DETERMINACIN EXPERIMENTAL DE BIOMOLCULAS II

1) INTRODUCCIN

Los carbohidratos, hidratos de carbono y tambin simplemente azcares. En su composicin

entran los elementos carbono, hidrgeno y oxgeno, con frecuencia en la proporcin C n(H2O)n,
por ejemplo, glucosa C6(H2O)6 de aqu los nombres carbohidratos o hidratos de carbono.
Estos compuestos, abarcan sustancias muy conocidas y al mismo tiempo, bastante dismiles,
azcar comn, papel, madera, algodn, son carbohidratos o estn presentes en ello en una alta
proporcin.

A partir del dixido de carbono y agua, las plantas sintetizan los carbohidratos, en un proceso
denominado fotosntesis.
La energa solar qued transformada en energa qumica a disposicin de las plantas y de
animales, los cuales metabolizan los carbohidratos realizando la operacin inversa y utilizando
la energa para diversos fines.
Ingerimos cereales, pero los cereales contienen almidones, estos son macromolculas
polimricas de glucosa, que nuestro organismo procesa y transforma con sus enzimas para
nuestro beneficio.
La glucosa, no solamente la utiliza el organismo como fuente de energa, puede transformarla
en otras macromolculas, el glucgeno, que se acumula en el hgado y msculos y sirve de
reserva de energa, la transforma en colesterol y hormonas esferoidales imprescindibles para
numerosas funciones. Si se ingieren excesos de carbohidratos estos se transforman en grasas.
De modo que, estos compuestos resultan importantes para nosotros, no solo por el algodn,
papel y madera.
Los lpidos biolgicos constituyen un grupo qumicamente diverso de compuestos cuya
caracterstica comn y definitoria es su insolubilidad en agua. Las funciones biolgicas de los
lpidos son igualmente diversas. En muchos organismos las grasas y los aceites son las formas
principales de almacenamiento energtico mientras lo fosfolpidos y los esteroides constituyen
la mitad de la masa biolgica. Otros lpidos, an estando presentes en cantidades
relativamente pequeas, juegan papeles cruciales como cofactores enzimticos, hormonas y
mensajeros intracelulares.

2) MATERIALES Y MTODOS

Materiales
- 2 ml de orina
- 5 ml de aceite vegetal
- 2 ml de leche evaporada
- 2 ml de leche evaporada sper light
- 2 ml de jugo de mandarina
- Un trozo pequeo de papa, cebolla, zanahoria, pan y manzana
- 3 goteros
- Tubos de ensayo
- Pipetas de 5 ml
- Estufa
 - Pizas de madera
- Bencina
- Lugol
- Solucin de glucosa al 1%
- Reactivo de Sudn III en solucin alcohlica
- Vaso de precipitados de 500 ml para Bao Mara
- Gradillas
- Detergente
- Cocina
- NaOH al 20%
- Reactivo de Benedict
- Agua destilada
- Placa Petri

Mtodos

Experimento 1: Reconocimiento de almidn

Se coloc en una placa Petri todas las muestras y se procedi a teirlas con 2 gotas de lugol a
cada una.

Experimento 2: Reconocimiento de azcar reductor

Se utilizaron cuatro tubos de ensayo, en el primero se coloc agua destilada y 1 ml de reactivo
de Benedict, en el segundo se coloc solucin de glucosa al 1% y 1ml de reactivo de Benedict,
en el tercer tubo se coloc jugo de mandarina y 1ml de reactivo de Benedict y en el cuarto
tubo se coloc orina y 1 ml de reactivo de Benedict. Se llevaron todos los tubos a Bao Mara
por 5 minutos, anotando despus los resultados.

Experimento 3: Propiedades de los lpidos

Se utilizaron tres tubos de ensayo, el primero contena una mezcla de agua y aceite, se agitaba
y dejaba reposar. El segundo contena una emulsin de agua, aceite y detergente tambin
agitado. El tercer tubo tena una mezcla de aceite y bencina completamente mezclados.

Experimento 4: Reconocimiento de lpidos

Se utilizaron cuatro tubos de ensayo, el primero contena una mezcla de agua destilada y
reactivo de Sudn III, el segundo tena una mezcla de aceite y el reactivo, el tercero contena
leche evaporada entera y reactivo de Sudn III y e cuarto tena leche evaporada sper light y
reactivo de Sudn III.

