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PRACTICA DE LABORATORIO #1
DISTRIBUCION DE LOS MICROORGANISMOS EN LA NATURALEZA Y COLORACION SIMPLE
ESTUDIANTES:
BARRERA CABRERA, ARMANDO JOSE
ORANTES ESPINOZA, NATHALY ALEXANDRA OE14002
INSTRUCTORA DE LABORATORIO:
ABIGAIL ANZORA LEN
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INDICE
INTRODUCCIN .................................................................................................................................. 3
OBJETIVOS........................................................................................................................................... 5
MARCO TEORICO ................................................................................................................................ 6
OBSERVACIONES............................................................................................................................... 10
CUESTIONARIO ................................................................................................................................. 16
CONCLUSIONES ................................................................................................................................. 20
BIBLIOGRAFIA ................................................................................................................................... 21
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INDICE DE IMGENES.
Figura 1. Placa Petri con Aire de la parte frontal del laboratorio. ................................................ 10
Figura 2. Placa Petri con muestra del cuerpo humano. .................................................................. 10
Figura 3. Placa Petri con muestra de tierra..................................................................................... 11
Figura 4. Placa Petri con muestra de tallo. ..................................................................................... 11
Figura 5. Placa Petri con muestra de agua de chorro. .................................................................... 11
Figura 6. Muestra del cuerpo humano.. 12
Figura 7. Muestra del cuerpo humano con tapa hacia abajo.......................................................... 12
Figura 8. Muestra de agua de chorro..13
Figura 9. Muestra de agua de chorro con tapa hacia abajo ............................................................ 13
Figura 10. Muestra de tallo.14
Figura 11. Muestra de tallo con tapa hacia abajo. .......................................................................... 14
Figura 12. Muestra de tierra..15
Figura 13. Muestras de tierra con tapa hacia abajo. ....................................................................... 15
Figura 14. Vista en el microscopio de la levadura. .......................................................................... 15
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INTRODUCCIN
El objetivo del laboratorio fue conocer los microorganismos que se encuentran normalmente
diseminados en una forma amplia en la naturaleza, adems de observar las diferencias macro y
microscpicas que estos presentan.
Los microorganismos tienen mltiples formas y tamaos, algunos son beneficiosos mientras que
otros son patgenos y causan enfermedades. Son organismos dotados de individualidad que
presentan, a diferencia de las plantas y los animales, una organizacin biolgica elemental. Las
bacterias viven sobre o dentro de casi todo material o hbitat existente en la tierra, desde suelos
hasta el agua y el aire, desde nuestra casa hasta el hielo del rtico y en las hendiduras volcnicas.
El ser humano se caracteriza por ser un reservorio natural de microorganismos, se estima que se
tiene 10 veces ms de ellos que clulas propias.
Para el desarrollo de la prctica se tomaron muestras del aire fuera del laboratorio de
Microbiologa, agua de chorro, tierra y tallo de una planta. Se hicieron los cultivos en placas Petri,
las cuales contenan Patata Dextrosa Agar (PDA). Se Incubaron las placas 8 das y posteriormente
se realiz un anlisis de las colonias formadas mediante la identificacin de sus principales
caractersticas y a travs de un microscopio se analizaron de forma ms profunda sus propiedades
microscpicas.
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OBJETIVOS
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MARCO TEORICO
Los microorganismos son aquellos seres vivos ms diminutos que nicamente pueden ser
apreciados a travs de un microscopio. En este extenso grupo podemos incluir a los virus, las
bacterias, levaduras y hongos que se encuentran en la tierra. Respecto de su estructura biolgica y
a diferencia de lo que ocurre con las plantas o los animales, esta es sumamente elemental ya que
son unicelulares, en lo que s coinciden con los mencionados es en la individualidad que presentan
y ostentan.
Las causas principales por las cuelas los organismos son importantes en el ecosistema son:
1. Las cianobacterias son las que generaron por primera vez oxgeno atmosfrico.
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ejemplos ms representativos de sta funcionalidad es Thioplaca spp., que vive en agrupaciones a
modo de fajos rodeados por una cubierta comn. Otros microorganismos que habitan
ventajosamente las superficies de los sistemas acuticos incluyen microorganismos ssiles de los
gneros Sphaerotilus y Leucothrix; y las bacterias con prosteca y que se reproducen por gemacin
de los gneros Caulobacter e Hyphoinicrohium.
