UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE CIENCIAS MDICAS FASE I,

Unidad Didctica: BIOQUMICA MDICA 2 AO, 2013

CICLO DE KREBS,
CADENA RESPIRATORIA.
Dr. Mynor A. Leiva Enrquez

Dr. M. Leiva
 Fuente: Bioqumica
de Harvey 5. Ed.
Dr. M. Leiva
 Fuente: Bioqumica
Dr. M. Leiva de Harvey 5. Ed.
 Fuente: Bioqumica
Dr. M. Leiva de Harvey 5. Ed.
 PROCEDENCIA Y DESTINO DE ACETIL-CoA

Protenas Glucosa TAG

Glicerol

Aminocidos Piruvato c. Grasos

Esteroides
Acetil-CoA

Colesterol
Cetognesis Ciclo
de Citrato Acetil-CoA
Krebs
c. grasos
C. Respiratoria
TAG
ATP+CO2+H2O
Dr. M. Leiva
Ciclo del cido Ctrico (KREBS)

10 reacciones enzimticas
2 reacciones irreversible
Genera 3 NADH+H, 1 FADH2
y 1 ATP a nivel del sustrato
Dr. M. Leiva
Mitocondria

Dr. M. Leiva
 Esquema general
del ciclo de Krebs

Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL.

Dr. M. Leiva 2. Edicin. Editorial. Elsevier.
 ENZIMA SUSTRATO
1- CITRATO SINTASA 12 CITRATO
2- ACONITASA 23 ISOCITRATO
3- ISOCITRATO 34 ALFA CETO-
DESHIDROGENASA GLUTARATO
4- ALFA-CETO-GLUTARATO
45 SUCCINIL-CoA
DESHIDROGENASA
5- SUCCINATO TIO-CINASA 56 SUCCINATO
6- SUCCINATO
67 FUMARATO
DESHIDROGENASA
7- FUMARASA 78 MALATO
8- MALATO
81 OXALACETATO
DESHIDROGENASA
Dr. M. Leiva
 1. Formacin del Citrato

El citroil-CoA es un intermediario transitorio de reaccin

La hidrlisis del enlace tioster del intermediario hace que la reaccin sea exergnica

Dr. M. Leiva
 2. Formacin de isocitrato
va cis-aconitato

La aconitasa contiene un centro hierro-azufre que

acta como centro de fijacin de sustratos y centro cataltico.

Dr. M. Leiva
Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 3. Ed. Editorial. Elsevier.
 Fuente: Bioqumica
de Harvey 5. Ed.
Dr. M. Leiva
 3. Oxidacin del isocitrato
a -cetoglutarato y CO2

Existen dos formas diferentes de isocitrato deshidrogenasa:

NAD dependiente (matriz mitocondrial)
NADP dependiente (matriz mitocondrial y citosol)
Dr. M. Leiva
 4. Oxidacin del -cetoglutarato a
succinil-CoA y CO2

El complejo de la -cetoglutarato deshidrogenasa es muy

parecido al
complejo piruvato deshidrogenasa, tanto en estructura como en
funcin, requiere difosfato de tiamina, lipoato, NAD, FAD y CoA
Dr. M. Leiva
Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.
 a Cetoglutarato deshidrogenasa
Localizado en la mitocondria
Complejo multienzimatico que acta de la misma
forma que el Complejo Piruvato-deshidrogenasa.
Sustrato: alfa-ceto-glutarato.
Producto: Succinil-CoA
3 enzimas
Alfa cetoglutarato deshidrogenasa (E1)
Dihidrolipoil transsucciniilasa(E2)
Dihidrolipoil deshidrogenasa (E3)
5 coenzimas
Pirofosfato de tiamina
Acido lipoico
CoA
FAD
NAD

Dr. M. Leiva
 El complejo a cetoglutarato deshidrogenasa utiliza
5 coenzimas diferentes
Difosfato de tiamina Lipoamida

