Clonacin

Por: Ruben Olvea Pineda UANCV

La clonacin (del griego: , retoo, rama;1 copia idntica de un organismo a partir de su ADN) se
puede definir como el proceso por el que se consiguen, de forma asexual,2 copias idnticas de
un organismo, clula o molcula ya desarrollado.

Se deben tomar en cuenta las siguientes caractersticas:

En primer lugar se necesita clonar las clulas (producto embrionario), porque no se puede hacer un
rgano o parte del "clon" si no se cuenta con las clulas que forman a dicho cuerpo.
Ser parte de un organismo ya "desarrollado", porque la clonacin responde a un inters por obtener
copias de un determinado organismo, y slo cuando es adulto se pueden conocer sus caractersticas.
Por otro lado, se trata de crearlo de forma asexual.2 La reproduccin sexual no permite obtener copias
idnticas, ya que este tipo de reproduccin por su misma naturaleza genera diversidad mltiple.

Clonacin en la naturaleza
La reproduccin asexual, tambin llamada reproduccin clonal, es una forma natural de reproduccin
utilizada por numerosas formas de vida desde que sta existe, empezando por las bacterianas. Aunque la
forma fundamental de reproduccin en los eucariontes es la sexual, en la que los descendientes son
genticamente distintos de su progenitor o progenitores, en todos los grupos se recurre frecuentemente a
la multiplicacin asexual (clonal). Tiene este carcter tambin la extensin del nmero de pies
de plantas en las llamadas colonias clonales; algunos ejemplos son el arndano, los avellanos, el Pando,
el cafetero de Kentucky, las myricas o el liquidmbar americano.

Clonacin molecular
La clonacin molecular se utiliza en una amplia variedad de experimentos biolgicos y las aplicaciones
prcticas van desde la toma de huellas dactilares a produccin de protenasa gran escala.

En la prctica, con el fin de amplificar cualquier secuencia en un organismo vivo, la secuencia a clonar
tiene que estar vinculada a un origen de replicacin; que es una secuencia de ADN.

Transfeccin
Se introduce la secuencia formada dentro de clulas.
Seleccin
Finalmente se seleccionan las clulas que han sido transfectadas con xito con el nuevo ADN.

Inicialmente, el ADN de inters necesita ser aislado de un segmento de ADN de tamao

adecuado. Posteriormente, se da el proceso de ligacin cuando el fragmento amplificado se
inserta en un vector de clonacin: El vector se linealiza (ya que es circular), usando enzimas de
restriccin y a continuacin se incuban en condiciones adecuadas el fragmento de ADN de inters
y el vector con la enzima ADN ligasa.

Tras la ligacin del vector con el inserto de inters, se produce la transfeccin dentro de las
clulas, para ello las clulas transfectadas son cultivadas; este proceso, es el proceso
determinante, ya que es la parte en la que vemos si las clulas han sido transfectadas exitosamente
o no.

Tendremos que identificar por tanto las clulas transfectadas y las no transfectadas, existen
vectores de clonacin modernos que incluyen marcadores de resistencia a los antibiticos con los
que slo las clulas que han sido transfectadas pueden crecer. Hay otros vectores de clonacin
que proporcionan color azul/ blanco cribado. De modo, que la investigacin de las colonias es
necesaria para confirmar que la clonacin se ha realizado correctamente.

Clonacin celular
Clonar una clula consiste en formar un grupo de ellas a partir de una sola. En el caso de
organismos unicelulares como bacterias y levaduras, este proceso es muy sencillo, y slo
requiere la inoculacin de los productos adecuados.

Sin embargo, en el caso de cultivos de clulas en organismos pluricelulares, la clonacin de las

clulas es una tarea difcil, ya que estas clulas necesitan unas condiciones del medio muy
especficas.

Una tcnica til de cultivo de tejidos utilizada para clonar distintos linajes de clulas es el uso de
aros de clonacin (cilindros).

