINCIONES HISTOLGICAS REVELAN
canzar otros tejidos. Sin embargo, todas ellas comparten
DIFERENCIAS BIOQUMICAS Y MORFOLGICAS
caractersticas en comn como ser su vida media limitada
y su renovacin en forma continua a lo largo del ciclo de La observacin de los estadios de diferenciacin celular
vida del ser humano. Notablemente, todas provienen de requiere la obtencin de material mediante puncin
un mismo tipo de clula germinal (stem cell) que se en- aspirativa, que en el adulto se puede practicar en el
cuentra en la mdula sea. Estas clulas germinales son esternn o en la cresta ilaca posterior. Luego de la ob-
totipotentes, pudiendo dar origen a todos los tipos de clu- tencin de este material se realiza el extendido de los
las del tejido sanguneo y tambin a otros tipos de clulas, grumos medulares, que una vez teido puede visua-
como los osteoclastos, que forman parte del tejido conectivo. lizarse con microscopa ptica. Las tinciones histolgicas
Dentro de las clulas que forman el tejido sanguneo en- permitieron grandes avances en la ubicacin de estas
contramos a los glbulos rojos que transportan oxgeno y clases celulares y en la caracterizacin de distintos tipos
dixido de carbono, plaquetas que intervienen en la coa- de leucemias, enfermedad maligna que puede incluir a
gulacin sangunea y leucocitos o glbulos blancos que las clulas madre o precursoras y a su linaje posterior. La
combaten infecciones y en algunos casos digieren dese- coloracin de Wright o la de May-Grnwald-Giemsa
chos celulares actuando como recolectores/reprocesadores son utilizadas tanto para mdula sea como para sangre
de residuos. Los leucocitos tienen tambin la habilidad de perifrica y permiten revelar los distintos estadios de
atravesar los capilares sanguneos y migrar hacia los tejidos diferenciacin celular. Estas tinciones tambin se deno-
donde son requeridos. minan panpticas, ya que colorean tanto los elementos
bsicos como los cidos que se encuentran en el ex-
Los glbulos blancos pueden ser clasificados dentro de tres tendido. Los componentes que forman esta coloracin
categoras en base a su morfologa revelada por tinciones son tres: azul de metileno, azur de metileno y eosina. El
histoqumicas y resuelta por microscopa ptica: granu- azul de metileno es un componente bsico que tie es-
locitos, monocitos y linfocitos. Los granulocitos contienen tructuras acdicas de la clula impartindoles una colo-
numerosos lisosomas y vesculas secretorias y las tinciones racin azul-violcea; la eosina y el azur de metileno son
permiten visualizar diferencias entre ellos en cuanto a compuestos cidos que tien estructuras alcalinas, otor-
bioqumica y funcin, forman parte de este grupo gndoles coloracin rojo-anaranjada y rojo-violcea
neutrfilos, basfilos y eosinfilos. Los neutrfilos, o tam- respectivamente. La tincin para la deteccin de
bin llamados polimorfomonucleares debido a que su n- peroxidasas imparte una coloracin marrn-rojiza a las
cleo presenta varios lbulos, son los ms abundantes y su clulas con granulos peroxidasa positivos y permite la
funcin es fagoctar microorganismos, comnmente bac- clasificacin morfolgica de leucemias mielocticas agu-
terias. Los basfilos secretan histamina y median respues- das. La coloracin esterasa inespecfica, permite la dife-
tas inflamatorias y los eosinfilos colaboran en la destruc- renciacin primaria entre leucemias mielomonocticas
cin de parsitos y modulan respuestas alrgicas infla- y monoctcas de otras leucemias mielocticas, otorga
matorias. Los monocitos, una vez que dejan el torrente una coloracin marrn-anaranjada en caso de ser positi-
sanguneo, dan origen a clulas llamadas macrfagos, c- va la reaccin. La reaccin de PAS (Periodic-Acid-
lulas fagocticas por excelencia, capaces de ingerir bacte- Schiff), permite la deteccin de polisacridos y de muco-
rias y protozoos. Los macrfagos, junto con los neutrfilos, polisacridos intracelulares. La serie granuloctica, PAS
albergan gran nmero de lisosomas especializados cuyo positiva, se revela en color borgoa y va incrementndose
contenido es capaz de generar molculas altamente en el linaje celular hasta llegar a un mximo en los
reactivas (radicales libres), como el anin superxido (O, - ), neutrfilos. Esta coloracin se utiliza en el diagnstico
el hipoclorito, y que a la vez posee hidrolasas concentra- del sndrome mielodisplsico y de eritroleucemias.
53
FRMULA O SERIE BLANCA
Mieloblasto
54
FRMULA O SERIE BLANCA
55
FRMULA O SERIE BLANCA
56
FRMULA O SERIE BLANCA
lado o doblado, la cromatina aparece en hebras finas, ca- que preparado sea movido formando una figura de diente
ractersticas de estas clulas. El citoplasma aparece en co- de sierra, de arriba hacia abajo, de izquierda a derecha, de
lor azulado grisceo y puede tener alguna vacuola. Se di- abajo hacia arriba, de izquierda a derecha, y volver a co-
ferencia de las clulas de la serie granuloctica por ser menzar el recorrido, hasta totalizar un recuento total de
esterasa inespecfica positiva y dar reaccin dbil para por lo menos 100 leucocitos.
peroxidasa y PAS. Los valores normales encontrados en
Es ideal realizar el recuento en dos extendidos realizados
sangre van de 0,2 a 1,0 lOVfXl. Los macrfagos son el ltimo
con la misma muestra para promediar los resultados. Los
estadio de maduracin de los monocitos y son difcilmente
porcentajes que se obtienen por este mtodo pueden ser
localizables en sangre perifrica.
transformados en valores absolutos al combinar con el re-
Los linfocitos son las clulas ms pequeas de la serie cuento total de leucocitos.
blanca, su tamao es variable debido a que la expansin Es importante destacar que la precisin del recuento para
del citoplasma vara en funcin de su actividad y oscila las clulas sanguneas menos predominantes es baja al con-
entre 9 y 20 xm. En sangre perifrica los linfocitos de me- tar slo un total de 100 leucocitos. Por ejemplo, si el valor
nor tamao son los ms abundantes. Son las clulas ms real de eosinfilos en sangre fuera de 5%, es de esperar que
numerosas, despus de los neutrfilos, en extendidos de en el recuento diferencial de un mismo extendido se halle
sangre normal de adultos con valores que van de 1,0 a 3,5 un valor que oscile entre 2 y 11%. Este rango puede ser
103/(xl. El ncleo es redondo u oval, sin lbulos a diferencia reducido a u m e n t a n d o el n m e r o total de clulas
de los monocitos, intensamente teido. El citoplasma es de recontadas, sin embargo, esto carece de valor en la evalua-
color azulado a gris. Al igual que los monocitos son esterasa cin manual de un extendido, y si se requiere mayor preci-
inespecfica positivos, presentan coloracin dbil para PAS, sin debera utilizarse un mtodo automatizado, donde el
y son peroxidasa negativos. nmero de clulas contadas puede llegar a 10.000 con
facilidad.