NAD (niacina) FAD (Riboflavina) CoA (A. Pantotenico)

Dr. M. Leiva
 5. Conversin del succinil-CoA en succinato

La formacin acoplada de GTP (o ATP) a expensas de la energa

liberada por la decarboxilacin oxidativa del -ceto-glutarato
es otro ejemplo de fosforilacin a nivel del sustrato.
Dr. M. Leiva
 Fuente: Bioqumica
de Harvey 5. Ed.
Dr. M. Leiva
 6. Oxidacin del succinato a fumarato

El malonato es un
fuerte inhibidor
En eucariotas, la succinato deshidrogenasa competitivo de
se encuentra unida a la membrana mitocondrial esta enzima
interna, contiene tres centros hierro-azufre
diferentes y una molcula de FAD unida
covalentemente. Dr. M. Leiva
 7. Hidratacin del fumarato
y produccin de malato

La enzima FUMARASA es especfica para el fumarato y el L-malato

Dr. M. Leiva
8. Oxidacin del malato a oxalacetato

Dr. M. Leiva
 Fuente: Bioqumica
de Harvey 5. Ed.
Dr. M. Leiva
Balance energtico

Dr. M. Leiva
 Vas Anaplerticas

Ana: arriba,
Plerotikos: llenar
Son reacciones que reponen
intermediarios del ciclo
Piruvato carboxilasa: produce
oxalacetato
Dr. M. Leiva
 Reacciones Anaplerticas

Son reacciones que proveen la cantidad

necesaria de un metabolito intermediario
importante.
La reaccin de la enzima piruvato carboxilasa
es un ejemplo, al ser necesario Oxalacetato.
Piruvato + CO2 + ATP + H2O
Oxalacetato + ADP + Pi + 2H+
malato para gluconeognesis
Dr. M. Leiva
 Principales vas biosintticas
y anaplerticas

Dr. M. Leiva
Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.
 Fuente: Bioqumica
Dr. M. Leiva de Harvey 5. Ed.
Los Carbonos de los aminocidos (luego de la transaminacin)
entran al ciclo de Krebs en diferentes puntos

Dr. M. Leiva
Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 3. Ed. Editorial. Elsevier.
Principales vas biosintticas
y anaplerticas

Dr. M. Leiva
 Regulacin del ciclo de Krebs
Disponibilidad de sustratos
Necesidad de intermediarios como
precursores biosintticos
Demanda de ATP
El factor regulador ms importante es la
relacin
intramitocondrial de [NAD+] / [NADH]

Dr. M. Leiva
 Regulacin del ciclo de Krebs
1. Disponibilidad de sustratos
2. Inhibicin por acumulacin de
productos
3. Regulacin de las siguientes
enzimas:
Citrato sintasa
Inhibidores: NADH, succinil-
CoA, citrato, ATP
Activadores: ADP
Isocitrato deshidrogenasa
Inhibidores: NADH
Activadores: Ca++, ADP
-cetoglutarato
deshidrogenasa
Inhibidores: succinil-CoA,
NADH
Activadores: Ca++
Dr. M. Leiva Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.
Fuente: Bioqumica
de Harvey 5. Ed. Dr. M. Leiva
 El Ciclo de KREBS es un
punto de convergencia
en el metabolismo
intracelular.
Carbohidratos, grasas
y protenas son
fuentes de Acetil-
CoA
Desde aqu, la
obtencin de ATP
sigue la misma ruta.
El requisito para su
accin es la presencia
de oxgeno.
Dr. M. Leiva
Fuente: Fundamentos de Bioqumica, VOET ET AL. 2. Ed. Ed. Interamericana.
 C. Krebs:
proceso
anfiblico

Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 3. Ed.

