UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS ESPE

NOMBRES: VALENCIA ZASKYA

NRC: 2514
FECHA: 11/07/2017
MICROBIOLOGA I

TEMA

Conteo bacteriano aplicando siembra por extensin y profundidad con dilucin

bacteriana.

RESUMEN

INTRODUCCIN

Antecedentes

EI nmero de microorganismos en una muestra (agua, suelo, aire, alimento entre otros), es
un parmetro importante porque permite evaluar la calidad microbiana de esta.

Justificacin del problema

Por medio de la utilizacin de mtodos para la cuantificacin bacteriana. Al realizar las

diluciones seriadas permite la obtencin de la medida de bacterias en la muestra debido a
que en cantidades muy extensas no es posible su conteo. Al realizar una equivalencia en
proporcin a la dilucin nos proporciona la informacin del total de bacterias en la muestra
que se deseaba conocer.

OBJETIVOS

General:

Cuantificar el crecimiento bacteriano al realizar la siembra por extensin y profundidad de

la muestra en diluciones seriadas.

Especficos:

o Efectuar una serie de diluciones de la muestra.

o Hacer la siembra por extensin y profundidad.
o Medir las unidades formadoras de colonias.

MARCO TERICO

El crecimiento bacteriano es la reproduccin asexual o divisin celular de una bacteria en

dos clulas hijas, en un proceso llamado fisin binaria. Ambas clulas provenientes de la
fisin no necesariamente sobreviven. La supervivencia de las bacterias est determinado
por las condiciones de su ambiente: un medio de cultivo con los nutrientes necesarios, pH
optimo, ambiente temperado y fuentes de energa como azucares; todo esto permite
predecir el crecimiento bacteriano, es asi que si el nmero de sobrevivientes excede la
unidad promedio, la poblacin bacteriana sufre un crecimiento exponencial. (James, 2017)

CRECIMIENTO INDIVIDUAL en este la bacteria alcanza un tamao y peso fijo. Constituye

el paso previo a la divisin celular. CRECIMIENTO POBLACIONAL constituye el incremento
en el nmero de clulas como consecuencia del crecimiento y divisin celular

RECUENTO BACTERIANO

CONTEO DE CLULAS VIABLES La clula viable es aquella capaz de dividirse y formar

una colonia en el medio de cultivo. Se basa en que cada colonia surge de una simple clula.
Cada colonia contiene una sola especie bacteriana.. El nmero de bacterias viables por
muestra se expresa en: UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (UFC). Representa
cada colonia contada y su nmero total representa el nmero total de bacterias viables en
la muestra. MTODO DE EXTENDIDO EN PLACA el mtodo de eleccin para anaerobios
facultativos y cultivo de microaerfilos (Stanier, 1996)

TCNICAS DE RECUENTO Finalizado el tiempo de incubacin, se realiza el recuento. Se

toman en cuenta nicamente aquellas cajas Petri que tengan entre 30 y 300 colonias. Este
nmero de colonias es estadsticamente representativo. Aquellas placas que tengan ms
de 300 colonias se reportan como INCONTABLES (Izuerieta, 2013)

HIPTESIS

METODOLOGA

Se diluy el cultivo para esto se tom un mililitro del cultivo y se ubic en una botella de
almacenamiento con 99 ml de agua destilada estril, despus se etiquetaron cinco tubos
de ensayo con tapa con los nmeros; 1, 2, 3, 4, 5. Cada uno con 9 mL de agua destilada
estril. Ms tarde se tom un mililitro de solucin contenida en la botella de
almacenamiento, con la pipeta de 1 mL se coloc en el primer tubo de ensayo,
posteriormente se puso la tapa en el tubo de ensayo y se agit 25 veces apoyando el codo
sobre el mesn y se realiz movimientos con la mano con la que se agarr el tubo. A
continuacin se tom de este un mililitro de la solucin y se situ en el tubo 2 repitiendo
este procedimiento hasta el tubo 5. Tomando cada muestra del tubo anterior por lo que se
obtuvo las relaciones de 1:10,1:100,1:1000,1:10000,1:10000000.

Del tubo 5 con un FD de 1107 se cogi 0.1mL para realizar la siembra por extensin y se
situ sobre agar nutriente en una caja Petri con un tringulo de vidrio, que previamente se
esteriliz baando al tringulo en alcohol y se encendi en el mechero esperando que se
apague. Se extendi por toda la superficie. Finalmente se incub a 37C. En otro agar
nutriente para realizar la siembra a profundidad se tom 0.1mL de la solucin tambin
contenida en el tubo 5 con la pipeta y se disolvi en agar nutriente caliente, despus se
homogeniz y en seguida se puso en una caja Petri. Finalmente se incub a 37C por 24
horas. (Koch, 2017).

RESULTADOS

Siembra por extensin: se present crecimiento masivo como se indica en la Fig1

Siembra a profundidad: se present crecimiento masivo como se muestra en la Fig

Fig1. Siembra por extensin Fig 2. Siembra a profundidad

Calculo esperado

En el caso de haber obtenido un valor entre 30 y 300 como 189 colonias, al resultado obtenido se
aumenta el factor de dilucin empleado, el factor de dilucin FD 1x107 debido a la previa dilucin en
99 mL (1:100) y las siguientes realizadas en cinco tubos de ensayo cada uno con 9mL (1:10) y el
tubo 5 tendra tericamente FD de 1x105. Al considerar la cantidad de dilucin que se us fue 0,1
mL de muestra, para la siembra en las cajas Petri. Y el valor que se considera en el clculo es de
1mL se realiz una equivalencia aumentando de 189 x107 a 189 x108 expresando de la siguiente
forma: = 1.89 1010 /

DISCUSIN

CONCLUSIONES

RECOMENDACIONES
Se debe seguir la metodologa sin alterarla, verificar la temperatura del agar. Previo a
realizar cualquier siembra se debe verificar que las cajas Petri estn limpias y esterilizadas.
Al momento de utilizar la pipeta se verifica que sea del volumen deseado.

BIBLIOGRAFA

Izuerieta, N. (2013). recuento bacteriano . Laboratorio de bacteriologia y micologa pg 10-

11.

Stanier, R. Y. (1996). Microbiologa. Barcelona: Reverte pg 199-201.

James, A. Sullivan (2017). Cell alive. Bacteria Divide and Multiply., de

http://www.cellsalive.com/ecoli.htm

Koch, A. 2017. Siembras bacterianas por extensin y profundidad a partir de diluciones

seriadas de la muestra. Recuento bacteriano. Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE.
Sangolqu, Ecuador.