RECUENTO DIFERENCIAL LEUCOCITARIO
La clasificacin manual de los leucocitos utilizando la co- REFERENCIAS:
loracin de Wright permite determinar la relacin porcen- Wintrobe's Clinical Hematology , 1999. Vol. 1. 10 th. Edition. Lee G. R.,
Foerster J., Lukens J., Paraskevas E, Creer J. R, Rodgers G. M. Williams &. Wilkins
tual entre las diversas especies leucocitarias. Para ello se
Eds, West Camden St., Baltimore, Maryland.
debe trabajar en el rea central del extendido y realizar
Diagnstico Hematolgico. Laboratorioy Clnica, 1972. Tomo I. Ciscar, F. y
una observacin sistemtica del mismo moviendo la regin Farreras. De. Jims, Barcelona.
visualizada asegurando la no repeticin del recuento (evi- Hematologa Clnica, 1979. Vol. 1. Wintrobe M. M., Lee G. R., Bithell T. C,
tar el solapamiento de las reas revisadas). Se recomienda Boggs D. R., Athes J. W, Foerster J. Editorial Intermdica, Bs. As.
57
FRMULA PLAQUETARIA
60
FRMULA PLAQUETARIA
Los granulos a son los ms abundantes, cerca de 50 a 80 endotelial, VEGF, etc.), inhibidores de la fibrinlisis,
por cada plaqueta, y tienen un dimetro promedio de 200 inmunoglobulinas y otras.
nm. En su interior pueden distinguirse diferentes electro- Los cuerpos densos estn presentes en nmero de 3 a 8 en
densidades que corresponden a las diversas protenas que cada plaqueta. Estos granulos electrodensos de aproxima-
contienen. De hecho, virtualmente todas las protenas damente 20-30 nm de dimetro contienen calcio,
plasmticas pueden estar en el interior de estos granulos. serotonina, ADP y ATP La liberacin del contenido de los
Las protenas plaquetarias especficas constituyen una se- cuerpos densos por parte de las plaquetas activadas ejerce
rie de quemoquinas e incluyen al factor plaquetario 4 y a un efecto de retroalimentacin positiva sobre la agrega-
la familia de las (3-tromboglobulinas. Otras protenas pre- cin plaquetaria, ya que el ADP es un potente agonista
sentes en los granulos a son: fibringeno, factor de Von plaquetario y la serotonina algo ms dbil.
Willebrand, fibronectina, trombospondina, factores de la En el interior plaquetario tambin pueden observarse
coagulacin (factor V, protena S, factor XI), factores de microtbulos y microfilamentos que le otorgan motilidad a
crecimiento (PDGF, TGF-J3, factor de crecimiento la plaqueta, y un nmero variable de mitocondrias.
Citoplasma granuloso
Prolongaciones citoplasmticas
con vesculas visiblemente
demarcadas
Vacuolas
perifricas
Trombocitos diferenciados
Trombocitos libres
Mltiples
ncleos
* "
Prolongaciones
Pequeos
granulos
azules
Megacariocito maduro
Trombocitos patolgicos.
61
FRMULA PLAQUETARIA
Las plaquetas son los elementos particulados ms peque- presenta granulaciones rojo-violceas (azurfilas) y su ta-
os de la sangre, carecen de ncleo y su vida media es mao es mayor al anterior. Generalmente, se ubican en la
muy corta, sin embargo, su indispensable participacin en cercana de los capilares sanguneos y extienden prolonga-
el mantenimiento de la hemostasia demuestra que para ciones citoplasmticas penetrando en el lumen de aqu-
ser importante no es necesario contar con un gran tamao. llos. De esta manera se generan las PLAQUETAS, por
desprendimiento de pequeas porciones de las prolonga-
GENERACIN DE LA SERIE PLAQUETARIA
Los progenitores de las plaquetas, derivados de las clulas
germinales de la mdula sea, realizan su proceso de creci-
miento y diferenciacin pasando por estadios reconocibles
en la visualizacin con microscopa ptica de extendidos
medulares. El promegacarioblasto, primera clula pre-
cursora distinguible, presenta un solo ncleo, de aspecto
pseudo linfoide y para su identificacin es necesaria la
reaccin de reconocimiento con marcadores moleculares
o enzimticos especficos. El megacarioblasto, el siguien-
62
FRMULA PIAQUETARIA
do aparecer con forma redondeada y emitiendo prolonga- es inferior a 130 103/}Xl, por debajo de 20 103/|il se produce
ciones delgadas. Al microscopio ptico pueden distinguir- sangrado espontneo. Las causas de este desorden pueden
se dos zonas: una central llamada crommero, con fina deberse a: disminucin de la produccin o de la vida me-
granulacin rojo-purprea donde se agrupan las organelas, dia de estos elementos, atrapamiento (como en varios ca-
y una externa llamada hialmero, en general incolora o sos de esplecnomegalia) o despus de transfusiones de san-
ligeramente azulada. gre. Pseudo trombocitopenia se produce en algunos ca-
sos en donde la sangre del paciente se aglutina a pesar de
Los valores normales de plaquetas estimados a partir del ex-
estar anticoagulada con EDTA. En esta situacin se pro-
tendido de sangre se encuentran entre 130 a 360 x lOVjLll,
duce un falso recuento por debajo de los valores normales
mientras que en el caso de contadores automticos
en los analizadores automticos y debe determinarse el
hematolgicos o recuento en cmara los valores obte-
nmero real de plaquetas a partir del extendido de sangre.
nidos son mayores por caractersticas propias de estos m-
Una manera de evitar la agregacin es utilizar otro
todos. Si el extendido se prepar a partir de sangre no
anticoagulante o realizar el recuento a partir de sangre
anticoagulada, las plaquetas se agregan dando la impre-
capilar.
sin de un recuento por debajo de los valores normales.