De acuerdo con esta tcnica, una agrupacin de clulas que han sido expuestas a un agente
mutagnico o a un medicamento utilizado para propiciar la seleccin se ponen en una alta
dilucin para crear colonias aisladas; cada una proviniendo de una sola clula potencialmente y
clnicamente diferenciada.

En una primera etapa de crecimiento, cuando las colonias tienen slo unas pocas clulas; se
sumergen aros estriles de poliestireno en grasa, y se ponen sobre una colonia individual junto
con una pequea cantidad de tripsina.
Las clulas que se clonan, se recolectan dentro del aro y se llevan a un nuevo contenedor para
que contine su crecimiento en forma natural.

Clonacin de organismos de forma natural

La clonacin de un organismo es crear un nuevo organismo con la misma informacin gentica
proveniente de una clula existente. Es un mtodo de reproduccin asexual, donde
la fertilizacin no ocurre. En trminos generales, slo hay un progenitor involucrado. Esta forma
de reproduccin es muy comn en organismos como las amebas y otros seres unicelulares,
aunque la mayora de las plantas y hongos tambin se reproducen asexualmente.

Tambin se incluye la obtencin de gemelos idnticos de manera natural. Se considera como una
alteracin espontnea durante el desarrollo embrionario, ignorndose su causa, aunque existe una
correlacin familiar estadsticamente significativa.

Gemelacin artificial
Este tipo de clonacin consiste en tomar un embrin de hasta 8 clulas y generar embriones
idnticos preimplantatorios (se podran generar hasta 8 embriones idnticos, uno a partir de
cada blastmera). Las blastmeras biopsiadas del embrin original se introducen
individualmente o de dos en dos en una zona pelcida vaca (puede proceder de otro animal, pues
despus el embrin sale de ella), o en una cubierta artificial (ZPA), y de cada uno se generan
embriones idnticos al original (clones).

En veterinaria se lleva haciendo ms de 30 aos (para preservar las razas puras y mantener los
caracteres deseados de un determinado animal), sin embargo, al considerarse una clonacin, est
totalmente prohibido en humanos, principalmente porque los embriones humanos pueden morir
durante el proceso. Si se legalizase esta tcnica, el rendimiento por ciclo de fecundacin in vitro
(FIV) aumentara espectacularmente, pues se podran obtener muchos ms embriones y
fcilmente; adems ya no sera necesario someter a las mujeres a tratamientos fuertes de
estimulacin ovrica, pues a partir de un slo embrin podran obtener hasta 8 clones: se
transfiere uno y los otros se congelaran, para poder ser transferidos aos despus o como reserva
de seguridad, por si el hijo necesita clulas madre para el tratamiento de alguna enfermedad.

En la pelcula Los nios del Brasil se explica lo que la ciencia saba en los aos 80 sobre la
clonacin. La pelcula The 6th Day (El 6 da) plantea lo que la ficcin del 2000 esperaba de la
clonacin para el 2015 en ambiente de crimen.
Separacin de blastmeros para estudios de diagnstico
prenatal
En algunas especies, como los equinos, se ha utilizado la separacin de blastmeros de embriones
previos a su implantacin para efectuar estudios de diagnstico de enfermedades genticas. En
ellos se ha determinado la viabilidad de los embriones analizados despus de su transferencia en
hembras receptoras, encontrndose tasas de gestacin de 21 %. La tcnica de separacin de los
blastmeros implica la remocin de la zona pelcida, ya sea por mtodos qumicos, mecnicos o
enzimticos, para posteriormente obtener los blastmeros mediante aspiracin, extrusin o
disminucin de sus interacciones en soluciones libres de Ca2+ y Mg2+. En humanos la
separacin y cultivo de blastmeros aislados tambin han sido utilizados en estudios
de biopsias de embriones en diferentes etapas de segmentacin con la finalidad de dar
alternativas a los estudios de diagnstico prenatal, evaluando a su vez el desarrollo embrionario
in vitro con el propsito de que se seleccionen los mejores embriones capaces de desarrollarse
en blastocistos y congelarlos mientras se evalan sus blastmeros aislados.