Dr. M. Leiva Editorial. Elsevier.
 Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 3. Ed.
Dr. M. Leiva Editorial. Elsevier.
Dr. M. Leiva Fuente: Bioqumica Mdica. , BAYNES ET AL. 3. Ed. Editorial. Elsevier.
 GLUCONEOGNESIS

LIPOGNESIS

SNTESIS PROTICA

HEM y cidos Nucleicos

Proceso
ANFIBLICO
Dr. M. Leiva Fuente: Bioqumica de Mathews 3 Edicin.
Dr. M. Leiva
A nivel del sustrato 4 ATP
Lanzadera de Malato 6 ATP
Descarboxilacin del piruvato 6 ATP
Ciclo de Krebs 24 ATP
total 40 ATP

Dr. M. Leiva
LANZADERAS DE GLICEROFOSFATO Y MALATO

Fuente: Bioqumica
de Harvey 5. Ed.

Dr. M. Leiva
 moles ATP/mol
Reaccin Mecanismo
Glucosa
Hexocinasa Fosforilacin -1

Fosfofructocinasa Fosforilacin -1
Fosforilacin oxidativa
Glicerol-3-P Deshidrogenasa +6 (+4)*
del NADH
Fosforilacin a nivel
Fosfoglicerato cinasa 2
del Sustrato
Fosforilacin a nivel
Piruvato cinasa 2
del Sustrato
Fosforilacin oxidativa
Piruvato deshidrogenasa 6
del NADH
Fosforilacin oxidativa
Isocitrato deshidrogenasa 6
del NADH
Fosforilacin oxidativa
-cetoglutarato deshidrogenasa 6
del NADH
Fosforilacin a nivel
Succinil-CoA sintetasa 2
del sustrato (GTP)
Fosforilacin oxidativa
Succinato deshidrogenasa 4
del FADH2
Fosforilacin oxidativa
Malato deshidrogenasa 6
del NADH
Dr. M. Leiva TOTAL 38 (36)
 CADENA RESPIRATORIA
MITOCONDRIAL
FOSFORILACIN OXIDATIVA
Dr. M. Leiva
 La fosforilacin oxidativa se produce en la
membrana interna de la mitocondria

La mitocondria posee dos sistemas de

membrana, que rodean a la matriz.

Matriz
Ciclo del cido ctrico y oxidacin de los
cidos grasos

Membrana interna
Es impermeable a casi todos los iones Se
pliega en crestas.
Contiene los componentes de la cadena de
transpote de e-
Y la ATP sintasa

Membrana externa
Es bastante permeable a iones y
molculas pequeas

Dr. M. Leiva
Mitocondria
Cadena Respiratoria y Fosforilacin Oxidativa
Cadena Respiratoria: Transporte en
secuencia ordenada de los equivalentes
reducidos desde los sustratos donadores
(reduciendo al NAD o al FAD) hasta la
formacin final de AGUA.
Fosforilacin Oxidativa: Sistema de
conversin o captura de la energa liberada
en la cadena respiratoria (68%), para unir
ADP + Pi y formar ATP.
Dr. M. Leiva
Cadena Respiratoria y Fosforilacin Oxidativa

Las enzimas de la cadena respiratoria

estn en la cara interna de la membrana
interna, agrupadas en complejos que
producen potenciales electroqumicos
transmembrana.
Varias ATP-sintasa utilizan la energa del
gradiente de protones para sintetizar ATP,
perdindose una parte como calor.
Dr. M. Leiva
Dr. M. Leiva
 Conservacin de la energa por
acoplamiento con el ATP
Casi la mitad de la energa obtenida en la
oxidacin de los combustibles metablicos es
canalizada hacia la sntesis de ATP
La membrana mitocondrial interna es
impermeable a ATP, coenzimas, fosfato,
protones, varios iones y molculas pequeas.
Se acepta que 1 mol de NADH tiene un
rendimiento aproximado de 2.5 moles de ATP