En el microscopio ptico, con objetivos de bajo aumento Existen alteraciones de tamao de las plaquetas, cuando
(10 X o 40 X) se comprueba la coloracin y distribucin se encuentran elementos de este origen con dimetro
adecuada de estos elementos sobre el extendido. Luego mayor de 5 j,m. Estas son llamadas plaquetas gigantes,
con objetivo de inmersin (100 X) se estima el nmero de tienen forma redondeada, poseen una fina granulacin de
plaquetas en varios campos sucesivos debindose encon- color azul a violeta en su interior y los bordes no se visualizan
trar de 5 a 15 plaquetas por campo o 1 plaqueta cada 10 a
en forma definida. Normalmente no son detectadas por
20 glbulos rojos. Las alteraciones de recuento por debajo
los analizadores automticos, dando lugar a una reduc-
de este rango son llamadas trombocitopenias y por enci-
cin en el recuento con respecto a los valores normales. La
ma trombocitosis.
presencia de estas formas se debe usualmente al incre-
mento de cariocitopoyesis a partir de los megacariocitos
ANOMALAS PLAQUETARIAS medulares y puede ocurrir debido al aumento del consu-
La alteracin en nmero de plaquetas por encima de los mo de plaquetas en enfermedades como la trombocitopenia
valores normales se denomina trombocitosis. En estos casos inmunitaria o por el incremento de la produccin a nivel
es poco comn que los valores excedan los 1000 103/j-ll, si medular en la trombocitemia esencial. Tambin se encuen-
no se encuentran presentes otros factores de riesgo es rara tran junto con neutrfilos con granulacin basoflica en
pacientes con anomala de May-Hegglin y en el sndrome
de Bernard-Soulier. Cuando nos encontramos con
plaquetas que difieren en tamao nos encontramos frente
a una modificacin cualitativa y debe considerarse altera-
do cualquier elemento cuyo dimetro exceda los 4 /xm, las
causas se deben al incremento de la generacin a nivel
mdula sea y esta modificacin puede deberse al mismo
origen de los casos comentados para las plaquetas gigantes.
En extendidos de sangre es posible encontrar remanentes
de megacariocitos, stos se distinguen por su forma re-
dondeada, granulacin gruesa de color violeta a azul oscu-
ro debido a la presencia de cromatina, pero carentes de
Trombocitos ncleo y citoplasma residual escaso con las tinciones
panpticas habituales.
REFERENCIAS:
la derivacin hacia una trombosis. Valores an ms altos
que los mencionados anteriormente (por encima de 3000 Wintrobe's Clinical Hematology , 1999. Vol. 1. 10 th. Edition. Lee G. R.,
FoersterJ., LukensJ., Paraskevas E, Creer J. E, RodgersG. M. Williams & Wilkins
lQVpl) se pueden encontrar en desrdenes de tipo Eds, West Camden St., Baltimore, Maryland.
mieloproliferativo, con aumentos persistentes del nmero Diagnstico Hematolgico. Laboratorio y Clnica, 1972. Tomo 1. Ciscar F. y
de plaquetas, y pueden estar asociados con complicacio- Farreras. De. Jims, Barcelona.
nes trombticas y/o sangrado. La trombocitopenia se en- Hematologa Clnica, 1979. Vol. 1. Wintrobe M. M., Lee G. R., Bithell T. C,
cuentra presente en casos donde el recuento de plaquetas Boggs D. R-, Athes J. W, FoersterJ. Editorial Intermdica, Bs. As.
63
BlOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO
HEMATOLGICO
El laboratorio supone para el operador una serie de riesgos ridas) en la piel que muchas veces pueden no ser evi-
que pueden reducirse con la adopcin de medidas de pre- dentes. El uso de guantes puede reducir este riesgo, as
vencin simples y eficaces. como tambin el empleo de anteojos y cubrebocas, pues-
Los riesgos pueden ser tanto de naturaleza qumica como to que aerosoles o salpicaduras constituyen otra forma
biolgica, y es importante en primer lugar enumerarlos para de tomar contacto con fluidos biolgicos potencialmen-
entender cmo protegerse. te peligrosos.
La sangre como tal y su manejo debe imponer respeto, En el manejo de guantes es importante recordar que si
puesto que en una muestra pueden hallarse cantidades stos toman contacto con sangre pueden resultar la fuente
suficientes de agentes patgenos como para resultar fuente de contaminacin de otras superficies, por lo que su re-
de una infeccin; la va de ingreso ms comn para estos cambio oportuno tambin debe ser considerado a la hora
patgenos son pequeas soluciones de continuidad (he- de establecer las recomendaciones de uso.
64
MDULO
65
66
INTERPRETACIN DE HISTOGRAMAS
2.1 INTRODUCCIN
La interpretacin de histogramas y escatergramas es un su utilidad como criterio importante de decisin para, al
tema que se vuelve cada vez ms importante en el argot de efectuar la valoracin del resultado de una citometra
la hematologa actual, debido principalmente a la hemtica, poder utilizarlos como apoyo al decidir qu mues-
proliferacin de instrumentos automatizados que cada tras requieren una valoracin microscpica ms a fondo
vez ms participan de manera rutinaria y eficientemente para emitir un resultado con validez diagnstica completa.
en las reas de Hematologa de un creciente nmero de Con el presente mdulo pretendemos dar a conocer
laboratorios a nivel mundial. cmo se lleva a cabo el proceso de generacin de histo-
No obstante, an es frecuente encontrar, sobre todo en los gramas y escatergramas en los diferentes instrumentos
laboratorios clnicos pequeos, que existe cierto grado de Cell Dyn, efectuando una revisin de las diferentes
desconocimiento tanto de las ventajas como del alcance y tecnologas utilizadas para obtenerlos, as como expo-
limitaciones diagnsticas que pueden alcanzar, as como ner qu informacin til se puede extraer de ellos.
67
INTERPRETACIN DE HISTOGRAMAS
68
INTERPRETACIN DE HISTOGRAMAS
GENERACIN DE b IS roGRAM
10
(f 9
o 8
_J
-> 7
DEP
6
5
O 4
UJ 3
Z) 2
1
PULSOS CR 84 85 86 87 88 89 90 9 1 9 2 93
FEMTOLITROS (fl)
h-
DISTRIBUCIN DEL TAMAO
DE CLULAS ROJAS
La dilucin de eritrocitos contiene los tres tipos celulares. Por ello, el histograma de serie roja puede ser utilizado
para mostrar grficamente las relaciones entre cada tipo celular.
RBC
Fig.4
Entre los parmetros de la formula roja que se derivan de PLTR .' Este alerta es desplegado cuando el conteo
este histograma de eritrocitos se encuentran: plaquetario es inferior a 120 k/[ y adems el resultado
El volumen corpuscular medio (MCV) que se obtiene del conteo inicial y del segundo conteo difieren entre s
por medicin directa del promedio aritmtico del volu- en un valor superior a los lmites esperados, en cuyo
men de todos los eritrocitos incluidos en el muestreo. caso es necesario reanalizar la muestra y si el alerta
persiste realizar el conteo plaquetario en cmara de
El ancho de distribucin eritroctica (RDW) es una me-
Newbauer.