3) RESULTADOS Y DISCUSIONES

Resultados
En el primer experimento se pudo reconocer la cantidad de almidn contenida en cada
alimento al reaccionar este con el lugol. Los alimentos con mayor contenido de almidn fueron
el pan en primer lugar, seguido por la papa y la cebolla. Los de menor contenido fueron la
zanahoria y por ltimo la manzana.
 El lugol reaccion con el almidn del pan, tornndose de un color violeta oscuro
intenso

El lugol cambi de color a un azul oscuro al

reaccionar con el almidn de la papa

Una parte del lugol reaccion, mientras que la otra

conserv su color natural.

El lugol tom un color azul no muy intenso,

debido a la poca presencia de azcares
complejos en la zanahoria.

El lugol mantuvo su color, con ligeras secciones verdes, esto

sugiri que la manzana no contiene azcares complejos en
gran cantidad.

Mediante el segundo experimento se reconocieron los azcares reductores de las diferentes

sustancias con la ayuda del reactivo de Benedict. El tubo con el agua destilada fue el control
negativo, pues no reaccionaba con el reactivo, sino que mantena la coloracin celeste del
mismo. La sustancia con mayor cantidad de azcar reductor fue la glucosa, que cambi su color
a un rojo ladrillo, seguido por el tubo con el jugo de mandarina, que tena un color amarillo
ocre. La orina cambi de color a verde oscuro, por lo que se deduce que la cantidad de azcar
en esta era mnima (trazas).
De derecha a izquierda: Agua destilada, solucin de glucosa al 1%, jugo de mandarina, orina

Las mismas muestras pero con el reactivo de

Benedict

Las muestras siendo calentadas a Bao Mara por

5 minutos

Muestras finales, se distinguen las que tienen

azcares reductores

El tercer experimento consista en reconocer las propiedades de los lpidos mediante tres tubos
de ensayo. EL primer tubo contena agua y aceite y, a pesar que se agit, estas dos sustancias
no se disolvieron, por lo que se concluy que era una mezcla homognea.

El segundo tubo contena agua, aceite y detergente. El detergente fue el agente emulsificante
pues, al agitar la muestra, todo se mezcl parcialmente generando espuma. El ltimo tubo
contena aceite y bencina, al mezclarlos se unieron completamente y de manera rpida,
formndose una mezcla homognea.

De izquierda a derecha: Agua con aceite, Agua con

aceite y detergente, aceite con bencina
El cuarto experimento permita reconocer los lpidos en diferentes muestras, de los cuatro
tubos de ensayo, se concluy que la sustancia con mayor cantidad de lpidos era el aceite
vegetal, seguido por la leche evaporada entera, leche evaporada sper light y ,por ltimo, el
agua destilada que no contena lpidos.

De izquierda a derecha: Agua destilada,

aceite vegetal, leche sper light, leche
entera

Discusiones

Experimento 1: Reconocimiento de almidn

El experimento demostr que las muestras con mayor cantidad de carbohidratos complejos, al
reaccionar con el lugol, adquiran un color violeta intenso. Esto se debe a que la coloracin
producida por el lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molcula de
almidn. No es por tanto, una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un compuesto de
inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta molcula, apareciendo la coloracin azul
violeta. (juntadeandalucia.es)

Experimento 2: Reconocimiento de azcar reductor

Segn la prueba de Benedict, algunos azcares tienen el poder de oxidarse ante la presencia
de oxidantes suaves como el Cu 2+. Esta caracterstica radica en la presencia de un grupo
carbonilo libre, el cual es oxidado y genera un grupo carboxilo. Por lo tanto, aquellos azcares
con un grupo carbonilo libre son llamados azcares reductores y aquellos en los que el grupo
carbonilo se encuentra combinado en unin glucosdica se conocen como azcares no
reductores () El reactivo de Benedict contiene soluciones de carbonato de sodio, sulfato de
cobre y citrato de sodio. El Na 2CO3 confiere a la solucin un pH alcalino necesario para que la
solucin pueda llevarse a cabo. El citrato de sodio mantiene al in Cu 2+ en solucin ya que tiene
la propiedad de formar complejos coloreados poco ionizados con algunos de los metales
pesados. Con el cobre produce un complejo de color azul. Si se le agrega al reactivo una
solucin de azcar reductor y se caliente hasta llevar la mezcla a ebullicin, el azcar en
solucin alcalina a elevadas temperaturas se convertir en D-gluconato y su n-diol,
rompindose luego en dos fragmentos altamente reductores, los cuales con sus electrones
expuestos, reaccionarn con el Cu2+. Posteriormente el Cu2+ producido reacciona con los iones
OH- presentes en la solucin para formar el hidrxido de cobre. (Angulo Ugalde, Y. 1999) Es
por esto que las muestras con mayor cantidad de azcares reductores (en este caso glucosa y
fructosa) sufrieron una coloracin correspondiente al color rojo ladrillo del hidrxido de cobre,
en mayor proporcin en la solucin de glucosa que en el jugo de mandarina.