Dr. M. Leiva
Dr. M. Leiva Fuente: Bioqumica Mdica de BAYNES et. Al. 3. Edicin,
 Fuente: Bioqumica
de Harvey 5. Ed.
Dr. M. Leiva
 Fuente: Bioqumica
de Harvey 5. Ed.
Dr. M. Leiva
 Fuente: Bioqumica
de Harvey 5. Ed.
Dr. M. Leiva
 Fuente: Bioqumica
de Harvey 5. Ed.
Dr. M. Leiva
 Sustratos que transfieren electrones a
NAD por enzimas deshidrogenasas

Puede haber acoplamiento

directo al NAD de la Cadena
Respiratoria.
Piruvato y
alfa-cetoglutarato usan
complejos dishidrogenasa
+ FAD + Lipoato NAD.
Producen 3 ATP
Producen 2.5ATP
Dr. M. Leiva
 Sustratos que transfieren electrones por
enzimas dependientes de Flavoprotena.

FeS: Sulfoprotena
frrica (Fe++Fe+++)
TFE: Flavoprotena
transferidora de
electrones.
Fp: Flavoprotena
FAD Producen 2 ATP
FAD Producen 1.5ATP
Dr. M. Leiva
 Sustratos que transfieren electrones por
enzimas dependientes de Flavoprotena.

La enzima succinato
deshidrogenasa se ubica
en la superficie interna de
la membrana interna
mitocondrial.
El potencial redox de estos
sustratos es ms positivo.

Dr. M. Leiva
Dr. M. Leiva
 Enzimas ligadas a NAD+

Alfa- cetoglutarato DH
Malato DH
Piruvato DH
Gliceraldehido- 3 -fosfato DH
Lactato DH
Beta- hidroxiacil- CoA DH

Ligadas a NAD+ o NADP+

Glutamato DH

Ligadas a FAD

Acil CoA DH (F)

Succinato DH (II)
Glicerol3 P DH (G)

Ligadas a FMN
NADH DH
Dr. M. Leiva
Fuente: Bioqumica Mdica de BAYNES et. Al. 3. Edicin,
 Complejo I. Funcin de NADH
Deshidrogenasa (FeS y FMN)
La energa proveniente
de la oxidacin
NADH+H, traslada
protones al exterior de
la membrana interna
(bomba de protones)
Transfiere electrones a
la uniquinona.

Dr. M. Leiva
 El complejo II define la funcin
ubicuinona-oxidorreductasa
La coenzima Q recibe equivalentes
reductores de componentes ms
positivos.
Lipoflica, parecida a la vit. K
La coenzima Q une a las
flavoprotenas con el Citocromo b (el
de menor potencial redox)
Componente mvil que colecta
equivalentes de Complejos I y II y los
lleva al Complejo III. Dr. M. Leiva
El coenzima Q es paso obligatorio de los
electrones procedentes de varias vas
Espacio
intermembrana

Succinato

Matriz Flavoprotena de
transferencia de
electrones

Dr. M. Leiva
 Complejo III:
ubicuinona:ferrocitocromo c oxidorreductasa.

El ciclo de la Coenzima Q
incluye la captacin de 2
H+ de la matriz
mitocondrial y su bombeo
hacia el espacio
intermembrana,
Traslada electrones del
cit. b al c1 y finalmente al
cit. c.
Dr. M. Leiva
 Oxidacin de la Oxidacin de la
primera QH2 segunda QH2

El citocromo c transporta electrones del completo III al IV.

Si llega al citosol, puede inducir apoptosis.
Dr. M. Leiva
 Complejo IV:
Ferrocitocromo c oxidorreductasa
Cit.c es soluble, conecta Espacio
complejos fijos III y IV. Intermembrana

C-aa3 citocromo oxidasa:

combinacin irreversible de
equivalentes reductores
conducidos hacia el
oxgeno: da direccin.
Tercera bomba de protones
que impulsa a la ATP
sintasa. Genera AGUA.
Inhibida por Monxido de
Carbono y Cianuro. (del sustrato) (bombeados)
Matriz

Dr. M. Leiva
Dr. M. Leiva Fuente: Bioqumica Mdica de BAYNES et. Al. 3. Edicin,
 La oxidacin se acopla estrechamente a la fosforilacin
para satisfacer las necesidades de energa de la clula.