dida matemtica de la amplitud del histograma. Lo que a
nivel clnico significa un mayor o menor grado de LRI.- Interferencia en la regin baja por sus siglas en
"anisocitosis" en los eritrocitos de la muestra. ingls. Este alerta es mostrado a la derecha del resultado
del VPM cuando el histograma de plaquetas no tiene
Adicionalmente a estos parmetros derivados del una distribucin normal o si el histograma no inicia en la
histograma es importante tomar en consideracin que base del mismo en la zona limtrofe al lmite inferior de 1-
los "alertas" relacionados a los resultados en muchos 3 fl del histograma. Entre las causas biolgicas que pue-
casos son derivados del anlisis de los datos contenidos den generar este alerta se encuentran: presencia de:
en los histogramas. Entre estos alertas tenemos: microplaquetas, fragmentos celulares, crioglobulinas,
RBC MORPH.- Este alerta aparece en los instru- inclusiones eritrocitarias, hemolisis, etc. Este alerta tam-
mentos Cell Dyn 3000, 3500 y 3700, y es mostrado a la bin puede ser generado por causas ajenas a la muestra
derecha del resultado del MCV, indica que uno o ms de como podra ser la utilizacin de un reactivo contamina-
los siguientes criterios se encuentran fuera de especi- do o colocado errneamente en el instrumento (como
ficaciones: podra ser la utilizacin por error del operador de un
(MCV) < 8 0 fl o (MCV) > 100 fl recipiente con desechos del instrumento en lugar de un
reactivo nuevo), la presencia de ruido electrnico por
(MCH) < 2 5 pg o (MCH) > 3 4 pg carencia de una adecuada toma de tierra fsica en la lnea
(MCHC) < 2 9 g/dl o (MCHC) > 3 7 g/dl elctrica en que se est conectando el instrumento.
(RDW) > 18.5% U R I . - Interferencia en la regin alta por sus siglas en
Sin embargo es sumamente importante que el personal ingls. Este alerta es mostrado a la derecha del VPM como
de laboratorio revise el frotis ante la presencia del alerta resultado de la presencia de impulsos elctricos
con la finalidad de cuantificar las anomalas de serie roja anormalmente elevados en la zona del punto de corte
que pudieran estar presentes. superior del histograma de plaquetas (15-35 fl). La prin-
70
INTERPRETACIN DE HISTOGRAMAS
PLT: 9 4 K / | j l
PLT
La alarma LRI aparece acompaando a la cifra de plaquetas para indicar interferencias en la regin baja (LRI); se debe
a la acumulacin de datos en la zona de 2-3 fl. Se activa por una o varias de las siguientes causas:
cipal causa de la aparicin de este alerta es la presencia resultado es imprescindible la verificacin del conteo
de eritrocitos microcticos que invaden el rea corres- plaquetario por otros mtodos.
pondiente al histograma de plaquetas, aunque entre otras Es sumamente importante, al presentarse un alerta en el
causas tenemos la presencia de: macroplaquetas, agrega- resultado de las plaquetas, valorar la causa que lo est
dos plaquetarios, fragmentos de eritrocitos, eritrocitos en- generando y de considerarlo necesario es muy conve-
fermos, y satelitosis plaquetaria. niente el reanlisis de la muestras; en caso de persistir el
L U R I . - Este alerta es el resultado de la combinacin alerta proceder al conteo plaquetario en cmara de
de los 2 tipos de alertas anteriores (LRI y URI) y como Newbauer.
PLT: 296k/ul
PLT
La alarma URI aparece acompaando a la cifra de plaquetas para indicar interferencias en la regin alta (URI); se debe
a la acumulacin de plaquetas y eritrocitos entre los 20 y 40 fl. Esta alarma se activa por una o varias de las siguientes causas:
71
INTERPRETACIN DE HISTOGRAMAS
La medicin del volumen de las clulas blancas median- la ventaja adicional de liberar la hemoglobina para su
te impedancia es posible gracias a la accin del reactivo posterior medicin colorimtrica. En lo referente a las
Usante, el cual no realiza una lisis indiscriminada de las clulas blancas, el Usante va a ocasionar la salida de agua
membranas celulares puesto que slo va a ocasionar la del citoplasma ocasionando que la membrana se adhiera
lisis de las membranas eritrocitarias selectivamente con al ncleo de la clula. Esta salida del agua citoplasmtica
ocasiona que la distribucin del tamao celular no sea
igual a la percepcin microscpica del tamao celular,
Tamao relativo de los leucocitos
que comnmente tenemos. (Ver figura 5).
Al microscopio Luego de la accin del hemolizante Una vez que se modific por accin del Usante el tama-
o de las clulas blancas, stas pasan a travs del orifi-
Linfocito cio de apertura de 7(V generando impulsos elctricos
de igual manera como ocurre durante el conteo de
eritrocitos y plaquetas, slo que en este caso la variabi-
lidad entre el tamao de los impulsos elctricos entre s
es muy alta y en general hay 3 tipos de clulas en las
que los tamaos de impulso generados por las clulas
modificadas por el Usante se sobreponen. stas son:
--ryo monocitos, eosinfilos y basfilos. De ah que actual-
mente la tecnologa de impedancia (sin combinarla con
alguna otra tecnologa) est limitada a reportar como
mximo una diferencial de 3 partes (para que tenga
* * correlacin con la realidad).
Neutrfilo
Fig.5 Fig.
72
INTERPRETACIN DE HISTOGRAMAS
Existen diferentes regiones o puntos de control dentro GRAN R4 o RM .- Se activa cuando existe un nme-
de las 3 poblaciones de clulas blancas incluidas en el ro elevado de clulas a la izquierda de los 350 fl y est
histograma de tal manera que cuando no se cumplen los relacionada con granulocitosis o neutropenia princi-
criterios de normalidad de este histograma se muestran palmente.
6 diferentes alarmas R o Regionales ( RO, R l , R2, R3,
La parte ms importante de estos alertas R o regionales
R4, y RM), estos alertas se muestran a la derecha del
est en que los instrumentos nos estn indicando que no
resultado de la poblacin presuntamente afectada por
basta con el reporte directo de la muestra, sino que inva-
la misma."
riablemente ante la presencia de un alerta R se debe
Regin LIM (35 a 98 fl). Las clulas localizadas en esta realizar la observacin microscpica de la muestra para la
rea son en su mayora linfocitos aunque tambin pue- cuantificacin de la diferencial antes de reportar el re-
den encontrarse eritrocitos nucleados, macroplaquetas, sultado final.
agregados plaquetarios, eritrocitos con Usado incomple-
to, linfocitos aripicos o blastos. EFECTOS QUE PUEDEN INFLUENCIAR
LIM RO o RM .- Esta alarma se despliega cuando el LA OBTENCIN DE RESULTADOS MEDIANTE
nmero de clulas que aparecen a la izquierda de IMPEDANCIA
los 30 fl supera los criterios considerados como norma- Volumen del reactivo hemolizante. Cualquier varia-
les. Y puede ser originada por: agregados plaque- cin en el tipo, volumen o concentracin del reactivo
tarios, macroplaquetas, eritroblastos, eritrocitos re- hemolizante utilizado, as como el aumento en el tiempo
sistentes al Usado y crioglobulinas. de lisis, puede afectar los resultados del diferencial
LIM Rl o RM.- Esta alarma se activa cuando existen volumtrico de 3 partes. Los instrumentos Cell Dyn 1400,
clulas a la izquierda o a la derecha y/o a la derecha 1600 y 1700 adicionan 1.2 mi de Usante a cada muestra,
de los 35 fl en un nmero superior a los criterios de el tiempo de este proceso est optimizado para asegurar
normalidad; se puede deber a la presencia de una adicin lenta del mismo. Cuando los resultados a lo
crioglobulinas, linfocitosis o linfopenia. largo de una rutina de trabajo muestran una frecuencia
de alertas "R" superior a la habitual se debe verificar la
LIM R2 o RM .- Se activa cuando las clulas a la
calibracin del volumen adicionado de hemolizante.