Experimento 3: Propiedades de los lpidos

En el primer tubo se distingue visualmente la separacin entre el aceite y el agua .El primero en
la superficie y el agua en la base, (se forma una emulsin transitoria puesto que la aparente
mezcla desaparece al dejarlos en reposo). Esto se debe a que el aceite vegetal, por ser un cido
graso insaturado, tiende a ser lquido a temperatura ambiente, esto es porque cada doble
enlace produce un doblez en la cadena de hidrocarburo el cual impide que esta se alinee
estrechamente con la cadena contigua. La formacin de triglicridos es la principal forma de
almacenamiento de cidos grasos en plantas (de donde se extrae el aceite vegetal). Estos
triglicridos son molculas sin polos elctricos, por eso se les llama lpidos no polares, su falta
de polaridad hace que sean insolubles en el agua, que es altamente polar.

En el segundo tubo se forma una emulsin permanente entre el agua, aceite y detergente. Se
visualiza vagamente el detergente y el aceite, ambos en la superficie pero sin determinar el
orden de cada uno, solo el agua permanece en la base con restos de detergente. El detergente
acta como emulsificante permitiendo que el agua y el aceite se mezclen ya que el detergente
est formado por molculas con una cabeza hidroflica de grupo carboxilo negativo y una larga
cadena carbonada hidrofbica no polar. Debido a esta propiedad, las molculas de detergente
actan estableciendo una serie de relaciones entre el agua y el aceite. Cuando se aade
detergente a la solucin, sus cabezas hidroflicas se proyectan hacia el agua, mientras que las
cadenas largas se unen a las partculas de aceite y permanecen en el interior. De esta forma, se
forman grupos circulares llamados micelas, con la grasa absorbida dentro y atrapada.
El tercer tubo mostr una mezcla totalmente homognea entre el aceite y la bencina, puesto
que la bencina es un solvente orgnico y se encarga de romper los enlaces dobles de los cidos
fosfatdicos que existen entre las molculas de aceite. Esto haca que el aceite fuera ms
lquido de lo normal.

BENCINA
BENCINA

BENCINA
ACEITE VEGETAL

BENCINA BENCINA

Experimento 4: Reconocimiento de lpidos

Se hizo un reconocimiento de lpidos
con el reactivo Sudn III. El agua destilada
contenida en el primer tubo de ensayo cambi de color a rosado disolvindose
completamente, esto no debera ser as puesto que el reactivo Sudn III es soluble en aceites y
no en agua. La misma reaccin adversa tuvo en el aceite de cocina del segundo tubo de
ensayo, en esta oportunidad el aceite no se mezcl con el reactivo sino que el aceite tendi a ir
hacia la superficie. Una de las explicaciones es que el solvente en el que se encontraba el
reactivo sea soluble en agua, como el etanol. Otra explicacin es que el aceite haya sido muy
apolar, y como el reactivo Sudn III tiene cierto grado de polaridad, no se disolvieron. El Sudn
III es un colorante que se utiliza para detectar especficamente las grasas, porque es insoluble
en agua y en cambio es soluble en las grasas. Al ser de color rojo, cuando se disuelve tie las
grasas de color rojo anaranjado (Daniel Toms Puig, 2010)
En el tercer tubo se mezcl el Sudn III con leche evaporada entera, observndose una capa
gruesa de color rojo en la parte superior de la leche, confirmndose as la presencia de una
importante cantidad de grasa.
A diferencia del tercer tubo, el cuarto contena leche evaporada sper light (menos del 1% de
grasa), por eso, al mezclarla con el reactivo Sudn III, solo se apreci una lnea muy delgada de
color rojo, de esta manera se pudo comprobar que la leche sper light contiene muy poca
grasa.

4) CONCLUSIONES

- Se reconoci la presencia de almidn y azcares reductores en muestras problema.

- Se reconocieron algunas propiedades fisicoqumicas de los lpidos.
- Se identific la presencia de lpidos en muestras problema.

5) CUESTIONARIO

- Qu indica la presencia de azcar reductor en la orina?

