I.

INTRODUCCION

Un medio de cultivo es un material alimenticio que se usa en el

laboratorio para el desarrollo de microorganismos. Una vez que ha sido
preparado, un medio de cultivo puede ser inoculado, (es decir se le aaden
organismos) y a continuacin incubado en condiciones que favorezcan el
crecimiento microbiano.

Los medios de cultivo se preparan a partir de soluciones

concentradas 10 o 100 veces (Soluciones Madre o Stock). En la solucin
madre se pueden mezclar varias sales minerales siempre que no se produzcan
problemas de precipitacin. Algunos elementos, como el Fe, se utilizan en
forma de quelatos para mantener su disponibilidad durante el cultivo. Por ende
a partir de eso, primeramente enfocaremos a los clculos necesarios para
preparar medios de cultivo.

Bajo este contexto daremos a conocer mediante una prctica en

laboratorio de biotecnologa, de la Universidad Nacional agraria de la Selva, la
preparacin de medio de cultivo a parir de clculos necesarios, para
concentraciones, y soluciones, etc.

Objetivos

- Practicar los clculos para la preparacin de medios de cultivo.

- Conocer las labores rutinarias e identificar los cuidados requeridos para
la preparacin.
 II. REVISION DE LITERATURA

2.1. Medio de cultivo

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de

microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias
artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen
los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo. Para que las bacterias crezcan adecuadamente
en un medio de cultivo artificial, ste debe reunir una serie de condiciones tales
como: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno adecuado, as
como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar
exento de todo microorganismo contaminante.
2.2. Clasificacin de medio de cultivo

II.2.1. Segn su estado fsico

Liquido
Usualmente se denominan caldos ya que contienen los nutrientes disueltos
en agua. Permiten obtener suspensiones con un elevado nmero de
microorganismos. Ej. Caldo nutritivo.
Solido
Se pueden preparar a partir de medios lquidos a los cuales se les aaden
agentes solidificantes como agar, gelatina o slica gel. Se utilizan con
frecuencia en el aislamiento y mantenimiento de los microorganismos en el
laboratorio. Ej. Agar nutritivo
II.2.2. Segn la naturaleza de sus constituyentes

Medios naturales, complejos o indefinidos

Estn constituidos por sustancias complejas de origen animal o vegetal y
usualmente se complementan con el aadido de minerales y otras
sustancias. No se conocen todos los componentes del medio de cultivo, ni
las cantidades exactas en que estn presentes. Este tipo de medio es el
ideal para cuando simplemente se pretende obtener un buen crecimiento
microbiolgico, ya que su confeccin es fcil y rpida (Basta pesar una
cierta cantidad del extracto desecado, suministrado por casas comerciales,
disolverlo en agua y esterilizar en autoclave). Ej. Extracto de carne, extracto
de levaduras.
Medios sintetico
Se preparan a partir de ingredientes qumicamente puros y por lo tanto se
puede conocer exactamente su composicin cuali y cuantitativa. Por su
costo slo se emplean en procedimientos especiales.
Medios mezcla de los anteriores
Denominado medio semisinttico, llevan algunas sustancias qumicas cuya
naturaleza y cantidad se conoce, junto con sustancias de naturaleza y
composicin indefinida.
II.2.3. Segn sus propsitos de uso

Medios de enriquecimiento
Se llama enriquecimiento a cualquier cultivo en medio lquido que resulte en
un incremento en el nmero de un tipo dado de microorganismo en relacin
con el nmero de otros tipos de microorganismos que puedan estar en el
inculo. Un medio de enriquecimiento puede contener sustancias que
favorezcan el crecimiento del microorganismo que nos interesa o que
inhiban el crecimiento de los otros tipos de microorganismos presentes. La
selectividad de un cultivo de enriquecimiento no est determinada
nicamente por la composicin qumica del medio usado, sino que en un
medio dado puede ser variada significativamente modificando otros factores
tales como: temperatura, pH, fuerza inica, iluminacin, aireacin, etc. Ej.
Caldo tetrationato utilizado para el enriquecimiento de las especies del
gnero Salmonella provenientes de muestras de heces, orina, agua o
alimentos.
Medios selectivos
Son bsicamente iguales a los de enriquecimiento, se diferencian por ser
medios slidos y estn diseados para el aislamiento de microorganismos
especficos. Ej. Agar desoxicolato citrato utilizado para el aislamiento de
patgenos entricos.
Medios diferenciales
No contienen sustancias inhibidoras, es decir, permiten el crecimiento de
muchos tipos de microorganismos, pero s contienen indicadores de
productos derivados de la actividad metablica de los microorganismos
sobre algunos de los componentes del medio. Se utilizan para la
identificacin de los microorganismos. Ej.: Agar base rojo fenol utilizado
para detectar fermentacin de carbohidratos.
 Medios selectivos diferenciales
A veces se combinan en un mismo medio las caractersticas de ser
selectivo y diferencial. Por ejemplo, el agar Mac Conkey, este medio
contiene sales biliares y cristal violeta, que inhiben el crecimiento de las
bacterias gram positivas. Pero como tambin contiene lactosa y un
indicador de pH permite distinguir entre las bacterias fermentadoras de
lactosa y las que no lo son.
II.2.4.

2.3.
III. MATERIALES Y METODOS
IV. RESULTADOS
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSION
 VII. RECOMENDACIONES
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
IX. ANEXOS