izquierda de los 98 fl exceden los criterios normales y
puede deberse a la presencia de: linfocitos atpicos, Influencia del E D T A tras la o b t e n c i n de la
linfocitosis, linfopenia,basofilia (mayor al5%), blastos muestra. Los resultados no muestran diferencias signi-
o clulas plasmticas. ficativas entre la utilizacin del EDTA (K3 lquido) o
(Na2 Polvo), analizadas entre 25 minutos y 4 horas de
Regin MID (98 a 135 fl). Las clulas localizadas en esta
haber sido obtenidas. Sin embargo, los datos evaluados
rea son generalmente eosinfilos, basfilos y monocitos.
muestran que la accin hemoltica en algunas muestras
Aunque tambin pueden localizarse agranulocitos,
puede estar afectada por el tiempo de exposicin al
blastos, y plasmocitos.
EDTA lquido, la accin hemoltica se realiza directa-
MID R2 o RM .- Esta alarma se activa cuando existe mente sobre la membrana celular, de forma que cual-
un nmero elevado de clulas a la derecha de los 98 quier modificacin de la misma influye sobre los resul-
fl y puede generarse debido a: basofilia (>5%), blastos, tados. (Ver figura 7)
eosinofilia, clulas plasmticas.
El EDTA "puede" generar cambios transitorios en un
MID R3 o RM .- Se activa cuando el nmero de periodo que oscila entre los 5 y 25 minutos tras la obten-
clulas que se localizan a la derecha de los 135 fl es cin de la muestra. El cambio consiste generalmente en
ms elevado que el criterio de normalidad. Este aler- una compresin ms rpida de la membrana por accin
ta se puede generar por: presencia de neutrfilos del Usante (histograma desplazado hacia la izquierda)
en banda ( > 1 0 % ) , blastos, clulas plasmticas, con la falsa activacin de alertas "R" pero generalmente
eosinofilia ( > 1 0 % ) , basofilia, agregados plaque- sin alteracin del resultado numrico de la diferencial
tarios. volumtrica. Sin embargo, los resultados obtenidos tras
Regin GRAN (135 a 345 fl). Las clulas localizadas en 25 minutos de espera desde la obtencin de la muestra,
esta regin son generalmente granulocitos neutrfilos; ya no muestran este fenmeno transitorio y tienen una
sin embargo, en aproximadamente un 20% de las mues- buena correlacin con los frotis teidos.
tras, algunos eosinfilos pueden localizarse en esta re-
Influencia de la t e m p e r a t u r a de la muestra. La
gin.
temperatura de la muestra puede cambiar tambin el
GRAN R3 o RM .- Este alerta se activa cuando las efecto de la accin ltica sobre la membrana celular. Las
clulas que se ubican a la derecha de los 135 fl exce- muestras refrigeradas que se utilizan antes de ser
den los criterios de normalidad, y puede generarse atemperadas muestran a menudo histogramas compri-
como resultado de: presencia de eosinofilia (> 10%), midos hacia la izquierda en donde la regin GRAN
granulocitos inmaduros, granulocitos en banda o ca- invade parcialmente la regin MID y LIM, activando
yados (> 10%), granulocitosis, neutropenia. uno o ms alertas y con la posibilidad de afectar poten-
73
INTERPRETACIN DE HISTOGRAMAS
CONCEPTOS CLAVE: El cuadro muestra cules son los cuatro detectores utili-
Los analizadores Cell Dyn de la serie 3000 emplean zados por el instrumento para captar las caractersticas
tanto la citometra de flujo como la impedancia elc- de cada clula individual presente en la alcuota de la
muestra analizada. En la siguiente figura se observa una
trica para generar los resultados de las clulas blan-
ilustracin que representa una clula desviando la luz
cas, sin embargo, slo los datos provenientes del
hacia los cuatro detectores pticos.
conteo ptico (WOC) se utilizan para la generacin
del conteo diferencial.
El patrn de desviacin de la luz lser es utilizado 90D 90
Detector 0o 10 90 90 Despolarizado
Tipo y direccin de la luz Luz desviada Luz desviada Luz desviada de 70 Luz desviada 90
colectada por cada detector de 1 a 3 o de 7 a 10 a 110 con polaridad ver tical despolarizada
76
INTERPRETACIN DE HISTOGRAMAS
Espejo ^^
Fotomultiplicador de
dispersin de la luz
despolarizada a 90
( PMT J
canal 4
Forma de
lser despol. escter
90 escter
Polarizador horizontal
Fotomultiplicador
de dispersin de
la luz a 90
canal 3
Lente cilindrica
Fotodiodo
detector de
dispersin
de la luz a 10"
Espejo
Reactivo envolvente
Flujo de clulas
Celda de flujo
leucocitario
Diagrama del sistema ptico de los instrumentos Cell Dyn de la serie 3000.
Evitar que se acumule polvo en estos lentes es com- sea seleccionada slo la regin de ms intensidad,
promiso del usuario del instrumento, quien deber valga la redundancia, antes de ser enfocada en la
realizar quincenalmente la limpieza de los filtros de celda de flujo.
aire ubicados en la parte posterior del instrumento. Celda de flujo. Es el sitio utilizado para enfocar
Lentes cilindricos. Tienen la funcin de cambiar hidrodinmicamente una columna de clulas a tra-
la forma del haz lser, de cilindrica a oval, y tambin vs del haz de luz lser, al tiempo que permite la ade-
la funcin de comprimir la luz a fin de reducir su cuada dispersin de la luz, carente de reflejos, para
dimetro y a la vez, intensificarla. poder colectar con exactitud la luz desviada por cada
Ranura de 125 x. Es el ltimo paso en el acon- una de las clulas.
dicionamiento del lser para garantizar que su for- Barra de oscuracin. Esta barra previene que el
ma sea cuadrada, homognea en intensidad y que haz del lser incida directamente en el detector pti-
77
INTERPRETACIN DE HISTOGRAMAS
b. Escatergrama b. Escatergrama
.afitih
^Jfcjlni
Complejidad 10 Complejidad 10
El instrumento Cell Dyn aplica un algoritmo de varios PASO 3: SEPARACIN DE LAS CLULAS
pasos para lograr la clasificacin de las clulas blancas en POLINUCLEARES EN NEUTRFILOS Y
una diferencial de cinco partes con alertas poblacionales.