Los microorganismos ms patgenos transmitidos por el agua producen infecciones del aparato
digestivo, fiebre tifoidea, paratifoidea, disentera (basilary amabiana) y clera. Los agentes
etiolgicos de sta se encuentran en las materias fecales y la orina de los infectados y cuando son
eliminadas pueden llegar a un deposito que desemboque en una fuente de agua para beber.
Los microorganismos del suelo se pueden clasificar, con respecto al procesamiento de la materia
orgnica sobre la base de:
Existe una gran diversidad de microorganismos que viven en el suelo, aunque el nmero y los tipos
dependen de diversos factores ambientales como lo son los nutrientes, humedad, temperatura,
pH, prcticas agrcolas, aireacin entre otras. La mayor parte de ellos son hetertrofos, siendo
comunes los bacilos esporulados, los actinomicetos que son los responsables del olor a tierra
mojada.
Las condiciones ambientales que se dan sobre las plantas, no parecen a priori favorables para el
desarrollo de bacterias, se producen grandes oscilaciones de temperatura, hay viento, exposicin
a luz solar, la disponibilidad del agua es limitada e intermitente; sin embargo, la presencia de
bacterias es una constante sobre la superficie vegetal.
Un papel importante para las plantas juega las bacterias benficas del suelo, ya que al asociarse
con ellas les permiten, por una parte, aumentar su crecimiento y desarrollo y, por otra, las
protegen contra otros organismos del suelo que causan enfermedades. Ecolgicamente, a esta
relacin benfica entre las bacterias y las plantas se le denomina mutualismo, el cual se define
como la condicin en la que dos seres vivos de diversas especies viven juntos habitualmente (pero
no necesariamente), con beneficio recproco para el hospedero (planta) y el simbionte (bacteria).
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FROTIS BACTERIANO
Se denomina frotis a la extensin que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo
con objeto de separar lo ms posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la
preparacin es muy difcil obtener una imagen clara y ntida. Este frotis debe ser posteriormente
fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los mtodos habituales de tincin que permiten
la observacin al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos
lavados. La fijacin de una extensin bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y
adheridas al vidrio alterando lo menos posible la morfologa y bacteriana y las posibles
agrupaciones de clulas que pudiera haber.
1. Colocar una pequea gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio. Es necesaria muy
poca cantidad de agua, por lo que se puede usar el asa de siembra, ya que en el extremo curvo
de su filamento queda retenida una mnima gota de agua, que resulta suficiente.
2. Flamear el asa de siembra, tomar, en condiciones aspticas, una pequea cantidad del cultivo
bacteriano en medio slido y transferirlo a la gota de agua. Remover la mezcla con el asa de
siembra hasta formar una suspensin homognea que quede bastante extendida para facilitar
su secado. Esperar hasta que el lquido se evapore o acelerar su evaporacin acercando el
portaobjetos a la llama del mechero.
3. Por calor: Pasar cinco veces el portaobjetos por la llama durante unos segundos.
4. Cubrir el frotis con abundante colorante y dejarlos actuar durante el tiempo que indique el
protocolo de cada tincin concreta. Suele oscilar entre 1 y 5 minutos.
5. Lavar la preparacin con agua para eliminar el colorante. Esta operacin se realiza inclinando
el portaobjetos y aplicando el chorro de agua en su parte superior de manera que resbale
sobre el frotis, pero sin que vaya dirigido directamente sobre l, pues podra arrastrar parte
del frotis consigo
6. Secar el portaobjeto: en ningn caso se debe frotar el porta.
7. Observar la preparacin al microscopio llegando hasta el mximo aumento.
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COLORACIN BACTERIOLOGICA
La coloracin de clulas y tejidos quiz sea una combinacin de fenmenos fsicos y qumicos.
Fsicos: absorcin, absorcin capilaridad y osmosis.
Qumicos: Afinidad del colorante bsico por los tejidos cidos y viceversa conduce a la formacin
de nuevos compuestos.
Colorante Simple.
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OBSERVACIONES
PRIMERA SESIN.
Se pusieron las muestras del agua de agua de chorro, tallo, tierra, aire de afuera del laboratorio de
microbiologa y del antebrazo del cuerpo humano en placas Petri que contenan Patata Dextrosa
Agar(PDA).
- Se dej por 10 minutos la placa Petri afuera del Laboratorio de Microbiologa para poder
obtener la muestra del aire.
- Se pas un hisopo estril en el antebrazo del compaero para inocular la placa Petri.
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- Se inoculo la placa Preti con la muestra de tierra que se llev al laboratorio.
- Se esterilizo el tallo, lavndolo bien con agua destilada estril y se procedi a cortarlo en
trozos de 1cm2 de rea para colocarlos como muestra en la placa Petri.