Clonacin reproductiva
Es impreciso distinguir entre clonacin humana reproductiva y otro tipo de clonacin debido a
que toda clonacin humana es reproductiva, pues siempre se produce un embrinhumano. La
diferencia realmente reside en el destino que se le d a ese embrin.3 Este tipo de clonacin se
basa en la creacin de una copia genticamente idntica a una copia actual o anterior de un ser
humano o animal. Es tcnicamente posible, pues se ha conseguido en animales, aunque tiene bajo
rendimiento y conlleva ciertos riesgos, como por ejemplo, problemas epigenticos (sndrome
LOS: el clon crece mucho ms, que el animal original) y de senescencia. Este tipo de clonacin
est absolutamente prohibido en humanos, pues no tiene ningn sentido teraputico, aparte de
que al no ser una tcnica perfeccionada, pueden morir los embriones humanos en el proceso.

En 1996, fue clonada la oveja Dolly. Fue el primer mamfero clonado a partir del ADN derivado
de un adulto en vez de ser utilizado el ADN de un embrin. Pero aunque Dolly tena una
apariencia saludable, se cuestionaba que envejeciera antes que una oveja normal, es decir, que la
fuente (Dolly) trasmiti su edad celular al clon. Adems fueron necesarios 277 embriones para
producir este nacimiento.

Sin embargo, algunos han especulado que haba un factor agravante al deceso de Dolly y era que
tena una edad gentica de seis aos, la misma edad de la oveja de la cual fue clonada. Una base
para esta idea fue el hallazgo de sus telmeros cortos, que son generalmente el resultado del
proceso de envejecimiento. Sin embargo, el Roslin Institute ha establecido que los controles
intensivos de su salud no revelaron ninguna anormalidad en Dolly que pudieran pensar en
envejecimiento prematuro.

Clonacin teraputica (o androptica)

Artculo principal: Ingeniera de tejidos

La clonacin teraputica, rea en la que se est investigando mucho actualmente, no consiste en

clonar personas o crear bebs de reserva,4 sino tejidos y rganos que poder trasplantar al
paciente donante y curar as enfermedades.5 Los diferentes avances en legislacin internacional
e investigacin permiten la clonacin de determinados tejidos animales y humanos con fines de
investigacin mdica. Este tipo de clonacin consiste en fusionar el ncleo de una clula adulta
(madre o diferenciada) y un ovocito enucleado, al que se le ha extrado el ncleo, para crear
un embrin con el que trabajar.

De dicho embrin se pueden aislar clulas madre embrionarias compatibles con el futuro receptor
del tejido. Las clulas madre se aislan de la masa celular interna del embrin clonado una vez
alcanzado el estado de blastocisto. Estas clulas madre poseen la misma dotacin gentica que el
paciente del que se tom la clula adulta y, por tanto, reproducen su misma dotacin antignica,
la estructura de protenas superficial de la clula, por lo que se puede evitar una reaccin de
rechazo al trasplante. Una vez que se han extrado las clulas madre de la masa celular interna,
se destruye el embrin clonado.

De hecho, en enero de 2008, se anunci que se haban creado cinco embriones clonados a partir
de clulas de piel humana, con vistas a proporcionar una fuente viable de clulas madre
embrionarias para el tratamiento de enfermedades; valindose de la misma tcnica que dio origen
a la oveja Dolly, cientficos de la empresa californiana Stemagen Corporation, con sede en La
Jolla, California, encabezados por Andrew French, han empleado las clulas de la piel de dos
varones adultos as como los vulos de tres mujeres jvenes (entre 20 y 24 aos) que se estaban
sometiendo a un tratamiento de fertilidad.6 Adems, en mayo de 2013 la Universidad de
Oregn desvel que se haban conseguido obtener mediante clonacin clulas embrionarias
humanas. La tcnica tiene grandes implicaciones en la medicina regenerativa, ya que se podran
obtener clulas madre de un embrin en fase de blastocisto con las que poder regenerar partes
del cuerpo humano del propio donante sin riesgo de rechazo durante el trasplante. Adems, en el
ao 2013 se consigui la clonacin de un ejemplar de ratn de laboratorio a partir de una simple
gota de sangre de la cola del ratn donante, hecho que produjo un cambio en el panorama de la
clonacin animal, pues esta ha sido la primera vez que se ha conseguido clonar un animal sin
necesidad de eutanasiar al animal donante, que es lo que se vena haciendo hasta ahora en la
clonacin de animales como por ejemplo en el caso de la oveja Dolly.7