EOSINFILOS
En el primer paso, ilustrado arriba, se colectan los valores
de intensidad para cada una de las 10,000 clulas inclui-
das en la diferencial y se almacenan en una tabla como la a. Anlisis de datos en Modo de lista
que se muestra en la figura anterior.
TAMAO COMPLEJIDAD LOBULARIDAD GRANULARIDAD CLASIFICACIN
En la grfica generada, corresponde considerar pares
Cl. 0 10 90 90c Despolarizado 1 2
de coordenadas cartesianas a los valores que provie-
nen de dos detectores. Diferente es en este caso la I 165 162 116 32
2 60 64 15 6 Mono
grfica, mejor llamada escatergrama, que represen- 3 140 79 21 9 Mono
ta el tamao celular contra la complejidad celular de 4 148 182 104 118 Eos
5 90 110 28 8 Mono
cada una de las 10,000 clulas, y en donde cada punto 6 36 37 8 4 Mono
representa a una clula.
Cl. 10 90 90 Despolarizado 1
En este tercer paso se considera slo a las clulas que en - Monocitos en color prpura.
la primera clasificacin resultaron ser polinucleares y se - Basfilos en color negro (en impresin, y blanco en el
colocan en el escatergrama: Granularidad vs. Lobularidad, monitor del instrumento).
de tal manera que se observan dos poblaciones: una
Los puntos sobre las lneas continuas representan a las
igualmente dispersa en el eje de lobularidad pero una de
ellas, los eosinfilos, presenta altos valores en el eje clulas incluidas en el conteo celular de W B C total; los
granularidad. puntos debajo de las mismas lneas continuas represen-
tan a eventos celulares que no provienen de WBC.
Por medio de esta grfica podemos separar los neutrfilos
Las lneas punteadas representan la mejor separacin
(amarillo) de los eosinfilos (verde); la lnea diagonal
entre las poblaciones de clulas blancas. Nuevamente
representa la mejor separacin entre las dos poblaciones.
los colores representan a cada una de las poblaciones
Se puede observar que en la tabla se van acumulando
celulares.
cada una de las clasificaciones celulares realizadas.
PASO 5: COMBINACIN DE TODAS LAS
PASO 4: SEPARACIN DE MONONUCLEARES EN
CLASIFICACIONES
LINFOCITOS, MONOCITOS, BASFILOS Y
NWBC a. Anlisis de datos en Modo de lista
TAVIW COMPLtjIDAD LOBULARIDAD GRANULARIDAD CLASIFKAaN
a. Anlisis de datos en Modo de lista
Cl. 0 10 90 90 Despolarizado jo 2 3
TAMAO COMPLEJIDAD LOBULARIDAD GRANULARIDAD CLASIFICACIN
1 165 162 116 32 Poly Neut -
Cl. 0 10 90 90 Despolarizadc 1 2 2 60 64 15 6 Mono - Lymph
3 140 79 21 9 Mono - Mono
1 165 162 116 32 Poly 4 148 182 104 118 Poly Eos
2 60 64 15 6 Mono Limp 5 90 110 28 8 Mono - Baso
3 140 79 21 9 Mono Mono 6 36 37 8 4 Mono Noise/NRBC
4 148 182 104 lis Poly
5 90 110 28 8 Mono Baso
6 36 37 8 4 Mono Noise
/NRBC b. Escatergrama
b. Escatergrama
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Complejidad 10
Complejidad 10
Una vez realizadas todas las clasificaciones, no importa
cul escatergrama veamos en todos ellos, se puede apre-
ciar -por la distribucin de colores- dnde se encuentra
En el paso 4 se considera en el escatergrama Tamao
cada poblacin, sin embargo el escatergrama que nos da
contra Complejidad, teniendo en cuenta nicamente a
mayor informacin es el generado por el Tamao y la
las clulas que en la primera clasificacin fueron toma-
Complejidad. Cabe sealar que una clula ser clasifica-
das como mononucleares. En muestras normales apare-
da en cualquier escatergrama dentro de la misma pobla-
cen cuatro poblaciones bien diferenciadas:
cin celular independientemente de la posicin que ocu-
- NWBC/NRBC en color rojo (clulas no blancas o pe. Es por ello que se permite la sobreposicin de clulas
eritroblastos). diferentes en algunas posiciones comunes dentro del
- Linfocitos en color azul. escatergrama, no quedando clulas sin identificar.
INTERPRETACIN DE HISTOGRAMAS
Complejidad -10
82
INTERPRETACIN DE HISTOGRAMAS
SUSPECT
WBC 22.2 K/uL (WIC) Alerta DFLT(LMB)
2.91 13.1 %N BAND
LYM 18.7 83.9 %L VAR LYM
MONO .143 .643 %M FWBC
EOS .118 .530 %E
BASO 326 1.78 %B
Sospecha de variantes
de linfocitos Linfocitos normales
Complejidad
SUSPECT
WBC 13.9 K/uL WBC
4.64 33.3 %N
LYM 6 J 8 48.0 %L VAR LYM
MONO 1.54 11.0 %M NRBC/RRBC
EOS 1 0 7.27 %E
BASO .046 .328 %B DFLT(NLMEB)
Sospecha de
granulocitos inmaduros
Sospecha de
eritroblastos NRBC
Complejidad
Complejidad
SUSPECT
Alerta DFLT(NLMEB). Este alerta aparece cuan- WBC 7.80 K/uL
3.39 43.4 %N IG/BAND
do, debido a la ubicacin de las poblaciones en el LYM .960 12.3 %L BLAST O)
escatergrama 0o-10 o en el de 90-90DER el instru- MONO 2 3 9 307 %M 01
T3.
EOS .076 .980 %E
mento no logra ubicar la mejor separacin entre am- BASO ,982 1 Z 6 %B O
Linfoblasto
SUSPECT
WBC 19.5 K/uL
16.8 86.0 %N BAND
LYM .833 4.27 %L VAR LYM
MONO 1.67 8.55 %M
EOS .023 .120 %h
BASO .202 1.03 %B
Complejidad
Eritroblasto
policromatfilo
Complejidad
85
GLOSARIO SOBRE LA TECNOLOGA
CELL DYN
Apertura. Orificio con un dimetro y longitud conoci- proceder a su anlisis y emite los resultados una
dos que ofrece una resistencia fija y conocida a la vez finalizado ste.
corriente elctrica cuando se sumerge en un me- Basfilo. Granulocito que suele estar presente en con-
dio conductor concreto. Acta como zona de sen- centraciones nfimas en la circulacin. Interviene en
sibilizacin para mediciones de la impedancia. la alergia, la inflamacin y la liberacin de histamina.