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SEGUNDA SESIN.
-Tras haber incubado por 8 das las placas Petri los resultados obtenidos fueron impresionantes
debido a que en cada una de las muestras se formaron diferentes microorganismos.
Tipos de Colonias: 1
Color: Amarillo plido
Aspecto: Ondulado
Superficie: Elevada
Figura 6. Muestra del cuerpo humano. Figura 7. Muestra del cuerpo humano con tapa hacia abajo
Tipo de Colonias: 2
1 Tipo de Colonia
Color: Hueso
Aspecto: Circular
Superficie: convexa
2 Tipo de Colonia
Color: Blanca lechosa
Aspecto: irregular
Superficie: umbilicada
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Figura 8. Muestra de agua de chorro Figura 9. Muestra de agua de chorro con tapa hacia abajo
-Muestra de Tallo (Esta Placa no se abri ya que se llen toda de un hongo blanco y verde musgo)
Tipo de Colonias: 7
3 Tipo de Colonia
Color: Ocre
Aspecto: Circular
Superficie: Convexa
4 Tipo de Colonia
Color: Caf
Aspecto: Fusiforme
Superficie: Plana
5 Tipo de Colonia
Color: hueso con amarillo mostaza
Aspecto: Dentada
Superficie: Elevada
6 Tipo de Colonia
Color: amarillo con caf
Aspecto: Circular no entero
Superficie: Plana
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7 Tipo de Colonia
Color: Blanco con Beige
Aspecto: Ondulado
Superficie: Plana
Figura 10. Muestra de tallo. Figura 11. Muestra de tallo con tapa hacia abajo.
Placa con muestra de Tierra (La placa no se pudo abrir ya que se form un hongo y para
evitar problemas se mantuvo cerrara)
Tipos de Colonias: 3
2 Tipo de Colonia
Color: Negro
Aspecto: Ondulado
Superficie: Plana
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Figura 12. Muestra de tierra. Figura 13. Muestras de tierra con tapa hacia abajo.
Placa con Muestra del Aire de la parte Frontal del Laboratorio de Microbiologa.
Esta Placa Petri con La muestra de Aire no nos la dieron debido a que en el momento en que las
colonias crecieron estas tiraban una especie de esporas como un polvo y este se estaba saliendo
de la Placa por lo tanto lo metieron en una bolsa y no nos lo entregaron si no que lo llevaron a
descarte de inmediato.
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CUESTIONARIO
1. Nombre los diferentes ambientes y cules son las caractersticas de cada uno.
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Agua: El agua facilita las reacciones qumicas dentro y fuera de las clulas, permite la actividad
enzimtica. Tambin es el medio de transporte y circulacin de distintos componentes de los seres
vivos (La sangre de los vertebrados tiene un 90% de agua) y adems ayuda a mantener la forma de
las clulas y su tamao (turgencia).
(Agua) Surgente: el agua surgente es aquella que brota de la tierra por su propia fuerza, es decir
que no es impulsada por ningn otro factor.
Lagunas: son extensiones pequeas de aguas dulces o saladas de escasa profundidad.
Acuferos: Las rocas porosas y permeables que almacenan y transmiten el agua se llaman
acuferos. Son una fuente importante de agua para uso humano.
Suelo: es la capa superficial de la corteza terrestre donde actan y se relacionan los factores
biticos, vegetales y animales, y abiticos, minerales. Se forman por la alteracin y acumulacin de
materiales originados por procesos fsicos y qumicos.
(Suelo) Humfero: Es de color negro, muy frtil por la presencia de humus; se encuentra en zonas
templadas.
Roca Madre: los suelos se forman por la disgregacin de la roca madre, que da origen a partculas
slidas inorgnicas de distinto tamao, como la arena, el limo y la arcilla. En cambio las partculas
slidas orgnicas se originan de la descomposicin parcial de restos de seres vivos que se
incorporan al suelo en forma de humus.
(Suelo) Limoso: estn formados por limo, un material muy pequeo y fino; pero tambin tienen
arena y arcilla. Los suelos limosos son suaves al tacto, tienen una textura jabonosa y su color es
marrn oscuro.