Clonacin de sustitucin
Un cuarto tipo de clonacin sera la llamada clonacin de sustitucin que sera una combinacin
de la clonacin reproductiva y la clonacin teraputica. En este tipo de clonacin se producira
la clonacin parcial de un tejido o una parte de un humano necesaria para realizar un trasplante.

Clonacin de especies extintas y en peligro de extincin

La clonacin de especies extintas, ha sido un sueo para muchos cientficos.Uno de los objetivos
previstos para la clonacin fue el mamut lanudo, pero los intentos de extraer ADN de mamuts
congelados no han tenido xito, aunque un equipo ruso-japons est trabajando en ello.

En 2001, una vaca llamada Bessie dio a luz a un gaur (un bisonte indio) clonado de Asia, una
especie en peligro, pero el ternero muri despus de dos das.

En 2003, un banteng (tipo de toro) fue clonado con xito, adems tambin fueron clonadas con
xito tres fieras de frica a partir de embriones congelados. Estos xitos han dado esperanzas
sobre la posibilidad de que otras especies extintas puedan ser clonadas. De cara a esta posibilidad;
las muestras de tejidos del ltimo bucardo (cabra montesa) fueron congelados rpidamente tras
su muerte.

Los investigadores tambin estn considerando la clonacin de especies en peligro de extincin

como el panda gigante, el ocelote, y guepardos.

En 2002, los genetistas en el Museo Australiano anunciaron que haban replicado el ADN
del Tigre de Tasmania, extinto hace 65 aos con la reaccin en cadena de la polimerasa. Sin
embargo en el ao 2005, tuvieron que parar el proyecto ya que las clulas no se haban conservado
bien.

Uno de los obstculos en el intento de clonar especies extintas es la necesidad de mantener el

ADN en perfecto estado, muy bien conservado.

Consideraciones ticas a la clonacin

Argumentos a favor de la clonacin humana teraputica

El aumento de la esperanza de vida de los seres humanos ha provocado un notable aumento de

las enfermedades crnicas o degenerativas, como las enfermedades cardiacas, el alzheimer o
el cncer. El principal problema es que estas enfermedades afectan a partes del organismo que,
debido a un aumento de la longevidad o al dao irreversible sufrido, el cuerpo no puede regenerar
por s solo. Una solucin a estas enfermedades puede ser la clonacin teraputica, al ser una
especializacin del tratamiento con clulas madre. Cuando un rgano o tejido ha sido daado es
necesario regenerarlo o realizar un trasplante, pero los trasplantes tienen varias dificultades, como
la dificultad para encontrar donantes, el posible rechazo inmunitario o la imposibilidad de
trasplantar ciertos tejidos u rganos.8

Se crea que la clonacin teraputica prometa grandes posibilidades, pero hasta la fecha no ha
habido grandes avances en la medicina regenerativa con base a la clonacin teraputica. Es ms,
en el 2007, el profesor Ian Wilmut, el investigador mdico pionero en clonacin animal y quien
cre a la Oveja Dolly, anunci que haba abandonado la investigacin destinada a producir
clulas madre embrionarias humanas mediante la clonacin, es decir, la llamada "clonacin
teraputica". El profesor Wilmut, dijo que abandonaba la clonacin teraputica en favor a
las clulas pluripotentes inducidas, iPS, argumentando que estas clulas proporcionan los
suministros de una amplia gama de clulas compatibles con los pacientes sin los problemas ticos
de la clonacin y de la disgregacin de clulas madre embrionarias que destruye a los embriones.9
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