Aglutinacin. Efecto por el que las clulas o partculas Blasto. Es un precursor inmaduro en la estirpe de las
se adhieren o aglomeran. clulas sanguneas. Normalmente, esta clula est
Aglutinina. Anticuerpo presente en el plasma o una presente en la mdula sea, pero no en la sangre
suspensin que reacciona con el aglutingeno pro- circulante.
duciendo una aglutinacin o agregacin. Calibracin. Determinacin del factor de conversin
Agregacin. Vase Aglutinacin. de la desviacin de un procedimiento analtico en
Alarma. Mensaje visualizado en la pantalla que advier- condiciones conocidas, con objeto de obtener me-
te al operador de un problema o del estado anor- diciones exactas. La exactitud en el intervalo de
mal del sistema. operacin se establece a travs de los correspon-
dientes mtodos de referencia, materiales de refe-
Alarma. Smbolo escrito o visualizado en la pantalla
rencia y/o calibradores (ICSH).
para atraer la atencin. El ordenador asigna deter-
minadas alarmas que alertan al operador sobre las Calibracin automtica. Opcin de los sistemas CELL-
anomalas detectadas en los datos durante su an- DYN que gua al operador a travs del proceso de
lisis o sobre determinadas situaciones del analiza- calibracin y calcula automticamente el factor
dor que ocurren durante el procesado de la mues- de calibracin de cada parmetro.
tra. En general, requiere la toma de medidas (revi- Calibrador. Material de caractersticas conocidas que se
sin/correccin) por parte del operador. utiliza, en combinacin con el procedimiento de ca-
Alarma de parmetro. Indicador visual o impreso que libracin, para ajustar la medicin. Este material debe
sealiza la presencia o sospecha de una sustancia o corresponderse con una preparacin o material de
condicin que puede alterar la exactitud de la me- referencia nacional o internacional (ICSH).
dicin del parmetro. Carboxihemoglobina. Unin relativamente estable en-
Alarma de presencia de poblaciones a n o r m a l e s . tre el monxido de carbono y la hemoglobina; su
Indicador visual o impreso que sealiza la pre- formacin impide el intercambio normal del
sencia de anomalas eritrocitarias, del tipo de la dixido de carbono y del oxgeno durante la circu-
anisocitosis, o leucocitarias, como por ejemplo c- lacin normal de la sangre. Sus niveles se elevan
lulas en banda, granulocitos inmaduros, blastos o en los estados de asfixia, incluida la muerte.
linfocitos modificados. C B C . Acrnimo de hemograma completo, que incluye
Alarma por dispersin. Indicador visual o impreso que al menos: WBC, RBC, HGB, HCT, MCV, MCH,
sealiza la presencia de los datos de concentracio- M C H C y PLT.
nes celulares y/o valores fuera del intervalo elegi- Clula en banda. Estado de maduracin del granulocito
do por el operador. antes de su segmentacin. En general, su nmero
Algoritmo. Procedimiento para resolver un problema es muy reducido en la circulacin, pero cuando
paso a paso; generalmente se encuentra codifica- aumenta indica una "desviacin a la izquierda".
do en el software del ordenador. Coagulacin. Proceso mediante el cual la sangre se
Anisocitosis. Variacin en el tamao de los eritrocitos. espesa formando una masa adherente y viscosa,
que tiene la finalidad de obstruir una ruptura en
Anticoagulante. Sustancia que impide o bloquea los
algn vaso sanguneo.
mecanismos normales de coagulacin de la sangre.
Coeficiente de correlacin. Grado de relacin entre
Arrastre. Interferencia significativa de la muestra previa
dos variables, que se representa como un valor en
en los resultados obtenidos con la muestra actual.
una escala de - 1 , 0 a 1,0, siendo este ltimo valor
Autoaglutinacin. Aglomeracin inespecfica de las c- indicativo de una correlacin positiva perfecta y el
lulas debida a factores fsicos/qumicos. primero, de una correlacin negativa perfecta. El
Autoanalizador de hematologa. Instrumento que ad- valor 0,0 indica que no existe ninguna correlacin
mite directamente muestras de sangre total para entre las variables.
86
GLOSARIO SOBRE LA TECNOLOGA CELL DYN
Corpsculo. Eritrocito o leucocito vivo no agregado en Error aleatorio. Variacin sin un patrn caracterstico
los tejidos contiguos. entre los datos sucesivos de un anlisis. A menudo,
se admite que sigue una distribucin normal
Correccin de la coincidencia. Anlisis estadstico (gaussiana) alrededor de la media.
que ajusta la prdida de coincidencia del recuen-
to. En los sistemas CELL-DYN un circuito analgico Error sistemtico.Variacin direccional o con un pa-
aplica la correccin de forma automtica. trn fijo entre los valores obtenidos y los valores
esperados.
Crioaglutinina. Sustancia de la sangre que agrega los
eritrocitos compatibles e incompatibles a baja tem- Especificidad clnica. Capacidad del anlisis para re-
peratura. Tambin se denomina criohemaglutinina. conocer a los sujetos que no padecen la enferme-
dad sospechada. Capacidad del mtodo para obte-
Criofibringeno, crioglobulina. Cualquiera de las ner resultados negativos en relacin con un mto-
protenas que se asemejan a las gammaglobulinas, do de referencia. Porcentaje o proporcin de pa-
cristalizan en fro y se disuelven de nuevo con el cientes que no sufren dicho trastorno clnico y pre-
calor. sentan valores que no exceden el lmite de deci-
Datos de configuracin. Criterios elegidos por el ope- sin (NCCLS).
rador o datos para ajustar la operacin del analiza-
Especificidad del anlisis. Ausencia de interferencias
dor y los formatos de salida de los datos.
en la medicin. Capacidad de un mtodo analti-
Desviacin. Cambio brusco en los resultados. co para determinar nicamente el componente
Desviacin. Factor sistemtico que determina inexac- que se desea medir (NCCLS).
titud. Medicin de la inexactitud o error sistemti- Estabilidad. Capacidad de una muestra, reactivo o con-
co en determinadas condiciones del anlisis. trol de mantener constante la concentracin de la
Desviacin. Variacin o cambio en el tiempo del sis- muestra a analizar. A veces, tambin refleja la ca-
tema que influye significativamente en su fun- pacidad del sistema analtico para evitar la des-
cionamiento. viacin.