Espacio
Intermembrana

Succinato Fumarato
Matriz

Dr. M. Leiva
Si el recorrido de los equivalentes reductores empieza en el complejo I, se cumplirn
3 bombeos de protones. Si empieza en el complejo II, se cumplirn 2 bombeos.
A mayor bombeo, mayor gradiente de protones y mayor actividad de la ATP-sintetasa.
Dr. M. Leiva
 Fuente: Bioqumica
de Harvey 5. Ed.
Dr. M. Leiva
 Teora Quimiosmtica de la Fosforilacin Oxidativa
La membrana interna es impermeable a los protones. Cuando son bombeados fuera de la matriz,
acidifican y positivizan el espacio intermembrana.
La fuerza protn motriz (p) es la energa almacenada en el gradiente de
concentracin de protones que al regresar por la ATP-sintasa, generan la energa para producir
ATP.

Dr. M. Leiva
 El hidrgeno y los
electrones fluyen a
lo largo de la
cadena en etapas, a
partir de los
componentes de
mayor potencial
redox negativo
hacia los
componentes de
mayor potencial
redox positivo, a
travs de un
intervalo de 1.1 V
que abarca desde el
NAD+/NADH hasta
el O2 / 2 H2O. Dr. M. Leiva
 Complejo V: ATP -
Sintasa

Fo es el motor
y poro de
protones.
El F1
componente
rotatorio.

Dr. M. Leiva Fuente: Bioqumica Mdica de BAYNES et. Al. 3. Edicin,

Dr. M. Leiva Fuente: Bioqumica Mdica de BAYNES et. Al. 3. Edicin,
 ATP sintasa: Los protones que
pasan por las
subunidades C y g
causan su rotacin.
Las subunidades b
captan ATP+Pi y
liberan ATP.
Se forman 3
molculas de ATP por
cada giro completo
del complejo
Fuente: Bioqumica de HARPER. 17. Edicin, Dr. M. Leiva
 F0: bomba de H+
Segmento hidrofbico que atraviesa la membrana interna
mitocondrial
Contiene conducto de H + del complejo
Formado por
-10-14 subunidades c
-1 subunidad a en la periferia del anillo
Matriz M.

Espacio
Intemembrana
Dr. M. Leiva
 F 1 : Unidad cataltica:
formada por:
-5tipos de cadenas polipeptdicas:
-3 cadenas
-3 cadenas
-1 cadenas
- y alternadas en anillo hexmerico
-miembros de la familia de NTPasas
-ambas unen nucletidos,
solo participa en la catlisis
- y forman el tallo central de la
estructura.

Dr. M. Leiva
 Fuente: Bioqumica
de Harvey 5. Ed.
Dr. M. Leiva
 Inhibicin del
Complejo I

Dr. M. Leiva
Fuente: Bioqumica Mdica de BAYNES et. Al. 3. Edicin,
 Inhibicin del
Complejo III

Dr. M. Leiva
Fuente: Bioqumica Mdica de BAYNES et. Al. 3. Edicin,
Inhibicin del
Complejo IV

Dr. M. Leiva Fuente: Bioqumica Mdica de BAYNES et. Al. 3. Edicin,

 Inhibidores de cadena respiratoria, Inhibidores
de fosforilacin oxidativa y desacopladores
ADP
atractilsido

ATP
malonato 2,4-di-nitrofenol,
termogenina,
oligomicina

Antimicina A y H2S, CO
barbitricos
Dimercaprol y CN

Fuente: Bioqumica de HARPER. 17. Edicin, Dr. M. Leiva

 Protenas
Desacopladoras

Fuente: Bioqumica Mdica de BAYNES et. Al. 3. Edicin, Dr. M. Leiva

Dr. M. Leiva GRACIAS