(Suelo) Arenoso: estn formados por granos muy pequeos de roca, piedras y arena. Como son
sueltos, son fciles de cavar y el agua penetra en ellos muy fcilmente. Son speros al tacto y
tienen un color amarillo grisceo
2. Explique porque se utiliza agua estril para lavar los vegetales.
El agua estril se utiliza para lavar los vegetales, porque se encuentra libre de cualquier
microorganismo daino o no a la salud, es decir no contiene ninguna forma de vida, se hace en
autoclave se lleva a unos 121 grados Celsius, a una elevada presin de vapor que calienta an ms
el lquido, por unos 15 minutos. Para resumir agua destilada es agua qumicamente pura, mientras
que el agua estril es agua microbiolgicamente pura.
3. De qu tipo de microorganismos principalmente estn formado la poblacin microbiana
del medio ambiente.
Desde el punto de vista de los tipos de microorganismos predominantes hay que estudiar varios
aspectos:
1 si consideramos la biomasa, el grupo principal de microorganismos lo constituyen los hongos.
Este tipo de microorganismos no es fcilmente cuantificable en recuentos estndar puesto que, en
este caso, se enumeran nicamente las esporas y no la biomasa total.
2 La mayor riqueza en biodiversidad la presentan las bacterias que incluyen un nmero muy
grande de especies. Adems de las especies actualmente conocidas (en torno a las 5000)
probablemente existe un nmero an mayor de especies no cultivables. Los grupos principales
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pertenecen a bacterias Gram-positivas de los gneros Bacillus, Micrococcus. Son muy importantes
en el suelo los estreptomicetos productores del tpico olor a tierra hmeda e importante
industrialmente como fuente de metabolitos secundarios entre los que destacan antibiticos.
3 Se pueden detectar en el suelo especies de algas y de protozoos que no difieren notablemente
de las encontradas en medios acuticos.
4. Cul es la razn que predomine ese tipo de organismos?
Los Protozoos predominan por las bacterias para su alimentacin, y agua para desplazarse, por lo
que la humedad del suelo desempea un papel importante a la hora de determinar qu tipos de
Protozoos estarn presentes y activos.
Los hongos predominan tolerando las situaciones cidas y el escaso suministro de calcio
Las bacterias predominan en la mayora de los ambientes: tierra, agua, plantas, animales o materia
orgnica
En los diferentes tipos de ambiente estn presentes una variedad de colonias porque los
microorganismos funcionan como poblaciones y comunidades y ya que su interaccin con otros
organismos y su ambiente contribuye al desarrollo y funcionamiento del ecosistema.
Aire de la parte frontal del laboratorio, antebrazo del cuerpo humano, tierra de la calle, tallo, agua
de laguna
Se utiliz hisopos estriles para que no haya presencia de otros microorganismos externos a la
muestra que se est estudiando.
8. Por qu las placas de Petri se incuban con las tapas hacia abajo?
Una vez que se ha colocado la suspensin de bacterias en la placa, se debe dejar que se evapore
una parte antes de comenzar la incubacin durante toda la noche. Sin embargo, quedar una
cantidad moderada de humedad. Si la placa no es invertida durante la incubacin, la bacteria no
podr colonizar el agar apropiadamente, lo que evitar que crezca y forme colonias
adecuadamente, o estimular el crecimiento de otros microorganismos. Cualquiera de estas dos
consecuencias invalidar el experimento. Adems, la condensacin o humedad puede causar
vetas, lo que har que elegir y analizar colonias separadas sea mucho ms difcil. Una vez que la
bacteria ha formado colonias, la placa tambin debe ser almacenada hacia abajo para mantener
los niveles de humedad.
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9. Cul es la razn de hacer preparaciones para observar al microscopio de las diferentes
colonias?
La razn del manejo del microscopio ptico es para la visualizacin de microorganismos. Se
observarn preparaciones bacterianas bajo diferentes tcnicas de tincin que permitan establecer
diferencias morfolgicas y estructurales entre y dentro de los microorganismos.
10. De las diferentes colonias observadas cuales puede identificar el tipo de organismos sin
necesidad de hacer la preparacin microscpica
Levaduras: Son hongos unicelulares, redondos o elipsoides
Mohos: Son hongos multicelulares. El elemento tubular que emerge se denomina "hifa"; ste
sigue creciendo y ramificndose
Bacterias:
Cocos forma esfrica
Bacilos forma de vara
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CONCLUSIONES
Se comprob visualmente la presencia de microorganismo en diferentes medios: aire,
agua, tierra cuerpo humano, vegetales.
La realizacin correcta del frotis de las diferentes colonias (esto incluye no someter las
lminas durante mucho tiempo y directamente al mechero, porque se puede quebrar) y el
uso de colorantes, permite observar de la mejor manera en el microscopio.
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BIBLIOGRAFIA
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