87
GLOSARIO SOBRE LA TECNOLOGA CELL DYN
88
GLOSARIO SOBRE LA TECNOLOGA CELL DYN
tura (zona de deteccin). Cada clula desplaza su Jeringa. Dispositivo que se compone de un cilindro hue-
propio volumen de lquido conductor y crea as co, conectado a un mbolo, y sirve para inyectar o
una resistencia al flujo que resulta directamente administrar un volumen preciso de la muestra di-
proporcional al volumen celular. Las propiedades luida.
fsicas detectadas en las clulas se transforman en Leucocito. Clula de la sangre circulante, que se en-
alarmas elctricas equivalentes. cuentra presente en concentraciones de 7 a 12 Lil
Imprecisin. Variacin en los resultados de un con- de sangre total. Inicialmente, se diferencian por
junto de replicados o mediciones duplicadas, que sus propiedades nucleares como leucocitos polinu-
se expresa como la desviacin tpica o el coeficien- cleares o mononucleares. A su vez, se pueden cla-
te de variacin. Vase tambin Precisin. sificar segn la presencia de granulos en el cito-
plasma como granulocitos, linfocitos y monocitos.
In vitro. Trmino con el que se hace referencia a prue-
Los leucocitos defienden a los tejidos de la inva-
bas diagnsticas que analizan una muestra de un
sin de los microorganismos extraos y de las sus-
tubo de ensayo o de otro medio controlado (lite-
tancias qumicas.
ralmente, en el vidrio).
In vivo. Dentro del ser vivo. Limpieza automtica. Opcin de los sistemas CELL-
DYN para limpiar automticamente el sistema de
ndice de dilucin. Factor con el que se diluye una
flujo del analizador y la cnula de muestra sin in-
muestra antes de su medicin. Los ndices de dilu-
tervencin del usuario.
cin pueden variar hasta obtener una concentra-
cin susceptible de ser medida. Linealidad. Capacidad de anlisis para obtener medi-
ciones proporcionales a un analito medido en un
ndice de la desviacin tpica (IDE). Medida del
intervalo conocido de concentracin o cuenta ce-
error sistemtico y aleatorio, que indica cuntas
lular [NCCLS].
desviaciones tpicas se aleja un nmero determi-
nado de la media. Se usa en los programas de con- Linfocito. Pequeo leucocito mononuclear maduro,
trol de calidad externos para relacionar el funcio- presente en concentracin relativamente elevada
namiento de un laboratorio con el de los dems (20-50%). Posee un ncleo redondo o ligeramente
laboratorios participantes. El IDE perfecto es 0, pero indentado y no contiene granulos visibles en su
en cualquier caso, debe ser siempre inferior a 1,0. citoplasma.
Linfocitosis. Aumento de la concentracin de linfocitos
ndices eritrocitarios. Conjunto calculado de valores
en la sangre circulante.
de las p r o p i e d a d e s e r i t r o c i t a r i a s : v o l u m e n
corpuscular medio (MCV), hemoglobina cor- Linfopenia (linfopnico). Disminucin del recuento
puscular media (MCH) y concentracin de la he- absoluto de linfocitos en la sangre circulante.
moglobina corpuscular media (MCHC). Lipemia. Estado en el que se observa una concentra-
Inexactitud. Diferencia numrica entre la media de cin de lpidos en la sangre mayor de la normal; el
un conjunto de mediciones repetidas de la misma plasma tiene un aspecto lechoso. Este estado pue-
muestra y el valor esperado. La diferencia (positiva de interferir la lectura ptica de los valores hema-
o negativa) se puede expresar en las unidades de tolgicos principalmente de hemoglobina.
la cantidad medida o como porcentaje del valor LIS. Acrnimo de sistema de informacin del labora-
esperado (ICSH). torio.
Intervalo. Medida de la dispersin de los valores. Dife- Lisis. Proceso de alteracin o destruccin de las clulas.
rencia entre el valor mximo y mnimo de un con- LRI. Acrnimo de la interferencia de la regin inferior.
junto de mediciones. Indicador visual o impreso de deteccin de una
Intervalo de referencia. Intervalo normal establecido anomala en la regin inferior de tamao de las
en el laboratorio. Las variables locales, como el m- plaquetas, que exige revisin microscpica de la
todo de ensayo, la regin geogrfica, las sustancias muestra.
de interferencia, la edad y el sexo ocasionan mni- LYM. Cdigo para identificar el recuento absoluto de
mas variaciones en los intervalos de referencia que linfocitos por unidad de volumen de sangre total:
se obtienen en cada laboratorio. # x 1071o # x l 0 3 / A d
El intervalo normal se determina examinando Macrocitosis. Incremento generalizado del nmero de
muestras recogidas en un nmero de 100 a 300 eritrocitos de gran tamao en la circulacin. Se
sujetos sanos y calculando despus la media 2DE. asocia a estados de deficiencia de la vitamina B ]2 y
Los resultados del anlisis del 95% de la poblacin del folato, y tambin a ciertos tratamientos.
normal se hallarn comprendidos dentro de este MCH (hemoglobina corpuscular media). Acrnimo
intervalo. Se sugiere que cada laboratorio establezca de hemoglobina corpuscular media. Smbolo con
sus propios intervalos de referencia. el que se expresa el resultado de la hemoglobina
corpuscular media, que es el contenido medio de
89
GLOSARIO SOBRE LA TECNOLOGA CELL DYN
Sustancias/estados de interferencia (resultados err- Verificacin. Protocolo o procedimiento seguido para exa-
neos). Componente del sistema que altera la exac- minar el funcionamiento de un sistema o componen-
titud en la medicin de un parmetro. te del mismo y asegurar que cumple todas las especi-
Tendencia. Situacin en la que un resultado se desplaza ficaciones estipuladas.
en la misma direccin durante varios ciclos de proce- Volumen globular (hematocrito). Medida de la relacin
sado consecutivos. entre el volumen ocupado por los eritrocitos y la san-
Trombocito o plaqueta. Fragmentos citoplsmicos circu- gre total.
lantes de los megacariocitos, presentes en concen- VPM. Acrnimo de volumen plaquetario medio. Cdigo
traciones moderadas en la sangre (media: aprox. que representa el volumen plaquetario medio (en
25O.00O/jU,l de sangre total). No contiene ncleos, pero femtolitros). VPM vara de forma inversamente pro-
s algunos granulos. porcional al PDW.
Unidad de medida. Cantidad determinada que se adop- WBC. Acrnimo de leucocito. Su concentracin se mide
ta como patrn de medicin. Se acompaa de un por unidad de volumen de sangre total: # x 109/1 o #
resultado numrico de la cantidad o propiedad me- 10V/xl.
dida. X-B (programa de media mvil). Cdigo del programa
URL Acrnimo de interferencia de la regin superior. In- de medidas mviles diseado por el Dr. Bull. Progra-
dicador visual o impreso de una anomala detectada ma estadstico que controla el funcionamiento del
en la regin superior de tamao de las plaquetas, que sistema a medida que se procesan las muestras. Todo
exige revisin. Esta alarma de la interferencia obede- resultado de cada parmetro examinado, como MCV,
ce, por regla general, a la presencia de grandes MCH y MCHC, que cumpla los criterios admitidos,
plaquetas o de pequeos eritrocitos en la muestra. es incluido automticamente en el lote actual.
92
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