Generalmente indica una deficiencia renal ocasionada por una baja en la actividad del
pncreas o un envenenamiento heptico con cobre o estao. Tambin puede ser un
sntoma de galactosemia, trastorno hereditario autonmico recesivo del metabolismo
de la galactosa.
- Qu es la emulsificacin y cul es su importancia?
Es un proceso en el que se separan las emulsiones. La emulsin es una mezcla de
lquidos inmiscibles, un lquido (fase interna, discontinua o dispersa) se dispersa en
forma de pequeas gotas o glbulos en el otro (fase externa, continua o dispersante).
Los emulsionantes son importantes en la industria cosmtica, fabricacin de productos
de limpieza en agroqumicos, medicina, ecologa, etc. En la industria cosmtica se
utiliza en mezclas aceite/agua o agua/aceite as permite incorporar principios activos
que son solubles en una fase pero no en otra, entonces del balance lipfilo/hidrfilo
depender la estabilidad de la emulsin conjuntamente con el grado de dispersin en
el que se puede conseguir con una buen agitacin. Este mismo principio se utiliza en la
fabricacin de ceras mixtas solvente/agua con el consiguiente abaratamiento de los
costos sobre todo en pases que no producen petrleo .Pero el inters esta mas
enfocado en plantear el uso emulsionantes en ecologa, ya que las aguas de ros, lagos,
mares son contaminadas con desechos de solventes como resultante de una deficiente
poltica de saneamiento que tiene las ciudades.
- Qu es la saponificain y cul es su importancia?
La saponificacin es una reaccin qumica entre un cido graso (o un lquido
saponificable, portador de residuos de cidos grasos) y una base, en la que se obtiene
como principal producto la sal de dicho cido y de dicha base. Estos compuestos tienen
la particularidad de ser anfipticos, es decir, tienen una parte polar y otra apolar, con lo
cual pueden interactuar con sustancias de propiedades dispares. De la saponificacin
se obtienen jabones principalmente. Para completar esta reaccin, en ocasiones se
adicionan sales para favorecer la precipitacin del jabn y el glicerol mediante
destilacin. El glicerol es utilizado en la industria cosmtica, para disminuir la humedad
 del tabaco y en la industria farmacutica. El jabn es purificado en agua a la
temperatura de ebullicin, precipitado, secado en moldes, adicionados varios aditivos
como perfumes, sustancias medicinales, bactericidas, etc.
- Todos los lpidos son buenos para su salud? Por qu?
Los lpidos son un componente esencial del organismo, todos los lpidos son
necesarios. Cumplen diversas funciones:
Energticamente: La grasa constituye una verdadera reserva energtica ya que brinda 9
Kcal por gramo.
Plsticamente: Tiene funcin dado que forman parte de todas las membranas celulares
y de la vaina de mielina de los nervios, por lo que podemos decir que se encuentran en
los rganos y tejidos.
Aislante: Actan como separadores dada su polaridad.
Transportan protenas liposolubles, dan sabor y textura a los alimentos.
Numerosas investigaciones realizadas por mdicos y cientfico han demostrado que los
individuos que ingiere grasa saturadas en grandes cantidades son ms susceptibles a
sufrir aterosclerosis, enfermedades cardiacas, cncer y otros problemas de salud.
Tambin se encuentran algunas enfermedades hereditarias que son consecuencia de
una acumulacin anormal de lpidos en las membranas como la Enfermedad de
Niemann-Pick y la Enfermedad de Tay-Sachs.

6) BIBLIOGRAFA

- Antonio Jimeno, M. Ballesteros, A. Pardo; L, Ugedo; Biologa COU, Editorial Santillana,

1992

- http://es.shvoong.com/exact-sciences/483737-importancia-los-
emulsionantes/#ixzz1YiWUstn9 Publicado el 09 de febrero del 2007, revisado el 22 de
septiembre del 2011

- http://www.juntadeandalucia.es/averroes/recursos_informaticos/concurso2001/accesi
t_4/glucidos.html Revisado el 20 de septiembre del 2011

- http://www.joseacortes.com/practicas/glucidos.htm Revisado el 19 de septiembre del

2011

- Solomon (Berg Martin) 2001. Biologa Quinta edicin. Editores Mxico. 1237 pp.
- Lipide OCHEMISTRY (la estructura de los lpidos) doctor Chapman del laboratorio de
investigacin, profesor agregado de qumica de la universidad de Sheffield. 2010
editorial Alhambra.
- Bioqumica y Biologa molecular (Jos A. Lozano) 2000 McGraw-Hill Interamericana.
Madrid
- http://www.textoscientificos.com/emulsiones/introduccion Revisado el 20 de
septiembre del 2011
 LABORATORIO DE BIOLOGA

DETERMINACIN EXPERIMENTAL DE BIOMOLCULAS II

PROFESORA: OGATA GUTIERREZ,

KATTY
ALUMNAS:
- ANCO, MARA
- AIQUIPA, ESMERALDA
- GARCA, FABIOLA
- GONZALES, VANESSA
- MACHER, ZOAR
- VILLALVA, MARYSOL

2011